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光唇鱼属鱼类线粒体DNA控制区结构及其系统发育分析 被引量:1
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作者 刘兰苑 郑鹏 +5 位作者 周江伟 陈锭娴 王凯丰 林胜跃 李强 桂林 《湖南农业科学》 2025年第1期81-86,共6页
采用PCR和DNA基因测序技术对采集的5种光唇鱼属鱼类样本线粒体控制区(mtDNA D-loop)基因组进行测序、MEGA 11.0软件对已有光唇鱼属14条mtDNA D-loop基因序列和碱基构成进行分析、双参数法计算控制区序列的遗传距离、邻接法(NJ)构建系统... 采用PCR和DNA基因测序技术对采集的5种光唇鱼属鱼类样本线粒体控制区(mtDNA D-loop)基因组进行测序、MEGA 11.0软件对已有光唇鱼属14条mtDNA D-loop基因序列和碱基构成进行分析、双参数法计算控制区序列的遗传距离、邻接法(NJ)构建系统发育树,以此了解光唇鱼属鱼类mtDNA D-loop结构及其系统发育。结果表明:研究所用的引物对5种光唇鱼mtDNA D-loop序列PCR扩增均可获得相应的序列;光唇鱼属14条mtDNA D-loop基因序列长度在931~941 bp之间,碱基A、T、C、G平均含量分别为34.5%、32.0%、20.8%、12.7%,A+T平均含量为66.5%、C+G平均含量为33.5%;14个各物种种间平均遗传距离处于0.022~0.165之间,均大于0.020,可以认为是有效种;光唇鱼属鱼类系统发育树表明,云南光唇鱼和宽口光唇鱼组成了支系Ⅱ、其余十二种光唇鱼组成了支系Ⅰ,在Ⅰ支系中又可分为A和B两个姐妹群,A群包含了北江光唇鱼、厚刺光唇鱼、窄条光唇鱼、武夷光唇鱼、台湾光唇鱼和虹彩光唇鱼,B群包含侧条光唇鱼、半刺光唇鱼、吉首光唇鱼、温州光唇鱼、薄颌光唇鱼和光唇鱼。 展开更多
关键词 线粒体dna控制区 结构 光唇鱼属 系统发育
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基于线粒体DNA控制区序列的瑶鸡母系起源进化研究
2
作者 马尹鹏 贾晓旭 +2 位作者 陆俊贤 唐修君 樊艳凤 《家畜生态学报》 北大核心 2025年第5期11-15,共5页
试验旨在利用线粒体DNA控制区(D-loop区)序列分析瑶鸡的遗传多样性。试验通对64只瑶鸡线粒体DNA D-loop区进行全序列测序,分析瑶鸡遗传多样性和单倍型特点,构建不同单倍型与红色原鸡之间NJ系统发育树。结果表明,瑶鸡的单倍型遗传多样性... 试验旨在利用线粒体DNA控制区(D-loop区)序列分析瑶鸡的遗传多样性。试验通对64只瑶鸡线粒体DNA D-loop区进行全序列测序,分析瑶鸡遗传多样性和单倍型特点,构建不同单倍型与红色原鸡之间NJ系统发育树。结果表明,瑶鸡的单倍型遗传多样性为0.779和核酸多样性为0.00148,共发现10种单倍型分别归属于A、B、C和E 4个单倍型群,其中E为优势单倍型类群,主要的母系来源可能是南亚的印度亚种。研究结果丰富了我国鸡群遗传多样性资料,为瑶鸡种质资源保护、利用与遗传育种提供科学依据。 展开更多
关键词 瑶鸡 线粒体dna D-LOOP区 遗传多样性
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梅花鹿粪便中线粒体DNA D-loop区异质性的研究
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作者 高雨薇 李晓达 +8 位作者 周永恒 林力均 杨金城 储佳宁 王文慧 张琦 于梦佳 徐艳春 杨淑慧 《野生动物学报》 北大核心 2025年第3期564-572,共9页
线粒体DNA(mtDNA)的异质性(heteroplasmy)是多种不同序列的mtDNA拷贝共存于一个个体的现象,对线粒体、细胞和组织的机能产生明显的影响。粪便是野生动物研究中最易得的材料,含有动物肠上皮脱落的细胞及其DNA,其中的mtDNA异质性可以反映... 线粒体DNA(mtDNA)的异质性(heteroplasmy)是多种不同序列的mtDNA拷贝共存于一个个体的现象,对线粒体、细胞和组织的机能产生明显的影响。粪便是野生动物研究中最易得的材料,含有动物肠上皮脱落的细胞及其DNA,其中的mtDNA异质性可以反映个体在各种因素影响下肠上皮细胞DNA的稳定性,为揭示个体的适合度、生态对策等提供新的线索。梅花鹿(Cervus nippon)是森林生态系统中的关键物种,其肠上皮中mtDNA异质性的特点尚未见报道。本研究用27只6~96月龄的圈养梅花鹿粪便样本,采用PCR扩增子高通量测序技术,对mtDNA D-loop区的异质性进行定量分析。结果显示:D-loop区广泛分布着异质性位点,但相对集中于第175~368位碱基的高变区(HyperHPR),而第597~687位碱基区间则较少发生,为保守区(Hy⁃poHPR)。HyperHPR异质性突变的多样性(HDα)极显著高于HypoHPR(P<0.001)。转换(T_(S))是主要碱基替换类型,其发生频率远高于颠换(T_(V))。HyperHPR中T_(S)/T_(V)平均为0.11,而HypoHPR平均为0.19,说明异质性突变在HypoHPR受到更强的选择性清除。无论是在D-loop区、HyperHPR与HypoHPR,雌雄个体之间异质性突变指标均无显著差异(D-loop区,|t|=0.273,P=0.787;HyperHPR,|t|=0.409,P=0.686;Hy⁃poHPR,|t|=0.793,P=0.435)。此外,HyperHPR的异质性频率与月龄之间存在显著正相关关系(R^(2)=0.132,P=0.035),使整个D-loop区也具有近乎显著的趋势(R^(2)=0.104,P=0.056)。但是,异质性突变各项指标均与性别无关(P=0.435~0.787)。以上结果表明,肠上皮细胞的D-loop区作为接近中性进化的非编码区,能够保留大量的异质性突变,但对T_(V)突变产生明显的选择性清除,特别是保守区域对T_(S)和T_(V)均有强烈的清除作用,从而使异质性突变形成的mtDNA多样性控制在一个相对正常的范围内。年龄是影响异质性水平的重要因素,性别的影响较小。研究结果为利用粪便研究肠上皮的稳定性与环境的关系提供了新的视角。 展开更多
关键词 梅花鹿 粪便dna 线粒体异质性 年龄
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线粒体DNA与人细胞癌变的关系——癌细胞核基因组mtDNA探针FISH分析 被引量:3
4
作者 胡义德 钱桂生 +4 位作者 李懿 刘素刚 刘卫东 赵自强 曹世龙 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2000年第4期289-291,共3页
探讨mtDNA与细胞癌变的关系。方法 :采用PCR方法制备地高辛标记的 3条人mtDNA探针 ,对 6株人癌细胞系和 1例原代培养人皮肤成纤维细胞的染色体或间期细胞核进行荧光原位杂交分析。结果 :3条mtDNA探针在 6个癌细胞系的部分染色体或间期... 探讨mtDNA与细胞癌变的关系。方法 :采用PCR方法制备地高辛标记的 3条人mtDNA探针 ,对 6株人癌细胞系和 1例原代培养人皮肤成纤维细胞的染色体或间期细胞核进行荧光原位杂交分析。结果 :3条mtDNA探针在 6个癌细胞系的部分染色体或间期核中均存在阳性杂交信号 ,而在成纤维细胞核中未出现阳性杂交信号。结论 :表明癌细胞核基因组中存在mtDNA的同源序列 。 展开更多
关键词 细胞 线粒体dna探针 荧光原位杂交
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线粒体微RNA调控线粒体DNA表达
5
作者 王鹏潇 陈乐融 +2 位作者 王珍 龙建纲 彭韵桦 《生物化学与生物物理进展》 北大核心 2025年第7期1649-1660,共12页
线粒体既是细胞能量代谢中心,又作为半自助细胞器,通过其内源性线粒体DNA(mitochondrialDNA,mtDNA)编码电子传递链核心组分,参与细胞命运决策。近年研究发现,线粒体中存在微RNA(microRNA,miRNA),即线粒体微RNA(mitochondrial-located mi... 线粒体既是细胞能量代谢中心,又作为半自助细胞器,通过其内源性线粒体DNA(mitochondrialDNA,mtDNA)编码电子传递链核心组分,参与细胞命运决策。近年研究发现,线粒体中存在微RNA(microRNA,miRNA),即线粒体微RNA(mitochondrial-located miRNA,mitomiR)。mitomiRs由核DNA(nuclear DNA,nDNA)转录产生后,进入细胞质加工成熟,最后转运进入线粒体。mitomiRs对mtDNA的调控方式多样,既可以在翻译水平上调节mtDNA表达,也可以直接结合mtDNA调节转录。当mitomiRs表达异常时,造成线粒体功能障碍,推动了代谢性疾病的发生。干预策略上,通过使用mitomiRs的模拟物或抑制剂来恢复mitomiRs在生理条件下的表达水平,能够改善线粒体功能、缓解相关疾病。因此,mitomiRs调控研究成为了近年来的研究热点。由于mitomiRs定位于线粒体,可借鉴靶向mtDNA递送方式来实现mitomiRs模拟物或抑制剂的递送,但仍存在细胞内外诸多障碍,未来开发更精确高效的递送系统尤为重要。mitomiRs介导的mtDNA表达调控不仅拓展了miRNAs在转录后基因调节中的新功能,也为线粒体相关疾病的治疗提供了极具潜力的分子靶点。本文系统总结了mitomiRs调控mtDNA表达的研究进展,探讨了mitomiRs-mtDNA相互作用调控机制,为基于mitomiRs逆转线粒体功能障碍相关疾病的精准治疗策略提供新的视角。 展开更多
关键词 线粒体微RNA 线粒体dna 表观遗传
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血浆无细胞线粒体外线粒体DNA与牙周炎临床指标的相关性研究 被引量:1
6
作者 杨再目 曹沛 +1 位作者 刘振华 栾庆先 《国际口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期288-295,共8页
目的血浆无细胞线粒体外线粒体DNA(cf-exmtDNA)具有促炎潜能,本文探讨血浆cf-exmtDNA与牙周炎临床指标的相关性。方法纳入18~45岁受试者78人,其中牙周健康者11人,牙龈炎患者11人,牙周炎患者56人。检查并记录基线牙周指标、年龄、性别、... 目的血浆无细胞线粒体外线粒体DNA(cf-exmtDNA)具有促炎潜能,本文探讨血浆cf-exmtDNA与牙周炎临床指标的相关性。方法纳入18~45岁受试者78人,其中牙周健康者11人,牙龈炎患者11人,牙周炎患者56人。检查并记录基线牙周指标、年龄、性别、体质指数(BMI)和空腹血糖(FBG)。取4 mL抗凝静脉血,采用二次离心法提取其中cf-exmtDNA,使用实时荧光定量聚合酶链式反应检测cf-exmtDNA拷贝数。比较不同牙周炎症状态组血浆cf-exmtDNA水平,并对血浆cf-exmtDNA与平均探诊深度(mPD)、平均附着水平(mCAL)、平均出血指数(mBI)、平均菌斑指数(mPLI)、年龄、FBG、BMI等指标进行相关性分析以及多重线性回归分析。结果牙周炎组血浆cf-exmtDNA水平显著高于牙周健康组(P=0.042);样本整体血浆cf-exmtDNA水平与年龄(P=0.023)、mPD(P<0.001)、mCAL(P=0.006)、mBI(P=0.026)呈正相关关系;多重回归分析中,血浆cf-exmtDNA水平主要取决于mPD。结论在18~45岁人群中,牙周炎患者血浆cf-exmtDNA水平较牙周健康者显著升高,血浆cf-exmtDNA水平与年龄、mPD、mCAL、mBI呈正相关关系。 展开更多
关键词 牙周炎 细胞dna 线粒体dna 横断面研究 牙周临床指标
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大肠癌细胞线粒体DNA与NIH3T3细胞核基因组整合的荧光原位杂交分析
7
作者 姬宏莉 肖冰 +4 位作者 尹磊 陈佳奇 张宇声 宋卫兵 姬宏娟 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2007年第2期250-252,共3页
目的:观察大肠癌细胞突变的线粒体DNA(mtDNA)转染小鼠胚胎成纤维细胞NIH3T3后,mtDNA与转染细胞核内基因组的整合情况。方法:将携带大肠癌细胞突变mtDNA的重组质粒pcDNA3.1(+)-Sw480 mtDNA、pcDNA3.1(+)-NHWBC mtDNA及空质粒pcDNA3.1(+)... 目的:观察大肠癌细胞突变的线粒体DNA(mtDNA)转染小鼠胚胎成纤维细胞NIH3T3后,mtDNA与转染细胞核内基因组的整合情况。方法:将携带大肠癌细胞突变mtDNA的重组质粒pcDNA3.1(+)-Sw480 mtDNA、pcDNA3.1(+)-NHWBC mtDNA及空质粒pcDNA3.1(+)通过脂质体法转染NIH3T3细胞。同时用PCR法制备3条相应的绿色荧光蛋白标记的mtDNA探针。分离转染的NIH3T3细胞核内染色体,用荧光原位杂交(FISH)法检测mtDNA探针与核内基因组的整合情况。结果与结论:瞬时转染的NIH3T3细胞核基因组上存在mtDNA的同源序列。外源肿瘤细胞mtDNA与NIH3T3细胞核内基因组发生整合。 展开更多
关键词 线粒体dna 细胞核基因组 荧光原位杂交 N1H3T3细胞
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线粒体DNA突变和拷贝数变异与肿瘤诊治的研究进展
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作者 李懿皞 郭玮 《复旦学报(医学版)》 北大核心 2025年第3期446-449,457,共5页
线粒体是细胞代谢过程中最重要的细胞器之一,其基因组具有易突变、缺乏损伤修复机制等特点。在肿瘤发生发展的过程中,线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)的突变及拷贝数变异都起到了重要的作用。近年来的研究发现,多种肿瘤疾病中都存在... 线粒体是细胞代谢过程中最重要的细胞器之一,其基因组具有易突变、缺乏损伤修复机制等特点。在肿瘤发生发展的过程中,线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)的突变及拷贝数变异都起到了重要的作用。近年来的研究发现,多种肿瘤疾病中都存在mtDNA的突变及拷贝数变异,而针对肿瘤组织mtDNA,尤其是患者体液中游离mtDNA的检测也有可能成为提示肿瘤疾病的重要方法。本文旨在总结线粒体基因组突变及拷贝数变异与肿瘤疾病及其诊断的相关性,并对其作为肿瘤标志物的研究进展进行综述,从而为肿瘤疾病的临床诊断提供参考。 展开更多
关键词 线粒体dna(mtdna) 线粒体dna突变 肿瘤诊断 拷贝数变异
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异核双金属探针在活细胞细胞核和线粒体中选择性定位DNA
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作者 王莹 薛瑞 +1 位作者 黄胜利 杨国昱 《无机化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2023年第8期1463-1470,共8页
用于实时成像活细胞DNA的细胞核探针是非常罕见的。通过Ru(N^N)3、Ir(C^N)2(N^N)、Re(CO)3Cl(N^N)和Pt(C^N)(N^N)的结合,生成了4种异核双金属配合物:2种不同的功能金属位点被锚定在线性双齿螯和配体(N^N)-(N^N)的尾端,形成不对称哑铃状... 用于实时成像活细胞DNA的细胞核探针是非常罕见的。通过Ru(N^N)3、Ir(C^N)2(N^N)、Re(CO)3Cl(N^N)和Pt(C^N)(N^N)的结合,生成了4种异核双金属配合物:2种不同的功能金属位点被锚定在线性双齿螯和配体(N^N)-(N^N)的尾端,形成不对称哑铃状的双金属分子M1-M2,即Ru-Re、Ru-Pt、Ir-Re和Ir-Pt。Ru-Re和Ru-Pt的红色发射探针具有较大的斯托克斯位移、优异的核膜穿透能力、良好光稳定性的DNA结合能力。此外,Ru-Re和Ru-Pt探针的DNA成像可与专门用于活细胞细胞核DNA染色的Hoechst 33342商用染料相媲美,而Ir-Re和Ir-Pt探针直接靶向线粒体。不同探针的发光特性和选择性胞内定位高度依赖于在异核双金属配合物中的金属物种。 展开更多
关键词 异核双金属探针 dna成像 线粒体染色 细胞摄取
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郧西马头山羊线粒体DNA D-loop区遗传多样性分析
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作者 程蕾 刘辰晖 +6 位作者 陈杨 向敏 余婕 钟朱夏 夏永春 杨务军 胡修忠 《湖北农业科学》 2025年第7期198-202,共5页
基于线粒体DNA(mtDNA)D-loop区序列的遗传变异分析,评估郧西马头山羊(Capra hircus)的遗传多样性。通过PCR扩增和测序获得184只郧西马头山羊mtDNA D-loop区全序列,系统分析其核苷酸多态性和单倍型多样性,开展中性检验(Tajima’s D、Fu’... 基于线粒体DNA(mtDNA)D-loop区序列的遗传变异分析,评估郧西马头山羊(Capra hircus)的遗传多样性。通过PCR扩增和测序获得184只郧西马头山羊mtDNA D-loop区全序列,系统分析其核苷酸多态性和单倍型多样性,开展中性检验(Tajima’s D、Fu’s Fs)和错配分布分析,并与不同山羊品种的mtDNA D-loop序列进行聚类分析。结果表明,郧西马头山羊mtDNA D-loop的A、G、C、T 4种碱基占比分别为30.77%、14.26%、26.26%、28.71%,A+T碱基的占比为59.48%,明显高于G+C(40.52%)。郧西马头山羊mtDNA D-loop共有52种单倍型,131个变异位点,其中单一多态位点51个,简约信息位点80个。Fu’s Fs检验结果显示,Fs为-2.48,显著偏离中性模型(P<0.05)。郧西马头山羊与其他5个山羊品种(川东白山羊、陕南白山羊、黄淮山羊、北川白山羊、波尔山羊)的系统发育树显示,184个个体被分为3个大分支,分别为2个本地支与1个波尔山羊杂交支。郧西马头山羊群体的多态程度高,遗传多样性丰富,具有较大的育种潜能,但存在周边多个地方山羊品种和波尔山羊的遗传渗入现象。 展开更多
关键词 郧西马头山羊(Capra hircus) 线粒体dna D-LOOP区 遗传多样性
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流式细胞仪检测高等植物细胞核DNA含量的方法 被引量:63
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作者 汪艳 肖媛 +3 位作者 刘伟 李婷婷 胡锐 乔志仙 《植物科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期126-131,共6页
相对于动物和微生物而言,流式细胞术在植物科学上的应用会因植物组织与细胞(如细胞壁、中央液泡、特殊细胞器等)的特殊结构以及次生代谢产物等特殊成分,造成样品在前期处理、染色及测试等方面的困难,甚至导致检测失败或结果不准确。笔... 相对于动物和微生物而言,流式细胞术在植物科学上的应用会因植物组织与细胞(如细胞壁、中央液泡、特殊细胞器等)的特殊结构以及次生代谢产物等特殊成分,造成样品在前期处理、染色及测试等方面的困难,甚至导致检测失败或结果不准确。笔者在长期运用流式细胞仪测试工作中,积累了大量的植物样本检测经验,并参考国内外相关文献,总结出从植物取材、样品制备到植物细胞核DNA流式检测的方法和技巧,可为植物科学研究者及从事流式细胞检测的技术人员提供实验参考。 展开更多
关键词 流式细胞 高等植物 细胞核dna含量 dna解离液
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梗阻性黄疸大鼠肝细胞线粒体DNA损伤的定量研究 被引量:13
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作者 唐春 别平 +2 位作者 李昆 张玉君 马正伟 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期48-52,共5页
目的:对梗阻性黄疸大鼠肝细胞线粒体DNA损伤进行定量研究,探讨其与线粒体功能损伤的关系。方法:48只健康Wistar大鼠随机分为假手术组和梗阻性黄疸组,梗阻性黄疸组用胆总管双重结扎并切断制成胆道梗阻模型。Estabrook氧电极法测定线粒体... 目的:对梗阻性黄疸大鼠肝细胞线粒体DNA损伤进行定量研究,探讨其与线粒体功能损伤的关系。方法:48只健康Wistar大鼠随机分为假手术组和梗阻性黄疸组,梗阻性黄疸组用胆总管双重结扎并切断制成胆道梗阻模型。Estabrook氧电极法测定线粒体呼吸控制率(RCR)和磷氧比值、Kimmich法测定肝组织内ATP含量以评价肝细胞线粒体功能,并利用荧光定量PCR方法,对各组大鼠肝细胞总mtDNA、缺失型mtDNA进行相对定量检测。结果:相对于假手术组,梗阻性黄疸组RCR、磷氧比值及肝组织ATP含量明显减少(P<0.01),细胞内总mtDNA拷贝数减少(P<0.01);假手术组内未检测出缺失型mtDNA,梗阻性黄疸组存在着缺失型mtDNA;随着梗阻时间的延长,梗阻性黄疸组RCR、磷氧比值及肝组织ATP含量逐步降低,总mtDAN拷贝数逐步减少(P<0.01),缺失型mtDNA在总mtDNA中的百分比逐步增加(P<0.01),其变化与线粒体功能损害相一致。结论:大鼠梗阻性黄疸肝细胞mtDNA损伤是导致线粒体功能损伤的重要因素。 展开更多
关键词 黄疸 阻塞性 细胞 dna 线粒体
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红莲型细胞质雄性不育水稻线粒体DNA的RFLP分析 被引量:25
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作者 李小明 郑用琏 +1 位作者 张方东 朱英国 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期201-204,共4页
应用RFLP技术 ,研究了红莲型不育系、保持系、杂种一代及野败型、马协型不育系的线粒体基因组。结果表明 ,红莲型不育系与保持系线粒体基因组之间在多个基因区域存在明显差异 ,为红莲型细胞质雄性不育分子机理研究提供了线索 ;红莲型不... 应用RFLP技术 ,研究了红莲型不育系、保持系、杂种一代及野败型、马协型不育系的线粒体基因组。结果表明 ,红莲型不育系与保持系线粒体基因组之间在多个基因区域存在明显差异 ,为红莲型细胞质雄性不育分子机理研究提供了线索 ;红莲型不育系与野败型不育系的线粒体基因组之间存在显著差异 ,马协型不育系与野败型不育系的线粒体基因组之间存在一定差异 ,在分子水平揭示了不育胞质的多样性。 展开更多
关键词 RFLP 细胞质雄性不育 水稻 线粒体dna
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改良一步法制备人外周血白细胞线粒体DNA 被引量:12
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作者 贾立明 叶明福 +7 位作者 刘丽红 孙玉兰 孙恒文 谢启超 李军果 钱桂生 房殿春 胡义德 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第15期1407-1409,共3页
目的 建立从少量外周血中提取白细胞线粒体DNA(mtDNA)的快速、简便方法。方法  5 8份抗凝血静置后取白细胞层 ,采用碱变性法裂解细胞 ,酚 氯仿 异戊醇抽提 ,RNA酶消化后再抽提及沉淀 ,PCR扩增产物电泳鉴定。结果 获得的mtDNA样品... 目的 建立从少量外周血中提取白细胞线粒体DNA(mtDNA)的快速、简便方法。方法  5 8份抗凝血静置后取白细胞层 ,采用碱变性法裂解细胞 ,酚 氯仿 异戊醇抽提 ,RNA酶消化后再抽提及沉淀 ,PCR扩增产物电泳鉴定。结果 获得的mtDNA样品不存在蛋白质等污染 ,用特异性mtDNAPCR引物从 5 8例核酸样品中均能扩增出 15 2 8bp的mtDNA基因片段。结论 改良一步法是一种省时、经济、实用、重复性好。 展开更多
关键词 线粒体dna 细胞 抽提
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辣椒细胞质雄性不育系与其保持系线粒体DNA的RAPD分析 被引量:21
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作者 王述彬 罗向东 +3 位作者 戴亮芳 陈劲枫 刘金兵 潘宝贵 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2008年第1期44-47,共4页
以辣椒细胞质雄性不育系21A及其相应的保持系21B为试材,从苗龄10~15d的黄化苗中分离纯化线粒体并提取线粒体DNA。线粒体负染后电镜观察发现,分离纯化的线粒体形态完整,呈椭球形,杂质较少。电泳检测提取的线粒体DNA的琼脂糖,结果... 以辣椒细胞质雄性不育系21A及其相应的保持系21B为试材,从苗龄10~15d的黄化苗中分离纯化线粒体并提取线粒体DNA。线粒体负染后电镜观察发现,分离纯化的线粒体形态完整,呈椭球形,杂质较少。电泳检测提取的线粒体DNA的琼脂糖,结果表明,线粒体DNA纯度较高,无降解现象,浓度为20~50ng/山,可用作RAPD分析。经初步筛选,100个RAPD随机引物中有8个引物表现出多态性,经再次重复筛选,获得了辣椒细胞质雄性不育系21A线粒体DNA与雄性不育性相关的RAPD标记CMSAG3430。 展开更多
关键词 辣椒 细胞质雄性不育 黄化苗 线粒体dna RAPD
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人癌细胞线粒体DNA控制区序列特征分析 被引量:14
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作者 胡义德 钱桂生 +2 位作者 李淑平 陈维中 毛宝龄 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期1-5,共5页
为了探讨癌细胞 mt D N A 控制区序列的变化特征, 采用 P C R 产物限制性片段长度多态性( P C R- R F L P) 分析与直接测序相结合的方法, 对比分析6 株人癌细胞系、6 例癌患者及4 例健康成人白细胞mt D N ... 为了探讨癌细胞 mt D N A 控制区序列的变化特征, 采用 P C R 产物限制性片段长度多态性( P C R- R F L P) 分析与直接测序相结合的方法, 对比分析6 株人癌细胞系、6 例癌患者及4 例健康成人白细胞mt D N A 控制区序列。发现第16519 位 T→ C、16 534 位 A→ G、46 位 T→ G 和49 位 A→ C 突变,在癌细胞系和癌患者白细胞mt D N A 中分别占50 % (3/6) 和333 % (2/6) , 健康成人白细胞mt D N A 中未见此类型突变; 第16 278 位 C→ T 突变, 在癌细胞系 mt D N A 中占50 % (3/6) , 显著高于正常人群mt D N A 中此位点的多态性变异。表明癌细胞和癌患者白细胞 mt D N A 重链复制起点及其 相邻 D 环区的特征性突变可能与细胞癌变/ 或癌的易感性有关。 展开更多
关键词 人癌细胞 线粒体dna 控制区 核苷酸序列 突变
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3种小麦细胞质雄性不育系及其杂种线粒体DNA的RFLP分析 被引量:11
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作者 姚方印 孙兰珍 +2 位作者 李传友 刘宝申 高庆荣 《西北植物学报》 CAS CSCD 2000年第5期707-714,共8页
对细胞质分别来源于提莫菲维 ( T.timopheevii) ,粘果山羊草 ( Ae.kotschyi) ,偏凸山羊草 ( Ae.ventricosa)的 3种普通小麦的雄性不育系 ,相应保持系和恢复系及其杂种的 mt DNA用 1 2个线粒体基因探针进行了 RFL P分析 ,结果为 :( 1 ) T... 对细胞质分别来源于提莫菲维 ( T.timopheevii) ,粘果山羊草 ( Ae.kotschyi) ,偏凸山羊草 ( Ae.ventricosa)的 3种普通小麦的雄性不育系 ,相应保持系和恢复系及其杂种的 mt DNA用 1 2个线粒体基因探针进行了 RFL P分析 ,结果为 :( 1 ) T、K、V型不育系的 mt DNA在组织结构上存在显著差异 ;( 2 ) T、K、V不育系的 mt DNA与共同的保持系间显著不同 ,推测 mt D-NA与小麦 cms有关 ;( 3)在 ATP6/Hind ,ATP6/Bam HI,2 6S/Hind ,2 6S/Bam HI组合中 ,检测到 T、K型不育系与其相应 F1代之间出现了多态性 ,证明核恢复基因影响 mt DNA的结构 ;( 4 )把雄性不育和育性恢复作为一个整体来考虑 ,着重比较不育系和 F1代之间的差异 ,并对其差异与 cms的关系进行了分析。 展开更多
关键词 小麦 细胞质雄性不育 线粒体 dna RFLP
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利用流式细胞术鉴定甜樱桃砧木细胞核DNA含量和染色体倍性 被引量:15
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作者 吴雅琴 周锡明 +4 位作者 陈龙 程和禾 李玉生 吴永杰 赵艳华 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第S1期48-52,共5页
【目的】研究建立甜樱桃砧木DNA倍性的快速鉴定方法。【方法】以甜樱桃砧木试管苗本溪山樱、‘Colt’、‘兰丁1号’、‘吉塞拉6号’和‘ZY-1’为试材,利用流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)检测甜樱桃砧木细胞染色体的倍性,并通过传统的... 【目的】研究建立甜樱桃砧木DNA倍性的快速鉴定方法。【方法】以甜樱桃砧木试管苗本溪山樱、‘Colt’、‘兰丁1号’、‘吉塞拉6号’和‘ZY-1’为试材,利用流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)检测甜樱桃砧木细胞染色体的倍性,并通过传统的染色体制片的方法对其结果进行验证。【结果】不同砧木品种间细胞核DNA含量差异显著,且随着倍性水平的增加,细胞核DNA相对含量随之成倍增加。流式细胞术检测结果与染色体制片检测结果一致。【结论】利用流式细胞仪测定甜樱桃砧木的细胞核DNA含量,具有样品制备简单,测量快速,准确度高等优点,是进行倍性鉴定的理想方法。 展开更多
关键词 甜樱桃砧木 流式细胞 细胞核dna含量 染色体倍性
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线粒体DNA缺失对人肺癌细胞生长和侵袭能力的影响 被引量:7
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作者 凌贤龙 陆应麟 杜芝燕 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第14期1453-1455,共3页
目的探讨线粒体DNA损伤对人肺癌细胞生长和侵袭能力的影响。方法采用溴化乙锭处理获得线粒体DNA缺失细胞;软琼脂集落形成实验检测细胞集落形成能力;Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力;MTT方法测定细胞长状态。结果线粒体DNA缺失细胞较... 目的探讨线粒体DNA损伤对人肺癌细胞生长和侵袭能力的影响。方法采用溴化乙锭处理获得线粒体DNA缺失细胞;软琼脂集落形成实验检测细胞集落形成能力;Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力;MTT方法测定细胞长状态。结果线粒体DNA缺失细胞较之于其母本细胞系,具有更强的集落形成和侵袭能力,以及更明显的生长优势结论线粒体损伤可能参与了肺癌细胞恶性表型的形成。 展开更多
关键词 线粒体 线粒体dna 肺癌 恶性表型
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刀额新对虾和日本囊对虾细胞核DNA含量的测定与比较 被引量:12
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作者 方旅平 张馥厚 +1 位作者 曹文清 林元烧 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期146-148,共3页
以刀额新对虾(Metapenaeus ensis)、日本囊对虾(Marsupenaeus japonicus)的血淋巴为材料,以小鸡血细胞核DNA含量(2.50 pg/2c)为参照样,使用Partec PA-I型倍性分析仪并结合外标定法,分别测定了刀额新对虾与日本囊对虾细胞的DNA含量.结果... 以刀额新对虾(Metapenaeus ensis)、日本囊对虾(Marsupenaeus japonicus)的血淋巴为材料,以小鸡血细胞核DNA含量(2.50 pg/2c)为参照样,使用Partec PA-I型倍性分析仪并结合外标定法,分别测定了刀额新对虾与日本囊对虾细胞的DNA含量.结果表明,这两种虾的细胞DNA含量分别为小鸡血细胞的1.77倍和1.95倍,换算成绝对含量分别为4.340 pg/2c和4.878 pg/2c.本文讨论了刀额新对虾与日本囊对虾以形态学为特征的分类系统与细胞DNA含量之间的关系,并推测在系统演化上日本囊对虾应比刀额新对虾更为高等. 展开更多
关键词 刀额新对虾 日本囊对虾 细胞核dna含量
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