磷脂酰肌醇3激酶和细胞外调节蛋白激酶信号通路对支气管哮喘大鼠气管平滑肌细胞增殖的协同调控作用 被引量：4

1

作者 徐慧 戴元荣 +1 位作者 付玉茹 夏梦玲 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1032-1036,共5页

目的探讨磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）和细胞外调节蛋白激酶（ERK）信号通路对支气管哮喘（简称哮喘）大鼠气管平滑肌细胞（ASMC）增殖的协同调控作用。方法 6~8周龄SPF级雄性SD大鼠,复制大鼠慢性哮喘模型,离体培养大鼠气管ASMC,将细胞分为... 目的探讨磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）和细胞外调节蛋白激酶（ERK）信号通路对支气管哮喘（简称哮喘）大鼠气管平滑肌细胞（ASMC）增殖的协同调控作用。方法 6~8周龄SPF级雄性SD大鼠,复制大鼠慢性哮喘模型,离体培养大鼠气管ASMC,将细胞分为正常组、哮喘组、转化生长因子β1（TGF-β1）组、TGF-β1＋PD98059组、TGF-β1＋渥曼青霉素（wortmannin）组、TGF-β1＋PD98059＋wortmannin组。采用CCK-8法检测各组细胞增殖情况及Western blotting法检测磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）和磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2（p-ERK1/2）表达情况。结果 CCK-8法检测各组大鼠ASMC OD值,TGF-β1组高于正常组和哮喘组,TGF-β1＋PD98059组、TGF-β1＋wortmannin组和TGF-β1＋PD98059＋wortmannin组低于TGF-β1组,TGF-β1＋PD98059＋wortmannin组低于TGF-β1＋PD98059组和TGF-β1＋wortmannin组（P〈0.01）。Western blotting法检测ASMC中p-Akt的表达,哮喘组高于正常组,TGF-β1组高于哮喘组,TGF-β1＋wortmannin组低于TGF-β1组（P〈0.01）。Western blotting法检测ASMC中p-ERK1/2的表达,哮喘组高于正常组,TGF-β1组高于哮喘组,TGF-β1＋PD98059组低于TGF-β1组（P〈0.01）。结论 PI3K和ERK信号通路协同调控了TGF-β1刺激哮喘大鼠ASMC增殖过程。 展开更多

关键词 哮喘 信号通路 肌细胞 平滑肌 细胞增殖 磷脂酰肌醇3-激酶类 细胞外调节蛋白激酶

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STAT3与MAPK蛋白协同调节肿瘤坏死因子-α转录活性 被引量：9

2

作者 杨丽萍 姚咏明 +2 位作者 李杰萍 叶棋浓 盛志勇 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第8期1003-1011,共9页

探讨信号转导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)与丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)在体内是否存在相互作用,并观察其作用如何影响肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis... 探讨信号转导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)与丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)在体内是否存在相互作用,并观察其作用如何影响肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)的转录活性.采用聚合酶链反应技术,从人Flag-p38和Flag-细胞外信号蛋白调节激酶2(extracellular-signal regulated protein kinase 2,ERK2)中扩增出p38和ERK2基因,将其插入载体pcDNA3-HA中;用Westernblot方法在293T细胞中检测其表达后应用免疫共沉淀技术检测STAT3蛋白与p38/ERK2蛋白之间是否存在相互作用.然后应用报告基因技术检测这种相互作用如何影响TNF-α的转录表达,并在应用RNA干扰技术将STAT3通路抑制后,观察TNF-α启动子转录活性如何变化.酶切和测序结果表明,扩增的p38和ERK2基因序列正确,大小为1080bp,在293T细胞中正确表达大小约40ku的p38和ERK2蛋白.免疫共沉淀实验结果证实,p38和STAT3蛋白以及ERK2和STAT3蛋白在体内相互作用.下游基因TNF-α荧光素酶活性实验显示,p38和STAT3蛋白以及ERK2和STAT3蛋白复合物协同升高TNF-α的活性,应用STAT3的干扰RNA后其活性则明显下降.该研究表明,STAT3和p38/ERK2蛋白在体内存在相互作用,STAT3与p38、STAT3与ERK2均对TNF-α的表达发挥协同效应,在阻断STAT3通路后,STAT3与p38、STAT3与ERK2对TNF-α表达的协同效应将明显降低. 展开更多

关键词 信号转导及转录激活因子3 P38丝裂原活化蛋白激酶 细胞外信号蛋白调节激酶 肿瘤坏死因子-Α

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siRNA沉默MEKK3基因促进TRAIL诱导乳腺癌MCF-7细胞的凋亡 被引量：1

3

作者 刘寿贵 刘磊 +1 位作者 周晓健 郭善禹 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2008年第6期552-556,共5页

目的:研究抑制促分裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶-激酶3(mitogen-activated protein/extracellular signal regulated kinase-kinase 3,MEKK3)基因表达促进TRAIL诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡的作用,寻找乳腺癌临床治疗新策略。方法:... 目的:研究抑制促分裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶-激酶3(mitogen-activated protein/extracellular signal regulated kinase-kinase 3,MEKK3)基因表达促进TRAIL诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡的作用,寻找乳腺癌临床治疗新策略。方法:应用MTT法检测人TRAIL对MCF-7细胞生长的抑制作用。合成MEKK3-siRNA,应用脂质体介导MEKK3-siRNA转染入人乳腺癌细胞MCF-7,以RT-PCR和Western blotting法检测MCF-7细胞MEKK3 mRNA和蛋白的表达。应用MTT法和流式细胞术检测MEKK3-siRNA与TRAIL联合处理后MCF-7细胞的增殖和凋亡。结果:TRAIL具有抑制MCF-7细胞增殖作用,但其抑制作用较弱。MEKK3-siRNA转染后能有效而稳定地抑制MCF-7细胞中MEKK3 mRNA和蛋白的表达(P<0.01)。TRAIL与MEKK3-siRNA联合处理MCF-7细胞较TRAIL单独处理更明显地抑制细胞增殖活力(P<0.05),更明显地增加细胞凋亡率(P<0.01)。结论:siRNA沉默MEKK3基因能显著促进TRAIL对乳腺癌MCF-7细胞凋亡的诱导作用,为探讨乳腺癌治疗新方案提供了实验依据。 展开更多

关键词 乳腺癌细胞 TRAIL siRNA 促分裂原活化蛋白/细胞外信号调节激酶-激酶3(mekk3) 凋亡

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基于MEK/ERK/STAT3信号通路探讨丹皮酚对糖尿病心肌病大鼠的影响 被引量：2

4

作者 程昌琴 陈江勇 +1 位作者 徐成 张敏 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期4169-4173,共5页

目的 探究丹皮酚调节丝裂原活化细胞外信号调节激酶(MEK)/细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)/信号转导与转录激活因子3 (STAT3)信号通路对糖尿病心肌病大鼠心脏功能、氧化应激损伤和炎症的影响。方法 将大鼠随机分为对照组、模型组、丹皮酚... 目的 探究丹皮酚调节丝裂原活化细胞外信号调节激酶(MEK)/细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)/信号转导与转录激活因子3 (STAT3)信号通路对糖尿病心肌病大鼠心脏功能、氧化应激损伤和炎症的影响。方法 将大鼠随机分为对照组、模型组、丹皮酚组、丹皮酚+MEK/ERK激活剂(C16-PAF)组,除对照组外,其余各组建立糖尿病心肌病大鼠模型,给予相应药物干预6周。检测大鼠心功能指标[左室后壁厚度(LVPWT)、左室舒张末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVESD)、左室射血分数(LVEF)和左室短轴缩短率(LVFS)];观察心肌组织形态并进行病理评分;检测心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合酶(NOS)活性和丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子-α (TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、 IL-6、单核细胞趋化蛋白-1 (MCP-1)水平,以及MEK、磷酸化MEK (p-MEK)、 ERK、磷酸化ERK (p-ERK)、 STAT3、磷酸化STAT3 (p-STAT3)蛋白表达。结果与对照组比较,模型组大鼠心肌组织病理损伤严重,LVPWT、 LVEDD、 LVESD、心肌组织病理评分、 MDA、 TNF-α、IL-1β、 IL-6、 MCP-1水平和p-MEK/MEK、 p-ERK/ERK、 p-STAT3/STAT3蛋白表达升高(P<0.05),LVEF、 LVFS、NO水平和SOD、 NOS活性降低(P<0.05);与模型组比较,丹皮酚组大鼠心肌组织病理损伤减轻,LVPWT、LVEDD、 LVESD、心肌组织病理评分、 MDA、 TNF-α、 IL-1β、 IL-6、 MCP-1水平和p-MEK/MEK、 p-ERK/ERK、 pSTAT3/STAT3蛋白表达降低(P<0.05),LVEF、 LVFS、 NO水平和SOD、 NOS活性升高(P<0.05);C16-PAF可减弱丹皮酚对糖尿病心肌病大鼠上述指标的改善效果(P<0.05)。结论 丹皮酚可通过抑制MEK/ERK/STAT3信号通路改善糖尿病心肌病大鼠心脏功能、氧化应激损伤和炎症。 展开更多

关键词 丹皮酚 糖尿病心肌病 丝裂原活化细胞外信号调节激酶(MEK) 细胞外信号调节蛋白激酶(ERK) 信号转导与转录激活因子3(STAT3) 氧化应激 炎症

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环磷酸鸟苷/蛋白激酶G信号通路的激活与再灌注损伤挽救激酶信号通路的关系 被引量：5

5

作者 潘国焰 林荣 +3 位作者 吴兵 洪美满 陈乘波 黄雪娥 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1438-1444,共7页

目的:观察脑钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)激活环磷酸鸟苷/蛋白激酶G(cyclic guanosine monophosphate/protein kinase G,cGMP/PKG)信号通路的心肌保护作用是否与细胞外调节蛋白激酶1/2(extracellular regulated protein kinase1... 目的:观察脑钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)激活环磷酸鸟苷/蛋白激酶G(cyclic guanosine monophosphate/protein kinase G,cGMP/PKG)信号通路的心肌保护作用是否与细胞外调节蛋白激酶1/2(extracellular regulated protein kinase1/2,ERK1/2)、磷酸酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)蛋白激酶的激活有关。方法:将84只新西兰兔随机分为7组(n=12):假手术组;对照组;BNP组;BNP+LY294002组(LY294002为PI3K抑制剂);LY294002组;BNP+PD98059组(PD98059为ERK1/2抑制剂);PD98059组。除了假手术组只开胸不结扎冠状动脉外,其余6组均于结扎左回旋支45 min后恢复左回旋支血流,进行再灌注180 min。全程观察血流动力学及心电变化;实验终末,各组随机抽取6只兔子心脏做左室梗死面积测定,采用伊文思蓝和氯化三苯基四氮唑双染色法测定心肌梗死面积;每组另外6只兔子心脏取梗死边缘区组织,Western blot方法测定PAkt/Akt、P-ERK1/2/ERK1/2的表达。结果:心率(heart rate,HR)和平均动脉压(mean arterial blood pressure,MABP)在基线水平上无明显差异(P>0.05)。与基线水平相比,HR和MABP在缺血以及再灌注时期有明显下降(P<0.05),而在再灌注时期维持较稳定的水平。各组之间HR、MABP差异无统计学意义(P>0.05);与对照组相比,BNP组心律失常发生率明显减少(P<0.003 125)。与BNP组比较,BNP+LY294002组、LY294002组、BNP+PD98059组及PD98059组心律失常明显增加(P<0.003 125),BNP+LY294002组和LY294002组,BNP+PD98059组和PD98059组差异无统计学意义(P>0.003 125);假手术组无心肌梗死。与对照组比较,BNP组心肌梗死范围明显减少(P<0.05)。与BNP组比较,BNP+LY294002组、LY294002组、BNP+PD98059组及PD98059组梗死面积明显增加(P<0.05)。BNP+LY294002组和LY294002组,BNP+PD98059组和PD98059组差异无统计学意义(P>0.05);与对照组比较,BNP组Akt、ERK1/2的磷酸化水平明显增加(P<0.05)。与BNP组相比,BNP+LY294002组Akt的磷酸化水平及BNP+PD98059组ERK1/2的磷酸化水平分别明显降低(P<0.05)。BNP+LY294002组和LY294002组Akt的磷酸化水平,BNP+PD98059组和PD98059组ERK1/2的磷酸化水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论:BNP激活cGMP/PKG信号通路,对心肌缺血再灌注损伤产生保护作用,且该通路的激活与再灌注损伤挽救激酶通路的激活有关。 展开更多

关键词 心肌缺血再灌注损伤 环磷酸鸟苷 蛋白激酶G信号通路 再灌注损伤挽救激酶信号通路 磷酸酰肌醇-3-激酶 蛋白激 酶B 细胞外调节蛋白激酶1 2

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高危型HPV感染与宫颈上皮病变组织中MEKK3、NF-κB基因表达的关系 被引量：6

6

作者 鲁燕飞 陈国强 陈锐 《海南医学院学报》 CAS 2017年第5期589-592,共4页

目的:研究宫颈上皮病变组织中高危型HPV感染与MEKK3、NF-κB表达的关系。方法:收集2013年5月~2016年3月期间125例宫颈活检标本进行研究,宫颈炎症标本、宫颈上皮内瘤变标本、宫颈癌标本分别纳入炎症组、CIN组、恶性组,采用HPV-DNA分型检... 目的:研究宫颈上皮病变组织中高危型HPV感染与MEKK3、NF-κB表达的关系。方法:收集2013年5月~2016年3月期间125例宫颈活检标本进行研究,宫颈炎症标本、宫颈上皮内瘤变标本、宫颈癌标本分别纳入炎症组、CIN组、恶性组,采用HPV-DNA分型检测试剂盒测定HPV分型,采用免疫组化试剂盒测定MEKK3、NF-κB的蛋白表达量,采用荧光定量PCR试剂盒测定MEKK3、NF-κB以及下游分子的mRNA表达量。结果:高危型HPV阳性宫颈组织中MEKK3、NF-κB的蛋白阳性表达率均显著高于高危型HPV阴性宫颈组织,高危型HPV阳性宫颈组织中MEKK3、NF-κB、Bcl-2、XIAP、Bmi-1、TGF-β、Vimentin的mRNA表达量均显著高于高危型HPV阴性宫颈组织;MEKK3和NF-κB阳性表达组织中Bcl-2、XIAP、Bmi-1、TGF-β、Vimentin的mRNA表达量均显著高于MEKK3和NF-κB阴性表达组织。结论:高危型HPV感染会通过MEKK3/NF-κB通路来增加宫颈上皮病变组织中增殖基因Bcl-2、XIAP、Bmi-1以及侵袭基因TGF-β、Vimentin的表达量。 展开更多

关键词 宫颈上皮内瘤变 高危型HPV 有丝裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶3 核转录因子ΚB

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宫颈上皮内瘤变组织中MEKK3、NF-κB的表达量及其与高危型HPV感染的相关性研究 被引量：10

7

作者 刘平 张红莉 《海南医学院学报》 CAS 2016年第19期2247-2250,共4页

目的:研究宫颈上皮内瘤变组织中有丝裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶3(mitogen-activated protein Kinase/ERK kinase kinase 3,MEKK3)、核转录因子κB(nuclear factors-κB,NF-κB)的表达量及其与高危型HPV感染的相关性。方法:选... 目的:研究宫颈上皮内瘤变组织中有丝裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶3(mitogen-activated protein Kinase/ERK kinase kinase 3,MEKK3)、核转录因子κB(nuclear factors-κB,NF-κB)的表达量及其与高危型HPV感染的相关性。方法:选择500例宫颈上皮内瘤变患者作为CIN组以及一般资料匹配的450例慢性宫颈炎患者作为对照组,收集宫颈组织后采用免疫组化方法测定MEKK3、NF-κB的蛋白表达量,采用荧光定量PCR方法测定MEKK3、NF-κB、JAK2、STAT3、p16^(INK4a)、p27^(kip1)、p53^(kip3)的mRNA表达量。结果:CIN组宫颈组织中MEKK3、NF-κB的蛋白表达量以及mRNA表达量均显著高于对照组(P<0.05);高危型HPV感染(+)宫颈组织中MEKK3、NF-κB的蛋白表达量以及mRNA表达量均显著高于高危型HPV感染(-)(P<0.05);MEKK3、NF-κB阳性表达CIN宫颈组织中JAK2、STAT3的mRNA含量显著高于MEKK3、NF-κB阴性表达的CIN宫颈组织(P<0.05),p16^(INK4a)、p27^(kip1)、p53^(kip3)的mRNA含量显著低于MEKK3、NF-κB阴性表达的CIN宫颈组织(P<0.05)。结论:高危型HPV感染能够增加宫颈上皮内瘤变组织中MEKK3、NF-κB的表达量,进而通过JAK2/STAT3信号通路来下调抑癌基因p16^(INK4a)、p27^(kip1)、p53^(kip3)的表达。 展开更多

关键词 宫颈上皮内瘤变 人乳头瘤病毒 有丝裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶3 核转录因子ΚB 抑癌基因

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人参皂苷20(s)-Rg3对llc-pk1细胞中顺铂所致肾毒性的保护作用 被引量：10

8

作者 吴胜斌 王应灯 《世界中医药》 CAS 2018年第8期2010-2014,共5页

目的:探讨人参皂苷20(s)-Rg3对llc-pk1细胞中顺铂所致肾毒性的保护作用。方法:通过基于细胞的肾脏保护试验,研究了发酵黑参(FBG)及其活性成分人参皂苷20(S)-Rg3对猪肾(LLC-PK1)细胞中顺铂(化疗药物)诱导的损伤的保护作用。结果:由顺铂... 目的:探讨人参皂苷20(s)-Rg3对llc-pk1细胞中顺铂所致肾毒性的保护作用。方法:通过基于细胞的肾脏保护试验,研究了发酵黑参(FBG)及其活性成分人参皂苷20(S)-Rg3对猪肾(LLC-PK1)细胞中顺铂(化疗药物)诱导的损伤的保护作用。结果:由顺铂诱导的细胞活力降低,再使用FBG提取物和人参皂苷20(S)-Rg3依赖剂量后明显恢复。用FBG提取物或人参皂苷20(S)-Rg3处理后会降低顺铂诱导升高与磷酸化c-Jun N-末端激酶(JNK),p53和裂解的半胱天冬酶-3升高的蛋白。通过用FBG和人参皂苷20(S)-Rg3的共同处理,由于顺铂的诱导导致凋亡LLC-PK1细胞升高的百分比显著降低。结论:人参皂苷20(s)-Rg3可改善LLC-PK1的细胞毒性,人参皂苷20(S)-RG3可能是通过阻断JNK-P53-caspase-3信号级联反应来介导这种作用的重要组成部分。 展开更多

关键词 顺铂 人参皂苷20(S)-Rg3 llc-pk1细胞 c-Jun N-末端激酶 肾毒性 发酵黑参 丝裂原活化蛋白激酶 细胞外调节蛋白激酶 磷酸脱氢酶 甘油醛-3-磷酸脱氢酶

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CaMKⅡγ和CaMKⅡδ通过PI3K/Akt/Erk信号通路减轻小鼠神经元缺血再灌注损伤

9

作者 刘昊铭 林子诗 叶靖 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期563-570,共8页

目的观察钙/钙调蛋白依赖性激酶Ⅱ(CaMKⅡ)的同工型CaMKⅡγ和CaMKⅡδ对鼠神经元细胞缺血缺氧再灌注损伤的影响,并探究其作用机制。方法分离胚胎期第18天胎鼠大脑用于提取原代神经元,在5%CO_(2)、37℃条件下培养,分为常规培养的对照组... 目的观察钙/钙调蛋白依赖性激酶Ⅱ(CaMKⅡ)的同工型CaMKⅡγ和CaMKⅡδ对鼠神经元细胞缺血缺氧再灌注损伤的影响,并探究其作用机制。方法分离胚胎期第18天胎鼠大脑用于提取原代神经元,在5%CO_(2)、37℃条件下培养,分为常规培养的对照组、空白对照组(si-NT)、CaMKⅡγ敲除组(si-CAMK2G)和CaMKⅡδ敲除组(si-CAMK2D)。研究组神经元转染处理后,更换为无糖培养基,并将其置于缺氧环境中模拟氧糖剥夺(OGD/R)条件,持续1 h,随后复原标准培养环境。通过对神经元裂解物行免疫蛋白印迹检测磷脂酰肌醇-3-激酶/细胞外信号调节激酶(PI3K/Akt/Erk)信号通路构件的表达量,并建立小鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,通过对比假手术组(Sham)(n=25)和MCAO组(n=25)PI3K/Akt/Erk信号通路表达来进行验证。结果si-CAMK2G组的胎鼠神经元细胞在OGD/R 12、24、48、72 h的生存率明显低于si-NT组(P<0.01或0.001),并可逆转OGD/R介导的胎鼠神经元细胞CaMKⅡγ表达上调。si-CAMK2G组和si-CAMK2D组与si-NT组相比,PI3K/Akt/Erk信号通路表达受到明显抑制(P<0.01)。在MCAO模型中,MCAO组小鼠脑CaMKⅡδ和CaMKⅡγ的表达显著增加并激活了PI3K/Akt/Erk信号通路,CaMKⅡδ和CaMKⅡγ,Erk、磷酸化Erk、Akt和磷酸化Akt在MCAO造模成功再灌注后24、48、72和96 h的表达显著高于Sham组再灌注24 h(P<0.05,0.01或0.0001)。结论CaMKⅡγ和CaMKⅡδ在神经元细胞发生缺血缺氧损伤时的神经保护作用可能是通过PI3K/Akt/Erk信号通路介导的。 展开更多

关键词 脑缺血再灌注损伤 钙/钙调蛋白依赖性激酶Ⅱ 神经保护 磷脂酰肌醇-3-激酶 细胞外信号调节激酶 信号通路

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参苓白术散通过ERK/p38 MAPK信号通路干预溃疡性结肠炎大鼠结肠组织AQP3、AQP4的表达 被引量：62

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作者 李姿慧 王键 +2 位作者 蔡荣林 刘晓丽 蒋怀周 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1883-1888,共6页

目的探讨细胞外信号调节激酶/p38丝裂原活化蛋白激酶(ERK/p38MAPK)信号通路在参苓白术散调控脾虚湿困型溃疡性结肠炎大鼠结肠组织水通道蛋白(aquaporin,AQP)3、AQP4表达中的作用。方法将60只Wistar大鼠按照随机数字表均分为正常组、模型... 目的探讨细胞外信号调节激酶/p38丝裂原活化蛋白激酶(ERK/p38MAPK)信号通路在参苓白术散调控脾虚湿困型溃疡性结肠炎大鼠结肠组织水通道蛋白(aquaporin,AQP)3、AQP4表达中的作用。方法将60只Wistar大鼠按照随机数字表均分为正常组、模型组(氯化钠注射液)、参苓白术散组、U0126+参苓白术散组、SB203580+参苓白术散组。除正常组外,脾虚湿困型溃疡性结肠炎大鼠采用2,4,6-三硝基苯磺酸/乙醇灌肠,结合环境与饮食干预复制。14 d后采用蛋白质印迹法检测各组大鼠结肠组织AQP3、AQP4蛋白的表达,实时荧光定量PCR法检测其mRNA表达情况。结果模型组大鼠AQP3、AQP4蛋白表达及其mRNA的表达水平明显低于正常组(P<0.05),参苓白术散组大鼠结肠组织AQP3、AQP4蛋白及mRNA表达较模型组明显升高,组间比较有显著性差异(P<0.05),SB203580+参苓白术散组及U0126+参苓白术散组大鼠结肠组织AQP3、AQP4蛋白及mRNA表达较模型组有较小幅度升高,与正常组和参苓白术散组相比均有显著性差异(P<0.05)。结论参苓白术散可显著改善大鼠结肠组织AQP3、AQP4蛋白及mRNA表达,ERK/p38 MAPK信号通路参与了参苓白术散对脾虚湿困型溃疡性结肠炎大鼠结肠组织AQP3、AQP4表达的调节作用。 展开更多

关键词 参苓白术散 溃疡性结肠炎 细胞外信号调节激酶/p38丝裂原活化蛋白激酶(ERK/p38 MAPK) AQP3 AQP4 1 4-二氨基-2 3-二氰基-1 4-双(邻氨基苯巯基)丁二烯(U0126) 4-(4-氟苯基)-2-(4-甲基亚磺酰基苯基)-5-(4-吡啶基)-1H-咪唑(SB203580)

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沉默GOLPH3基因表达逆转人结肠癌细胞顺铂耐药的研究 被引量：1

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作者 王春晓 邱成志 洪钟时 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期862-868,共7页

背景与目的:化疗是结肠癌的重要治疗方法之一,其方案常含有铂类药物,而化疗耐药会影响结肠癌疗效和预后,其发生机制与基因异常表达有关。高尔基磷酸化蛋白3(Golgi phosphoprotein 3,GOLPH3)是一个癌基因,在结肠癌组织中存在过表达,可促... 背景与目的:化疗是结肠癌的重要治疗方法之一,其方案常含有铂类药物,而化疗耐药会影响结肠癌疗效和预后,其发生机制与基因异常表达有关。高尔基磷酸化蛋白3(Golgi phosphoprotein 3,GOLPH3)是一个癌基因,在结肠癌组织中存在过表达,可促进结肠癌细胞的增殖,与预后不良相关。目前,GOLPH3基因的高表达与结肠癌对铂类耐药的相关性尚不明确。探讨沉默GOLPH3基因逆转人结肠癌HT29细胞对顺铂的化疗耐药效应和机制。方法:HT29细胞分为5组。①对照组:人结肠癌HT29细胞;②转染组:siRNA-GOLPH3转染HT29细胞;③实验组1:经顺铂处理的HT29细胞;④实验组2:经顺铂处理的siRNA-GOLPH3转染HT29细胞;⑤实验组3:经顺铂和细胞外调节蛋白激酶(extracellular signal-regulated protein kinases,ERK)1/2抑制剂PD98059处理的HT29细胞。四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法、平板克隆形成实验检测各组结肠癌HT29细胞增殖及克隆形成能力。蛋白质印迹法(Westernblot)检测GOLPH3、P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、ERK1/2和pERK1/2蛋白的表达。结果:经顺铂处理后,实验组1、实验组2的细胞在波长490 nm处的吸光度(D)值均显著低于对照组(P<0.05),实验组2的D490值显著低于实验组1(P<0.001);实验组1和实验组2的细胞集落数均显著低于对照组(P<0.01),实验组2的细胞集落数显著低于实验组1(P<0.001)。实验组1的P-gp、GOLPH3、pERK1/2蛋白表达量显著高于实验组2(P<0.01);实验组3的P-gp蛋白表达量较实验组1显著降低(P<0.01)。结论:沉默GOLPH3基因可通过抑制丝裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶(mitogen-activated protein kinase/extracellular signal-regulated kinase,MAPK/ERK)信号通路逆转HT29结肠癌细胞对顺铂化疗的耐药性。 展开更多

关键词 高尔基磷酸化蛋白3 结肠癌细胞 丝裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶信号通路 化疗耐药 顺铂

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外源性硫化氢对嗜铬细胞瘤细胞β位淀粉样前体蛋白裂解酶1表达的影响

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作者 代政伟 张华 +3 位作者 孟涛 晏宁 李洁颖 晏勇 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期626-630,共5页

目的观察外源性硫化氢(H2S)对嗜铬细胞瘤细胞(PC12)β位淀粉样前体蛋白裂解酶1(BACE1)表达的影响,并探讨可能涉及的细胞信号机制。方法用不同浓度的硫氢化钠(NaHS)处理体外培养的PC12细胞,利用RT-PCR和Western blot法检测细胞内BACE1mRN... 目的观察外源性硫化氢(H2S)对嗜铬细胞瘤细胞(PC12)β位淀粉样前体蛋白裂解酶1(BACE1)表达的影响,并探讨可能涉及的细胞信号机制。方法用不同浓度的硫氢化钠(NaHS)处理体外培养的PC12细胞,利用RT-PCR和Western blot法检测细胞内BACE1mRNA及蛋白表达;继以LY294002和PD98059分别阻断磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(PI3-K/Ak)t及丝裂酶原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶1/2(MAPK/ERK1/2)通路,Western blot法检测其对NaHS诱导的通路下游蛋白Akt1和ERK1/2磷酸化的影响及其对BACE1蛋白表达变化的调节;ELISA法检测细胞培养液中Aβ42水平的变化。结果 NaHS在实验浓度范围内呈剂量依赖性下调BACE1mRNA及蛋白表达,200μmol/L时最明显,各NaHS组与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05);LY294002抑制NaHS诱导的Akt1蛋白磷酸化,削弱NaHS对BACE1蛋白的下调作用,其表达在LY294002预处理组与NaHS200μmol/L组相比,差异具有统计学意义(P<0.05);而PD98059虽能抑制NaHS导致的ERK1/2蛋白磷酸化,但对其调节BACE1蛋白表达无影响,PD98059预处理组与NaHS200μmol/L组相比,差异无统计学意义(P>0.05);不同处理条件下的Aβ42表达与BACE1变化趋势基本一致。结论外源性H2S下调PC12细胞BACE1表达,其机制可能与PI3-K/Akt信号通路的激活有关,而与MAPK/ERK1/2通路无关。 展开更多

关键词 外源性硫化氢 β位淀粉样前体蛋白裂解酶1 磷脂酰肌醇3-激酶 丝氨酸苏氨酸蛋白激酶 细胞外信号调节激酶1/2

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肠炎清对溃疡性结肠炎大鼠TGF-β_(1)/Smad3/ERK通路的影响 被引量：7

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作者 詹原泉 丛龙玲 +4 位作者 吕永慧 黄雅静 谢英杰 周婉妃 吴宇金 《世界中医药》 CAS 2022年第14期1990-1994,2001,共6页

目的:观察肠炎清对溃疡性结肠炎(UC)大鼠的保护作用及对TGF-β_(1)/Smad3/ERK信号通路的调控作用。方法:将25只雌性SD大鼠随机分为5组:空白对照组、模型组、美沙拉嗪组、肠炎清低剂量组和肠炎清高剂量组,除空白对照组外,其余大鼠均采用2... 目的:观察肠炎清对溃疡性结肠炎(UC)大鼠的保护作用及对TGF-β_(1)/Smad3/ERK信号通路的调控作用。方法:将25只雌性SD大鼠随机分为5组:空白对照组、模型组、美沙拉嗪组、肠炎清低剂量组和肠炎清高剂量组,除空白对照组外,其余大鼠均采用2,4,6三硝基苯磺酸(TNBS)诱导,建立UC模型。造模24 h后,模型组、空白对照组分别用0.9%生理盐水灌胃;美沙拉嗪对照组以30 mg/kg艾迪莎混悬液灌胃;肠炎清高剂量组以147.2 g/kg肠炎清灌胃;肠炎清低剂量组以36.8 g/kg肠炎清灌胃;1次/d,时间固定,持续7 d。检测结肠黏膜组织中转化生长因子(TGF)-β_(1)、Smad3、胞外信号调节激酶(ERK)磷酸化的水平及TGF-β_(1)信号通路活化的程度。结果:模型组ERK表达水平最低,低于溶媒对照组、美沙拉嗪组、肠炎清高剂量组和低剂量组,肠炎清剂量组该指标水平随剂量升高而上升,且高剂量肠炎清组ERK表达水平显著高于模型组。模型组TGF-β_(1)和Smad3高于美沙拉嗪组组、空白对照组和肠炎清低剂量组及高剂量组。结论:肠炎清对UC大鼠肠黏膜具有保护作用,其机制可能与通过下调TGF-β_(1)-Smad3通路,提高ERK表达有关。 展开更多

关键词 肠炎清 大鼠 转化生长因子-β_(1) 信号传导蛋白-3 细胞外信号调节激酶 作用机制 溃疡性结肠炎 信号通路

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Hippo/YAP信号通路与细胞增殖相关信号通路交叉作用的研究进展 被引量：4

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作者 王琪 陈希彦 文勇 《国际口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期614-618,共5页

Hippo/YAP信号通路首次被发现于果蝇中,在哺乳动物中具有高度保守的特性,可通过直接或间接地调节细胞增殖、程序性细胞死亡以起到平衡机体内环境稳态、维持器官大小的作用。YAP作为Hippo信号通路中的一个转录共激活因子,与磷脂酰肌醇3-... Hippo/YAP信号通路首次被发现于果蝇中,在哺乳动物中具有高度保守的特性,可通过直接或间接地调节细胞增殖、程序性细胞死亡以起到平衡机体内环境稳态、维持器官大小的作用。YAP作为Hippo信号通路中的一个转录共激活因子,与磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)、Wnt/β-联蛋白、细胞外信号调节激酶(ERK)1/2等通路中相关分子相互作用,使得Hippo通路与其他增殖调控相关信号通路形成"交通",构成一个复杂的信号通路网,共同调控细胞的增殖。本文就目前对Hippo信号通路中共激活因子YAP与增殖调控信号通路间的交叉影响及其机制的研究进展作一综述。 展开更多

关键词 Hippo/YAP信号通路 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B Wnt/β-联蛋白 细胞外信号调节激酶 增殖

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RSK3及其生物学功能

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作者 王咪 熊鲲 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期9-16,共8页

核糖体S6激酶3(RSK3)具有丝氨酸/苏氨酸激酶活性,在人体组织中广泛表达.RSK3属于90ku的RSK家族,可通过促蛋白磷酸化作用在Ras-MAPK和PI3K-mTOR下游通路中作为重要的一级效应分子参与细胞增殖、细胞周期、细胞存活和分化等多方面的调控.... 核糖体S6激酶3(RSK3)具有丝氨酸/苏氨酸激酶活性,在人体组织中广泛表达.RSK3属于90ku的RSK家族,可通过促蛋白磷酸化作用在Ras-MAPK和PI3K-mTOR下游通路中作为重要的一级效应分子参与细胞增殖、细胞周期、细胞存活和分化等多方面的调控.简述RSK3的结构、表达、细胞中的调控机制与功能及其与疾病之间的关系. 展开更多

关键词 核糖体S6激酶3 细胞外信号调节激酶 磷酸肌醇依赖的蛋白激酶 磷脂酰肌醇3-激酶

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