基因芯片与生物信息学 被引量：1

1

作者 赵忠良 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 2000年第5期370-371,共2页

关键词 生物信息学 基因芯片 遗传信息

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全反式维甲酸诱导前列腺癌细胞系DU-145凋亡的分子机理 被引量：1

2

作者 邵晨 邵国兴 +4 位作者 王禾 陈宝琦 贺大林 朱峰 赵忠良 《西安医科大学学报》 CAS CSCD 2000年第3期247-250,共4页

目的　克隆全反式维甲酸诱导前列腺癌细胞系 DU- 1 45细胞产生凋亡的相关基因。探讨维甲酸诱导前列腺癌细胞产生凋亡的分子机理。方法　应用全反式维甲酸诱导前列腺癌细胞系DU- 1 45细胞凋亡 ,采用基于 PCR的改良消减杂交技术克隆与凋... 目的　克隆全反式维甲酸诱导前列腺癌细胞系 DU- 1 45细胞产生凋亡的相关基因。探讨维甲酸诱导前列腺癌细胞产生凋亡的分子机理。方法　应用全反式维甲酸诱导前列腺癌细胞系DU- 1 45细胞凋亡 ,采用基于 PCR的改良消减杂交技术克隆与凋亡相关的基因。结果　在前列腺癌 DU- 1 45细胞凋亡过程中 ,有大量肿瘤坏死因子 (TNF)的表达 ,同时 ,克隆出 c- erb B- 2基因。结论　TNF及 c- erb B- 2基因在由全反式维甲酸诱导的前列腺癌细胞系 DU- 1 展开更多

关键词 前列腺癌 全反式维甲酸 TNF DU-145细胞

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抗人CD_3单链抗体基因的构建及序列分析 被引量：12

3

作者 白玉杰 杨安钢 +3 位作者 苏成芝 王国华 王方 茹小荣 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1996年第3期6-11,共6页

本文在已克隆抗人ＣＤ３抗体ＶＨ和Ｖｋ基因的基础上，设计并合成了ＰＣＲ引物。两个外侧引物分别含有ＥｃｏＲＩ和ＳａｌＩ酶切位点及起始码和终止码序列，４个内侧引物各含部分连接肽基因序列。用加端ＰＣＲ分别在ＶＨ基因３＇端和Ｖ... 本文在已克隆抗人ＣＤ３抗体ＶＨ和Ｖｋ基因的基础上，设计并合成了ＰＣＲ引物。两个外侧引物分别含有ＥｃｏＲＩ和ＳａｌＩ酶切位点及起始码和终止码序列，４个内侧引物各含部分连接肽基因序列。用加端ＰＣＲ分别在ＶＨ基因３＇端和Ｖｋ基因５＇端延伸部分连接肽基因序列，回收后混合运火；应用重叠延伸拼接法，将ＶＨ和Ｖｋ基因通过Ｌｉｎｋｅｒ序列串联为单链抗体基因；利用ＰＣＲ产物两端预先设计的ＳａｌＩ和ＥｃｏＲＩ酶切位点，将其克隆到ｐＵＣ１９质粒中，筛选到阳性克隆。经双脱氧终止法序列测定：ＶＨ和ＶＫ基因及Ｌｉｎｋｅｒ序列均正确，为用基因工程技术生产单链抗体奠定了基础。 展开更多

关键词 单链 抗体 基因 聚合酶链反应 CD3 构建

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中国南海海绵提取物renierol对黄嘌呤氧化酶的抑制作用 被引量：9

4

作者 尚雁君 郭跃伟 +5 位作者 黄才国 贾睿 许强芝 魏善建 焦炳华 张建荣 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期25-27,共3页

目的:本实验的目的是探讨中国南海海绵提取物renierol对黄嘌呤氧化酶的抑制作用及对小鼠高尿酸血症的影响。方法:从海绵中分离提取renierol成分,将20、40、60μg/ml renierol或1μg/ml阳性对照别嘌呤醇(1μg/ml),分别加入黄嘌呤溶液(50... 目的:本实验的目的是探讨中国南海海绵提取物renierol对黄嘌呤氧化酶的抑制作用及对小鼠高尿酸血症的影响。方法:从海绵中分离提取renierol成分,将20、40、60μg/ml renierol或1μg/ml阳性对照别嘌呤醇(1μg/ml),分别加入黄嘌呤溶液(50μmol/ml)和0.1 U/ml黄嘌呤氧化酶中,利用5 min超氧离子生成量来测定黄嘌呤氧化酶活性(NBT显色法)。再将20、40、60μg/ml renierol或100 U/ml阳性对照SOD加入25℃预热过的邻苯三酚,在波长420 nm处测定吸光值,观察renierol对自由基的直接清除作用。建立尿酸酶抑制剂氧嗪酸钾造成小鼠高尿酸血症模型,并给高、中、低剂量renierol组小鼠口服10、203、0 mg.kg-1renierol,别嘌呤醇组给药量为2 mg.kg-1,用全自动生化分析仪测定实验鼠的血清尿酸值,观察renierol体内降尿酸作用。结果:Renierol体外是黄嘌呤氧化酶的竞争性抑制剂,其IC50为1.36μg.ml-1,在体内也有明显的降尿酸作用。结论:Renierol通过抑制黄嘌呤氧化酶来降血尿酸。 展开更多

关键词 renierol 海绵 海洋生物学 黄嘌呤氧化酶 高尿酸血症 抑制作用

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一种双顺反子表达载体的构建及应用的研究 被引量：8

5

作者 刘新平 陈苏民 +4 位作者 陈南春 赵忠良 柴玉波 崔有宏 薛泳涛 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1996年第2期156-159,共4页

将表达载体ｐＥＣ３４中的一段寡核苷酸序列，其中包括翻译增强子序列、ＳＤ序列、终止码、起始码及两端的限制性内切酶位点，插入ＧＳＴ基因后，构建成双顺反子的表达载体．利用此载体表达了非融合的人骨形成蛋白２Ａ（ｈＢＭＰ２Ａ）... 将表达载体ｐＥＣ３４中的一段寡核苷酸序列，其中包括翻译增强子序列、ＳＤ序列、终止码、起始码及两端的限制性内切酶位点，插入ＧＳＴ基因后，构建成双顺反子的表达载体．利用此载体表达了非融合的人骨形成蛋白２Ａ（ｈＢＭＰ２Ａ）和人骨形成蛋白３（ｈＢＭＰ３）Ｃ端肽段，将第一顺反子基因（ＧＳＴ基因）切小到原来的１／３时，则位于下游的第二顺反子基因编码的蛋白质在大肠杆菌中的表达量增加一倍。 展开更多

关键词 双顺反子 基因表达 表达载体

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氧化修饰的β_2-糖蛋白-1诱导抗心磷脂抗体的产生 被引量：7

6

作者 时彤 魏征人 +1 位作者 李晓梅 杨翰仪 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第7期359-360,共2页

目的：探讨蛋白质的氧化修饰与体内抗磷脂抗体产生的关系。方法：首先，在体外以次黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶氧化系统氧化大鼠β_2-GP1，然后以氧化的β_2-GP1（oxβ_2－GP1）免疫同种大鼠，最后以ELISA方法检测被免疫大鼠β_2-GP1血清中的... 目的：探讨蛋白质的氧化修饰与体内抗磷脂抗体产生的关系。方法：首先，在体外以次黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶氧化系统氧化大鼠β_2-GP1，然后以氧化的β_2-GP1（oxβ_2－GP1）免疫同种大鼠，最后以ELISA方法检测被免疫大鼠β_2-GP1血清中的抗心磷脂抗体（ACA）。结果：氧化的β_2-GP1免疫的大鼠血清中产生高滴度的ACA。结论：β_2－GP1的氧化修饰在ACA的产生上可能起十分重要的作用。 展开更多

关键词 β2-糖蛋白1 抗磷脂抗体综合征 氧化修饰 ACA

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EphB2胞外不同结构域在酵母双杂交系统中自激活作用的检测 被引量：4

7

作者 张晓光 韩月恒 +3 位作者 韩景田 杨敏 药立波 刘新平 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期137-137,共1页

关键词 EPHB2 酵母双杂交系统 pGBT9 配体 自激活作用

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伴有染色体异常白血病患者FLT3基因突变检测的临床意义 被引量：5

8

作者 王杰 李树 王彤 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第4期700-704,共5页

本研究旨在探讨伴有染色体异常急性髓系白血病患者FLT3跨膜区内部串联重复突变检测的临床意义。用R显带染色体核型技术分析125例AML患者的细胞核型;采用PCR联合序列测定检测伴有或不伴有染色体异常的AML患者FLT3基因突变情况。结果表明:... 本研究旨在探讨伴有染色体异常急性髓系白血病患者FLT3跨膜区内部串联重复突变检测的临床意义。用R显带染色体核型技术分析125例AML患者的细胞核型;采用PCR联合序列测定检测伴有或不伴有染色体异常的AML患者FLT3基因突变情况。结果表明:125例患者中46例证实存在不同类型染色体异常,总检出率为36.8%,各亚型检出率分别为M057.14%、M155.56%、M238.71%、M350.0%、M450.0%、M530.77%、M6/M710.0%和M718.75%。染色体异常的类型以t(16,21)最多,为9例,占19.78%;其次分别为t(8,21)7例,占15.22%;t(4,11)6例,占13.04%。同时发现了3例国内较少见的t(6,9)染色体异常,占6.52%。无染色体异常79例患者中56例FLT3基因表达阳性,阳性率为70.89%。46例伴有染色体异常患者中31例FLT3基因表达阳性,阳性率为67.39%,两者无显著性差异(p(0.05)。在两组患者中FLT3/ITD基因突变阳性率分别为11.39%和24.09%,两者有显著性差异(p<0.05)。临床资料显示,伴有和不伴有染色体异常的两组患者外周血白细胞计数、Hb计数、骨髓中白细胞比例均无显著性差异(p(0.05);伴有或不伴有染色体异常FLT3/ITD阳性组绝大多数短期内死亡,两组间死亡率无显著性差异(p(0.05),但伴有染色体异常FLT3/ITD阳性组患者的生存期更短,两者有显著性差异(p<0.05)。结论:同时伴有染色体异常和FLT3/ITD突变患者预后较差,FLT3/ITD突变可以作为染色体异常AML患者预后不良的重要标志。 展开更多

关键词 急性髓性白血病 染色体异常 FLT3/ITD突变 临床意义

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FLT3基因动态监测在急性髓系白血病治疗中的应用 被引量：2

9

作者 李树 王彤 +2 位作者 王杰 李军 张璐 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第4期705-708,共4页

微小残留病(Minute Residual Disease,MRD)是急性髓系白血病(Acute myeloid leukaemia,AML)复发和妨碍长期无病生存率的重要原因。本研究旨在探讨FLT3基因在AML发病中的作用及对微小残留病(MRD)检测的意义。应用PCR技术检测了125例AML... 微小残留病(Minute Residual Disease,MRD)是急性髓系白血病(Acute myeloid leukaemia,AML)复发和妨碍长期无病生存率的重要原因。本研究旨在探讨FLT3基因在AML发病中的作用及对微小残留病(MRD)检测的意义。应用PCR技术检测了125例AML患者在化疗与异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)治疗前后FLT3基因的表达,并对FLT3基因阳性者进行了随访观察。结果表明:PCR检测FLT3基因的灵敏度为10-4;AML初诊患者中FLT3基因的阳性表达率为69.6%;完全缓解(CR)患者FLT3表达基因阳性表达率44.90%,FLT3转为阴性者占48.98%;FLT3表达无改变者占6.12%;复发者FLT3基因表达转为阳性,而未缓解者FLT3持续阳性,治疗前FLT3阳性AML患者完全缓解率低于FLT3基因表达阴性患者,两者有显著性差异(p<0.05)。获得CR的FLT3阳性AML患者的复发率显著高于FLT3阴性患者(p<0.05)。结论:FLT3基因表达与白血病发生有关,PCR动态检测AML患者治疗前后FLT3表达水平,可作为判断AML白血病预后和监测微量残留病的一项指标。 展开更多

关键词 急性髓系白血病 FLT3基因 MRD 白血病预后 PCR

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酪氨酸激酶受体Eph亚族的研究进展 被引量：3

10

作者 张晓光 药立波 苏成芝 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1999年第1期15-19,共5页

酪氨酸激酶受体（ＲＴＫ）参与细胞生长、分化、胚胎发育及细胞内信号传递等过程，具有相当重要的生理功能．目前已发现５０多种ＲＴＫ基因分属于１４种亚族，Ｅｐｈ亚族是其中最大的家族，由１４个基因组成，一些基因主要在脑的发育中... 酪氨酸激酶受体（ＲＴＫ）参与细胞生长、分化、胚胎发育及细胞内信号传递等过程，具有相当重要的生理功能．目前已发现５０多种ＲＴＫ基因分属于１４种亚族，Ｅｐｈ亚族是其中最大的家族，由１４个基因组成，一些基因主要在脑的发育中表达，另一些则在各种组织中广泛表达．最近该亚族胞外配体的发现为深入研究其生理功能打下基础．综述了Ｅｐｈ亚族成员的来源、表达及其配体的研究概况． 展开更多

关键词 酪氨酸激酶 受体 Eph亚族 配体

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抗人CD3单链抗体的表达及其分离纯化 被引量：3

11

作者 白玉杰 苏成芝 杨安钢 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1998年第3期201-203,共3页

本研究将构建的抗人ＣＤ３单链抗体基因，克隆到融合蛋白表达载体ｐＧＥＸ－４Ｔ－１中，用ＩＰＴＧ诱导表达ＧＳＴ－ＳｃＦｖ融合蛋白，并以ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，在Ｍｒ为５２０００左右出现一条新生蛋白带，表达量约占菌体总蛋白的... 本研究将构建的抗人ＣＤ３单链抗体基因，克隆到融合蛋白表达载体ｐＧＥＸ－４Ｔ－１中，用ＩＰＴＧ诱导表达ＧＳＴ－ＳｃＦｖ融合蛋白，并以ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，在Ｍｒ为５２０００左右出现一条新生蛋白带，表达量约占菌体总蛋白的４０％。经初步纯化和复性后，用ＧＳＴ亲和色谱纯化，再经凝血酶水解获得抗人ＣＤ３ＳｃＦｖ，竞争结合抑制实验证明。 展开更多

关键词 单链抗体 表达 纯化 分离 CD3单链抗体

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急性碘过量对大鼠甲状腺钠碘转运体表达的影响 被引量：6

12

作者 张新 李亚明 宗志红 《中国医学影像技术》 CSCD 北大核心 2009年第1期15-17,共3页

目的观察单次大剂量碘对大鼠甲状腺内钠碘转运体(NIS)蛋白表达量的影响,探讨应用99mTcO-4进行甲状腺扫描前是否应对碘的摄入进行限制。方法将SD大鼠分成给碘后1d处死组、给碘后7d处死组和对照组,每组8只;将2000μg碘化钠(NaI)溶于0.5ml... 目的观察单次大剂量碘对大鼠甲状腺内钠碘转运体(NIS)蛋白表达量的影响,探讨应用99mTcO-4进行甲状腺扫描前是否应对碘的摄入进行限制。方法将SD大鼠分成给碘后1d处死组、给碘后7d处死组和对照组,每组8只;将2000μg碘化钠(NaI)溶于0.5ml生理盐水注入前两组大鼠腹腔内,对照组注射等量生理盐水。各组大鼠处死后,取其甲状腺,应用Western免疫印迹方法探测NIS蛋白含量,通过光密度分析方法对信号强度进行半定量分析。结果给碘后1d处死组大鼠甲状腺内NIS蛋白含量明显低于对照组和给碘后7d处死组(P均<0.001),而给碘后7d处死组与对照组间NIS蛋白表达量的差异无统计学意义(P>0.05)。结论单次大剂量碘摄入可降低甲状腺内NIS蛋白的表达量,此效应在给碘1d后明显,7d后可恢复至正常水平。 展开更多

关键词 钠碘转运体 Western免疫印迹 放射性核素显像

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生存素和乳腺癌耐药蛋白表达与转移性乳腺癌化疗效应的相关性 被引量：2

13

作者 李迅 杨顺娥 关亚群 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期297-301,共5页

背景与目的:化疗是转移性乳腺癌的主要治疗手段,但常因盲目选择化疗方案,导致治疗失败。因此,对具有不同分子生物学特点的转移性乳腺癌进行化疗疗效预测,已成为国内外研究热点。本研究探讨生存素(survivin)、乳腺癌耐药蛋白(BCRP)基因... 背景与目的:化疗是转移性乳腺癌的主要治疗手段,但常因盲目选择化疗方案,导致治疗失败。因此,对具有不同分子生物学特点的转移性乳腺癌进行化疗疗效预测,已成为国内外研究热点。本研究探讨生存素(survivin)、乳腺癌耐药蛋白(BCRP)基因在长春瑞滨联合顺铂化疗方案治疗转移性乳腺癌不同疗效组间的表达差异,初步寻找出与该化疗方案敏感性相关的生物学指标。方法:采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测43例转移性乳腺癌转移灶中生存素和BCRP基因的表达水平,了解其与化疗疗效的关系。结果:长春瑞滨联合顺铂化疗方案总有效率为72.1%(31/43),7例为完全缓解(CR),占16.3%(7/43);部分缓解(PR)24例,占55.8%(24/43);9例稳定(SD),占20.9%(9/43);3例进展(PD),占7.0%(3/43)。survivin mRNA与BCRP mRNA在乳腺癌转移灶中的阳性表达率分别为51.2%(22/43)和32.6%(14/43),两者表达差异无显著性(P>0.05),survivin mRNA阴性表达组其化疗疗效高于阳性表达组(P<0.05),BCRPmRNA表达状况与化疗疗效有相关性(P<0.05),survivin mRNA和BCRPmRNA均为阴性表达组的化疗疗效高于其他组(P<0.05)。结论:联合检测survivinmRNA和BCRP mRNA表达可作为长春瑞滨联合顺铂化疗方案治疗转移性乳腺癌的疗效预测敏感性指标之一。 展开更多

关键词 转移性乳腺癌 化疗 生存素mRNA BCRP MRNA 疗效

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抗人黑色素瘤单链抗体基因的克隆和分泌型表达 被引量：1

14

作者 王字玲 邓健蓓 +3 位作者 韩骅 陈萍 药立波 苏成芝 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第1期58-62,共5页

应用ＲＴ－ＰＣＲ技术从分泌抗人黑色素瘤单克隆抗体的杂交瘤细胞ＨＢ８７６０中克隆了抗体轻、重链可变区基因，然后用（Ｇｌｙ４Ｓｅｒ）３连接肽基因将ＶＨ、ＶＬ连接成ＳｃＦｖ基因，并进行了序列测定．计算机分析表明ＶＨ，ＶＬ均... 应用ＲＴ－ＰＣＲ技术从分泌抗人黑色素瘤单克隆抗体的杂交瘤细胞ＨＢ８７６０中克隆了抗体轻、重链可变区基因，然后用（Ｇｌｙ４Ｓｅｒ）３连接肽基因将ＶＨ、ＶＬ连接成ＳｃＦｖ基因，并进行了序列测定．计算机分析表明ＶＨ，ＶＬ均符合小鼠抗体可变区的特征，为功能性重排的抗体可变区基因．ＶＨ、ＶＬ、ｌｉｎｋｅｒ拼接正确．ＳｃＦｖ基因全长７２９ｂｐ，其中ＶＨ基因长３６０ｂｐ，编码１２０个氨基酸，ＶＬ基因长３２４ｂｐ，编码１０８个氨基酸．在噬菌粒表达载体ｐＣＡＮＴＡＢ５Ｅ中表达了可溶性的ＳｃＦｖ蛋白，表达产物经流式细胞仪检测可特异地与黑色素瘤细胞结合，不与肝癌。 展开更多

关键词 单链抗体 基因克隆 基因表达 黑色素瘤

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大鼠β_2-糖蛋白Ⅰ的氧化修饰 被引量：1

15

作者 时彤 王雪丽 +1 位作者 曲立科 杨翰仪 《白求恩医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期117-118,共2页

目的 :探讨 β2 -糖蛋白 ( β2 - GP )在体外的氧化修饰 ,为其在体内诱导抗磷脂抗体产生研究作准备。方法 :首先纯化并鉴定大鼠 β2 - GP ,然后在体外以次黄嘌呤 /黄嘌呤氧化酶氧化系统氧化大鼠β2 - GP 。结果 :大鼠的 β2 - GP 在体... 目的 :探讨 β2 -糖蛋白 ( β2 - GP )在体外的氧化修饰 ,为其在体内诱导抗磷脂抗体产生研究作准备。方法 :首先纯化并鉴定大鼠 β2 - GP ,然后在体外以次黄嘌呤 /黄嘌呤氧化酶氧化系统氧化大鼠β2 - GP 。结果 :大鼠的 β2 - GP 在体外被氧化产生羰基 ,氧化后的羰基含量与氧化前的比较有显著差异( P<0 .0 5)。结论 :在体外 β2 - GP 可以被次黄嘌呤 /黄嘌呤氧化酶氧化系统氧化产生羰基。 展开更多

关键词 Β2-糖蛋白I 氧化修饰 黄嘌呤氧化酶 大鼠 抗磷脂抗体综合征 APS

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抗人肝癌单链抗体的基因克隆和分泌型表达 被引量：1

16

作者 牛利国 陈志南 +4 位作者 苏成芝 药立波 刘新平 王国华 杨敏 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1998年第2期102-104,109,共4页

应用ＲＴＰＣＲ技术，从分泌抗人肝癌单克隆抗体（ｍＡｂ）的杂交瘤细胞ＨＡｂ１８中，扩增出抗体ＶＨ和ＶＬ基因，并测序。计算机分析表明，ＶＨ和ＶＬ均符合小鼠抗体可变区的特征，为功能性重排的抗体可变区基因。用（Ｇｌｙ４Ｓｅ... 应用ＲＴＰＣＲ技术，从分泌抗人肝癌单克隆抗体（ｍＡｂ）的杂交瘤细胞ＨＡｂ１８中，扩增出抗体ＶＨ和ＶＬ基因，并测序。计算机分析表明，ＶＨ和ＶＬ均符合小鼠抗体可变区的特征，为功能性重排的抗体可变区基因。用（Ｇｌｙ４Ｓｅｒ）３连接肽基因，将ＶＨ和ＶＬ连接成ＳｃＦｖ基因，并进行序列测定，结果表明，ＶＨ，ＶＬ，ｌｉｎｋｅｒ拼接正确，基因全长为７２６ｂｐ。用噬菌粒表达载体ｐＣＡＮＴＡＢ５Ｅ在大肠杆菌中表达了可溶性的ＳｃＦｖ融合蛋白，经流式细胞仪分析表达产物可特异地与肝癌细胞结合。 展开更多

关键词 单链抗体 克隆 表达 噬菌粒载体 肝肿瘤

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rhEGF激活ERK1/2对人胚胎羊膜细胞株Bcl-2、P53蛋白表达的影响 被引量：1

17

作者 袁庆丰 徐立红 +3 位作者 陈加平 周雯 陈淑洁 姒健敏 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期2265-2267,共3页

目的:探讨表皮生长因子(EGF)促人胚胎羊膜细胞(FL)增殖时对细胞外信号调节激酶(ERK1/2)通路的影响及其应用安全性。方法:不同浓度重组人EGF(rhEGF)对培养的FL细胞进行刺激,用MTT法检测细胞增殖、Western蛋白印迹法检测磷酸化ERK1/2及Bc... 目的:探讨表皮生长因子(EGF)促人胚胎羊膜细胞(FL)增殖时对细胞外信号调节激酶(ERK1/2)通路的影响及其应用安全性。方法:不同浓度重组人EGF(rhEGF)对培养的FL细胞进行刺激,用MTT法检测细胞增殖、Western蛋白印迹法检测磷酸化ERK1/2及Bcl-2、P53蛋白水平。结果:剂量-效应关系示rhEGF浓度10μg/L时促细胞增殖率最高(42.4%,P<0.01)。rhEGF浓度在10-60μg/L时p-ERK1/2水平明显升高,各浓度组Bcl-2水平无变化,而60μg/L浓度组P53水平明显下降。结论:rhEGF最佳浓度10μg/L是安全的用量,但超大剂量rhEGF的应用可能会降低促细胞凋亡能力。 展开更多

关键词 表皮生长因子 细胞培养 蛋白质ERK1/2 蛋白质BCL-2 蛋白质P53

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鼠抗hTNF-α单克隆抗体重链基因片段的克隆和cDNA序列测定 被引量：1

18

作者 邓健蓓 韩骅 苏成芝 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1997年第1期24-27,共4页

采用反转录ＰＣＲ方法，以一对锚ＰＣＲ引物和一对针对鼠ＩｇＶＨ区基因的引物，从分泌鼠抗ｈＴＮＦ－α单克隆抗体的Ｅ６杂交瘤细胞株中，分别扩增和克隆了自５′非翻译区至Ｃγ１近３′端的重链基因片段和重链可变区基因片段，并测定... 采用反转录ＰＣＲ方法，以一对锚ＰＣＲ引物和一对针对鼠ＩｇＶＨ区基因的引物，从分泌鼠抗ｈＴＮＦ－α单克隆抗体的Ｅ６杂交瘤细胞株中，分别扩增和克隆了自５′非翻译区至Ｃγ１近３′端的重链基因片段和重链可变区基因片段，并测定了其核苷酸序列。计算机分析表明，系重排的鼠Ｉｇ重链基因。 展开更多

关键词 IgVH基因 HTNF-Α 单克隆抗体 核苷酸序列

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鼠抗hTNF－α单克隆抗体轻链可变区基因片段的克隆和cDNA序列测定 被引量：1

19

作者 陈萍 邓建蓓 +2 位作者 王字玲 韩骅 苏成芝 《细胞与分子免疫学杂志》 CSCD 1996年第4期21-26,共6页

目的：获得鼠抗人肿瘤坏死因子－α（ｈＴＮＦ－α）单克隆抗体轻链可变区基因序列。方法：采用反转录ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）方法，以一对针对鼠Ｉｇ轻链可变区（ＶＬ）基因的引物，从分泌鼠抗ｈＴＮＦ－α单克隆抗体的Ｅ６杂交瘤细胞... 目的：获得鼠抗人肿瘤坏死因子－α（ｈＴＮＦ－α）单克隆抗体轻链可变区基因序列。方法：采用反转录ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）方法，以一对针对鼠Ｉｇ轻链可变区（ＶＬ）基因的引物，从分泌鼠抗ｈＴＮＦ－α单克隆抗体的Ｅ６杂交瘤细胞株中扩增和克隆ＶＬ基因片段，用双脱氧链终止法测定其核苷酸序列，并进行计算机分析。结果：此ＶＬ基因长３４２ｂＰ，可编码１１４个氨基酸，为开放读框；有明确的框架区（ＦＲＳ）和抗原互补决定区（ＣＤＲＳ）；含有抗体可变区特征性的两个半胱酸残基。在基因数据库（ＥＭＢＬＧｅｎｅＢａｎｋ１９９５）中，未查见相同序列的基因。结论：此ＶＬ基因系重排的鼠Ｉｇ轻链基因。 展开更多

关键词 hTNF 单克隆抗体 基因 核苷酸 序列 克隆

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抗CD8单抗轻、重链可变区基因的克隆和序列分析

20

作者 陈梅红 王字玲 +1 位作者 邓健蓓 苏成芝 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1998年第1期11-12,70,共3页

采用反转录ＰＣＲ（ＲＴＰＣＲ）法，从分泌特异性抗ＣＤ８单抗的杂交瘤细胞中扩增出该抗体轻、重链可变区（ＶＨ，ＶＬ）基因，并测定了其序列，经计算机分析，ＶＨ和ＶＬ基因均为新发现的基因序列，符合功能重排的鼠抗体可变区基... 采用反转录ＰＣＲ（ＲＴＰＣＲ）法，从分泌特异性抗ＣＤ８单抗的杂交瘤细胞中扩增出该抗体轻、重链可变区（ＶＨ，ＶＬ）基因，并测定了其序列，经计算机分析，ＶＨ和ＶＬ基因均为新发现的基因序列，符合功能重排的鼠抗体可变区基因特征。 展开更多

关键词 CD8 单克隆抗体 可变区基因 PCR 克隆 序列分析

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