重组人白细胞介素35(rhIL-35)通过抑制NF-κB通路减轻川崎病的冠状动脉内皮细胞损害 被引量：4

1

作者 田正 周忠 +3 位作者 杨艳娟 李洁滢 胡琳 焦蓉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期880-885,共6页

目的探究重组人白细胞介素35(rhIL-35)对川崎病(KD)冠脉损害的保护作用及其作用机制。方法采用体外培养的人冠状动脉内皮细胞(HCAEC)建立KD血管模型,利用肿瘤坏死因子α(TNF-α)及KD患者血清刺激HCAEC以模拟KD的局部炎性病变。将细胞分... 目的探究重组人白细胞介素35(rhIL-35)对川崎病(KD)冠脉损害的保护作用及其作用机制。方法采用体外培养的人冠状动脉内皮细胞(HCAEC)建立KD血管模型,利用肿瘤坏死因子α(TNF-α)及KD患者血清刺激HCAEC以模拟KD的局部炎性病变。将细胞分为对照组、TNF-α及KD血清刺激组、(25、50)ng/mL rhIL-35处理组,CCK-8法检测细胞增殖活性,实时定量PCR检测HCAEC的IL-1β、IL-6、IL-17A、闭锁小带蛋白1(ZO-1)mRNA水平,ELISA检测KD患儿血浆IL-35水平及HCAEC上清液IL-1β、IL-6、IL-17A含量,Western blot法检测核因子κB p65(NF-κB p65)及ZO-1的表达。结果TNF-α及KD血清处理抑制HCAEC增殖,rhIL-35则明显逆转以上作用;rhIL-35预保护细胞后可明显下调IL-1β、IL-6及IL-17A的表达;与TNF-α及KD血清刺激组相比,rhIL-35预处理细胞后可明显增高ZO-1蛋白的表达,抑制NF-κB p65的高表达。结论rhIL-35能够通过抑制NF-κB通路减轻KD的冠状动脉内皮细胞损害。 展开更多

关键词 川崎病(KD) 重组人白细胞介素35(rhil-35) 冠状动脉内皮细胞(HCAEC) 炎性细胞因子 核因子κB(NF-κB)

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重组人白细胞介素-35的真核表达及生物活性 被引量：1

2

作者 马娟 谢良志 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期618-622,共5页

目的构建重组人白细胞介素-35[rhIL-35-IgG1(Fc)]蛋白的真核表达载体并表达纯化该蛋白,研究IL-35与其受体糖蛋白130(gp130)的结合作用。方法构建IL-35真核表达载体pSTEP2-IL35-LFc,转染到HEK293T细胞中,采用亲和色谱分离纯化获得重组IL... 目的构建重组人白细胞介素-35[rhIL-35-IgG1(Fc)]蛋白的真核表达载体并表达纯化该蛋白,研究IL-35与其受体糖蛋白130(gp130)的结合作用。方法构建IL-35真核表达载体pSTEP2-IL35-LFc,转染到HEK293T细胞中,采用亲和色谱分离纯化获得重组IL-35蛋白,SDS-PAGE及Western blot法鉴定蛋白表达,ELISA法检测IL-35-Fc与其受体链gp130的结合作用,并在M1小鼠白血病细胞上研究IL-35对gp130的生物学作用。结果获得高纯度的人IL-35-Fc重组蛋白,ELISA法检测结果发现IL-35-Fc与其受体链gp130具有结合作用,并且IL-35在M1小鼠白血病细胞上对gp130具有中和作用。结论成功制备了具有生物活性的人IL-35-IgG1(Fc)重组蛋白,发现IL-35能够与其受体链gp130的结合,在M1小鼠白血病细胞上对gp130也具有中和作用。 展开更多

关键词 重组人白细胞介素-35 糖蛋白130 M1小鼠白血病细胞

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白细胞介素35的在肿瘤发展中的作用 被引量：11

3

作者 黄崇标 田野 +4 位作者 崔焱 徐杰 辛亮 杨雪玲 齐大亮 《中国肺癌杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期230-235,共6页

白细胞介素(interleukin,IL)-35是IL-12细胞因子家族的新成员,自2007年发现以来IL-35很快成为了相关领域的研究热点。与IL-12家族的其他成员(IL-12、IL-23以及IL-27)相类似,IL-35也是由异源性的α链及β链组成,即p35和EBI3蛋白组成。目... 白细胞介素(interleukin,IL)-35是IL-12细胞因子家族的新成员,自2007年发现以来IL-35很快成为了相关领域的研究热点。与IL-12家族的其他成员(IL-12、IL-23以及IL-27)相类似,IL-35也是由异源性的α链及β链组成,即p35和EBI3蛋白组成。目前的研究发现IL-35的功能主要表现在两个方面,一方面是IL-35在体内某些炎性疾病及自身免疫性疾病患者体内异常表达,IL-35在这些疾病的发生发展过程中起到重要作用。另一方面,IL-35在某些肿瘤中也表达异常,在肿瘤的发展过程中起到了重要作用。本文对IL-35的结构及信号通路进行了阐述,并总结了IL-35在肿瘤发展中的作用的最新研究进展。 展开更多

关键词 白细胞介素 IL-35 肿瘤 肿瘤免疫

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慢性自发性荨麻疹患者血清白细胞介素-35和转化生长因子β1的水平检测 被引量：7

4

作者 王亚婷 石春蕊 +3 位作者 师蓓 武奕 熊潇 周兰霞 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期256-257,共2页

慢性自发性荨麻疹（chronic spontaneous urticaria，csu）是一种皮肤科常见的变态反应性疾病，特点为病程〉6周的风团或血管神经性水肿，严重影响患者生活质量。目前本病发病机制尚不明确，越来越多的研究倾向于其发病与免疫功能异常... 慢性自发性荨麻疹（chronic spontaneous urticaria，csu）是一种皮肤科常见的变态反应性疾病，特点为病程〉6周的风团或血管神经性水肿，严重影响患者生活质量。目前本病发病机制尚不明确，越来越多的研究倾向于其发病与免疫功能异常有关。 展开更多

关键词 荨麻疹 慢性 自发性 白细胞介素-35 转化生长因子Β1

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乙型慢加亚急性肝衰竭患者血清白细胞介素-35的表达及其临床意义 被引量：8

5

作者 陈丽 罗二平 +1 位作者 黄小平 甘建和 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2013年第17期2800-2802,共3页

目的:探讨乙型慢加亚急性肝衰竭(HBV-SACLF)患者血清中白细胞介素-35(IL-35)的动态表达及其临床意义。方法:酶联免疫吸附法分别检测28例HBV-SACLF患者(HBV-SACLF组)、28例慢性乙型肝炎患者(慢性乙型肝炎组)以及28例正常人(正常组)血清中... 目的:探讨乙型慢加亚急性肝衰竭(HBV-SACLF)患者血清中白细胞介素-35(IL-35)的动态表达及其临床意义。方法:酶联免疫吸附法分别检测28例HBV-SACLF患者(HBV-SACLF组)、28例慢性乙型肝炎患者(慢性乙型肝炎组)以及28例正常人(正常组)血清中IL-35水平。观察HBV-SACLF患者病程早、中、晚期血清IL-35变化;IL-35与HBV-DNA及ALT、AST进行多重回归分析;比较存活组与非存活组血清IL-35表达水平的差异。结果:IL-35浓度(pg/mL)在正常组、慢性乙型肝炎组和HBV-SACLF组血清中的表达分别为178.26±52.32、426.83±236.29、1 087.00±436.26,HBV-SACLF组明显高于慢性乙型肝炎组和正常组,3组间比较差异有统计学意义(F=9.95,P<0.01);HBV-SACLF早、中、晚期血清IL-35浓度(pg/mL)分别为1 539.00±285.72,1 082.94±333.90,636.80±169.00,3期比较差异有统计学意义(F=3.81,P=0.018);存活组与非存活组IL-35浓度(pg/mL)分别为1 472.94±308.02,1 544.36±274.84,差异无统计学意义(t′=0.46,P=0.65);HBV-SACLF早期IL-35与同期HBV-DNA及ALT具有相关性(P值分别为0.01、0.02),而中、晚期无明显相关性(P>0.05)。结论:HBV-SACLF患者血清IL-35明显升高,且在疾病早期升高,中晚期降低;其早期IL-35与HBV-DNA及ALT呈正相关,IL-35的升高可能部分反映患者免疫功能状态和预后。 展开更多

关键词 肝炎病毒 乙型 白细胞介素35 慢加亚急性肝衰竭

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支气管哮喘患者血清白细胞介素35水平变化及意义 被引量：21

6

作者 张耀源 张孔 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期398-401,共4页

【目的】探讨支气管哮喘患者血清白细胞介素35水平变化及意义。【方法】将45例受试者分为支气管哮喘组(25例)和健康对照组(20例),测定支气管哮喘组患者未控制、部分控制后1周、控制后1周的血清白细胞介素35(IL-35)水平及各项主要肺功能... 【目的】探讨支气管哮喘患者血清白细胞介素35水平变化及意义。【方法】将45例受试者分为支气管哮喘组(25例)和健康对照组(20例),测定支气管哮喘组患者未控制、部分控制后1周、控制后1周的血清白细胞介素35(IL-35)水平及各项主要肺功能指标[包括第一秒用力呼气容积(FEV1)与预计值的比值、用力肺活量(FVC)与预计值的比值、FEV1与FVC的比值、呼气峰流量(PEF)与预计值的比值],以及未控制阶段的FEV1下降20%的吸入药物累积浓度(PC20-FEV1),测定健康对照组血清IL-35水平,分析哮喘患者与健康人血清IL-35水平的差异及其与哮喘控制水平、气道反应性的相关性。【结果】支气管哮喘组未控制、部分控制以及控制阶段血清IL-35浓度(pg/mL)分别为141±45、260±84、366±94,健康对照组血清IL-35浓度(pg/mL)为396±120,支气管哮喘组未控制、部分控制阶段血清IL-35水平均低于健康对照组(P值均小于0.001),支气管哮喘组控制阶段与健康对照组血清IL-35水平差异无统计学意义(P=0.36)。血清IL-35水平在未控制阶段低于部分控制阶段(95%置信区间为-163.10～-73.65,P<0.001),部分控制阶段低于控制阶段(95%置信区间为-151.41～-61.97,P<0.001)。哮喘患者血清IL-35水平与哮喘控制水平呈正相关,与PC20-FEV1无相关性。【结论】健康人与哮喘患者血清中均存在IL-35表达,血清IL-35水平可能可以作为哮喘控制水平评估的免疫学参考指标。 展开更多

关键词 支气管哮喘 白细胞介素35 FEV1下降20%的吸入药物累积浓度

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B细胞活化因子的双向性:促进调节性T细胞分泌白细胞介素-35 被引量：4

7

作者 张亚敏 王瑞云 +2 位作者 李军 陶娟 涂亚庭 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2017年第5期640-644,共5页

目的研究B细胞活化因子(B cell activation factor of the tumor necrosis factor family,BAFF)对调节性T细胞(Tregs)分泌抑制性细胞因子白细胞介素-35(interleukin-35,IL-35)的影响,验证系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,S... 目的研究B细胞活化因子(B cell activation factor of the tumor necrosis factor family,BAFF)对调节性T细胞(Tregs)分泌抑制性细胞因子白细胞介素-35(interleukin-35,IL-35)的影响,验证系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)中BAFF对免疫反应的双向调节机制。方法磁珠分选狼疮模型鼠Tregs,经BAFF刺激后采用qRT-PCR及流式细胞术检测其分泌IL-35浓度。比较正常对照鼠、狼疮模型鼠及经尾静脉注射抗BAFF蛋白后狼疮模型鼠脾脏Tregs频率及分泌IL-35情况。结果BAFF能够有效促进Tregs分泌IL-35。相对于正常对照鼠,狼疮模型鼠(血清中BAFF升高)脾脏Tregs分泌较高浓度的IL-35,而中和其循环中BAFF后,Tregs分泌IL-35减少。结论在SLE发病机制中,BAFF不仅是重要的致病因素,还能够通过促进Tregs细胞分泌IL-35发挥负向免疫调节效应。 展开更多

关键词 系统性红斑狼疮 B细胞活化因子 调节性T细胞 白细胞介素-35

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KIH结构在人白介素-35体外重组表达中的应用 被引量：1

8

作者 张凯跃 李宗艳 +4 位作者 曹瑞晴 孟琳琳 胡祥维 顾玉超 王建刚 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期857-866,共10页

白细胞介素35(interleukin-35,IL-35)是非常重要的免疫抑制性细胞因子,被证实在多种疾病的免疫应答中发挥作用。本研究通过克隆人IL-35基因编码序列,构建单亚基表达载体pXC17.4-p35和pcDNA3.1(+)-EBI3,共转染CHO-K1细胞体外表达IL-35,... 白细胞介素35(interleukin-35,IL-35)是非常重要的免疫抑制性细胞因子,被证实在多种疾病的免疫应答中发挥作用。本研究通过克隆人IL-35基因编码序列,构建单亚基表达载体pXC17.4-p35和pcDNA3.1(+)-EBI3,共转染CHO-K1细胞体外表达IL-35,经检测未发现p35亚基与EBI3亚基的结合。Knobs-into-Holes(KIH)可解决异源抗体重链错配的问题,因此,在原始序列的基础上融合KIH结构构建表达载体pXC17.4-p35-Fch和pcDNA3.1(+)-EBI3-Fck来表达KIH-IL-35重组融合蛋白质;同时交换2个亚基的表达载体来验证不同表达载体对KIH-IL-35表达量的影响。经过多种蛋白质检测方法的分析,显示KIH-IL-35结构的正确表达率明显提高。大量表达后对KIH-IL-35进行亲和纯化,采用ELISA法检测纯化后的KIH-IL-35与糖蛋白130(gp130)分子的结合活性,结果表明,KIH-IL-35与gp130的结合呈浓度依赖性。采用细胞活性检测方法检测KIH-IL-35与M1细胞的间接活性,结果表明,M1细胞的抑制率与KIH-IL-35的浓度呈剂量依赖性增长。此外,本研究成功建立了一种利用激活的人外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)对IL-35进行活性检测的方法,结果显示,激活的PBMCs与KIH-IL-35的浓度呈剂量依赖性增长。总之,本研究利用KIH-IL-35模型,提高了重组人IL-35的正确表达率,并验证其在体外的高活性,为IL-35的研究及类似异源二聚体细胞因子的重组表达提供新思路。 展开更多

关键词 人白细胞介素-35 Knobs-into-Holes 融合蛋白质 多聚体

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白细胞介素35和白细胞介素37与结直肠癌临床病理学特征及预后的相关性研究 被引量：10

9

作者 陈飞儿 张凤 +4 位作者 谈振宇 夏庆华 包士三 陶琨 董志恒 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期456-461,共6页

背景与目的:结直肠癌(colorectal cancer,CRC)为世界第三常见恶性肿瘤,近年来研究者认为白细胞介素(interleukin,IL)-35和(或)IL-37与CRC的发展有关,但其作用机制尚未阐明。探究IL-35和IL-37在CRC发展中的作用及其可能的机制,分析IL-35... 背景与目的:结直肠癌(colorectal cancer,CRC)为世界第三常见恶性肿瘤,近年来研究者认为白细胞介素(interleukin,IL)-35和(或)IL-37与CRC的发展有关,但其作用机制尚未阐明。探究IL-35和IL-37在CRC发展中的作用及其可能的机制,分析IL-35和IL-37与CRC患者预后的相关性。方法:收集2013年—2017年在上海交通大学医学院附属同仁医院接受治疗的191例CRC患者手术病理蜡块的肿瘤组织,与其匹配的非癌组织是来源于同一患者的肠癌手术切缘蜡块组织。应用免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)染色法将CRC患者的癌组织与非癌组织染色,并运用Image-Pro Plus将IHC染色阳性部分定量分析,结合随访结果,探讨癌组织与非癌组织中IL-35和IL-37的表达水平与CRC临床病理学特征及预后的相关性。结果:与非癌组织相比,CRC组织中IL-35的表达量减少了50%(P<0.0001)。CRC组织中IL-37的表达量与非癌组织相比增加了40%(P=0.012)。多因素生存分析显示,癌组织中IL-35(HR=0.39;95%CI:0.16~0.97;P=0.04)的表达水平是CRC患者术后生存的独立预测指标。结论:IL-35和IL-37蛋白的表达水平可能与CRC的发展有关,IL-35的表达水平可能是CRC患者术后生存的独立预测指标。 展开更多

关键词 结直肠癌 白细胞介素35 白细胞介素37 预后 多因素生存分析

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湿疹患者外周血信号传导及转录激活因子4和白细胞介素-35mRNA水平变化与临床相关性研究 被引量：4

10

作者 冯爽 陈宏 +1 位作者 潘小刚 门剑龙 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期110-112,共3页

目前认为以辅助性T细胞（Th）2细胞占优势地位的Th1和Th2细胞亚群失衡是湿疹发病的重要机制，大量Th2型细胞因子介导了以嗜酸性粒细胞浸润为主的Ⅳ型变态反应。但新近研究发现，湿疹患者体内存在另外2种Th细胞的失衡状态，

关键词 湿疹 信号传导及转录激活因子4 白细胞介素-35

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白细胞介素-35及其与口腔疾病的关系 被引量：2

11

作者 刘芳 蔡扬 《国际口腔医学杂志》 CAS CSCD 2018年第6期716-722,共7页

白细胞介素(IL)-35是近年发现的主要由调节性T(Treg)细胞分泌的一种新型抑制性细胞因子,属于IL-12家族新成员。IL-35不仅可诱导一种新型Treg细胞或调节性B细胞的产生,而且还可抑制辅助性T(Th)17细胞和Th1细胞介导的炎性反应,从而在自身... 白细胞介素(IL)-35是近年发现的主要由调节性T(Treg)细胞分泌的一种新型抑制性细胞因子,属于IL-12家族新成员。IL-35不仅可诱导一种新型Treg细胞或调节性B细胞的产生,而且还可抑制辅助性T(Th)17细胞和Th1细胞介导的炎性反应,从而在自身免疫性疾病、炎症性疾病及肿瘤等疾病的发生发展中起着重要的免疫调节作用。目前,IL-35已成为细胞因子研究的热点,为自身免疫性疾病、炎症性疾病等疾病的生物治疗提供了新方向。本文拟从IL-35的结构、生物学功能及其在口腔疾病中的研究进展作简要的综述。 展开更多

关键词 白细胞介素-35 调节性T细胞 免疫抑制

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口腔扁平苔藓组织中白细胞介素35受体的表达及意义 被引量：1

12

作者 张玲艳 王荣 +1 位作者 柳汀 蔡扬 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期513-518,共6页

目的通过检测白细胞介素35受体(IL-35R)两亚基糖蛋白130(gp130)、白细胞介素12受体β2(IL-12Rβ2)及信号转导和转录激活因子(STAT)1、STAT4在口腔扁平苔藓(OLP)组织中的表达,探讨IL-35R在OLP病损形成和发展中的作用及意义。方法收集41例... 目的通过检测白细胞介素35受体(IL-35R)两亚基糖蛋白130(gp130)、白细胞介素12受体β2(IL-12Rβ2)及信号转导和转录激活因子(STAT)1、STAT4在口腔扁平苔藓(OLP)组织中的表达,探讨IL-35R在OLP病损形成和发展中的作用及意义。方法收集41例OLP组织(OLP组)和15例正常口腔黏膜组织(对照组)为研究对象。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测组织中gp130、IL-12Rβ2、STAT1、STAT4 mRNA的表达水平,免疫组织化学(IHC)检测组织中gp130、IL-12Rβ2蛋白的表达及分布,并分析gp130、IL-12Rβ2蛋白表达与OLP临床特征的关系。结果1)OLP组gp130、IL-12Rβ2、STAT1、STAT4 mRNA的相对表达量均高于对照组(P<0.05)。2)OLP组gp130、IL-12Rβ2蛋白的阳性表达率均高于对照组(P<0.05),且gp130、IL-12Rβ2蛋白在OLP组织中的表达呈正相关(r=0.984,P<0.001)。3)糜烂型OLP组织gp130、IL-12Rβ2蛋白的阳性表达率高于非糜烂型(P<0.05)。结论IL-35R及STAT在OLP组织中表达上调,且IL-35R的表达与OLP的临床分型有关,提示IL-35R可能在OLP病损形成及发展中起重要作用。 展开更多

关键词 口腔扁平苔藓 白细胞介素35 白细胞介素35受体 糖蛋白130 白细胞介素12受体β2 信号转导和转录激活因子1 信号转导和转录激活因子4

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白细胞介素-35在非感染性葡萄膜炎中的研究进展

13

作者 杨淑芳 由彩云 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2022年第3期249-252,共4页

白细胞介素(IL)-35是IL^(-1)2家族的新成员。它在多种自身免疫性疾病、器官移植和肿瘤中发挥作用,是一类具有重要治疗前景的抗炎细胞因子。许多研究显示IL-35参与多种非感染性葡萄膜炎的发生、发展。本文就IL-35的结构与来源、生物学功... 白细胞介素(IL)-35是IL^(-1)2家族的新成员。它在多种自身免疫性疾病、器官移植和肿瘤中发挥作用,是一类具有重要治疗前景的抗炎细胞因子。许多研究显示IL-35参与多种非感染性葡萄膜炎的发生、发展。本文就IL-35的结构与来源、生物学功能及IL-35在自身免疫性葡萄膜炎中的研究进展进行综述。 展开更多

关键词 白细胞介素-35 葡萄膜炎 调节性T细胞 调节性B细胞

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重组白细胞介素4受体(IL-4R)噬菌体单链抗体库构建及筛选 被引量：6

14

作者 杨光勇 郭海涛 +5 位作者 刘茜明 何光志 田维毅 蔡琨 王平 王文佳 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期829-833,共5页

目的应用噬菌体展示技术构建重组白细胞介素4受体（IL-4R）噬菌体单链抗体（sc Fv）库,并从抗体库中进行筛选。方法利用重组人IL-4R（rh IL-4R）蛋白免疫BALB/c小鼠,提取总RNA,反转录PCR扩增V_H和V_L基因,经重叠延伸PCR扩增出带有限制... 目的应用噬菌体展示技术构建重组白细胞介素4受体（IL-4R）噬菌体单链抗体（sc Fv）库,并从抗体库中进行筛选。方法利用重组人IL-4R（rh IL-4R）蛋白免疫BALB/c小鼠,提取总RNA,反转录PCR扩增V_H和V_L基因,经重叠延伸PCR扩增出带有限制性酶切位点的sc Fv,用限制性内切酶SfiⅠ和NotⅠ分别双酶切sc Fv和p CANTAB5E载体,利用T4连接酶进行连接,转入感受态细菌E.coli TG1中制备转化子;在培养基中培养得到噬菌体单链抗体库;通过3轮富集和筛选,选择抗原亲和力最强的克隆进行测序分析。结果经过3轮筛选,构建了库容为2×10~8的rh IL-4R单链抗体库,测序结果显示抗rh IL-4R蛋白sc Fv基因全长741 bp,编码247个氨基酸。通过VBASE2数据库分析,抗rh IL-4R蛋白的V_H和V_L基因序列都存在3个互补决定区和4个骨架区。结论成功构建了抗rh IL-4R蛋白噬菌体sc Fv库。 展开更多

关键词 重组人白细胞介素4(rhil-4R) 噬菌体展示技术 单链抗体

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双向电泳分析重组人白细胞介素-1β对人牙髓细胞的影响

15

作者 郭世梁 张颖丽 +1 位作者 张影杰 柏祥娥 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1029-1031,1035,共4页

目的:观察rhIL-1β对培养的HDPCs产生蛋白质的影响,揭示rhIL-1β与牙髓炎的关系。方法:在HD-PCs的培养液中加入rhIL-1β,用2-DE分离HDPCs全蛋白,获得对照组和诱导组HDPCs蛋白质图谱,ImageMaster2DElit 5.0软件分析确认差异表达蛋白。结... 目的:观察rhIL-1β对培养的HDPCs产生蛋白质的影响,揭示rhIL-1β与牙髓炎的关系。方法:在HD-PCs的培养液中加入rhIL-1β,用2-DE分离HDPCs全蛋白,获得对照组和诱导组HDPCs蛋白质图谱,ImageMaster2DElit 5.0软件分析确认差异表达蛋白。结果:比较对照组和诱导组蛋白质图谱,发现了39个蛋白质点差异明显。其中15个蛋白质点在诱导组高表达,新增13个蛋白质点,7个蛋白质点低表达,4个蛋白质点仅在对照组中表达。结论:HDPCs对rhIL-1β的应答反应是一个非常复杂的过程,多种蛋白质分子涉及其中。 展开更多

关键词 重组人白细胞介素-1β(rhil-1β) 双向电泳(2-DE) 蛋白质组 人牙髓细胞(HDPCs)

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重组人白细胞介素-13在大肠杆菌中的表达纯化及鉴定 被引量：1

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作者 林辉煌 刘春凤 +2 位作者 尹凤红 丁玉梅 陈清西 《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期836-841,共6页

采用大肠杆菌(Escherichia coli)作为宿主,通过300L发酵罐进行中试发酵表达重组人白细胞介素-13(rhIL-13)融合蛋白;经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导,离心发酵液收集菌体,菌体经溶解、变性、稀释复性及亲和层析捕获,获得融合蛋... 采用大肠杆菌(Escherichia coli)作为宿主,通过300L发酵罐进行中试发酵表达重组人白细胞介素-13(rhIL-13)融合蛋白;经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导,离心发酵液收集菌体,菌体经溶解、变性、稀释复性及亲和层析捕获,获得融合蛋白;融合蛋白经肠激酶酶切后,再经亲和层析分离和分子筛精细纯化等步骤,获得高纯度rhIL-13原液.每升发酵液可获得高纯度的rhIL-13原液约30mg.通过本纯化工艺获得的rhIL-13原液经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法检测,纯度大于98.75%;经高效液相色谱分子排阻(HPLC-SEC)法检测,纯度为100%;质谱(MS)法测定rhIL-13分子质量为12 348u,与理论值基本一致;采用噻唑蓝(MTT)法进行比活性检测,比活大于8.0×106 IU/mg;采用HPLC-SEC法和MS法对rhIL-13二硫键数目和位置进行分析,结果显示二硫键数目和位置与理论一致.此操作方法可获得高纯度、高活性的rhIL-13原液,并且操作简单,易于放大,可实现工业化规模生产. 展开更多

关键词 重组人白细胞介素-13(rhil-13) 表达 纯化 鉴定

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重组人白细胞介素-4对人肺腺癌细胞SPC-A_1/TAX化疗增敏研究

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作者 林安华 李羲 《中国肺癌杂志》 CAS 2005年第3期233-235,共3页

关键词 人肺腺癌细胞SPC-A1 白细胞介素-4 化疗增敏 细胞多药耐药性 TAX 重组人 rhil-4 化疗药物 癌细胞分化 上升趋势 综合治疗 化疗失败 逆转方法 产生机制 肿瘤细胞 肺癌 死亡率 发病率 可替代 针对性 敏感性 MDR 严重 临床

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重组人白介素10对离体大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞增殖的影响 被引量：5

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作者 欧阳平 刘煜 +4 位作者 赖文岩 彭立胜 杨红 吴文言 徐安龙 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第11期828-830,共3页

目的 观察重组人白介素１０（ｒｈＩＬ－１０）对血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖的影响。方法 离体培养大鼠胸主动脉 ＶＳＭＣ并分别接受不同浓度ｒｈＩＬ－１０、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）、血小板源性生长因子（ＰＤＧＦ－ＢＢ）... 目的 观察重组人白介素１０（ｒｈＩＬ－１０）对血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖的影响。方法 离体培养大鼠胸主动脉 ＶＳＭＣ并分别接受不同浓度ｒｈＩＬ－１０、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）、血小板源性生长因子（ＰＤＧＦ－ＢＢ）的刺激，采用ＭＴＳ／ＰＥＳ 法确定ＶＳＭＣ的增殖状态并与对照组比较。结果　与对照组相比，ＴＮＦ－α和ＰＤＧＦ－ＢＢ均对ＶＳＭＣ增殖具有明显的刺 激作用（Ｐ＜０．０５）。单独应用ｒｈＩＬ－１０对血管平滑肌细胞生长没有影响。在ＴＮＦ－α和ＰＤＧＦ－ＢＢ分别刺激下，ｒｈＩＬ－１０均可 抑制ＶＳＭＣ的生长（Ｐ<０．０５）。结论　ｒｈＩＬ－１０可抑制细胞因子和生长因子诱导的ＶＳＭＣ增殖。 展开更多

关键词 血管平滑细胞 重组白细胞介素-10 胸主动脉 肿瘤坏死因子 VSMC 细胞增殖 rhil-10

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非小细胞肺癌组织及细胞中IL-35的表达 被引量：6

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作者 张玉 张城城 +1 位作者 董利菊 沙泉 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第7期1082-1087,共6页

目的探讨白细胞介素35(IL-35)在非小细胞肺癌组织和细胞中的表达及其对肺癌细胞生物学功能的影响。方法免疫组化法检测IL-35在74例非小细胞肺癌组织中的表达,分析IL-35表达与非小细胞肺癌临床病理特征的相关性;RT-PCR法检测IL-35在不同... 目的探讨白细胞介素35(IL-35)在非小细胞肺癌组织和细胞中的表达及其对肺癌细胞生物学功能的影响。方法免疫组化法检测IL-35在74例非小细胞肺癌组织中的表达,分析IL-35表达与非小细胞肺癌临床病理特征的相关性;RT-PCR法检测IL-35在不同肺癌细胞中的表达水平;CCK-8法、划痕试验和Transwell实验分别检测IL-35对细胞增殖和迁移侵袭能力的影响。结果免疫组化和RT-PCR检测结果表明,IL-35在非小细胞肺癌组织的表达水平明显上调(P<0.05),在肺癌细胞系中均有不同程度表达。IL-35表达与肿瘤分期、淋巴结转移成正相关(P<0.05),与患者性别、年龄、组织类型、分化程度及远端转移等均无相关性(P>0.05)。外源性IL-35的刺激作用促进肺癌细胞的增殖和迁移侵袭。结论 IL-35在非小细胞肺癌组织和细胞中高表达,并促进肺癌细胞的增殖与迁移侵袭,可以作为临床肺癌基因治疗的靶向指标。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 白细胞介素-35 增殖 迁移 侵袭

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小鼠白细胞介素12基因的钓取及其在COS-7细胞中的表达 被引量：2

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作者 杨英 刘晓冬 刘树铮 《白求恩医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期12-13,共2页

目的 :钓取小鼠白细胞介素 12 (m IL- 12 ) p4 0和 p35c DNA并检测其在哺乳动物细胞 (COS- 7)中的表达。方法 :RT- PCR法从小鼠腹腔巨噬细胞 m RNA中扩增 p4 0和 p35亚基 ;脂质体Lipofect AMINE将质粒 p NG- m IL- 12转染至 COS- 7细胞 ... 目的 :钓取小鼠白细胞介素 12 (m IL- 12 ) p4 0和 p35c DNA并检测其在哺乳动物细胞 (COS- 7)中的表达。方法 :RT- PCR法从小鼠腹腔巨噬细胞 m RNA中扩增 p4 0和 p35亚基 ;脂质体Lipofect AMINE将质粒 p NG- m IL- 12转染至 COS- 7细胞 ,ELISA法检测不同时间 m IL- 12表达水平。结果 :1RT- PCR法扩增出特异的 p4 0和 p35亚基 ,p35亚基克隆至 p KS载体测序 ;2 EL ISA法检测转染 p NG- m IL- 12的 COS- 7细胞上清有 m IL- 12分泌。结论 :为进一步研究 m IL- 12的免疫调节机制及其抑瘤作用奠定了基础。 展开更多

关键词 小鼠 白细胞介素12 基因表达 COS-7细胞 p40亚基 p35亚基

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