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一株受四环素及其衍生物诱导表达的Tet-on鼻咽癌细胞系 被引量:23
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作者 廖伟 易红 +2 位作者 顾焕华 苏涛 曹亚 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第1期132-135,共4页
Tet-on基因表达系统是新近发展的一种真核生物体外表达系统.该系统利用四环素及其衍生物对所感兴趣基因进行诱导表达.这种诱导表达具有严密、高效、可控性强、表达泄露小等优点.对于研究一些致死基因及毒性强的基因在细胞或体... Tet-on基因表达系统是新近发展的一种真核生物体外表达系统.该系统利用四环素及其衍生物对所感兴趣基因进行诱导表达.这种诱导表达具有严密、高效、可控性强、表达泄露小等优点.对于研究一些致死基因及毒性强的基因在细胞或体内的表达提供了极好的工具.利用Tet-on基因表达系统,构建了一株鼻咽癌细胞系,该细胞系的建立为进一步研究一些鼻咽癌发病相关基因,如EB病毒潜伏膜蛋白基因、瘤基因、抑瘤基因等与鼻咽癌的相关性,提供了理想的细胞模型. 展开更多
关键词 四环素 诱导表达 鼻咽癌细胞系
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健择对人鼻咽癌细胞系放射增敏机制的实验研究 被引量:6
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作者 李坚 王仁生 甘浪舸 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2006年第13期734-737,共4页
目的:观察单纯放射及放射联合健择(gemcitabine)对人鼻咽癌细胞系(CNE-2)细胞周期改变的影响,探讨健择对CNE-2细胞的放射增敏机制。方法:用流式细胞仪技术分析60Coγ射线单纯照射和照射联合健择对CNE-2细胞周期的影响。结果:单纯照射导... 目的:观察单纯放射及放射联合健择(gemcitabine)对人鼻咽癌细胞系(CNE-2)细胞周期改变的影响,探讨健择对CNE-2细胞的放射增敏机制。方法:用流式细胞仪技术分析60Coγ射线单纯照射和照射联合健择对CNE-2细胞周期的影响。结果:单纯照射导致CNE-2细胞G1期阻滞,照射剂量<6Gy时与照射剂量呈正相关,>6Gy时G1期阻滞基本稳定在一定水平。5mg/L、10mg/L、15mg/L健择与CNE-2细胞共育24h后照射2Gy,以S期阻滞为主;随着单次照射剂量的提高,以G1阻滞明显。CNE-2细胞与健择15mg/L共育12h后照射2Gy,开始时以G1阻滞为主,但24h后以S期阻滞明显,且至少维持36h以上。结论:健择对CNE-2细胞有中度放射增敏作用;其机制可能与健择引起S期或G1期阻滞有关。 展开更多
关键词 健择 辐射增敏药 细胞周期 流式细胞 鼻咽癌细胞系
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uPA,uPAR,PAI-1在具有不同转移率的鼻咽癌细胞系中的表达 被引量:5
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作者 潘国庆 姚运红 +1 位作者 陆元志 唐慰萍 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2002年第4期310-313,共4页
目的 :研究尿激酶型纤溶酶原激活剂 (urokinase typeplasminogenactivator ,uPA)和它的受体 (uPAR)、抑制剂 (PAI- 1)在具有不同转移率的鼻咽癌细胞系CNE 2Z(2 0 %淋巴道转移 )、CNE 2Z H5 (40 %淋巴道转移 )、CNE 2Z H5 9(90 %淋巴道... 目的 :研究尿激酶型纤溶酶原激活剂 (urokinase typeplasminogenactivator ,uPA)和它的受体 (uPAR)、抑制剂 (PAI- 1)在具有不同转移率的鼻咽癌细胞系CNE 2Z(2 0 %淋巴道转移 )、CNE 2Z H5 (40 %淋巴道转移 )、CNE 2Z H5 9(90 %淋巴道转移 )中的表达。方法 :应用逆转录聚合酶反应 (RT PCR)方法检测uPA ,uPAR ,PAI 1在基因转录水平的表达。结果 :uPA ,uPARmRNA在CNE 2Z H5 9中表达最高 ,在CNE 2Z中表达最低 ;PAI 1mRNA在CNE 2Z H5 9中无表达 ,在CNE 2Z ,CNE 2Z H5有表达 ,但差异无显著性。结论 :uPA、uPAR可能促进鼻咽癌细胞侵袭、转移 ,PAI 1可能起抑制作用。 展开更多
关键词 尿激酶 鼻咽癌细胞系 肿瘤侵袭 肿瘤转移 尿激酶型纤溶酶原激活剂 尿激酶型纤溶酶原激活剂受体 纤溶酶原激活剂抑制剂
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鼻咽癌细胞5-8F通过TLR4介导的信号通路对革兰氏阴性细菌脂多糖的反应性研究 被引量:2
4
作者 杨一新 杨云波 +6 位作者 周鸣 周后德 向波 彭淑平 李小玲 沈守荣 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第2期138-145,共8页
鼻咽上皮细胞无时无刻不暴露和接触到共生微生物与病原微生物,机体依靠天然防御系统和抗原识别的适应性免疫反应系统来进行自我保护.慢性感染的重要毒力因素被认为是革兰氏阴性细菌细胞壁的主要成分脂多糖(LPS),对LPS的识别与信号传导... 鼻咽上皮细胞无时无刻不暴露和接触到共生微生物与病原微生物,机体依靠天然防御系统和抗原识别的适应性免疫反应系统来进行自我保护.慢性感染的重要毒力因素被认为是革兰氏阴性细菌细胞壁的主要成分脂多糖(LPS),对LPS的识别与信号传导是宿主细胞抵御革兰氏阴性细菌的关键.通过流式细胞术、RT-PCR等研究发现,5-8F细胞可与LPS相结合并产生反应,且其受LPS调节的机制是由于5-8F细胞中存在LPS受体分子如CD14、TLR4与MD2等的表达.同时应用免疫荧光、蛋白质印迹、荧光素酶报告系统等研究发现,5-8F细胞可受到LPS的诱导而活化TLR4的下游信号传导通路.5-8F细胞在LPS的诱导下,磷酸化NFκBp65的表达增加,并且使NFκBp65活化迁移至核内.研究还发现,LPS增加TNF-α全长启动子活性,同时LPS可使5-8F细胞中TNF-α的分泌增加,从而介导炎性因子的释放.因此,5-8F细胞可通过与LPS受体分子:CD14、TLR4及MD2与LPS相结合并反应,从而激活TLR4介导的NFκB信号通路,使炎性因子的释放增加,导致鼻咽部的炎症反应诱发鼻咽癌. 展开更多
关键词 脂多糖 鼻咽癌细胞系 TOLL受体 信号传导通路
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转酮酶样蛋白1在人类鼻咽癌细胞生长增殖中的作用
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作者 张松 杨菊红 +1 位作者 孔维佳 孙宇 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期505-509,共5页
目的:探讨转酮酶样蛋白1(TKTL1)在体外培养的人类鼻咽癌细胞生长增殖中的作用。方法:构建针对TKTL1 mRNA的干扰RNA质粒,转染人类鼻咽癌细胞(CNE细胞系);检测转染前后CNE细胞中转酮酶活性的变化;实时定量RT-PCR检测转染前后CNE细胞转酮... 目的:探讨转酮酶样蛋白1(TKTL1)在体外培养的人类鼻咽癌细胞生长增殖中的作用。方法:构建针对TKTL1 mRNA的干扰RNA质粒,转染人类鼻咽癌细胞(CNE细胞系);检测转染前后CNE细胞中转酮酶活性的变化;实时定量RT-PCR检测转染前后CNE细胞转酮酶基因家族(TKT、TKTL1、TKTL2)mRNA表达水平的变化;通过流式细胞术和MTT实验检测转染前后CNE细胞增殖和细胞周期的改变。结果:实验组CNE细胞中转酮酶活性(携带有pEGFP-C1-U6/TKTL1)明显低于质粒对照组(携带有pEGFP-C1-U6/UC)和空白对照组(未转染细胞);实时定量RT-PCR结果显示转染前后CNE细胞中TKT和TKTL2 mRNA的表达水平均无显著差异。然而,实验组细胞中TKTL1的表达水平明显低于对照组,且实验组CNE细胞增殖明显被抑制,癌细胞被阻滞在G0/G1期。结论:转酮酶蛋白TKTL1在人类鼻咽癌细胞的生长增殖中起重要作用,TKTL1可能成为肿瘤治疗研究的新靶点。 展开更多
关键词 转酮酶样蛋白1 鼻咽肿瘤 鼻咽癌细胞系 细胞周期
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SAPK/JNK信号通路在鼻咽癌放疗群集耐受中的作用研究 被引量:3
6
作者 栾巍 黄海辉 梁后杰 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第21期2177-2179,共3页
目的用CNE-2Z多细胞球(multicellular spheroids,MCSs)模拟实体瘤,探讨SAPK/JNK信号通路在鼻咽癌放疗群集耐受中的作用。方法采用liquid overlay技术进行MCSs培养,Western blot法检测X射线照射后信号通路活性变化,SAPK/JNK信号通路特异... 目的用CNE-2Z多细胞球(multicellular spheroids,MCSs)模拟实体瘤,探讨SAPK/JNK信号通路在鼻咽癌放疗群集耐受中的作用。方法采用liquid overlay技术进行MCSs培养,Western blot法检测X射线照射后信号通路活性变化,SAPK/JNK信号通路特异阻断剂sp-600125作用前后Caspase-3蛋白表达变化;TUNEL法检测sp-600125作用前后、X射线照射后MCSs凋亡率变化。结果X射线照射后MCSs中SAPK/JNK信号通路表现动态磷酸化过程,其中2h磷酸化水平最高;预先阻断信号通路X射线照射后,细胞凋亡率上调(P<0.05),caspase-3蛋白表达增高(P<0.05)。结论SAPK/JNK信号通路短暂激活可能传递生存信号而在鼻咽癌放疗群集耐受中发挥作用,特异性阻断其信号传递上调MCSs凋亡率,这可能与促进caspase-3蛋白表达有关。 展开更多
关键词 鼻咽癌细胞系CNE-2Z 细胞凋亡 SAPK/JNK信号通道 sp-600125
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胰岛素和表皮生长因子刺激引起的蛋白激酶B磷酸化与PTEN突变的关系 被引量:3
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作者 钟海兰 胡先福 林建华 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1065-1068,1072,共5页
目的研究第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)突变对人鼻咽癌细胞系CNE-1中蛋白激酶B(Akt)的磷酸化的影响。方法 CNE-1细胞用含100 m L/L胎牛血清RPMI1640培养基培养,并分别转染野生型PTEN(wt PTEN)质粒、突变型PTEN C124... 目的研究第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)突变对人鼻咽癌细胞系CNE-1中蛋白激酶B(Akt)的磷酸化的影响。方法 CNE-1细胞用含100 m L/L胎牛血清RPMI1640培养基培养,并分别转染野生型PTEN(wt PTEN)质粒、突变型PTEN C124S质粒和突变型PTEN G129E质粒。各组细胞加刺激前用无血清RPMI1640培养基饥饿过夜,用0.15 IU/m L胰岛素或0.3μg/m L重组人表皮生长因子(rh EGF)刺激,Western blot法检测Akt的磷酸化水平。结果胰岛素和rh EGF刺激均可导致CNE-1细胞Akt信号激活;wt PTEN可抑制胰岛素或rh EGF刺激引起的Akt信号激活;PTEN C124S突变体可激活胰岛素刺激引起的Akt信号,但不可激活rh EGF刺激引起的Akt信号;PTEN G129E突变体抑制胰岛素刺激引起的Akt信号激活。结论 wt PTEN可抑制胰岛素或rh EGF刺激引起的Akt信号激活,但PTEN C124S和G129E突变体不能一致性激活Akt信号表达。这表明PTEN基因突变可能与Akt信号表达无关。 展开更多
关键词 第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN) 基因突变 蛋白激酶B(Akt)磷酸化 胰岛素 重组人表皮生长因子(rhEGF) CNE-1人鼻咽癌细胞系
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