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miR-485-5p靶向氧连接的N-乙酰氨基葡萄糖转移酶抑制前列腺癌细胞的增殖、迁移与侵袭
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作者 胡东来 赵梓岐 +3 位作者 李元 杨丽 雷艳丽 楚元奎 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期258-268,共11页
前列腺癌是男性生殖系统最常见的恶性肿瘤。尽管采用雄激素剥夺疗法等策略在一定程度上对治疗前列腺癌有效,但大多数患者最终会进展为临床尚无有效治疗手段的去势抵抗性前列腺癌。因此,寻找新的更加有效的前列腺癌治疗靶点就显得尤为关... 前列腺癌是男性生殖系统最常见的恶性肿瘤。尽管采用雄激素剥夺疗法等策略在一定程度上对治疗前列腺癌有效,但大多数患者最终会进展为临床尚无有效治疗手段的去势抵抗性前列腺癌。因此,寻找新的更加有效的前列腺癌治疗靶点就显得尤为关键。多项研究表明,微RNA(microRNAs,miRNAs)的异常表达与肿瘤的发生相关。已有报道显示,miRNA-485-5p(miR-485-5p)在多种肿瘤中发挥抑癌作用,但其在前列腺癌中的作用在较大程度上仍未可知。本研究旨在探究miR-485-5p在前列腺癌细胞增殖、迁移与侵袭的作用与机制。生物信息学预测和qRT-PCR检测发现,miR-485-5p在前列腺癌中表达下调。平板克隆形成实验、Transwell实验和划痕愈合实验证明,转染miR-485-5p模拟物显著抑制前列腺癌细胞的增殖、迁移与侵袭。生物信息学预测、双荧光素酶报告法、Western印迹和qRT-PCR检测证实,氧连接的N-乙酰氨基葡萄糖转移酶(O-linked N-acetylglucosamine transferase,OGT)是miR-485-5p的一个下游直接靶标。进一步的分析和检测显示,OGT在前列腺癌中呈高表达,转染OGT的siRNA能够显著抑制前列腺癌细胞的增殖、迁移与侵袭,同时有效逆转转染miR-485-5p抑制物所发挥的促癌作用。综上所述,miR-485-5p可以通过负向调控OGT进而抑制前列腺癌细胞的增殖、迁移与侵袭。本研究结果有助于进一步阐释miR-485-5p在前列腺癌中发生发展的作用和机制,可为寻找前列腺癌的治疗靶点提供实验依据。 展开更多
关键词 miR-485-5p 前列腺癌 氧连接的n-乙酰氨基葡萄糖转移酶 增殖 迁移
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N-乙酰氨基葡萄糖苷内切酶的功能与机制
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作者 芦鑫荣 童永亮 +9 位作者 孔维溧 邹琳 沈旦枫 吕绍衔 刘瑞杰 张绍兴 张瑜芯 侯琳琳 孙桂芹 陈力 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2024年第5期985-999,共15页
N-乙酰氨基葡萄糖苷内切酶(endo-beta-N-acetylglucosaminidase,ENGase)广泛分布于各种生物中,主要通过降解错误折叠的糖蛋白,参与细胞和生命的调控。ENGase也是糖链编辑的有效工具酶,可专一性水解游离寡糖链及糖肽或糖蛋白上核心五糖... N-乙酰氨基葡萄糖苷内切酶(endo-beta-N-acetylglucosaminidase,ENGase)广泛分布于各种生物中,主要通过降解错误折叠的糖蛋白,参与细胞和生命的调控。ENGase也是糖链编辑的有效工具酶,可专一性水解游离寡糖链及糖肽或糖蛋白上核心五糖的N-乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)之间的β-14糖苷键。其水解产物是寡糖链和一个GlcNAc,或带有一个GlcNAc的糖肽或糖蛋白。本文对ENGase的发现、分布、蛋白质结构、酶学反应及生物学功能进行阐述,为ENGase的生物学研究提供思路,为糖生物学与糖组学的应用研究奠定基础。 展开更多
关键词 n-乙酰氨基葡萄糖苷内切酶 n-糖基化 游离寡糖 糖链编辑 糖生物学
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锦鲤N-乙酰氨基葡萄糖-1-磷酸转移酶α/β亚基(GNPTAB)的生物信息学分析及其组织分布和时序表达
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作者 温思怡 韩卓然 孙敬锋 《天津农学院学报》 CAS 2024年第5期52-58,共7页
论文旨在研究锦鲤(Cyprinus carpio var. koi)GNPTAB(alpha/beta subunits of N-acetylglucosamine-1-phosphotransferase)基因的分子生物学特征及对维氏气单胞菌感染的应答规律。对锦鲤GNPTAB基因CDS区进行生物信息学分析,利用实时荧... 论文旨在研究锦鲤(Cyprinus carpio var. koi)GNPTAB(alpha/beta subunits of N-acetylglucosamine-1-phosphotransferase)基因的分子生物学特征及对维氏气单胞菌感染的应答规律。对锦鲤GNPTAB基因CDS区进行生物信息学分析,利用实时荧光定量PCR技术研究GNPTAB基因的组织分布和维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)感染机体后的时序表达规律。结果显示,GNPTAB基因CDS区片段长度为3 747 bp,推测编码1 248个氨基酸,含有4个结构域。实时荧光定量PCR分析显示,GNPTAB基因在健康锦鲤各组织中均有表达,在肝脏表达量最高,其次是肌肉、肠道、脾脏、皮肤、中肾、头肾。维氏气单胞菌人工感染锦鲤6~72 h,GNPTAB基因在肠道组织主要呈现上调表达,在肝脏、头肾、脾脏、皮肤、肌肉组织中主要呈现下调表达。维氏气单胞菌感染锦鲤后,GNPTAB基因在这些组织中出现表达差异,推测GNPTAB参与了机体的病理生理过程或免疫应答反应。 展开更多
关键词 锦鲤 生物信息学分析 组织分布 时序表达 n-乙酰氨基葡萄糖-1-磷酸转移酶α/β亚基
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微生物法合成N-乙酰氨基葡萄糖及其衍生物的研究进展 被引量:12
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作者 牛腾飞 李江华 +2 位作者 堵国成 刘龙 陈坚 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期274-279,共6页
氨基葡萄糖(glucosamine,GlcN)是葡萄糖2位碳上的羟基被氨基取代后的氨基单糖。GlcN及其衍生物N-乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)在食品、医药和化妆品领域具有广泛应用。文章综述了生物法生产N-乙酰氨基葡萄糖及其衍生物代谢工程策略的研究进展... 氨基葡萄糖(glucosamine,GlcN)是葡萄糖2位碳上的羟基被氨基取代后的氨基单糖。GlcN及其衍生物N-乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)在食品、医药和化妆品领域具有广泛应用。文章综述了生物法生产N-乙酰氨基葡萄糖及其衍生物代谢工程策略的研究进展,并对其潜在问题及应用前景进行了展望。 展开更多
关键词 n-乙酰氨基葡萄糖 n-乙酰氨基葡萄糖衍生物 氨基葡萄糖 代谢工程策略 基因工程菌
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羧甲基壳聚糖、盐酸氨基葡萄糖及N-乙酰氨基葡萄糖对大鼠胰岛细胞生长及胰岛素分泌量的影响 被引量:9
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作者 韩宝芹 刘成圣 +3 位作者 王绪敏 贺君 刘晨光 刘万顺 《中国生物医学工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期187-191,共5页
通过胶原酶消化法获得大鼠胰岛单层细胞 ,并用转板以及碘乙酸处理的方法除去其中的成纤维细胞 ,得到比较纯的胰岛内分泌细胞 ,以此为材料研究了羧甲基壳聚糖、盐酸氨基葡萄糖、N 乙酰氨基葡萄糖对大鼠胰岛细胞生长和胰岛素释放的影响。... 通过胶原酶消化法获得大鼠胰岛单层细胞 ,并用转板以及碘乙酸处理的方法除去其中的成纤维细胞 ,得到比较纯的胰岛内分泌细胞 ,以此为材料研究了羧甲基壳聚糖、盐酸氨基葡萄糖、N 乙酰氨基葡萄糖对大鼠胰岛细胞生长和胰岛素释放的影响。实验结果表明 ,羧甲基壳聚糖、盐酸氨基葡萄糖、N 乙酰氨基葡萄糖均能够促进大鼠胰岛细胞的生长。采用放射免疫法测定培养的胰岛细胞分泌胰岛素含量 ,结果表明 ,羧甲基壳聚糖具有刺激大鼠胰岛细胞胰岛素释放的作用。 展开更多
关键词 盐酸氨基葡萄糖 n-乙酰氨基葡萄糖 羧甲基壳聚糖 胰岛细胞 胰岛素
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锯缘青蟹N-乙酰氨基葡萄糖苷酶在甲醛溶液中的失活动力学研究 被引量:5
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作者 谢进金 张继平 +3 位作者 王勤 杨学敏 林建成 陈清西 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期98-101,共4页
研究甲醛对锯缘青蟹N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAGase EC 3.2.1.52)活力的影响,结果表明:随着甲醛浓度的增大,酶活力呈指数下降,导致酶活力下降50%的甲醛浓度(失活半衰期,IC50)为0.60 mol/L.酶在低浓度甲醛溶液中的失活过程显示为可逆失活.... 研究甲醛对锯缘青蟹N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAGase EC 3.2.1.52)活力的影响,结果表明:随着甲醛浓度的增大,酶活力呈指数下降,导致酶活力下降50%的甲醛浓度(失活半衰期,IC50)为0.60 mol/L.酶在低浓度甲醛溶液中的失活过程显示为可逆失活.用底物反应动力学方法考察酶在甲醛溶液中的失活动力学,测定游离酶(E)和酶-底物络合物(ES)在甲醛溶液中失活的微观速度常数,并比较游离酶(E)和酶-底物络合物(ES)的正向反应的微观失活速度常数k+0>k′+0,表明底物对酶被甲醛的失活作用有一定的保护作用.正向的失活速度常数k+0和k′+0随着甲醛浓度的增大而增大,而逆向的速度常数k-0随着甲醛浓度的增大而减小,表明随着甲醛浓度的增大,酶变性越来越快,而活力恢复越来越难. 展开更多
关键词 锯缘青蟹 n-乙酰氨基葡萄糖苷酶 甲醛 失活动力学
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N-乙酰氨基葡萄糖对乙醇致肝组织损伤的保护作用及其机制 被引量:6
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作者 赵莹 吴小兰 +3 位作者 郭林明 刘艳霞 刘蕾 刘俊康 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期456-459,I0003,共5页
目的:探讨N-乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)减轻乙醇对肝组织损伤的作用,并阐明其作用机制。方法:小鼠灌胃市售白酒建立酒精性肝病模型,同时在市售白酒中加入低、中、高剂量的GlcNAc作为干预组,记录模型组和干预组小鼠开始醉酒时间及醉酒持续时... 目的:探讨N-乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)减轻乙醇对肝组织损伤的作用,并阐明其作用机制。方法:小鼠灌胃市售白酒建立酒精性肝病模型,同时在市售白酒中加入低、中、高剂量的GlcNAc作为干预组,记录模型组和干预组小鼠开始醉酒时间及醉酒持续时间,HE染色观察模型组和干预组小鼠肠道组织和肝组织的病理损伤程度。结果:与模型组比较,GlcNAc低、中、高剂量组小鼠的开始醉酒时间逐渐延长(P<0.05或P<0.01),醉酒持续时间逐渐缩短(P<0.05或P<0.01)。组织切片观察,模型组小鼠肠道组织结构受损,腺体萎缩,管腔内可见脱落的肠黏膜细胞,肝组织多数细胞胞膜破裂,少许细胞核破碎、溶解消失,肝小叶中央静脉及其周围肝窦明显扩张,肝细胞索间充满淡红色嗜酸性均质状物,周围组织结构疏松;GlcNAc干预组小鼠肠道及肝组织损伤均有不同程度的减轻,且随着GlcNAc剂量的增加,肠道组织和肝组织损伤逐步减轻。结论:GlcNAc可不同程度减轻乙醇对肠道组织和肝组织的损伤,GlcNAc对肝脏的保护作用可能与GlcNAc稳定肠黏膜屏障作用有关。 展开更多
关键词 n-乙酰氨基葡萄糖 肠黏膜 通透性 肝细胞/病理学
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N-乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅴ过表达对人肝癌细胞粘着斑复合物介导的信号转导作用 被引量:4
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作者 王丽影 雷群英 +3 位作者 戴振宇 陈伉俪 陈惠黎 查锡良 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期240-244,共5页
为了探讨过表达N 乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅴ (GnT Ⅴ )后 772 1细胞侵袭、迁移等行为改变的机制 ,检测了GnT Ⅴ 772 1及pcDNA3 772 1两组细胞中与恶性表型密切相关的粘着斑激酶 (focalad hesionkinase ,FAK)、PTEN蛋白、蛋白激酶B(PKB... 为了探讨过表达N 乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅴ (GnT Ⅴ )后 772 1细胞侵袭、迁移等行为改变的机制 ,检测了GnT Ⅴ 772 1及pcDNA3 772 1两组细胞中与恶性表型密切相关的粘着斑激酶 (focalad hesionkinase ,FAK)、PTEN蛋白、蛋白激酶B(PKB)等重要信号分子的表达水平 ,同时测定了 2组细胞非贴壁依赖生长的能力 .利用Western印迹方法检测FAK、PTEN、PKB的表达或磷酸化水平 .利用poly hema使细胞非贴壁生长 ,2组细胞悬浮无血清培养 2 0h ,采用流式细胞仪方法检测细胞的失巢凋亡 (anoikis) .研究发现 ,转染GnT Ⅴ后的肝癌细胞的FAK表达无明显变化 ,FAK的酪氨酸磷酸化水平增高 70 %;而PTEN的表达下降了 4 9%;PKB的磷酸化增加 2 0 0 %;pcDNA3 772 1细胞已有明显凋亡 ,而转染GnT Ⅴ的 772 1细胞未发生凋亡 .结果提示 ,转染GnT Ⅴ后的肝癌细胞迁移力增强 ,可能与其FAK的磷酸化程度升高 ,激酶活力增强有关 ;而能逃逸失巢凋亡是因为PTEN的表达下降 ,PTEN蛋白的磷酸酶活性降低 ,细胞Akt PKB磷酸化水平保持在较高水平 . 展开更多
关键词 n-乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅴ 过表达 人肝癌细胞 粘着斑复合物 介导 信号转导作用
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黄芩苷对凡纳滨对虾N-乙酰氨基葡萄糖苷酶的作用机制 被引量:3
9
作者 谢晓兰 高平章 +2 位作者 董昀佳 马欣悦 李美灵 《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2013年第9期125-128,共4页
为有效防控对虾的疾病,选择更合适有效的药物并了解药物的作用机制,采用荧光光谱法考察了黄芩苷对凡纳滨对虾N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAGase)构象的影响及两者的相互作用机制。结果表明:黄芩苷与NAGase作用的荧光猝灭类型是静态猝灭,在17... 为有效防控对虾的疾病,选择更合适有效的药物并了解药物的作用机制,采用荧光光谱法考察了黄芩苷对凡纳滨对虾N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAGase)构象的影响及两者的相互作用机制。结果表明:黄芩苷与NAGase作用的荧光猝灭类型是静态猝灭,在17℃和37℃温度下,两者的结合常数KA分别是9.909×103L/mol和6.882×103L/mol,结合位点数分别是1.485和1.547,即黄芩苷与NAGase结合位点数约等于1.5;通过热力学定律判定,黄芩苷对NAGase的作用力类型为静电作用力。同步荧光测定表明,NAGase的酪氨酸残基最大发射峰位没有明显变化,而色氨酸残基发生了明显的红移,说明黄芩苷的作用使NAGase中色氨酸所处的环境发生变化,即NAGase的构象发生了变化。表明,黄芩苷可通过与NAGase相互作用达到调节凡纳滨对虾的周期性蜕壳及疾病防御的作用。 展开更多
关键词 黄芩苷 凡纳滨对虾 n-乙酰氨基葡萄糖苷酶 荧光法 作用机制
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全反式维甲酸通过内质网应激诱导N-乙酰氨基葡萄糖基转移酶V受阻的人肝癌SMMC-7721细胞凋亡 被引量:2
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作者 陆祎 徐莺莺 +1 位作者 范恺谊 申宗侯 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期285-290,共6页
目的初步探讨全反式维甲酸(all-trans-retinoic acid,ATRA)诱导N-乙酰氨基葡萄糖基转移酶V(N-acetylglucosaminyltransferase V,GnT-V)表达受阻的人肝癌SMMC-7721细胞(AsGnT-V/SMMC-7721)发生凋亡与细胞中内质网应激的关系。方法利用RT-... 目的初步探讨全反式维甲酸(all-trans-retinoic acid,ATRA)诱导N-乙酰氨基葡萄糖基转移酶V(N-acetylglucosaminyltransferase V,GnT-V)表达受阻的人肝癌SMMC-7721细胞(AsGnT-V/SMMC-7721)发生凋亡与细胞中内质网应激的关系。方法利用RT-PCR检测ATRA处理前后AsGnT-V/SMMC-7721细胞中内质网应激关键分子GRP78(glucose regulated protein78)、XBP1(X box binding protein1)等的变化,并用West-ern blot检测ATRA处理前后AsGnT-V/SMMC-7721细胞中内质网应激相关凋亡途径中的重要分子CHOP(C/EBP homologus protein)、caspase-9、caspase-12以及caspase-3的变化。结果GRP78和XBP1的变化表明经ATRA处理后AsGnT-V/SMMC-7721细胞的内质网应激加剧了,而与内质网应激相关的凋亡分子CHOP、caspase-9、caspase-12以及caspase-3都发生了激活。结论ATRA诱导AsGnT-V/SMMC-7721细胞发生的凋亡与内质网应激有关。 展开更多
关键词 n-乙酰氨基葡萄糖基转移酶V 内质网应激 凋亡
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茶叶提取物对N-乙酰氨基葡萄糖苷酶活性的调控 被引量:3
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作者 谢晓兰 吕凤娇 庄晓丹 《江苏农业科学》 北大核心 2013年第3期277-279,共3页
采用乙醇浸提法提取绿茶中的有效物质,紫外光谱特征显示,提取物主成分为二氢黄酮类物质;绿茶提取物对N-乙酰氨基葡萄糖苷酶活性具有显著的抑制作用;绿茶提取物对NAGase的作用属可逆的竞争型抑制,抑制常数KI为0.16 mg/mL。
关键词 绿茶 n-乙酰氨基葡萄糖苷酶 活力调控 抑制机理
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肝癌细胞N-乙酰氨基葡萄糖基转移酶V表达受阻与内质网应激之间的关系 被引量:2
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作者 徐莺莺 陆祎 +1 位作者 张毅 申宗侯 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2005年第2期130-134,共5页
目的:探讨N-乙酰氨基葡萄糖基转移酶V(GnTV)表达受阻与内质网应激之间的关系。方法:应用RNAi技术,构建GnTVsiRNA表达质粒,抑制GnTV的表达,用RTPCR和Westernblot检测内质网应激中的重要分子GRP78(glucoseregulatedprotein,葡萄糖调节蛋白... 目的:探讨N-乙酰氨基葡萄糖基转移酶V(GnTV)表达受阻与内质网应激之间的关系。方法:应用RNAi技术,构建GnTVsiRNA表达质粒,抑制GnTV的表达,用RTPCR和Westernblot检测内质网应激中的重要分子GRP78(glucoseregulatedprotein,葡萄糖调节蛋白)、XBP1(Xboxbindingprotein1,X盒结合蛋白1)和PERK[RNAdependentproteinserine/threoninekinase(PKR)likekinase,RNA依赖蛋白丝/苏氨酸激酶的类似激酶]的表达变化。结果:GRP78的mRNA和蛋白质表达量升高;XBP1的mRNA发生剪接,蛋白分子量从33×103(33kD)变为54×103;PERK蛋白发生磷酸化。结论:GnTV受阻可导致内质网应激。 展开更多
关键词 内质网应激 n-乙酰氨基葡萄糖基转移酶V RNAI
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N-乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅲ在大鼠实验性肝癌发病中的表达 被引量:1
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作者 张廼哲 张文智 +2 位作者 李绍连 赵会军 付琳杰 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 1997年第2期120-124,共5页
应用Wistar大鼠饲喂甲氨基偶氮苯(3′-MeDAB)造成实验性肝癌模型,与此同时饲喂刺五加多糖动态观察了癌变过程中,肝脏r-谷氨酰转肽酶(r-GT)活性,肝脏N-乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅲ(GnTⅢ)和r-GT免疫组... 应用Wistar大鼠饲喂甲氨基偶氮苯(3′-MeDAB)造成实验性肝癌模型,与此同时饲喂刺五加多糖动态观察了癌变过程中,肝脏r-谷氨酰转肽酶(r-GT)活性,肝脏N-乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅲ(GnTⅢ)和r-GT免疫组化定位、肝脏病理组织等和脏器系数等改变,结果显示:(1)r-GT活性于实验第4天即明显升高(2.3倍),至实验结束时可达对照组的40倍,GnTⅢ和r-GT免疫组化定位,在癌变前期增生结节的胞浆中已有明显表达,随病程进展其改变的强度均与病理组织学检测结果相吻合,表明GnTⅢ和r-GT在反映肝细胞癌变方面,确实是一个早期应用价值的指标。(2)刺五加多糖对实验性肝癌的形成似有一定的减缓作用。 展开更多
关键词 r-GT 实验性肝癌 转移酶 改变 表达 n-乙酰氨基葡萄糖 刺五加 饲喂 免疫组化定位 多糖
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N-乙酰氨基葡萄糖月桂酸酯的非水相催化合成及其抗菌性的初探 被引量:1
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作者 李更更 陶冠军 +2 位作者 秦昉 熊幼翎 陈洁 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期69-73,共5页
研究了非水相酶催化合成N-乙酰氨基葡萄糖月桂酸酯的反应条件,并对其抑菌性进行了探索。对影响合成N-乙酰氨基葡萄糖月桂酸酯反应的因素(DMF的含量、温度、反应时间、底物摩尔比、加酶量)进行了探讨。结果显示,N-乙酰氨基葡萄糖月桂酸... 研究了非水相酶催化合成N-乙酰氨基葡萄糖月桂酸酯的反应条件,并对其抑菌性进行了探索。对影响合成N-乙酰氨基葡萄糖月桂酸酯反应的因素(DMF的含量、温度、反应时间、底物摩尔比、加酶量)进行了探讨。结果显示,N-乙酰氨基葡萄糖月桂酸酯合成反应的最佳溶剂为叔丁醇和DMF的混合溶剂,摩尔比为叔丁醇∶DMF=7∶3,在此溶剂条件下,在酸糖摩尔比为3∶1,糖浓度为1mmol/L,反应温度为60℃,反应时间为48h,加酶量为20mg/mL时,产率达到最高。N-乙酰氨基葡萄糖月桂酸酯抑菌性的研究结果显示,该物质对革兰氏阳性菌的抑制性稍强,而对酵母基本无抑制作用。 展开更多
关键词 n-乙酰氨基葡萄糖月桂酸酯 脂肪酶催化 抑菌性
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N-乙酰氨基葡萄糖对绛红小单孢菌合成庆大霉素的影响 被引量:1
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作者 管玉霞 孙甲贤 王静 《中国科学技术大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1022-1027,共6页
研究了N-乙酰氨基葡萄糖对绛红小单孢菌产素的影响,实验探索了N-乙酰氨基葡萄糖添加工艺,在250mL摇瓶发酵过程中培养48h,60h分别添加0.05%,0.15%N-乙酰氨基葡萄糖可使庆大霉素生测效价达2 030U/mL,较对照1 228U/mL提高了65%以上(三次平... 研究了N-乙酰氨基葡萄糖对绛红小单孢菌产素的影响,实验探索了N-乙酰氨基葡萄糖添加工艺,在250mL摇瓶发酵过程中培养48h,60h分别添加0.05%,0.15%N-乙酰氨基葡萄糖可使庆大霉素生测效价达2 030U/mL,较对照1 228U/mL提高了65%以上(三次平均基本一致);5L发酵罐试产三批次发酵终结,生测效价平均为1 727U/mL(厡工艺1 097U/mL)提高了57%,效果十分明显.同时测定了发酵过程中菌体代谢各种参数的变化,证明了N-乙酰氨基葡萄糖在绛红小单孢菌生物合成中的促进作用.本方法操作简单,基本不改变原工艺,生产成本低廉,对提高庆大霉素产量效果非常明显. 展开更多
关键词 绛红色小单孢菌 庆大霉素 n-乙酰氨基葡萄糖 生测效价 代谢参数
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乳腺癌组织中N-乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅴ的活性和临床意义
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作者 胡薇 施俊义 +6 位作者 郑唯强 倪灿荣 陈颖 于观贞 盛湲 李莉 方国恩 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期767-770,共4页
目的:检测乳腺癌组织中N-乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅴ(GnT-Ⅴ)的活性并分析其临床意义。方法:应用组织芯片技术构建12×10乳腺癌组织阵列块,通过凝集素印迹法检测以白细胞植物凝集素(PHA-L)标记的GnT-Ⅴ在57例乳腺癌和12例乳腺良性病变... 目的:检测乳腺癌组织中N-乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅴ(GnT-Ⅴ)的活性并分析其临床意义。方法:应用组织芯片技术构建12×10乳腺癌组织阵列块,通过凝集素印迹法检测以白细胞植物凝集素(PHA-L)标记的GnT-Ⅴ在57例乳腺癌和12例乳腺良性病变中的活性,并探讨其与临床病理学参数间的关系。结果:乳腺癌组织中PHA-L阳性89.47%(51/57),胞质阳性,乳腺良性病变组织中PHA-L阳性8.33%(1/12),两者存在显著性差异(P<0.01)。乳腺癌中GnT-Ⅴ活性在不同病理类型、不同淋巴结转移状况、不同病理分期患者中的表达无明显差异。结论:乳腺病灶GnT-Ⅴ高活性提示病变恶性可能大,可以GnT-Ⅴ为靶点,治疗出现复发及转移三阴的乳腺癌患者。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 n-乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅴ 组织芯片
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菊花总黄酮对凡纳滨对虾N-乙酰氨基葡萄糖苷酶的效应
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作者 谢晓兰 潘小芳 +1 位作者 吕凤娇 李小琴 《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2013年第2期141-143,共3页
为菊花在凡纳滨对虾健康养殖、疾病预防和饲料添加方面的开发利用提供参考,通过乙醇回流法提取菊花总黄酮,以提取物为效应物研究其对凡纳滨对虾N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAGase)活力的影响。结果表明:菊花总黄酮提取物对NAGase活力具有明... 为菊花在凡纳滨对虾健康养殖、疾病预防和饲料添加方面的开发利用提供参考,通过乙醇回流法提取菊花总黄酮,以提取物为效应物研究其对凡纳滨对虾N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAGase)活力的影响。结果表明:菊花总黄酮提取物对NAGase活力具有明显的抑制作用,其抑制作用属可逆的竞争型抑制,抑制常数KI为0.35mg/mL。 展开更多
关键词 菊花 总黄酮提取物 凡纳滨对虾 n-乙酰氨基葡萄糖苷酶 抑制机理
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难治性癫痫细胞模型中N-乙酰氨基葡萄糖转移酶Vb和肌营养不良蛋白聚糖基因的表达变化及意义
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作者 叶洁梅 吴原 +3 位作者 黄金山 李偲俊 韦兴 刘云 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第15期1735-1738,共4页
目的探讨难治性癫痫细胞模型(Sombati癫痫细胞模型)中N-乙酰氨基葡萄糖转移酶Vb(GnT-Vb)和肌营养不良蛋白聚糖(dystroglycan)基因的表达变化及意义。方法取新生24 h内SD乳鼠,分离其双侧海马进行原代海马神经元培养。将培养至第14天的海... 目的探讨难治性癫痫细胞模型(Sombati癫痫细胞模型)中N-乙酰氨基葡萄糖转移酶Vb(GnT-Vb)和肌营养不良蛋白聚糖(dystroglycan)基因的表达变化及意义。方法取新生24 h内SD乳鼠,分离其双侧海马进行原代海马神经元培养。将培养至第14天的海马神经元分为对照组和模型组,模型组利用低镁细胞外液培养3 h制备Sombati癫痫细胞模型。通过实时定量聚合酶链式反应(real-time qPCR)方法测定对照组和模型组造模后第1天和第4天GnT-Vb和dystroglycan的基因表达水平。结果造模后第1天,模型组GnT-Vb基因表达水平低于对照组(P<0.05);而两组dystroglycan基因表达水平间无差异(P>0.05)。造模后第4天,模型组GnT-Vb、dystroglycan基因表达水平均高于对照组(P<0.05)。结论 GnT-Vb和dystroglycan基因在Sombati癫痫细胞模型中表达呈增高趋势,并呈现一定时间的动态变化;GnT-Vb和dystroglycan基因可能同时参与了难治性癫痫的形成过程。 展开更多
关键词 癫痫 n-乙酰氨基葡萄糖转移酶Vb 肌营养不良蛋白聚糖类
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抑制肝癌细胞N-乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅴ表达导致细胞未折叠蛋白质反应
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作者 张毅 张力 +1 位作者 方欢 申宗侯 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期517-521,共5页
目的探讨N乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅴ(GnTⅤ)对细胞基因表达和功能的影响。方法用WesternBlot验证GnTⅤ的反义cDNA稳转的细胞株AsGnTⅤ7721(AsGnTⅤSMMC7721)中GnTⅤ表达,用基因芯片技术比较AsGnTⅤ7721与7721(SMMC7721)细胞的基因表达差异... 目的探讨N乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅴ(GnTⅤ)对细胞基因表达和功能的影响。方法用WesternBlot验证GnTⅤ的反义cDNA稳转的细胞株AsGnTⅤ7721(AsGnTⅤSMMC7721)中GnTⅤ表达,用基因芯片技术比较AsGnTⅤ7721与7721(SMMC7721)细胞的基因表达差异,同时用RTPCR和WesternBlot检测AsGnTⅤ7721细胞中未折叠蛋白质反应信号通路关键分子Bip和XBP1的表达变化。结果基因芯片检测到的AsGnTⅤ7721细胞中的基因表达变化表明,细胞中产生未折叠蛋白质反应。同时AsGnTⅤ7721细胞中未折叠蛋白质反应信号途径中的关键分子Bip的mRNA和蛋白表达升高,XBP1mRNA被剪接。结论GnTⅤ表达受阻能导致细胞产生未折叠蛋白质反应。 展开更多
关键词 未折叠蛋白质反应 n-乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅴ 肝癌细胞
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N-乙酰氨基葡萄糖苷酶的异源表达及甘油糖苷的酶法合成
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作者 高坤鹏 毛相朝 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期87-95,共9页
从杆菌状链霉菌中克隆了一个N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(N-acetyl-glucosaminidase,NAGase)的编码基因sbnag2550,并将其在大肠杆菌BL21(DE3)中进行了异源表达。利用镍离子亲和层析得到纯酶后对SbNag2550的酶学性质进行了研究。该酶的最适温度... 从杆菌状链霉菌中克隆了一个N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(N-acetyl-glucosaminidase,NAGase)的编码基因sbnag2550,并将其在大肠杆菌BL21(DE3)中进行了异源表达。利用镍离子亲和层析得到纯酶后对SbNag2550的酶学性质进行了研究。该酶的最适温度为50℃,在45~60℃均表现出90%以上的酶活力。SbNag2550还表现出优良的热稳定性,在55℃孵育60 h仍能保留将近90%的酶活力。利用SbNag2550催化N-乙酰氨基葡萄糖(N-acetyl-glucosamine,NAG)和甘油发生逆水解反应,合成了甘油-N-乙酰氨基葡萄糖苷(glyceryl N-acetyl-glucosamine,GNAG)。在最适条件下,反应24 h时转化率达到28.20%,反应72 h时转化率为34.82%。本研究中首次通过酶法合成了GNAG,为其功能研究和应用开发奠定了基础。 展开更多
关键词 n-乙酰氨基葡萄糖苷酶 异源表达 酶学性质 逆水解反应 甘油-n-乙酰氨基葡萄糖
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