MYCN过表达诱导的视网膜肿瘤发展过程中的细胞特征及关键蛋白

1

作者 盖鑫冉 徐佳爱 +3 位作者 车虹昱 王祥 杨春华 齐东来 《眼科新进展》 北大核心 2025年第3期190-195,共6页

目的 研究MYCN过表达诱导的视网膜肿瘤发展过程中的细胞特征,寻找在此过程中发挥重要作用的关键蛋白。方法 选择在体外培养1年和2年的T-MYCN细胞(分别为T-MYCN Y1细胞和T-MYCN Y2细胞),组成后续实验的T-MYCN Y1组和T-MYCN Y2组细胞。WER... 目的 研究MYCN过表达诱导的视网膜肿瘤发展过程中的细胞特征,寻找在此过程中发挥重要作用的关键蛋白。方法 选择在体外培养1年和2年的T-MYCN细胞(分别为T-MYCN Y1细胞和T-MYCN Y2细胞),组成后续实验的T-MYCN Y1组和T-MYCN Y2组细胞。WERI-Rb-1细胞系从中国科学院上海细胞库获得,作为成熟RB对照组(WERI-Rb-1组);未经处理的人正常视网膜组织作为对照组。将细胞按照每孔1×10~4个细胞接种于24孔板,在显微镜下观察细胞形态并采集图像;在接种后第4、8、12天进行细胞计数。使用免疫荧光染色检测各组细胞增殖标记物Ki67和视锥细胞标记物L/M opsin的表达;采用qRT-PCR检测各组细胞中MYCN、CCNB1、CDK1、SYK和RXRγ的表达情况;通过蛋白质组学分析各组细胞间蛋白表达谱差异并筛选关键调控基因;采用慢病毒敲低OTX2表达后检测各组细胞的生长增殖能力。结果 生长曲线显示,在体外培养第12天,T-MYCN Y1组、T-MYCN Y2组和WERI-Rb-1组细胞数量分别为(59.17±4.01)×10~4个、(85.14±4.54)×10~4个、(100.73±1.99)×10~4个(均为P<0.05)。与对照组相比,T-MYCN Y1组、T-MYCN Y2组和WERI-Rb-1组Ki67和L/M opsin阳性细胞率均增加(均为P<0.001)。与对照组相比,T-MYCN Y1组、T-MYCN Y2组和WERI-Rb-1组细胞的MYCN mRNA相对表达量均显著升高(均为P<0.001),CCNB1和CDK1 mRNA相对表达量亦均升高(均为P<0.01)。与对照组相比,T-MYCN Y1组细胞的SYK mRNA相对表达量无明显变化(P>0.05),RXRγ mRNA相对表达量显著升高(P<0.05);T-MYCN Y2组和WERI-Rb-1组细胞的SYK、RXRγ mRNA相对表达量均显著升高(均为P<0.05)。GO富集分析显示这些差异蛋白富集到蛋白质复合体组装和线粒体等通路;KEGG富集分析显示这些差异蛋白富集到碳代谢、代谢途径和脂肪酸降解等通路。蛋白质组学和Western blot分析结果均显示,OTX2在WERI-Rb-1组细胞中表达水平最高,其次为T-MYCN Y2组细胞,T-MYCN Y1组细胞最低。qRT-PCR结果显示,在T-MYCN Y1组、T-MYCN Y2组和WERI-Rb-1组细胞中,与空载对照组相比,OTX2敲低组的OTX2 mRNA相对表达量均下降(均为P<0.05);细胞生长曲线显示,在三组细胞中敲低OTX2后,细胞的生长增殖能力均下降,差异均有统计学意义(均为P<0.001)。结论 MYCN过表达诱导的视网膜肿瘤发展过程中,细胞逐渐呈现出与WERI-Rb-1细胞类似的视网膜母细胞瘤特征;OTX2在MYCN扩增或高表达RB的生长增殖中发挥重要作用,靶向OTX2可能成为治疗RB新的研究方向。 展开更多

关键词 视网膜母细胞瘤 MYCN WERI-Rb-1 蛋白质组学 OTX2

在线阅读 下载PDF 职称材料

细胞周期素D1、视网膜母细胞瘤样蛋白2及微小染色体维持蛋白7在肝细胞癌中的表达及对预后的意义 被引量：14

2

作者 刘娟 殷飞 姚树坤 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期304-309,共6页

目的:研究细胞周期素D1(cyclin D1)、视网膜母细胞瘤样蛋白2(RBL2/p130)及微小染色体维持蛋白7(MCM7)在肝细胞癌(以下简称肝癌)中的表达及对预后诊断的意义。方法:用免疫组织化学法检测44例肝癌组织、26例癌旁硬化肝组织及18例正常肝组... 目的:研究细胞周期素D1(cyclin D1)、视网膜母细胞瘤样蛋白2(RBL2/p130)及微小染色体维持蛋白7(MCM7)在肝细胞癌(以下简称肝癌)中的表达及对预后诊断的意义。方法:用免疫组织化学法检测44例肝癌组织、26例癌旁硬化肝组织及18例正常肝组织中cyclin D1、RBL2/p130及MCM7的表达情况,并分析其与肝癌患者临床参数间的关系。结果:肝癌组织中cyclin D1和MCM7的阳性表达率分别是68.2%和72.7%,显著高于正常肝组织及癌旁硬化肝组织(P<0.01);RBL2/p130的阳性表达率为34.1%,显著低于正常肝组织及癌旁硬化肝组织(P<0.01),MCM7与cyclin D1的表达呈正相关(r=0.349,P<0.05),与RBL2/p130的表达呈负相关(r=-0.421,P<0.01);cyclin D1与RBL2/p130的表达呈负相关(r=-0.435,P<0.01)。Cyclin D1及MCM7的表达与肿瘤包膜的完整性、肿瘤分化程度及肝癌临床分期有关,RBL2/p130的表达与有无门脉癌栓、肿瘤分化程度及肝癌临床分期有关(P<0.05)。MCM7还与肿瘤大小及甲胎蛋白(AFP)值的大小有关。多因素分析显示肿瘤大小、MCM7及cyclin D1与肝癌预后相关(P<0.05)。MCM7及cyclin D1阳性表达的患者、RBL2/p130阴性表达的患者预后差(P<0.05)。结论:Cyclin D1、RBL2/p130和MCM7的异常表达在肝癌形成过程中发挥了重要作用。监测其在肝癌中的表达情况将有助于判断肝癌患者的预后。 展开更多

关键词 细胞周期蛋白D1 视网膜母细胞瘤样蛋白质 微小染色体维持蛋白质 肝肿瘤

在线阅读 下载PDF 职称材料

视网膜母细胞瘤Bcl-2和Bax基因蛋白质表达 被引量：7

3

作者 张小猛 庞利民 张晓光 《白求恩医科大学学报》 CSCD 2000年第2期144-146,共3页

目的 :研究凋亡及凋亡调控基因 Bcl- 2 /Bax和视网膜母细胞瘤 ( Retinoblastoma,RB)的发生、发展及退化的关系。方法 :收集 36例 RB标本 ,对其分别进行 Bcl- 2和 Bax基因的蛋白质免疫组织化学染色。对其表达情况和染色强度进行观察。结... 目的 :研究凋亡及凋亡调控基因 Bcl- 2 /Bax和视网膜母细胞瘤 ( Retinoblastoma,RB)的发生、发展及退化的关系。方法 :收集 36例 RB标本 ,对其分别进行 Bcl- 2和 Bax基因的蛋白质免疫组织化学染色。对其表达情况和染色强度进行观察。结果 :1 Bcl- 2在分化型 RB中表达比较好 ;2 Bax在未分化型和分化型中表达都比较好。结论 :1分化型和未分化型 RB中都有 Bcl- 2 /Bax基因蛋白表达 ;2随 RB恶性度的增加 ,Bcl- 2的表达逐渐减弱 ;Bax的表达无明显改变。 3分化型 RB受 Bcl- 2和 Bax基因共同控制 ;未分化型 RB受 Bax基因调控 ,Bcl- 2基因发挥很少的作用。 展开更多

关键词 凋亡 视网膜母细胞瘤 BCL-2 BAX 免疫组织化学

在线阅读 下载PDF 职称材料

靶向E2F1的shRNA抑制眼内视网膜母细胞瘤生长 被引量：3

4

作者 王丰 马家烈 +3 位作者 李惠明 陈霞芳 王煜非 黄倩 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第5期587-591,共5页

视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,RB)中由于Rb基因缺失或失活,转录调控因子E2F1始终处于活化状态,细胞不断增殖,E2F1活性增加是恶性肿瘤的普遍现象.根据人E2F1基因设计了3段shRNA,构建RNA干扰表达载体pSilencer-shE2F1,瞬时转染人视网膜... 视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,RB)中由于Rb基因缺失或失活,转录调控因子E2F1始终处于活化状态,细胞不断增殖,E2F1活性增加是恶性肿瘤的普遍现象.根据人E2F1基因设计了3段shRNA,构建RNA干扰表达载体pSilencer-shE2F1,瞬时转染人视网膜母细胞瘤细胞株HXO-Rb-44和人肝癌细胞株SMMC-7721,通过荧光定量PCR检测E2F1表达水平的变化,PI(碘化丙锭)染色检测细胞周期各时相细胞数量以检测其对细胞周期的影响.根据筛选出的有效shRNA序列构建腺病毒载体并包装出腺病毒Ad-shE2F1,在裸鼠前房模型中,体外按50moi的感染系数感染稳定表达绿色荧光蛋白(GFP)的人视网膜母细胞瘤细胞株48h后,收集细胞,将2×105细胞注射到裸鼠眼前房内,连续观察眼内肿瘤细胞生长情况并拍照记录.通过转染肿瘤细胞株检测E2F1转录水平,筛选到1个能明显抑制肿瘤细胞内E2F1表达的shRNA序列,并使细胞周期中S期细胞数减少.经Ad-shE2F1感染的RB肿瘤细胞与对照相比较,其在裸鼠眼前房内肿瘤生长减缓.结果说明,有效抑制hE2F1表达的shRNA具有抑制体内外人视网膜母细胞瘤生长的作用. 展开更多

关键词 E2F1 SHRNA 视网膜母细胞瘤

在线阅读 下载PDF 职称材料

Janus激酶抑制剂AG490对人视网膜母细胞瘤HXO-RB_(44)细胞JAK2/STAT3信号通路的影响 被引量：7

5

作者 许蓓 陈翔 +1 位作者 谭佳 许雪亮 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1061-1067,共7页

目的:研究Janus激酶(Janus kinase,JAK)抑制剂AG490对人视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞株体外抗增殖及细胞周期的作用,探讨其对JAK2/信号转导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)信号通路蛋白表达... 目的:研究Janus激酶(Janus kinase,JAK)抑制剂AG490对人视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞株体外抗增殖及细胞周期的作用,探讨其对JAK2/信号转导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)信号通路蛋白表达的影响。方法:本实验分为实验组和对照组,实验组又根据不同浓度(6.25,12.50,25.00,50.00,100.00,200.00μmol/L)的AG490处理分为6个不同浓度的实验组。采用细胞的活力测定法检测各组细胞增殖状态。应用流式细胞术对各组中细胞凋亡及周期进行分析。采用Western印迹检测处理后STAT3,p-STAT3及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白的表达。结果:AG490处理HXO-RB44细胞株48 h后,随着药物浓度的增加,细胞抑制率增加,细胞存活率下降(均P<0.05)。除6.25μmol/L实验组外,其余5组与对照组两两比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。流式细胞术显示:随着AG490药物浓度的增加,细胞凋亡率呈逐渐增高趋势,与对照组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。其中,50.00和100.00μmol/L实验组G1期细胞比例显著增多,相应地处于S期的细胞比例减少。Western印迹显示:随着AG490药物浓度的增加,STAT3和p-STAT3蛋白的表达量逐渐下降,与对照组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05);VEGF表达量逐渐下降,与对照组相比,6.25和12.50μmol/L实验组的VEGF差异均无统计学意义(均P>0.05),其余各实验组差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:JAK抑制剂AG490能抑制HXORB44细胞株生长及增殖,促进细胞的凋亡增加;并通过阻断JAK2/STAT3信号通路而下调STAT3,p-STAT3和VEGF的表达,从而抑制HXO-RB44细胞株的增殖,加速其凋亡。 展开更多

关键词 视网膜母细胞瘤 Janus激酶2/信号转导与转录激活因子3信号通路 血管内皮生长因子 分子靶向治疗

在线阅读 下载PDF 职称材料

杜仲绿原酸通过PI3K/AKT/Nrf-2通路增强视网膜母细胞瘤细胞系HXO-Rb44放射敏感性 被引量：4

6

作者 刘铭 王俊 +1 位作者 李丽 成仲夏 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2019年第6期644-649,655,共7页

目的探究杜仲绿原酸(CGA)通过调控PI3K/AKT/Nrf-2通路,对视网膜母细胞瘤细胞系HXO-Rb44放射敏感性的增强作用。方法通过不同浓度的CGA处理HXO-Rb44细胞,检测IC10,作为后续实验中CGA浓度。将细胞分为Ctrl、Radio、CGA、Radio+CGA组,Radi... 目的探究杜仲绿原酸(CGA)通过调控PI3K/AKT/Nrf-2通路,对视网膜母细胞瘤细胞系HXO-Rb44放射敏感性的增强作用。方法通过不同浓度的CGA处理HXO-Rb44细胞,检测IC10,作为后续实验中CGA浓度。将细胞分为Ctrl、Radio、CGA、Radio+CGA组,Radio组给予4 MV X射线照射24 h,CGA组使用CGA处理24 h,Radio+CGA组在CGA处理24 h后再给予4 MV X射线照射24 h,流式细胞术检测细胞周期与细胞凋亡,蛋白质印迹检测Ki67、依赖还原型辅酶I/II醌氧化还原酶I(NQO1)、活化型半胱天冬酶(cl-caspase-3)、硫氧还蛋白还原酶1(TrxR1)、活化磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、p-AKT、核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白表达。进一步通过PI3K激活剂740Y-P处理细胞,检测细胞周期、凋亡、增殖和相关蛋白表达、PI3K/AKT/Nrf2通路蛋白表达。结果随着CGA浓度的增高,细胞的相对存活率降低,药物毒性呈浓度依赖性,IC10为81.59μmol/L。与Ctrl组相比,Radio和CGA组G2/M期细胞比例显著升高,细胞凋亡比率显著升高(P<0.01);与Radio组相比,Radio+CGA组G2/M期细胞比例和细胞凋亡比率进一步显著升高(P<0.01)。同时在蛋白水平上,与Ctrl组相比,Radio和CGA组Ki67、NQO1、TrxR1、p-PI3K、Nrf2蛋白表达及p-AKT/AKT比率显著降低(P<0.01);放射和CGA联合作用进一步降低以上各指标(P<0.01)。此外,PI3K激活剂可逆转放射对细胞周期、增殖、凋亡以及PI3K/AKT/Nrf2通路的作用,CGA可恢复放射引起的上述各指标的变化(P<0.01)。结论CGA可增强HXO-Rb44细胞的放射敏感性,其作用机制与抑制PI3K/AKT/Nrf2通路相关。 展开更多

关键词 杜仲绿原酸 放射敏感性 视网膜母细胞瘤 PI3K/AKT/Nrf2通路

在线阅读 下载PDF 职称材料

MMP-2和MMP-9在视网膜母细胞瘤中的表达及意义 被引量：11

7

作者 龙华 姜发纲 《眼科新进展》 CAS 2006年第12期908-910,共3页

目的探讨视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,Rb)中基质金属蛋白酶-2(matrixmetalloproteinase-2,MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的表达及其与临床病程的关系。方法应用免疫组织化学SP法检测41例Rb组织中MMP-2... 目的探讨视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,Rb)中基质金属蛋白酶-2(matrixmetalloproteinase-2,MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的表达及其与临床病程的关系。方法应用免疫组织化学SP法检测41例Rb组织中MMP-2和MMP-9的表达;用HMIAS-2000型全自动医学彩色图像分析系统测量其平均光密度值。统计学方法比较不同临床和病理阶段Rb表达MMP-2和MMP-9的差异。结果在41例Rb组织切片中均有MMP-2和MMP-9的表达。有视神经浸润的肿瘤MMP-2和MMP-9表达水平明显高于无视神经浸润的肿瘤(P<0.01),处于眼外期的肿瘤MMP-2和MMP-9的表达水平明显高于眼内期和青光眼期的肿瘤(P<0.01)。结论Rb细胞内有MMP-2和MMP-9的表达。MMP-2和MMP-9的表达水平与视神经浸润和临床分期存在密切的关系,提示其表达水平与该肿瘤的浸润与发展有关。 展开更多

关键词 视网膜母细胞瘤 基质金属蛋白酶-2 基质金属蛋白酶-9 免疫组织化学

在线阅读 下载PDF 职称材料

紫杉醇诱导视网膜母细胞瘤细胞凋亡及对磷酸化Bcl-2的影响 被引量：1

8

作者 闵红波 黄勤 +2 位作者 王建文 孙继虎 步世忠 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2004年第6期510-512,516,共4页

目的 :研究紫杉醇 (Tax)抑制视网膜母细胞瘤 (Rb)细胞生长并诱导其凋亡及磷酸化Bcl 2在其中的作用。方法 :应用3 H 胸腺嘧啶掺入分析法观察Tax对细胞生长的抑制作用 ,以DNA片段凝胶电泳分析细胞凋亡 ,用Westernblot分析Tax对磷酸化Bcl ... 目的 :研究紫杉醇 (Tax)抑制视网膜母细胞瘤 (Rb)细胞生长并诱导其凋亡及磷酸化Bcl 2在其中的作用。方法 :应用3 H 胸腺嘧啶掺入分析法观察Tax对细胞生长的抑制作用 ,以DNA片段凝胶电泳分析细胞凋亡 ,用Westernblot分析Tax对磷酸化Bcl 2的影响 ,用cDNA细胞转染法观察突变型Bcl 2阻断Tax的作用。结果 :Tax可明显地抑制Y79细胞的生长 ,1μmol/LTax处理 2 4小时 ,3 H 胸腺嘧啶掺入率下降达 5 5 .4 3% ,Tax可诱导Y79细胞凋亡。在此过程中 ,Bcl 2被磷酸化。当Y79细胞被转染突变型Bcl 2后 ,Tax对Y79细胞的作用被阻断。结论 :Tax可抑制Y79细胞生长并诱导其凋亡 ,磷酸化Bcl 2参与其过程。 展开更多

关键词 视网膜母细胞瘤 紫杉醇 Y79 磷酸化Bcl-2 细胞凋亡

在线阅读 下载PDF 职称材料

NKG2D配体在视网膜母细胞瘤RB细胞的表达及意义

9

作者 李佳 周希瑗 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期88-89,共2页

目的:探讨视网膜母细胞瘤RB细胞株上NKG2D配体的表达情况及其对同种异体NK细胞杀伤活性的影响。方法:采用半定量RT-PCR法检测RB细胞及人红白血病细胞K562细胞上NKG2D配体MICA、MICB、ULBP1、ULBP2、ULBP3的mRNA表达情况。应用MTT法检测... 目的:探讨视网膜母细胞瘤RB细胞株上NKG2D配体的表达情况及其对同种异体NK细胞杀伤活性的影响。方法:采用半定量RT-PCR法检测RB细胞及人红白血病细胞K562细胞上NKG2D配体MICA、MICB、ULBP1、ULBP2、ULBP3的mRNA表达情况。应用MTT法检测人NK细胞对肿瘤细胞的杀伤活性。结果:K562细胞表面表达MICA、MICB、ULBP1、ULBP2、ULBP3,RB细胞表面表达MICA、MICB、ULBP2、ULBP3不表达ULBP1。K562细胞表面NKG2D的配体mRNA表达强度明显强于RB细胞(P<0.05)。当效靶比分别为5:1、10:1、20:1、40:1时NK细胞对K562、RB细胞的杀伤活性分别为28.32%±2.06%、9.11%±0.89%;45.62%±1.17%、22.87%±1.38%;60.79%±1.78%、32.69%±0.37%;73.83%±3.05%、50.29%±2.49%,在各效靶比时NK细胞对K562细胞的杀伤活性较RB细胞明显增强(P<0.05)。结论:NKG2D配体影响NK细胞对靶细胞的杀伤活性,NKG2D配体表达水平可能决定着NK细胞抗肿瘤免疫应答的强弱,提高NKG2D配体的表达有可能提高NK细胞的抗肿瘤作用。 展开更多

关键词 自然杀伤细胞 NKG2D 视网膜母细胞瘤 细胞毒性

在线阅读 下载PDF 职称材料

视网膜母细胞瘤结合锌指蛋白1调控肥胖和肿瘤信号通路研究综述

10

作者 谢小雷 江佩欣 +3 位作者 张敬鸿 莫骏健 吴可凡 曾康逸 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期114-119,共6页

视网膜母细胞瘤结合锌指蛋白1(retinoblastoma-interacting zinc finger protein 1,RIZ1)基因,又称PRDM2(positive regulatory domain 2)基因,是PRDM基因家族一员,其蛋白序列包含1个PR结构域、1个核激素受体结合基序、8个锌指结构域和1... 视网膜母细胞瘤结合锌指蛋白1(retinoblastoma-interacting zinc finger protein 1,RIZ1)基因,又称PRDM2(positive regulatory domain 2)基因,是PRDM基因家族一员,其蛋白序列包含1个PR结构域、1个核激素受体结合基序、8个锌指结构域和1个视网膜母细胞瘤蛋白(retinoblastoma protein,Rb)相互作用基序。RIZ1主要定位于细胞核内,在核内发挥转录抑制因子、基因调控、蛋白质-蛋白质相互作用等功能。RIZ1是代谢通路的重要参与者,其通过调控代谢相关基因影响基础代谢,抑制肥胖的形成;RIZ1功能突变或含量不足与多种肿瘤发生发展相关,其通过激活下游致癌基因或调控代谢参与肿瘤进程。RIZ1通过v-akt鼠科胸腺瘤病毒癌基因同源物Ⅲ(v-akt murine thymoma viral oncogene homolog 3,AKT3)、胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor 1,IGF-1),以及作为协同激活剂等方式分别调控AKT/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)、IGF-1、雌激素这3条肿瘤和肥胖相关分子信号通路。3条分子通路功能有差异且其下游分子存在交叉,提示RIZ1在不同年龄、性别和器官中的作用可能不同。详细研究RIZ1与RIZ2在代谢进程中的调控作用有助于全面了解RIZ1参与肥胖和肿瘤形成的机制。未来基于RIZ1靶点进行诊断研究或功能恢复可能对代谢性疾病和肿瘤的诊断和治疗有重要意义。 展开更多

关键词 视网膜母细胞瘤结合锌指蛋白1 PRDM2基因 代谢 肥胖 肿瘤 信号通路

在线阅读 下载PDF 职称材料

人子宫内膜上皮视网膜母细胞瘤抑癌蛋白磷酸化状态及其与细胞周期蛋白G1的相关性

11

作者 程钊 汤晓蓉 +2 位作者 郄明蓉 张金虎 岳利民 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第14期1290-1292,1295,共4页

目的探讨非磷酸化视网膜母细胞瘤抑癌蛋白(RB)和磷酸化RB(p-RB)在正常人子宫内膜上皮的周期性表达及其与细胞周期蛋白G1(CyclinG1)的相关性。方法采用免疫组织化学技术分别检测正常子宫内膜增殖期(9例)和分泌期(9例)组织切片RB和p-RB(se... 目的探讨非磷酸化视网膜母细胞瘤抑癌蛋白(RB)和磷酸化RB(p-RB)在正常人子宫内膜上皮的周期性表达及其与细胞周期蛋白G1(CyclinG1)的相关性。方法采用免疫组织化学技术分别检测正常子宫内膜增殖期(9例)和分泌期(9例)组织切片RB和p-RB(ser-795)及CyclinG1的表达,并分析RB的磷酸化状态及其与CyclinG1的相关性。结果免疫组化结果显示,在9例增殖期子宫内膜上皮,仅2例非磷酸化RB呈弱阳性表达,其余7例为阴性表达,在9例分泌期子宫内膜上皮非磷酸化RB均为阳性表达。在9例增殖期子宫内膜上皮P-RB均呈阳性表达,在9例分泌期子宫内膜上皮仅3例P-RB呈弱阳性表达,其余6例为阴性表达;CyclinG1表达的时空特点与非磷酸化RB表达相似,在9例增殖期子宫内膜上皮仅2例呈弱阳性表达,其余7例为阴性表达,在9例分泌期子宫内膜上皮均呈阳性表达。正常子宫内膜上皮细胞增殖期、分泌期非磷酸化RB、p-RB与CyclinG1的表达间差异均有统计学意义(P<0.01)。Spearman相关性分析结果表明非磷酸化RB与CyclinG1的表达正相关(rs=0.945,P<0.05),磷酸化p-RB(ser-795)的表达与CyclinG1负相关(rs=-0.791,P<0.05)。结论RB的磷酸化状态可能参与cyclinG1介导的孕激素对子宫内膜上皮的负调控作用。 展开更多

关键词 细胞周期蛋白质类 视网膜母细胞瘤抑癌蛋白 磷酸化 子宫内膜

在线阅读 下载PDF 职称材料

三氧化二砷诱导视网膜母细胞瘤细胞凋亡的实验研究 被引量：2

12

作者 李芸 唐罗生 沈宏伟 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期476-480,共5页

目的:探讨三氧化二砷体外诱导视网膜母细胞瘤细胞凋亡的作用及其可能的机制。方法:梯度浓度三氧化二砷处理视网膜母细胞瘤细胞系HXO-RB44,MTT法观察增殖的变化,AO/EB染色法、Annexin V+PI法流式细胞仪检测细胞凋亡。活性比色法检测caspa... 目的:探讨三氧化二砷体外诱导视网膜母细胞瘤细胞凋亡的作用及其可能的机制。方法:梯度浓度三氧化二砷处理视网膜母细胞瘤细胞系HXO-RB44,MTT法观察增殖的变化,AO/EB染色法、Annexin V+PI法流式细胞仪检测细胞凋亡。活性比色法检测caspase-3活性变化,Western免疫印迹法测定bcl-2和bax蛋白的表达。结果:三氧化二砷处理后的HXO-RB44细胞增殖抑制,抑制率呈剂量时间依赖性;其细胞凋亡率显著增加;caspase-3活性增加,bcl-2/bax的比值下调。结论:三氧化二砷在体外可通过诱导HXO-RB44细胞凋亡达到抑制其增殖的作用;其诱导凋亡的作用可能与激活caspase-3和下调bcl-2/bax比值有关。 展开更多

关键词 三氧化二砷 视网膜母细胞瘤 凋亡 CASPASE-3 BCL-2/BAX

在线阅读 下载PDF 职称材料

木犀草素调控视网膜母细胞瘤侵袭性和干样特性的机制研究 被引量：1

13

作者 谢丹璇 周龑 +2 位作者 牟成金 周璞 林萌 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第23期2865-2869,共5页

目的:探究木犀草素调控视网膜母细胞瘤侵袭性和干样特性的机制。方法:正常培养视网膜母细胞瘤细胞Y79、SO-RB50,以不同浓度木犀草素处理细胞24 h,采用CCK8法检测细胞活力,选取后续给药剂量,采用Transwell小室实验检测细胞侵袭能力,免疫... 目的:探究木犀草素调控视网膜母细胞瘤侵袭性和干样特性的机制。方法:正常培养视网膜母细胞瘤细胞Y79、SO-RB50,以不同浓度木犀草素处理细胞24 h,采用CCK8法检测细胞活力,选取后续给药剂量,采用Transwell小室实验检测细胞侵袭能力,免疫荧光检测细胞中波形蛋白(Vimentin)表达,显微镜下观察干细胞成球能力,Western blot检测细胞中血管内皮生长因子(VEGF)、干细胞标志物(SOX2、OCT4、CD44)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化PI3K(p-PI3K)、丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(AKT)、p-AKT、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)及p-mTOR表达,构建裸鼠异位肿瘤模型,观察木犀草素对肿瘤生长的影响。结果:与空白组比较,木犀草素干预后Y79、SO-RB50细胞活力明显降低,裸鼠瘤体的生长受到明显抑制(P<0.05),细胞侵袭能力下降,VEGF、Vimentin表达降低(P<0.05),干细胞克隆成球率和成球直径降低,SOX2、OCT4、CD44蛋白表达降低(P<0.05),且细胞中p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT及p-mTOR/mTOR水平也降低(P<0.05)。结论:木犀草素可抑制视网膜母细胞瘤侵袭性和干样特性,可能与抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路有关。 展开更多

关键词 木犀草素 视网膜母细胞瘤 侵袭 干样特性 PI3K/AKT/mTOR信号通路

在线阅读 下载PDF 职称材料

胶质母细胞瘤患者血浆胰岛素样生长因子结合蛋白-2影响因素研究

14

作者 徐丽 崔云 +1 位作者 李桂林 江涛 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第33期3728-3730,共3页

目的探讨胶质母细胞瘤组织胰岛素样生长因子结合蛋白-2(IGFBP-2)表达和肿瘤侵袭性对患者血浆IGFBP-2表达水平的影响。方法应用ELISA法检测43例胶质母细胞瘤患者血浆IGFBP-2表达水平;应用免疫组化技术检测上述患者肿瘤组织IGFBP-2和基质... 目的探讨胶质母细胞瘤组织胰岛素样生长因子结合蛋白-2(IGFBP-2)表达和肿瘤侵袭性对患者血浆IGFBP-2表达水平的影响。方法应用ELISA法检测43例胶质母细胞瘤患者血浆IGFBP-2表达水平;应用免疫组化技术检测上述患者肿瘤组织IGFBP-2和基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达情况;IGFBP-2以肿瘤细胞阳性与否分为两个水平("1"和"2"),MMP-9以肿瘤细胞阳性率"≤60%"和">60%"分为两个水平("1"和"2"),对患者血浆IGFBP-2表达水平进行2×2析因分析。结果胶质母细胞瘤患者肿瘤组织IGFBP-2、MMP-9表达(P=0.003、P=0.014)及二者的交互效应(P=0.049)均能影响患者血浆IGFBP-2水平。结论胶质母细胞瘤患者血浆IGFBP-2水平受肿瘤组织IGFBP-2表达、肿瘤侵袭性及其交互效应的影响。 展开更多

关键词 脑胶质母细胞瘤 胰岛素样生长因子结合蛋白-2 基质金属蛋白酶9

在线阅读 下载PDF 职称材料

吴茱萸碱对视网膜母细胞瘤细胞增殖、凋亡、细胞周期的影响 被引量：3

15

作者 赵静 杨洪涛 裴存文 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2022年第11期863-867,878,共6页

目的探讨吴茱萸碱对视网膜母细胞瘤细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响,分析整合素β2-反义RNA1(ITGB2-AS1)在视网膜母细胞瘤中的表达和作用。方法取对数生长期HXO-Rb44细胞铺在96孔板上,用终浓度为1μmol·L^(-1)、2μmol·L^(-1)... 目的探讨吴茱萸碱对视网膜母细胞瘤细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响,分析整合素β2-反义RNA1(ITGB2-AS1)在视网膜母细胞瘤中的表达和作用。方法取对数生长期HXO-Rb44细胞铺在96孔板上,用终浓度为1μmol·L^(-1)、2μmol·L^(-1)、4μmol·L^(-1)吴茱萸碱处理细胞24 h,记为吴茱萸碱1μmol·L^(-1)组、吴茱萸碱2μmol·L^(-1)组、吴茱萸碱4μmol·L^(-1)组,同时将不经吴茱萸碱处理的细胞设为对照组;按照Lipofectamine 2000试剂盒说明书将si-NC、si-ITGB2-AS1转染细胞,记为si-NC组、si-ITGB2-AS1组;将pcDNA、pcDNA-ITGB2-AS1转染细胞,再用4μmol·L^(-1)吴茱萸碱处理,记为吴茱萸碱4μmol·L^(-1)+pcDNA组、吴茱萸碱4μmol·L^(-1)+pcDNA-ITGB2-AS1组。采用MTT法测定细胞存活率,平板克隆实验计数克隆形成数,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡情况,qRT-PCR检测ITGB2-AS1表达。结果吴茱萸碱2μmol·L^(-1)组、吴茱萸碱4μmol·L^(-1)组细胞存活率和克隆形成数较对照组、吴茱萸碱1μmol·L^(-1)组减小,差异均有统计学意义(均为P<0.05);吴茱萸碱4μmol·L^(-1)组细胞存活率和克隆形成数较吴茱萸碱2μmol·L^(-1)组减小,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。吴茱萸碱2μmol·L^(-1)组、吴茱萸碱4μmol·L^(-1)组G_(0)-G_(1)期细胞比例较对照组、吴茱萸碱1μmol·L^(-1)组下降,G_(2)-M期细胞比例较对照组、吴茱萸碱1μmol·L^(-1)组升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05);吴茱萸碱4μmol·L^(-1)组G_(0)-G_(1)期细胞比例较吴茱萸碱2μmol·L^(-1)组下降,G_(2)-M期细胞比例较吴茱萸碱2μmol·L^(-1)组升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。吴茱萸碱2μmol·L^(-1)组、吴茱萸碱4μmol·L^(-1)组细胞凋亡率较对照组、吴茱萸碱1μmol·L^(-1)组升高,ITGB2-AS1表达量较对照组、吴茱萸碱1μmol·L^(-1)组降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05);吴茱萸碱4μmol·L^(-1)组细胞凋亡率较吴茱萸碱2μmol·L^(-1)组升高,ITGB2-AS1表达量较吴茱萸碱2μmol·L^(-1)组降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。si-ITGB2-AS1组ITGB2-AS1表达量、细胞存活率、克隆形成数和G_(0)-G_(1)期细胞比例均较si-NC组降低,G_(2)-M期细胞比例、细胞凋亡率均较si-NC组升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。吴茱萸碱4μmol·L^(-1)+pcDNA-ITGB2-AS1组细胞ITGB2-AS1表达量、细胞存活率和克隆形成数均较吴茱萸碱4μmol·L^(-1)+pcDNA组升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。吴茱萸碱4μmol·L^(-1)+pcDNA-ITGB2-AS1组G_(0)-G_(1)期细胞比例较吴茱萸碱4μmol·L^(-1)+pcDNA组高,G_(2)-M期细胞比例、细胞凋亡率较吴茱萸碱4μmol·L^(-1)+pcDNA组低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论吴茱萸碱通过抑制ITGB2-AS1表达降低视网膜母细胞瘤细胞增殖,阻滞G_(2)-M期细胞周期,并促进细胞凋亡。 展开更多

关键词 视网膜母细胞瘤 吴茱萸碱 整合素β2-反义RNA1 细胞增殖 细胞周期 细胞凋亡

在线阅读 下载PDF 职称材料

miR-101表达上调对视网膜母细胞瘤细胞的增殖及侵袭能力的抑制作用 被引量：9

16

作者 李勇 徐卫星 +1 位作者 徐军 李佳 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2018年第6期527-532,共6页

目的探究miR-101对视网膜母细胞瘤增殖及侵袭能力的影响。方法收集31例视网膜母细胞瘤组织及7例正常视网膜组织。培养人正常视网膜血管内皮细胞系ACBRI-181及视网膜母细胞瘤系HXO-Rb44。Lipofectamine 2000转染HXORb44细胞并分组:阴性对... 目的探究miR-101对视网膜母细胞瘤增殖及侵袭能力的影响。方法收集31例视网膜母细胞瘤组织及7例正常视网膜组织。培养人正常视网膜血管内皮细胞系ACBRI-181及视网膜母细胞瘤系HXO-Rb44。Lipofectamine 2000转染HXORb44细胞并分组:阴性对照(normal control,NC)1组[转染microRNA(miR)-101阴性对照物]、miR-101表达组(转染miRNA-101类似物);NC 2组[转染组蛋白-赖氨酸N-甲基转移酶(EZH2)阴性对照序列]、siRNA-EZH2组(转染EZH2siRNA)、siRNAEZH2+mimics组(转染EZH2siRNA和miRNA-101类似物)和EZH2+mimics组(转染EZH2表达载体和miRNA-101类似物)。正常HOX-Rb44细胞作为空白组。采用qRT-PCR检测miR-101、EZH2 mRNA表达,Western blot检测EZH2蛋白表达。MTT及Transwell实验分别测定细胞增殖及侵袭能力。荧光素酶报告基因实验确定miR-101和EZH2的靶向关系。裸鼠体内移植实验测定细胞体内增殖能力。结果与正常视网膜组织和ACBRI-181细胞相比,视网膜母细胞瘤组织及HXO-Rb44细胞中miR-101的相对表达量均明显下调(均为P<0.05)。EZH2 mRNA及蛋白在miR-101表达组中的相对表达量均显著低于空白组和NC1组(均为P<0.05)。72~96 h,miR-101表达组的吸光度(A)值均显著低于空白组及NC1组(均为P<0.01)。miR-101表达组侵袭细胞数量(51±6)均显著低于空白组(97±11)及NC1组(92±8)(均为P<0.01)。EZH2是miR-101的靶基因。48~96 h,siRNA-EZH2组和siRNA-EZH2+mimics组的A值均显著低于空白组和NC2组(均为P<0.01);72~96 h,siRNA-EZH2+mimics组的A值明显低于siRNA-EZH2组(P<0.05);24~96 h,EZH2+mimics组的A值与空白组和NC2组之间的差异均无统计学意义(均为P>0.05)。siRNA-EZH2组侵袭细胞数量(48±4)和siRNA-EZH2+mimics组(38±3)均显著低于空白组(95±10)和NC2组(90±6)(均为P<0.01),siRNA-EZH2+mimics组侵袭细胞数量明显低于siRNA-EZH2组(P<0.05),EZH2+mimics组侵袭细胞数量与空白组和NC2组之间的差异均无统计学意义(均为P>0.05)。裸鼠体内移植5~7周,siRNA-EZH2组和siRNA-EZH2+mimics组的瘤体体积均显著低于空白组和NC2组(均为P<0.01),siRNA-EZH2+mimics组的瘤体体积明显低于siRNA-EZH2组(P<0.05),EZH2+mimics组的肿瘤体积与空白组和NC2组之间的差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论 miR-101上调后可抑制HXO-Rb44细胞的增殖及侵袭能力,这可能是通过抑制EZH2表达实现的。 展开更多

关键词 视网膜母细胞瘤 miR-101 EZH2 增殖 侵袭

在线阅读 下载PDF 职称材料

绿原酸对视网膜母细胞瘤细胞株HXO-RB44的生长抑制作用 被引量：4

17

作者 赵静滨 何熹微 +2 位作者 姚素艳 刘建生 郑德宇 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期734-738,共5页

目的探讨绿原酸(CHA)对体外培养人视网膜母细胞瘤(Rb)细胞株HXO-RB44的作用及机制。方法应用CCK-8体外抑制实验,筛选CHA对体外培养传6代的人Rb细胞株HXO-RB44的最佳抑癌浓度。Western blot检测人Rb细胞株HXO-RB44中抑癌基因Rb1和P16及... 目的探讨绿原酸(CHA)对体外培养人视网膜母细胞瘤(Rb)细胞株HXO-RB44的作用及机制。方法应用CCK-8体外抑制实验,筛选CHA对体外培养传6代的人Rb细胞株HXO-RB44的最佳抑癌浓度。Western blot检测人Rb细胞株HXO-RB44中抑癌基因Rb1和P16及细胞周期蛋白(Cyclin D2)和细胞周期蛋白依赖激酶(CDK 4)的表达变化;ELISA检测培养基中乳酸脱氢酶(LDH)水平。结果 CCK-8体外抑制实验结果显示,CHA对人Rb细胞株HXO-RB44的最佳抑癌浓度为80μmol/L。经80μmol/L CHA处理5d的HXO-RB44细胞株中,抑癌基因Rb1和P16均有少量表达,而在阳性对照组(HT1080细胞)和未处理的HXO-RB44细胞几乎没有表达。CHA处理5d的HXO-RB44细胞株的Cyclin D2和CDK4的表达明显低于阳性对照组(HT1080细胞)和未处理的HXO-RB44细胞(P<0.01)。CHA处理5d的HXO-RB44的培养基中LDH的含量为(226.75±42.74)U/L,明显低于正常培养的细胞培养基(425.84±31.67)U/L(P<0.01)。结论 80μmol/L CHA可能通过增加HXO-RB44抑癌基因的表达,降低细胞周期蛋白的表达及LDH水平,而抑制HXO-RB44细胞株的增殖。 展开更多

关键词 绿原酸 人视网膜母细胞瘤 抑癌基因 细胞周期蛋白2(Cyclin D2) 细胞周期蛋白依赖激酶4(CDK4)

在线阅读 下载PDF 职称材料

成人视网膜母细胞瘤诊疗一例

18

作者 张亚男 毛英 +1 位作者 姜利斌 李彬 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期58-59,共2页

患者男,21岁,曾因右眼无明显原因视力下降伴眼前黑影遮挡,在外院诊断为右眼玻璃体出血,行右眼玻璃体切除联合硅油填充术治疗,血性玻璃体液涂片检查结果示较多核大、深染的异型细胞,考虑为视网膜血管瘤。后因病情加重而再次于外院行手术... 患者男,21岁,曾因右眼无明显原因视力下降伴眼前黑影遮挡,在外院诊断为右眼玻璃体出血,行右眼玻璃体切除联合硅油填充术治疗,血性玻璃体液涂片检查结果示较多核大、深染的异型细胞,考虑为视网膜血管瘤。后因病情加重而再次于外院行手术抽取玻璃体液,病理检查结果示玻璃体液内见大量退变细胞和较多淋巴细胞以及部分上皮样细胞,视网膜母细胞瘤不能排除。 展开更多

关键词 视网膜母细胞瘤 玻璃体液 涂片检查 右眼玻璃体 上皮样细胞 异型细胞 视网膜血管瘤 病理检查结果

在线阅读 下载PDF 职称材料

范先群教授团队Molecular Cancer在线发表视网膜母细胞瘤治疗相关研究成果

19

《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期1062-1062,共1页

上海交通大学医学院附属第九人民医院眼科范先群教授团队鉴定并命名了全新的长链非编码RNA (long noncoding RNA,lnc RNA)RBAT1(retinoblastoma associated transcript-1),发现lnc RNARBAT1可招募HNRNPL(heterogeneous nuclear ribonucl... 上海交通大学医学院附属第九人民医院眼科范先群教授团队鉴定并命名了全新的长链非编码RNA (long noncoding RNA,lnc RNA)RBAT1(retinoblastoma associated transcript-1),发现lnc RNARBAT1可招募HNRNPL(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein L)并顺式激活E2F3(E2F transcription factor 3),靶向RBAT1/E2F3显著抑制视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,RB)发生。 展开更多

关键词 视网膜母细胞瘤 医院眼科 E2F3 范先

在线阅读 下载PDF 职称材料

髓母细胞瘤中P_(53)、bcl-2及Ki-67的表达及其意义 被引量：2

20

作者 付欣鸽 李锋 +5 位作者 胡文浩 陶林 李洪安 蒋金芳 陈云昭 陈华 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2002年第1期11-13,共3页

用免疫组化S P法检测 2 5例髓母细胞瘤中Ki 6 7、P53 及bcl 2基因的表达。结果表明 ,在 2 5例髓母细胞瘤中 ,bcl 2和P53 蛋白的阳性表达率分别为 72 % (18/ 2 5 )和 16 % (4/ 2 5 )。Ki 6 7阳性率平均为 (33.34± 4 .98) % ,其表达... 用免疫组化S P法检测 2 5例髓母细胞瘤中Ki 6 7、P53 及bcl 2基因的表达。结果表明 ,在 2 5例髓母细胞瘤中 ,bcl 2和P53 蛋白的阳性表达率分别为 72 % (18/ 2 5 )和 16 % (4/ 2 5 )。Ki 6 7阳性率平均为 (33.34± 4 .98) % ,其表达与组织学分型有关。说明在髓母细胞瘤中bcl 2蛋白与P53 展开更多

关键词 髓母细胞瘤 蛋白质P53 蛋白质BCL-2 KI-67蛋白 基因表达 颅内肿瘤 发病学

在线阅读 下载PDF 职称材料