海南汉族人群AGT基因多态性与冠心病的相关性 被引量：2

1

作者 周代锋 张勇 +3 位作者 陈少华 李林江 王镇 习隽丽 《海南医学院学报》 CAS 2012年第1期18-20,共3页

目的:探讨AGT基因T174M和M235T多态性与海南汉族冠状动脉性心脏病(CHD)的关系。方法:应用等位基因特异性PCR技术,对334例海南地区汉族CHD患者和193例海南汉族正常对照组中AGT基因T174M、M235T多态位点进行了检测,分析两组基因型频率及... 目的:探讨AGT基因T174M和M235T多态性与海南汉族冠状动脉性心脏病(CHD)的关系。方法:应用等位基因特异性PCR技术,对334例海南地区汉族CHD患者和193例海南汉族正常对照组中AGT基因T174M、M235T多态位点进行了检测,分析两组基因型频率及等位基因频率。结果:M235T多态位点的等位基因在海南汉族正常对照组和CHD患者组之间存在差异(χ2=4.314,P=0.038);T174M多态位点的基因型在汉族正常对照组和CHD患者组之间也存在差异(P=0.047,Fisher确切概率法)。结论:AGT基因T174M、M235T多态性与海南汉族人群CHD均相关,M235T多态位点235M等位基因是海南汉族人群CHD的易感基因,T174M多态位点174TT和174MM基因型可使海南汉族人群CHD的患病危险性增加。 展开更多

关键词 血管紧张素原基因 DNA多态性 冠状动脉性心脏病 海南汉族

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海南山蛭蛭素基因的克隆和序列分析 被引量：3

2

作者 谭琳 康由发 +1 位作者 谭恩光 郑学勤 《热带农业科学》 2004年第2期23-25,61,共4页

以海南山蛭(Haemadipsahainana)基因组DNA为模板,以合成的2段30个寡聚核苷酸的序列为引物,经过PCR扩增,分离海南山蛭中的蛭素基因,获得了1条大小约237 bp的DNA片段。将其克隆到pGEM-Teasy载体中,经筛选与检测,并进行序列分析。结果显示... 以海南山蛭(Haemadipsahainana)基因组DNA为模板,以合成的2段30个寡聚核苷酸的序列为引物,经过PCR扩增,分离海南山蛭中的蛭素基因,获得了1条大小约237 bp的DNA片段。将其克隆到pGEM-Teasy载体中,经筛选与检测,并进行序列分析。结果显示,所克隆的海南山蛭蛭素基因的大小为231 bp,与Dr. Burkhard报道的印度山蛭蛭素cDNA序列相比,其核苷酸的同源性为99.9%。 展开更多

关键词 海南 山蛭 蛭素基因 基因克隆 序列分析

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纤维蛋白原β-148C/T基因多态性与血浆纤维蛋白原关系的研究 被引量：6

3

作者 杨志刚 刘国勋 +3 位作者 李凤芹 凌光鑫 程爽 蔡望伟 《白求恩医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期689-690,共2页

目的 :调查 15 6例广东汉族健康人纤维蛋白原 (Fg)β- 148C/ T基因多态性频率分布情况 ,分析Fgβ- 148C/ T基因多态性与血浆 Fg水平的关系。方法 :分别用 PCR- RFLPs方法及比浊法检测 Fg基因多态性及血浆 Fg水平。结果 :等位基因 T-14 ... 目的 :调查 15 6例广东汉族健康人纤维蛋白原 (Fg)β- 148C/ T基因多态性频率分布情况 ,分析Fgβ- 148C/ T基因多态性与血浆 Fg水平的关系。方法 :分别用 PCR- RFLPs方法及比浊法检测 Fg基因多态性及血浆 Fg水平。结果 :等位基因 T-14 8频率为 0 .2 85 ,携带 T-14 8基因组血浆 Fg水平高于野生型组 (P<0 .0 5 )。结论 :携带 T-14 8基因较不携带者血浆 Fg水平高 ,提示 Fgβ- 148C/ T基因多态性与血浆Fg水平相关。 展开更多

关键词 纤维蛋白原 多态现象 急性相蛋白 白细胞介素-6

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β-纤维蛋白原-455 G/A基因多态性对缺血性脑卒中患者血浆纤维蛋白原水平的影响 被引量：6

4

作者 李凤芹 刘国勋 +2 位作者 杨志刚 蔡望伟 凌光鑫 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2001年第2期165-168,共4页

为了分析 β 纤维蛋白原 4 5 5G A(β Fg 4 5 5G A)基因多态性与环境因素对血浆Fg水平及缺血性脑卒中发病的影响 ,应用聚合酶链反应 (PCR)及限制性内切酶分析的方法 ,分析了 10 4例缺血性脑卒中患者及 15 6例健康人的 β Fg 4 5 5G A... 为了分析 β 纤维蛋白原 4 5 5G A(β Fg 4 5 5G A)基因多态性与环境因素对血浆Fg水平及缺血性脑卒中发病的影响 ,应用聚合酶链反应 (PCR)及限制性内切酶分析的方法 ,分析了 10 4例缺血性脑卒中患者及 15 6例健康人的 β Fg 4 5 5G A基因多态现象 ,用比浊法测定血浆Fg水平。研究结果显示 ,病例组血浆Fg水平明显高于对照组 (P <0 .0 1)。无论男、女患者与对照相比 ,A等位基因携带者血浆Fg水平均比同组GG基因型者明显升高 (P <0 .0 5 )。对照组内只有A等位基因携带者随年龄增长血浆Fg水平有明显升高 (P <0 .0 5 )。病例组男性按吸烟及基因型情况分组 ,在GA基因型中 ,吸烟组血浆Fg水平高于不吸烟与戒烟组 (P <0 .0 5 ) ;GG基因型组吸烟与否对Fg水平无显著影响 (P >0 .0 5 )。病例组与对照组A等位基因频率分布无差异。结论提示 ,A等位基因携带者血浆Fg水平升高 ,并随年龄、吸烟而更加显著 ,提示 β Fg 4 5 5A等位基因携带者血浆Fg水平更易受环境因素影响而升高 ,故此基因多态性可用于易感人群的检测 。 展开更多

关键词 纤维蛋白原 β-纤维蛋白原-455G/A基因多态性 基因多态性 缺血性脑卒中

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失血性休克家兔血浆中分子物质及血糖含量的动态变化 被引量：6

5

作者 陈世民 潘正甫 +5 位作者 谢协驹 莫燕娜 王英 潘海玲 王铁丹 肖应庆 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1994年第2期180-183,共4页

用改进的紫外吸收法及葡萄糖氧化酶法分别测定了家兔失血性休克前后不同时间动脉和静脉血浆中分子物质（ＭＭＳ）及血糖含量的动态变化。结果表明，在家兔失血性休克后３０ｍｉｎ，动、静脉血浆ＭＭＳ含量比休克前显著降低；血糖含量则... 用改进的紫外吸收法及葡萄糖氧化酶法分别测定了家兔失血性休克前后不同时间动脉和静脉血浆中分子物质（ＭＭＳ）及血糖含量的动态变化。结果表明，在家兔失血性休克后３０ｍｉｎ，动、静脉血浆ＭＭＳ含量比休克前显著降低；血糖含量则显著升高。随着休克发展，ＭＭＳ含量逐渐回升，在动物临终前呈显著升高，并且静脉血浆含量显著高于动脉血浆含量，血糖浓度则随休克发展不断升高。输血组在休克３０ｍｉｎ后将血液回输，血压恢复，ＭＭＳ含量则持续保持低水平状态，血糖含量逐渐回降。ＭＭＳ与血糖含量的变化之间没有显著性相关。 展开更多

关键词 出血性 血糖 输血 出血性休克

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弓形虫抗原与霍乱毒素A2/B亚基复合基因在小鼠体内诱导的免疫反应 被引量：3

6

作者 丛华 古钦民 +5 位作者 江渊 周怀瑜 何深一 杨婷婷 李瑛 赵群力 《中国人兽共患病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期338-341,共4页

目的　观察弓形虫主要表面抗原SAG1、SAG2 与霍乱毒素A2 /B亚基复合基因真核质粒经肌肉免疫小鼠所诱导的免疫反应。方法　将SAG1基因、SAG2 基因及CTXA2 /B基因定向连接插入真核表达质粒pcDNA3.1,经酶切及测序,获得pcDNA3.1 SAG1 SAG2 ... 目的　观察弓形虫主要表面抗原SAG1、SAG2 与霍乱毒素A2 /B亚基复合基因真核质粒经肌肉免疫小鼠所诱导的免疫反应。方法　将SAG1基因、SAG2 基因及CTXA2 /B基因定向连接插入真核表达质粒pcDNA3.1,经酶切及测序,获得pcDNA3.1 SAG1 SAG2 及pcDNA3.1 SAG1 SAG2 CTXA2 /B的重组子;碱裂解法大量制备经肌肉注射免疫BALB/c鼠,每只鼠经后腿肌肉注射质粒10 0 μg ,每2周免疫1次,共3次,以PcDNA3.1空质粒注射组及PBS组为对照,分别于每次免疫前断尾取血和免疫后4周取小鼠脾脏测定T淋巴细胞增殖活性及NK细胞活性,ELISA法测定IgG抗体。结果　免疫组小鼠的IgG抗体水平明显提高,NK细胞杀伤活性和T细胞增殖活性也明显增强。免疫鼠抗攻击感染的时间延长。结论　含有霍乱毒素的复合基因免疫小鼠后体液免疫和细胞免疫水平均有提高。 展开更多

关键词 弓形虫 SAG1/SAG2 霍乱毒素A2/B亚基 DNA免疫

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芪合酶基因的克隆与植物表达载体的构建 被引量：4

7

作者 谭琳 郑学勤 +1 位作者 康由发 施江 《热带作物学报》 CSCD 2003年第2期42-45,共4页

为获得含白藜芦醇且具有保健作用的转基因番茄,进行了芪合酶基因克隆、植物表达载体构建及导入受体细胞的研究。从葡萄2个品种———雷司令和粉红玫瑰的叶片中提取基因组DNA,并以其为模板,经PCR扩增芪合酶基因,各获得一长约1.6Kb的片段... 为获得含白藜芦醇且具有保健作用的转基因番茄,进行了芪合酶基因克隆、植物表达载体构建及导入受体细胞的研究。从葡萄2个品种———雷司令和粉红玫瑰的叶片中提取基因组DNA,并以其为模板,经PCR扩增芪合酶基因,各获得一长约1.6Kb的片段,将这2个片段分别连接到pGEM-Teasy和pUCm-T上进行测序,1个片段长为1622bp(命名为S1),另一个片段长为1617bp(命名为S2)。然后将S1正向插入pEV2的果实特异性启动子TFP2和NOS终止子,构建了植物表达载体pEV2S1;将S2正向插入植物表达载体pBI121的35S启动子和NOS终止子之间,构建了植物表达载体pBS2。将重组体pEV2S1和pBS2转化大肠杆菌E.coliXL1,并对重组体进行了筛选和鉴定。 展开更多

关键词 芪合酶基因 基因克隆 植物表达载体 转基因番茄 白藜芦醇 基因转化

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甲胎蛋白对Hela细胞增殖的促进作用 被引量：3

8

作者 李孟森 李平风 +3 位作者 杨非易 葛韵琴 李刚 杜国光 《海南医学院学报》 CAS 2000年第3期138-141,共4页

目的 :采用由脐带血血清中提纯的胎蛋白 (Alpha-fetoprotein,AFP)作用于体外培养的Hela细胞。方法 :通过对MTT计数 ,3H -TdR掺入以及细胞周期时相改变等指标的检测。结果 :发现AFP(浓度大于10mg/L)对Hela细胞增殖有明显的促进作用。结论

关键词 甲胎蛋白类 肿瘤细胞 培养的 细胞增殖

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小鼠阿片肽δ受体多肽片段的单克隆抗体细胞系的建立 被引量：2

9

作者 李孟森 杨非易 +3 位作者 沈黎阳 葛韵琴 杜国光 李刚 《海南医学院学报》 CAS 1997年第3期103-104,134,共3页

本实验选用一段合成的小鼠阿片肽δ受体的多肽片段，通过与牛血清清蛋白连接，免疫小鼠，经细胞融合后，检测出抗该多肽片段抗体，从而建立了抗多肽片段单克隆抗体的细胞系。

关键词 阿片肽受体 多肽 单克隆抗体 细胞系 小鼠

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活血化瘀药物的基础研究及其临床应用 被引量：3

10

作者 李孟森 王思灵 和岚 《海南医学院学报》 CAS 1998年第1期39-42,共4页

活血化瘀药物的基础研究及其临床应用李孟森王思灵和岚（海南医学院生化教研室）海口５７０１０２血瘀证是中医最常见的临床病证，其包括广泛的病理过程，有关血瘀证的认识，我国学者从本世纪七十年代开始，运用现代科学研究方法和... 活血化瘀药物的基础研究及其临床应用李孟森王思灵和岚（海南医学院生化教研室）海口５７０１０２血瘀证是中医最常见的临床病证，其包括广泛的病理过程，有关血瘀证的认识，我国学者从本世纪七十年代开始，运用现代科学研究方法和技术，对血瘀症及其相应治法深入研究... 展开更多

关键词 中药 活血化瘀 基础研究 临床应用

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辅酶Ⅱ-亲和胶的制备和应用 被引量：1

11

作者 蔡望伟 凌光鑫 陈历昌 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1991年第5期400-401,共2页

亲和层析是一种特异性较高的分离纯化方法,目前已广泛应用于多种生物物质的分离纯化。NADP是生物体内许多酶的辅酶,是一种很好的亲和配基。因此,将NADP结合到不溶性介质上,可得到一种分离纯化有关酶及蛋白质的亲和胶。本文介绍NADPSepha... 亲和层析是一种特异性较高的分离纯化方法,目前已广泛应用于多种生物物质的分离纯化。NADP是生物体内许多酶的辅酶,是一种很好的亲和配基。因此,将NADP结合到不溶性介质上,可得到一种分离纯化有关酶及蛋白质的亲和胶。本文介绍NADPSepharose 4B胶的合成方法及其应用。 展开更多

关键词 辅酶Ⅱ 亲和胶 亲和层析 制备

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人类红细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的分离纯化与鉴定 被引量：1

12

作者 蔡望伟 凌光鑫 陈历昌 《生物化学杂志》 CAS CSCD 1991年第6期747-750,共4页

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD,EC1·1·1.49)催化磷酸已糖途径的第一步反应。人红细胞内的G6PD及其催化产生的NADPH对于维持血红蛋白及红细胞膜的稳定性具有非常重要的作用。G6PD的结构变异可影响其活性。纯化人红细胞G6PD对于进... 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD,EC1·1·1.49)催化磷酸已糖途径的第一步反应。人红细胞内的G6PD及其催化产生的NADPH对于维持血红蛋白及红细胞膜的稳定性具有非常重要的作用。G6PD的结构变异可影响其活性。纯化人红细胞G6PD对于进一步阐明G6PD的结构与功能的关系有重要意义。本文报道纯化人红细胞的的方法,并对该酶进行鉴定。 展开更多

关键词 葡萄糖 磷酸脱氢酶 红细胞 分离

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SARS S1基因对番茄的遗传转化与转基因番茄植株的获得 被引量：1

13

作者 谭琳 康由发 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期131-134,共4页

利用DNA直接导入法将含有SARS S1基因的植物表达载体pCS1导入农杆菌LBA4404中,并通过农杆菌介导的叶盘转化法得到12株再生小苗。PCR、Southern杂交检测结果证实,有6株为真正的转基因植株。

关键词 SARS S1基因 转化转基因番茄

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一种新的人类G6PD突变型的体外构建

14

作者 王颖 蔡望伟 《海南医学院学报》 CAS 2007年第6期514-517,共4页

目的:体外构建人类G6PD突变型。方法:①运用PCR方法获得含有G6PD基因开放阅读框的PCR产物,随后将PCR产物连接到18T-simple vector中,构建成18T-G6PD;②酶切下G6PD cDNA的开放阅读框并连接到pALTER-1 vector中,构建成pAL-G6PD重组子;③... 目的:体外构建人类G6PD突变型。方法:①运用PCR方法获得含有G6PD基因开放阅读框的PCR产物,随后将PCR产物连接到18T-simple vector中,构建成18T-G6PD;②酶切下G6PD cDNA的开放阅读框并连接到pALTER-1 vector中,构建成pAL-G6PD重组子;③运用含有突变序列的寡核苷酸引物体外构建G6PD835-海口突变重组子(835A→G,T279A),命名为pAL-G6PD-AG。结果:获得了G6PD的T279A的突变重组子。结论:此项工作为进一步体外表达突变型G6PD,并展开比较人类G6PD新发点突变835-海口(835A→G,T279A)与正常G6PD的酶动力学差异的研究奠定基础。 展开更多

关键词 葡糖磷酸脱氢酶 葡糖磷酸脱氢酶缺乏 点突变 聚合酶链反应

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ET-1基因突变位点的组合分析与原发性高血压病的关系 被引量：5

15

作者 邱逸敏 张勇 +3 位作者 黄林 晏辉芳 王镇 周代锋 《海南医学院学报》 CAS 2014年第9期1161-1163,共3页

目的:了解内皮素-1(ET-1)基因138A/-、K198N、G8002A3个突变位点多态性组合与海南汉族原发性高血压(EH)的关系。方法:应用等位基因特异性PCR技术,对201例海南汉族EH患者及311例海南汉族正常对照组ET-1基因多态性位点进行检测,利用统计... 目的:了解内皮素-1(ET-1)基因138A/-、K198N、G8002A3个突变位点多态性组合与海南汉族原发性高血压(EH)的关系。方法:应用等位基因特异性PCR技术,对201例海南汉族EH患者及311例海南汉族正常对照组ET-1基因多态性位点进行检测,利用统计学方法分析3个位点多态性组合与EH的关系。结果:138A/-、K198N、G8002A多态位点分别可检测出4A/4A、4A/3A、3A/3A3种基因型,GG、GT、TT 3种基因型和GG、GA、AA 3种基因型。多态位点组合分析发现有两组基因型4A3AGG-GG、3A3A-GG-GG在病例组中出现的频率远大于对照组;两组基因型4A4A-GT-GG、4A3A-GTGG在对照组中出现的频率大于病例组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:4A3A-GG-GG和3A3A-GG-GG这两组基因型串联可能会增加高血压的发病几率,4A4A-GT-GG和4A3A-GT-GG这两组基因型串联可能会降低高血压的发病几率。 展开更多

关键词 内皮素-1基因 DNA多态性位点组合分析 高血压 汉族

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凝血因子FⅧA链基因第1内含子内顺式调节元件的鉴定

16

作者 黄丽君 李慧 +5 位作者 刘晗 郭黎媛 高利波 刘新华 蔡望伟 李刚 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期338-343,共6页

探讨FⅧA基因表达的分子机制.凝胶阻滞实验(EMSA)结果证明,FⅧA基因第1内含子5′区的前12碱基与转录因子结合并由此调控基因表达.FⅧA基因第1内含子第12位碱基由C突变为A(内含子1(+12)C→A)导致与转录因子结合能力降低.构建不同的荧光... 探讨FⅧA基因表达的分子机制.凝胶阻滞实验(EMSA)结果证明,FⅧA基因第1内含子5′区的前12碱基与转录因子结合并由此调控基因表达.FⅧA基因第1内含子第12位碱基由C突变为A(内含子1(+12)C→A)导致与转录因子结合能力降低.构建不同的荧光素酶表达质粒Luc1、Luc2、Luc3、Luc4、Luc5、Luc6,并转染U937细胞和HepG2细胞.结果显示,如果Luc5(具有最高表达活性)的内含子1(+12)由C突变为A,启动子活性显著降低.与Luc5相比,突变后的Luc5的活性分别下降了52·9%(U937,P<0·01)和47·6%(HepG2,P<0·01).将Luc5与PN3 Sp1共同转染U937细胞和HepG2细胞后,Luc5的荧光素酶活性分别提高了42·4%(U937,与Luc5单独转染比较P<0·01)和54·9%(HepG2,与Luc5单独转染比较P<0·01),而突变后的Luc5(Mut)与PN3 Sp1共同转染则没有明显的改变.表明转录因子Sp1在FXA基因表达的重要性.这些结果也表明,内含子在FⅧA基因表达过程中起重要作用,为遗传性凝血因子Ⅷ发病机理的研究提供了新的证据. 展开更多

关键词 凝血因子[ⅩⅢ] (F[ⅩⅢ])内含子 点突变 表达调控

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杭州市393名汉族献血员Tf亚型基因频率的调查

17

作者 周振群 刘小凤 +2 位作者 陈洛夫 黄冬爱 陈历昌 《浙江医科大学学报》 CAS CSCD 1992年第1期30-31,43,共3页

我们采用超薄层等电聚焦电泳方法对杭州市393名汉族献血员的血清转铁蛋白(Tf)的多态性进行了分析.结果表明Tf亚型的分布,C_1/C_1型占50.89%,C_1/C_2型占1.53%,C_1/C_3型占39,95%,C_2/C_2型为0,C_2/C_3型占1,27%,C_3/C_3型占6.36%.基因... 我们采用超薄层等电聚焦电泳方法对杭州市393名汉族献血员的血清转铁蛋白(Tf)的多态性进行了分析.结果表明Tf亚型的分布,C_1/C_1型占50.89%,C_1/C_2型占1.53%,C_1/C_3型占39,95%,C_2/C_2型为0,C_2/C_3型占1,27%,C_3/C_3型占6.36%.基因频率为TfC_1=0.7163,TfC_2=0.0140,TfC_3=0.2697.群体基因表型的分布符合Hardy-Weinberg平衡定律,经X^2检验表明,观察值与预期值极为符合(X^2=2.561,df=5,P>0.75),因此上述遗传表型的分布规律可作为杭州地区人群(汉族)的代表. 展开更多

关键词 转铁球蛋白 血液 基因频率

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