犬细小病毒VP2基因的比较及分型研究 被引量：25

1

作者 邱薇 范泉水 +6 位作者 李作生 杨美峰 郑颖 尹惠琼 王双印 李江 夏咸柱 《动物医学进展》 CSCD 2005年第5期69-72,共4页

为查明我国CPV的流行变异情况及为进一步的免疫研究奠定基础,对我国不同地区分离到的9株细小病毒毒株进行了VP2基因的扩增和序列分析,并与CPV的参考毒株进行了比较分型, 9 株CPV 中有6 株属CPV 2a,3株属CPV 2b,但未分离到CPV 2c变异株,... 为查明我国CPV的流行变异情况及为进一步的免疫研究奠定基础,对我国不同地区分离到的9株细小病毒毒株进行了VP2基因的扩增和序列分析,并与CPV的参考毒株进行了比较分型, 9 株CPV 中有6 株属CPV 2a,3株属CPV 2b,但未分离到CPV 2c变异株,结果表明我国目前仍以CPV 2a流行为主。 展开更多

关键词 VP2基因 犬细小病毒 分型 CPV 免疫研究 序列分析 病毒毒株 参考毒株 变异株 流行 分离

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埃博拉病毒的研究进展 被引量：9

2

作者 聂福平 范泉水 +5 位作者 王灵强 郄翠仙 郭松辉 龙贵伟 李丽红 张念祖 《中国畜牧兽医》 CAS 2006年第10期65-67,共3页

埃博拉病毒是一种致死性病原体,是能引起人类和灵长类动物产生埃博拉出血热的病原。随着研究的深入,埃博拉病毒逐渐被人类认识。作者着重介绍了埃博拉病毒的分子生物学特性,以使人们更加了解埃博拉病毒。

关键词 埃博拉病毒 基因组结构 毒力 分布特性

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鹌鹑腺病毒的分离及病原特性的研究 被引量：1

3

作者 俞乃胜 李文贵 +4 位作者 韦剑珊 龙沛然 曾子安 刘洁 王旭东 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期271-275,共5页

1994年～ 1995年 ,从云南呈贡县爆发的一群有减蛋综合征症状 ,血清含有EDSV血凝抑制抗体的鹌鹑泄殖腔分离到一株病毒 ,并命名为QAVc 94株。经形态学、培养特性、血凝特性、理化特性、免疫电镜、酶切图谱分析、交叉血凝抑制试验以及动物... 1994年～ 1995年 ,从云南呈贡县爆发的一群有减蛋综合征症状 ,血清含有EDSV血凝抑制抗体的鹌鹑泄殖腔分离到一株病毒 ,并命名为QAVc 94株。经形态学、培养特性、血凝特性、理化特性、免疫电镜、酶切图谱分析、交叉血凝抑制试验以及动物接种结果确定 ,QAVc 94株属于禽腺病毒Ⅲ群中血清型相同而基因型不同的鹌鹑减蛋综合征病毒。病毒颗粒略似球形 ,无囊膜 ,直径为 70～ 75nm ,核酸大小为 34 7kb ,分子量为 2 2 9× 10 6Da ,其TCID50 为 4 5。 展开更多

关键词 鹌鹑 腺病毒 分离 病原特性

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犬腺病毒SY-45株不同大小蚀斑特性研究 被引量：2

4

作者 范泉水 夏咸柱 +6 位作者 邱薇 黄耕 何洪彬 余春 乔军 武银莲 殷震 《动物医学进展》 CSCD 2001年第4期86-87,99,共3页

应用蚀斑方法将 SY- 4 5毒株经过 3次蚀斑纯化直到蚀斑大小相对稳定。从不同大小的蚀斑中挑选出三种蚀斑 ,大斑直径约 3mm (简称 LP)、中斑约 2 mm(简称 MP)、小斑约 1 mm(简称 SP)。分别在 MDCK细胞上增殖并进行了三种不同大小斑毒对... 应用蚀斑方法将 SY- 4 5毒株经过 3次蚀斑纯化直到蚀斑大小相对稳定。从不同大小的蚀斑中挑选出三种蚀斑 ,大斑直径约 3mm (简称 LP)、中斑约 2 mm(简称 MP)、小斑约 1 mm(简称 SP)。分别在 MDCK细胞上增殖并进行了三种不同大小斑毒对犬的毒力、免疫原性和在 MDCK细胞上产毒量比较 ,以筛选最佳的疫苗株 ,试验结果表明用不同大小蚀斑病毒大剂量人工感染易感犬后 ,所有的试验犬临床症状和病理解剖学和病理组织学表现均正常 ;对挑选的 4窝 CAV HI抗体效价小于等于 1 :2的健康幼犬进行免疫试验 ,测定血清的中和抗体效价和血凝抑制抗体效价 ,结果表明 :大斑毒的免疫原性要稍高于中斑毒 ,而明显高于小斑毒 ;不同大小蚀斑毒在 MDCK细胞上产毒量差异很大 ,大斑毒可达 1 0 7TCID50 / m L、小斑毒达 1 0 6 TCID50 /ml、小斑毒达 1 0 4 .5TCID50 / m L。综合所有试验结果表明 :大斑毒株具有产毒量高、安全性好、免疫原性强的优点 ,是较为理想的疫苗株。 展开更多

关键词 犬传染性喉气管炎病毒 犬2型腺病毒 蚀斑特性

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牛腺病毒载体研究进展 被引量：1

5

作者 邱薇 夏咸柱 +3 位作者 范泉水 扈荣良 孙阳 杨美峰 《动物医学进展》 CSCD 2003年第6期11-14,共4页

动物腺病毒与人腺病毒具有相似基因组结构 ,用其构建的动物腺病毒载体可将外源基因转移到人体细胞内表达 ,却又不能在其中复制繁殖 ,且人体内不存在针对它们的免疫应答 ,有望代替人腺病毒作为基因治疗和基因免疫的载体 ,目前已构建了多... 动物腺病毒与人腺病毒具有相似基因组结构 ,用其构建的动物腺病毒载体可将外源基因转移到人体细胞内表达 ,却又不能在其中复制繁殖 ,且人体内不存在针对它们的免疫应答 ,有望代替人腺病毒作为基因治疗和基因免疫的载体 ,目前已构建了多种动物腺病毒载体。文章综述了近年来牛腺病毒载体构建的一些研究进展。 展开更多

关键词 牛腺病毒 病毒载体 基因治疗 基因免疫 基因组结构 免疫应答

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犬细小病毒分离鉴定及其基因型调查的基础研究 被引量：13

6

作者 谢之景 夏咸柱 +4 位作者 扈荣良 范泉水 叶俊华 徐在品 黄耕 《中国动物保健》 2003年第12期21-23,共3页

用F81细胞从不同地区送检的25份肠炎犬病料中分离出10株细小病毒,经形态学、理化学、生物学和分子病毒学等鉴定。结果这10株病毒均能在F81细胞上生长,产生细胞肿胀、变圆、破碎、脱落等细胞病变;病毒粒子呈立体对称,直径为20～24nm,无囊... 用F81细胞从不同地区送检的25份肠炎犬病料中分离出10株细小病毒,经形态学、理化学、生物学和分子病毒学等鉴定。结果这10株病毒均能在F81细胞上生长,产生细胞肿胀、变圆、破碎、脱落等细胞病变;病毒粒子呈立体对称,直径为20～24nm,无囊膜,抗氯仿,耐酸,耐热,能被5-IUDR抑制,可凝集猪、马、猫的红细胞,不能凝集人、鸡、豚鼠、兔的红细胞,HA试验能被抗CPV的特异性抗体所抑制。用犬细小病毒(CPV)特异性引物对10株病毒进行PCR扩增,结果扩增片段与阳性对照大小一致(771bp)。用PV/犬/JL/1/02、PV/犬/BJ/1/99和PV/犬/GZ/1/02三个毒株进行人工感染犬试验,结果人工感染犬在接种后白细胞总数出现短期不同程度的下降,在攻毒后4～14d粪便PCR检测阳性,其中接种PV/犬/BJ/1/99的一只犬出现严重的肠炎症状并死亡,其余接种犬没有出现明显的临床症状,但血清抗体均升高(大于5倍),而对照组的白细胞总数和血清抗体没有明显的变化,粪便PCR检测阴性。表明所分离毒株能够感染犬。鉴定结果证明,CPV在我国犬群中仍广泛存在。 展开更多

关键词 犬 细小病毒 分离鉴定 基因型 形态学 理化学 生物学 分子病毒学 人工感染

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单链抗体的研究进展 被引量：9

7

作者 尹惠琼 《动物医学进展》 CSCD 2003年第2期24-26,共3页

抗体在疾病的诊断、治疗和预防中发挥着重要的作用,其生产制备经历了抗血清多克隆抗体和单克隆抗体(Monoclonalantibodies,McAb)阶段,现已进入了基因工程抗体的时代。基因工程抗体主要包括单链抗体(ScFv)、Fab抗体、F(ab`)2抗体等小分... 抗体在疾病的诊断、治疗和预防中发挥着重要的作用,其生产制备经历了抗血清多克隆抗体和单克隆抗体(Monoclonalantibodies,McAb)阶段,现已进入了基因工程抗体的时代。基因工程抗体主要包括单链抗体(ScFv)、Fab抗体、F(ab`)2抗体等小分子抗体、嵌合抗体和改形抗体。本文就单链抗体的研究进展作了综述。 展开更多

关键词 单链抗体 基因工程抗体 噬菌体展示技术

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抗禽流感病毒药物的活性筛选研究 被引量：1

8

作者 廖金 范泉水 +10 位作者 李作生 邱薇 赵勤实 于福先 宋贵强 聂福平 龙贵伟 任玉莹 谢红良 余方芳 张泉鹏 《上海畜牧兽医通讯》 2007年第3期33-34,共2页

目的:观察药物对禽流感病毒抑制作用。方法:固定病毒稀释药物的微量中和实验法,采用体外细胞培养技术,将系列稀释的药物与固定量病毒在细胞上感作后,置适宜条件培养5～7d,同时设相应对照,以病毒所致的特异性细胞病变(CPE)作为观察指标,... 目的:观察药物对禽流感病毒抑制作用。方法:固定病毒稀释药物的微量中和实验法,采用体外细胞培养技术,将系列稀释的药物与固定量病毒在细胞上感作后,置适宜条件培养5～7d,同时设相应对照,以病毒所致的特异性细胞病变(CPE)作为观察指标,用Reed-Muench法计算中和结果,凡药物能保护细胞不出现特异性病变的定为该药对病毒有抑制作用,测定治疗指数TI值。结果:药物能减少H5N1型的禽流感病毒引起的CPE,药物对照实验也出现同样结果。结论:药物对H5N1型的禽流感病毒有抑制作用。 展开更多

关键词 禽流感 细胞病变CPE 病毒毒力

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犬2型腺病毒对犬的口服免疫研究

9

作者 范泉水 夏咸柱 +4 位作者 王度林 齐桂凤 邱薇 何洪彬 黄耕 《中国兽药杂志》 北大核心 2000年第4期17-19,共3页

对未经犬腺病毒免疫的两月龄左右杂交狼犬 ,随机分为 6组每组 5只 ,另设 5只对照 ,用作者分离鉴定和致弱驯化的犬喉气管炎病毒 (犬 2型腺病毒 )的第 60代 DK细胞培养物 ( SYCAV- 2 DK60 )对犬进行口服免疫试验 ,在免疫第 4周采血分离血... 对未经犬腺病毒免疫的两月龄左右杂交狼犬 ,随机分为 6组每组 5只 ,另设 5只对照 ,用作者分离鉴定和致弱驯化的犬喉气管炎病毒 (犬 2型腺病毒 )的第 60代 DK细胞培养物 ( SYCAV- 2 DK60 )对犬进行口服免疫试验 ,在免疫第 4周采血分离血清 ,测定犬腺病毒的血凝抑制抗体 ( HI)效价 ,结果 30只试验犬全部产生了 HI抗体 ,表明 SY CAV- 2可通过口服或饵料的途径对犬实施免疫 ,为犬口服联合疫苗以及犬 2型腺病毒为载体的口服狂犬 展开更多

关键词 犬腺病毒 口服免疫 血凝抑制抗体效价 载体

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驯化克隆的CAV-2大斑株的实验免疫研究

10

作者 范泉水 夏咸柱 +6 位作者 邱薇 黄耕 何洪彬 余春 乔军 武银莲 殷震 《中国兽药杂志》 2002年第2期25-29,共5页

对MDCK细胞上驯化克隆产毒量高的大斑株 (LP)的第 5 0代毒和 75代毒进行了实验免疫研究 ,结果表明该毒株具有安全性好 ,通过静脉和口鼻接种CAV易感犬 ,无任何致病反应 ;用10 4 .0 TCID50 以上的该毒免疫CAV易感犬 ,即获得 97.5 %以上的... 对MDCK细胞上驯化克隆产毒量高的大斑株 (LP)的第 5 0代毒和 75代毒进行了实验免疫研究 ,结果表明该毒株具有安全性好 ,通过静脉和口鼻接种CAV易感犬 ,无任何致病反应 ;用10 4 .0 TCID50 以上的该毒免疫CAV易感犬 ,即获得 97.5 %以上的免疫保护 ;将其在CAV易感犬连续传 5代 ,其安全性与原毒相同 ,表明该毒株在 5 0～ 75代之间遗传性稳定 ,免疫原性良好 ;与CPV和CDV弱毒联合免疫 ,结果与各弱毒单独免疫所产生的抗体无差异 ,说明该毒株不但可以单独用于免疫 ,也可与其他弱毒联合免疫。是一株较好的疫苗候选株 ,具有开发应用价值。 展开更多

关键词 犬 传染性喉气管炎病毒 犬2型腺病毒 大蚀斑 免疫原性 安全性 驯化 克隆

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云南犬莱姆病血清抗体的调查研究

11

作者 兰建强 唐安建 +5 位作者 和绍禹 万康林 路年生 王度林 李国荣 齐桂凤 《云南畜牧兽医》 2000年第4期20-20,共1页

1999年采集云南地区 156份犬血清进行间接免疫荧光法 (IFA)检测莱姆病血清抗体，在 156份血清标本中检出≥ 1∶ 64的阳性标本 54份，阳性率为 34. 62％。调查首次发现云南地区存在犬莱姆病。

关键词 犬 莱姆病 间接免疫荧光 血清学调查 检测

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昆明某犬场犬传染性肝炎的病毒分离鉴定及防治研究 被引量：3

12

作者 黎立光 范泉水 《云南畜牧兽医》 2000年第2期6-8,共3页

在犬腺病毒分子流行病学调查过程中 ,从昆明某犬场发生的一起临床上表现犬传染性肝炎的病犬脏器中 ,分出了1株病毒(CAV -1-KM) ,并对其进行了病毒形态学、理化学、血清学交叉中和试验、动物感染试验与分子生物学系统鉴定 ,证明为一株犬... 在犬腺病毒分子流行病学调查过程中 ,从昆明某犬场发生的一起临床上表现犬传染性肝炎的病犬脏器中 ,分出了1株病毒(CAV -1-KM) ,并对其进行了病毒形态学、理化学、血清学交叉中和试验、动物感染试验与分子生物学系统鉴定 ,证明为一株犬传染性肝炎强毒 ,用特异性的抗犬传染性肝炎免疫血清对处于危险中的犬 ,进行了紧急预防注射 ,有效地控制了疾病的流行。用犬Ⅱ型腺病毒疫苗作预防注射 。 展开更多

关键词 犬 传染性肝炎病毒 病原分离鉴定 免疫

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过氧化物酶同工酶在黑蛋巢菌属分类上的应用研究

13

作者 余静 王杰 +2 位作者 陈玉惠 周彤燊 叶锋平 《西南林学院学报》 2003年第4期17-20,共4页

采用电泳方法分析过氧化物酶同工酶在黑蛋巢菌属种级分类中的意义.结果表明:组间过氧化物酶同工酶相似系数集中在0.20～0.40;种间相似系数多在0.30～0.57;同一个种不同菌株之间相似系数为0.89～1.00,且过氧化物酶同工酶不受地理种源的影... 采用电泳方法分析过氧化物酶同工酶在黑蛋巢菌属种级分类中的意义.结果表明:组间过氧化物酶同工酶相似系数集中在0.20～0.40;种间相似系数多在0.30～0.57;同一个种不同菌株之间相似系数为0.89～1.00,且过氧化物酶同工酶不受地理种源的影响.鸟巢菌科黑蛋巢菌属过氧化物酶同工酶具有种的稳定性,而在组间、组内种间差异较明显,对该属真菌的分类和疑难标本鉴定有一定意义. 展开更多

关键词 过氧化物酶同工酶 黑蛋巢菌属 电泳 种间相似系数 组间相似系数

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云南山羊痘电镜及PCR诊断技术研究

14

作者 廖红芬 张以芳 +3 位作者 孔德会 陶汝宪 蔡荣甫 龙沛然 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2008年第1期30-32,共3页

关键词 山羊痘病毒 电镜检测 PCR 云南省 诊断技术 流行病学调查 检测鉴定 烈性传染病

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红毛五加多糖对胃癌细胞的诱导凋亡作用 被引量：11

15

作者 吕晓英 刘新华 +4 位作者 李由 郑保春 李建明 王双印 曾令福 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2001年第2期137-139,142,共4页

目的 :研究红毛五加多糖对胃癌的诱导凋亡作用及其作用机制。方法 :采用流式细胞术检测凋亡细胞百分比及基因和细胞因子蛋白含量。结果 :该多糖使癌基因bcl 2蛋白表达降低 ,而使抑癌基因p5 3、bax、Fas、Fas L及细胞因子TGFβ1蛋白表达... 目的 :研究红毛五加多糖对胃癌的诱导凋亡作用及其作用机制。方法 :采用流式细胞术检测凋亡细胞百分比及基因和细胞因子蛋白含量。结果 :该多糖使癌基因bcl 2蛋白表达降低 ,而使抑癌基因p5 3、bax、Fas、Fas L及细胞因子TGFβ1蛋白表达增高。 结论 :该多糖通过降低原癌基因蛋白表达 ,增高抑癌基因和细胞因子蛋白表达 ,从而诱导胃癌细胞SGC 790 1凋亡。 展开更多

关键词 红毛五加多糖 胃癌 细胞凋亡 基因表达 细胞因子 AGP

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桂林老虎猫瘟热病毒的分离鉴定 被引量：10

16

作者 邱薇 夏咸柱 +7 位作者 范泉水 何洪彬 黄耕 余春 乔军 武银莲 范秀军 王春华 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第4期249-251,共3页

我们在作猫细小病毒分子流行病学调查过程中 ,从桂林送检的老虎粪便中分离出 1株虎细小病毒 ,并对其进行了系统鉴定 ,经形态学、理化学、血清学交叉中和试验、动物感染试验与分子生物学鉴定 ,证明为一株猫瘟热病毒 (猫泛白细胞减少症病... 我们在作猫细小病毒分子流行病学调查过程中 ,从桂林送检的老虎粪便中分离出 1株虎细小病毒 ,并对其进行了系统鉴定 ,经形态学、理化学、血清学交叉中和试验、动物感染试验与分子生物学鉴定 ,证明为一株猫瘟热病毒 (猫泛白细胞减少症病毒 )的强毒。 展开更多

关键词 老虎 猫瘟热病毒 分离 鉴定

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犬细小病毒核酸疫苗制备及免疫试验 被引量：8

17

作者 邱薇 范泉水 +6 位作者 李作生 杨美峰 郑颖 李丽红 王双印 李江 夏咸柱 《动物医学进展》 CSCD 2006年第3期78-81,共4页

以犬细小病毒基因组DNA为模板,应用PCR方法扩增了全长VP1基因,PCR产物经纯化和NotⅠ/BamHⅠ双酶切后与同样处理的真核表达载体pIRES进行连接,转化到感受态细胞JM109中,筛选了真核重组表达质粒pIRESVP1,并进行了序列测定。对6只9月龄犬... 以犬细小病毒基因组DNA为模板,应用PCR方法扩增了全长VP1基因,PCR产物经纯化和NotⅠ/BamHⅠ双酶切后与同样处理的真核表达载体pIRES进行连接,转化到感受态细胞JM109中,筛选了真核重组表达质粒pIRESVP1,并进行了序列测定。对6只9月龄犬分别接种不同剂量的pIRESVP1或空载体质粒及生理盐水,8周接种1次,每次接种前采血,测定血清的血凝抑制抗体效价,第2次免疫后即可检测到较高的血清效价。在第3次接种4周后,对全部实验犬进行攻毒,攻毒后第7天及第14天时采血,测定血清的血凝抑制抗体效价。所有接种pIRESVP1疫苗的犬均能抵抗CPV强毒的攻击,而接种空载体质粒和生理盐水的对照犬则全部发病。证明所构建的核酸疫苗(pIRESVP1)能使犬免受犬细小病毒强毒的感染。 展开更多

关键词 核酸疫苗 犬细小病毒 免疫

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抗五步蛇毒ScFv噬菌体显示文库的构建及表达 被引量：3

18

作者 尹惠琼 范泉水 +5 位作者 谭德勇 王双印 孙阳 李刚山 邱薇 余敏 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期338-340,共3页

目的 :构建抗五步蛇毒的特异性ScFv噬菌体显示文库 ,并从中筛选出阳性克隆。方法 :用五步蛇毒素免疫BALB C小鼠 ,挑选其中效价最高的 3只小鼠提取脾脏组织 ,抽提细胞总RNA ,经RT PCR分别扩增出VH、VL基因片段 ,经Linker连接成ScFv基因 (... 目的 :构建抗五步蛇毒的特异性ScFv噬菌体显示文库 ,并从中筛选出阳性克隆。方法 :用五步蛇毒素免疫BALB C小鼠 ,挑选其中效价最高的 3只小鼠提取脾脏组织 ,抽提细胞总RNA ,经RT PCR分别扩增出VH、VL基因片段 ,经Linker连接成ScFv基因 (singlechainvariablefragment) ,再把ScFv基因重组到pCANTAB 5E载体 ,转化至大肠杆菌TG1中表达 ,经辅助噬菌体 (Helperphage)M13K0 7拯救后建成噬菌体显示文库。结果 :经 4轮吸附 洗脱 富集筛选后 ,库容量达到 4× 10 8cfu L ,随机挑取 90个克隆进行ELISA检测 ,结果 16个呈阳性 ,并进行了重复验证。结论 展开更多

关键词 五步蛇 蛇毒 单链抗体 噬菌体显示文库

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3株钩端螺旋体外膜蛋白基因的序列分析 被引量：4

19

作者 邱薇 孟佩云 +5 位作者 尹惠琼 范泉水 李刚山 刘燕 王维祥 王双印 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2001年第4期17-18,35,共3页

目的　探讨钩端螺旋体外膜蛋白基因在钩体遗传分类中的作用。方法　对我国的 2株问号钩体赖型 5 6 6 0 1株和爪哇型 5 6 6 0 2株的外膜蛋白基因Ompl1进行PCR扩增 ,得到外膜蛋白基因并进行了全基因序列分析。测序的 2株钩体与流感伤寒型R... 目的　探讨钩端螺旋体外膜蛋白基因在钩体遗传分类中的作用。方法　对我国的 2株问号钩体赖型 5 6 6 0 1株和爪哇型 5 6 6 0 2株的外膜蛋白基因Ompl1进行PCR扩增 ,得到外膜蛋白基因并进行了全基因序列分析。测序的 2株钩体与流感伤寒型RH5 2株进行了核苷酸序列比较和推导的氨基酸序列比较。结果　赖型 5 6 6 0 1株和爪哇型 5 6 6 0 2株钩体Ompl1基因核苷酸序列与流感伤寒型RH5 2株的同源性分别为 89%和 80 % ,推导的外膜蛋白氨基酸序列的同源性分别为 92 %和88%。由此可以看出 5 6 6 0 1株、5 6 6 0 2株与RH5 2株分别属于不同的血清群 ,这与Yasuda的遗传分类相一致。结论　我国的赖型 5 6 6 0 1株和爪哇型 5 6 6 0 2株及流感伤寒型RH5 2株Ompl1基因的核苷酸序列存在一定差别 。 展开更多

关键词 钩端螺旋体 外膜蛋白基因 序列分析

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动物园猫瘟热净化的新手段——聚合酶链式反应 被引量：3

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作者 邱薇 夏咸柱 +7 位作者 范泉水 何洪彬 黄耕 余春 乔军 武银莲 范秀军 王春华 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2001年第5期14-15,共2页

关键词 动物园 猫瘟病毒 热净化 聚合酶链式反应 PCR技术

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