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低氘水抗肿瘤作用的研究进展
1
作者 王宏强 刘聪 +1 位作者 方唯意 杨慧龄 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1454-1456,1460,共4页
目的 氘是致癌的重要诱发因素之一，通过采用先进的制造技术去除天然水中的氘，降低氘含量可制得贫氘水，又称低氘水、超轻水或无氘水。有研究表明，水中氘浓度体积分数减少65%能够抑制肿瘤生长，国外临床实验证实服用低氘水（10-20 pp... 目的 氘是致癌的重要诱发因素之一，通过采用先进的制造技术去除天然水中的氘，降低氘含量可制得贫氘水，又称低氘水、超轻水或无氘水。有研究表明，水中氘浓度体积分数减少65%能够抑制肿瘤生长，国外临床实验证实服用低氘水（10-20 ppm）的肿瘤患者能使肿瘤停止生长，显著提高患者的生存时间和生活质量。目前，抗癌化疗药物种类繁多，但都存在一定局限性，而低氘水使用方便，没有毒副作用。基于低氘水的显著优势，本文主要对低氘水的抗癌作用的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 氘 癌症 低氘水 抗癌
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血清蛋白质组学研究中白蛋白和IgG去除方法的建立与评价 被引量：11
2
作者 李雪华 李欣 +1 位作者 徐守军 丁彦青 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2004年第11期1233-1235,共3页
目的建立和评价血清蛋白质组学研究中白蛋白和IgG的去除方法。方法应用Micro Bio-Spin column过滤纯化血清蛋白,去除白蛋白和IgG,利用双向凝胶电泳(2-DE)分析评价血清蛋白过滤效果。结果建立了血清白蛋白和IgG去除方法;过滤后大部分血... 目的建立和评价血清蛋白质组学研究中白蛋白和IgG的去除方法。方法应用Micro Bio-Spin column过滤纯化血清蛋白,去除白蛋白和IgG,利用双向凝胶电泳(2-DE)分析评价血清蛋白过滤效果。结果建立了血清白蛋白和IgG去除方法;过滤后大部分血清白蛋白和IgG能够去除,2-DE图谱中低丰度蛋白质分辨率增加。结论本研究建立的血清蛋白质纯化技术,可有效应用于疾病的血清蛋白质组学研究。 展开更多
关键词 蛋白质组学 白蛋白 IGG 去除方法 双向凝胶电泳 蛋白质纯化技术
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以肿瘤干细胞为靶的免疫治疗 被引量：7
3
作者 郭坤元 姚开泰 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期343-347,共5页
肿瘤干细胞(cancer stem cell,CSC)是肿瘤发生和转移的种子细胞,CSC具有自我更新、增殖和不完全分化的能力。CSC对化疗/放疗的抵抗以及免疫逃逸成为肿瘤复发的根源,要提高肿瘤治愈率必须彻底清除CSC。认识CSC的标记特征和"干性&qu... 肿瘤干细胞(cancer stem cell,CSC)是肿瘤发生和转移的种子细胞,CSC具有自我更新、增殖和不完全分化的能力。CSC对化疗/放疗的抵抗以及免疫逃逸成为肿瘤复发的根源,要提高肿瘤治愈率必须彻底清除CSC。认识CSC的标记特征和"干性"调节关键分子才能有效和特异地攻击CSC。免疫治疗具有抗原识别的靶向性和时空效应性,是以CSC为靶的治疗的基础;以单克隆抗体和致敏的免疫细胞为主要治疗技术的免疫治疗清除CSC具有可实践性和挑战性。 展开更多
关键词 肿瘤干细胞 免疫治疗 靶向治疗
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鼻咽癌组织中梭形癌细胞具有上皮-间充质转化及肿瘤干细胞特性 被引量：5
4
作者 罗伟仁 姚开泰 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期708-712,共5页
目的探讨鼻咽癌组织中梭形癌细胞是否具有上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)和肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs)特性。方法以33例鼻咽慢性炎组织作为正常对照,采用免疫组化SP法检测98例鼻咽癌组织梭形癌细胞中... 目的探讨鼻咽癌组织中梭形癌细胞是否具有上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)和肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs)特性。方法以33例鼻咽慢性炎组织作为正常对照,采用免疫组化SP法检测98例鼻咽癌组织梭形癌细胞中E-cadherin、N-cadherin、vimentin、OCT4、SOX2和ALDH1的表达。结果与鼻咽慢性炎组织相比,鼻咽癌组织中梭形癌细胞上皮标志物蛋白E-cadherin明显下调(P<0.001),而间叶标志物蛋白N-cadherin和vimentin明显上调(P均<0.001)。梭形癌细胞中E-cadherin与N-cadherin(P=0.020)和vimentin(P=0.001)的表达呈明显负相关。与鼻咽慢性炎组织相比,鼻咽癌组织中梭形癌细胞中CSCs标志物OCT4、SOX2和ALDH1蛋白明显升高(P均<0.001),二者差异有统计学意义。此外,梭形癌细胞中E-cadherin与OCT4(P=0.029)及ALDH1(P=0.000)的表达均呈负相关。结论鼻咽癌组织中梭形癌细胞具有EMT及CSCs特性,可作为判断转移性鼻咽癌的形态学指标。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 梭形癌细胞 上皮-间充质转化 肿瘤干细胞
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鼻咽癌中ABC转运蛋白基因表达的研究 被引量：4
5
作者 杜莎莎 姚开泰 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期449-452,共4页
目的探讨10种耐药相关的ABC转运蛋白在鼻咽癌组织中的表达及意义。方法采用实时荧光定量PCR,检测10种耐药相关的ABC转运蛋白在25例鼻咽癌组织中的表达水平,并与其在正常鼻咽组织中的表达进行比较分析。结果10种耐药相关的ABC转运蛋白在... 目的探讨10种耐药相关的ABC转运蛋白在鼻咽癌组织中的表达及意义。方法采用实时荧光定量PCR,检测10种耐药相关的ABC转运蛋白在25例鼻咽癌组织中的表达水平,并与其在正常鼻咽组织中的表达进行比较分析。结果10种耐药相关的ABC转运蛋白在鼻咽癌组织中均有不同程度的表达,其中ABCA2、ABCC3在鼻咽癌组织及鼻咽正常组织中均高表达;ABCC1、ABCC5及ABCG2在鼻咽癌组织中的表达高于其在正常鼻咽组织中的表达,并有统计学差异;而ABCB1、ABCC2、ABCC3、ABCC4、ABCC6及ABCC11在两类样本中均为低表达。结论在鼻咽组织中高表达的转运蛋白与鼻咽癌的天然耐药性有关;在鼻咽癌组织中高表达,而在正常鼻咽组织中表达显著降低的ABC转运蛋白很可能在鼻咽癌对化疗的耐药中起着重要作用,在鼻咽癌组织及正常鼻咽组织中均低表达的转运蛋白的转运药物则可能是鼻咽癌化疗的敏感药物。 展开更多
关键词 鼻咽癌 多药耐药 ATP结合盒膜转运蛋白 实时荧光定量聚合酶链反应
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小鼠和人胚胎鼻咽发育解剖形态学比较研究
6
作者 郑文宏 邓丽群 安靓 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2013年第3期288-292,共5页
目的比较人与小鼠胚胎鼻咽部的解剖学和组织学差异，为研究一些鼻咽部疾病发病机制提供参考资料。方法用组织学方法观察E9．28周人胚胎及E9．5～19．5dC57BL／6J小鼠胚胎鼻咽结构及粘膜形态。结果人胚胎鼻咽部呈不规则的立方形，顶后壁... 目的比较人与小鼠胚胎鼻咽部的解剖学和组织学差异，为研究一些鼻咽部疾病发病机制提供参考资料。方法用组织学方法观察E9．28周人胚胎及E9．5～19．5dC57BL／6J小鼠胚胎鼻咽结构及粘膜形态。结果人胚胎鼻咽部呈不规则的立方形，顶后壁呈约120。的弧形；鼻咽部富含皱襞、隐窝及淋巴组织。小鼠鼻咽部是一个接近直线的弧形管腔，无淋巴组织及隐窝等结构。人胚胎鼻咽粘膜早、中期主：要是假复层纤毛柱状上皮被覆，只有少量过渡上皮及复层鳞状上皮存在。小鼠胚胎鼻咽粘膜全部为假复层纤毛柱状上皮。结论人与小鼠胚胎鼻咽解剖学和组织学差异，可能导致他们对某些疾病易感性不同。 展开更多
关键词 小鼠 人 胚胎 鼻咽粘膜 发育
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肺癌A549细胞株中ALDH1^+细胞的生物学功能研究 被引量：6
7
作者 邹爱梅 吴爱兵 +4 位作者 黄维甄 张金标 谢剑明 李荣 罗荣城 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2011年第14期817-821,共5页
目的: 探讨肺癌A549细胞株中具有肿瘤干细胞特性的ALDH1^+细胞的生物学功能特性。方法:运用流式细胞仪分选肺癌A549细胞株中ALDH1^+细胞,并通过肿瘤球培养、MTT实验、平板克隆、Transwell小室迁移实验、裸鼠体内成瘤实验来验证ALDH1^+... 目的: 探讨肺癌A549细胞株中具有肿瘤干细胞特性的ALDH1^+细胞的生物学功能特性。方法:运用流式细胞仪分选肺癌A549细胞株中ALDH1^+细胞,并通过肿瘤球培养、MTT实验、平板克隆、Transwell小室迁移实验、裸鼠体内成瘤实验来验证ALDH1^+细胞的自我更新、增殖克隆、迁移及致瘤能力。结果:ALDH1^+A549细胞的肿瘤球形成能力、增殖克隆、迁移和体内成瘤能力明显高于ALDH1-A549细胞和未经分选的A549细胞。结论:A549细胞株中ALDH1^+A549细胞具有自我更新、增殖、迁移和高致瘤能力的肿瘤干细胞特性,ALDH1可作为分选肺癌肿瘤干细胞的标志物。 展开更多
关键词 ALDH1 肺癌 肿瘤干细胞 肿瘤球
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木香内酯抑制肺癌细胞H460生长的机制研究 被引量：9
8
作者 吴蒙 姚开泰 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2017年第9期932-936,共5页
目的前期研究发现木香内酯(MCL)可以提高乳腺癌细胞对化疗药物顺铂的敏感性以及诱导乳腺癌细胞的凋亡,文中旨在初步探讨MCL对肺癌H460细胞生长的抑制作用及其机制。方法不同浓度30、60、90μmol/L的MCL的培养(以不含药物的培养基为对照... 目的前期研究发现木香内酯(MCL)可以提高乳腺癌细胞对化疗药物顺铂的敏感性以及诱导乳腺癌细胞的凋亡,文中旨在初步探讨MCL对肺癌H460细胞生长的抑制作用及其机制。方法不同浓度30、60、90μmol/L的MCL的培养(以不含药物的培养基为对照)作用于肺癌细胞系H460细胞后,通过CCK8和平板克隆形成实验检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞的凋亡及周期;通过Western blot方法检测MCL抑制肺癌细胞H460生长的机制。结果与对照克隆数(275.00±7.21)比较,30、60、90μmol/L MCL作用后克隆数(199.00±5.66、166.00±1.41、90.00±7.81)均明显减少(P<0.05)。同时,CCK-8结果显示,与对照比较,30μmol/L MCL作用72、96 h后,A值明显升高(P<0.05);60、90μmol/L MCL作用48、72、96 h后,A值明显升高(P<0.05)。与对照凋亡比例[(2.9±0.03)%]相比,30、60、90μmol/L的MCL作用后早期和晚期凋亡比例[(5.23±0.76)%、(9.06±0.47)%、(19.00±0.64)%]均明显升高(P<0.05)。与对照组G2/M期细胞比例[(11.48±0.36)%]相比,30、60、90μmol/L的MCL G2/M期细胞比例[(12.52±0.88)%、(17.22±0.43)%、(19.84±0.31)%]逐渐上升,且MCL在浓度为60、90μmol/L处理后较对照差异具有统计学意义(P<0.05)。与对照组S+G1/G0期细胞比例[(87.53±1.06)%]相比,30、60、90μmol/L MCL的S+G1/G0期细胞比例[(87.47±0.89)%、(82.94±0.67)%、(79.79±0.21)%]逐渐降低,且MCL在浓度为60、90μmol/L处理后较对照差异具有统计学意义(P<0.05)。与对照相比,30、60、90μmol/L MCL处理后notch4的蛋白表达水平明显下降(P<0.05);而caspase3的蛋白剪切,即cleaved caspase3的表达水平明显上调(P<0.05)。结论 MCL对肺癌H460的生长具有抑制作用。 展开更多
关键词 木香内酯 肺癌 生长抑制
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1型糖尿病发病机制及治疗研究 被引量：35
9
作者 陶桂香 徐洋 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1297-1303,共7页
1型糖尿病是一种自身免疫性疾病,多由T淋巴细胞介导,胰岛β细胞被攻击破坏,引发炎症,导致胰岛素分泌绝对不足而发病,需外源胰岛素终生治疗。如果治疗不当或不及时会出现严重的并发症而导致死亡,影响了患者的生活质量,也让患者家庭承受... 1型糖尿病是一种自身免疫性疾病,多由T淋巴细胞介导,胰岛β细胞被攻击破坏,引发炎症,导致胰岛素分泌绝对不足而发病,需外源胰岛素终生治疗。如果治疗不当或不及时会出现严重的并发症而导致死亡,影响了患者的生活质量,也让患者家庭承受沉重的经济负担。目前研究认为1型糖尿病的发生有遗传因素,但其他因素像环境、病毒感染等的研究也越来越多,其复杂的发病机制一直是一个研究热点。虽然目前没有有效根治1型糖尿病的方法,但通过严格控制患者的血糖水平,防止并发症的发生,可以提高患者的生存质量,延长其寿命。国外对于1型糖尿病的研究比较多,已有报道患者通过治疗,不仅可以减少并发症,改善生活质量,使患者拥有正常的寿命。近年来干细胞治疗1型糖尿病的研究越来越多,有望使1型糖尿病的根治成为可能,但其临床研究中出现的免疫排斥及自身免疫反应成为首要解决的问题,而利用人源化鼠模型能加快其研究步伐,特别是通过免疫抑制通路来治疗自身免疫性疾病及异体免疫排斥的研究迫在眉睫。 展开更多
关键词 1型糖尿病 自身免疫 T细胞 人源化鼠 免疫排斥
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Nestin增强部分肝切除小鼠模型肝再生增殖能力的研究
10
作者 纪小珍 李振林 +1 位作者 贾俊双 安靓 《中国比较医学杂志》 CAS 2014年第1期35-39,I0009,共6页
目的探讨巢蛋白(nestin)基因过表达对小鼠部分肝切除后肝再生增殖能力的影响及其可能的分子机制。方法应用荧光定量PCR、Western blot和免疫组化的方法检测转基因小鼠肝脏中外源基因nestin的表达情况。使用Brdu标记法比较转基因小鼠和... 目的探讨巢蛋白(nestin)基因过表达对小鼠部分肝切除后肝再生增殖能力的影响及其可能的分子机制。方法应用荧光定量PCR、Western blot和免疫组化的方法检测转基因小鼠肝脏中外源基因nestin的表达情况。使用Brdu标记法比较转基因小鼠和野生型小鼠肝脏在不同状态下(静息状态、肝叶切除后24 h、肝叶切除后72 h)肝细胞增殖能力的差异。结果荧光定量PCR、Western blot和免疫组化证实转基因小鼠肝脏中存在nestin的高表达状态。在静息状态下,野生鼠和nestin过表达的转基因鼠肝脏BrdU标记率几乎为零,两者无明显差异;但在肝大部切除的情况下,nestin过表达的转基因鼠有更多的细胞进入增殖状态,增殖能力较野生鼠明显增强,差别具有统计学意义(24 h:t=2.996,P=0.024;72 h:t=2.915,P=0.027)。结论 nestin过表达对静息状态下的肝脏增殖无影响,但可增加损伤修复情况下肝脏的再生增殖能力。表明nestin过表达对静止期细胞作用不明显,但在一些病理或刺激状态下nestin可以通过促进DNA的合成而加速细胞的分裂增殖。 展开更多
关键词 NESTIN 肝大部切除 肝脏增殖 小鼠
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诱导性多潜能干细胞(iPS cells)——现状及前景展望 被引量：34
11
作者 申红芬 姚志芳 +3 位作者 肖高芳 贾俊双 肖东 姚开泰 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第8期950-960,共11页
主要从iPS细胞发展历程、获得iPS细胞的几个关键步骤(如基因导入方式、诱导iPS细胞所需因子组合与小分子化合物运用和体细胞种类选择等)、病人或疾病特异性iPS细胞、iPS细胞体内外诱导分化与其衍生物的临床应用和制备无遗传修饰的(genet... 主要从iPS细胞发展历程、获得iPS细胞的几个关键步骤(如基因导入方式、诱导iPS细胞所需因子组合与小分子化合物运用和体细胞种类选择等)、病人或疾病特异性iPS细胞、iPS细胞体内外诱导分化与其衍生物的临床应用和制备无遗传修饰的(genetic modification-free)iPS细胞的可行性与前景等方面对iPS细胞最新研究进展做评述.日本和美国研究小组先后用4种基因将小鼠(2006年8月)和人(2007年11～12月)的体细胞在体外重编程为诱导性多潜能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPS cells),此后在短短两年多时间内,iPS细胞的研究和关注度呈爆炸式增长.体细胞重编程、去分化和多潜能干细胞来源等一系列热点问题再次成为干细胞和发育生物学等研究的热点和焦点.与胚胎干细胞(embryonic stem cells,EScells)一样,iPS细胞在体内可分化为3个胚层来源的所有细胞,进而参与形成机体所有组织和器官.迄今,在体外已由iPS细胞定向诱导分化出功能性的多种成熟细胞.因此,iPS细胞研究不仅具有重要理论意义,而且在再生医学、组织工程和药物发现与评价等方面极具应用价值. 展开更多
关键词 体细胞重编程 胚胎干细胞 诱导性多潜能干细胞 分化 细胞治疗 无遗传修饰的重编程方法 小分子
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实时荧光定量RT-PCR分析非小细胞肺癌SATB1的表达和临床病理意义 被引量：32
12
作者 周来勇 刘芳 +3 位作者 童健 陈群请 张福伟 郭琳琅 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期534-537,共4页
目的检测非小细胞肺癌组织中SATB1 mRNA的表达,探讨SATB1表达与非小细胞肺癌发生、发展的关系及其临床病理意义。方法用TRIZOL提取非小细胞肺癌组织和正常肺组织总RNA后,将其反转录为cDNA,以实时荧光定量RT-PCR方法检测非小细胞肺癌组... 目的检测非小细胞肺癌组织中SATB1 mRNA的表达,探讨SATB1表达与非小细胞肺癌发生、发展的关系及其临床病理意义。方法用TRIZOL提取非小细胞肺癌组织和正常肺组织总RNA后,将其反转录为cDNA,以实时荧光定量RT-PCR方法检测非小细胞肺癌组织及正常肺组织中SATB1 mRNA的表达,分析SATB1基因表达与临床病理参数的相关性。结果癌组织中SATB1 mRNA表达量为正常组织13倍,两者差异显著(P<0.001),其中有、无转移组分别为正常组织23.63倍和5.57倍。结论SATB1 mRNA的表达水平可能与非小细胞肺癌发生发展及淋巴转移有关,有望成为判断非小细胞肺癌预后的一个指标。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 SATB1 mRNA 实时荧光定量RT-PCR
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miR-590-5p和miR-590-3p参与肝细胞肝癌发展的机制 被引量：20
13
作者 杨红飞 郑文宏 +2 位作者 赵文淘 关春燕 安靓 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期804-811,共8页
目的研究miR-590的两个臂—miR-590-5p和miR-590-3p对肝癌细胞增殖能力的影响,以及参与肿瘤发生发展的机制。方法利用miRNA芯片、QPCR对肝癌标本和各细胞株miR-590的表达谱系进行分析和验证。通过脂质体将miR-590 mimic或inhibitor转染... 目的研究miR-590的两个臂—miR-590-5p和miR-590-3p对肝癌细胞增殖能力的影响,以及参与肿瘤发生发展的机制。方法利用miRNA芯片、QPCR对肝癌标本和各细胞株miR-590的表达谱系进行分析和验证。通过脂质体将miR-590 mimic或inhibitor转染正常肝细胞或肝癌细胞,MTT生长曲线分析和软琼脂克隆形成实验检测转染后细胞增殖及存活能力的变化。Targetscan预测miR-590-5p和miR-590-3p的靶基因,并通过萤光素酶报告系统以及western blot进行验证。结果 miRNA芯片结果显示3个肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织相对于癌旁正常组织,miR-590-5p和miR-590-3p表达上调。通过QPCR验证了10例临床HCC肿瘤标本发现80%的HCC组织相对于癌旁组织miR-590-5p和miR-590-3p均同步显著上调。QPCR结果进一步发现,HepG2、Hep3B、Huh7三株HCC细胞株相对于正常肝细胞株L-O2 miR-590-5p/3p同样表达上调。MTT和软琼脂克隆形成结果显示,L-O2分别过表达miR-590-5p和miR-590-3p,细胞的增殖能力都显著增加(P<0.05);而HepG2、Hep3B、Huh7分别下调miR-590-5p和miR-590-3p的表达后,细胞的增殖能力也都显著降低(P<0.05)。Targetscan预测,PDCD4和PTEN分别作为miR-590-5p和miR-590-3p的潜在靶基因。萤光素酶报告系统以及western blot结果显示miR-590-5p和miR-590-3p可以分别直接下调靶基因PDCD4和PTEN的表达(P<0.05)。进一步我们发现miR-590-3p通过下调PTEN激活PI3K-AKT信号通路,促进AKT1-S473的磷酸化水平。结论在HCC发展过程中miR-590扮演着重要的致癌因子角色,我们结果发现miR-590的两个臂都具有促进肿瘤发生的生物学功能,它们分别通过靶向调节抑癌基因PDCD4和PTEN的表达来促进HCC细胞的增殖和存活,并激活核心的PI3K-AKT肿瘤信号通路。由此可见miR-590在HCC发生发展过程中具有重要的意义,也可作为临床诊治潜在的新靶标。 展开更多
关键词 miR-590 miR-590-5p miR-590-3p 肝细胞肝癌 PDCD4 PTEN 增殖
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加强推进力度,促进转化医学发展 被引量：41
14
作者 蔡红兵 李欣 +4 位作者 孙学刚 方唯意 张龙城 杨明会 姚开泰 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期741-743,共3页
介绍了转化医学的概念和国内外发展状况。根据2010年"香山会议(S13)"精神,对照政府提出的"十二五"期间防治重大疾病、控制健康危险因素的目标,结合目前国内转化医学发展现状,提出应该从推广转化医学理念、搭建平台... 介绍了转化医学的概念和国内外发展状况。根据2010年"香山会议(S13)"精神,对照政府提出的"十二五"期间防治重大疾病、控制健康危险因素的目标,结合目前国内转化医学发展现状,提出应该从推广转化医学理念、搭建平台、建设专业人才队伍和运行机制、促进研究成果向卫生政策转化、注重"创新"理念的贯穿和原创性中医药理论和药物的研究等方面加强推进力度,以促进转化医学在国内的发展。 展开更多
关键词 转化医学 转化研究 卫生政策
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慢病毒介导的siRNA靶向干扰EIF4G1鼻咽癌稳定细胞株的建立 被引量：8
15
作者 涂露霞 方唯意 +4 位作者 刘真 李欣 何英 谢思明 姚开泰 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期844-847,851,共5页
目的检测人真核翻译起始因子4G1(EIF4G1)基因在8株鼻咽癌细胞中的差异表达,寻找最高表达的细胞株。构建EIF4G1基因的小干扰RNA(siRNA)表达载体,建立稳定干扰EIF4G1表达的鼻咽癌细胞株,测定干扰效率。方法应用荧光定量PCR检测EIF4G1mRNA... 目的检测人真核翻译起始因子4G1(EIF4G1)基因在8株鼻咽癌细胞中的差异表达,寻找最高表达的细胞株。构建EIF4G1基因的小干扰RNA(siRNA)表达载体,建立稳定干扰EIF4G1表达的鼻咽癌细胞株,测定干扰效率。方法应用荧光定量PCR检测EIF4G1mRNA在鼻咽癌细胞株5-8F、6-10B、C666-1、CNE1、CNE2、HNE1、HONE1、SUNE1表达水平。构建重组靶向EIF4G1shRNA慢病毒表达质粒pLenti6/BLOCK-iT-DEST/EIF4G1shRNA。用293FT细胞包装后产生的成熟慢病毒颗粒感染5-8F细胞,经杀稻瘟菌素筛选后,建立稳定表达siRNA的5-8F鼻咽癌细胞株。最后荧光定量PCR检测干扰效率。结果在8个鼻咽癌细胞株中,EIF4G1显示在5-8F细胞株中表达最高。PCR和测序验证pLenti6/BLOCK-iT-DEST/EIF4G1shRNA重组质粒构建成功;经293FT细胞病毒包装,感染5-8F细胞后,与阴性对照组和未干扰组相比可明显抑制EIF4G1mRNA水平EIF4G1表达。结论成功构建了pLenti6/BLOCK-iT-DEST/EIF4G1shRNA慢病毒重组质粒,建立了稳定靶向干扰EIF4G1表达的siRNA5-8F鼻咽癌细胞株。 展开更多
关键词 真核翻译起始因子4G1 慢病毒 重组质粒 RNA干扰 鼻咽癌细胞
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CXCR4／SDF-1对鼻咽癌细胞增殖与迁移能力的影响 被引量：11
16
作者 邱际华 刘求真 +2 位作者 陈丽 焦锋 姚开泰 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期598-600,共3页
目的观察鼻咽癌不同恶性程度的细胞中趋化因子受体CXCR4的表达,检测CXCR4/SDF-1反应轴对鼻咽癌细胞的增殖作用,SDF-1对CXCR4阳性肿瘤细胞的趋化作用,探讨CXCR4/SDF-1生物学轴对人鼻咽癌细胞增殖与迁移能力的影响。方法以鼻咽癌成瘤高转... 目的观察鼻咽癌不同恶性程度的细胞中趋化因子受体CXCR4的表达,检测CXCR4/SDF-1反应轴对鼻咽癌细胞的增殖作用,SDF-1对CXCR4阳性肿瘤细胞的趋化作用,探讨CXCR4/SDF-1生物学轴对人鼻咽癌细胞增殖与迁移能力的影响。方法以鼻咽癌成瘤高转移细胞株5-8F及成瘤不转移细胞株6-10B为研究对象,采用Westernblot免疫印迹法检测鼻咽癌细胞株CXCR4蛋白的表达情况,SDF-1及CXCR4阻断剂AMD3100作用于两种细胞后,MTT法检测细胞的增殖能力,体外迁徙实验检测CXCR4/SDF-1反应轴对鼻咽癌细胞的趋化作用。结果5-8F细胞株CXCR4蛋白的表达明显高于6-10B细胞株;SDF-1能明显增强5-8F细胞增殖与迁移能力,CXCR4阻断剂AMD3100作用后,5-8F细胞增殖与迁移能力明显降低;SDF-1对6-10B细胞的迁移及增殖能力无明显影响。结论CXCR4/SDF-1生物学轴与鼻咽癌细胞株的增殖与迁移有一定的关系,AMD3100可明显抑制鼻咽癌细胞的增殖与迁移能力。 展开更多
关键词 鼻咽癌 增殖 迁移 CXCR4 SDF-1
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人参超微粉与细粉的体外溶出度比较 被引量：20
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作者 蔡璐 梁少瑜 +2 位作者 戴开金 向飞军 罗奇志 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1547-1550,共4页
目的比较人参超微粉与细粉中人参皂苷类成分的体外溶出度,探索粉体粒径对人参皂苷类成分溶出的影响,为人参入药时粉碎粒径的选择提供科学依据。方法采用浆法,运用高效液相色谱同时分析人参超微粉和细粉中5种人参皂苷成分的体外溶出情况... 目的比较人参超微粉与细粉中人参皂苷类成分的体外溶出度,探索粉体粒径对人参皂苷类成分溶出的影响,为人参入药时粉碎粒径的选择提供科学依据。方法采用浆法,运用高效液相色谱同时分析人参超微粉和细粉中5种人参皂苷成分的体外溶出情况,绘制溶出曲线,比较人参不同粒径粉末的溶出特征。结果人参超微粉与细粉相比,其人参皂苷类成分Re、Rg1、Rf、Rb1、Rb2具有更快的溶出速度,5 min内即能溶出总量的90%以上;人参超微粉与细粉中人参Re、Rf、Rb1、Rb2溶出总量无显著性差异;人参超微粉中Rg1溶出量较高(P<0.05);但将人参超微粉与细粉均置于袋泡茶茶袋中时,人参细粉中5种人参皂苷反而比人参超微粉溶出快。结论超微粉碎能加快人参中人参皂苷类成分的溶出速度,提高Rg1溶出总量,但将其装入袋泡茶茶袋中时,人参超微粉中人参皂苷类成分反而比人参细粉溶出慢,因此在超微粉入药时,不宜选用袋泡茶剂型。 展开更多
关键词 人参皂苷 溶出度 人参超微粉 人参细粉
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人Snail基因RNAi慢病毒载体对鼻咽癌5-8F细胞增殖和侵袭的影响 被引量：5
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作者 陈丽 刘求真 +2 位作者 邱际华 焦锋 姚开泰 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1151-1154,共4页
目的构建人Snail基因慢病毒干扰载体及观察干扰前后对鼻咽癌5-8F细胞增殖和侵袭的影响。方法设计Snail基因特异性RNAi靶序列,克隆至经双酶切后的plVTHM线性化载体,测序鉴定正确后,用病毒上清感染鼻咽癌细胞5-8F,流式细胞仪分选获得稳定... 目的构建人Snail基因慢病毒干扰载体及观察干扰前后对鼻咽癌5-8F细胞增殖和侵袭的影响。方法设计Snail基因特异性RNAi靶序列,克隆至经双酶切后的plVTHM线性化载体,测序鉴定正确后,用病毒上清感染鼻咽癌细胞5-8F,流式细胞仪分选获得稳定干扰Snail基因的细胞亚系。荧光定量PCR检测mRNA表达情况;MTT法和体外侵袭实验分别测定对细胞增殖和侵袭的影响。结果plVTHM-siSnail慢病毒干扰载体构建正确。荧光定量PCR结果表明分选后的细胞Snail mRNA水平表达显著降低。干扰后的细胞增殖减慢,穿透基膜的细胞数量减少,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论plVTHM-siSnail表达质粒可显著下调Snail基因在5-8F中的表达,在一定程度上抑制鼻咽癌细胞的增殖和侵袭。 展开更多
关键词 SNAIL RNA干扰 鼻咽癌 增殖 侵袭
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鼻咽癌淋巴结转移动物模型的建立及其转移相关标签基因的筛选 被引量：6
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作者 冷雷 刘腾飞 +2 位作者 黄仲曦 谢卫兵 姚开泰 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1519-1522,共4页
目的建立稳定的鼻咽癌(NPC)淋巴结转移模型,筛选鼻咽癌淋巴结转移的候选标志基因。方法我们用鼻咽癌5-8F-EGFP细胞株建立了稳定淋巴结转移可视化裸鼠模型,筛选获得具有淋巴结转移潜能的5-8F-LN鼻咽癌细胞。通过文献数据挖掘获得乳腺癌,... 目的建立稳定的鼻咽癌(NPC)淋巴结转移模型,筛选鼻咽癌淋巴结转移的候选标志基因。方法我们用鼻咽癌5-8F-EGFP细胞株建立了稳定淋巴结转移可视化裸鼠模型,筛选获得具有淋巴结转移潜能的5-8F-LN鼻咽癌细胞。通过文献数据挖掘获得乳腺癌,头颈部鳞癌等肿瘤的转移标签基因和淋巴结转移标签基因,结合鼻咽癌5-8F和6-10B细胞株约307个差异性表达基因得到21个重叠的基因,最终分析得到3个可能促进恶性肿瘤转移的高表达基因:ADM,IRF1和CAV1。通过荧光定量PCR验证在5-8F-EGFP,6-10B-EGFP,5-8F-LN和NP69细胞中的表达情况。结果IRF1在5-8F-EGFP、6-10B-EGFP和5-8F-LN中的表达远高于在NP69中的表达,且差别有统计学意义(P=0.008、0.022、0.006);CAV1在5-8F-EGFP中的表达高于其在6-10B-EGFP中的表达(P=0.014);ADM在4种细胞中的表达无明显差别。结论IRF1可能在鼻咽癌演进过程中起着重要作用,而CAV1在5-8F-EGFP中的相对高表达可能和其高转移特性有关。 展开更多
关键词 鼻咽癌 转移 可视化动物模型 签名基因 荧光定量PCR
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F10基因过表达对A549细胞致瘤性的影响 被引量：7
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作者 宋亚丽 张弓 +5 位作者 庞战军 朱秀兰 杨晓萍 李雅芳 全松 邢福祺 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期676-680,共5页
目的探讨F10基因过表达对肺癌A549细胞裸鼠成瘤的影响及其机制。方法取SPF级裸鼠（4~5周龄）18只,随机均分为A549-WT组、Mock-A549组和F10＋A549组（n=6）,依次接种野生A549细胞（A549-WT）、转染了空载体的对照细胞株（Mock-A549）和... 目的探讨F10基因过表达对肺癌A549细胞裸鼠成瘤的影响及其机制。方法取SPF级裸鼠（4~5周龄）18只,随机均分为A549-WT组、Mock-A549组和F10＋A549组（n=6）,依次接种野生A549细胞（A549-WT）、转染了空载体的对照细胞株（Mock-A549）和已构建的过表达F10基因的A549细胞（F10＋A549）5×106个于颈背部皮下。接种后每3～4d称体重并观察,记录肿瘤发生时间,绘制在体肿瘤生长曲线,计算各组裸鼠的成瘤率。各组裸鼠于接种5周后处死,进行大体观察后取瘤组织块制备石蜡切片,HE染色后行病理组织学观察,并采用免疫组化法检测Caspase-3、Bax和Bcl-2在瘤组织中的表达。结果 A549-WT组、Mock-A549组和F10＋A549组裸鼠的成瘤时间分别为12.0±1.4、11.7±1.0、8.5±1.4d,组间比较差异有统计学意义（F=13.523,P=0.000）,A549-WT组和Mock-A549组裸鼠成瘤时间长于F10＋A549组（P〈0.05）,而前两组比较差异无统计学意义（P=0.660）。大体观察可见,F10＋A549组成瘤体积较A549-WT和Mock-A549组明显增大。F10＋A549组肿瘤的在体生长速度较A549-WT和Mock-A549组增快,差异有统计学意义（P〈0.05）,而后两组间比较差异无统计学意义（P〉0.05）。肿瘤组织HE切片显示,A549-WT和Mock-A549组成瘤组织中存在较多坏死细胞,HE染色表现为均质红染、无定形物质结构,而F10＋A549组成瘤组织边缘细胞坏死较少,细胞增生明显,且肿瘤组织局部可见微血管生成。免疫组化检测显示,Bcl-2蛋白在A549-WT和Mock-A549两组瘤组织中几乎无表达,而在F10＋A549组瘤组织中表达较多,阳性细胞呈弥漫性分布。Bax和Caspase-3蛋白在A549-WT和Mock-A549两组瘤组织中的表达均较强,尤以A549-WT组为显著,但在F10＋A549组瘤组织中表达均很弱。结论 F10基因可通过下调Caspase-3和Bax表达、上调Bcl-2表达而增强肺癌A549细胞株在裸鼠体内的致瘤性。 展开更多
关键词 肺肿瘤 F10基因 A549细胞 致癌性试验
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