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促细胞增殖新基因TOX的功能研究
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作者 邓唯唯 李静 +4 位作者 高鹏 郝东霞 张璐 石太平 王应 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期369-374,共6页
利用GenBank中的数据,通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)从人的cDNA文库中克隆得到功能基因TOX(thymocyte selection-associated high mobility group box),运用生物信息学分析其结构特性,并通过逆转录PCR(reverse tra... 利用GenBank中的数据,通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)从人的cDNA文库中克隆得到功能基因TOX(thymocyte selection-associated high mobility group box),运用生物信息学分析其结构特性,并通过逆转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)分析TOX在细胞系中的表达;利用荧光显微镜观察其亚细胞定位情况;使用细胞生长曲线实验和流式细胞术分析TOX对细胞增殖及细胞周期的影响.结果表明:TOX基因定位于人8号染色体q12.1上,全长4 131bp,编码526个氨基酸,该蛋白质分子质量约为57ku,含有9个外显子和8个内含子,其编码蛋白为高迁移率蛋白家族成员,能参与基因调控等生理过程;TOX基因在白血病细胞系Jurkat和Raji中高表达,并定位于细胞核中;对细胞生长曲线绘制及细胞周期分析表明,TOX能够使细胞生长速度加快,且S期细胞比例明显上升.说明TOX参与了细胞增殖调控,有可能研究开发为药物靶标或疾病标志物. 展开更多
关键词 TOX基因 细胞增殖 细胞周期 药物靶标 疾病标志物
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放射性Annexin V活体检测细胞凋亡的研究进展 被引量:4
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作者 陈大明 金小海 +3 位作者 罗志福 张锦荣 王凡 马大龙 《原子能科学技术》 EI CAS CSCD 2004年第1期35-42,共8页
概述了放射性AnnexinV活体检测细胞凋亡的研究状况,介绍了这类显像剂在医学临床研究上的优越性,并对放射性标记AnnexinV显像剂的研究方法和进展进行了评述。
关键词 细胞凋亡 显像剂 活体检测 PCD 生命科学 放射性AnnexinV
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它莫西芬诱导乳腺癌MCF-7细胞自噬的比较蛋白质组学研究
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作者 娄雅欣 钟丽君 +4 位作者 杨彬 陈丽娜 刘丹 邹霞娟 彭嘉柔 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第z1期78-79,共2页
The differentially expressed proteins between normal and tamoxifen-induced autophagic MCF-7 cells were studied by 2-DE combining with mass spectrometric analysis.Totally,there were 668±99 and 550±97 protein ... The differentially expressed proteins between normal and tamoxifen-induced autophagic MCF-7 cells were studied by 2-DE combining with mass spectrometric analysis.Totally,there were 668±99 and 550±97 protein spots detected in the 2-DE maps from normal and autophagic MCF-7 cells respectively,among which 5 changed protein spots were identified by the Q-TOF MS/MS and database search. 展开更多
关键词 PROTEOMICS Two dimensional gel electrophoresis Mass spectrometry AUTOPHAGY
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哌嗪嘧啶类CCR4拮抗剂的设计、合成及生物活性 被引量:3
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作者 巩宏伟 綦辉 +5 位作者 孙薇 姜丹 肖军海 杨晓虹 王应 李松 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2013年第9期2131-2138,共8页
基于对已报道的CCR4拮抗剂的构效关系分析,设计并合成了一系列哌嗪嘧啶类化合物.采用细胞趋化抑制实验测试了合成化合物的体外活性,其中化合物8a的活性优于目前报道的活性最好的化合物BMS-397;在小鼠鼻炎模型中,化合物8a以极低的剂量达... 基于对已报道的CCR4拮抗剂的构效关系分析,设计并合成了一系列哌嗪嘧啶类化合物.采用细胞趋化抑制实验测试了合成化合物的体外活性,其中化合物8a的活性优于目前报道的活性最好的化合物BMS-397;在小鼠鼻炎模型中,化合物8a以极低的剂量达到了布地奈德(鼻炎临床治疗药物)的治疗效果.采用毛细管电泳法测得化合物8a与CCR4 N端40肽的结合常数为(3.6179±0.5976)×104L/mol. 展开更多
关键词 CCR4拮抗剂 CKLF1 TARC MDC 过敏性炎症
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细胞凋亡检测蛋白AnnexinV的制备纯化和初步评价 被引量:2
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作者 陈大明 谢虹 +8 位作者 祁本忠 张颖梅 贾兵 杨红伟 罗志福 张锦荣 金小海 王凡 马大龙 《原子能科学技术》 EI CAS CSCD 2004年第z1期182-187,共6页
文章利用基因工程技术在大肠杆菌中高效表达了人重组AnnexinV,建立了批量获得AnnexinV工程菌诱导表达的最佳温度、时间和包涵体的操作程序。通过SDS PAGE分析和得到的AnnexinV标记上FITC后能对地塞米松引起Balb/c小鼠胸腺单细胞产生的... 文章利用基因工程技术在大肠杆菌中高效表达了人重组AnnexinV,建立了批量获得AnnexinV工程菌诱导表达的最佳温度、时间和包涵体的操作程序。通过SDS PAGE分析和得到的AnnexinV标记上FITC后能对地塞米松引起Balb/c小鼠胸腺单细胞产生的凋亡进行有效检测的实验表明:经过离子层析纯化后得到了高纯度、有生物活性的人重组AnnexinV纯品。细胞结合分析的结果显示:AnnexinV的KD值为8.53nmol/L,RT为8.79nmol/L。 展开更多
关键词 细胞凋亡 ANNEXIN V 诱导表达和纯化 FITG-Annexin V 细胞结合分析
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应用蛋白质组学技术初步分析HeLa细胞饥饿诱导的自噬相关蛋白 被引量:2
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作者 娄雅欣 陈丽娜 +2 位作者 钟丽君 杨彬 彭嘉柔 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期638-641,共4页
应用双向凝胶电泳(2-DE)结合质谱技术研究饥饿诱导自噬的HeLa细胞(实验组)与正常培养的HeLa细胞(对照组)的差异表达蛋白质。结果显示对照组样本的2-DE图谱检测到1253±100个蛋白斑点,实验组样本检测到1216±125个蛋白斑点,二者... 应用双向凝胶电泳(2-DE)结合质谱技术研究饥饿诱导自噬的HeLa细胞(实验组)与正常培养的HeLa细胞(对照组)的差异表达蛋白质。结果显示对照组样本的2-DE图谱检测到1253±100个蛋白斑点,实验组样本检测到1216±125个蛋白斑点,二者主要斑点的位置与数量基本一致。对差异表达蛋白进行质谱分析,首次发现前折叠素2,转胶蛋白2,乳腺癌扩增序列2和Annexin A3在自噬细胞中表达上调,提示这4种蛋白可能参与饥饿诱导的细胞自噬。本研究为自噬的机制初步提供了线索。 展开更多
关键词 蛋白质组学 双向凝胶电泳 质谱 自噬
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细胞凋亡检测剂^(125,131)I-Annexin Ⅴ的制备和初步评价 被引量:1
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作者 陈大明 金小海 +8 位作者 祁本忠 罗志福 贾兵 张颖妹 杨红伟 张锦荣 杜进 马大龙 王凡 《核化学与放射化学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期209-214,共6页
利用国内基因工程制备的AnnexinⅤ,采用Iodo Gen标记方法,研究了125,131I AnnexinⅤ的标记条件。在每管加入50μgIodo Gen、pH=6~7.8、AnnexinⅤ的质量浓度大于25μg/mL的条件下,反应10min,标记物的标记率大于80%。经PD 10色谱柱纯化后... 利用国内基因工程制备的AnnexinⅤ,采用Iodo Gen标记方法,研究了125,131I AnnexinⅤ的标记条件。在每管加入50μgIodo Gen、pH=6~7.8、AnnexinⅤ的质量浓度大于25μg/mL的条件下,反应10min,标记物的标记率大于80%。经PD 10色谱柱纯化后,标记物的放化纯度大于95%,室温下,标记物能稳定40h。在正常小鼠体内的生物分布实验表明,碘标记的AnnexinⅤ主要浓聚于肝、脾、肾,在体内清除很快。凋亡细胞结合分析表明,碘标记的AnnexinⅤ保持了较好的生物活性,对PS的解离常数K为8.53nmol/L,结合容量RT为1.23×106结合位点数/个细胞。所制备的细胞凋亡检测剂125,131I AnnexinⅤ可以用于进一步的动物模型或人体实验。 展开更多
关键词 细胞凋亡 ANNEXIN V 制备 碘标记 稳定性 细胞结合分析 磷脂酰丝氨酸基团 核医学显像剂
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制度化管理的学习型科研团队 被引量:6
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作者 胡桂芬 《研究与发展管理》 CSSCI 北大核心 2006年第2期130-134,共5页
“获取”和“创新”是学习型科研团队的精神基石,努力实践团队的宗旨和目标,是所有成员的共同愿景.实现这一愿景的重要条件之一,是建立科学的易于操作的制度和规范.北京大学人类疾病基因研究中心成立5年来,在科研及管理工作中所取得的... “获取”和“创新”是学习型科研团队的精神基石,努力实践团队的宗旨和目标,是所有成员的共同愿景.实现这一愿景的重要条件之一,是建立科学的易于操作的制度和规范.北京大学人类疾病基因研究中心成立5年来,在科研及管理工作中所取得的骄人成绩,有力地证明,在努力建设学习型科研团队的同时,建设制度化管理的一系列举措是行之有效的. 展开更多
关键词 学习型科研团队 制度 管理
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趋化素样因子1对鼠肺巨噬细胞吞噬活性的作用 被引量:2
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作者 谭亚夏 叶枫 +5 位作者 莫红缨 韩文玲 芮民 楼雅欣 夏冬兰 钟南山 《广州医学院学报》 2007年第4期24-26,共3页
目的:观察超化素样因子1(CKLF1)导入对小鼠肺巨噬细胞吞噬功能的作用。方法:将1%锥虫兰水溶液注入至CKLF1基因导入的小鼠腹腔内,观察小鼠肺巨噬细胞对锥虫兰的吞噬作用。结果:与对照组小鼠相比,导入CKLF1小鼠的肺组织巨噬细胞聚集增生,... 目的:观察超化素样因子1(CKLF1)导入对小鼠肺巨噬细胞吞噬功能的作用。方法:将1%锥虫兰水溶液注入至CKLF1基因导入的小鼠腹腔内,观察小鼠肺巨噬细胞对锥虫兰的吞噬作用。结果:与对照组小鼠相比,导入CKLF1小鼠的肺组织巨噬细胞聚集增生,被肺泡巨噬细胞吞噬的锥虫兰颗粒数量为73.6±5.2与对照小鼠32.5±8.1相比明显增多,体积明显增大。结论:CKLF1在体内可明显增强小鼠肺巨噬细胞的吞噬功能。 展开更多
关键词 趋化素样因子 巨噬细胞 锥虫兰 小鼠
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^(125)I标记的羊抗人IgG多克隆抗体在荷人结肠癌裸鼠体内的生物分布及γ显像 被引量:1
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作者 贺巍巍 刘昭飞 +2 位作者 贾兵 邱晓彦 王凡 《同位素》 CAS 北大核心 2008年第2期77-81,共5页
采用Iodogen法对羊抗人IgG多克隆抗体(GAHG)进行125I标记,并观察了125I-GAHG在荷HT-29人结肠癌裸鼠体内的生物分布和γ显像,以探讨肿瘤细胞分泌的IgG作为靶点进行肿瘤放射免疫显像和治疗的可能性。结果显示,125I-GAHG具有良好的体外稳定... 采用Iodogen法对羊抗人IgG多克隆抗体(GAHG)进行125I标记,并观察了125I-GAHG在荷HT-29人结肠癌裸鼠体内的生物分布和γ显像,以探讨肿瘤细胞分泌的IgG作为靶点进行肿瘤放射免疫显像和治疗的可能性。结果显示,125I-GAHG具有良好的体外稳定性,其血液清除符合二室模型,T1/2α和T1/2β分别为1.19 h和43.99 h。尾静脉给药后,与125I标记的正常羊IgG(125I-IgG)对照相比,125I-GAHG具有更加明显的肿瘤摄取。瘤体内给药的实验结果显示,125I-GAHG在肿瘤部位具有良好的滞留。在静脉注射后72 h,肿瘤摄取达到最大,为6.71±2.19%ID/g。靶与非靶组织的放射性摄取比(T/NT)随着时间延长逐渐增大。上述结果提示,125I-GAHG具有肿瘤特异性摄取,这为以肿瘤分泌的IgG为靶点的肿瘤放射免疫显像和靶向治疗提供了新思路。 展开更多
关键词 IGG ^125I 肿瘤显像 生物分布
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