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rhTNF-α生物活性测定方法的改进及其对人白血病早幼粒细胞HL-60作用机理研究 被引量：10
1
作者 王军志 高凯 饶春明 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1999年第2期141-144,共4页
目的:通过对rhTNF-α生物活性方法的改进,建立了较规范的活性测定方法,避免了人为判定的误差,提高了测定精确性.方法:本研究应用L929鼠结缔组织来源纤维母细胞系,参照国际标准品测定rhTNF-α效价.分别用Northern Dot Blot杂交检测及DNA... 目的:通过对rhTNF-α生物活性方法的改进,建立了较规范的活性测定方法,避免了人为判定的误差,提高了测定精确性.方法:本研究应用L929鼠结缔组织来源纤维母细胞系,参照国际标准品测定rhTNF-α效价.分别用Northern Dot Blot杂交检测及DNA电泳等方法,观察不同效价rhTNF-α对HL-60人白血病早幼粒细胞生长的影响.结果:rhTNF-α对HL-60细胞的生长抑制作用与时间、剂量正相关,核酸水平检测初步发现c-myc基因表达量降低,且rhTNF-α对DNA有损伤作用.结论:rhT-NF-α的测定可用自动分析的方法进行.rhTNF-α抑制HL-60细胞生长,其机理不同于阿霉素. 展开更多
关键词 RHTNF-Α 生物活性 IL-60细胞 白血病
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重组碱性成纤维细胞生长因子生物学活性研究 被引量：8
2
作者 饶春明 刘兰 王军志 《微生物学杂志》 CAS CSCD 1999年第3期41-42,共2页
关键词 重组 BFGF 生物学活性
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正交实验建立蛇毒抗瘤蛋白生物活性测定方法 被引量：1
3
作者 乐嘉静 李湛君 徐康森 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2005年第4期447-450,共4页
目的:建立蛇毒抗瘤蛋白生物活性测定方法。方法:用正交实验确定实验条件,求细胞5 0 %死亡时的样品浓度,即IC50 值。结果:此法使细胞死亡率与样品的Log浓度具有良好的线性关系(r =0 .95 15 ,P <0 .0 1) ,重复性实验结果:板内RSD值为12... 目的:建立蛇毒抗瘤蛋白生物活性测定方法。方法:用正交实验确定实验条件,求细胞5 0 %死亡时的样品浓度,即IC50 值。结果:此法使细胞死亡率与样品的Log浓度具有良好的线性关系(r =0 .95 15 ,P <0 .0 1) ,重复性实验结果:板内RSD值为12 .3% ,板间RSD值为16 .6 % ;不同实验次数RSD值为17.8% ,灵敏度为36 μg·L- 1,并能反应出蛇毒抗瘤蛋白的抗肿瘤特异性。结论:此方法特异,简便且具有良好的重复性,可以作为蛇毒抗瘤蛋白生物活性的测定方法。 展开更多
关键词 蛇毒抗瘤蛋白 生物活性 正交实验 MTT K562细胞株
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重组人胰高血糖素类多肽-1(7-36)对化学致糖尿病模型动物的降血糖作用 被引量：10
4
作者 乐嘉静 李湛君 +2 位作者 邱财荣 宫泽辉 徐康森 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期1171-1173,共3页
目的　本文研究了重组人胰高血糖素类多肽 1(7 36 )[rhGLP 1(7 36 ) ]对化学所致糖尿病模型动物的降血糖和促胰岛素分泌作用。方法　对四氧嘧啶型糖尿病小鼠及链脲霉素型糖尿病大鼠皮下注射不同剂量的rhGLP 1,分别于给药 4天后采血 ,收... 目的　本文研究了重组人胰高血糖素类多肽 1(7 36 )[rhGLP 1(7 36 ) ]对化学所致糖尿病模型动物的降血糖和促胰岛素分泌作用。方法　对四氧嘧啶型糖尿病小鼠及链脲霉素型糖尿病大鼠皮下注射不同剂量的rhGLP 1,分别于给药 4天后采血 ,收取血清 ,测定血糖及胰岛素值。结果　四氧嘧啶型糖尿病小鼠皮下注射 4 0、80 μg·kg-1rhGLP 1后 ,血糖值显著下降 (P <0 0 1) ,而 2 0 μg·kg-1剂量组则无显著性改变 ;链脲霉素型糖尿病大鼠皮下注射 2 8、5 6 μg·kg-1rhGLP 1后 ,血糖值显著下降 (P <0 0 5、P <0 0 1) ,而 14 μg·kg-1剂量组则无显著性改变。结论　rhGLP 1对实验动物部分 展开更多
关键词 重组人胰高血糖素类多肽-1 糖尿病模型 血糖 胰岛素
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阳离子抗菌肽研究进展 被引量：13
5
作者 查向东 徐康森 刘兢 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第7期735-740,共6页
阳离子抗菌肽广泛分布于多种生物 ,越来越多的证据表明它们在机体天然免疫中有着重要的作用。广谱抗菌、抗病毒、抗肿瘤细胞及其它特性也使得其具有潜在的医药价值。对抗菌肽的研究正不断深入。该文从一般性质、作用机制、构效关系、重... 阳离子抗菌肽广泛分布于多种生物 ,越来越多的证据表明它们在机体天然免疫中有着重要的作用。广谱抗菌、抗病毒、抗肿瘤细胞及其它特性也使得其具有潜在的医药价值。对抗菌肽的研究正不断深入。该文从一般性质、作用机制、构效关系、重组表达、应用价值、存在的问题与发展方向等方面 。 展开更多
关键词 阳离子抗菌肽 结构 活性 作用机制 构效关系 重组表达
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海狗油ω-3多不饱和脂肪酸对胰岛素抵抗型糖尿病大鼠的降糖作用研究 被引量：9
6
作者 乐嘉静 李湛君 徐康森 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2005年第3期321-325,共5页
目的:海狗油ω-3多不饱和脂肪酸(Sealoilω-3PUFA)具有降糖作用,本文用胰岛素抵抗型糖尿病大鼠模型从体内研究它的降血糖和增加胰岛素敏感性的作用,为临床试验提供实验依据。方法:用高脂饲料链脲霉素建立的胰岛素抵抗型糖尿病大鼠的模... 目的:海狗油ω-3多不饱和脂肪酸(Sealoilω-3PUFA)具有降糖作用,本文用胰岛素抵抗型糖尿病大鼠模型从体内研究它的降血糖和增加胰岛素敏感性的作用,为临床试验提供实验依据。方法:用高脂饲料链脲霉素建立的胰岛素抵抗型糖尿病大鼠的模型灌胃给予不同剂量的海狗油ω3多不饱和脂肪酸,给药6周后,采血,收集血清,测定血脂四项、血糖值、胰岛素值及肝糖原。结果:海狗油ω3多不饱和脂肪酸4 .8、2 .4、1.2g·kg-1可使升高的血清甘油三脂分别降低4 4.1%、4 3.5 %和6 .5 % ;可使降低的血清高密度脂蛋白分别升高2 2 .4 %、8.0 %和6 .3% ;并能使升高的血清低密度脂蛋白分别下降2 7.9%、2 3.6 %和- 4.6 % ;可使血糖值既明显低于给药前31.6 %、13.3% ,- 10 .2 % ,也明显低于对照组,比对照组分别降低4 7.3% ,39.2 %和12 .2 % ,说明其降糖作用非常明显。而胰岛素分泌并不明显,分别是2 1%、- 0 .8%和15 .5 % ;海狗油ω3多不饱和脂肪酸可增强机体对胰岛素的敏感性,敏感指数分别增加12 9.5 %、6 0 .3%、5 5 .5 % ,也可降低机体对胰岛素的抵抗,抵抗指数分别降低36 .4 %、39 .2 %和0 .9%。海狗油ω3多不饱和脂肪酸4 .8、2 .4、1.2g·kg-1能加强肝糖原的合成,分别增加4 1.8%、2 9.8%和- 16 .2 %。结论:海狗油ω- 展开更多
关键词 海狗油ω-3多不饱和脂肪酸 血糖 胰岛素 胰岛素抵抗 胰岛素敏感性
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睫状神经营养因子突变体的设计及活性分析 被引量：3
7
作者 毕华 岳俊杰 +3 位作者 袁力勇 饶春明 陈惠鹏 王军志 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第4期408-411,共4页
利用计算机分子模拟系统模建了CNTFRα的三维结构,并对CNTF与CNTFRα结合的关键部位进行分析,同时综合了同源比较的结果及CNTF分子自身的特点,设计了2个CNTF的突变体A和B.表达纯化后得到目的蛋白,TF-1细胞增殖实验的结果表明,2个突变体... 利用计算机分子模拟系统模建了CNTFRα的三维结构,并对CNTF与CNTFRα结合的关键部位进行分析,同时综合了同源比较的结果及CNTF分子自身的特点,设计了2个CNTF的突变体A和B.表达纯化后得到目的蛋白,TF-1细胞增殖实验的结果表明,2个突变体蛋白的比活性均达到106U/mg的水平,且A的活性大于B的活性.上述结果初步表明设计的合理性,为其进一步的开发和应用奠定了基础. 展开更多
关键词 计算机分子模拟 表达 纯化 睫状神经营养因子突变体
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重组人肿瘤坏死因子(rhTNF-α)国家标准品的研制 被引量：4
8
作者 王军志 高凯 饶春明 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1999年第4期295-298,共4页
目的:建立符合WHO重组细胞因子要求,用于rhTNF质量控制的国家标准品.方法:用NIBSC提供的国际标准品为标准,采用L929细胞体外活性测定系统,按统一方案组织了4家实验室,对这批rhTNF-α国家标准品(批号960508)的效价进行协作标定.结果:经... 目的:建立符合WHO重组细胞因子要求,用于rhTNF质量控制的国家标准品.方法:用NIBSC提供的国际标准品为标准,采用L929细胞体外活性测定系统,按统一方案组织了4家实验室,对这批rhTNF-α国家标准品(批号960508)的效价进行协作标定.结果:经统计学分析,均数的95%可信区间为3289～4266IU/支,单次测定的95%标准值范围为1735～8087IU/支.这批国家标准品效价确定为3500IU/支.4种不同温度存放27个月的样品,效价测定结果表明其效价稳定.结论:这批rhTNF-α经统一协作,质量可靠,效价稳定,可用作国家标准品使用. 展开更多
关键词 RHTNF 标准化 生物学活性 肿瘤坏死因子
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人神经生长因子基因血管内给药的安全性评价 被引量：3
9
作者 时小燕 吴勇杰 +1 位作者 高凯 王军志 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2003年第1期39-43,共5页
目的 :评价用高渗法向大鼠脑内导入二型重组腺相关病毒 人神经生长因子 (NGF) β基因(rAAV2 hNGFβ)的安全性。 方法 :大鼠经颈外动脉输入甘露醇诱导血脑屏障开放 ,分别经颈外动脉输入生理盐水 (对照组 )、rAAV2 hNGFβ或rAAV2 GFP... 目的 :评价用高渗法向大鼠脑内导入二型重组腺相关病毒 人神经生长因子 (NGF) β基因(rAAV2 hNGFβ)的安全性。 方法 :大鼠经颈外动脉输入甘露醇诱导血脑屏障开放 ,分别经颈外动脉输入生理盐水 (对照组 )、rAAV2 hNGFβ或rAAV2 GFP。对导入rAAV2 hNGFβ的大鼠 ,观察饲养期间的一般情况 ,d 60称重 ,测定痛敏感度、出血时间和凝血时间。麻醉后腹腔取血 ,行血液学、血液生化检测 ;脏器称重 ,计算脏器系数 ,并做病理组织学检查。对导入rAAV2 GFP的大鼠处死后用 4 %多聚甲醛 PBS原位灌注固定 ,脏器连续冰冻切片 ,用激光共聚焦显微镜观察rAAV2 GFP在各脏器中的分布及表达。结果 :和对照组相比 ,导入rAAV2 hNGFβ大鼠的一般情况、痛敏感度、血液学和血液生化指标、脏器系数及各脏器病理组织学检查无明显差异。rAAV2 GFP分布器官包括肝、脾、肾、肾上腺、肺、甲状腺、垂体、胸腺、胃、小肠和胰腺组织。结论 :经颈外动脉将rAAV2 hNGFβ导入大鼠脑内d 60 ,rAAV2 hNGFβ对大鼠全身无明显毒性 ;rAAV2 hNGFβ除在大鼠脑内有表达外 ,其在体内的生物学分布较为广泛。 展开更多
关键词 毒理学 安全性评价 重组腺相关病毒 神经生长因子基因 血脑屏障 生物学分布 大鼠
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一种改进的银染方法
10
作者 赵燕平 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1996年第4期305-307,共3页
本文介绍一种改进的蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳的银染方法,通过对常用的Merril等人银染方法一些步骤的修改,染色后背景颜色明显减低、灵敏度明显提高,与原法相比提高近6倍,可检出低至0.38ng的蛋白条带。
关键词 银染 蛋白质聚丙烯酰胺凝腔电泳 蛋白条带 碱性染色法
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