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鳜鱼生肌调节因子基因(mrf4)的克隆及其在成鱼和胚胎中的表达 被引量:2
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作者 李虹辉 许友卿 +5 位作者 刘小燕 刘知行 王开卓 褚武英 张建社 丁兆坤 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期631-635,共5页
为分析鳜鱼(Siniperca chuatsi)生肌调节因子基因(mrf4)的特征,阐明其在鳜鱼不同组织以及胚胎发育不同时期的表达规律,用反转录PCR法扩增鳜鱼mrf4的cDNA序列,并将其连入克隆载体,进行测序、分析;用荧光定量PCR检测mrf4基因在不同组织及... 为分析鳜鱼(Siniperca chuatsi)生肌调节因子基因(mrf4)的特征,阐明其在鳜鱼不同组织以及胚胎发育不同时期的表达规律,用反转录PCR法扩增鳜鱼mrf4的cDNA序列,并将其连入克隆载体,进行测序、分析;用荧光定量PCR检测mrf4基因在不同组织及胚胎发育不同阶段的表达情况。结果:克隆的鳜鱼mrf4 cDNA全长为726 bp,编码的蛋白质含241个氨基酸,具有生肌调节因子的典型的碱性螺旋–环–螺旋结构;mrf4在成体鳜鱼白肌、红肌、心脏、脑以及不同发育阶段的胚胎中均有表达,在红肌中的表达量显著高于在其他组织中的表达量(P<0.05);在胚胎发育阶段的原肠期、尾芽期、肌肉效应期,mrf4的表达量呈递增趋势,而在胚胎发育的心搏期、血液循环期、仔鱼期,mrf4的表达量呈递减趋势,肌肉效应期mrf4的表达量明显高于胚胎发育的其他阶段的mrf4表达量(P<0.05)。 展开更多
关键词 鳜鱼 生肌调节因子基因(mrf4) 克隆 表达分析
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牛MRF4基因的电子克隆与分析 被引量:11
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作者 张力鹏 张东 蔡欣 《中国牛业科学》 2007年第6期1-4,共4页
本研究以牛的MRF4基因为对象,运用生物信息学方法,对其进行了电子克隆和序列分析。结果表明,牛的MRF基因由3个外显子构成。牛MRF4全基因序列与大鼠MRF4基因在1817 bp具有77%的相似性,与小鼠MRF4基因在1661 bp具有72%的相似性。
关键词 mrf4 生肌因子 生物信息学 电子克隆
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重组牙鲆MRF4在大肠杆菌中的表达、纯化及多克隆抗体分析(英文)
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作者 徐芃 谭训刚 +2 位作者 张培军 张玉青 王波 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1169-1174,共6页
MRF4 是肌肉发生调节因子家族的一员,其对肌肉的发育有重要的调节作用. 对于养殖鱼类,生长速度是很重要的经济指标,而肌肉的发育对鱼类的生长非常重要. 制备了 MRF4 的多克隆抗体以分析在鱼类中 MRF4 的功能. 通过采用大肠杆菌表达系统... MRF4 是肌肉发生调节因子家族的一员,其对肌肉的发育有重要的调节作用. 对于养殖鱼类,生长速度是很重要的经济指标,而肌肉的发育对鱼类的生长非常重要. 制备了 MRF4 的多克隆抗体以分析在鱼类中 MRF4 的功能. 通过采用大肠杆菌表达系统及 pET-30 表达载体对牙鲆肌肉发生调节因子 MRF4 进行了体外重组表达. 所得到的 MRF4 重组蛋白为可溶性的. 在自然条件下,经金属离子螯合柱纯化后,得到了电泳纯的融合蛋白,通过免疫新西兰大白兔制备 MRF4 的多克隆抗体. 蛋白质印迹分析显示:重组蛋白能被抗组氨酸标签的抗体及所制备的多克隆抗体识别,而且这一多克隆抗体能检测到内源性的 MRF4 蛋白,从而进一步证明了抗血清中含有 MRF4 的抗体. MRF4 融合蛋白的成功表达及其多克隆抗体的制备为进一步深入研究其在牙鲆肌肉发育过程中的分子机制奠定了基础. 展开更多
关键词 牙鲆 表达 纯化 mrf4抗体
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松江鲈MRF4基因克隆与组织表达分析
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作者 张燕萍 邵芳 +3 位作者 郑红梅 卢祥云 徐建荣 顾志良 《南京师大学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期108-115,共8页
MRF4(myf6或herculin)基因属于MyoD家族成员之一,为成肌细胞分化成肌管的重要调控因子.本实验以松江鲈(Trachidermus fasciatus)肌肉总RNA为模板,采用RT-PCR结合RACE的方法,获得1 049 bp全长cDNA序列,包含了1个含有720个核苷酸的开放性... MRF4(myf6或herculin)基因属于MyoD家族成员之一,为成肌细胞分化成肌管的重要调控因子.本实验以松江鲈(Trachidermus fasciatus)肌肉总RNA为模板,采用RT-PCR结合RACE的方法,获得1 049 bp全长cDNA序列,包含了1个含有720个核苷酸的开放性阅读框(ORF),共编码239个氨基酸.其编码区序列与石斑鱼同源性最高、为91.81%,其次是东方红鳍鲀、为83.40%,与哺乳类、鸟类的同源性在65%左右,与爪蟾同源性最低仅为59.65%.预测松江鲈MRF4蛋白具有保守的HLH结构域,bHLH结构域形成剪刀状α-螺旋二聚体.用荧光定量PCR方法检测发现,MRF4基因的mRNA在松江鲈6种组织中均有表达,但其在肌肉组织中表达量极显著高于其他组织,提示其在肌肉的生长发育过程中起着重要作用. 展开更多
关键词 松江鲈 mrf4 RACE 组织表达分析
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运动与生肌调节因子研究进展 被引量:5
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作者 苏艳红 王瑞元 周越 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期770-772,共3页
关键词 生肌调节因子 MYOGENIN 肌球蛋白轻链 运动 肌球蛋白重链 MYOD mrf4 调节基因
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NRF4转染对横纹肌肉瘤RD细胞分化及生肌调节因子表达的影响
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作者 李光辉 王东林 +2 位作者 陈正堂 李德志 万瑛 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第10期876-877,F004,共3页
为观察MRF4转染对人横纹肌肉瘤RD细胞分化及生肌调节因子MyoD表达的影响,利用脂质体法将MRF4转染人横纹肌肉瘤RD细胞,原位杂交检测MRF4、MyoD mRNA的表达,观察细胞形态、生长速度变化,并采用免疫细胞化学方法检测横纹肌肌球蛋白重链及... 为观察MRF4转染对人横纹肌肉瘤RD细胞分化及生肌调节因子MyoD表达的影响,利用脂质体法将MRF4转染人横纹肌肉瘤RD细胞,原位杂交检测MRF4、MyoD mRNA的表达,观察细胞形态、生长速度变化,并采用免疫细胞化学方法检测横纹肌肌球蛋白重链及肌动蛋白α-actin表达。结果显示,转染后RD细胞形态向高分化方向变化,生长受抑;MRF4、MyoD表达明显增加;细胞肌球蛋白重链和肌动蛋白α-actin表达显著增强。提示MRF具有促进RD细胞分化的作用,并可激活另一生肌调节因子MyoD的表达。 展开更多
关键词 细胞分化 mrf4 横纹肌肉瘤 肌形成调节因子 原位杂交 免疫细胞化学方法
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樱桃谷鸭胚胎期胸肌发育特征的研究 被引量:2
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作者 王志秀 杨春彦 +7 位作者 梁文双 宋倩倩 严丹 田慧月 白皓 江勇 常国斌 陈国宏 《中国家禽》 北大核心 2021年第11期103-107,共5页
为探究樱桃谷鸭胚胎期胸肌的发育规律以及调控基因与胸肌发育的关系,选取100只均重90~100 g的樱桃谷鸭种蛋进行同条件孵化,测定12~27日胚龄(E12~E27)的胚重和胸肌重并计算胸肌率;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法分析樱桃谷鸭E13~E27... 为探究樱桃谷鸭胚胎期胸肌的发育规律以及调控基因与胸肌发育的关系,选取100只均重90~100 g的樱桃谷鸭种蛋进行同条件孵化,测定12~27日胚龄(E12~E27)的胚重和胸肌重并计算胸肌率;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法分析樱桃谷鸭E13~E27胸肌中MyoG、MRF4和MSTN的表达量。结果显示:樱桃谷鸭胚重随着胚龄的增加而增加;E20前胸肌发育与鸭胚重发育趋于一致,胸肌率随胚重的增加而增加;然而,E20后胸肌的发育以肌细胞融合为主,胸肌增长几乎处于停滞状态,胸肌率开始呈现下降趋势。MyoG、MRF4在胸肌中的相对表达量随胚龄的增加均呈现出先升高再降低的趋势,分别在E19、E20处达到最高点;MSTN在E16~E27的表达趋势与MyoG、MRF4相反,呈现出先降低再升高的趋势,在E19处出现最低点。结果表明:E18~E20是樱桃谷鸭胸肌增长最快点,是胚胎期樱桃谷鸭胸肌发育的关键过渡点。 展开更多
关键词 樱桃谷鸭 胚胎 胸肌 MYOG mrf4 MSTN
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PAX3-FKHR转染对横纹肌肉瘤RD细胞分化及MyoD表达的影响 被引量:1
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作者 李光辉 王东林 +2 位作者 陈正堂 李德志 万瑛 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2003年第1期13-16,共4页
目的 :研究融合基因PAX3 FKHR对胚胎型横纹肌肉瘤细胞分化及MyoD表达的影响。方法 :构建PAX3 FKHR的真核表达质粒 ,采用脂质体法将MyoD、PAX3 FKHR先后转染人胚胎型横纹肌肉瘤RD细胞 ,观察转染前后细胞生物学特性、形态学改变以及肌分... 目的 :研究融合基因PAX3 FKHR对胚胎型横纹肌肉瘤细胞分化及MyoD表达的影响。方法 :构建PAX3 FKHR的真核表达质粒 ,采用脂质体法将MyoD、PAX3 FKHR先后转染人胚胎型横纹肌肉瘤RD细胞 ,观察转染前后细胞生物学特性、形态学改变以及肌分化标志蛋白MHC、α actin的表达。结果 :RD细胞在转染PAX3 FKHR后细胞的生长速度、生长方式及MHC、α actin的表达均无显著的变化 ;在表达MyoD的RD细胞中转入PAX3 FKHR后 ,细胞MyoD表达无明显变化 ,但细胞形态向低分化方向变化 ,细胞肌球蛋白重链和肌动蛋白α actin表达显著下降。结论 :融合基因PAX3 FKHR转染对培养RD细胞的生物学特性及分化无明显影响 ,并不影响MyoD的表达 。 展开更多
关键词 MYOD 横纹肌肉瘤 转染 分化
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