蛋白酶体20S亚基β8调控丝裂原活化蛋白激酶激酶/细胞外信号调节激酶通路对肾透明细胞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

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作者 郝宇菲 石宇 +3 位作者 郑锦秀 赵雪婷 刘盛露 杨利军 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期641-652,共12页

目的探究蛋白酶体20S亚基β8(PSMB8)对肾透明细胞癌(ccRCC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响,以及是否通过调控丝裂原活化蛋白激酶激酶(MEK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路发挥其作用。方法采用癌症基因组图谱数据库分析ccRCC与正常组织PS... 目的探究蛋白酶体20S亚基β8(PSMB8)对肾透明细胞癌(ccRCC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响,以及是否通过调控丝裂原活化蛋白激酶激酶(MEK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路发挥其作用。方法采用癌症基因组图谱数据库分析ccRCC与正常组织PSMB8 mRNA的表达水平,并通过实时荧光定量PCR、Western blot和免疫组织化学染色等方法进一步检测PSMB8在ccRCC组织和细胞中的表达情况。构建稳定过表达和敲减PSMB8的细胞株,分别采用CCK-8法和平板克隆实验检测细胞的增殖能力,划痕愈合实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭的能力。对PSMB8共表达基因进行京都基因与基因组百科全书通路富集分析,Western blot检测MEK/ERK通路相关蛋白的磷酸化水平,并加用ERK激动剂C16-PAF处理进行细胞功能学挽救实验。结果与正常组织比较,PSMB8 mRNA和蛋白在ccRCC组织中呈高表达(P均<0.001),且与临床患者的TNM分期显著相关(P<0.001);与阴性对照组比较,过表达PSMB8可以促进786-O、ACHN细胞的增殖(P=0.021,P=0.039)、迁移和侵袭(P均<0.001),敲减PSMB8可以抑制786-O、ACHN细胞的增殖(P=0.022,P=0.005)、迁移和侵袭(P均<0.001);PSMB8共表达基因通路富集分析提示其可能与丝裂原活化蛋白激酶通路相关(P<0.001);敲减PSMB8后786-O和ACHN细胞MEK1/2(P=0.017,P=0.016)、ERK1/2(P=0.010,P=0.040)蛋白磷酸化水平及ERK下游因子c-Myc(P=0.043,P=0.038)、c-Fos(P=0.025,P=0.008)和CyclinD1(P=0.006,P=0.047)转录水平均下调;与ERK激动剂C16-PAF处理组比较,敲减PSMB8+C16-PAF组明显抑制786-O、ACHN细胞的增殖(P=0.003,P=0.002)、迁移和侵袭能力(P均<0.001)。结论PSMB8通过激活MEK/ERK信号通路从而促进ccRCC细胞的增殖、迁移及侵袭。 展开更多

关键词 肾透明细胞癌 蛋白酶体20S亚基β8 丝裂原活化蛋白激酶激酶/细胞外信号调节激酶信号通路

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舒芬太尼调节Ras/Raf/MEK/ERK信号通路对骨关节炎大鼠炎症反应和软骨细胞凋亡的影响 被引量：2

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作者 张洪远 张腾 +1 位作者 杜建国 陶宏 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期2071-2075,2082,共6页

目的:探讨舒芬太尼(Suf)调节Ras/Raf/丝裂原激活蛋白激酶激酶(MEK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路对骨关节炎(OA)大鼠炎症反应和软骨细胞凋亡的影响。方法:SD大鼠分为正常对照组(NC组)、空白对照组(Blank组)、低剂量Suf组(Suf-L组,1... 目的:探讨舒芬太尼(Suf)调节Ras/Raf/丝裂原激活蛋白激酶激酶(MEK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路对骨关节炎(OA)大鼠炎症反应和软骨细胞凋亡的影响。方法:SD大鼠分为正常对照组(NC组)、空白对照组(Blank组)、低剂量Suf组(Suf-L组,1μg/kg)、高剂量Suf组(Suf-H组,5μg/kg)、双醋瑞因(DC组,54 mg/kg)、Suf-H+ML-099(Ras/Raf/MEK/ERK通路激活剂)组(5μg/kg Suf+11.7 mg/kg ML-099),每组12只。除NC组外,其他组大鼠均采用横断大鼠右膝关节内侧半月板胫骨韧带构建OA模型,成功建模后开始给药,而NC组、Blank组大鼠需腹腔注射,而NC组、Blank组大鼠腹腔注射且灌胃等量生理盐水,每天给药1次,持续给药3周。末次给药24 h后,监测大鼠压痛阈值、热痛阈值变化;ELISA检测血清中TNF-α、IL-1β、IL-6水平;番红O-固绿染色检测软骨组织病理变化;TUNEL染色检测软骨细胞凋亡;Western blot检测软骨组织中Ras/Raf/MEK/ERK信号通路蛋白及基质金属蛋白酶13(MMP-13)蛋白表达。结果:与NC组比较,Blank组大鼠压痛阈值、热痛阈值降低(P<0.05),软骨组织病理损伤严重,TNF-α、IL-1β、IL-6水平、Mankin评分、软骨细胞凋亡率、Ras、Raf、MEK、p-ERK1/2、MMP-13蛋白表达升高(P<0.05);与Blank组比较,Suf-L组、Suf-H组、DC组对应指标变化趋势与上述相反(P<0.05);ML-099减弱了高剂量Suf对OA大鼠的影响。结论:Suf可能通过下调Ras/Raf/MEK/ERK通路抑制OA大鼠炎症和软骨细胞凋亡。 展开更多

关键词 舒芬太尼 骨关节炎 炎症 ras/raf/丝裂原激活蛋白激酶激酶/细胞外信号调节激酶信号通路

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中药通过细胞外信号调节激酶信号通路调控胃癌的研究进展 被引量：4

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作者 赵颖异 吕星 +1 位作者 谭雅兰 韩永光 《世界中医药》 CAS 北大核心 2024年第7期1043-1048,1055,共7页

胃癌在我国发病率和死亡率较高,存在发现晚、5年生存率低的特点,手术切除仍然是临床治疗的主要方法。大鼠肉瘤蛋白(Ras)/迅速加速性纤维肉瘤蛋白(Raf)/丝裂原活化的细胞外信号调节激酶(MEK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路在调控细胞... 胃癌在我国发病率和死亡率较高,存在发现晚、5年生存率低的特点,手术切除仍然是临床治疗的主要方法。大鼠肉瘤蛋白(Ras)/迅速加速性纤维肉瘤蛋白(Raf)/丝裂原活化的细胞外信号调节激酶(MEK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路在调控细胞增殖、转移、凋亡等方面具有非常重要的作用,与胃癌的发生与发展密切相关。近年来,很多学者探索调控Ras/Raf/MEK/ERK信号通路治疗胃癌的作用机制,在信号转导机制研究、靶向抑制剂筛选、中医药治疗等方面取得大量成果,实验验证在胃癌的治疗中干预其信号传递具有良好的效果和应用前景。 展开更多

关键词 大鼠肉瘤蛋白/迅速加速性纤维肉瘤蛋白/丝裂原活化的细胞外信号调节激酶/细胞外信号调节激酶(ras/raf/MEK/ERK)信号通路 胃癌 基因突变 抑制剂 靶向治疗 中药 研究进展 作用机制

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磷酸化细胞外信号调节蛋白激酶加重糖尿病大鼠脑缺血性损伤 被引量：4

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作者 张建忠 景丽 +2 位作者 郭风英 马轶 王一理 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第24期2339-2342,共4页

目的探讨高血糖加重脑缺血性损伤的分子机制。方法采用大鼠全脑缺血模型,通过免疫组化、末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP原位切口末端标记方法和Western blot技术,对比研究Streptozotocin诱导的糖尿病大鼠脑缺血时神经元细胞外信号调节... 目的探讨高血糖加重脑缺血性损伤的分子机制。方法采用大鼠全脑缺血模型,通过免疫组化、末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP原位切口末端标记方法和Western blot技术,对比研究Streptozotocin诱导的糖尿病大鼠脑缺血时神经元细胞外信号调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)磷酸化和神经元凋亡的关系。结果糖尿病组脑缺血30min和再灌注1、3、6h后,扣带皮质和海马CA3区ERK1/2阳性细胞数和神经元凋亡明显高于正常血糖组(P<0.05)。ERK1/2抑制剂U0126可明显减少ERK1/2的磷酸化和凋亡神经元的数量。Western blot分析可见,在缺血脑组织中磷酸化ERK1/2明显增高,再灌注3和6h糖尿病组显著高于正常血糖缺血组(P<0.05)。结论糖尿病高血糖加重缺血性脑损伤与MAPK家族激活有关,特别是ERK1/2参与了脑细胞的损伤。 展开更多

关键词 脑缺血 高血糖 丝裂原激活蛋白激酶 细胞外信号调节蛋白激酶 糖尿病

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过表达Raf激酶抑制蛋白(RKIP)抑制人肝星状细胞增殖

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作者 聂金兰 黄权芳 +1 位作者 谭实美 林兴 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1491-1494,共4页

目的研究Raf激酶抑制蛋白(RKIP)对LX-2人肝星状细胞增殖的影响。方法用重组质粒pc DNA3.1-RKIP转染LX-2细胞,G418筛选并培养稳定转染的细胞。MTT法和集落形成试验检测过表达RKIP对LX-2细胞增殖、集落生成的影响;Western blot法检测RKIP... 目的研究Raf激酶抑制蛋白(RKIP)对LX-2人肝星状细胞增殖的影响。方法用重组质粒pc DNA3.1-RKIP转染LX-2细胞,G418筛选并培养稳定转染的细胞。MTT法和集落形成试验检测过表达RKIP对LX-2细胞增殖、集落生成的影响;Western blot法检测RKIP、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、1型胶原蛋白(Col1)、基质金属蛋白酶1(MMP-1)、MMP-2及胞外信号调节激酶/丝裂原激活蛋白激酶(ERK/MAPK)信号通路相关蛋白的表达水平。结果与对照细胞相比,过表达RKIP明显抑制LX-2细胞增殖和集落形成,下调Col1、α-SMA、MMP-1和MMP-2蛋白表达,降低ERK/MAPK磷酸化水平。结论过表达RKIP抑制LX-2细胞的增殖,其机制与抑制ERK/MAPK信号通路有关。 展开更多

关键词 raf激酶抑制蛋白(RKIP) 肝星状细胞 LX-2细胞 增殖 胞外信号调节激酶/丝裂原激活蛋白激酶(ERK/MAPK)

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丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)抑制剂对人精子活动力的影响 被引量：3

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作者 丁玉芹 姜宏 汪存利 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期291-292,共2页

丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）属于丝/苏氨酸蛋白激酶,有报道[1]其家族成员细胞外信号调节激酶（extracellular-signal regulated protein kinase,ERK）和p38MAPK定位于精子尾部中段,参与精子活动力的调节;17-β雌二醇可通过PI3K/Akt通路... 丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）属于丝/苏氨酸蛋白激酶,有报道[1]其家族成员细胞外信号调节激酶（extracellular-signal regulated protein kinase,ERK）和p38MAPK定位于精子尾部中段,参与精子活动力的调节;17-β雌二醇可通过PI3K/Akt通路激活ERK,增加精子活动力, 展开更多

关键词 精子活动力 细胞外信号调节激酶(ERK) p38丝裂原激活蛋白激酶(p38MAPK) PD98059 SB203580 免疫印迹技术

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CCl4诱导的大鼠肝纤维化模型肝纤维化逆转与MAPK信号通路的研究 被引量：28

7

作者 李政通 李俊 +4 位作者 黄成 李浩 章圣鹏 黄艳 陶辉 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期809-814,共6页

目的通过检测CCl4诱导肝纤维化大鼠逆转恢复各时期MAPK信号通路蛋白动态变化,研究其在肝纤维化恢复期可能的调控作用。方法采用CCl4皮下注射SD大鼠12周,复制肝纤维化模型,分别于注射12周,停药后2、4、6、8周取材。通过检测各组ALT、AST... 目的通过检测CCl4诱导肝纤维化大鼠逆转恢复各时期MAPK信号通路蛋白动态变化,研究其在肝纤维化恢复期可能的调控作用。方法采用CCl4皮下注射SD大鼠12周,复制肝纤维化模型,分别于注射12周,停药后2、4、6、8周取材。通过检测各组ALT、AST、Hyp、LN、PⅢNP的含量变化和肝脏病理组织切片Masson染色,加以验证。采用West-ern blot法检测各组肝组织中MAPK通路蛋白表达。结果 ALT、AST、Hyp、LN、PⅢNP等反映肝损伤和纤维化进程的指标在第12周最高,即模型组最高,并且随着肝纤维化逆转而含量逐渐降低,Masson染色结果与之一致,表明大鼠肝纤维化模型期与各恢复期模型建立完成。p-ERK1/2在模型组表达明显降低,与正常组相比差异有显著性(P<0.01),恢复4周表达明显升高,与模型组相比差异有显著性(P<0.01),以后逐渐降低。p-JNK1/2在模型组表达明显降低(P<0.01),恢复期逐渐升高(P<0.05)。p-p38在模型组表达明显升高(P<0.01),恢复期逐渐降低(P<0.05)。p-ERK/ERK与Hyp相关系数r=-0.46,P=0.003;p-JNK/JNK与Hyp相关系数r=-0.53,P=0.0004;p-p38/p38与Hyp相关系数r=0.81,P=0.0001。结论 MAPK信号通路中的ERK、JNK和p38信号通路在肝纤维化逆转中发挥重要作用。 展开更多

关键词 肝纤维化 有丝分裂原活化蛋白激酶 细胞外信号调节激酶 C-JUN氨基末端激酶 P38丝裂原活化蛋白激酶 信号通路

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miR-508-5p慢病毒过表达载体构建及对MAPK1/ERK信号通路靶向抑制作用的研究

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作者 白静 范维宁 +3 位作者 邢译文 张涛 周林林 徐广贤 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期34-39,共6页

目的:构建能高效表达成熟miR-508-5p小分子的慢病毒过表达载体,研究其对MAPK1/ERK信号通路靶向调控作用。方法:利用化学合成miR-508-5p茎环结构RNA,并将其克隆入线性化的pSicoR质粒中,经双酶切及测序鉴定;同时构建与miR-508-5p互补靶基... 目的:构建能高效表达成熟miR-508-5p小分子的慢病毒过表达载体,研究其对MAPK1/ERK信号通路靶向调控作用。方法:利用化学合成miR-508-5p茎环结构RNA,并将其克隆入线性化的pSicoR质粒中,经双酶切及测序鉴定;同时构建与miR-508-5p互补靶基因MAPK1的3'非翻译区,将其克隆入线性化的Report载体中。利用脂质体转染试剂将鉴定阳性的pSicoR-miR-508-5p重组质粒转染HEK-293T细胞,进一步通过Relative luciferase activity、Western blot及real-time PCR试验检测MAPK1蛋白和mRNA相对表达水平。结果:酶切及测序结果证明成功构建pSicoR-miR-508-5p及Report-MAPK1 3'-UTR重组质粒,并通过实验证实miR-508-5p过表达明显抑制MAPK1的蛋白表达水平及mRNA相对含量(P<0.05);抑制miR-508-5p的表达,又明显上调MAPK1的蛋白表达水平及mRNA相对含量(P<0.05)。结论:成功构建pSicoR-miR-508-5p慢病毒过表达载体,证实miR-508-5p直接靶标MAPK1的表达,在转录后水平对其进行负调控,为进一步研究miRNA对细胞通路和细胞周期的调控作用奠定了基础。 展开更多

关键词 miR-508-5P 细胞通路 丝裂原活化蛋白激酶(MAPK1) 细胞外信号调节激酶(ERK)

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基于MAPK/ERK信号通路探讨冷冻消融对肺癌小鼠的作用机制 被引量：3

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作者 林事成 刘殿娜 +6 位作者 周相男 庄垚雪 梁天宇 王潇凡 胡凯文 孙静宜 李泉旺 《海南医学院学报》 CAS 2022年第6期420-424,共5页

目的:研究冷冻消融术对肺腺癌小鼠MAPK/ERK信号通路的调节作用。方法:采用Lewis小鼠肺腺癌细胞株建立C57BL/6小鼠皮下移植瘤模型,选取造模成功的10只小鼠随机分成2组,假手术组和冷冻消融组,每组5只,冷冻消融组小鼠选用双循环冷冻消融术... 目的:研究冷冻消融术对肺腺癌小鼠MAPK/ERK信号通路的调节作用。方法:采用Lewis小鼠肺腺癌细胞株建立C57BL/6小鼠皮下移植瘤模型,选取造模成功的10只小鼠随机分成2组,假手术组和冷冻消融组,每组5只,冷冻消融组小鼠选用双循环冷冻消融术,假手术组于移植瘤处切开缝合,术后14 d取肿瘤组织,通过Western blot检测冷冻消融对MAPK/ERK通路相关蛋白KRAS、RAF1、MEK1、ERK1/2、P-RAF1、P-MEK1、P-ERK1/2的影响,采用qRt-PCR进一步验证通路关键分子KRas基因表达情况。结果:与假手术组比,冷冻消融术后肿瘤组织中磷酸化蛋白P-RAF1、P-MEK1、P-ERK1/2降低(P<0.05),MAPK/ERK通路关键分子KRAS在蛋白和基因表达上均降低(P<0.05)。结论:冷冻消融可以通过下调KRAS表达,负向调控MAPK/ERK信号通路。 展开更多

关键词 冷冻消融 丝裂原活化蛋白激酶/细胞外调节蛋白激酶信号通路 肺癌 小鼠 机制

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补肾法调控小鼠卵母细胞自噬促进其成熟的分子机制研究

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作者 吴忠玉 刘雪平 +5 位作者 唐思玲 张新苗 郗红燕 何文娟 吴莉园 段彦苍 《世界中医药》 北大核心 2025年第11期1898-1905,共8页

目的:研究补肾法对体外培养小鼠卵母细胞成熟的促进作用及其对丝裂原细胞外信号调节激酶(MEK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路和自噬的影响。方法:150只雌性美国癌症研究所(ICR)小鼠随机分为5组,空白对照组和自噬抑制剂组小鼠蒸馏水灌... 目的:研究补肾法对体外培养小鼠卵母细胞成熟的促进作用及其对丝裂原细胞外信号调节激酶(MEK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路和自噬的影响。方法:150只雌性美国癌症研究所(ICR)小鼠随机分为5组,空白对照组和自噬抑制剂组小鼠蒸馏水灌胃,补肾组、补肾加自噬抑制剂组、补肾加MEK抑制剂组小鼠补肾调经Ⅱ、Ⅲ号方灌胃。剥离卵母细胞复合体(COCs)进行体外培养。定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测卵母细胞微管相关蛋白1轻链3(LC3)、螯合体1(p62)、MEK1/2、ERK1/2 mRNA表达情况;免疫荧光法检测卵母细胞LC3、p62、MEK1/2、ERK1/2、p-MEK1/2、p-ERK1/2蛋白表达情况。结果:与空白对照组比较,补肾组卵母细胞第一极体排出率升高,胞质中皮质颗粒密度降低,卵母细胞中LC3、MEK1/2、ERK1/2 mRNA表达升高,p62 mRNA和蛋白表达降低,LC3、p-MEK1/2、p-ERK1/2蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01);自噬抑制剂组卵母细胞第一极体排出率降低,胞质中皮质颗粒密度升高,卵母细胞中LC3 mRNA和蛋白表达降低,p62 mRNA和蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01)。与自噬抑制剂组比较,补肾加自噬抑制剂组卵母细胞第一极体排出率升高,胞质中皮质颗粒密度降低,LC3 mRNA和蛋白表达升高,p62 mRNA和蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01)。与补肾组比较,补肾加MEK抑制剂组卵母细胞第一极体排出率降低,胞质中皮质颗粒密度升高,卵母细胞中LC3、MEK、ERK mRNA表达降低,p62 mRNA和蛋白表达升高,LC3、p-MEK1/2、p-ERK1/2蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论:补肾调经系列方可通过激活MEK/ERK信号通路提高卵母细胞自噬水平从而促进小鼠卵母细胞成熟。 展开更多

关键词 补肾调经系列方 小鼠 卵母细胞 自噬 丝裂原细胞外信号调节激酶 细胞外信号调节激酶 信号通路 分子生物学

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急性冷热应激对大鼠脊髓和脊神经节ERK信号转导的影响 被引量：4

11

作者 王进堂 尹岭 +1 位作者 田淑君 张笑明 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期163-169,共7页

ERK是细胞内MAPK信号转导系统的重要蛋白激酶,参与多种刺激的应激反应。本实验建立冷热应激模型,应用免疫组织化学和Western blot方法,研究冷热应激刺激对大鼠脊髓和脊神经节ERK的激活作用。结果显示:(1)正常脊髓非磷酸化ERK1(pan-ERK1... ERK是细胞内MAPK信号转导系统的重要蛋白激酶,参与多种刺激的应激反应。本实验建立冷热应激模型,应用免疫组织化学和Western blot方法,研究冷热应激刺激对大鼠脊髓和脊神经节ERK的激活作用。结果显示:(1)正常脊髓非磷酸化ERK1(pan-ERK1)阳性细胞分布于RexedIII-X层,而I-II层没有免疫反应,胞浆着色,没有核膜断裂;磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)阳性细胞见于灰质Rexed各层(I-X),散在分布。免疫产物位于胞浆核周区,少见于细胞核,核膜有断裂。脊神经节p-ERK1/2免疫反应见于大、中、小型神经元,定位于细胞核;没有pan-ERK1免疫反应。(2)20min热应激后,RexedII层p-ERK1/2阳性细胞数明显增多,核周着色区增大,核膜常有断裂,脊神经节阳性细胞数没有明显变化;10min热应激和体温(38℃)应激后,脊髓和脊神经节阳性细胞数和核着色没有显著变化。(3)20min冷应激后,脊髓II层p-ERK1/2阳性细胞数轻度减少,核周着色区变窄,核膜有断裂,脊神经节阳性细胞数没有变化;10min冷应激后阳性细胞数没有明显变化。(4)Western blot显示,热应激和冷应激分别提高和降低了胸段脊髓p-ERK1/2的蛋白表达水平。本研究证实,ERK存在于脊髓灰质各层和脊神经节各型神经元,热应激提高了ERK激活水平而冷应激则相反,提示MAPK信号转导激活具有应激类型和应激强度的依赖性,参与了感觉神经元的功能调节。 展开更多

关键词 冷应激 热应激 丝裂原激活蛋白激酶(MAPK) 细胞外信号调节蛋白激酶(ERK) 大鼠

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MAPK通路抑制剂对三七皂苷单体R1减轻大鼠低氧高二氧化碳性肺血管收缩的影响 被引量：9

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作者 马迎春 陈海娥 +5 位作者 王淑君 黄林静 何金波 应磊 陈锡文 王万铁 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1764-1770,共7页

目的:探讨三七皂苷单体R1对低氧高二氧化碳性肺血管收缩(HHPV)的影响及其与MAPK信号通路的关系。方法:采用大鼠离体肺动脉环灌流模型,随机将其分为:常氧组(N组);低氧高二氧化碳组(H组);低氧高二氧化碳+DMSO组(HD组);低氧高二氧化碳+R1组... 目的:探讨三七皂苷单体R1对低氧高二氧化碳性肺血管收缩(HHPV)的影响及其与MAPK信号通路的关系。方法:采用大鼠离体肺动脉环灌流模型,随机将其分为:常氧组(N组);低氧高二氧化碳组(H组);低氧高二氧化碳+DMSO组(HD组);低氧高二氧化碳+R1组,又分为低浓度组(RL组)、中浓度组(RM组)和高浓度组(RH组);低氧高二氧化碳+SB203580组(S组);低氧高二氧化碳+U0126组(U组);低氧高二氧化碳+R1+SB203580组(RS组);低氧高二氧化碳+R1+U0126组(RU组)。观察二级肺动脉环在常氧及急性低氧高二氧化碳条件下的张力变化。在急性低氧高二氧化碳条件下,观察不同浓度R1孵育及最佳浓度R1分别与SB203580、U0126联合孵育对HHPV三期变化的影响,按照低氧高二氧化碳反应性测定方法测定血管张力变化值。结果:在急性低氧高二氧化碳条件下:(1)二级肺动脉呈现双相性收缩变化,与N组相比显著差异(P<0.05或P<0.01);(2)HD组和RL组能明显缓解HHPV的I期快速收缩,逆转II期持续收缩,RM组作用不明显,RH组增强HHPV的I期快速收缩和II期持续收缩。与HD组比较,RL和RH组有显著差异(P<0.05或P<0.01);(3)RS组和RU组收缩峰值较HD组均明显下降,II期持续收缩逆转为舒张状态。与RL组相比,RS组和RU组HHPV显著缓解(P<0.05或P<0.01)。与S组和U组相比,RS组和RU组HHPV显著缓解(P<0.05或P<0.01)。结论:低浓度(8 mg/L)三七皂苷单体R1可减轻大鼠急性HHPV,其机制可能与MAPK(p38 MAPK和ERK1/2)信号通路的参与有关。 展开更多

关键词 三七皂苷单体R1 低氧 高碳酸血症 p38丝裂原激活蛋白激酶类 细胞外信号调节激酶1 2 大鼠

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沉默GOLPH3基因表达逆转人结肠癌细胞顺铂耐药的研究 被引量：1

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作者 王春晓 邱成志 洪钟时 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期862-868,共7页

背景与目的:化疗是结肠癌的重要治疗方法之一,其方案常含有铂类药物,而化疗耐药会影响结肠癌疗效和预后,其发生机制与基因异常表达有关。高尔基磷酸化蛋白3(Golgi phosphoprotein 3,GOLPH3)是一个癌基因,在结肠癌组织中存在过表达,可促... 背景与目的:化疗是结肠癌的重要治疗方法之一,其方案常含有铂类药物,而化疗耐药会影响结肠癌疗效和预后,其发生机制与基因异常表达有关。高尔基磷酸化蛋白3(Golgi phosphoprotein 3,GOLPH3)是一个癌基因,在结肠癌组织中存在过表达,可促进结肠癌细胞的增殖,与预后不良相关。目前,GOLPH3基因的高表达与结肠癌对铂类耐药的相关性尚不明确。探讨沉默GOLPH3基因逆转人结肠癌HT29细胞对顺铂的化疗耐药效应和机制。方法:HT29细胞分为5组。①对照组:人结肠癌HT29细胞;②转染组:siRNA-GOLPH3转染HT29细胞;③实验组1:经顺铂处理的HT29细胞;④实验组2:经顺铂处理的siRNA-GOLPH3转染HT29细胞;⑤实验组3:经顺铂和细胞外调节蛋白激酶(extracellular signal-regulated protein kinases,ERK)1/2抑制剂PD98059处理的HT29细胞。四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法、平板克隆形成实验检测各组结肠癌HT29细胞增殖及克隆形成能力。蛋白质印迹法(Westernblot)检测GOLPH3、P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、ERK1/2和pERK1/2蛋白的表达。结果:经顺铂处理后,实验组1、实验组2的细胞在波长490 nm处的吸光度(D)值均显著低于对照组(P<0.05),实验组2的D490值显著低于实验组1(P<0.001);实验组1和实验组2的细胞集落数均显著低于对照组(P<0.01),实验组2的细胞集落数显著低于实验组1(P<0.001)。实验组1的P-gp、GOLPH3、pERK1/2蛋白表达量显著高于实验组2(P<0.01);实验组3的P-gp蛋白表达量较实验组1显著降低(P<0.01)。结论:沉默GOLPH3基因可通过抑制丝裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶(mitogen-activated protein kinase/extracellular signal-regulated kinase,MAPK/ERK)信号通路逆转HT29结肠癌细胞对顺铂化疗的耐药性。 展开更多

关键词 高尔基磷酸化蛋白3 结肠癌细胞 丝裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶信号通路 化疗耐药 顺铂

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组蛋白磷酸化参与学习记忆调控的分子机制 被引量：1

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作者 刘晓亚 高灿 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2016年第9期831-838,共8页

组蛋白磷酸化是组蛋白翻译后修饰诸多方式中的一种,属于表观遗传学的范畴,在DNA损伤修复、细胞分裂等过程中发挥作用.近年来研究表明,组蛋白磷酸化在学习记忆等认知功能中也发挥重要的调节作用.本文主要就组蛋白磷酸化在学习记忆中的作... 组蛋白磷酸化是组蛋白翻译后修饰诸多方式中的一种,属于表观遗传学的范畴,在DNA损伤修复、细胞分裂等过程中发挥作用.近年来研究表明,组蛋白磷酸化在学习记忆等认知功能中也发挥重要的调节作用.本文主要就组蛋白磷酸化在学习记忆中的作用,及其上游信号通路、下游转录调控机制做一综述,旨在为认知功能障碍相关疾病提供新的理论基础和治疗靶点. 展开更多

关键词 组蛋白磷酸化 表观遗传学 细胞外信号调节激酶 丝裂原应激激活蛋白激酶1 转录调控 学习记忆

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骨质疏松分子生物学研究专家共识 被引量：11

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作者 《中国骨质疏松杂志》社 《中国骨质疏松杂志》骨代谢专家组 +2 位作者 张萌萌 毛未贤 马倩倩 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期157-162,共6页

骨质疏松分子生物学研究在骨代谢分子信号通路、骨质疏松易感基因、骨质疏松相关蛋白、骨质疏松靶向治疗等方向取得了很大进展。核因子κB受体活化因子/核因子κB受体活化因子配体/骨保护素(RANK/RANKL/OPG)信号通路、核因子κB受体活... 骨质疏松分子生物学研究在骨代谢分子信号通路、骨质疏松易感基因、骨质疏松相关蛋白、骨质疏松靶向治疗等方向取得了很大进展。核因子κB受体活化因子/核因子κB受体活化因子配体/骨保护素(RANK/RANKL/OPG)信号通路、核因子κB受体活化因子(NF-κB)信号通路、丝裂原活化蛋白激酶/细胞外调节蛋白激酶(MAPK/ERK)信号通路、巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)信号通路、钙离子(Ca^(2+))信号通路、酪氨酸激酶、蛋白激酶B(Src、Akt)信号通路、蛋白激酶C(PKC)信号通路等骨代谢重要通路,维生素D受体(VDR)基因、低密度脂蛋白相关蛋白5(LRP5)基因、亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因、雌激素受体(ER)基因等易感基因,载脂蛋白E(Apo E)、Klotho蛋白(Klotho)、骨形态发生蛋白(BMP)、骨涎蛋白(BSP)等相关蛋白,以直接或间接的方式参与调控骨代谢,作用重叠相互联系,互为结果,已在本专业领域达成共识。 展开更多

关键词 核因子κB受体活化因子/核因子κB受体活化因子配体/骨保护素信号通路 核因子κB受体活化因子信号通路 丝裂原活化蛋白激酶/细胞外调节蛋白激酶信号通路 巨噬细胞集落刺激因子信号通路 钙离子信号通路 酪氨酸激酶、蛋白激酶B信号通路 蛋白激酶C信号通路 免疫球蛋白样受体信号通路 Wnt/β-连环蛋白信号通路 Hedghog信号通路 骨形态发生蛋白2/Smad信号通路 胞内磷脂酰肌醇激酶/蛋白激酶B信号通路 维生素D受体基因 低密度脂蛋白相关蛋白5基因 亚甲基四氢叶酸还原酶基因 雌激素受体基因 Ⅰ型胶原α1和Ⅰ型胶原α2基因 甲状旁腺素基因 降钙素受体基因 甲状旁腺素相关蛋白受体基因 载脂蛋白E Klotho蛋白 骨形态发生蛋白 骨涎蛋白 低密度脂蛋白受体相关蛋白5 激活蛋白-1 硬化蛋白 靶向治疗 骨质疏松 分子生物学

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MEK抑制剂U0126对大鼠睾丸移植缺血再灌注损伤的保护作用

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作者 姚晓霖 陈昭典 +2 位作者 谭付清 陆意 胡倩 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期81-88,共8页

目的:探讨大鼠睾丸移植缺血再灌注损伤与细胞外信号调节激酶(ERK)表达的关系,以及MEK抑制剂(U0126)对移植睾丸的保护作用。方法:应用潭付清技术建立大鼠原位异体睾丸移植模型,将实验动物分为7组:1正常对照组;2冷灌注对照组;3假手术对照... 目的:探讨大鼠睾丸移植缺血再灌注损伤与细胞外信号调节激酶(ERK)表达的关系,以及MEK抑制剂(U0126)对移植睾丸的保护作用。方法:应用潭付清技术建立大鼠原位异体睾丸移植模型,将实验动物分为7组:1正常对照组;2冷灌注对照组;3假手术对照组;和应用潭付清技术建立大鼠原位异体睾丸移植模型的4睾丸移植1组(移植后30min取材);5睾丸移植2组(移植后1周取材);6U0126预处理1组(U0126预处理并在移植30min后取材);7U0126预处理2组(U0126预处理并在移植1周后取材)。Western blot法测定移植睾丸ERK1、ERK2、pERK1及pERK2的表达水平,光镜和电镜下观察组织学改变,并应用放免法测定移植受体血清T、FSH、LH值。结果:各对照组间的ERK表达、组织学改变及生殖激素水平均无显著差异(P>0.05);睾丸移植1组ERK1、ERK2、pERK1及pERK2表达水平明显高于正常对照组(P<0.05);U0126预处理1组ERK1和ERK2水平较睾丸移植1组无显著差异(P>0.05),而pERK1和pERK2水平显著低于睾丸移植1组(P<0.05);U0126预处理1组的组织学改变与正常对照组类似,但明显轻于睾丸移植1组;U0126预处理2组组织学损伤轻于睾丸移植2组,生殖激素水平与正常对照组无明显差异(P>0.05),但明显高于睾丸移植2组(P<0.01)。结论:大鼠睾丸移植后植睾ERK1、ERK2、pERK1及pERK2的表达水平明显升高,导致移植睾丸组织结构损伤和生殖激素分泌功能减退;U0126可通过抑制ERK1和ERK2磷酸化,减轻移植睾丸的早期出现的缺血再灌注损伤,短期内保护其生精功能,并维持其生殖激素水平。 展开更多

关键词 睾丸移植 再灌注损伤 疾病模型 动物 细胞外信号调节MAP激酶类/代谢 丝裂原激活蛋白激酶类/代谢 缺血

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