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白喉毒素(Gly_4Ser)_2-人表皮生长因子融合蛋白的纯化及其特异性细胞毒性研究 被引量：6
1
作者 张国利 吴广谋 +3 位作者 李俊植 岳玉环 李树民 朱平 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期171-172,共2页
关键词 白喉毒素 人表皮生长因子融合蛋白 特异性细胞毒性 氨基酸 DT
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人表皮生长因子融合蛋白在大肠杆菌表达的研究 被引量：1
2
作者 汪炬 余榕捷 +1 位作者 徐丽慧 刘侃 《安徽大学学报（自然科学版）》 CAS 2004年第2期71-74,共4页
在大肠杆菌中高效表达人表皮生长因子(hEGF)。根据大肠杆菌对密码的偏爱性,构建高效表达EGF融合蛋白的菌株,经离子交换层析和凝胶过滤层析两个步骤使产物得到纯化。融合蛋白表达产量为27%,EGF融合蛋白纯化产物纯度为95%以上,促3T3细胞... 在大肠杆菌中高效表达人表皮生长因子(hEGF)。根据大肠杆菌对密码的偏爱性,构建高效表达EGF融合蛋白的菌株,经离子交换层析和凝胶过滤层析两个步骤使产物得到纯化。融合蛋白表达产量为27%,EGF融合蛋白纯化产物纯度为95%以上,促3T3细胞增殖的活性测定为ED50为4.2ng/mL。在pET 3c:BL21(DE3)大肠杆菌表达系统中,以融合蛋白方式表达人表皮生长因子,表达效率高,纯化路线简单,产量较高,适合产业化生产。 展开更多
关键词 表皮生长因子 融合蛋白 大肠杆菌 基因表达 纯化
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人表皮生长因子融合蛋白在干酪乳杆菌中的表达
3
作者 汪舒庆 葛向阳 陈正军 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期70-77,共8页
以干酪乳杆菌作为传递载体,构建表达人表皮生长因子的重组干酪乳杆菌,探讨原位表达特定蛋白的可行性。采用SOE PCR合成人表皮生长因子序列,克隆到干酪乳杆菌表达载体pELWH,构建pELWHhEGF重组质粒,将该质粒电转化干酪乳杆菌宿主,采用West... 以干酪乳杆菌作为传递载体,构建表达人表皮生长因子的重组干酪乳杆菌,探讨原位表达特定蛋白的可行性。采用SOE PCR合成人表皮生长因子序列,克隆到干酪乳杆菌表达载体pELWH,构建pELWHhEGF重组质粒,将该质粒电转化干酪乳杆菌宿主,采用Western blot及间接免疫荧光检测目的蛋白的表达,并通过细胞增殖实验验证目的蛋白的生物学活性。结果表明:在重组菌的细胞表面及培养液上清中均检测到SlpA-hEGF融合蛋白,分子质量约55ku;细胞增殖实验显示SlpA-hEGF融合蛋白及干酪乳杆菌上清均能显著促进NIH/3T3细胞的增殖。 展开更多
关键词 干酪乳杆菌 人表皮生长因子 SlpA-hEGF融合蛋白 细胞增殖
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信号肽-CUB-表皮生长因子结构域包含蛋白1和纽蛋白与心肌梗死患者心肌损伤的关系
4
作者 杨思思 迟永生 +1 位作者 况珊 胡欢欢 《中华老年心脑血管病杂志》 北大核心 2025年第10期1419-1422,共4页
目的采用决策曲线和剂量反应分析信号肽-CUB-表皮生长因子结构域包含蛋白1(signal peptide-CUB-epidermal growth factor-like domain-containing protein 1,SCUBE1)和血清纽蛋白(Vinculin)与老年心肌梗死(acute myocardial infarction,... 目的采用决策曲线和剂量反应分析信号肽-CUB-表皮生长因子结构域包含蛋白1(signal peptide-CUB-epidermal growth factor-like domain-containing protein 1,SCUBE1)和血清纽蛋白(Vinculin)与老年心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)患者经皮冠状动脉介入治疗(percutaneous coronary intervention,PCI)术后心肌损伤的预测价值。方法前瞻性选取2021年1月至2024年1月浙江中医药大学附属湖州市中医院重症医学科收治的老年AMI患者68例为观察组,并同期选择60例健康体检者为对照组;根据随访3个月后是否发生主要心血管不良事件(major adverse cardiovascular events,MACE)将观察组分为MACE组32例和未发生MACE组36例。检测患者血清SCUBE1、Vinculin含量、血清中肌钙蛋白I(troponin I,cTnI)、肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzymes-MB,CK-MB)和肌红蛋白(myoglobin,Myo)。采用Pearson相关性分析SCUBE1、Vinculin与cTnI、CK-MB、Myo表达相关性。采用ROC曲线分析SCUBE及Vinculin对老年AMI患者PCI预后的预测价值。采用限制性立方样条图分析血清SCUBE1和Vinculin与老年AMI患者PCI术后发生MACE事件关联强度的剂量反应。采用决策曲线分析血清SCUBE1和Vinculin对老年AMI患者PCI术后发生MACE事件预测价值。结果观察组cTnI、CK-MB、Myo、SCUBE1和Vinculin表达高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。Pearson相关性分析结果显示,观察组SCUBE1、Vinculin与cTnI、CK-MB、Myo表达呈正相关;发生组血清SCUBE1和Vinculin水平高于未发生组;ROC曲线分析结果显示,血清SCUBE1和Vinculin预测老年AMI患者PCI术后MACE发生的曲线下面积为0.783、0.814,两者联合预测老年AMI患者PCI术后MACE发生的曲线下面积为0.959;血清SCUBE1和Vinculin连续变化与老年AMI患者PCI术后发生MACE事件呈非线性剂量反应关系(r=0.698,r=0.832,P<0.001),血清SCUBE1和Vinculin与老年AMI患者PCI术后发生MACE事件呈显著正相关,老年AMI患者PCI术后发生MACE概率随血清SCUBE1和Vinculin升高而升高;血清SCUBE1和Vinculin对老年AMI患者PCI术后发生MACE事件发生具有一定预测价值。结论SCUBE1和Vinculin与老年AMI患者PCI术后心肌损伤发生存在相关性,且具有较好的预测价值。 展开更多
关键词 ROC曲线 表皮生长因子 纽蛋白 心肌梗死
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核表皮生长因子受体与转录因子YY1协同驱动CEMIP表达促进肝细胞癌侵袭
5
作者 涂丽 刘洋 +3 位作者 于滢 欧阳诗琪 王曾丽 唐小龙 《陆军军医大学学报》 北大核心 2025年第17期1994-2011,共18页
目的揭示核表皮生长因子受体(nuclear epidermal growth factor receptor,nEGFR)通过与转录因子YY1形成复合物协同调控细胞迁移诱导蛋白(cell migration-inducing protein,CEMIP)基因表达的分子机制,并探究nEGFR-YY1-CEMIP信号轴在肝细... 目的揭示核表皮生长因子受体(nuclear epidermal growth factor receptor,nEGFR)通过与转录因子YY1形成复合物协同调控细胞迁移诱导蛋白(cell migration-inducing protein,CEMIP)基因表达的分子机制,并探究nEGFR-YY1-CEMIP信号轴在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)侵袭中的生物学功能。方法将血清饥饿24 h的HCC细胞用100 ng/mL EGF进行处理,设置对照组和不同时间点的EGF处理组,通过Western blot及间接免疫荧光实验(immunofluorescence,IF)检测EGFR的核内表达和定位变化。为明确nEGFR与YY1的相互作用,设置对照组及EGF处理组,采用IF观察核内共定位情况,并通过免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP)验证二者是否存在相互作用。通过高通量测序技术(RNA sequencing,RNA-seq)检测细胞基因组转录水平差异,结合GO功能富集分析和JASPAR数据库预测,最终锁定候选靶基因CEMIP,为验证调控机制构建YY1的siRNA后,联合EGF处理,分为:Control组、EGF组、siYY1组、siYY1+EGF组,通过Western blot和RT-qPCR检测CEMIP蛋白及mRNA水平。为明确nEGFR/YY1结合CEMIP启动子的分子机制,设置对照组和EGF处理组,采用染色质免疫沉淀-定量PCR(chromatin immunoprecipitation-qPCR,ChIP-qPCR)实验检测CEMIP启动子区的富集情况。通过转染野生型EGFR(EGFR-WT)、核定位缺陷突变体(EGFR-dNLS)、YY1过表达质粒(YY1-OE)及功能缺失突变体(YY1-DN),利用荧光素酶报告基因实验检测启动子活性变化。通过划痕愈合实验、Transwell实验检测细胞的迁移侵袭能力,采用ELISA实验检测透明质酸(hyaluronic acid,HA)的含量,并通过Western blot实验检测基质金属蛋白酶(MMP2/9)的含量,评估nEGFR/YY1-CEMIP轴对HCC细胞迁移侵袭的调控作用。通过分析国家生物技术信息中心(National Center for Biotechnology Information,NCBI)公共数据库中HCC患者的CEMIP表达谱,验证其与肿瘤转移风险的潜在关联。结果Western blot和IF检测显示EGF处理可显著诱导EGFR的核易位,并在30 min达到峰值(P<0.001)。Co-IP和IF证明了nEGFR和YY1存在相互作用,且在细胞核内共定位。RNA-seq分析显示,CEMIP表现为差异显著基因。GO富集分析显示CEMIP主要富集于细胞促侵袭等生物学功能。JASPAR预测发现CEMIP启动子区存在YY1的潜在结合区域。Western blot和RT-qPCR实验进一步证实EGF处理可上调CEMIP蛋白和mRNA的水平,而敲低YY1则显著抑制CEMIP的表达,外源性补充EGF能够恢复YY1缺陷细胞的CEMIP表达(P<0.05)。ChIP-qPCR显示nEGFR/YY1复合物特异性富集于CEMIP启动子区域且EGF刺激可以显著增强其结合强度(P<0.001)。荧光素酶报告基因实验证实nEGFR/YY1可以增强CEMIP的启动子活性(P<0.01),而EGFR-dNLS或YY1-DN则无此效应。功能表型实验证明nEGFR/YY1-CEMIP轴通过促进HA分解和上调MMP2/9表达,显著增强HCC细胞的迁移侵袭能力(P<0.05)。基于NCBI数据库分析显示,CEMIP在HCC肿瘤组织中的表达水平显著高于癌旁正常组织(P<0.001),且CEMIP高表达的HCC患者具有更高的转移风险(P<0.001)。结论nEGFR通过与YY1形成转录因子复合物协同激活CEMIP表达促进HCC侵袭。 展开更多
关键词 核表皮生长因子受体 YY1 细胞迁移诱导蛋白 肝细胞癌 肿瘤侵袭
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人表皮生长因子-天花粉蛋白融合蛋白的基因克隆、表达及纯化 被引量：2
6
作者 李咏梅 杨海文 罗仁 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期205-207,共3页
目的构建人表皮生长因子(EGF)-linker-天花粉蛋白(TCS)融合蛋白的表达载体,在大肠杆菌中表达并纯化EGF-linker-TCS融合蛋白。方法用PCR方法扩增EGF及柔性连接肽Linker基因片段,插入质粒PQE30-TCS中,转化至大肠杆菌M15中,表达该融合蛋白(... 目的构建人表皮生长因子(EGF)-linker-天花粉蛋白(TCS)融合蛋白的表达载体,在大肠杆菌中表达并纯化EGF-linker-TCS融合蛋白。方法用PCR方法扩增EGF及柔性连接肽Linker基因片段,插入质粒PQE30-TCS中,转化至大肠杆菌M15中,表达该融合蛋白(EGF-linker-TCS)。表达产物经Ni-NTAAgrose亲和层析柱纯化。结果PQE30-EGF-linker-TCS蛋白在大肠杆菌M15中获得稳定、高效的融合表达。目的蛋白占细胞总蛋白的40%左右,以可溶性形式存在,表达上清柱纯化后纯度达95%以上。结论应用基因工程技术,成功地构建了融合蛋白EGF-linker-TCS的表达载体,表达并纯化了该融合蛋白,为进一步研究其结构功能关系和肿瘤临床应用奠定了基础。 展开更多
关键词 表皮生长因子 天花粉蛋白 重组融合蛋白 纯化
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GST融合蛋白制备表皮生长因子受体抗体 被引量：1
7
作者 阎志勇 吴爱群 +2 位作者 由振东 路长林 何成 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2004年第2期252-254,共3页
目的:探讨制备大量表皮生长因子受体(EGFR)特异性抗体的方法。方法:将编码EGFR的N端肽段的cDNA克隆入表达载体pGEX-4T-3中,转化大肠杆菌BL-21,经IPTG诱导表达后,经亲和层析柱纯化,用该GST融合蛋白免疫BALB/C小鼠,获得免疫血清,以ELISA和... 目的:探讨制备大量表皮生长因子受体(EGFR)特异性抗体的方法。方法:将编码EGFR的N端肽段的cDNA克隆入表达载体pGEX-4T-3中,转化大肠杆菌BL-21,经IPTG诱导表达后,经亲和层析柱纯化,用该GST融合蛋白免疫BALB/C小鼠,获得免疫血清,以ELISA和Western Blot检测抗体滴度。结果:获得GST-PTB融合蛋白纯度大于95％;经免疫小鼠抗血清滴度1∶38 827-1∶190 602,得到大量高滴度的EGFR特异性抗体。结论:用原核系统表达GST融合蛋白直接免疫小鼠可以快速、大量地制备EGFR特异性抗体。 展开更多
关键词 GST融合蛋白 表皮生长因子受体 抗体 EGFR 癌细胞
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血清糖蛋白非转移性黑色素瘤蛋白B对表皮生长因子受体扩增伴随突变的非小细胞肺癌预后的预测作用 被引量：1
8
作者 刘邦卿 李剑锋 +2 位作者 刘晓辉 张劲男 胡亚丽 《中国医科大学学报》 北大核心 2024年第2期127-131,共5页
目的评估游离的糖蛋白非转移性黑色素瘤蛋白B(GPNMB)对表皮生长因子受体(EGFR)扩增伴随突变的非小细胞肺癌(NSCLC)患者的耐药和预后的预测价值。方法选取2018年3月至2019年9月在唐山市人民医院接受治疗的55例EGFR扩增伴随突变的NSCLC患... 目的评估游离的糖蛋白非转移性黑色素瘤蛋白B(GPNMB)对表皮生长因子受体(EGFR)扩增伴随突变的非小细胞肺癌(NSCLC)患者的耐药和预后的预测价值。方法选取2018年3月至2019年9月在唐山市人民医院接受治疗的55例EGFR扩增伴随突变的NSCLC患者作为观察组,患者均应用EGFR酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)作为一线治疗方案;随机选取同期体检中心67例健康人群血液样本作为对照组。比较2组游离GPNMB表达水平;采用t检验或χ2检验分析GPNMB表达和患者临床病理特征的相关性;结合临床疗效,评估其作为耐药标志物的价值。随访患者的无进展生存时间(PFS),并采用多因素Cox回归分析影响EGFR扩增伴随突变NSCLC患者生存的独立危险因素。结果与对照组相比,观察组游离GPNMB表达水平显著升高。观察组游离GPNMB水平和EGFR-TKI的临床疗效显著相关(P=0.016),GPNMB高表达患者的耐药程度更强,PFS也更短(P=0.032)。游离GPNMB高水平(HR=4.029,95%CI:1.942~8.358,P<0.001)是影响患者生存的独立危险因素。结论EGFR扩增伴随突变的NSCLC患者游离GPNMB表达水平显著上调;且其高表达与患者耐药程度的增强及不良预后显著相关,是影响患者生存的独立危险因素。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 糖蛋白非转移性黑色素瘤蛋白B 表皮生长因子受体扩增伴随突变 耐药 预后
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靶向性抗肿瘤融合蛋白-表皮生长因子-腺病毒早期转录区4第4编码蛋白在细胞内的转运及对胞外信号调节激酶磷酸化的影响 被引量：1
9
作者 王存琳 陈虹 +2 位作者 马晓骊 王欣 黄秉仁 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期674-678,797-798,共7页
目的探讨经表皮生长因子受体介导进入肿瘤细胞的融合蛋白表皮生长因子-腺病毒早期转录区4第4编码蛋白(EGF-E4orf4)在细胞内的转运及对胞外信号调节激酶(ERK)磷酸化的影响。方法采用间接免疫荧光结合激光共聚焦显微镜观察融合蛋白在MDA-M... 目的探讨经表皮生长因子受体介导进入肿瘤细胞的融合蛋白表皮生长因子-腺病毒早期转录区4第4编码蛋白(EGF-E4orf4)在细胞内的转运及对胞外信号调节激酶(ERK)磷酸化的影响。方法采用间接免疫荧光结合激光共聚焦显微镜观察融合蛋白在MDA-MB-231和BGC823细胞中的转运和代谢特点,Western blot检测融合蛋白引起的细胞内ERK磷酸化水平的改变。结果融合蛋白可在细胞内累积,向细胞核周围聚集,并与细胞早期内体和晚期溶酶体共定位;融合蛋白能快速触发细胞内ERK发生磷酸化,磷酸化水平在10 min时最强,之后逐渐回落至刺激前水平,活化ERK的能力较表皮生长因子弱。结论融合蛋白EGF-E4orf4在细胞内经内体-溶酶体途径发生缓慢降解;在MDA-MB-231和BGC823细胞中,融合蛋白的作用特点存在明显差异,可能是导致融合蛋白对二者抑瘤率不同的原因之一。 展开更多
关键词 融合蛋白-表皮生长因子-腺病毒早期转录区4第4编码蛋白 内体-溶酶体途径 胞外信号调节激酶
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表皮生长因子、基质金属蛋白酶与汗腺发生相关性的实验研究 被引量：21
10
作者 李建福 付小兵 盛志勇 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期383-385,共3页
探讨胚胎期汗腺发生过程中表皮生长因子(EGF)、基质金属蛋白酶 2 (MMP 2 )和MMP 7与汗腺发生的相关性 ,为诱导表皮干细胞向汗腺细胞定向分化奠定基础。分别取 13～31周胚龄人胎儿背部全层皮肤 ,以免疫组织化学染色法 (SP法 )动态观察汗... 探讨胚胎期汗腺发生过程中表皮生长因子(EGF)、基质金属蛋白酶 2 (MMP 2 )和MMP 7与汗腺发生的相关性 ,为诱导表皮干细胞向汗腺细胞定向分化奠定基础。分别取 13～31周胚龄人胎儿背部全层皮肤 ,以免疫组织化学染色法 (SP法 )动态观察汗腺胚芽细胞或汗腺细胞及其周围局部基质对基质金属蛋白酶MMP 2、MMP 7与EGF及汗腺胚芽细胞或汗腺细胞对细胞角蛋白 7(K7)蛋白质表达情况 ,并以原位杂交法动态观察汗腺胚芽细胞或汗腺细胞MMP 2、MMP 7的mRNA信号特征。结果显示 ,MMP 2、MMP 7、EGF在14～2 0周于汗腺细胞及其周围局部基质蛋白质表达逐渐加强 ,2 0～ 2 2周达峰值 ,并维持至所观察的全时段 ;MMP 2、MMP 7的mRNA信号强弱在汗腺胚芽细胞或汗腺细胞中与其蛋白质表达相吻合 ;K7始于 14～ 16周在汗腺芽细胞内表达 ,并持续存在。研究表明 ,汗腺于胚龄 14～ 16周开始发生 ,至第 2 4周基本成熟 ;汗腺发生与MMPs所致细胞外基质改建。 展开更多
关键词 肝腺发生 表皮生长因子 基质金属蛋白酶 烧伤 动物实验
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表皮生长因子受体及HER-2/neu蛋白在胃癌中的表达和意义 被引量：12
11
作者 王士娜 王星 王翠芳 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期829-832,共4页
目的探讨表皮生长因子受体(EGFR)、HER-2/neu蛋白在胃癌中的表达及其与预后的关系。方法回顾性分析2006年11月至2013年11月我院收治的90例胃癌患者(观察组)的临床资料,另选取正常胃组织50例作为对照组。观察2组EGFR、HER-2/neu蛋白的表... 目的探讨表皮生长因子受体(EGFR)、HER-2/neu蛋白在胃癌中的表达及其与预后的关系。方法回顾性分析2006年11月至2013年11月我院收治的90例胃癌患者(观察组)的临床资料,另选取正常胃组织50例作为对照组。观察2组EGFR、HER-2/neu蛋白的表达情况,分析胃癌组织中EGFR、HER-2/neu蛋白表达和临床病理特征的关系。结果观察组EGFR、HER-2/neu蛋白表达阳性率高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。EGFR、HER-2/neu蛋白表达和胃癌患者的性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤直径无相关性(P>0.05),而与胃癌分化程度、临床分期、浸润深度、淋巴结转移、远处转移密切相关,差异均有统计学意义(P<0.05)。EGFR与HER-2/neu表达呈正相关。结论 EGFR、HER-2/neu蛋白的表达与胃癌的发生发展密切相关。EGFR与HER-2/neu的表达呈正相关。 展开更多
关键词 表皮生长因子受体 HER-2/NEU 蛋白 胃癌 表达 预后
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层粘连蛋白和表皮生长因子对兔角膜内皮细胞周期的影响 被引量：15
12
作者 李姝燕 吴静 +2 位作者 郝念 徐锦堂 赵松滨 《眼科新进展》 CAS 2004年第1期9-11,共3页
目的　观察层粘连蛋白和表皮生长因子单独及联合应用对兔角膜内皮细胞周期的影响。方法　体外培养角膜内皮细胞分为对照组、层粘连蛋白组、表皮生长因子 (EGF)组和联合应用组 ,倒置显微镜观察各组细胞形态及数目变化 ;计数 0、12、2 4、... 目的　观察层粘连蛋白和表皮生长因子单独及联合应用对兔角膜内皮细胞周期的影响。方法　体外培养角膜内皮细胞分为对照组、层粘连蛋白组、表皮生长因子 (EGF)组和联合应用组 ,倒置显微镜观察各组细胞形态及数目变化 ;计数 0、12、2 4、36h的各组细胞数目并绘制细胞生长曲线 ;流式细胞技术检测各组细胞周期。结果　倒置显微镜观察及细胞生长曲线显示 ,与对照组相比 ,层粘连蛋白组、EGF组和联合应用组细胞数目明显增多 ,其中联合应用组最为显著 ;细胞周期检测结果显示 ,层粘连蛋白组、EGF组和联合应用组G0～G1期细胞比例显著下降 (P <0 .0 5 ) ,G2～M期细胞比例显著提高 (P <0 .0 5 ) ;EGF组和联合应用组S期细胞比例显著提高 (P <0 .0 5 ) ;联合应用组与层粘连蛋白组相比 ,G0～G1期细胞比例显著下降 (P <0 .0 5 )。结论　层粘连蛋白和表皮生长因子单独及联合应用都可明显促进角膜内皮细胞分裂增生 ,且联合应用有协同作用。 展开更多
关键词 表皮生长因子 层粘连蛋白 角膜内皮细胞 细胞周期 细胞培养
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小ras同源蛋白Ⅰ基因在胰腺癌中的抑癌作用及其对表皮生长因子-Ras-Raf-促分裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶信号转导通路的影响 被引量：3
13
作者 鲁嘉 钱家鸣 +2 位作者 杨红 李景南 徐峰极 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期197-201,共5页
目的探讨抑癌蛋白小ras同源蛋白I(ARHI)转染对胰腺癌细胞Panc-1细胞增殖的影响,评估其对表皮生长因子(EGF)-Ras通路相关信号蛋白表皮生长因子受体(EGFR)、细胞外信号调节激酶(ERK)1/2、pan-Ras的作用。方法采用重组质粒pIRES2-EGFP-ARH... 目的探讨抑癌蛋白小ras同源蛋白I(ARHI)转染对胰腺癌细胞Panc-1细胞增殖的影响,评估其对表皮生长因子(EGF)-Ras通路相关信号蛋白表皮生长因子受体(EGFR)、细胞外信号调节激酶(ERK)1/2、pan-Ras的作用。方法采用重组质粒pIRES2-EGFP-ARHI瞬时转染Panc-1细胞,观察EGF刺激下ARHI基因对细胞增殖的影响。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测ARHI基因对细胞膜和细胞质中EGFR表达情况的影响,Western blot法检测不同EGF浓度刺激下ARHI蛋白的表达对Panc-1细胞内EGF-EGFR-Ras-Raf-MAPK/ERK1/2通路蛋白pan-Ras和P-ERK的影响,并与未转染Panc-1细胞进行比较。结果转染pIRES2-EGFP-ARHI后,Panc-1细胞增殖显著受抑。转染组和未转染组Panc-1细胞中EGFR的表达不存在明显差异,但受EGF作用的影响。转染组pan-Ras表达显著低于未转染组(P<0.05)。以50 ng/ml EGF刺激Panc-1瞬时转染细胞,结果显示在24 h内P-ERK1/2有短暂激活,长期(72 h内)则呈下降趋势。结论 ARHI和EGF可能共同作用于EGF-EGFR-Ras-Raf-MAPK/ERK通路,影响EGFR、pan-Ras和P-ERK表达。 展开更多
关键词 小ras同源蛋白I 表皮生长因子 表皮生长因子受体 RAS 胰腺癌
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乳腺癌患者血清糖类抗原153、E-钙黏蛋白、表皮生长因子受体水平检测的临床意义 被引量：13
14
作者 陈国强 朱圣娇 +2 位作者 桂瑞丰 李炎 陈锐 《中国全科医学》 CAS 北大核心 2019年第A01期71-74,共4页
目的探究乳腺癌患者血清糖类抗原153(CA153)、E-钙黏蛋白(E-cad)、表皮生长因子受体(EGFR)水平检测的临床意义。方法回顾性分析黄冈市中心医院168例乳腺癌患者临床资料(乳腺癌组),并收集154例行手术治疗的乳腺良性肿瘤患者临床资料(乳... 目的探究乳腺癌患者血清糖类抗原153(CA153)、E-钙黏蛋白(E-cad)、表皮生长因子受体(EGFR)水平检测的临床意义。方法回顾性分析黄冈市中心医院168例乳腺癌患者临床资料(乳腺癌组),并收集154例行手术治疗的乳腺良性肿瘤患者临床资料(乳腺良性肿瘤组)及152例健康体检者相关资料(健康对照组)。比较3组血清CA153、E-cad、EGFR水平有无差异,利用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清CA153、E-cad、EGFR诊断乳腺癌的应用价值;并分析乳腺癌临床病理特征与血清CA153、E-cad、EGFR表达水平的关系。结果乳腺癌组血清CA153、E-cad、EGFR水平高于乳腺良性肿瘤组、健康对照组(P<0.05),且乳腺良性肿瘤组血清CA153、E-cad、EGFR水平高于健康对照组(P<0.05)。ROC曲线结果显示,血清CA153、E-cad、EGFR对乳腺癌均具有较高的诊断效能。TNM分期较高、组织学分级较高及伴淋巴结转移的乳腺癌患者血清CA153、E-cad、EGFR水平高于TNM分期较低、组织学分级较低和无淋巴结转移者(P<0.05)。结论血清CA153、E-cad、EGFR的检测在乳腺癌诊断及临床病理特征评估中有重要作用,于临床乳腺癌诊疗工作有利。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 血清糖类抗原153 E钙黏着糖蛋白类 表皮生长因子受体 病理特征
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大肠癌表皮生长因子受体和p53蛋白表达与临床病理特征和预后的关系 被引量：3
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作者 庄小强 袁世珍 +2 位作者 王晓怀 赖日权 罗祝泉 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第3期206-209,共4页
为了研究大肠癌表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）和ｐ５３蛋白表达与病理特征和预后的关系，应用免疫组化检测ＥＧＦＲ和ｐ５３在６１例大肠癌中的表达。结果提示：正常大肠粘膜未发现ＥＧＦＲ和ｐ５３阳性表达，而两者在大肠癌均有较高表... 为了研究大肠癌表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）和ｐ５３蛋白表达与病理特征和预后的关系，应用免疫组化检测ＥＧＦＲ和ｐ５３在６１例大肠癌中的表达。结果提示：正常大肠粘膜未发现ＥＧＦＲ和ｐ５３阳性表达，而两者在大肠癌均有较高表达（７７．０４％和５５．７５％）。ＥＧＦＲ表达与大肠癌Ｄｕｋｅｓ分期有关（Ｐ＜０．０５）。ｐ５３表达与大肠癌分化程度及Ｄｕｋｅｓ分期有关（Ｐ＜０．０５）。大肠癌生存率随ＥＧＦＲ和ｐ５３表达增高而降低，其中两者４年生存率＞６５％表达组均明显低于＜２５％组（Ｐ＜０．０５），ＥＧＦＲ－ＬＩ和ｐ５３－ＬＩ与生存期均有明显负相关。结果表明：ＥＧＦＲ和ｐ５３表达与大肠癌的进展程度有关，该两项指标对大肠癌临床诊治和预后的评估有重要价值。 展开更多
关键词 大肠肿瘤 表皮生长因子 受体 P53蛋白 病理学
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表皮生长因子受体调控的人鼻咽癌细胞系CNE2分泌蛋白质的筛选 被引量：5
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作者 梁可 陈主初 +7 位作者 易红 李建玲 张鹏飞 李茂玉 李萃 冯雪萍 彭芳 肖志强 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第1期100-106,共7页
为筛选表皮生长因子受体(epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR)调控的鼻咽癌(nasopharyngealcarcinoma,NPC)细胞的分泌蛋白质,揭示EGFR在NPC发病中的作用机制,采用无血清培养法培养NPC细胞系CNE2,并用转化生长因子(transforminggrowthfa... 为筛选表皮生长因子受体(epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR)调控的鼻咽癌(nasopharyngealcarcinoma,NPC)细胞的分泌蛋白质,揭示EGFR在NPC发病中的作用机制,采用无血清培养法培养NPC细胞系CNE2,并用转化生长因子(transforminggrowthfactor-α,TGF-α)刺激CNE2细胞24h作为实验组,对照组CNE2细胞不用TGF-α刺激.超滤法脱盐并浓缩两组细胞的培养上清制备分泌蛋白,采用双向凝胶电泳技术(two-dimensionalelectrophoresis,2-DE)分离两组细胞的分泌蛋白,PDquest图像分析软件识别差异表达的蛋白质点,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assistedlaserdesorption/ionizationtimeofflightmassspectrometry,MALDI-TOF-MS)鉴定差异表达蛋白.建立了实验组和对照组CNE2细胞分泌蛋白的2-DE图谱,图像分析识别了22个差异蛋白质点,质谱鉴定了8个非冗余蛋白质,其功能涉及肿瘤细胞侵袭转移、细胞凋亡和增殖,为进一步揭示EGFR在NPC发病中的作用及其机制奠定了基础. 展开更多
关键词 鼻咽癌 CNE2细胞 表皮生长因子受体(EGFR) 分泌蛋白质组 二维凝胶电泳 质谱
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抗菌肽和人酸性成纤维细胞生长因子融合蛋白在毕赤酵母中的表达及其活性鉴定 被引量：5
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作者 苏志坚 吴晓萍 +4 位作者 郑青 黄亚东 庞实锋 冯雅 李校堃 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期63-68,共6页
目的 :构建和表达一种抗菌肽和人酸性成纤维细胞生长因子的融合蛋白 ,在创伤皮肤表面应用时能裂解成有功能的抗菌肽和人酸性成纤维细胞生长因子 ,预防伤口感染和促进皮肤修复。方法 :利用PCR技术分别扩增出带有凝血酶切割位点的天蚕素... 目的 :构建和表达一种抗菌肽和人酸性成纤维细胞生长因子的融合蛋白 ,在创伤皮肤表面应用时能裂解成有功能的抗菌肽和人酸性成纤维细胞生长因子 ,预防伤口感染和促进皮肤修复。方法 :利用PCR技术分别扩增出带有凝血酶切割位点的天蚕素杂合肽基因和人酸性成纤维细胞生长因子基因。再将两者作为模板 ,用PCR方法扩增出编码融合蛋白的DNA。将该DNA片段插入到载体pPICZαA中 ,并利用电转法将质粒转入毕赤酵母smd116 8中 ,Zeocin抗性筛选重组转化子。甲醇诱导 96h ,SDS PAGE电泳检测融合蛋白的表达 ,并用Western blot杂交检测融合蛋白的免疫原性。利用肝素亲和层析纯化融合蛋白 ,同时检测融合蛋白的抑菌和促3T3Bal/b细胞分裂活性。结果 :筛选出能表达相对分子质量约为 19kD融合蛋白的重组转化株 ,SDS PAGE电泳检测显示甲醇诱导 96h后 ,融合蛋白表达量达到最高 ,且能与人酸性成纤维细胞生长因子抗体产生免疫反应。融合蛋白没有抑菌活性 ,而裂解产物则具有抑菌活性。此外 ,融合蛋白的促细胞分裂活性与野生型人酸性成纤维细胞生长因子相比没有明显的降低。结论 :获得含凝血酶切割位点的抗菌肽和人酸性成纤维细胞生长因子的融合蛋白 ,并在毕赤酵母中实现了表达。融合蛋白的裂解产物具有抑菌活性。 展开更多
关键词 抗菌肽 人酸性成纤维细胞生长因子 融合蛋白 毕赤酵母 构建 表达
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尖锐湿疣组织中蛋白酪氨酸磷酸酶-1和表皮生长因子受体的表达 被引量：4
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作者 肖汉龙 陶娟 +3 位作者 刘辉峰 安湘杰 王育珏 涂亚庭 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期458-460,共3页
目的:探讨蛋白酪氨酸磷酸酶-1(SHP-1)和表皮生长因子受体(EGFR)在尖锐湿疣组织中的表达及意义。方法:采用免疫组化SP法检测30例尖锐湿疣患者组织和20例正常人包皮组织中SHP-1和EGFR的表达。结果:①尖锐湿疣组织中SHP-1的阳性表达率与正... 目的:探讨蛋白酪氨酸磷酸酶-1(SHP-1)和表皮生长因子受体(EGFR)在尖锐湿疣组织中的表达及意义。方法:采用免疫组化SP法检测30例尖锐湿疣患者组织和20例正常人包皮组织中SHP-1和EGFR的表达。结果:①尖锐湿疣组织中SHP-1的阳性表达率与正常对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);但阳性表达强度显著低于正常对照组(P<0.01);②尖锐湿疣组织中EGFR的阳性表达强度显著高于正常对照组(P<0.01);③尖锐湿疣组织中SHP-1和EGFR的表达呈负相关。结论:SHP-1和EGFR在尖锐湿疣组织中异常表达,可能与尖锐湿疣细胞的过度增殖有关。 展开更多
关键词 尖锐湿疣 蛋白酪氨酸磷酸酶-1 表皮生长因子受体
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钙黏蛋白与表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂治疗肝细胞癌敏感性的相关性 被引量：3
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作者 邢荣春 郑军 +4 位作者 陈平 郑卫红 刘伟 何政 姚汝铖 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期915-919,共5页
目的探讨钙黏蛋白(E-cadherin)表达在表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)治疗肝细胞癌耐药形成中的作用。方法选取常见的4种肝细胞癌细胞HepG2、BEL-7404、SK-HEP-1和MHCC97,用蛋白质印迹法检测这4种肝癌细胞中E-cadherin的蛋... 目的探讨钙黏蛋白(E-cadherin)表达在表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)治疗肝细胞癌耐药形成中的作用。方法选取常见的4种肝细胞癌细胞HepG2、BEL-7404、SK-HEP-1和MHCC97,用蛋白质印迹法检测这4种肝癌细胞中E-cadherin的蛋白表达,MTT法检测E-cadherin的表达与肝癌细胞EGFR-TKI治疗抑制率的相关性。结果 4种肝癌细胞中HepG2、BEL-7404表达E-cadherin呈阳性并对EGFR-TKI治疗敏感,PD153035和吉非替尼两种EGFR-TKI的药物浓度与肝癌细胞HepG2、BEL-7404的生存率之间存在相关性(P<0.05);然而,肝癌细胞SK-HEP-1和MHCC97中E-cadherin表达阴性并对EGFR-TKI治疗耐药,PD153035和吉非替尼两种药物浓度与肝癌细胞MHCC97、SK-HEP-1的生存率之间不存在相关性(P>0.05)。另外,E-cadherin表达阴性细胞SK-HEP-1转染E-cadherin目的基因后与转入空载体的肝癌细胞相比,EGFR-TKI治疗的敏感性上调(P<0.05)。结论 E-cadherin在调节EGFR分子靶向治疗的敏感性方面起重要作用。 展开更多
关键词 钙黏蛋白 表皮生长因子 酪氨酸激酶抑制剂 肝细胞癌 肿瘤抗药性
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G蛋白偶联雌激素受体1、表皮生长因子受体和趋化因子受体1在甲状腺乳头状癌中的表达及意义 被引量：5
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作者 唐萃 杨磊 +2 位作者 王旎 杨俊艳 刘智敏 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1317-1321,共5页
目的探讨G蛋白偶联雌激素受体1(G protein-coupled estrogen receptor1,GPER1)、表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)和趋化因子受体1(chemokine receptor1,CXCR1)在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,P... 目的探讨G蛋白偶联雌激素受体1(G protein-coupled estrogen receptor1,GPER1)、表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)和趋化因子受体1(chemokine receptor1,CXCR1)在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)组织中的表达及意义。方法甲状腺乳头状癌68例、结节性甲状腺肿42例,采用免疫组织化学S-P法检测GPER1、EGFR和CXCR1的表达,分析其与患者临床病理特征的关系,以及三者间表达的相关性。结果在PTC组织中,GPER1、EGFR和CXCR1的表达阳性率分别为76.5%、66.2%、64.7%,明显高于结节性甲状腺肿组的21.4%、16.7%和11.9%(P<0.01);GPER1、EGFR和CXCR1在PTC中的表达与颈部淋巴结转移相关(P<0.05),而与其他临床病理特征(年龄、性别、肿瘤大小及TNM分期)无相关性(P>0.05);在PTC及PTC淋巴转移癌组织中,GPER1与EGFR的表达呈显著正相关(r=0.262,P=0.031;r=0.542,P=0.002)、GPER1与CXCR1的表达也呈显著正相关(r=0.276,P=0.025;r=0.483,P=0.006)。结论 GPER1、EGFR和CXCR1的两两共表达与PTC的发生、发展密切相关,三者间可能存在一种相互作用。 展开更多
关键词 甲状腺乳头状癌 G蛋白偶联雌激素受体1 表皮生长因子受体 趋化因子受体1
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