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猴结核病的流行与防控
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作者 翟伟 刘栋辉 +3 位作者 徐正中 郑成坤 焦新安 陈祥 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期1077-1083,共7页
非人灵长类(non-human primates,NHPs)是结核病的易感宿主,感染后,结核不仅会在种群中相互传播,也会传播给人类。目前尚无有效的疫苗预防NHPs结核。虽然目前的防控方案已经较为成熟,减少了圈养NHPs结核病的发病率,但疫情仍有发生。本文... 非人灵长类(non-human primates,NHPs)是结核病的易感宿主,感染后,结核不仅会在种群中相互传播,也会传播给人类。目前尚无有效的疫苗预防NHPs结核。虽然目前的防控方案已经较为成熟,减少了圈养NHPs结核病的发病率,但疫情仍有发生。本文总结了世界范围圈养和野生环境下猴结核病的流行病学状况,对当前常用检测方法的优缺点进行分析,并总结当前NHPs的防控检测最常见做法。表明结核病对NHPs构成极大威胁,以提高NHPs饲养工作者、管理者对结核病的认知,为完善当前管理程序提供依据,以期为我国猴结核病的诊断防控提供参考。 展开更多
关键词 结核病 流行病学 预防控制
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牛CD4单克隆抗体的制备及其鉴定
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作者 孔文君 朱月姝 +3 位作者 徐正中 郑成坤 陈祥 焦新安 《细胞与分子免疫学杂志》 北大核心 2025年第5期450-455,共6页
目的制备抗牛CD4的单克隆抗体,并对其进行基本生物学特性鉴定。方法通过构建牛CD4基因原核质粒,成功表达并纯化出重组牛CD4(rHis-BoCD4和rGST-BoCD4)。利用杂交瘤技术制备抗牛CD4单克隆抗体,通过ELISA对单克隆抗体亚型和效价进行鉴定和... 目的制备抗牛CD4的单克隆抗体,并对其进行基本生物学特性鉴定。方法通过构建牛CD4基因原核质粒,成功表达并纯化出重组牛CD4(rHis-BoCD4和rGST-BoCD4)。利用杂交瘤技术制备抗牛CD4单克隆抗体,通过ELISA对单克隆抗体亚型和效价进行鉴定和分析,使用间接免疫荧光实验、Western blot法分析其特异性。结果成功获得了四株稳定分泌BoCD4单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为1H4、6A10、3F9和4G10。亚类鉴定单克隆抗体亚类6A10为IgG2b,其余单克隆抗体均为IgM型。Western blot结果显示,4株牛CD4单克隆抗体均可与体外表达的牛CD4蛋白发生特异性结合。间接免疫荧光实验表明4株单克隆抗体均能够特异性识别天然牛CD4蛋白。流式细胞术检测结果显示,3F9识别牛天然CD4分子的能力最强。结论成功制备了4株特异性强且能识别天然牛CD4蛋白的单克隆抗体,为后续研究牛CD4分子的功能、牛T淋巴细胞疾病的诊断及治疗方法的建立奠定基础。 展开更多
关键词 牛CD4 单克隆抗体 原核表达
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结核分枝杆菌ESAT6-CFP10蛋白的融合表达及其细胞免疫学特性 被引量:2
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作者 孟闯 万婷 +6 位作者 徐正中 单法 解晓莉 申峻松 范峰 陈祥 焦新安 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期789-794,共6页
本研究旨在原核表达结核分枝杆菌ESAT6-CFP10融合蛋白,分析其在小鼠模型中的细胞免疫应答特性,并评价其作为牛结核外周血IFN-γ释放试验特异性刺激原的能力。首先,通过构建pET30a(+)-esat6-linker-lhp重组质粒,BL21(DE3)中诱导表达ESAT6... 本研究旨在原核表达结核分枝杆菌ESAT6-CFP10融合蛋白,分析其在小鼠模型中的细胞免疫应答特性,并评价其作为牛结核外周血IFN-γ释放试验特异性刺激原的能力。首先,通过构建pET30a(+)-esat6-linker-lhp重组质粒,BL21(DE3)中诱导表达ESAT6-CFP10融合蛋白并纯化,随后经细胞表面分子的FACS分析、ELISPOT试验等分析其在小鼠中的细胞免疫应答特性,同时作为刺激原用于奶牛IFN-γ释放试验,评价其用于牛结核病诊断的潜能。结果表明:SDS-PAGE显示目的蛋白成功表达,Western blotting证实其对ESAT6、CFP10单克隆抗体有良好免疫反应性。FACS结果显示其上调树突状细胞表面CD80和CD86分子以及小鼠脾CD4+和CD8+T细胞表面CD69的表达,ELISPOT结果表明其诱导的特异性IFN-γ分泌细胞数显著高于IL-4分泌细胞数,显示其诱导产生Th1型免疫应答的能力。在479份奶牛外周血样本的γ-干扰素释放试验中,ESAT6-CFP10蛋白与PPD作为刺激原的阳性符合率为70.0%,阴性符合率为95.2%。本研究成功表达ESAT6-CFP10融合蛋白,其具备诱导Th1型免疫应答特性,在牛结核外周血γ-干扰素释放试验中可作为候选刺激抗原。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 ESAT6 CFP10 细胞免疫 牛结核病 刺激原
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噬菌体在食源性病原菌防控中的应用 被引量:2
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作者 许燕苹 徐正中 +1 位作者 陈祥 焦新安 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期927-930,共4页
近年来,病原微生物引起的食源性疾病在世界范围内频发,对人类健康及公共卫生安全造成严重威胁。而在抗菌药物使用日趋严格和规范的状况下,耐药性传播等问题依然存在,迫切需要新的防控手段。噬菌体因其可吸附并裂解细菌从而达到杀菌效果... 近年来,病原微生物引起的食源性疾病在世界范围内频发,对人类健康及公共卫生安全造成严重威胁。而在抗菌药物使用日趋严格和规范的状况下,耐药性传播等问题依然存在,迫切需要新的防控手段。噬菌体因其可吸附并裂解细菌从而达到杀菌效果,这为食源性病原菌的生物防控开辟了新的道路,本文就噬菌体及其裂解酶在食品安全防控方面的应用作一综述,旨在为食源性病原菌防控提供参考。 展开更多
关键词 噬菌体 病原微生物 食源性疾病 防控
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鹿结核病的流行与防控 被引量:1
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作者 张小露 李昕 +2 位作者 徐正中 陈祥 焦新安 《动物医学进展》 北大核心 2023年第7期102-106,共5页
鹿结核病是由结核分支杆菌复合群引起的一种人兽共患传染病,该病与牛结核病类似,是一种慢性消耗性疾病。近些年来养鹿业已经发展成为我国东北、内蒙古及新疆等地区的特色产业,且在全国各地的动物园、公园也有少量鹿的饲养。但社会对于... 鹿结核病是由结核分支杆菌复合群引起的一种人兽共患传染病,该病与牛结核病类似,是一种慢性消耗性疾病。近些年来养鹿业已经发展成为我国东北、内蒙古及新疆等地区的特色产业,且在全国各地的动物园、公园也有少量鹿的饲养。但社会对于结核病的关注几乎都落在了人和牛身上,而忽视了与人类关系密切的鹿结核病。目前有许多国家(如新西兰、英国、美国等)报道过鹿结核病。这些国家都采取了一系列措施来监测野鹿和驯养鹿中的结核病,且将鹿结核病的发生控制在较低水平。但我国还没有实施针对野鹿中结核病的监测计划,对驯养鹿中的结核病检测仅有一些地方标准。基于此,论文综述了世界各地鹿结核病的流行情况和防控措施,为我国鹿结核病防控提供参考。 展开更多
关键词 鹿 结核病 流行病学 预防控制
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鸡白痢沙门菌spiC基因克隆与生物信息学分析 被引量:1
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作者 安树敏 郭荣显 +3 位作者 薛颖 潘志明 耿士忠 焦新安 《动物医学进展》 北大核心 2016年第2期6-10,共5页
为了研究鸡白痢沙门菌SpiC蛋白的功能,以鸡白痢沙门菌S06004基因组DNA为模板PCR扩增spiC基因,进行克隆测序和生物信息学分析,并调查该基因在255株不同年代鸡白痢沙门菌分离株中的分布与进化情况。结果显示,鸡白痢沙门菌spiC基因全长384... 为了研究鸡白痢沙门菌SpiC蛋白的功能,以鸡白痢沙门菌S06004基因组DNA为模板PCR扩增spiC基因,进行克隆测序和生物信息学分析,并调查该基因在255株不同年代鸡白痢沙门菌分离株中的分布与进化情况。结果显示,鸡白痢沙门菌spiC基因全长384bp,编码127个氨基酸,在不同年代分离株中稳定存在。推导SpiC蛋白无跨膜区、信号肽和卷曲螺旋结构,有1处酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点,2处N-豆蔻酰化位点,预测线性抗原表位主要分布在15-20、29-35、52-53、70-72、83-85、89-94aa。利用SWISS MODEL在线程序建模,得到SpiC三维结构模型。同源性及进化分析显示spiC基因仅存在于沙门菌中且比较保守,鸡白痢沙门菌SpiC蛋白与沙门菌肠道亚种亲缘关系最近。 展开更多
关键词 鸡白痢沙门菌 SpiC蛋白 生物信息学分析
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布鲁氏菌主要外膜蛋白研究进展 被引量:4
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作者 辛雪强 佟彤 +3 位作者 王玉金 盛宇杰 徐正中 陈祥 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期872-879,共8页
布鲁氏菌病是一种世界范围流行的细菌性人兽共患传染病,由布鲁氏菌属细菌引起,给畜牧业生产和公共卫生安全带来了极大的威胁。外膜蛋白是布鲁氏菌主要的免疫和保护性抗原,与布鲁氏菌的毒力、免疫调节和胞内寄生等特性密切相关。本文对... 布鲁氏菌病是一种世界范围流行的细菌性人兽共患传染病,由布鲁氏菌属细菌引起,给畜牧业生产和公共卫生安全带来了极大的威胁。外膜蛋白是布鲁氏菌主要的免疫和保护性抗原,与布鲁氏菌的毒力、免疫调节和胞内寄生等特性密切相关。本文对布鲁氏菌主要外膜蛋白的研究进展予以综述,从而促进对布鲁氏菌抗原特性的理解,为布鲁氏菌新型诊断方法的建立和疫苗设计提供参考。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 外膜蛋白 抗原特性
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牛结核γ-干扰素夹心ELISA检测试剂盒的研制与评价 被引量:12
8
作者 李昕 徐正中 +7 位作者 单法 夏爱鸿 孟闯 沈也驰 陈义平 南文龙 陈祥 焦新安 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1060-1065,共6页
目的研制一种牛结核γ-干扰素夹心ELISA检测试剂盒,并在奶牛结核病检疫中进行初步应用和评价。方法建立牛结核γ-干扰素夹心ELISA检测方法,基于此法试制3批试剂盒,并对试剂盒的灵敏度、可重复性和保存期进行评价,其后进行初步应用,对96... 目的研制一种牛结核γ-干扰素夹心ELISA检测试剂盒,并在奶牛结核病检疫中进行初步应用和评价。方法建立牛结核γ-干扰素夹心ELISA检测方法,基于此法试制3批试剂盒,并对试剂盒的灵敏度、可重复性和保存期进行评价,其后进行初步应用,对961头奶牛采用单纯颈部皮试变态反应、商品化BOVIGAMTM试剂盒与试制的牛结核γ-干扰素夹心ELISA检测试剂盒进行同步检测。结果该试剂盒对质控样品的最低检出量达到8.21ng/mL,而且检测重复性良好,试剂盒保存期达12个月以上。在进行临床试验时,试制的试剂盒与单纯颈部皮试变态反应相比,阳性一致率为70.59%,阴性一致率为99.20%,总一致率为98.44%;与BOVIGAMTM试剂盒相比,阳性一致率为91.30%,阴性一致率为99.78%,总一致率为99.58%。其灵敏度为85.00%,特异性为100.00%。结论成功建立牛结核γ-干扰素夹心ELISA检测方法,并研制出相应试剂盒,具有良好应用前景。 展开更多
关键词 牛结核病 Γ-干扰素 夹心ELISA 试剂盒 敏感性 特异性
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牛肿瘤坏死因子α小鼠单克隆抗体的制备 被引量:6
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作者 谈悦 徐正中 +4 位作者 朱兆成 夏爱鸿 孙林 陈祥 焦新安 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期271-276,共6页
目的制备抗牛肿瘤坏死因子α(BoTNF-α)的单克隆抗体(mAb)。方法以原核系统表达的带有组蛋白(His)标签的重组牛TNF-α蛋白(rHis-BoTNF-α)为免疫原,带有谷胱甘肽硫转移酶(GST)标签的重组牛TNF-α蛋白(rGST-BoTNF-α)为检测原,采用杂交... 目的制备抗牛肿瘤坏死因子α(BoTNF-α)的单克隆抗体(mAb)。方法以原核系统表达的带有组蛋白(His)标签的重组牛TNF-α蛋白(rHis-BoTNF-α)为免疫原,带有谷胱甘肽硫转移酶(GST)标签的重组牛TNF-α蛋白(rGST-BoTNF-α)为检测原,采用杂交瘤细胞技术制备mAb。Western blot法检测mAb与rHis-BoTNF-α和rGST-BoTNF-α的反应性,间接ELISA检测mAb效价、特异性以及mAb与商品化重组BoTNF-α的反应性,流式细胞术分析mAb识别天然抗原的活性。结果成功筛选出7株稳定分泌抗rBoTNF-αmAb的杂交瘤细胞株。结果证明7株mAb均具有良好的反应性及特异性。流式细胞术分析显示mAb 4G4具有良好的识别天然抗原的活性。结论成功制备了抗BoTNF-α的mAb。 展开更多
关键词 牛肿瘤坏死因子α( BoTNF-α) 原核表达 单克隆抗体
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结核分枝杆菌基因敲除技术的研究进展 被引量:4
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作者 王海宁 金珊珊 +3 位作者 徐正中 王蕾 焦新安 陈祥 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期928-933,共6页
结核分枝杆菌是十分重要的人兽共患病原菌,基因缺失株的构建在该菌致病与免疫机制、基因功能解析和防控技术中意义重大,而该菌特有的复杂结构和生理生化特性也给缺失株的构建带来难度,为此有关结核分枝杆菌基因敲除技术的研究一直是重... 结核分枝杆菌是十分重要的人兽共患病原菌,基因缺失株的构建在该菌致病与免疫机制、基因功能解析和防控技术中意义重大,而该菌特有的复杂结构和生理生化特性也给缺失株的构建带来难度,为此有关结核分枝杆菌基因敲除技术的研究一直是重要课题。本文重点介绍了结核分枝杆菌基于特异性转导噬菌体、线性DNA片段、反选择标记、CRISPR技术以及ORBIT系统的基因敲除方法,同时对分枝杆菌的分子遗传操作发展进行了展望。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 基因敲除 特异性转导 线性DNA片段 反选择标记 CRISPR ORBIT
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沙门菌分型技术研究进展 被引量:13
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作者 李昱辰 程瞾 +3 位作者 蔡银强 焦扬 潘志明 焦新安 《中国动物检疫》 CAS 2014年第6期32-35,共4页
沙门菌在自然界广泛分布,是人和动物常见的病原菌,可引起人和动物伤寒、副伤寒、胃肠炎、败血症和局部感染等多种疾病。沙门菌分型方法分为以表型特征为依据的表型分型和以基因或基因组结构特征为依据的分子分型。本文不仅回顾了传统的... 沙门菌在自然界广泛分布,是人和动物常见的病原菌,可引起人和动物伤寒、副伤寒、胃肠炎、败血症和局部感染等多种疾病。沙门菌分型方法分为以表型特征为依据的表型分型和以基因或基因组结构特征为依据的分子分型。本文不仅回顾了传统的分型方法,还重点介绍了最近发展迅速的多种分子分型方法,可为沙门菌的分型研究提供参考。 展开更多
关键词 沙门菌 表型分型 分子分型
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沙门菌T3SS相关效应蛋白作用机制的研究进展 被引量:4
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作者 汤佩佩 蔺志杰 +1 位作者 潘志明 焦新安 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期277-280,288,共5页
沙门菌是人兽共患病原菌,能感染宿主并导致严重的并发症和死亡。沙门菌的致病性主要是由沙门菌SPI-1和SPI-2编码的T3SS的效应蛋白相互作用的结果。本文主要对T3SS相关效应蛋白在沙门菌感染的不同阶段发挥的功能进行综述,以期为进一步了... 沙门菌是人兽共患病原菌,能感染宿主并导致严重的并发症和死亡。沙门菌的致病性主要是由沙门菌SPI-1和SPI-2编码的T3SS的效应蛋白相互作用的结果。本文主要对T3SS相关效应蛋白在沙门菌感染的不同阶段发挥的功能进行综述,以期为进一步了解沙门菌致病机理提供参考。 展开更多
关键词 沙门菌 T3SS效应蛋白 功能
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结核分枝杆菌诱导宿主Ⅰ型干扰素应答及其免疫调控功能研究进展 被引量:2
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作者 姚志鸿 张志芳 +4 位作者 胡苏洁 刘慧 陈祥 徐正中 焦新安 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期94-97,共4页
阐述结核分枝杆菌感染过程中Ⅰ型干扰素的免疫功能,Ⅰ型干扰素既可以作为活动性结核的标识并加剧结核致病过程,同时也参与机体的抗结核免疫防御过程并降低结核分枝杆菌胞内存活。另外,在不同层面归纳结核分枝杆菌感染诱导宿主Ⅰ型干扰... 阐述结核分枝杆菌感染过程中Ⅰ型干扰素的免疫功能,Ⅰ型干扰素既可以作为活动性结核的标识并加剧结核致病过程,同时也参与机体的抗结核免疫防御过程并降低结核分枝杆菌胞内存活。另外,在不同层面归纳结核分枝杆菌感染诱导宿主Ⅰ型干扰素表达及信号通路活化的机制,并探讨结核分枝杆菌可以通过调控Ⅰ型干扰素应答水平以逃逸宿主免疫,从而促进其在宿主体内持续感染。旨在总结结核分枝杆菌诱导宿主Ⅰ型干扰素应答及其免疫调控功能的研究进展,进而为抗结核药物靶标筛选及疫苗研制提供新思路。 展开更多
关键词 结核病 结核分枝杆菌 Ⅰ型干扰素 免疫调控 免疫逃逸
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牛干扰素诱导蛋白-10单克隆抗体的制备及其流式检测方法的建立 被引量:2
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作者 徐正中 沈轩云 +3 位作者 朱兆成 夏爱鸿 陈祥 焦新安 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期959-964,共6页
为制备针对牛干扰素诱导蛋白-10(BoIP-10)的高亲和力单克隆抗体(MAb),并建立基于胞内染色技术的BoIP-10流式检测方法,本研究以纯化的原核表达融合蛋白rHis-BoIP-10为免疫原,使用纯化的rGST-BoIP-10为筛选抗原,利用淋巴细胞杂交瘤技术制... 为制备针对牛干扰素诱导蛋白-10(BoIP-10)的高亲和力单克隆抗体(MAb),并建立基于胞内染色技术的BoIP-10流式检测方法,本研究以纯化的原核表达融合蛋白rHis-BoIP-10为免疫原,使用纯化的rGST-BoIP-10为筛选抗原,利用淋巴细胞杂交瘤技术制备并筛选针对BoIP-10的MAb,结果显示,筛选获得8株稳定分泌BoIP-10 MAb的细胞株,分别为3E11、2A5、1C6、3B12、3E12、2D5、2H8和3A12;通过间接ELISA鉴定MAbs与真核BoIP-10的反应性,结果显示2A5、2D5、2H8等3株MAb与毕赤酵母表达的BoIP-10有较好的反应性;进一步采用阻断ELISA方法评价MAbs是否结合血浆中的天然BoIP-10,结果表明MAb 2D5可以识别血浆中的天然BoIP-10。将MAbs进行荧光标记后建立BoIP-10流式检测方法,结果显示建立的BoIP-10流式检测方法最佳刺激剂为ConA,最优刺激浓度为20μg/mL,最佳MAb株为2D5,MAb的最优使用浓度为4μg/mL。采用该BoIP-10流式方法检测BCG诱导牛外周血单核细胞Bo IP-10的表达水平,结果显示BCG体外感染牛外周血单核细胞12 h时表达较高水平的Bo IP-10。本研究制备并筛选出针对天然Bo IP-10的特异性MAb 2D5,基于此建立的流式检测方法为进一步研究Bo IP-10在牛机体免疫应答评价、牛结核病等传染性动物疫病诊断中的应用提供新的技术手段。 展开更多
关键词 牛干扰素诱导蛋白-10 单克隆抗体 流式检测方法
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新型冠状病毒S1蛋白的表达及活性鉴定 被引量:2
15
作者 汪巧菊 胡雨萌 +4 位作者 温亚亚 宋丽 孟闯 潘志明 焦新安 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期157-163,共7页
旨在获得具有免疫活性的SARS-CoV-2 S1蛋白,为COVID-19的免疫预防及临床诊断提供较好的候选抗原。该研究利用PCR技术扩增出刺突蛋白(Spike,S)的S1亚基序列,通过同源重组法将目的片段克隆至冷休克表达载体pCold I,转化至大肠杆菌BL21感... 旨在获得具有免疫活性的SARS-CoV-2 S1蛋白,为COVID-19的免疫预防及临床诊断提供较好的候选抗原。该研究利用PCR技术扩增出刺突蛋白(Spike,S)的S1亚基序列,通过同源重组法将目的片段克隆至冷休克表达载体pCold I,转化至大肠杆菌BL21感受态细胞内诱导表达S1蛋白,经Ni^(2+)柱亲和层析纯化后,通过SDS-PAGE和Western blotting鉴定目的蛋白的表达情况。结果表明,已成功表达含His标签的S1蛋白,并且已获得浓度和纯度较高、能与S1多克隆抗体反应的目的蛋白。此外,蛋白刺激细胞的结果表明,原核表达的S1蛋白免疫原性良好,能诱导小鼠巨噬细胞上调表达多种细胞因子和趋化因子,促进RAW264.7细胞产生免疫反应。综上,该研究成功构建了pCold I-S1重组质粒,获得了SARS-CoV-2的良好候选抗原S1蛋白。 展开更多
关键词 SARS-CoV-2 S1蛋白 原核表达 生物活性鉴定
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结核分枝杆菌亚单位疫苗研究进展 被引量:2
16
作者 殷立晗 李昕 +2 位作者 徐正中 焦新安 陈祥 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期492-499,共8页
结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,M.tb)是一种重要的人兽共患病原菌,能引起肺结核等严重的传染性疾病。疫苗是防控结核分枝杆菌感染的手段之一,目前获得许可的结核病疫苗仅为卡介苗,相比其他种类疫苗,结核亚单位疫苗具有更佳... 结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,M.tb)是一种重要的人兽共患病原菌,能引起肺结核等严重的传染性疾病。疫苗是防控结核分枝杆菌感染的手段之一,目前获得许可的结核病疫苗仅为卡介苗,相比其他种类疫苗,结核亚单位疫苗具有更佳的安全性,配合佐剂使用可进一步提高保护效力、延长持续时间。亚单位疫苗由一种或多种不含核酸但具有免疫活性的抗原组成,并且作为预防性疫苗已存在多种。制备亚单位疫苗的主要方式是分离纯化与保护性免疫应答相关的特异性抗原,以此适当激活树突状细胞(DC)来启动和/或调节T淋巴细胞。本文通过对已有结核亚单位疫苗进行汇总分析,着重阐述了用于亚单位疫苗的抗原、佐剂及目前的临床试验进展,为后续开展结核相关疫苗研究提供有价值的参考。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 亚单位疫苗 佐剂
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伦敦沙门菌的流行与耐药性分析 被引量:1
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作者 付莎莎 孙先谱 +3 位作者 孙凡 徐正中 焦新安 陈祥 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期795-800,共6页
目的分离鉴定2016-2018年不同宿主来源的伦敦沙门菌,并对其进行药物敏感性分析。方法通过生化实验和肠毒素基因stn检测进行种属鉴定;参照考夫曼怀特表对沙门菌进行血清型分型;采用琼脂稀释法测定伦敦沙门菌对18种抗菌药物的敏感性。结... 目的分离鉴定2016-2018年不同宿主来源的伦敦沙门菌,并对其进行药物敏感性分析。方法通过生化实验和肠毒素基因stn检测进行种属鉴定;参照考夫曼怀特表对沙门菌进行血清型分型;采用琼脂稀释法测定伦敦沙门菌对18种抗菌药物的敏感性。结果成功分离鉴定出135株伦敦沙门菌,分离自猪、人、犬和鸡来源的样品;100%伦敦沙门菌至少对一种抗菌药物表现耐药;伦敦沙门菌对四环素(95.6%)、链霉素(93.3%)和氨苄西林(87.4%)的耐药率较高,对氨曲南(8.9%)和头孢噻肟(11.1%)耐药率较低,对阿米卡星、多粘菌素、呋喃妥因和美罗培南敏感;多重耐药率达到95.6%,常见的多重耐药表型为AMP-CHL-FFC-FOS-GEN-OLA-STR-SXT-TET。结论伦敦沙门菌主要分离自猪全产业链各环节样品和体检人员样品,其耐药性和多重耐药性严重。 展开更多
关键词 伦敦沙门菌 流行 多重耐药性
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利用SCOTS技术筛选鸡白痢沙门菌感染巨噬细胞的转录序列 被引量:1
18
作者 李求春 方丽君 +5 位作者 陈静 谢晓蕾 陶明新 王晓春 吴颖斐 焦新安 《中国家禽》 北大核心 2014年第21期17-22,共6页
沙门菌在巨噬细胞内的存活是其在宿主内长期定植的主要因素之一,研究利用选择性捕获转录技术(SCOTS)筛选鸡白痢沙门菌S06004株在感染鸡巨噬细胞系HD-11过程中细菌表达的基因。结果显示:鸡白痢沙门菌以MOI值为100∶1感染HD-11细胞1 h后,... 沙门菌在巨噬细胞内的存活是其在宿主内长期定植的主要因素之一,研究利用选择性捕获转录技术(SCOTS)筛选鸡白痢沙门菌S06004株在感染鸡巨噬细胞系HD-11过程中细菌表达的基因。结果显示:鸡白痢沙门菌以MOI值为100∶1感染HD-11细胞1 h后,感染率达11.75%;选取感染1 h时间点作为研究对象,利用SCOTS技术获得了12个鸡白痢沙门菌的转录序列,包括与沙门菌感染相关的毒力基因调控因子inv F;构建了inv F、teh B和tol C基因插入突变株。突变株侵入HD-11的能力明显低于野生株,反映了SCOTS筛选获得的基因在鸡白痢沙门菌感染巨噬细胞时发挥重要的作用,为深入揭示鸡白痢沙门菌的感染机制提供了基础。 展开更多
关键词 鸡白痢沙门菌 巨噬细胞 选择性捕获转录序列(SCOTS)
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都柏林沙门菌及其疫苗研究进展 被引量:1
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作者 王蕾 王海宁 +3 位作者 李昕 徐正中 焦新安 陈祥 《中国奶牛》 2021年第5期19-23,共5页
都柏林沙门菌(Salmonella enterica serotype Dublin,S.Dublin)是一种重要的人兽共患病原菌,具有较高的侵袭性和致病性,通常能引起牛的沙门菌感染并造成严重的疾病。疫苗接种是预防牛都柏林沙门菌感染的重要手段,当前使用的都柏林沙门... 都柏林沙门菌(Salmonella enterica serotype Dublin,S.Dublin)是一种重要的人兽共患病原菌,具有较高的侵袭性和致病性,通常能引起牛的沙门菌感染并造成严重的疾病。疫苗接种是预防牛都柏林沙门菌感染的重要手段,当前使用的都柏林沙门菌疫苗主要为减毒活疫苗,它能减少都柏林沙门菌在牛体内的定殖,在免疫后可诱导高效的特异性免疫应答。本文主要介绍了都柏林沙门菌的生物学特性和疫苗的种类,包括灭活疫苗、减毒活疫苗及基因工程减毒疫苗,以期为开展相关疫苗研究提供有价值的参考。 展开更多
关键词 都柏林沙门菌 减毒 灭活 疫苗
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SG97A平衡致死系统的构建及其初步应用
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作者 耿士忠 陈晓娟 +1 位作者 潘志明 焦新安 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期2243-2250,共8页
敲除鸡伤寒沙门菌(SG)减毒疫苗株97Aasd基因,构建宿主载体平衡致死系统并表达新城疫病毒(NDV)F蛋白,构建二价活菌苗。PCR扩增两段位于asd基因外侧的序列作为等位基因,以氯霉素抗性(CmR)基因替代asd基因,构建自杀质粒pGMB151Δasd::CmR,... 敲除鸡伤寒沙门菌(SG)减毒疫苗株97Aasd基因,构建宿主载体平衡致死系统并表达新城疫病毒(NDV)F蛋白,构建二价活菌苗。PCR扩增两段位于asd基因外侧的序列作为等位基因,以氯霉素抗性(CmR)基因替代asd基因,构建自杀质粒pGMB151Δasd::CmR,通过E.coliχ7213与SG97A固相杂交,将质粒转入SG97A,反向筛选获得SG97AΔasd::CmR,利用质粒pCP20去除CmR后,DAP的依赖菌株命名为SG97AΔasd。将含asd基因的质粒pYA3334转入SG97AΔasd中构建宿主载体平衡致死系统,并表达NDV-F蛋白。结果表明,通过等位基因重组方法,成功构建SG97AΔasd及宿主载体平衡致死系统,重组菌能够表达NDV-F蛋白,并能在鸡体内诱导产生特异性抗体。本研究成功构建SG97AΔasd宿主载体平衡致死系统,并表达NDV-F蛋白及其诱导宿主产生抗体,为应用该系统构建二价活菌苗的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 鸡伤寒沙门菌 asd基因 宿主载体平衡致死系统 NDV-F蛋白
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