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追忆中国现代中兽医学家宋大鲁先生
1
作者 刘家国 《中兽医医药杂志》 CAS 2024年第6期86-89,共4页
时光飞逝,岁月如梭,从1994年9月1日到南京农业大学中兽医学科宋大鲁教授门下求学,至今已经整整30年。先生2018年1月4日逝世。每每想起先生,总难免神伤。先生的音容笑貌犹如昨日,历历在目。先生自幼苦难,勤俭好学,上进要强,靠自身努力考... 时光飞逝,岁月如梭,从1994年9月1日到南京农业大学中兽医学科宋大鲁教授门下求学,至今已经整整30年。先生2018年1月4日逝世。每每想起先生,总难免神伤。先生的音容笑貌犹如昨日,历历在目。先生自幼苦难,勤俭好学,上进要强,靠自身努力考取初级师范学校,边教学边苦读,终于考取南京农学院,成为一名兽医学生,学成后被陈振旅、张幼成等老先生赏识,留校任教中兽医学。先生长期致力于马、牛、羊病的中兽医防治以及中兽医药提高家禽免疫力的研究,成果丰硕,并被《人民日报》报道;带领学科组创收并自力更生修建了中兽医学科学楼;创办了国际兽医针灸培训班;创建了南京农业大学中药材生产专业;创办中国高校宠物医院,成为我国中兽医学的先驱和主要领军人之一。先生于1997年初退休,开始专注于宠物中兽医学发展,开创了宠物中兽医学的先河,培养了一大批宠物行业的领军人物,并编著和翻译了近1000万字的相关著作,这些著作都成为本行业的经典参考书籍。因对中兽医学卓越的贡献,先生被中央电视台《科技人生》专栏采访报道。先生一生勤奋求索,执着发扬中兽医,引领行业发展,永远值得我等后辈们学习! 展开更多
关键词 现代中兽医学家 宋大鲁 南京农业大学 领军人
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安徽鸡群鸡滑液囊支原体病流行病学调查与病原分离鉴定
2
作者 侯宏艳 沈学怀 +7 位作者 赵瑞宏 胡晓苗 戴银 尹磊 殷冬冬 王洁茹 郝胜杰 潘孝成 《安徽农业科学》 2025年第3期82-85,91,共5页
为进一步了解鸡滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)在安徽鸡群中的感染情况和流行菌株的遗传进化特征,对10个不同类型鸡群进行血清学和抗原核酸检测,分离并鉴定菌株,并进行遗传进化分析。结果表明,安徽鸡群中MS的平均抗体阳性率为71.... 为进一步了解鸡滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)在安徽鸡群中的感染情况和流行菌株的遗传进化特征,对10个不同类型鸡群进行血清学和抗原核酸检测,分离并鉴定菌株,并进行遗传进化分析。结果表明,安徽鸡群中MS的平均抗体阳性率为71.02%,平均核酸阳性率为72.19%,血清学检测结果和核酸检测结果之间存在显著相关(P<0.05);通过不同类型鸡群的比较发现,青年鸡群MS的感染率最低,其次为种鸡群。经过分离、培养、纯化和鉴定,从发病鸡群中分离到2株MS分离株,命名为AHH-01和AHH-02,分离株具有典型的MS菌株特征;基因分型结果显示,2株分离株均为K基因型,在遗传进化关系上与四川分离株SMU-SCYA-LF1/2019的亲缘关系最近,与国内其他地区的分离株存在一定的遗传距离。该研究为深入分析安徽地区鸡群MS的感染情况和流行菌株提供了研究基础。 展开更多
关键词 鸡滑液囊支原体 血清学 核酸 分离鉴定 进化分析
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猫冠状病毒RPA-LFD快速检测方法的建立
3
作者 白雪瑞 李尚同 +5 位作者 战晓燕 王金福 钟登科 孙卫东 蒋蔚 滑志民 《动物医学进展》 北大核心 2025年第2期67-72,共6页
为快速精准检测猫冠状病毒(FCoV),用FCoV的7b基因设计引物与探针,构建重组酶聚合酶扩增-侧流层析试纸条(RPA-LFD)方法。通过筛选最佳反应时间与温度,测定其敏感性和特异性。结果显示,RPA-LFD方法在37℃、15 min条件下,最低检测限为1 pg/... 为快速精准检测猫冠状病毒(FCoV),用FCoV的7b基因设计引物与探针,构建重组酶聚合酶扩增-侧流层析试纸条(RPA-LFD)方法。通过筛选最佳反应时间与温度,测定其敏感性和特异性。结果显示,RPA-LFD方法在37℃、15 min条件下,最低检测限为1 pg/μL,比普通PCR灵敏1000倍。同时,该方法与猫杯状病毒、猫疱疹病毒、犬冠状病毒、犬细小病毒、犬瘟热病毒均无交叉反应。通过9份临床病例的猫腹水样品检测,结果显示RPA-LFD与普通PCR结果一致。表明该方法快捷简便、特异性和灵敏性好,适用于快速检测FCoV感染。 展开更多
关键词 猫冠状病毒 重组酶聚合酶扩增 侧流层析试纸条
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大车前苷抑制猪肺炎支原体诱导的炎性反应的作用初探
4
作者 王吉英 向书涵 +7 位作者 李志强 李炻漾 张磊 谢青云 熊祺琰 邵国青 冯志新 于岩飞 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第4期1958-1968,共11页
猪肺炎支原体(Mesomycoplasma hyopneumoniae, Mhp)在呼吸道上皮细胞定植,引起猪气管、支气管及肺组织的炎性损伤,使猪饲料转化率降低,日增重下降,给养猪业造成严重的经济损失。大车前苷(Plantamajoside, PMS)为一种常用的抗炎中药,其... 猪肺炎支原体(Mesomycoplasma hyopneumoniae, Mhp)在呼吸道上皮细胞定植,引起猪气管、支气管及肺组织的炎性损伤,使猪饲料转化率降低,日增重下降,给养猪业造成严重的经济损失。大车前苷(Plantamajoside, PMS)为一种常用的抗炎中药,其在抑制Mhp感染引起的炎性反应中的作用未知。本研究拟通过Mhp感染PK-15细胞和小鼠为模型,探讨大车前苷在体外及体内条件下对Mhp诱导的炎性反应的影响及其相关机制。通过不同浓度的PMS作用PK-15细胞,确定PMS对细胞形态和活力无影响的最高浓度。随后采用该最高浓度的PMS的作用于Mhp感染的PK-15细胞,通过RT-qPCR检测PK-15细胞中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6, IL-6)等炎性相关因子的mRNA表达变化。结果显示,与细胞对照组相比,Mhp感染组细胞中的IL-6、TNF-α、NF-κB和IκBα的mRNA水平显著升高,而PMS的作用可降低Mhp感染时这种mRNA水平的升高。进一步通过Western blot和免疫荧光分析发现PMS可抑制Mhp诱导的NF-κB P65磷酸化,抑制NF-κB P65的核易位。小鼠感染模型的相关研究发现PMS可改善Mhp诱导的小鼠肺脏病变,使炎性细胞减少。同时,大车前苷可显著降低血清中TNF-α的含量。以上结果表明,PMS可能通过NF-κB通路改善Mhp诱导的炎性反应,为防治猪肺炎支原体感染新方法的提出提供重要的理论依据。 展开更多
关键词 大车前苷(PMS) 猪肺炎支原体(Mhp) 肺炎 核因子-ΚB
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异噁唑啉类动物驱虫药的研究及应用
5
作者 王达锋 马叶涵 +4 位作者 陈春 龚佳豪 四朗玉珍 张军忍 郭大伟 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第1期126-135,共10页
异噁唑啉类药物具有多种功效。近年来,因其对各种类型体外寄生虫的疗效好、安全性高,被广泛应用于抗宠物体外寄生虫。异噁唑啉类药物选择性地抑制无脊椎动物的谷氨酸和γ-氨基丁酸门控氯离子通道,使其神经系统紊乱而瘫痪死亡。本文从结... 异噁唑啉类药物具有多种功效。近年来,因其对各种类型体外寄生虫的疗效好、安全性高,被广泛应用于抗宠物体外寄生虫。异噁唑啉类药物选择性地抑制无脊椎动物的谷氨酸和γ-氨基丁酸门控氯离子通道,使其神经系统紊乱而瘫痪死亡。本文从结构特点、作用机制、药代动力学、药效学和临床驱虫应用等方面综述了异噁唑啉类驱虫药近年来的研究,分析了兽医领域中不同药物的应用情况及潜在毒性,展望异噁唑啉类动物驱虫药的未来发展情况。 展开更多
关键词 异噁唑啉 体外寄生虫 安全性 兽医
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植物雌激素大豆黄酮对小鼠乳腺上皮细胞乳成分合成和细胞增殖的影响及机制
6
作者 黄心河 李浩楠 +3 位作者 周潇 徐佳婧 张源淑 韩正康 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第1期417-429,共13页
本试验旨在研究植物雌激素大豆黄酮(daidzein, DZ)对小鼠乳腺上皮细胞EpH4-Ev乳糖、乳蛋白、乳脂肪合成及细胞增殖的影响,探讨相关的调节作用。首先用不同浓度DZ(0~1 000μmol·L^(-1))处理EpH4-Ev细胞6、12、24、48 h,通过检测细... 本试验旨在研究植物雌激素大豆黄酮(daidzein, DZ)对小鼠乳腺上皮细胞EpH4-Ev乳糖、乳蛋白、乳脂肪合成及细胞增殖的影响,探讨相关的调节作用。首先用不同浓度DZ(0~1 000μmol·L^(-1))处理EpH4-Ev细胞6、12、24、48 h,通过检测细胞活力确定DZ作用浓度及时间;试验分为对照组(0μmol·L^(-1) DZ处理)、低浓度组(10μmol·L^(-1) DZ处理)、中浓度组(20μmol·L^(-1) DZ处理)、高浓度组(40μmol·L^(-1) DZ处理),并以生理剂量的雌二醇(E2)作为阳性对照,37℃、5%CO_(2)培养12 h后,进行如下试验:(1)测定细胞及分泌上清中甘油三酯(TG)、葡萄糖(GLU)含量及脂滴染色变化;(2)检测细胞增殖与凋亡相关蛋白、乳成分合成相关蛋白的表达变化;(3)检测PI3K/AKT-mTOR信号通路关键蛋白的磷酸化水平;(4)流式细胞技术分析细胞凋亡率与细胞周期分布情况。结果显示:(1)与对照组相比,2.5~80.0μmol·L^(-1 ) DZ处理后,细胞活力极显著提高(P<0.01),其中20μmol·L^(-1 )DZ处理提高效果最为显著,结合实验室前期结果,选择DZ作用的低、中和高浓度分别为10、20和40μmol·L^(-1),作用时间为12 h。(2)与对照组相比,中浓度及高浓度组DZ及E2处理后极显著提高了EpH4-Ev细胞及分泌上清中TG和GLU的含量,促进了脂滴的合成(P<0.01)。(3)与对照组相比,不同浓度DZ处理后葡萄糖转运载体1(GLUT1)和β-酪蛋白(β-casein)的表达均极显著升高(P<0.01),同时DZ及E2处理后均提高脂肪酸合成酶(FASN)、胆固醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)的表达。(4)与对照组相比,不同浓度DZ及E2处理后均增加了G2/M期和S期的细胞占比,上调了增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白D1、D3、抗凋亡蛋白Bcl-2的表达量,同时中浓度DZ组极显著增加了Bcl-2/Bax比值(P<0.01),细胞凋亡率降低。(5)三个浓度DZ及E2处理后均上调了PI3K/AKT-mTOR信号通路中p-PI3K、p-mTOR、p-AKT的磷酸化水平。结果表明:DZ处理可促进乳腺上皮细胞的增殖及乳成分的合成。其机制与上调细胞增殖蛋白的表达、降低细胞凋亡率,激活PI3K/AKT-mTOR通路有关。 展开更多
关键词 植物雌激素 大豆黄酮 小鼠乳腺上皮细胞 乳成分合成 乳腺上皮细胞的增殖
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猪流行性腹泻病毒感染对小肠杯状细胞的影响及其机制的初步分析
7
作者 刘芮伶 李昱辰 +1 位作者 汤荣锋 杨倩 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第2期900-911,共12页
本研究旨在探明猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)对仔猪肠道黏液分泌的影响并揭示其潜在的分子机制。构建仔猪PEDV感染模型,通过阿利新蓝-过碘酸-雪夫(Alcian blue-periodic acid-Schiff,AB-PAS)染色和免疫荧光... 本研究旨在探明猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)对仔猪肠道黏液分泌的影响并揭示其潜在的分子机制。构建仔猪PEDV感染模型,通过阿利新蓝-过碘酸-雪夫(Alcian blue-periodic acid-Schiff,AB-PAS)染色和免疫荧光染色,揭示病毒感染对仔猪肠道杯状细胞数量和功能的影响。进一步利用肠道干细胞构建杯状细胞的体外实验模型,探明PEDV在该细胞模型的复制特点后,初步解析PEDV感染对杯状细胞黏液蛋白转录及其分泌调控相关信号通路的影响。体内试验结果显示,PEDV主要感染仔猪的空肠和回肠,其对空肠具有更高的易感性,并能显著抑制肠道黏膜中杯状细胞的数量和分泌功能。进一步利用肠道干细胞建立了杯状细胞体外培养模型,发现病毒感染显著降低了杯状细胞Muc2、TFF 3和SPDEF基因的转录水平,同时,黏液分泌调控的关键通路MAPK信号通路的活性也受到了明显抑制。PEDV感染会导致仔猪肠道杯状细胞数量减少,黏蛋白分泌水平降低。病毒对MAPK信号途径的抑制可能是导致这一现象的关键原因。 展开更多
关键词 PEDV 杯状细胞 MAPK信号通路
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筛选Toll样受体激动剂用于羊抗人载脂蛋白A1抗体的制备
8
作者 邓碧华 周宇杰 +3 位作者 尹文竹 唐欣薇 梅栋 徐志伟 《安徽农业科学》 2025年第1期98-101,共4页
为了筛选能够提高羊免疫应答的Toll样受体激动剂,设计针对羊TLR1~TLR10基因序列的引物,采用PCR方法检测羊体内Toll样受体的表达情况。然后,将人载脂蛋白A1(ApoA1)和HMT13佐剂配伍不同的TLR1~TLR9样受体激动剂,分组免疫湖羊后采集血样,... 为了筛选能够提高羊免疫应答的Toll样受体激动剂,设计针对羊TLR1~TLR10基因序列的引物,采用PCR方法检测羊体内Toll样受体的表达情况。然后,将人载脂蛋白A1(ApoA1)和HMT13佐剂配伍不同的TLR1~TLR9样受体激动剂,分组免疫湖羊后采集血样,并通过琼脂扩散试验检测抗体效价。结果表明:在湖羊的血液中均可检测到TLR1~TLR10的特异性目的片段。经过3、5、7次免疫后,添加TLR3激动剂的组效价最高,说明TLR3激动剂Ploy(I∶C)免疫增强效果最佳,可作为提高羊疫苗免疫的候选激动剂。 展开更多
关键词 TOLL样受体 激动剂 湖羊 APOA1 免疫应答
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氢溴酸常山酮对鸡柔嫩艾美耳球虫的防治试验研究
9
作者 张勇 庄皓翔 +1 位作者 何成华 孙卫东 《现代畜牧科技》 2025年第1期22-26,共5页
鸡球虫病是寄生在鸡肠道的一种常见疾病,对全世界的养鸡业造成重大的危害。艾美耳虫球虫通过感染肠道上皮并引起病变而破坏肠道完整性,最终使受感染鸡表现出营养吸收和利用不良,造成生长性能降低,免疫功能下降引发继发性疾病增加。该研... 鸡球虫病是寄生在鸡肠道的一种常见疾病,对全世界的养鸡业造成重大的危害。艾美耳虫球虫通过感染肠道上皮并引起病变而破坏肠道完整性,最终使受感染鸡表现出营养吸收和利用不良,造成生长性能降低,免疫功能下降引发继发性疾病增加。该研究以致病力强、危害严重的柔嫩艾美耳球虫为研究对象,观察鸡攻虫后氢溴酸常山酮防治效果。试验结果表明,与阳性对照组的相对增重率57.67%相比,药物防治组相对增重率高达84.92%,有显著提高。同时,药物防治组较阳性对照组的盲肠病变计分、盲肠内容物触片中卵囊数量明显降低,盲肠组织的病变程度明显减轻。这表明氢溴酸常山酮有较好的防治柔嫩艾美耳球虫的效果。这些试验结果为临床上鸡球虫病的防控提供了新的思路和方案。 展开更多
关键词 柔嫩艾美耳球虫 防治效果 研究
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西藏牦牛肉制品中致病菌的检测与风险评估
10
作者 云丹卓玛 蔺辉星 《食品安全导刊》 2025年第3期137-139,共3页
西藏牦牛肉制品因其独特的风味和营养价值而备受推崇。然而,其生产、加工等环节中存在的致病菌污染风险不容忽视。相关人员对此进行了深入研究,分析了常见致病菌种类及危害,并指出了其潜在的风险。本文分析了牦牛肉制品中的致病菌现状,... 西藏牦牛肉制品因其独特的风味和营养价值而备受推崇。然而,其生产、加工等环节中存在的致病菌污染风险不容忽视。相关人员对此进行了深入研究,分析了常见致病菌种类及危害,并指出了其潜在的风险。本文分析了牦牛肉制品中的致病菌现状,介绍了牦牛肉制品致病菌的检测方法及评估模型,并提出了风险控制措施及改善建议,以期助力高原特色食品产业发展。 展开更多
关键词 西藏 牦牛肉制品 致病菌 风险评估
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藏猪健康养殖研究进展
11
作者 王洪壮 德吉曲珍 +5 位作者 德吉 旦增曲珍 次桑卓玛 贺晴 李坤 刘洋 《中南农业科技》 2025年第2期258-262,共5页
藏猪是青藏高原特有的猪种,具有高原高寒适应性强、抗病力强、饲养成本低、脂肪沉积能力强、肉质鲜美等特点。经济的快速发展和生活水平的提高,人们对藏猪肉产品的需求迅速攀升。为满足市场需求,高海拔地区的藏猪开始被引进到内地养殖,... 藏猪是青藏高原特有的猪种,具有高原高寒适应性强、抗病力强、饲养成本低、脂肪沉积能力强、肉质鲜美等特点。经济的快速发展和生活水平的提高,人们对藏猪肉产品的需求迅速攀升。为满足市场需求,高海拔地区的藏猪开始被引进到内地养殖,藏猪养殖业正越来越受到关注。但藏猪繁殖力低下、生长速度慢、出栏率低等问题制约着藏猪的规模化养殖,传染病、寄生虫、饲养管理不规范、引种育种不科学等挑战影响着藏猪的健康养殖。通过概括藏猪的现有养殖模式,分析藏猪养殖存在的问题和面临的困难,并提出优化健康养殖的策略,旨在通过科学管理、防疫和科学育种模式提高藏猪的生产效率,促进藏猪的规模化健康养殖。 展开更多
关键词 藏猪 健康养殖 饲养管理 疾病防控
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宁夏地区羔羊源大肠杆菌分离鉴定及病理组织学分析
12
作者 于有利 王建东 +2 位作者 郭亚男 何薇 王攀 《中国草食动物科学》 北大核心 2025年第1期50-56,共7页
本试验以宁夏地区羔羊源大肠杆菌为研究对象,旨在明确羔羊源大肠杆菌的流行情况、毒力基因分布及其引起的病理组织变化情况等。于2022年3月—2023年3月采集宁夏地区不同养殖场内有腹泻症状的羔羊不同组织和肛拭子共206份样品,基于鉴别... 本试验以宁夏地区羔羊源大肠杆菌为研究对象,旨在明确羔羊源大肠杆菌的流行情况、毒力基因分布及其引起的病理组织变化情况等。于2022年3月—2023年3月采集宁夏地区不同养殖场内有腹泻症状的羔羊不同组织和肛拭子共206份样品,基于鉴别培养基、PCR扩增和16Sr RNA测序进行病原分离、鉴定和毒力基因检测,并对1例确定存在大肠杆菌感染的靶器官进行组织病理学分析。结果表明,宁夏地区羔羊的大肠杆菌总检出率为76.2%(157/206)。不同地区检出率不同,其中固原市的检出率最高,为93.3%(28/30),与银川市(51.2%,21/41)和吴忠市(80.0%,108/135)相比差异极显著(P<0.01)。不同采样部位的检出率也不同,其中从肛拭子中的检出率最高,为91.1%(143/157),与心脏(30.0%,3/10)、肺脏(33.3%,4/12)和肝脏(25.0%,3/12)中的检出率相比差异均极显著(P<0.01)。伊红美蓝和血平板鉴别培养基共分离鉴定出115株大肠杆菌。对不同分离株毒力因子检测时,菌毛基因K88和F14的检出率分别为25.2%(29/115)和8.8%(10/115),毒力岛基因HPI和LEE的检出率分别为84.3%(97/115)和74.0%(85/115),毒素基因st1、st2、lt1、stx1和stx2/stx2e的检出率分别为23.5%(27/115)、40.9%(47/115)、2.6%(3/115)、55.6%(64/115)和59.1%(68/115),未检测到菌毛基因K99、987P和F18fedA。病理组织学观察到肠组织黏膜层绒毛溶解坏死,黏膜上皮结构不完整,伴有淋巴细胞、中性粒细胞和浆细胞等炎性细胞浸润。综上,宁夏地区羔羊致病性大肠杆菌感染严重,应加强对致病性大肠杆菌的检测并采取相应的防控措施。 展开更多
关键词 羔羊 致病性大肠杆菌 病原分离鉴定 毒力因子 病理组织学
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南京地区市售鸡蛋的含硒量调查 被引量：7
13
作者 汪军 王盛良 +2 位作者 李家奎 赵圣 王小龙 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2000年第3期44-45,共2页
随机选取南京地区主要蛋品供应源的几大鸡场蛋鸡所产的鸡蛋，用荧光分光光度法测定其中的蛋清。蛋黄中硒的含量，并计算出鸡蛋的总硒量。结果显示，南京地区市售鸡蛋的总硒量范围１１～１５μｇ／个，蛋中的硒主要分布在蛋黄。
关键词 鸡蛋 硒 荧光分光光度法 测定
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乳房链球菌感染对乳腺上皮细胞中氨基酸代谢的影响 被引量：2
14
作者 卢劲晔 高亚兵 +2 位作者 韩心茹 刘钰臻 赵家玉 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期1766-1776,共11页
代谢是一切生理活动的基石,氨基酸代谢作为三大物质代谢之一,参与机体的多种生理活动,与宿主免疫细胞的功能有密切关系,在疾病的发展中具有不可替代的作用。为探究乳房链球菌(Streptococcus uberis,S.uberis)感染对乳腺上皮细胞中氨基... 代谢是一切生理活动的基石,氨基酸代谢作为三大物质代谢之一,参与机体的多种生理活动,与宿主免疫细胞的功能有密切关系,在疾病的发展中具有不可替代的作用。为探究乳房链球菌(Streptococcus uberis,S.uberis)感染对乳腺上皮细胞中氨基酸代谢的影响,本研究以S.uberis和乳腺上皮细胞系(EpH4-Ev)为研究对象,采用靶向氨基酸代谢组学技术对细胞中的氨基酸进行定量分析,并采用RT-qPCR和Western blot方法对关键氨基酸——精氨酸代谢通路关键酶进行验证。结果表明:S.uberis感染细胞后,细胞中甘氨酸、苏氨酸、鸟氨酸、天冬酰胺和谷氨酰胺的含量被显著上调(P<0.05),谷氨酸、脯氨酸、精氨酸、丝氨酸、组氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、丙氨酸、酪氨酸、色氨酸、赖氨酸和天冬氨酸的含量被显著下调(P<0.05),其中,精氨酸含量变化极显著(P<0.000 1,VIP>1.2),天冬酰胺和谷氨酰胺两种生糖氨基酸显著上升(P<0.05),赖氨酸和亮氨酸两种生酮氨基酸含量显著下降(P<0.05)。进一步研究精氨酸分解代谢通路发现:S.uberis感染乳腺上皮细胞会显著上调精氨酸代谢关键酶NOS2的mRNA和蛋白表达水平(P<0.05),显著下调ARG1的表达水平(P<0.05)。与对照组相比,S.uberis感染乳腺后,显著上调了细胞中促炎因子IL-1β、TNF-α表达(P<0.05)。综上所述,S.uberis感染造成乳腺上皮细胞氨基酸代谢紊乱,加速细胞内精氨酸耗竭,诱发炎症反应。结果提示,精氨酸在宿主抵抗S.uberis感染过程中具有重要作用,可作为奶牛乳腺炎早期诊断和未来防治的突破口。 展开更多
关键词 乳房链球菌 氨基酸代谢 精氨酸 乳腺炎
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犬呼吸道感染情况调查与流行特征分析
15
作者 鞠厚斌 杨德全 +12 位作者 李鑫 金季赜晓 王建 沈素芳 杨显超 葛杰 朱九超 沈海潇 卢军 唐文红 吴秀娟 唐燕婷 盛文伟 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期5577-5585,共9页
【目的】了解犬呼吸道感染病原谱的组成和感染特点。【方法】本研究选取2022年来自中国18个省份动物诊疗机构的400例具有临床呼吸道症状的犬鼻拭子和口咽拭子样本,采用恒温核酸扩增芯片法对病例样本进行6种犬呼吸道病原体核酸检测,并利... 【目的】了解犬呼吸道感染病原谱的组成和感染特点。【方法】本研究选取2022年来自中国18个省份动物诊疗机构的400例具有临床呼吸道症状的犬鼻拭子和口咽拭子样本,采用恒温核酸扩增芯片法对病例样本进行6种犬呼吸道病原体核酸检测,并利用统计学方法分析其在不同性别、不同季节、不同年龄、不同区域、不同品种间的差异。【结果】400份样本中犬呼吸道病原体核酸总检出率为97.25%,犬副流感病毒(CPIV)检出率最高,为35.00%,其他依次为犬支原体(M.canis,31.00%)、犬呼吸道冠状病毒(CRCoV,28.50%)、犬瘟热病毒(CDV,18.50%)、支气管败血波氏杆菌(B.b,10.50%)和犬流感病毒(CIV,1.50%)。混合感染92例,混合感染率为23.00%,其中,二重感染77例,占混合感染病例的83.70%,以CPIV和犬支原体、CRCoV+CPIV、CRCoV和犬支原体较为常见,阳性率分别为4.75%、4.25%和3.75%;三重感染12例,占混合感染病例的13.04%;四重感染2例,占混合感染病例的2.17%;五重感染1例,占混合感染病例的1.08%。经皮尔逊卡方检验,除CDV在不同年龄间差异显著(P<0.05)外,其他5种呼吸道病原在不同性别、不同年龄、不同区域、不同品种间均差异不显著(P>0.05)。【结论】犬呼吸道病原谱组成复杂,主要以CPIV、犬支原体、CRCoV、CDV、支气管败血波氏杆菌为主,且易发生混合感染,一年四季均可感染,秋冬季节尤为显著,应持续开展系统性、延续性研究,为精准防控犬呼吸道疾病提供科学依据。 展开更多
关键词 犬 呼吸道感染 病原谱 流行特征
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河北省廊坊市牛主要病毒性腹泻病原感染状况检测及牛冠状病毒演化分析 被引量：3
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作者 李思远 付新成 +10 位作者 袁雪松 毛立 蔡旭航 孙心如 黄金 谢玲玲 王府 周华 张琪 李基棕 李彬 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期649-659,共11页
牛病毒性腹泻病原严重危害畜牧业生产,BVDV、BoAstV、BCoV、MRV、BKoV、BoNeV、BNoV、BRV、BToV被认为是引起牛群腹泻的病原,不仅如此,BVDV、BCoV和BToV除了能引起消化道症状外还能引起呼吸道症状,BVDV不仅能引起消化道和呼吸道症状,还... 牛病毒性腹泻病原严重危害畜牧业生产,BVDV、BoAstV、BCoV、MRV、BKoV、BoNeV、BNoV、BRV、BToV被认为是引起牛群腹泻的病原,不仅如此,BVDV、BCoV和BToV除了能引起消化道症状外还能引起呼吸道症状,BVDV不仅能引起消化道和呼吸道症状,还会导致母牛生殖功能异常,这些疾病对畜牧业造成巨大的经济损失。为了解牛主要病毒性腹泻病原流行情况,本次试验通过PCR检测方法对我国河北地区323份腹泻牛粪样品进行常见9种病毒性牛腹泻病原进行检测。结果显示,BVDV阳性检出率1.85%(6/323)、BCoV阳性检出率14.24%(46/323)、BRV阳性检出率57.89%(187/323)、BoAstV阳性检出率0.31%(1/323)、BoNeV阳性检出率10.84%(35/323)、BNoV阳性检出率4.33%(14/323)、MRV阳性检出率2.48%(8/323)、BToV阳性检出率4.64%(15/323)、BKoV阳性检出率11.76%(38/323)。混合感染共有76份,占比23.53%(76/323)。HBLF2302株的全基因序列、S、HE、N、M和E基因进行同源性和遗传进化分析发现,HBLF2302与BCoV/NMG1/2022基因同源性最高,为GIIb亚型。基于氨基酸序列比对和HBLF2302的S蛋白三级结构预测发现,在S蛋白中157号位突变为157T,854号位点突变为854I。318V为独特突变,改变了与侧链残基的作用力,与631C形成氢键连接。并发现中国株区别于其它地区的GⅡb亚型,位于ORF1a区域有三个独特位点。本研究丰富了牛腹泻病原的流行病学数据,为牛腹泻病的防控奠定基础。 展开更多
关键词 病毒性腹泻 牛冠状病毒 流行病学调查 腹泻病原
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猪肺炎支原体乳酸脱氢酶在诱导猪支气管上皮细胞凋亡中的作用 被引量：2
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作者 王吉英 尹蕊如 +7 位作者 谢星 王海燕 刘胡栋 胡辉 熊祺琰 冯志新 邵国青 于岩飞 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期2195-2205,共11页
猪肺炎支原体感染会引起宿主上皮细胞的损伤及凋亡。上皮屏障的破坏往往导致细菌和病毒的继发感染,给养猪业造成严重的经济损失,但具体的致病机制及毒力因子尚未完全阐明。前期研究发现猪肺炎支原体乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, L... 猪肺炎支原体感染会引起宿主上皮细胞的损伤及凋亡。上皮屏障的破坏往往导致细菌和病毒的继发感染,给养猪业造成严重的经济损失,但具体的致病机制及毒力因子尚未完全阐明。前期研究发现猪肺炎支原体乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)不仅参与猪肺炎支原体的代谢还与猪肺炎支原体的毒力相关。因此,本研究通过原核表达及亲和层析获得猪肺炎支原体乳酸脱氢酶重组蛋白(recombinant LDH, rLDH),之后分别用不同浓度的rLDH与猪支气管上皮细胞(porcine bronchial epithelial cell, PBEC)孵育,经显微镜观察rLDH对细胞形态的影响,通过CCK-8法检测rLDH对细胞活力的影响。选取对细胞形态及活力影响不显著的50和100μg·mL^(-1) rLDH分别与PBEC孵育,通过流式细胞仪检测细胞凋亡率,反转录荧光定量PCR(reverse transcription-quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)法和免疫印记检测凋亡相关基因caspase 3、caspase 8、caspase 9、Bax、BCL-2的转录水平和蛋白水平。结果显示:猪肺炎支原体rLDH呈剂量依赖性地诱导PBEC凋亡,其作用与猪肺炎支原体菌株一致。用rLDH及Mhp 168孵育后,PBEC的促凋亡因子Bax、caspase 3和caspase 9的mRNA水平显著上调,凋亡抑制因子BCL-2的mRNA水平显著下调,caspase 8的mRNA水平未发生显著变化。促凋亡因子Bax、caspase 3的蛋白表达水平显著上调,凋亡抑制因子BCL-2的蛋白表达水平显著下调。结果表明,猪肺炎支原体可能通过LDH诱导PBEC内源性细胞凋亡,凋亡相关因子caspase 3、caspase 9、Bax和BCL-2在其中发挥重要作用。 展开更多
关键词 猪肺炎支原体(Mhp) 乳酸脱氢酶(LDH) 猪支气管上皮细胞(PBEC) 凋亡
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帕利亚姆病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用 被引量：1
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作者 杨恒 李占鸿 +5 位作者 宋子昂 高林 李卓然 廖德芳 肖雷 李华春 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期395-400,共6页
本研究拟建立帕利亚姆病毒(Palyam virus,PALV)血清型特异性实时荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)方法用于临床样本或媒介中PALV血清型鉴定。根据我国流行PALV毒株的基因节段2序列,设计扩增引物和TaqMan探针,建立PALV血清型特异型qRT-PCR方法,... 本研究拟建立帕利亚姆病毒(Palyam virus,PALV)血清型特异性实时荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)方法用于临床样本或媒介中PALV血清型鉴定。根据我国流行PALV毒株的基因节段2序列,设计扩增引物和TaqMan探针,建立PALV血清型特异型qRT-PCR方法,对方法的特异性、灵敏性与重复性进行评估;以我国分离的28株PALV和90份核酸阳性血液样本评估检测方法的可靠性;利用建立的方法对采集库蠓样本中携带的PALV进行血清型鉴定。结果显示,建立的PALV血清型qRT-PCR检测方法具有良好的特异性与灵敏性,可检出核酸拷贝数下限在22至28 copies·μL^(-1)。对28株PALV的qRT-PCR检测结果与病毒测序鉴定结果一致;对PALV不同感染阶段哨兵动物血液(90份)中的qRT-PCR鉴定结果与分离病毒的血清型鉴定结果一致;建立的方法可准确鉴定库蠓中携带PALV的血清型。本研究建立的PALV血清型qRT-PCR定型方法具有良好的特异强、敏感性与重复性,可用于PALV感染动物与媒介中PALV血清型的鉴定,具有良好的应用价值。 展开更多
关键词 帕利亚姆病毒 血清型鉴定 实时荧光定量RT-PCR 检测方法
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牛冠状病毒S1蛋白的真核表达及间接ELISA方法的建立与应用 被引量：1
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作者 黄金 李思远 +6 位作者 毛立 蔡旭航 谢玲玲 王府 周华 李基棕 李彬 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期2050-2060,共11页
为建立一种检测牛冠状病毒(BCoV)的抗体间接ELISA检测方法,本研究利用昆虫杆状病毒表达系统表达BCoV的S1蛋白,并作为包被抗原,建立BCoV的S1蛋白抗体间接ELISA检测方法,应用于临床样品检测。结果显示,S1蛋白大小约100 ku,可表达于昆虫Hi... 为建立一种检测牛冠状病毒(BCoV)的抗体间接ELISA检测方法,本研究利用昆虫杆状病毒表达系统表达BCoV的S1蛋白,并作为包被抗原,建立BCoV的S1蛋白抗体间接ELISA检测方法,应用于临床样品检测。结果显示,S1蛋白大小约100 ku,可表达于昆虫High5细胞培养基上清,经Western blot鉴定S1蛋白抗原性良好;经反应条件优化,确定抗原包被浓度为0.125μg·mL^(-1),血清稀释度为1∶200;采用1%明胶,于37℃封闭3 h;血清样品于37℃孵育30 min;酶标二抗的稀释度1∶25000,37℃孵育45 min;37℃避光显色13 min;临界值为0.297;经检验,该方法特异性良好;批间及批内变异系数均小于10%。当临界值为OD_(450 nm)为0.297时,若以IFA为标准,ELISA的敏感性为96.88%(31/32),特异性为87.50%(7/8),与IFA具有很强的一致性(κ=0.844,P<0.01);若以中和试验为标准,ELISA的敏感性为100.00%(31/31),特异性为88.89%(8/9),与血清中和试验具有很强的一致性(κ=0.925,P<0.01)。采用该方法对303份牛血清进行检测,BCoV阳性率为74.91%。由此说明,本研究建立的ELISA方法特异性强,敏感性高,重复性好,可用于BCoV的血清学调查和临床诊断,并可以应用于替代中和试验检测BCoV免疫后抗体水平。 展开更多
关键词 牛冠状病毒 昆虫杆状病毒表达系统 S1蛋白 间接ELISA
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猪圆环病毒3型Cap蛋白单克隆抗体的制备及阻断ELISA检测方法的建立 被引量：2
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作者 张宝戈 黄雅琴 +2 位作者 蔡金双 朱晨光 李玉峰 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期1170-1178,共9页
旨在建立检测猪圆环病毒3型(PCV3)抗体的阻断ELISA方法,本研究利用原核表达的PCV3Cap重组蛋白免疫BALB/c小鼠制备获得了一株分泌阻断效果良好抗体的杂交瘤细胞株2E6。以重组Cap蛋白作为包被抗原,以辣根过氧化物酶(HRP)标记的2E6单克隆... 旨在建立检测猪圆环病毒3型(PCV3)抗体的阻断ELISA方法,本研究利用原核表达的PCV3Cap重组蛋白免疫BALB/c小鼠制备获得了一株分泌阻断效果良好抗体的杂交瘤细胞株2E6。以重组Cap蛋白作为包被抗原,以辣根过氧化物酶(HRP)标记的2E6单克隆抗体作为检测抗体,经条件优化后建立了一种检测PCV3抗体的阻断ELISA方法。用建立的阻断ELISA方法检测50份临床阴性血清,计算阻断率(PI)的临界值,以此来确定该方法的判定标准:当PI≤28.30%时,判定结果为阴性;当PI≥35.05%时,判定结果为阳性;当28.30%<PI<35.05%时,判定为可疑,重复一次试验后如果结果仍为可疑,则判定为阳性。特异性试验表明该方法与猪圆环病毒2型(PCV2)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)以及猪瘟病毒(CSFV)的阳性血清均无交叉反应;敏感性试验表明其检测效价可达到1:128;重复性试验表明批内与批间的变异系数均小于10%;符合性检验表明该方法与PCV检测金标准免疫过氧化物酶单层试验(IPMA)比对的Kappa值达0.9,具有高度的一致性。综上所述,本研究建立的阻断ELISA方法具有良好的特异性与较高的符合率,可用于后期进行PCV3抗体的检测,为PCV3的流行病学调查与临床诊断提供技术支持。 展开更多
关键词 猪圆环病毒3型 Cap重组蛋白 单克隆抗体 阻断ELISA
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