羊结核病流行现状与防控策略

1

作者 安家兴 孔文君 +3 位作者 徐正中 郑成坤 陈祥 焦新安 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第4期346-350,共5页

羊是结核分枝杆菌的重要宿主之一。近年来,羊结核病的病例报道数量逐渐增多,羊结核病病原体会在多种动物间相互传播,甚至传染给人类,这进一步加剧了结核病防控的难度,严重威胁人畜健康。本文总结了世界范围内羊结核病的流行情况,并对我... 羊是结核分枝杆菌的重要宿主之一。近年来,羊结核病的病例报道数量逐渐增多,羊结核病病原体会在多种动物间相互传播,甚至传染给人类,这进一步加剧了结核病防控的难度,严重威胁人畜健康。本文总结了世界范围内羊结核病的流行情况,并对我国羊结核病流行情况作出具体分析。列举了羊结核病的常用检测方法并简要介绍了各种检测方法的不足之处。同时根据世界各国羊结核病的监测、处理与防控的常见方法,对我国羊结核病的防控提出建议,以期为羊结核病的防控提供参考。 展开更多

关键词 绵羊 山羊 结核病 流行病学 防控

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猴结核病的流行与防控

2

作者 翟伟 刘栋辉 +3 位作者 徐正中 郑成坤 焦新安 陈祥 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期1077-1083,共7页

非人灵长类(non-human primates,NHPs)是结核病的易感宿主,感染后,结核不仅会在种群中相互传播,也会传播给人类。目前尚无有效的疫苗预防NHPs结核。虽然目前的防控方案已经较为成熟,减少了圈养NHPs结核病的发病率,但疫情仍有发生。本文... 非人灵长类(non-human primates,NHPs)是结核病的易感宿主,感染后,结核不仅会在种群中相互传播,也会传播给人类。目前尚无有效的疫苗预防NHPs结核。虽然目前的防控方案已经较为成熟,减少了圈养NHPs结核病的发病率,但疫情仍有发生。本文总结了世界范围圈养和野生环境下猴结核病的流行病学状况,对当前常用检测方法的优缺点进行分析,并总结当前NHPs的防控检测最常见做法。表明结核病对NHPs构成极大威胁,以提高NHPs饲养工作者、管理者对结核病的认知,为完善当前管理程序提供依据,以期为我国猴结核病的诊断防控提供参考。 展开更多

关键词 猴 结核病 流行病学 预防控制

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结核分枝杆菌诱导宿主HIF-1α通路活化在免疫调控中的作用

3

作者 井钦伟 朱应鹏 +3 位作者 周璐 陈祥 徐正中 焦新安 《生物学杂志》 北大核心 2025年第4期109-112,共4页

缺氧诱导因子(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)是一种广泛存在于体内的转录因子,在缺氧状态下发挥其调控作用,HIF-1α及其信号通路的激活可以促进细胞存活和增加对损伤性刺激的保护作用。结核分枝杆菌是一种极具传染性的胞内感... 缺氧诱导因子(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)是一种广泛存在于体内的转录因子,在缺氧状态下发挥其调控作用,HIF-1α及其信号通路的激活可以促进细胞存活和增加对损伤性刺激的保护作用。结核分枝杆菌是一种极具传染性的胞内感染型细菌,其感染要面临低氧、一氧化氮和营养缺乏等逆境,缺氧时,HIF-1α通过影响巨噬细胞内的能量代谢途径来调控细胞对结核分枝杆菌的免疫应答,在巨噬细胞抗结核免疫中起着重要作用。旨在总结结核分枝杆菌诱导宿主HIF-1α通路活化在免疫调控中的作用,为结核分枝杆菌致病机制研究和疫苗研发提供参考。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌 宿主细胞 HIF-1α通路 免疫调控 免疫应答

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牛CD4单克隆抗体的制备及其鉴定

4

作者 孔文君 朱月姝 +3 位作者 徐正中 郑成坤 陈祥 焦新安 《细胞与分子免疫学杂志》 北大核心 2025年第5期450-455,共6页

目的制备抗牛CD4的单克隆抗体,并对其进行基本生物学特性鉴定。方法通过构建牛CD4基因原核质粒,成功表达并纯化出重组牛CD4(rHis-BoCD4和rGST-BoCD4)。利用杂交瘤技术制备抗牛CD4单克隆抗体,通过ELISA对单克隆抗体亚型和效价进行鉴定和... 目的制备抗牛CD4的单克隆抗体,并对其进行基本生物学特性鉴定。方法通过构建牛CD4基因原核质粒,成功表达并纯化出重组牛CD4(rHis-BoCD4和rGST-BoCD4)。利用杂交瘤技术制备抗牛CD4单克隆抗体,通过ELISA对单克隆抗体亚型和效价进行鉴定和分析,使用间接免疫荧光实验、Western blot法分析其特异性。结果成功获得了四株稳定分泌BoCD4单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为1H4、6A10、3F9和4G10。亚类鉴定单克隆抗体亚类6A10为IgG2b,其余单克隆抗体均为IgM型。Western blot结果显示,4株牛CD4单克隆抗体均可与体外表达的牛CD4蛋白发生特异性结合。间接免疫荧光实验表明4株单克隆抗体均能够特异性识别天然牛CD4蛋白。流式细胞术检测结果显示,3F9识别牛天然CD4分子的能力最强。结论成功制备了4株特异性强且能识别天然牛CD4蛋白的单克隆抗体,为后续研究牛CD4分子的功能、牛T淋巴细胞疾病的诊断及治疗方法的建立奠定基础。 展开更多

关键词 牛CD4 单克隆抗体 原核表达

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结核分枝杆菌ESAT6-CFP10蛋白的融合表达及其细胞免疫学特性 被引量：2

5

作者 孟闯 万婷 +6 位作者 徐正中 单法 解晓莉 申峻松 范峰 陈祥 焦新安 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期789-794,共6页

本研究旨在原核表达结核分枝杆菌ESAT6-CFP10融合蛋白,分析其在小鼠模型中的细胞免疫应答特性,并评价其作为牛结核外周血IFN-γ释放试验特异性刺激原的能力。首先,通过构建pET30a(+)-esat6-linker-lhp重组质粒,BL21(DE3)中诱导表达ESAT6... 本研究旨在原核表达结核分枝杆菌ESAT6-CFP10融合蛋白,分析其在小鼠模型中的细胞免疫应答特性,并评价其作为牛结核外周血IFN-γ释放试验特异性刺激原的能力。首先,通过构建pET30a(+)-esat6-linker-lhp重组质粒,BL21(DE3)中诱导表达ESAT6-CFP10融合蛋白并纯化,随后经细胞表面分子的FACS分析、ELISPOT试验等分析其在小鼠中的细胞免疫应答特性,同时作为刺激原用于奶牛IFN-γ释放试验,评价其用于牛结核病诊断的潜能。结果表明:SDS-PAGE显示目的蛋白成功表达,Western blotting证实其对ESAT6、CFP10单克隆抗体有良好免疫反应性。FACS结果显示其上调树突状细胞表面CD80和CD86分子以及小鼠脾CD4+和CD8+T细胞表面CD69的表达,ELISPOT结果表明其诱导的特异性IFN-γ分泌细胞数显著高于IL-4分泌细胞数,显示其诱导产生Th1型免疫应答的能力。在479份奶牛外周血样本的γ-干扰素释放试验中,ESAT6-CFP10蛋白与PPD作为刺激原的阳性符合率为70.0%,阴性符合率为95.2%。本研究成功表达ESAT6-CFP10融合蛋白,其具备诱导Th1型免疫应答特性,在牛结核外周血γ-干扰素释放试验中可作为候选刺激抗原。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌 ESAT6 CFP10 细胞免疫 牛结核病 刺激原

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鸡白痢沙门菌spiC::km突变株减毒效应的病理学观察 被引量：1

6

作者 耿士忠 安树敏 +5 位作者 曾玲 郭荣显 薛颖 蒋远远 潘志明 焦新安 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2015年第7期48-49,共2页

鸡白痢（Pullorum disease,PD）是由鸡白痢沙门菌（Salmonella Pullorum）引起的一种急性、全身性疾病,也是一种常见传染病,能引起雏鸡高发病率和高死亡率,是严重危害养鸡业的疾病之一,并造成严重经济损失。目前,除了抗生素,沙门菌活疫... 鸡白痢（Pullorum disease,PD）是由鸡白痢沙门菌（Salmonella Pullorum）引起的一种急性、全身性疾病,也是一种常见传染病,能引起雏鸡高发病率和高死亡率,是严重危害养鸡业的疾病之一,并造成严重经济损失。目前,除了抗生素,沙门菌活疫苗被普遍认为是预防和治疗沙门菌病的有效手段。 展开更多

关键词 鸡白痢 KM SPIC 沙门菌病 全身性疾病 突变株 活疫苗 病理学观察 SALMONELLA 空白对照组

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鹿结核病的流行与防控 被引量：1

7

作者 张小露 李昕 +2 位作者 徐正中 陈祥 焦新安 《动物医学进展》 北大核心 2023年第7期102-106,共5页

鹿结核病是由结核分支杆菌复合群引起的一种人兽共患传染病,该病与牛结核病类似,是一种慢性消耗性疾病。近些年来养鹿业已经发展成为我国东北、内蒙古及新疆等地区的特色产业,且在全国各地的动物园、公园也有少量鹿的饲养。但社会对于... 鹿结核病是由结核分支杆菌复合群引起的一种人兽共患传染病,该病与牛结核病类似,是一种慢性消耗性疾病。近些年来养鹿业已经发展成为我国东北、内蒙古及新疆等地区的特色产业,且在全国各地的动物园、公园也有少量鹿的饲养。但社会对于结核病的关注几乎都落在了人和牛身上,而忽视了与人类关系密切的鹿结核病。目前有许多国家(如新西兰、英国、美国等)报道过鹿结核病。这些国家都采取了一系列措施来监测野鹿和驯养鹿中的结核病,且将鹿结核病的发生控制在较低水平。但我国还没有实施针对野鹿中结核病的监测计划,对驯养鹿中的结核病检测仅有一些地方标准。基于此,论文综述了世界各地鹿结核病的流行情况和防控措施,为我国鹿结核病防控提供参考。 展开更多

关键词 鹿 结核病 流行病学 预防控制

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鸡白痢沙门菌spiC基因克隆与生物信息学分析 被引量：1

8

作者 安树敏 郭荣显 +3 位作者 薛颖 潘志明 耿士忠 焦新安 《动物医学进展》 北大核心 2016年第2期6-10,共5页

为了研究鸡白痢沙门菌SpiC蛋白的功能,以鸡白痢沙门菌S06004基因组DNA为模板PCR扩增spiC基因,进行克隆测序和生物信息学分析,并调查该基因在255株不同年代鸡白痢沙门菌分离株中的分布与进化情况。结果显示,鸡白痢沙门菌spiC基因全长384... 为了研究鸡白痢沙门菌SpiC蛋白的功能,以鸡白痢沙门菌S06004基因组DNA为模板PCR扩增spiC基因,进行克隆测序和生物信息学分析,并调查该基因在255株不同年代鸡白痢沙门菌分离株中的分布与进化情况。结果显示,鸡白痢沙门菌spiC基因全长384bp,编码127个氨基酸,在不同年代分离株中稳定存在。推导SpiC蛋白无跨膜区、信号肽和卷曲螺旋结构,有1处酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点,2处N-豆蔻酰化位点,预测线性抗原表位主要分布在15-20、29-35、52-53、70-72、83-85、89-94aa。利用SWISS MODEL在线程序建模,得到SpiC三维结构模型。同源性及进化分析显示spiC基因仅存在于沙门菌中且比较保守,鸡白痢沙门菌SpiC蛋白与沙门菌肠道亚种亲缘关系最近。 展开更多

关键词 鸡白痢沙门菌 SpiC蛋白 生物信息学分析

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布鲁氏菌主要外膜蛋白研究进展 被引量：4

9

作者 辛雪强 佟彤 +3 位作者 王玉金 盛宇杰 徐正中 陈祥 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期872-879,共8页

布鲁氏菌病是一种世界范围流行的细菌性人兽共患传染病,由布鲁氏菌属细菌引起,给畜牧业生产和公共卫生安全带来了极大的威胁。外膜蛋白是布鲁氏菌主要的免疫和保护性抗原,与布鲁氏菌的毒力、免疫调节和胞内寄生等特性密切相关。本文对... 布鲁氏菌病是一种世界范围流行的细菌性人兽共患传染病,由布鲁氏菌属细菌引起,给畜牧业生产和公共卫生安全带来了极大的威胁。外膜蛋白是布鲁氏菌主要的免疫和保护性抗原,与布鲁氏菌的毒力、免疫调节和胞内寄生等特性密切相关。本文对布鲁氏菌主要外膜蛋白的研究进展予以综述,从而促进对布鲁氏菌抗原特性的理解,为布鲁氏菌新型诊断方法的建立和疫苗设计提供参考。 展开更多

关键词 布鲁氏菌 外膜蛋白 抗原特性

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白细胞介素-2在牛感染性疾病中的作用

10

作者 陶宏卫 夏爱鸿 陈祥 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2022年第6期189-193,共5页

白细胞介素-2(IL-2)是Th1型细胞因子家族中重要的成员之一,主要由CD4^(+)T细胞和CD8^(+)T细胞产生,具有促进T细胞增殖的作用,同时还具有调节B细胞、NK细胞及巨噬细胞等的功能。IL-2的生成是机体受微生物感染时免疫应答的一部分,以区别... 白细胞介素-2(IL-2)是Th1型细胞因子家族中重要的成员之一,主要由CD4^(+)T细胞和CD8^(+)T细胞产生,具有促进T细胞增殖的作用,同时还具有调节B细胞、NK细胞及巨噬细胞等的功能。IL-2的生成是机体受微生物感染时免疫应答的一部分,以区别“自己”与“非己”,其在牛结核病、牛传染性鼻气管炎、口蹄疫、布鲁菌病、巴氏杆菌病、白血病等感染性疾病中发挥重要的作用。深入了解牛IL-2的结构、功能及其在感染性疾病中的作用机制,有利于对牛IL-2的进一步的研究和应用。 展开更多

关键词 牛白细胞介素-2 感染性疾病 生物学功能

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牛肿瘤坏死因子α小鼠单克隆抗体的制备 被引量：6

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作者 谈悦 徐正中 +4 位作者 朱兆成 夏爱鸿 孙林 陈祥 焦新安 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期271-276,共6页

目的制备抗牛肿瘤坏死因子α(BoTNF-α)的单克隆抗体(mAb)。方法以原核系统表达的带有组蛋白(His)标签的重组牛TNF-α蛋白(rHis-BoTNF-α)为免疫原,带有谷胱甘肽硫转移酶(GST)标签的重组牛TNF-α蛋白(rGST-BoTNF-α)为检测原,采用杂交... 目的制备抗牛肿瘤坏死因子α(BoTNF-α)的单克隆抗体(mAb)。方法以原核系统表达的带有组蛋白(His)标签的重组牛TNF-α蛋白(rHis-BoTNF-α)为免疫原,带有谷胱甘肽硫转移酶(GST)标签的重组牛TNF-α蛋白(rGST-BoTNF-α)为检测原,采用杂交瘤细胞技术制备mAb。Western blot法检测mAb与rHis-BoTNF-α和rGST-BoTNF-α的反应性,间接ELISA检测mAb效价、特异性以及mAb与商品化重组BoTNF-α的反应性,流式细胞术分析mAb识别天然抗原的活性。结果成功筛选出7株稳定分泌抗rBoTNF-αmAb的杂交瘤细胞株。结果证明7株mAb均具有良好的反应性及特异性。流式细胞术分析显示mAb 4G4具有良好的识别天然抗原的活性。结论成功制备了抗BoTNF-α的mAb。 展开更多

关键词 牛肿瘤坏死因子α( BoTNF-α) 原核表达 单克隆抗体

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ELISPOT检测技术在结核病诊断中的应用 被引量：7

12

作者 沈也驰 李昕 +3 位作者 徐正中 夏爱鸿 焦新安 陈祥 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2020年第1期103-107,共5页

结核病(tuberculosis,TB)是由结核分枝杆菌复合群所引起的一种人兽共患传染病,关于结核病的防治,难题之一依然是诊断问题。酶联免疫斑点试验是在酶联免疫吸附试验的基础上发展的一种检测技术,能够在单细胞水平上定量检测低频细胞亚群,... 结核病(tuberculosis,TB)是由结核分枝杆菌复合群所引起的一种人兽共患传染病,关于结核病的防治,难题之一依然是诊断问题。酶联免疫斑点试验是在酶联免疫吸附试验的基础上发展的一种检测技术,能够在单细胞水平上定量检测低频细胞亚群,具有高灵敏度、高特异性和高通量等特点,在肿瘤疫苗评价试验、免疫监测及免疫学研究中发挥重要作用。目前,该检测技术在结核病诊断中已实现临床检验,并且已有商品化的T-SPOT.TB试剂盒应用于人结核病诊断。本文对ELISPOT检测技术在结核病诊断中的应用作一综述。 展开更多

关键词 结核病 结核分枝杆菌 酶联免疫斑点试验 酶联免疫吸附试验 T-SPOT.TB

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沙门菌分型技术研究进展 被引量：13

13

作者 李昱辰 程瞾 +3 位作者 蔡银强 焦扬 潘志明 焦新安 《中国动物检疫》 CAS 2014年第6期32-35,共4页

沙门菌在自然界广泛分布,是人和动物常见的病原菌,可引起人和动物伤寒、副伤寒、胃肠炎、败血症和局部感染等多种疾病。沙门菌分型方法分为以表型特征为依据的表型分型和以基因或基因组结构特征为依据的分子分型。本文不仅回顾了传统的... 沙门菌在自然界广泛分布,是人和动物常见的病原菌,可引起人和动物伤寒、副伤寒、胃肠炎、败血症和局部感染等多种疾病。沙门菌分型方法分为以表型特征为依据的表型分型和以基因或基因组结构特征为依据的分子分型。本文不仅回顾了传统的分型方法,还重点介绍了最近发展迅速的多种分子分型方法,可为沙门菌的分型研究提供参考。 展开更多

关键词 沙门菌 表型分型 分子分型

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沙门菌T3SS相关效应蛋白作用机制的研究进展 被引量：4

14

作者 汤佩佩 蔺志杰 +1 位作者 潘志明 焦新安 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期277-280,288,共5页

沙门菌是人兽共患病原菌,能感染宿主并导致严重的并发症和死亡。沙门菌的致病性主要是由沙门菌SPI-1和SPI-2编码的T3SS的效应蛋白相互作用的结果。本文主要对T3SS相关效应蛋白在沙门菌感染的不同阶段发挥的功能进行综述,以期为进一步了... 沙门菌是人兽共患病原菌,能感染宿主并导致严重的并发症和死亡。沙门菌的致病性主要是由沙门菌SPI-1和SPI-2编码的T3SS的效应蛋白相互作用的结果。本文主要对T3SS相关效应蛋白在沙门菌感染的不同阶段发挥的功能进行综述,以期为进一步了解沙门菌致病机理提供参考。 展开更多

关键词 沙门菌 T3SS效应蛋白 功能

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布鲁菌病细胞免疫诊断靶点抗原研究进展 被引量：4

15

作者 杜强 徐正中 +1 位作者 陈祥 焦新安 《动物医学进展》 北大核心 2015年第11期88-92,共5页

布鲁菌病(布病)在世界各地广泛流行,严重威胁着人类健康,及时和准确诊断是防控布病的有效手段之一。目前布病诊断方法主要包括细菌学、分子生物学和血清学方法,细胞免疫学诊断方法还处于研发阶段,研究主要针对其潜在的诊断靶点抗原进行... 布鲁菌病(布病)在世界各地广泛流行,严重威胁着人类健康,及时和准确诊断是防控布病的有效手段之一。目前布病诊断方法主要包括细菌学、分子生物学和血清学方法,细胞免疫学诊断方法还处于研发阶段,研究主要针对其潜在的诊断靶点抗原进行筛选和评价。论文对布病细胞免疫主要诊断靶点抗原的研究现状进行综述。 展开更多

关键词 布鲁菌病 细胞免疫 诊断方法

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结核分枝杆菌诱导宿主Ⅰ型干扰素应答及其免疫调控功能研究进展 被引量：2

16

作者 姚志鸿 张志芳 +4 位作者 胡苏洁 刘慧 陈祥 徐正中 焦新安 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期94-97,共4页

阐述结核分枝杆菌感染过程中Ⅰ型干扰素的免疫功能,Ⅰ型干扰素既可以作为活动性结核的标识并加剧结核致病过程,同时也参与机体的抗结核免疫防御过程并降低结核分枝杆菌胞内存活。另外,在不同层面归纳结核分枝杆菌感染诱导宿主Ⅰ型干扰... 阐述结核分枝杆菌感染过程中Ⅰ型干扰素的免疫功能,Ⅰ型干扰素既可以作为活动性结核的标识并加剧结核致病过程,同时也参与机体的抗结核免疫防御过程并降低结核分枝杆菌胞内存活。另外,在不同层面归纳结核分枝杆菌感染诱导宿主Ⅰ型干扰素表达及信号通路活化的机制,并探讨结核分枝杆菌可以通过调控Ⅰ型干扰素应答水平以逃逸宿主免疫,从而促进其在宿主体内持续感染。旨在总结结核分枝杆菌诱导宿主Ⅰ型干扰素应答及其免疫调控功能的研究进展,进而为抗结核药物靶标筛选及疫苗研制提供新思路。 展开更多

关键词 结核病 结核分枝杆菌 Ⅰ型干扰素 免疫调控 免疫逃逸

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牛干扰素诱导蛋白-10单克隆抗体的制备及其流式检测方法的建立 被引量：2

17

作者 徐正中 沈轩云 +3 位作者 朱兆成 夏爱鸿 陈祥 焦新安 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期959-964,共6页

为制备针对牛干扰素诱导蛋白-10(BoIP-10)的高亲和力单克隆抗体(MAb),并建立基于胞内染色技术的BoIP-10流式检测方法,本研究以纯化的原核表达融合蛋白rHis-BoIP-10为免疫原,使用纯化的rGST-BoIP-10为筛选抗原,利用淋巴细胞杂交瘤技术制... 为制备针对牛干扰素诱导蛋白-10(BoIP-10)的高亲和力单克隆抗体(MAb),并建立基于胞内染色技术的BoIP-10流式检测方法,本研究以纯化的原核表达融合蛋白rHis-BoIP-10为免疫原,使用纯化的rGST-BoIP-10为筛选抗原,利用淋巴细胞杂交瘤技术制备并筛选针对BoIP-10的MAb,结果显示,筛选获得8株稳定分泌BoIP-10 MAb的细胞株,分别为3E11、2A5、1C6、3B12、3E12、2D5、2H8和3A12;通过间接ELISA鉴定MAbs与真核BoIP-10的反应性,结果显示2A5、2D5、2H8等3株MAb与毕赤酵母表达的BoIP-10有较好的反应性;进一步采用阻断ELISA方法评价MAbs是否结合血浆中的天然BoIP-10,结果表明MAb 2D5可以识别血浆中的天然BoIP-10。将MAbs进行荧光标记后建立BoIP-10流式检测方法,结果显示建立的BoIP-10流式检测方法最佳刺激剂为ConA,最优刺激浓度为20μg/mL,最佳MAb株为2D5,MAb的最优使用浓度为4μg/mL。采用该BoIP-10流式方法检测BCG诱导牛外周血单核细胞Bo IP-10的表达水平,结果显示BCG体外感染牛外周血单核细胞12 h时表达较高水平的Bo IP-10。本研究制备并筛选出针对天然Bo IP-10的特异性MAb 2D5,基于此建立的流式检测方法为进一步研究Bo IP-10在牛机体免疫应答评价、牛结核病等传染性动物疫病诊断中的应用提供新的技术手段。 展开更多

关键词 牛干扰素诱导蛋白-10 单克隆抗体 流式检测方法

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抗鸡白细胞介素4单克隆抗体的制备及其鉴定 被引量：2

18

作者 戴华 陈俊华 +3 位作者 张海霞 沈颖 陈祥 焦新安 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期986-990,共5页

目的制备抗鸡白细胞介素4(ChIL-4)单克隆抗体(mAb)并进行鉴定。方法以重组鸡IL-4(GST-ChIL-4)作为免疫原免疫8周龄BALB/c小鼠,以重组蛋白His-ChIL-4作为检测抗原建立筛选阳性杂交瘤细胞株的间接ELISA;以有限稀释法制备稳定分泌抗ChIL-4 ... 目的制备抗鸡白细胞介素4(ChIL-4)单克隆抗体(mAb)并进行鉴定。方法以重组鸡IL-4(GST-ChIL-4)作为免疫原免疫8周龄BALB/c小鼠,以重组蛋白His-ChIL-4作为检测抗原建立筛选阳性杂交瘤细胞株的间接ELISA;以有限稀释法制备稳定分泌抗ChIL-4 mAb细胞株;采用间接ELISA、间接免疫荧光法(IFA)以及Western blot法分析mAb的特异性。结果获得4株抗ChIL-4的mAb,分别命名为6A8、18F12、19F1、20G3,腹水mAb的ELISA效价为(1.6~6.4)×104;ELISA、IFA及Western blot结果显示该4株mAb均是特异针对重组ChIL-4的mAb,不具有识别重组牛IL-4、鸡γ干扰素(IFN-γ)等其他蛋白的能力。结论成功制备了抗ChIL-4的mAb。 展开更多

关键词 鸡白细胞介素4(ChIL-4) 单克隆抗体

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利用SCOTS技术筛选鸡白痢沙门菌感染巨噬细胞的转录序列 被引量：1

19

作者 李求春 方丽君 +5 位作者 陈静 谢晓蕾 陶明新 王晓春 吴颖斐 焦新安 《中国家禽》 北大核心 2014年第21期17-22,共6页

沙门菌在巨噬细胞内的存活是其在宿主内长期定植的主要因素之一,研究利用选择性捕获转录技术(SCOTS)筛选鸡白痢沙门菌S06004株在感染鸡巨噬细胞系HD-11过程中细菌表达的基因。结果显示:鸡白痢沙门菌以MOI值为100∶1感染HD-11细胞1 h后,... 沙门菌在巨噬细胞内的存活是其在宿主内长期定植的主要因素之一,研究利用选择性捕获转录技术(SCOTS)筛选鸡白痢沙门菌S06004株在感染鸡巨噬细胞系HD-11过程中细菌表达的基因。结果显示:鸡白痢沙门菌以MOI值为100∶1感染HD-11细胞1 h后,感染率达11.75%;选取感染1 h时间点作为研究对象,利用SCOTS技术获得了12个鸡白痢沙门菌的转录序列,包括与沙门菌感染相关的毒力基因调控因子inv F;构建了inv F、teh B和tol C基因插入突变株。突变株侵入HD-11的能力明显低于野生株,反映了SCOTS筛选获得的基因在鸡白痢沙门菌感染巨噬细胞时发挥重要的作用,为深入揭示鸡白痢沙门菌的感染机制提供了基础。 展开更多

关键词 鸡白痢沙门菌 巨噬细胞 选择性捕获转录序列(SCOTS)

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鸡白痢沙门菌中三型分泌系统-2效应蛋白基因分布研究 被引量：1

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作者 殷俊磊 程瞾 +3 位作者 夏静 李求春 耿士忠 焦新安 《中国家禽》 北大核心 2015年第19期14-19,共6页

为了解鸡白痢沙门菌中三型分泌系统-2（T3SS2）效应蛋白基因的分布情况。本研究采用PCR方法检测了在1962~2013年间从我国分离的237株鸡白痢沙门菌中25个T3SS2效应蛋白基因的分布特征;同时,通过序列比对分析了这25个基因在18株不同血清... 为了解鸡白痢沙门菌中三型分泌系统-2（T3SS2）效应蛋白基因的分布情况。本研究采用PCR方法检测了在1962~2013年间从我国分离的237株鸡白痢沙门菌中25个T3SS2效应蛋白基因的分布特征;同时,通过序列比对分析了这25个基因在18株不同血清型沙门菌中的流行特征,它们的全基因组序列来自GenBank。PCR结果显示,在这237株菌株中,cigR、pipB、pipB2、slrP、sopD、sopD2、spiC、sseF、sseG、sseJ、sseK1、sseL、steA、steB、steC和steD均存在,gogB和sspH1均缺失,其它基因分布水平在5.9%~99.6%之间。序列比对分析结果显示,有15个基因在这18株菌株中均存在,sifB、sseK1、sspH2和steC在一些菌株中是假基因。结果表明,gtgE、sseI和sseK2在这237株菌株中分布具有一定的年代规律性;大部分被检测基因在鸡白痢沙门菌中具有广泛分布;一些基因在微进化过程中形成了假基因。 展开更多

关键词 鸡白痢沙门菌 三型分泌系统-2 假基因

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