经济遗传值在甘蔗选育种应用研究系列(三)甘蔗亲本经济育种值和家系经济遗传值分析 被引量：18

1

作者 徐良年 邓祖湖 +2 位作者 林彦铨 陈如凯 傅华英 《中国糖料》 2013年第1期5-8,共4页

以45个家系甘蔗实生苗为供试材料,对蔗茎产量、甘蔗蔗糖分、有效茎、茎径、株高、甘蔗纤维分6个影响甘蔗产业经济效益最大的主要数量性状进行了经济遗传值(经济育种值)分析,结果表明:29个母本中,粤农73-204、德蔗93-88、CP84-1198、粤糖... 以45个家系甘蔗实生苗为供试材料,对蔗茎产量、甘蔗蔗糖分、有效茎、茎径、株高、甘蔗纤维分6个影响甘蔗产业经济效益最大的主要数量性状进行了经济遗传值(经济育种值)分析,结果表明:29个母本中,粤农73-204、德蔗93-88、CP84-1198、粤糖85-177、HoCP93-746、桂糖96-44、云蔗89-351、CP88-2143和湛蔗74-141等经济育种值高;26个父本中,CP84-1198、福农91-4621、粤糖89-240、CP81-1254、桂糖00-122、云瑞99-601、云瑞05-808、云瑞03-806、ROC22和福农95-1702等经济育种值高;45个家系中粤农73-204×CP84-1198、福农91-4710×粤糖89-240、HoCP93-746×福农91-4621、CP84-1198×ROC22、粤糖91-976×CP84-1198、HoCP93-746×ROC22、CP88-2143×粤糖97-76、桂糖96-44×ROC10、云蔗89-351×CP84-1198、湛蔗74-141×CP81-1254、HoCP93-746×湛蔗74-141、德蔗93-88×云瑞99-601、ROC11×桂糖91-116等经济遗传值高,可作为选育甘蔗新品种的重点家系。 展开更多

关键词 甘蔗 实生苗 经济育种值 经济遗传值 家系评价

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甘蔗杂交后代遗传变异评价及高糖和低糖池构建 被引量：2

2

作者 阙友雄 黄文华 +2 位作者 许莉萍 张木清 陈如凯 《热带作物学报》 CSCD 2009年第6期811-816,共6页

以甘蔗品种CP84-1198为母本,科5为父本,配置杂交组合1;以ROC20为母本,桂73-167为父本,配置杂交组合2。调查了2个杂交组合有性世代和无性世代的主要经济形状,并应用相关分析、差异显著性分析、多元线性回归分析和逐步回归分析等方法分析... 以甘蔗品种CP84-1198为母本,科5为父本,配置杂交组合1;以ROC20为母本,桂73-167为父本,配置杂交组合2。调查了2个杂交组合有性世代和无性世代的主要经济形状,并应用相关分析、差异显著性分析、多元线性回归分析和逐步回归分析等方法分析了甘蔗主要经济性状的相关性及其在世代间的差异和重演性。结果表明:有性世代中,株高与锤度、丛重、锤重都呈显著正相关,有效茎数对甘蔗经济产量的直接效应大于株高与茎径;无性世代中,锤度的变异系数最小,锤度性状稳定性相对较高;同一组合无性世代的株高、茎径和锤度的均值均显著高于有性世代;不同世代中株高和锤度重演力强,而茎径的相关系数不显著,重演力较弱,"Brix-clumpweigh"拟合图显示了有望从杂交后代群体中筛选出高糖、高产聚合基因型个体。根据以上结果,还探讨了杂交后代高产优质个体的选择策略,同时构建了能用于标记分析的高糖和低糖池。 展开更多

关键词 甘蔗 杂交后代 经济性状 遗传变异 选择策略

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经济遗传值在甘蔗选育种应用研究系列(二)甘蔗亲本育种值和家系遗传值分析 被引量：14

3

作者 徐良年 邓祖湖 +2 位作者 林彦铨 陈如凯 傅华英 《中国糖料》 2012年第4期5-9,12,共6页

以45个家系甘蔗实生苗为材料,对6个影响甘蔗产业经济效益最大的主要性状蔗茎产量、甘蔗蔗糖分、甘蔗纤维分、有效茎、茎径和株高进行方差、遗传力、育种值和遗传值分析。结果表明:6个性状除母本的株高差异不显著外,其它性状在父本、母... 以45个家系甘蔗实生苗为材料,对6个影响甘蔗产业经济效益最大的主要性状蔗茎产量、甘蔗蔗糖分、甘蔗纤维分、有效茎、茎径和株高进行方差、遗传力、育种值和遗传值分析。结果表明:6个性状除母本的株高差异不显著外,其它性状在父本、母本及家系间差异均达显著或极显著;各性状的广义遗传力均大于50%,其中,甘蔗蔗糖分的广义遗传力为90.21%,表明这6个性状的广义遗传力较高,适合有性世代选择,可提高选择强度。29个母本中CP65-357、桂糖96-44、HoCP93-746、CP 84-1198、湛蔗74-141、福农91-4710、ROC22七个母本蔗茎产量和甘蔗蔗糖分的育种值皆较高,可作为高产高糖母本。26个父本中CP84-1198、粤糖89-240、ROC22、云瑞99-601、福农91-4621等蔗茎产量的育种值高。45个家系中,福农91-4710×粤糖89-240、HoCP93-746×ROC22、CP84-1198×ROC22、HoCP93-746×湛蔗74-141、HoCP93-746×福农91-4621、ROC11×桂糖91-116等家系蔗茎产量和甘蔗蔗糖分遗传值皆较高,可作为选育甘蔗新品种重点家系。 展开更多

关键词 甘蔗 育种值 遗传值 家系评价

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甘蔗转基因改良及转基因检测机构的角色

4

作者 陈平华 许莉萍 +2 位作者 王恒波 陈由强 陈如凯 《热带农业科学》 2009年第12期34-38,共5页

我国甘蔗转基因研究取得了长足进展,现对我国甘蔗转基因研究实践中使用的改良方法进行回顾总结,并结合国际甘蔗转基因研究的现状指出未来甘蔗转基因研究的发展方向。针对转基因研究的高度社会敏感性,阐述法定转基因检测机构对保护和促... 我国甘蔗转基因研究取得了长足进展,现对我国甘蔗转基因研究实践中使用的改良方法进行回顾总结,并结合国际甘蔗转基因研究的现状指出未来甘蔗转基因研究的发展方向。针对转基因研究的高度社会敏感性,阐述法定转基因检测机构对保护和促进我国甘蔗转基因研究健康发展将起到的重要作用。 展开更多

关键词 甘蔗 转基因 回顾与展望 转基因检测机构 作用

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甘蔗基因表达定量PCR分析中内参基因的选择 被引量：53

5

作者 阙友雄 许莉萍 +3 位作者 徐景升 张积森 张木清 陈如凯 《热带作物学报》 CSCD 2009年第3期274-278,共5页

以甘蔗接种黑穗病菌后0、6、12、24、48、60和72h时间点的材料为研究对象,应用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,Real-timeqPCR)技术,探讨25SrRNA、GAPDH、β-actin和β-tubulin4个内参基因mRNA水平的表达情况。经geNorm程... 以甘蔗接种黑穗病菌后0、6、12、24、48、60和72h时间点的材料为研究对象,应用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,Real-timeqPCR)技术,探讨25SrRNA、GAPDH、β-actin和β-tubulin4个内参基因mRNA水平的表达情况。经geNorm程序统计学分析,4种内参基因的表达稳定性各异,25SrRNA>GAPDH>β-actin>β-tubulin,其中以25SrRNA表达稳定性最好,且根据该基因设计的两对定量PCR引物都是可行的。同时,甘蔗PPO基因表达特性的定量PCR分析也显示,甘蔗PPO基因与植物的抗病性相关。结果显示,研究中所筛选的内参基因是合适的。 展开更多

关键词 内参基因 geNorm程序 基因表达 实时定量PCR 多酚氧化酶基因

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甘蔗NBS-LRR类抗病基因同源序列的分离与鉴定 被引量：30

6

作者 阙友雄 许莉萍 +1 位作者 林剑伟 陈如凯 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期631-639,共9页

根据已知植物(拟南芥、烟草和亚麻)抗病基因(RGAs)保守序列设计简并引物,从甘蔗高抗黑穗病品种NCo376的基因组DNA和cDNA中扩增出11条抗病基因同源序列,其中5条来自基因组DNA(EF059973、EF059974、EF059975、EF059976和EF059977),6条来自... 根据已知植物(拟南芥、烟草和亚麻)抗病基因(RGAs)保守序列设计简并引物,从甘蔗高抗黑穗病品种NCo376的基因组DNA和cDNA中扩增出11条抗病基因同源序列,其中5条来自基因组DNA(EF059973、EF059974、EF059975、EF059976和EF059977),6条来自cDNA(EF155648、EF155649、EF155650、EF155651、EF155652和EF155653)。序列分析表明,这些RGAs均含有典型的NBS-LRR类抗病基因所拥有的保守结构域P-loop、Kinase-2a、Kinase-3a和疏水结构域。聚类分析表明,11条RGA同RPS2和XA1聚为一类,而N和L6则单独聚为一类。所有11条抗病基因同源序列中,kinase-2(LLVLDDVW/D)最后一个氨基酸皆为色氨酸。定量PCR分析表明,编号为EF059974的PIC基因的表达不仅受黑穗病菌胁迫的影响,而且受水杨酸的诱导和过氧化氢的抑制,也具有抗病基因组织特异性和组成型表达特性。 展开更多

关键词 甘蔗 NBS-LRR 抗病基因同源序列

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甘蔗根际土壤化感潜力评价及其化感物质分析 被引量：13

7

作者 张爱加 袁照年 +7 位作者 陈冬梅 王海斌 吴文祥 林生 陈婷 陈兰兰 方长旬 林文雄 《中国生态农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期1013-1017,共5页

以"福农28"和"赣蔗18"的新植、宿根甘蔗根际土壤为材料,以未种植甘蔗的土壤为对照,探讨甘蔗根际土壤水浸提液及不同极性有机溶剂浸提液化感作用潜力及其主要化感物质成分(GC-MS鉴定)。结果表明:甘蔗根际土壤的水浸... 以"福农28"和"赣蔗18"的新植、宿根甘蔗根际土壤为材料,以未种植甘蔗的土壤为对照,探讨甘蔗根际土壤水浸提液及不同极性有机溶剂浸提液化感作用潜力及其主要化感物质成分(GC-MS鉴定)。结果表明:甘蔗根际土壤的水浸提液对莴苣幼苗具有化感作用,表现为高抑低促,且宿根甘蔗根际土壤水浸提液对莴苣的抑制作用比新植甘蔗强;有机溶剂浸提液的生物测试结果表明,弱极性的乙醚、石油醚浸提液对莴苣具有一定的促进作用,中极性的氯仿和强极性的甲醇浸提液则相反,且甲醇浸提液对莴苣的抑制作用最强。水浸提液及有机溶剂浸提液的测定结果均表明,"赣蔗18"宿根甘蔗根际土壤的化感潜力高于"福农28"。"赣蔗18"宿根甘蔗根际土壤甲醇浸提液物质成分分析结果表明,"赣蔗18"宿根甘蔗根际土壤中存在与化感作用相关的物质有54个,主要分为5大类:酸类、萜类、酚类、甾类、酯类。 展开更多

关键词 甘蔗 新植甘蔗 宿根甘蔗 根际土壤 化感作用 化感物质

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甘蔗中一个NBS-LRR类基因的全长克隆与表达分析 被引量：11

8

作者 阙友雄 许莉萍 +3 位作者 张木清 徐景升 张积森 陈如凯 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期1161-1166,共6页

采用RACE技术,从甘蔗高抗黑穗病品种NCo376中克隆了一个NBS-LRR类基因的cDNA全长序列,命名为SNLR。生物信息学分析显示,甘蔗SNLR基因的cDNA全长为2985bp(GenBank登录号为EF155654),包括一个2661bp的完整开放读码框以及一个典型的29bppol... 采用RACE技术,从甘蔗高抗黑穗病品种NCo376中克隆了一个NBS-LRR类基因的cDNA全长序列,命名为SNLR。生物信息学分析显示,甘蔗SNLR基因的cDNA全长为2985bp(GenBank登录号为EF155654),包括一个2661bp的完整开放读码框以及一个典型的29bppoly-A。同时,还具有NBS-LRR类抗病基因的所有保守结构域,包括4个NBS区域保守结构域和6个潜在LRR结构域;蛋白疏水性分析和二级、三级结构分析表明,该基因编码的蛋白质为弱碱性蛋白,pI为7.76,无明显的疏水结构域,以卷曲结构和螺旋结构为骨架,三级结构未见明显的跨膜信号蛋白区。定量PCR分析表明,甘蔗SNLR基因的表达受到黑穗病菌、水杨酸和过氧化氢的影响,分别表现出"抑-扬"、"全程抑制"和"扬-抑"的表达模式,也具有抗病基因组成型和组织特异性表达的特点。推测甘蔗SNLR基因可能为抗病相关基因。 展开更多

关键词 甘蔗 分子克隆 抗病基因 定量PCR

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我国甘蔗机械化收获现状的研究 被引量：48

9

作者 廖平伟 张华 +2 位作者 罗俊 郭伟 黄志宏 《农机化研究》 北大核心 2011年第3期26-29,共4页

甘蔗收获环节是我国甘蔗产业发展的"瓶颈",对我国甘蔗机械化收获的现状进行研究,进而优化我国甘蔗产业的结构尤为重要。为此,概述了我国甘蔗机械化收获的技术,并对现阶段我国甘蔗机械化收获的应用情况进行分析,深入探讨了我... 甘蔗收获环节是我国甘蔗产业发展的"瓶颈",对我国甘蔗机械化收获的现状进行研究,进而优化我国甘蔗产业的结构尤为重要。为此,概述了我国甘蔗机械化收获的技术,并对现阶段我国甘蔗机械化收获的应用情况进行分析,深入探讨了我国甘蔗机械化收获存在的问题。结果表明:我国甘蔗机械化收获主要以国外引进的8台CASE 7000切段式甘蔗联合收割机为主,其机械收割面积相对全国近180万hm2的植蔗面积来讲约等于0。因此,针对当前我国甘蔗机械化收获的实际情况,提出了相应的发展对策。 展开更多

关键词 甘蔗 机械化收获 技术

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福建山樱花愈伤组织的诱导及植株再生 被引量：24

10

作者 邹娜 陈璋 +1 位作者 林思祖 林庆良 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1417-1423,共7页

为了建立福建山樱花植株再生体系，本文分别以福建山樱花外植体茎段和由茎段诱导出的腋芽的小叶为材料，探讨不同植物生长调节剂种类和浓度配比对福建山樱花愈伤组织诱导及植株再生的影响。结果表明：高浓度的2，4-D有利于福建山樱花愈... 为了建立福建山樱花植株再生体系，本文分别以福建山樱花外植体茎段和由茎段诱导出的腋芽的小叶为材料，探讨不同植物生长调节剂种类和浓度配比对福建山樱花愈伤组织诱导及植株再生的影响。结果表明：高浓度的2，4-D有利于福建山樱花愈伤组织诱导，茎段和小叶分别接种于MS＋2，4-D2．Omg·L^-1和MS＋2，4一D2．Omg·L^-1和BA0．5mg·L^-1，相应的愈伤组织诱导率为93．75％和91．30％。小叶诱导出的愈伤组织接种于MS＋2，4一D0．5mg·L^-1＋BA2．0mg·L^-1，不定芽分化率为60．7％。将不定芽转接入1／2MS＋BA0．5mg·L。＋IBA0．1mg·L^-1进行伸长培养，并在1／2MS＋IBA0．6mg·L^-1培养基中生根形成完整植株。此外，福建山樱花小叶愈伤组织接种于MS＋2，4一D0．1～0．5mg·L^-1＋BA1．0mg·L^-1，还可诱导出体细胞胚。 展开更多

关键词 福建山樱花 组织培养 愈伤组织诱导 植株再生 体细胞胚

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基因枪法获得转cry1Ac基因甘蔗的研究 被引量：6

11

作者 高世武 郭晋隆 +2 位作者 许莉萍 陈如凯 傅华英 《热带亚热带植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期142-148,共7页

根据定向克隆原则,以pGreenⅡ0229为载体骨架,cry1Ac为目的基因,bar为筛选标记基因,构建了大小为8602bp的植物表达载体pUBCG0229-cry1Ac。酶切结果表明,构建的载体pUBCG0229-cry1Ac结构完全正确。用基因枪轰击法将pUBCG0229-cry1Ac质粒... 根据定向克隆原则,以pGreenⅡ0229为载体骨架,cry1Ac为目的基因,bar为筛选标记基因,构建了大小为8602bp的植物表达载体pUBCG0229-cry1Ac。酶切结果表明,构建的载体pUBCG0229-cry1Ac结构完全正确。用基因枪轰击法将pUBCG0229-cry1Ac质粒DNA转化甘蔗(Saccharum Complex)品种福农95-1702和桂糖94-119的胚性愈伤组织,使用PPT(phosphinothricin)对轰击后的材料进行继代、分化和生根筛选,移栽成活后使用Basta溶液喷洒进行初步筛选,共获得86株抗性植株,通过PCR检测、Dot-Southern检测及PCR产物测序,证明已将cry1Ac基因整合到其中22株甘蔗基因组中。 展开更多

关键词 甘蔗 CRY1AC基因 BAR基因 遗传转化 基因枪 抗螟虫

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利用斑茅cDNA芯片研究甘蔗受黑穗病菌侵染后基因差异表达 被引量：5

12

作者 阙友雄 许莉萍 +4 位作者 林剑伟 徐景升 张积森 张木清 陈如凯 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期940-945,共6页

为了解甘蔗抗黑穗病的分子机制,利用斑茅干旱胁迫cDNA芯片检测了甘蔗受黑穗病菌胁迫后的基因差异表达。经杂交,在cDNA芯片的3860个模板中,有效差异表达(Ratio值≥2.0或≤0.5)的基因为101个,其中上调55个,下调46个。部分基因的定量PCR验... 为了解甘蔗抗黑穗病的分子机制,利用斑茅干旱胁迫cDNA芯片检测了甘蔗受黑穗病菌胁迫后的基因差异表达。经杂交,在cDNA芯片的3860个模板中,有效差异表达(Ratio值≥2.0或≤0.5)的基因为101个,其中上调55个,下调46个。部分基因的定量PCR验证表明,芯片杂交结果可靠。上调表达基因经测序、冗余序列剔除,一共获得36个uniqueESTs。已知功能的22个上调表达基因,涉及多条生理代谢途径,如光合作用、离子转运和核酸代谢途径;以及多种分子水平的进程,如基因转录、蛋白质合成与修饰以及细胞信号转导等。另外,还检测到14个未知功能基因。结果表明,甘蔗对黑穗病的抗性具有复杂的机制。本研究为解释甘蔗受黑穗病菌胁迫后的基因差异表达及其网络构建奠定了基础,还为今后系统研究甘蔗对生物与非生物胁迫的响应机制提供技术支持。 展开更多

关键词 甘蔗 黑穗病菌 斑茅 CDNA芯片 差异表达基因

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甘蔗单花粉全基因组扩增(WGA)与SCoT分子标记研究 被引量：6

13

作者 陈平华 陈如凯 +8 位作者 许莉萍 王恒波 陈利平 林冰 施桂姣 张卓 高三基 郭晋隆 潘永保 《热带作物学报》 CSCD 2011年第11期2069-2075,共7页

从一个完整的甘蔗花粉囊中分离出单个花粉粒．利用特制取样器进行收集，采用碱裂解法释放单花粉DNA．裂解液可以直接作为WGA模板进行全基因组扩增．制备出单个花粉粒大量DNA。通过5SrRNA—ITS鉴定WGA产物真实性．并以目标起始密码子多... 从一个完整的甘蔗花粉囊中分离出单个花粉粒．利用特制取样器进行收集，采用碱裂解法释放单花粉DNA．裂解液可以直接作为WGA模板进行全基因组扩增．制备出单个花粉粒大量DNA。通过5SrRNA—ITS鉴定WGA产物真实性．并以目标起始密码子多态性标记对真实的WGA产物进行分析，显示出丰富的多态性。利用NTSYSpc软件分析花粉粒间遗传距离，并进行聚类分析，显示单花粉间遗传距离变幅为0．0888-0．3654，在相似系数0．187处．受试花粉粒中的36个明显分为2组．占总数的69％。说明减数分裂染色体重组过程中，有一定比例的基因位点为多数花粉粒所共有。根据SCoT标记聚类图可将所有供试花粉分为4大类．不同类花粉粒的分布具有一定的规律性． 展开更多

关键词 甘蔗 单花粉 全基因组扩增 SCoT分子标记 遗传分布

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对甘蔗受黑穗病菌侵染后差异表达基因的分离与鉴定 被引量：7

14

作者 阙友雄 许莉萍 陈如凯 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期452-458,共7页

采用12个3′锚锭引物和8个5′随机引物构建引物组合,运用DDRT-PCR差异显示方法,分析NCo376和F134两品种接种黑穗病菌前后的基因表达差异。经克隆、测序和半定量RT-PCR验证,获得7条真实差异表达片段,这些片段分别同GenBank中编码细胞色素... 采用12个3′锚锭引物和8个5′随机引物构建引物组合,运用DDRT-PCR差异显示方法,分析NCo376和F134两品种接种黑穗病菌前后的基因表达差异。经克隆、测序和半定量RT-PCR验证,获得7条真实差异表达片段,这些片段分别同GenBank中编码细胞色素C氧化酶基因、核糖体蛋白基因、NAD-依赖型苹果酸脱氢酶基因、氨基转移酶基因、乙烯响应相关结合蛋白基因、RNA聚合酶特异转录起始因子和反转录转座子的序列的同源性达28%～99%。半定量RT-PCR分析表明,细胞色素C氧化酶基因的表达受甘蔗黑穗病菌和水杨酸的调控,不依赖于过氧化氢的作用机制,在甘蔗根、茎、叶中表达的抗病基因组成型表达,但表达水平较低。推测甘蔗受黑穗病菌侵染后,可能通过细胞色素C氧化酶基因的诱导,促使植保素合成增多,以此抵抗或抑制病原菌的胁迫。该结果丰富了甘蔗与黑穗病菌互作的分子机制研究,为甘蔗抗黑穗病分子育种奠定了基础。 展开更多

关键词 甘蔗 甘蔗黑穗病 MRNA差异显示 差异表达基因 RT-PCR

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椰乳在甘蔗组培快繁中作用的研究 被引量：6

15

作者 陈平华 陈舜彬 +4 位作者 陈岚凤 许莉萍 王恒波 陈由强 陈如凯 《热带作物学报》 CSCD 2009年第12期1818-1823,共6页

以种性优良但组培分化困难的3个甘蔗品种FN95-1702、FN99-2308和FN99-20169的愈伤组织为材料,以2种常用的培养基为基本培养基,分别添加4种不同体积的椰乳,采用随机区组实验设计,进行分化阶段和生根阶段培养,并对移栽幼苗成活率进行了观... 以种性优良但组培分化困难的3个甘蔗品种FN95-1702、FN99-2308和FN99-20169的愈伤组织为材料,以2种常用的培养基为基本培养基,分别添加4种不同体积的椰乳,采用随机区组实验设计,进行分化阶段和生根阶段培养,并对移栽幼苗成活率进行了观察。结果表明:对于不同激素配方的培养基,在分化阶段添加椰乳后甘蔗愈伤组织的分化率和芽长势均明显提高,添加椰乳的适宜体积为10%～20%,其中,以15%为最佳添加体积,可使分化率提高100%。幼苗生根阶段,添加椰乳使幼苗生根的数量减少,对移栽成活率影响不明显。不同甘蔗品种适合的培养基略有差异,实验所选用的2种培养基与椰乳之间无交互作用。 展开更多

关键词 椰乳 甘蔗 组培 快繁

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甘露糖筛选系统的建立及在甘蔗转基因中的应用 被引量：4

16

作者 高世武 阙友雄 +2 位作者 郭晋隆 许莉萍 陈如凯 《热带作物学报》 CSCD 2010年第5期789-796,共8页

用甘露糖作为筛选底物,对甘蔗品种福农95-1702外植体的再生进行研究,建立福农95-1702的甘露糖筛选体系;在甘蔗愈伤组织的继代、分化、生根三个阶段进行抗性筛选时,甘露糖占总糖的比例分别是60%、60%和30%。在以上筛选体系的基础上,将福... 用甘露糖作为筛选底物,对甘蔗品种福农95-1702外植体的再生进行研究,建立福农95-1702的甘露糖筛选体系;在甘蔗愈伤组织的继代、分化、生根三个阶段进行抗性筛选时,甘露糖占总糖的比例分别是60%、60%和30%。在以上筛选体系的基础上,将福农95-1702作为受体材料,通过基因枪轰击法,将含有cryIA(c)抗虫基因的基因表达盒与筛选标记基因(pmi)进行共转化,通过甘露糖筛选,最终获得26株抗性再生植株,经PCR检测,其中4株呈阳性。初步说明cryIA(c)基因已经整合到福农95-1702的基因组中,获得了4株转基因阳性甘蔗植株。 展开更多

关键词 甘蔗 甘露糖 cryIA(c)基因 基因枪 共转化

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感染甘蔗黄叶病毒后甘蔗叶组织超微结构的病变 被引量：4

17

作者 高三基 陈平华 +1 位作者 洪健 陈如凯 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2010年第1期6-9,共4页

利用电镜技术对感染甘蔗黄叶病毒蔗叶组织超微结构进行观察表明,韧皮部伴胞及叶肉细胞内的线粒体、叶绿体等细胞器及细胞核都发生了明显的病理变化.线粒体形态异常,有的肿大、内嵴模糊,严重者内嵴消失,空泡化,仅剩未被消解的残骸;叶绿... 利用电镜技术对感染甘蔗黄叶病毒蔗叶组织超微结构进行观察表明,韧皮部伴胞及叶肉细胞内的线粒体、叶绿体等细胞器及细胞核都发生了明显的病理变化.线粒体形态异常,有的肿大、内嵴模糊,严重者内嵴消失,空泡化,仅剩未被消解的残骸;叶绿体被膜破裂,严重者被膜完全消解,基粒类囊体和基质片层消失,基质外流.维管束鞘细胞中的叶绿体被膜和基质片层也遭到破坏,淀粉粒增多、膨大;细胞核形态变为不规则,局部核膜破裂,核内染色质分布不均匀,呈降解状. 展开更多

关键词 甘蔗黄叶病毒 叶片细胞 超微结构 细胞病理变化

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利用改进的Oligo-Capping法构建甘蔗茎全长cDNA文库 被引量：4

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作者 郭晋隆 阙友雄 +3 位作者 刘金仙 郑益凤 陈如凯 许莉萍 《热带作物学报》 CSCD 2009年第5期672-676,共5页

Oligo-Capping法是目前全长cDNA文库构建的重要方法之一。笔者在引进、消化和吸收的基础上,通过对特异引物和接头序列的设计,及cDNA扩增反应条件的优化,对该方法进行了一些切实可行的改进,形成了一套简便易行的技术体系。利用本研究中... Oligo-Capping法是目前全长cDNA文库构建的重要方法之一。笔者在引进、消化和吸收的基础上,通过对特异引物和接头序列的设计,及cDNA扩增反应条件的优化,对该方法进行了一些切实可行的改进,形成了一套简便易行的技术体系。利用本研究中改进的Oligo-Capping法,成功地构建了甘蔗茎全长cDNA文库。综合评价结果表明,本研究中所构建的甘蔗茎全长cDNA文库的库容大于2.5×106cfu,重组率为91%,全长率高达88.9%。本文库的构建为进一步甘蔗茎中全长基因的克隆和功能基因的表达分析奠定了基础。 展开更多

关键词 全长CDNA文库 Oligo-Capping法 甘蔗茎

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甘蔗细胞质型苹果酸脱氢酶基因的克隆及其表达分析 被引量：3

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作者 徐景升 阙友雄 +6 位作者 颜克伟 唐唯其 许莉萍 高三基 郭晋隆 董萌 陈如凯 《热带亚热带植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期455-461,共7页

对甘蔗(Saccharum officinarum L.)叶片全长cDNA文库进行测序,获得了1个细胞质型苹果酸脱氢酶(cMDH)基因的全长cDNA序列,命名为Sc-cMDH。生物信息学分析表明,该基因全长1314 bp,开放阅读框为999 bp,编码332个氨基酸。Sc-cMDH与其他植物c... 对甘蔗(Saccharum officinarum L.)叶片全长cDNA文库进行测序,获得了1个细胞质型苹果酸脱氢酶(cMDH)基因的全长cDNA序列,命名为Sc-cMDH。生物信息学分析表明,该基因全长1314 bp,开放阅读框为999 bp,编码332个氨基酸。Sc-cMDH与其他植物cMDH的氨基酸序列同源性高达86.5%～97.0%。Sc-cMDH包含典型的NAD+结合基元T11GAAGQI17和催化基元I184WGNH188,还有相当保守的6个半胱氨酸残基,因此推断该基因为细胞质型NAD-MDH。定量PCR分析结果表明,该基因在甘蔗叶片和根中的表达量高于茎。 展开更多

关键词 甘蔗 细胞质型苹果酸脱氢酶基因 实时定量PCR

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抗原直接包被间接ELISA检测甘蔗黄叶病毒 被引量：1

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作者 高三基 Pan Yong-bao 陈如凯 《热带作物学报》 CSCD 2010年第8期1356-1361,共6页

利用正交设计L9(34)方法优化甘蔗黄叶病毒(SCYLV)抗原直接包被间接ELISA实验条件,统计结果表明,甘蔗蔗汁和蔗叶SCYLV粗提液包被抗原合适体积为150μL,最佳的抗体浓度SCYLV-IgG多克隆抗体(一抗)稀释1500倍,碱性磷酸酶羊抗兔IgG(二抗)稀释... 利用正交设计L9(34)方法优化甘蔗黄叶病毒(SCYLV)抗原直接包被间接ELISA实验条件,统计结果表明,甘蔗蔗汁和蔗叶SCYLV粗提液包被抗原合适体积为150μL,最佳的抗体浓度SCYLV-IgG多克隆抗体(一抗)稀释1500倍,碱性磷酸酶羊抗兔IgG(二抗)稀释20000～30000倍,最佳反应时间为1～2h。应用这一优化体系,分析甘蔗不同部位的蔗茎和不同叶位的叶片SCYLV滴度的差异,结果表明,上部甘蔗蔗茎SCYLV病毒含量显著高于中下部蔗茎组织,最高可见肥厚带叶(+1叶)及其上一叶(-1叶)的嫩叶组织SCYLV病毒含量显著高于最高可见肥厚带叶以下第2叶(+3叶)和第4叶(+5叶)的老叶组织。甘蔗幼嫩组织部位SCYLV滴度较高,更适合于病毒检测。 展开更多

关键词 甘蔗 甘蔗黄叶病毒 酶联免疫吸附试验

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