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家蚕MYST组蛋白乙酰转移酶基因Bm-mof的克隆表达和转录活性检测 被引量:1
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作者 孔卫青 杨金宏 朱勇 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期215-221,共7页
MYST组蛋白乙酰转移酶(histone acetyltransferase,HAT)广泛存在于从酵母到人的真核生物中,在真核生物的转录调控中起着重要的作用。利用NCBI已登录的其他物种该基因的氨基酸序列与家蚕的基因组框架图和表达序列标签(expres sedsequence... MYST组蛋白乙酰转移酶(histone acetyltransferase,HAT)广泛存在于从酵母到人的真核生物中,在真核生物的转录调控中起着重要的作用。利用NCBI已登录的其他物种该基因的氨基酸序列与家蚕的基因组框架图和表达序列标签(expres sedsequence tags,EST)数据库进行电子克隆,获得了家蚕中的同源基因。该基因长1575bp(GenBank登录号为DQ442997),开放阅读框(ORF)长1326bp,无内含子。基因编码442个氨基酸,预测蛋白质的分子量为51.4kD。序列中有HAT核心结构域、锌指结构域和染色质域3个保守的结构域,与其他物种同源基因具有较高的序列相似性。RT-PCR结果表明该基因在本实验所检测的家蚕各时期和组织中均有表达。将该基因用亚克隆的方法导入到pET50b载体中并成功地进行了原核表达,表达出了带有6个组氨酸和1个Nus.Tag标签的重组蛋白。 展开更多
关键词 家蚕 myst组蛋白乙酰转移酶 克隆 序列分析 表达谱
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慢性应激-糖皮质激素-组蛋白脱乙酰酶功能轴在慢性应激术后认知障碍中的作用
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作者 郑智滢 宫祥丹 +2 位作者 夏天娇 陈超超 顾小萍 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第2期268-276,共9页
目的:探讨小鼠慢性应激状态在术后认知功能障碍的作用,以及组蛋白脱乙酰酶2(histone deacetylase 2,HDAC2)在其中的机制联系。方法:建立重复社交失败应激模型以及长时程异氟醚麻醉模型小鼠,动物实验分为对照(Ctrl)组、异氟醚麻醉(Iso)... 目的:探讨小鼠慢性应激状态在术后认知功能障碍的作用,以及组蛋白脱乙酰酶2(histone deacetylase 2,HDAC2)在其中的机制联系。方法:建立重复社交失败应激模型以及长时程异氟醚麻醉模型小鼠,动物实验分为对照(Ctrl)组、异氟醚麻醉(Iso)组、慢性社交失败应激(RSDS)组和慢性社交失败应激联合异氟醚麻醉(RSDS+Iso)组;通过社交逃避实验和新环境抑制进食实验测试焦虑情绪行为改变;通过新物体识别实验和Morris水迷宫实验测试小鼠认知功能水平改变;利用ELISA实验检测小鼠血浆皮质酮水平;从胎鼠海马提取原代海马神经元,将神经元细胞分组为对照(Ctrl)组,慢性应激复合长时程异氟醚麻醉(Cort+Iso)组,单纯CAY-10683干预(CAY)组和CAY-10683治疗(CAY+Cort+Iso)组;采用CCK-8方法检测细胞活力变化;采用Western blot方法检测脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)和HDAC2蛋白的表达变化。结果:(1)RSDS模型小鼠成功建立,且ELISA实验结果提示慢性应激复合长时程异氟醚麻醉的小鼠血浆皮质酮水平明显升高。(2)认知行为学实验和Western blot结果显示慢性应激状态的小鼠在接受长时程异氟醚麻醉后其认知水平和海马组织BDNF蛋白表达水平明显下降。(3)Western blot结果显示慢性应激显著提高了长时程异氟醚麻醉的小鼠海马组织HADC2蛋白表达水平,利用HDAC2抑制剂可降低慢性应激复合长时程异氟醚麻醉的原代海马神经元HDAC2蛋白表达量,同时增加BDNF的蛋白表达水平。结论:(1)慢性应激可显著加重长时程异氟醚麻醉介导的术后认知功能障碍,同时伴有海马HDAC2蛋白表达水平的增加。(2)抑制HDAC2可有效改善慢性应激复合长时程异氟醚麻醉所导致的认知相关蛋白BDNF的蛋白表达下降。 展开更多
关键词 术后认知功能障碍 慢性应激 组蛋白 组蛋白2
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组蛋白脱乙酰酶抑制剂在特发性肺纤维化治疗中的作用机制
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作者 周佳 李龙 廖晶 《协和医学杂志》 北大核心 2025年第4期989-994,共6页
特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)是一种慢性、进行性、纤维化性间质性肺疾病。近年来,随着对IPF病理机制的深入研究,越来越多的药物治疗靶点被发现。研究表明,表观遗传修饰失调可诱导慢性阻塞性肺疾病、哮喘、IPF等... 特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)是一种慢性、进行性、纤维化性间质性肺疾病。近年来,随着对IPF病理机制的深入研究,越来越多的药物治疗靶点被发现。研究表明,表观遗传修饰失调可诱导慢性阻塞性肺疾病、哮喘、IPF等多种肺部疾病。组蛋白脱乙酰酶(histone deacetylase,HDAC)不仅在表观遗传修饰过程中发挥重要作用,也是IPF发病的关键介质。HDAC在肌成纤维细胞及肺泡上皮细胞中呈高表达,可调控肺部促炎症状态、促纤维化及促细胞凋亡相关基因的可遗传表达,在IPF发病过程中发挥重要作用。本文从上皮-间质转化、慢性肺部炎症反应、细胞凋亡、巨噬细胞极化等方面阐述HDAC抑制剂在IPF中的作用机制,旨在评估HDAC抑制剂作为IPF靶向治疗药物的可能性,并为相关研究提供参考和借鉴。 展开更多
关键词 特发性肺纤维化 组蛋白 上皮-间质转化 炎症反应 细胞凋亡
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定点整合β1,4半乳糖基转移酶、α-2,6-唾液酸转移酶1和N-乙酰氨基糖基转移酶Ⅲ的CHO工程细胞株构建
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作者 李仙红 贾润清 +4 位作者 王友亮 漫未玲 朱天昊 阎新龙 林艳丽 《中国生物化学与分子生物学报》 北大核心 2025年第4期576-585,共10页
对哺乳动物细胞CHO进行糖基化改造,用于生产蛋白质类药物。首先测定CHO细胞Rosa26位点的基因组序列,设计gRNA序列,利用规律成簇的间隔短回文重复(CRISPR/Cas9)技术,将着陆架整合到CHO细胞的Rosa26位点处。通过重叠PCR及无缝连接技术构建... 对哺乳动物细胞CHO进行糖基化改造,用于生产蛋白质类药物。首先测定CHO细胞Rosa26位点的基因组序列,设计gRNA序列,利用规律成簇的间隔短回文重复(CRISPR/Cas9)技术,将着陆架整合到CHO细胞的Rosa26位点处。通过重叠PCR及无缝连接技术构建3个糖基转移酶共同表达的打靶载体,分别是β1,4半乳糖基转移酶(B4GALT1)、α-2,6-唾液酸转移酶1(ST6GAL1)和N-乙酰氨基糖基转移酶Ⅲ(GnTⅢ),并利用重组酶介导的盒式交换技术(recombinase-mediated cassette exchange,RMCE)将3个糖基转基因酶基因定点整合到CHO Rosa26位点中。PCR证实了3个糖基转移酶成功定点整合Rosa26位点,qRT-PCR证实3个糖基转移酶的mRNA表达水平均在50000倍以上,蛋白质免疫印迹法证实3个糖基转移酶的蛋白质表达水平均在4倍以上(P<0.001)。成功构建了Rosa26位点定点整合3个糖基转移酶的CHO工程细胞株。 展开更多
关键词 β-1 4半乳糖基转移 α-2 6-唾液酸转移1 N-氨基糖基转移 规律成簇的间隔短回文重复技术 重组介导的盒式交换技术 中国仓鼠卵巢细胞
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抑制乙酰转移酶p300对大鼠体外循环肺损伤及自噬的影响
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作者 张仁鸿 陈卓 +3 位作者 吴汉华 罗俊丽 窦雪娇 张红 《医学研究与战创伤救治》 北大核心 2025年第1期9-15,共7页
目的探讨抑制乙酰转移酶p300对大鼠体外循环肺损伤及自噬的影响。方法18只雄性健康SD大鼠随机分为3组:假手术组(Sham组)、体外循环左肺损伤组(I/R组),体外循环左肺损伤+p300抑制剂组(C646组)。各6只。Sham组做穿刺及开胸处理,不建立CPB;... 目的探讨抑制乙酰转移酶p300对大鼠体外循环肺损伤及自噬的影响。方法18只雄性健康SD大鼠随机分为3组:假手术组(Sham组)、体外循环左肺损伤组(I/R组),体外循环左肺损伤+p300抑制剂组(C646组)。各6只。Sham组做穿刺及开胸处理,不建立CPB;I/R组及C646组建立CPB左肺损伤模型,并在CPB前10 min经尾静脉分别注射等量等渗盐水及p300选择性抑制剂C646;实验在3个时间点行血气分析,包括体外循环前(T1)、开放肺门10 min后(T2)以及实验结束时(T3),同时计算得出氧合指数(OI)和呼吸指数(RI)的值;T3时取左肺支气管肺泡灌洗液(BALF)及左侧肺组织,ELISA检测左肺BALF中TNF-α和总蛋白含量,透视电镜下观察左肺组织自噬小体和自噬溶酶体,Western blot检测肺组织p300及自噬相关蛋白Beclin1、p62表达。结果与Sham组比较,T2、T3时刻I/R组和C646组OI明显降低,RI明显升高(P<0.05)、TNF-α和总蛋白含量明显增加,I/R组p300和Beclin1、P62表达增加(P<0.05),C646组p300、Beclin1表达减少,p62表达增加(P<0.05),病理损伤评分明显升高(P<0.05),Ⅱ型肺泡上皮细胞胞浆内自噬明显;与I/R组比较,T3时刻C646组OI明显升高,RI明显降低(P<0.05),TNF-α和总蛋白含量明显降低,p300和自噬相关蛋白Beclin1、P62表达减少(P<0.05),病理损伤评分明显降低,Ⅱ型肺泡上皮细胞细胞质内自噬减少(P<0.05)。结论抑制乙酰转移酶p300后大鼠CPB后肺组织自噬蛋白Beclin1、P62表达明显减少;乙酰转移酶p300抑制剂C646可减轻肺部炎症反应,改善肺功能,可能与其抑制过度自噬有关。 展开更多
关键词 体外循环 肺损伤 转移p300 自噬
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番茄组蛋白乙酰转移酶(HAT)的全基因组鉴定与分析 被引量:4
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作者 史建磊 熊自立 +2 位作者 李涛 张海利 宰文珊 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2020年第3期666-674,共9页
组蛋白乙酰化修饰在基因表达调控方面扮演着重要角色。为深入挖掘番茄组蛋白乙酰转移酶(HAT)基因,本研究运用生物信息学方法,共鉴定出26个番茄HAT。聚类分析发现,这些HAT可以分为7组,分别为HAG、HAG1、HAG2、MCC1、HAM、HAF和HAC。其中,... 组蛋白乙酰化修饰在基因表达调控方面扮演着重要角色。为深入挖掘番茄组蛋白乙酰转移酶(HAT)基因,本研究运用生物信息学方法,共鉴定出26个番茄HAT。聚类分析发现,这些HAT可以分为7组,分别为HAG、HAG1、HAG2、MCC1、HAM、HAF和HAC。其中,GNAT家族(GCN5、HAT1、MCC1)18个、p300/CBP家族4个、MYST和TAFII250家族各1个。6对同源基因Ka/Ks值均小于1,说明其进化中经历了纯化选择。不同家族HAT理化性质存在差异,但均为亲水蛋白质,主要定位于细胞核,蛋白质二级结构主要包括α螺旋和无规则卷曲,具有典型的保守基序和特征结构域。染色体定位发现,番茄HAT基因不均匀地散布于12条染色体上,且呈两端分布,其中1号和9号染色体最多,部分基因经串联重复形成基因簇。基因表达分析发现,GNAT家族番茄特有的HAT和HAG2组基因在病菌、盐和热胁迫下具有较高的表达水平,一些基因具有病菌诱导特异性和耐盐(热)与盐(热)敏材料上表达差异性。可见,番茄HAT在结构、性质和功能上具有多样性,其在全基因组水平上的鉴定与分析为相关基因克隆利用提供了依据。 展开更多
关键词 番茄 组蛋白转移 生物信息学
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菜心组蛋白乙酰转移酶基因BrcuHAC1克隆与表达分析 被引量:7
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作者 肖旭峰 张袆 杨寅桂 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期2323-2331,共9页
为揭示组蛋白乙酰化修饰在十字花科作物抽薹发育表观遗传调控中的功能,以油青49和油青甜菜心80天的菜心为材料,通过PCR和RACE方法克隆了菜心BrcuHAC1基因c DNA和g DNA全长序列,并进行生物信息学分析,同时采用实时荧光定量PCR方法检测目... 为揭示组蛋白乙酰化修饰在十字花科作物抽薹发育表观遗传调控中的功能,以油青49和油青甜菜心80天的菜心为材料,通过PCR和RACE方法克隆了菜心BrcuHAC1基因c DNA和g DNA全长序列,并进行生物信息学分析,同时采用实时荧光定量PCR方法检测目的基因的时空表达特性。结果表明,克隆获得了BrcuHAC1基因全长6 061 bp,包括CDS区5 067 bp,编码1 688个氨基酸。对应的g DNA全长为7 376 bp,含有15个外显子和14个内含子,最长的外显子长度为1 599 bp,内含子的长度范围为50~210 bp。启动子序列中含有多个基本转录元件和顺式作用元件,如光反应元件、脱落酸响应元件、参与厌氧诱导的增强子元件等。多序列比对结果表明,BrcuHAC1的氨基酸序列中含有高等植物HAC1基因的6个保守结构域。系统发育分析结果显示,菜心与油菜、甘蓝、白菜处于同一分支,其亲缘关系最近。时空特异性分析结果表明,BrcuHAC1在菜心的根、茎、花、叶中均有表达,其中在花中表达量最高,叶次之,根最低;BrcuHAC1从苗期至完全抽薹开花期的表达量呈现上升趋势,说明BrcuHAC1在菜薹花发育过程中可能起到一定的调控作用。本研究结果为揭示组蛋白乙酰转移酶调控菜心抽薹分子机制提供了一定的理论依据。 展开更多
关键词 菜心 组蛋白转移 克隆 基因结构 表达特性
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2周跑台训练对大鼠空间学习和记忆能力及海马组蛋白乙酰转移酶和组蛋白去乙酰化酶活性的影响
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作者 单小忠 李爱春 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期320-324,共5页
目的:探讨跑台训练对大鼠空间学习和记忆能力及海马组蛋白乙酰转移酶(HAT)和组蛋白去乙酰化酶(HDAC)活性的影响。方法:3周龄清结级SD雄性大鼠48只,随机分为安静组(n=24)和训练组(n=24),训练组大鼠进行2周每天30 min的跑台训练,速度和时... 目的:探讨跑台训练对大鼠空间学习和记忆能力及海马组蛋白乙酰转移酶(HAT)和组蛋白去乙酰化酶(HDAC)活性的影响。方法:3周龄清结级SD雄性大鼠48只,随机分为安静组(n=24)和训练组(n=24),训练组大鼠进行2周每天30 min的跑台训练,速度和时间依次为8 m/min×3min,10 m/min×3 min,15 m/min×18 min,10 m/min×3 min,8 m/min×3 min。安静组大鼠每天在同一时间段放于跑台上30min,不开动跑台。训练最后三天,采用Morris水迷宫检测所有大鼠学习和记忆行为,指标为大鼠找到放置D象限的平台的潜伏期,120秒内在各象限的游泳时间百分比及穿越原平台相应位置的次数。分别于最后一次训练结束后即刻、1 h和6 h检测大鼠海马组蛋白乙酰转移酶和组蛋白去乙酰化酶活性。结果:与安静组相比,训练组大鼠潜伏期显著缩短,在D象限的游泳时间百分比显著增加,在120秒穿越原平台位置的次数显著增加。训练组大鼠运动即刻和1 h海马HAT活性较安静组显著升高、HDAC活性较安静组显著降低,二者在训练后6 h均恢复到基础水平。结论:2周跑台训练显著提高大鼠的空间学习和记忆能力;急性运动可导致大鼠海马组织短时HAT活性升高和HDAC活性降低,2周跑台训练未引起大鼠安静时海马组织HAT和HDAC活性显著变化。 展开更多
关键词 跑台训练 学习记忆 海马 组蛋白转移 组蛋白
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组蛋白乙酰转移酶HAT1信号通路促进HBV cccDNA微小染色体组装和表观遗传修饰
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作者 张晓东 杨光 Yang G 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2019年第11期2465-2465,共1页
【据《Theranostics》2019年9月报道】题:组蛋白乙酰转移酶HAT1信号通路促进HBV cccDNA微小染色体组装和表观遗传修饰(作者Yang G等)长期从事乙型肝炎、肝癌研究的南开大学生命科学学院张晓东教授团队在HBV转录、复制调控机制研究方面... 【据《Theranostics》2019年9月报道】题:组蛋白乙酰转移酶HAT1信号通路促进HBV cccDNA微小染色体组装和表观遗传修饰(作者Yang G等)长期从事乙型肝炎、肝癌研究的南开大学生命科学学院张晓东教授团队在HBV转录、复制调控机制研究方面有了新突破。日前,他们在生物医学领域学术期刊《Theranostics》上发文,首次报道了“组蛋白乙酰转移酶HAT1信号通路促进HBV cccDNA微小染色体组装和表观遗传修饰”的新机制,为临床清除HBV共价环状闭合DNA(cccDNA)和治疗乙型肝炎提供了新的潜在靶点。 展开更多
关键词 肝癌研究 CCCDNA 型肝炎 微小染色体 表观遗传修饰 组蛋白转移 学术期刊 张晓东
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胰淀素作用于背外侧被盖核胆碱乙酰转移酶神经元调节小鼠体重
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作者 曹晓娟 刘昊东 +10 位作者 李鹏辉 李嘉成 樊奇 王星 李彩琴 杨子程 郭永清 陈玉洁 张小宇 海日汗 杜晨光 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期3185-3192,共8页
胰淀素(amylin)作用于背外侧被盖核(lateral dorsal tegmental nucleus,LDT),诱导减肥和抑食效应,并激活背肩胛棕色脂肪组织(interscapular brown adipose tissue,IBAT)产热。多种食欲激素受体与胆碱乙酰转移酶(choline acetyltransfera... 胰淀素(amylin)作用于背外侧被盖核(lateral dorsal tegmental nucleus,LDT),诱导减肥和抑食效应,并激活背肩胛棕色脂肪组织(interscapular brown adipose tissue,IBAT)产热。多种食欲激素受体与胆碱乙酰转移酶(choline acetyltransferase,ChAT)神经元共同定位于LDT中,以调节饱腹感和能量消耗。然而,LDT的ChAT神经元是否参与胰淀素介导的体重调节作用尚待探索。作者拟通过免疫荧光检测小鼠LDT中原癌基因蛋白(c-Fos)和ChAT神经元的表达,逆行示踪技术确认LDT的下游神经核团,神经元损伤试验分析胰淀素作用的神经机制。结果显示:腹腔注射胰淀素显著降低小鼠体重,并显著促进LDT和臂旁核(PBN)中c-Fos和ChAT神经元表达。ChAT和神经型一氧化氮合成酶(nNOS)神经元在LDT、PBN和迷走神经背侧核(DMV)中共表达。逆行示踪试验证明LDT向PBN神经元发送神经投射。此外,损伤LDT和PBN神经元可降低胰淀素的减肥效果。LDT是连接PBN的能量平衡调节中枢,ChAT神经元参与介导胰淀素的体重调节过程。 展开更多
关键词 肥胖 胆碱转移 胰淀素 下丘脑 背外侧被盖核
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玉米组蛋白乙酰转移酶的鉴定与表达规律分析 被引量:5
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作者 马宇馨 杜璇玥 +5 位作者 李肖慧 任莹 张林旺 邢继红 张康 董金皋 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期20-26,共7页
组蛋白乙酰转移酶(Histone acetyltransferases,HATs)催化组蛋白乙酰化,通过调节组蛋白乙酰化状态影响染色质的结构,进而影响基因的转录,在植物的生长、发育和胁迫反应过程中发挥重要的调控作用。目前有关玉米HATs家族基因的系统研究尚... 组蛋白乙酰转移酶(Histone acetyltransferases,HATs)催化组蛋白乙酰化,通过调节组蛋白乙酰化状态影响染色质的结构,进而影响基因的转录,在植物的生长、发育和胁迫反应过程中发挥重要的调控作用。目前有关玉米HATs家族基因的系统研究尚未见报道。本研究利用生物信息学方法,对玉米HATs家族基因进行系统进化分析、保守结构域分析、组织表达特性分析以及生物和非生物胁迫下的表达规律分析。结果发现,玉米HATs家族基因可以分为GANT、MYST和CBP 3个亚家族,均包含多个保守的结构域,在不同组织和生物/非生物胁迫过程中表达水平呈现明显的不同。利用Real-time PCR技术,检测HATs家族基因在激素处理玉米后的表达水平,发现该家族成员在茉莉酸和水杨酸处理后表现出不同的表达规律。这些结果表明玉米HATs家族基因在玉米生长发育以及响应生物和非生物胁迫过程发挥重要的作用,为阐明玉米HATs家族基因的功能及其调控机制奠定了基础。 展开更多
关键词 玉米 HATs家族基因 组蛋白 组蛋白转移
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重组p300组蛋白乙酰转移酶结构域的表达及应用 被引量:2
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作者 常锐 谈娟 +3 位作者 王荣敏 陈启民 耿运琪 乔文涛 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期452-458,共7页
组蛋白乙酰化修饰是基因起始转录的关键步骤.p300等组蛋白乙酰转移酶(HATs)催化组蛋白和非组蛋白的乙酰化.HATs具有多种细胞功能,而且乙酰化对底物蛋白的功能改变也具有重要功能.组蛋白乙酰转移酶p300可乙酰化多种细胞内蛋白,某些病毒... 组蛋白乙酰化修饰是基因起始转录的关键步骤.p300等组蛋白乙酰转移酶(HATs)催化组蛋白和非组蛋白的乙酰化.HATs具有多种细胞功能,而且乙酰化对底物蛋白的功能改变也具有重要功能.组蛋白乙酰转移酶p300可乙酰化多种细胞内蛋白,某些病毒蛋白与p300有相互作用并促进病毒复制.因此,p300是细胞内具有广泛功能的转录激活因子.组蛋白乙酰转移酶结构域(HAT区)是p300乙酰化酶活性的最小中心功能域,在p300乙酰化底物中具有重要功能.本文重组表达了对应p300 HAT区的GST-p300 HAT蛋白,对其乙酰化酶的活性进行检测.结果证实,p300 HAT蛋白在体外可高效乙酰化组蛋白H3.随后,对体外乙酰化反应的条件进行优化.总之,本文构建了一种简单高效、非放射性体外乙酰化体系,适用于对潜在底物蛋白的乙酰化水平和机制进行分析,以及乙酰化蛋白的相关功能的研究. 展开更多
关键词 组蛋白转移(HATs) P300 体外
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一种简便可靠的组蛋白乙酰转移酶(HAT)抑制剂荧光检测方法 被引量:2
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作者 赵晋燕 闫征 +1 位作者 刘子良 王楠 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1084-1089,共6页
组蛋白乙酰转移酶(HAT)参与真核细胞基因转录的调节,其抑制剂由于具有调节转录并产生抗病毒、抗炎、抗氧化等作用,有希望成为一类新药.非放射性分光光度HAT测定方法虽然可替代广泛使用的放射性检测方法,但缺乏灵敏度和准确性.建立了一... 组蛋白乙酰转移酶(HAT)参与真核细胞基因转录的调节,其抑制剂由于具有调节转录并产生抗病毒、抗炎、抗氧化等作用,有希望成为一类新药.非放射性分光光度HAT测定方法虽然可替代广泛使用的放射性检测方法,但缺乏灵敏度和准确性.建立了一种简单的非放射性荧光检测方法,即测量辅酶A(CoASH)与邻苯二甲醛(OPA)和巯基乙醇反应的荧光产物.此法与分光光度法相比具有更高的准确性,可进行多种化合物HAT抑制活性的筛选.这种新方法有望成为研究转录调节和新药开发方面的一种有效工具. 展开更多
关键词 组蛋白转移(HATs) A(CoASH) 邻苯二甲醛(OPA)
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组蛋白乙酰转移酶GCN5参与调控代谢性疾病的分子机制 被引量:2
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作者 陈慧 张又枝 欧阳昌汉 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期640-645,共6页
GCN5是首个在酵母中被克隆和鉴定的组蛋白乙酰转移酶,属于GCN5相关N-乙酰基转移酶超家族成员,具有赖氨酸乙酰转移酶的活性。GCN5主要分布在细胞核内,由可识别组蛋白乙酰基团的溴结构域和具有催化活性的组蛋白乙酰转移酶结构域及N末端结... GCN5是首个在酵母中被克隆和鉴定的组蛋白乙酰转移酶,属于GCN5相关N-乙酰基转移酶超家族成员,具有赖氨酸乙酰转移酶的活性。GCN5主要分布在细胞核内,由可识别组蛋白乙酰基团的溴结构域和具有催化活性的组蛋白乙酰转移酶结构域及N末端结构域组成,其引起的赖氨酸残基的乙酰化修饰能增强组蛋白与DNA的结合力,进而影响基因的转录,参与调控细胞增殖、分化、细胞周期以及DNA损伤/修复等诸多生物进程。近年的研究发现,GCN5可通过对组蛋白及非组蛋白的乙酰化修饰,参与调控肝糖原合成、脂肪生成和成骨细胞分化等。本文重点就GCN5的分子结构、酶活性及其在糖尿病、肥胖、骨质疏松等不同代谢相关疾病中的作用及其分子机制进行综述,对GCN5调控细胞代谢及活性氧生成的机制进行总结,对靶向GCN5的代谢性疾病的治疗前景进行展望。 展开更多
关键词 组蛋白转移 GCN5 代谢 糖尿病 骨质疏松
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橡胶树胶孢炭疽菌组蛋白乙酰转移酶CgGCN5调控致病力功能研究
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作者 刘世科 安邦 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2021年第9期2653-2658,共6页
胶孢炭疽菌引起的炭疽病害是造成海南省橡胶减产的主要原因之一。研究该病原菌致病力的分子机制能够为新型防控策略的研发提供理论依据。在橡胶树胶孢炭疽菌中,存在1个编码组蛋白乙酰转移酶的基因CgGCN5。在本研究中,通过同源重组原理... 胶孢炭疽菌引起的炭疽病害是造成海南省橡胶减产的主要原因之一。研究该病原菌致病力的分子机制能够为新型防控策略的研发提供理论依据。在橡胶树胶孢炭疽菌中,存在1个编码组蛋白乙酰转移酶的基因CgGCN5。在本研究中,通过同源重组原理及原生质体转化法构建了橡胶树胶孢炭疽菌CgGCN5的敲除突变株和互补菌株,并对其生长、产孢及致病力等表型进行了初步分析。结果表明,与野生型菌株相比,CgGCN5敲除突变株的生长速率、产孢能力均显著下降;并且突变株对橡胶树叶片的致病力也显著下降;进一步分析表明,突变株丧失了对玻璃纸的穿透力。与此同时,互补菌株能够恢复突变株的相应表型。以上结果表明,CgGCN5在调控胶孢炭疽菌的生长及致病力中起重要作用。 展开更多
关键词 胶孢炭疽菌 组蛋白转移 GCN5 致病性
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甜菜组蛋白乙酰转移酶(HAT)超家族成员的鉴定与表达模式分析
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作者 蒋依辰 王琳玉 +1 位作者 于清洋 邳植 《中国糖料》 2022年第2期1-7,共7页
组蛋白乙酰转移酶(Histone acetyltransferase,HAT)催化的组蛋白乙酰化修饰能够通过改变染色质结构调控植物的生长发育和胁迫应答。但是,关于甜菜HAT家族成员的信息及其参与非生物胁迫应答的情况尚未有明确报道。本研究利用生物信息学... 组蛋白乙酰转移酶(Histone acetyltransferase,HAT)催化的组蛋白乙酰化修饰能够通过改变染色质结构调控植物的生长发育和胁迫应答。但是,关于甜菜HAT家族成员的信息及其参与非生物胁迫应答的情况尚未有明确报道。本研究利用生物信息学方法对甜菜HAT基因家族进行系统进化、基因结构、功能结构域、非生物胁迫下基因表达模式进行分析。研究结果表明,甜菜共有7个HAT家族成员,分别归属于GNAT、TAFII250和CBP家族。7个HAT成员分别分布在5条染色体上;编码长度为461~1904 aa氨基酸。甜菜组蛋白乙酰转移酶(BvHATs)除含有Acetyltransf_1、Acetyltransf_10和HAT_KAT11保守结构域外,还含有zf-TAZ、ZZ、PHD等多种功能结构域,并且不同成员间功能结构域差异较大。基于转录组测序结果,发现在不同非生物胁迫下的BvHATs基因水平发生显著变化。其中Bv4_085980_ujsz在盐胁迫和碱胁迫下都发生显著变化,而Bv2_026300_ydyh在冷胁迫下有明显下调。BvHATs家族基因参与非生物胁迫应答,但系统进化和表达模式分析表明BvHATs参与的调控通路可能不同于拟南芥。本研究为今后阐明BvHATs的基因功能提供了必要信息。 展开更多
关键词 甜菜 组蛋白转移 基因家族 非生物胁迫 生物信息学
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黄芩茎叶黄酮对大鼠缺血性记忆障碍的改善作用及对胆碱乙酰转移酶和一氧化氮合酶蛋白表达的影响 被引量:9
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作者 王玉梅 曹凯 +2 位作者 刘永平 秦博文 商亚珍 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2011年第4期494-500,共7页
目的探讨黄芩茎叶黄酮(flavonoids from stem and leaf ofscutellaria baicalensis georgi,SSF)对大鼠永久性慢性脑缺血引起记忆障碍的改善作用及对胆碱乙酰转移酶和一氧化氮合酶蛋白表达的影响。方法雌性sprague-dawley(SD)大鼠双侧颈... 目的探讨黄芩茎叶黄酮(flavonoids from stem and leaf ofscutellaria baicalensis georgi,SSF)对大鼠永久性慢性脑缺血引起记忆障碍的改善作用及对胆碱乙酰转移酶和一氧化氮合酶蛋白表达的影响。方法雌性sprague-dawley(SD)大鼠双侧颈总动脉永久结扎2个月制备慢性脑缺血记忆障碍模型,通过Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,免疫组化测定海马细胞中胆碱乙酰转移酶(chloine acetyltransferase,ChAT)、神经元型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase,nNOS)、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)和内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)蛋白表达来探讨黄芩茎叶黄酮对大鼠缺血性记忆障碍的改善作用及对胆碱乙酰转移酶和一氧化氮合酶蛋白表达的影响。结果与假手术组相比,脑缺血模型组大鼠的学习记忆能力显著降低,找到平台的游泳路程显著延长;海马细胞中ChAT和eNOS蛋白表达显著降低;nNOS和iNOS蛋白表达显著增加。然而,17.5、35.0和70.0 mg/kg SSF灌胃给脑缺血大鼠38 d均能不同程度地改善学习记忆能力障碍,明显缩短大鼠找到平台的游泳路程;增加海马细胞中ChAT和eNOS蛋白的表达;抑制海马细胞中nNOS和iNOS蛋白的表达。结论 SSF对大鼠脑缺血性记忆障碍具有明显的改善作用,其作用机制可能与调节脑内ChAT和一氧化氮合酶的异常变化有关。 展开更多
关键词 黄芩茎叶黄酮 慢性脑缺血 MORRIS水迷宫 胆碱转移 一氧化氮合
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组蛋白去乙酰酶抑制剂MS-275抑制膀胱癌的实验研究 被引量:4
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作者 曲巍 王立明 +3 位作者 朱有华 许涛 付莉莉 高文波 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2006年第1期5-8,共4页
背景与目的:染色质核心组蛋白的乙酰化水平受组蛋白乙酰转移酶和组蛋白去乙酰酶(HDAC)的控制,它与基因表达调控密切相关、HDACs功能异常与肿瘤的发生发展有关,组蛋白去乙酰酶抑制剂(HDAC Is)通过抑制HDACs而抗肿瘤。本文研究HDAC I类药... 背景与目的:染色质核心组蛋白的乙酰化水平受组蛋白乙酰转移酶和组蛋白去乙酰酶(HDAC)的控制,它与基因表达调控密切相关、HDACs功能异常与肿瘤的发生发展有关,组蛋白去乙酰酶抑制剂(HDAC Is)通过抑制HDACs而抗肿瘤。本文研究HDAC I类药物之一MS-275对人膀胱癌T24细胞的抑制作用,为临床应用提供有价值的实验依据。方法:将不同浓度的MS-275作用于T24细胞,用MTT法检测生长抑制作用,用平板克隆形成试验测定细胞增殖能力的影响,分别采用光学显微镜、透射电子显微镜及AnnexinV、PI双标流式细胞术观察和检测细胞的凋亡情况。结果:MS-275对人膀胱癌T24细胞的生长抑制作用存在明显的剂量、时间依赖关系,0.5μmol/L作用72 h的抑制率为9.34%±3.57%,而8μmol/L作用120 h达94.84%±1.33%。克隆形成率从阴性对照组的55.67%±6.51%降至4μmol/L组的2.33%±0.58%。显微镜下可观察到大量的凋亡形态特征的细胞。流式细胞术检测示,作用48 h后的凋亡率在1μmol/L组、2μmol/L组和4μmol/L组分别为24.19%、30.77%和38.51%,明显高于阴性对照组(2.49%)。结论:组蛋白去乙酰酶抑制剂类药物具有体外抗膀胱癌作用,其重要作用机制之一是诱导膀胱癌细胞凋亡,并有望成为新的抗膀胱肿瘤药物。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 组蛋白抑制剂 细胞增殖 细胞凋亡 培养的肿瘤细胞
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miR-485-5p靶向氧连接的N-乙酰氨基葡萄糖转移酶抑制前列腺癌细胞的增殖、迁移与侵袭
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作者 胡东来 赵梓岐 +3 位作者 李元 杨丽 雷艳丽 楚元奎 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期258-268,共11页
前列腺癌是男性生殖系统最常见的恶性肿瘤。尽管采用雄激素剥夺疗法等策略在一定程度上对治疗前列腺癌有效,但大多数患者最终会进展为临床尚无有效治疗手段的去势抵抗性前列腺癌。因此,寻找新的更加有效的前列腺癌治疗靶点就显得尤为关... 前列腺癌是男性生殖系统最常见的恶性肿瘤。尽管采用雄激素剥夺疗法等策略在一定程度上对治疗前列腺癌有效,但大多数患者最终会进展为临床尚无有效治疗手段的去势抵抗性前列腺癌。因此,寻找新的更加有效的前列腺癌治疗靶点就显得尤为关键。多项研究表明,微RNA(microRNAs,miRNAs)的异常表达与肿瘤的发生相关。已有报道显示,miRNA-485-5p(miR-485-5p)在多种肿瘤中发挥抑癌作用,但其在前列腺癌中的作用在较大程度上仍未可知。本研究旨在探究miR-485-5p在前列腺癌细胞增殖、迁移与侵袭的作用与机制。生物信息学预测和qRT-PCR检测发现,miR-485-5p在前列腺癌中表达下调。平板克隆形成实验、Transwell实验和划痕愈合实验证明,转染miR-485-5p模拟物显著抑制前列腺癌细胞的增殖、迁移与侵袭。生物信息学预测、双荧光素酶报告法、Western印迹和qRT-PCR检测证实,氧连接的N-乙酰氨基葡萄糖转移酶(O-linked N-acetylglucosamine transferase,OGT)是miR-485-5p的一个下游直接靶标。进一步的分析和检测显示,OGT在前列腺癌中呈高表达,转染OGT的siRNA能够显著抑制前列腺癌细胞的增殖、迁移与侵袭,同时有效逆转转染miR-485-5p抑制物所发挥的促癌作用。综上所述,miR-485-5p可以通过负向调控OGT进而抑制前列腺癌细胞的增殖、迁移与侵袭。本研究结果有助于进一步阐释miR-485-5p在前列腺癌中发生发展的作用和机制,可为寻找前列腺癌的治疗靶点提供实验依据。 展开更多
关键词 miR-485-5p 前列腺癌 氧连接的N-氨基葡萄糖转移 增殖 迁移
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缺血再灌注对大鼠海马组蛋白脱乙酰酶磷酸化水平的影响 被引量:1
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作者 李建国 陈静 +4 位作者 孟金凤 张倩倩 燕子 赵欣 张宇 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 2022年第2期135-141,共7页
目的:研究缺血再灌注(I/R)后海马不同区域I类和II类组蛋白脱乙酰酶(HDAC)的表达和功能,以阐明HDAC在I/R性神经元损伤中的作用机制。方法:制备脑I/R模型,采用Western Blot分析HDAC和磷酸化HDAC(p-HDAC)在海马CA1、CA3和DG区的表达,在体... 目的:研究缺血再灌注(I/R)后海马不同区域I类和II类组蛋白脱乙酰酶(HDAC)的表达和功能,以阐明HDAC在I/R性神经元损伤中的作用机制。方法:制备脑I/R模型,采用Western Blot分析HDAC和磷酸化HDAC(p-HDAC)在海马CA1、CA3和DG区的表达,在体分别给予HDAC(1、2、3、4、7)特异性抑制剂(Parthenolide、CAY10683、RGFP966、Tasquinimod、MS-275)后,采用尼氏染色检测其对海马神经元存活的影响。结果:在CA1区和CA3区,I/R组p-HDAC1、p-HDAC2、p-HDAC3、HDAC4、p-HDAC4和p-HDAC7的表达比假手术(sham)组显著增高(P<0.01)。在DG区,sham组HDAC1、p-HDAC1、p-HDAC2、p-HDAC3、HDAC4、p-HDAC4、HDAC7和p-HDAC7的表达显著高于sham组CA1区和CA3区的表达(P<0.05)。I/R组CA1区存活神经元数目比sham组低(P<0.01),HDAC抑制剂可显著减弱CA1区神经元死亡(P<0.01),而对CA3和DG区存活神经元数目无显著影响(P>0.05)。结论:I/R可通过p-HDAC(1、2、3、4、7)影响大鼠海马CA1区神经元存活,抑制其功能能够减弱神经元死亡。 展开更多
关键词 缺血再灌注 海马 组蛋白 组蛋白抑制剂 神经元死亡 大鼠
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