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高质量植物基因组DNA的分离 被引量:71
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作者 罗志勇 周钢 +2 位作者 陈湘晖 陆秋恒 胡维新 《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第2期178-180,共3页
为了从富含多酚和多糖的药用植物组织中分离出高质量基因组DNA ,本文通过改良几种已经存在的分离方法 ,获得了一种以CTAB法为基础的分离高质量完整DNA的简便、快速方法。使用该方法从人参、西洋参及三七的新鲜或干燥根组织分离DNA时 ,A2... 为了从富含多酚和多糖的药用植物组织中分离出高质量基因组DNA ,本文通过改良几种已经存在的分离方法 ,获得了一种以CTAB法为基础的分离高质量完整DNA的简便、快速方法。使用该方法从人参、西洋参及三七的新鲜或干燥根组织分离DNA时 ,A2 60 /A2 80 为 1.8左右 ,分子量大小约为 2 1.2kb ,由此所得的DNA可直接用于AFLP分析 ,即用EcoRⅠ /MseⅠ消化DNA后 ,用DNA的限制酶切片段经T4DNA连接酶连接 ,再用巢式PCR扩增 ,构建出可重复的、多态性丰富的人参、西洋参、三七基因组DNAAFLP指纹图谱。结果表明 ,该技术可有效地从富含多酚和多糖的药用植物组织中分离出高质量和高分子量DNA ,此法亦有望用于其它植物DNA的分离。 展开更多
关键词 DNA分离 高质量DNA 改进 CTAB法 药用植物
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基于核心能力的护士专业技术职称晋升评价指标体系研究 被引量:13
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作者 岳丽青 王曙红 +2 位作者 王耀辉 范丽莉 夏晓晨 《护理学杂志》 CSCD 2013年第16期68-71,共4页
目的构建三级综合医院护士专业技术职称晋升的评价指标体系。方法采用Delphi法,对27名来自某三级甲等医院和某护理学院的临床护理专家、护理教育专家、临床科室主任、护士长进行两轮函询。结果两轮函询中专家意见的肯德尔和谐系数为0.8... 目的构建三级综合医院护士专业技术职称晋升的评价指标体系。方法采用Delphi法,对27名来自某三级甲等医院和某护理学院的临床护理专家、护理教育专家、临床科室主任、护士长进行两轮函询。结果两轮函询中专家意见的肯德尔和谐系数为0.813,专家对指标评价的重要性变异系数为0.13和0.15;从德、能、勤、绩4个方面筛选出护士专业技术职称晋升的4个一级指标,13个二级指标,22个三级指标。结论该综合评价指标体系能体现护士知识、技能、态度和价值观,与工作实绩相结合,可作为护理人力资源管理的参考依据。 展开更多
关键词 临床护士 专业技术职称 晋升 指标体系
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成人视网膜假定蛋白基因ARHP的克隆及生物信息学分析 被引量:4
3
作者 李峰 蒋卫红 +4 位作者 尹志华 杨旭宇 冯湘玲 刘卫东 姚开泰 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第6期930-934,共5页
从UniGene库中选取编号为BG2 2 2 62 4来自人鼻咽组织的表达序列标签 (EST )序列 ,联网到NCBI调用Blast服务器分析 ,发现该EST序列是一个代表新基因的未知序列 .利用Blast检索GenBank的nr数据库和EST数据库 ,构建EST重叠群 ,联网到NCBI... 从UniGene库中选取编号为BG2 2 2 62 4来自人鼻咽组织的表达序列标签 (EST )序列 ,联网到NCBI调用Blast服务器分析 ,发现该EST序列是一个代表新基因的未知序列 .利用Blast检索GenBank的nr数据库和EST数据库 ,构建EST重叠群 ,联网到NCBI的ORFfinder服务器 ,分析发现该EST重叠群具有完整的阅读框架 .分别在cDNA序列阅读框架的起始密码子和终止密码子的两侧设计引物 ,以人胎脑cDNA文库为模板 ,进行PCR扩增 ,测序确定该基因的cDNA全长序列 .该基因cDNA序列全长为 1672bp ,阅读框架位于第 3 0 4~ 1557位之间 ,编码由 417个氨基酸组成 ,分子质量为 46 58ku的蛋白质 ,其理论 pI为 4 2 1.将蛋白质序列通过NCBI的Blast服务器进行序列相似性分析 ,发现该基因编码的蛋白质和成年小鼠视网膜未知蛋白 (BAB3 2 2 14 )同源 .经与国际人类基因组命名委员会协商定名为成人视网膜假定蛋白 (adultretinahypotheticalprotein ,ARHP) ,GenBank登录号为AY174896.生物信息学分析表明 ,该蛋白质可能为一参与转录调控的核蛋白 .ARHP基因定位在染色体 5q3 5,跨越 3 5163bp ,含 4个外显子和 3个内含子 .在基因的 5′非翻译区有 展开更多
关键词 成人视网膜假定蛋白基因 基因克隆 生物信息学分析 表达序列标签
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HRE1.Egr-1.yCDglyTK融合自杀基因前药系统对鼻咽癌放射增敏作用的体外实验 被引量:5
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作者 钟宇 唐瑶云 +1 位作者 谢常宁 赵素萍 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期110-114,共5页
目的:构建缺氧/辐射双敏感性启动子HRE1.Egr-1,观察其在缺氧或放射诱导下调控yCDglyTK基因在鼻咽癌HNE-1细胞表达及yCDglyTK/5-FC对鼻咽癌HNE-1细胞杀伤效应,为探索新的鼻咽癌基因-放射治疗奠定实验基础。方法:利用基因重组技术构建嵌... 目的:构建缺氧/辐射双敏感性启动子HRE1.Egr-1,观察其在缺氧或放射诱导下调控yCDglyTK基因在鼻咽癌HNE-1细胞表达及yCDglyTK/5-FC对鼻咽癌HNE-1细胞杀伤效应,为探索新的鼻咽癌基因-放射治疗奠定实验基础。方法:利用基因重组技术构建嵌合启动子HRE1.Egr-1调控yCDg-lyTK基因表达的质粒载体;脂质体介导重组质粒转染鼻咽癌HNE-1细胞,建立稳定表达yCDglyTK基因的鼻咽癌HNE-1转染细胞;免疫印迹法检测在常氧、放射、乏氧、乏氧加放射等不同条件下HNE1细胞中yCDglyTK表达的强度;MTT法检测加入5-FC后对上述不同条件下稳定转染细胞的杀伤效应。结果:各组蛋白表达均有差别(P<0.01),以乏氧/放射处理最为明显;5-FC对各种条件干预下的细胞均有杀伤效应,其中以乏氧/放射处理最为明显(P<0.01)。结论:HRE1.Egr-1嵌合启动子具有放射和乏氧诱导的双重特性,可以显著增强yCDglyTK/5-FC系统在乏氧和放射干预下对鼻咽癌HNE-1细胞的杀伤效应,为鼻咽癌的基因-放射治疗开辟了新思路。 展开更多
关键词 鼻咽癌 缺氧反应元件 乏氧 基因-放射治疗
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非酒精性脂肪肝对药动学影响研究进展 被引量:3
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作者 李荣辉 黄美玲 +3 位作者 谭鸿毅 裴奇 项玉霞 阳国平 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2013年第9期1065-1075,共11页
非酒精性脂肪肝(NAFLD)是一种最常见的慢性肝病,严重威胁人类健康。在影响药物代谢的各种因素中,慢性肝病所起的作用最重要,可导致肝脏基因表达、mRNA及蛋白表达改变。非酒精性脂肪肝动物模型和非酒精性脂肪肝炎患者的研究结果显示,非... 非酒精性脂肪肝(NAFLD)是一种最常见的慢性肝病,严重威胁人类健康。在影响药物代谢的各种因素中,慢性肝病所起的作用最重要,可导致肝脏基因表达、mRNA及蛋白表达改变。非酒精性脂肪肝动物模型和非酒精性脂肪肝炎患者的研究结果显示,非酒精性脂肪肝时药物代谢酶及药物转运体发生显著改变。药物代谢酶和药物转运体在药物代谢过程中发挥重要作用,其改变可能影响药物在体内的清除,导致诸多临床药物的疗效、毒副作用甚至药物相互作用的发生。随着非酒精性脂肪肝的流行,越来越多的药物用于非酒精性脂肪肝患者。因此本文就非酒精性脂肪肝对药动学影响的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 非酒精性脂肪肝 药物代谢酶 药物转运 药动学 研究进展
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遗传性聋基因诊断策略进展 被引量:7
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作者 刘亚兰 桑树山 刘学忠 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期666-672,共7页
听力损失可以由多种因素引起,其中遗传因素占语前感音神经性聋的60%左右[1]。根据是否伴有其他器官或系统症状,遗传性聋分为非综合征型聋(non-syndromic hearing loss,NSHL)和综合征型聋(syndromic hearing loss,SHL)。在语前聋中,大约... 听力损失可以由多种因素引起,其中遗传因素占语前感音神经性聋的60%左右[1]。根据是否伴有其他器官或系统症状,遗传性聋分为非综合征型聋(non-syndromic hearing loss,NSHL)和综合征型聋(syndromic hearing loss,SHL)。在语前聋中,大约70%为NSHL,30%为SHL。按照遗传模式区分,大约80%NSHL为常染色体隐性耳聋(autosomal recessive deafness,DFNB),20%为常染色体显性耳聋(autosomal dominant deafness,DFNA),1%为伴性染色体遗传性聋,不足1%为线粒体相关性聋[2]。SHL的临床表现除耳聋外,常伴有其他器官或系统的症状或体征,目前已发现400多种伴有耳聋的综合征[3]。SHL伴随的症状或体征可以帮助综合征型聋的诊断,但是,这些伴随症状可能出现在耳聋之后或者不被发现,从而影响SHL的正确诊断。 展开更多
关键词 遗传性聋 诊断策略 非综合征型 系统症状 基因 常染色体隐性 常染色体显性 SHL
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cDNA微阵列结合信号通路分析喉鳞癌差异表达基因 被引量:2
7
作者 陈杰 田勇泉 +3 位作者 肖健云 邢晓为 左朝辉 黄文孝 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期483-486,共4页
关键词 喉鳞癌 芯片 信号通路 差异表达基因
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鼻腔恶性黑色素瘤19例临床分析 被引量:5
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作者 魏瑞 蒋卫红 申良方 《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第2期121-122,共2页
目的 :探讨鼻腔恶性黑色素瘤的病理、临床特点及治疗。方法 :我院自 1988年 9月~ 2 0 0 1年 7月共收治 19例鼻腔恶性黑色素瘤 ,均有病理学证实。主要症状多为鼻塞和涕血、鼻衄。 19例均手术治疗 ,手术加放疗 6例 ,手术加放疗加化疗 2... 目的 :探讨鼻腔恶性黑色素瘤的病理、临床特点及治疗。方法 :我院自 1988年 9月~ 2 0 0 1年 7月共收治 19例鼻腔恶性黑色素瘤 ,均有病理学证实。主要症状多为鼻塞和涕血、鼻衄。 19例均手术治疗 ,手术加放疗 6例 ,手术加放疗加化疗 2例 ,手术加化疗 3例。结果 :19例中至今生存 7例 ,分别已生存 8月~ 13年。 1,3,5年生存率分别为 6 4.7%,42 .85 %,30 .76 %。结论 :鼻腔恶性黑色素瘤恶性程度高 ,易复发 ,手术加放疗是有效的治疗方法。 展开更多
关键词 鼻腔 恶性黑色素瘤 临床分析 诊断 治疗
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医疗机构完全市场化改革的风险及其控制 被引量:2
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作者 丁建农 田勇泉 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期423-427,共5页
随着20世纪下半叶以来新公共管理运动在全球的兴起,市场化成为了主流。一些国家将原本由政府管理的医疗机构注入民营资本,让医疗行业朝着市场化方向改革,医疗机构市场化改革可能存在的风险主要有以下几个方面:医疗资源分配不均的风险;... 随着20世纪下半叶以来新公共管理运动在全球的兴起,市场化成为了主流。一些国家将原本由政府管理的医疗机构注入民营资本,让医疗行业朝着市场化方向改革,医疗机构市场化改革可能存在的风险主要有以下几个方面:医疗资源分配不均的风险;医疗行业市场失灵的风险;政府寻租腐败的道德风险;社会正义价值沦丧的风险等。医疗机构市场化的风险控制措施主要有:明确政府的职能定位;完善医疗保险体系建设;健全基层医疗体系;强化医院社会意识。 展开更多
关键词 医疗机构 市场化 风险 控制
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经鼻内镜下蝶鞍占位性病变摘除术的护理 被引量:3
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作者 屈桂荣 《护理学杂志(综合版)》 2002年第3期180-181,共2页
关键词 重体瘤 蝶鞍肿瘤 经鼻内镜 围手术期 蝶鞍手术 护理
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随机森林算法在产后抑郁风险预测中的应用 被引量:21
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作者 肖美丽 晏春丽 +6 位作者 付冰 杨淑平 朱姝娟 杨东琪 雷倍美 黄瑞瑞 雷俊 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期1215-1222,共8页
目的:探讨随机森林算法在产后抑郁影响因素的筛选和风险预测中的应用效果。方法:选取2017年6月至2018年6月在湖南省长沙市某三甲医院接受产前检查并在该医院分娩,符合纳入和排除标准的孕早期妇女为研究对象。入组时,使用自编的调查问卷... 目的:探讨随机森林算法在产后抑郁影响因素的筛选和风险预测中的应用效果。方法:选取2017年6月至2018年6月在湖南省长沙市某三甲医院接受产前检查并在该医院分娩,符合纳入和排除标准的孕早期妇女为研究对象。入组时,使用自编的调查问卷、中文版爱丁堡产后抑郁量表(Edinburgh Postnatal Depression Scale,EPDS)调查研究对象的人口经济学、心理社会学、生物学和产科及其他特征;产后4~6周内,采用中文版EPDS进行抑郁评分和自编的产后资料问卷收集分娩和产后资料。采用R软件在训练数据集上建立产后抑郁风险预测的随机森林模型,在验证数据集上采用预测准确率、灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和曲线下面积(area under curve,AUC)评价模型的预测效果。结果:共调查406例研究对象,其中150例的EPDS得分≥9,产后抑郁的发生率为36.9%。通过随机森林算法对训练集建立的模型在验证集上验证,得出预测准确度为80.10%,灵敏度为61.40%,特异度为89.10%,阳性预测值为73.00%,阴性预测值为82.80%,AUC值0.833。采用随机森林算法通过变量重要性评分对产后抑郁影响因素的重要程度进行排序,得出排名前10位的重要预测变量为产前抑郁、产后经济担忧程度、产后工作担忧程度、孕早期血清游离三碘甲腺原氨酸、孕晚期高密度脂蛋白、向婴幼儿发脾气、孕早期血清总胆固醇、孕早期三酰甘油、孕晚期血细胞比容和三酰甘油。结论:随机森林算法在产后抑郁的风险预测中具有较大优势,通过综合评价机制能从复杂的多因素中识别出产后抑郁的重要影响因素,并进行定量分析。这对识别产后抑郁关键因素,进行及时、有效干预具有重要意义。 展开更多
关键词 随机森林 产后抑郁 影响因素 风险预测
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护士临床警报知识、态度和行为问卷的编制与考评 被引量:11
12
作者 邹莎 岳丽青 +2 位作者 方晚霞 李珍 李映兰 《护理学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第1期37-41,共5页
目的编制评价护士临床警报知识、态度和行为的可靠工具。方法以知信行模式和临床警报生命周期特点为理论基础,参考相关文献和通过质性访谈建立条目池,经2轮德尔菲专家函询和调查450名临床护士确定问卷。结果形成3个维度40个条目的问卷,... 目的编制评价护士临床警报知识、态度和行为的可靠工具。方法以知信行模式和临床警报生命周期特点为理论基础,参考相关文献和通过质性访谈建立条目池,经2轮德尔菲专家函询和调查450名临床护士确定问卷。结果形成3个维度40个条目的问卷,知识维度12个条目、态度维度11个条目、行为维度17个条目;问卷Cronbach′sα系数0.884,折半信度0.933,重测信度0.876。条目水平内容效度指数(I-CVI)0.818~1.000,问卷水平内容效度指数(S-CVI)0.850;共提取8个公因子,累积贡献率为58.857%。结论护士临床警报知识、态度和行为问卷信效度良好,可用于测评护士临床警报处理能力。 展开更多
关键词 护士 临床警报 报警 知识 态度 行为 信度 效度
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鼻咽癌组织中EB病毒潜伏相关基因的表达 被引量:6
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作者 尹志华 蒋卫红 +3 位作者 李峰 杨旭宇 冯湘玲 姚开泰 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期2374-2378,共5页
目的:通过检测鼻咽癌组织中EB病毒的潜伏膜蛋白LMP1的序列以及LMP1、EBNA1、EBNA2的mRNA表达来探讨EB病毒的感染状态及其表达产物与鼻咽癌的关系。方法:应用PCR法检测鼻咽癌组织中LMP1 DNA的存在,并对鼻咽癌来源的LMP1和EB病毒永生化狨... 目的:通过检测鼻咽癌组织中EB病毒的潜伏膜蛋白LMP1的序列以及LMP1、EBNA1、EBNA2的mRNA表达来探讨EB病毒的感染状态及其表达产物与鼻咽癌的关系。方法:应用PCR法检测鼻咽癌组织中LMP1 DNA的存在,并对鼻咽癌来源的LMP1和EB病毒永生化狨猴B淋巴细胞系B95-8来源的LMP1进行测序,比较序列的差异。利用巢式RT-PCR检测鼻咽癌组织中LMP1、EBNA1、EBNA2的mRNA表达。结果:47例鼻咽癌组织均含有LMP1 DNA,所有鼻咽癌来源的LMP1 DNA与B95-8来源的LMP1 DNA序列比较均存在着多个单核苷酸变异,最明显的是XhoⅠ酶切位点的丢失。测序后显示鼻咽癌来源的LMP1DNA有30个核苷酸的丢失。巢式RT-PCR显示LMP1、EBNA1、EBNA2在鼻咽癌中的mRNA表达率分别为76.6%、80.0%和74.5%。其中EB-NA1的表达是由Qp启动的,而B95-8细胞中EBNA1的表达是由Cp启动的。结论:鼻咽癌中EB病毒的作用途径比较复杂,LMP1、EBNA1、EBNA2等潜伏期基因还有早期裂解基因BARF1均可能参与鼻咽癌的发生发展过程。 展开更多
关键词 爱泼斯坦巴尔病毒 鼻咽肿瘤 潜伏膜蛋白质1
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医护人员职业暴露后预防依从性及其影响因素研究进展 被引量:11
14
作者 田含章 易宜芳 李映兰 《护理学杂志》 CSCD 2014年第6期92-94,共3页
揭示国内外医护人员职业暴露及暴露后心理应激状况的现状,探讨暴露后预防依从性的影响因素,为医院管理者或政策制定者采取相应心理干预、提高职业暴露后预防的依从性和制定相关卫生政策提供依据。
关键词 医护人员 职业暴露 心理应激 暴露后预防 综述文献
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诱导型一氧化氮合酶在鼻咽癌中的表达及意义 被引量:13
15
作者 刘阳云 赵素萍 +3 位作者 刘庚勋 李正贤 孙正良 江文 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2007年第2期97-100,共4页
背景与目的:诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在许多肿瘤中呈高表达,被认为与肿瘤的发生、发展、浸润及转移有关,但iNOS在鼻咽癌(NPC)肿瘤组织中的表达及其作用,国内尚未见报道,国外(PUBMED)也仅可查到两条与iNOS在NPC中表达有关的信息,然而这... 背景与目的:诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在许多肿瘤中呈高表达,被认为与肿瘤的发生、发展、浸润及转移有关,但iNOS在鼻咽癌(NPC)肿瘤组织中的表达及其作用,国内尚未见报道,国外(PUBMED)也仅可查到两条与iNOS在NPC中表达有关的信息,然而这两项研究并未对iNOS表达与NPC的生物学行为进行探讨。本研究应用免疫组化法检测iNOS在鼻咽正常粘膜和NPC中的表达情况,探讨iNOS与NPC发生发展浸润和转移的关系。方法:选取鼻咽活检石蜡标本50例,其中低分化鳞癌40例,正常鼻咽粘膜标本10例作对照。石蜡切片免疫组织化学染色,光镜下观察iNOS的蛋白表达情况。结果:正常鼻咽组织中,iNOS蛋白无表达;在NPC组织中,iNOS免疫组化阳性者细胞胞质和胞核内出现棕黄色细颗粒,且胞核染色比胞质更强。在NPC组织中iNOS蛋白表达明显上调,其阳性表达率分别为67.5%(27/40),与正常鼻咽组织比较(0/10),差异具有显著性(P<0.05);有淋巴结转者iNOS的表达高于无淋巴结转移者(72.41%vs 54.55%),T3/4期NPC的iNOS表达高于T1/2期NPC(73.33%vs 50.00%),差异均具有显著性(P<0.05)。结论:①在NPC组织中,iNOS蛋白表达定位于细胞胞质和胞核,且胞核表达比胞质更强。②在NPC组织中,iNOS蛋白表达明显上调。iNOS的过度表达可能与NPC的发生、发展、侵袭和转移有关,选择性iNOS抑制剂可能有助于NPC的治疗。 展开更多
关键词 鼻咽癌 诱导型一氧化氮合酶
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诱导型一氧化氮合酶在指导晚期鼻咽癌治疗方案选择中的价值 被引量:6
16
作者 刘阳云 赵素萍 +3 位作者 刘庚勋 李正贤 孙正良 江文 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2007年第9期684-688,共5页
背景与目的:同期放化疗被认为是目前治疗晚期鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)的最佳方案,但对于同期放化疗对哪一类患者最有效,哪种化疗药物与放疗联合疗效最佳等问题尚没有一致的结论。有学者推荐将顺铂(cisplatin,DDP)同期放化... 背景与目的:同期放化疗被认为是目前治疗晚期鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)的最佳方案,但对于同期放化疗对哪一类患者最有效,哪种化疗药物与放疗联合疗效最佳等问题尚没有一致的结论。有学者推荐将顺铂(cisplatin,DDP)同期放化疗方案作为治疗晚期NPC的标准方案。由于顺铂能增加诱导型一氧化氮合成酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)的表达,使杀肿瘤的一氧化氮(NO)合成增加而抗瘤,因此我们考虑是否可以通过检测治疗前NPC组织中的iNOS的表达来对这种同期放化疗的疗效进行预测,并根据预测结果选择相应的治疗方案。本研究旨在探讨NPC肿瘤组织中诱导型iNOS的表达与DDP同期放化疗后鼻咽局部肿瘤全消与残留的关系,以便选择最合适的治疗方案,最大限度地提高鼻咽局部肿块全消率。方法:应用免疫组化法检测DDP同期放化疗后30例鼻咽局部肿块全消和30例鼻咽局部肿块残留的鼻咽部低分化鳞状细胞癌患者在接受治疗前的肿瘤组织中iNOS的蛋白表达情况。结果:iNOS阳性表达定位于NPC细胞的胞质和胞核内,且胞核染色比胞质更强。iNOS在NPC中总的阳性表达率为71.67%(43/60)。在30例肿块全消和30例肿块残留的NPC组织中,iNOS阳性表达率为分别为86.67%、53.33%,差异具有显著性(χ2=6.748,P=0.034)。两组间iNOS弱阳性及中等阳性表达差异无显著性,而强阳性表达全消组低于残留组,差异有显著性(χ2=4.246,P=0.039)。结论:治疗前检测iNOS在NPC组织中的表达,对预测DDP同期放化疗疗效有一定的价值,可根据其表达情况,选择相对合理的同期放化疗方案。 展开更多
关键词 诱导型一氧化氮合酶 鼻咽癌 同期放化疗 顺铂
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