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人类TAP1基因克隆及表达载体的构建 被引量:1
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作者 刘玉 李殿俊 +3 位作者 吕雪莹 杨秋霞 谷金宇 王兰 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期53-54,共2页
关键词 TAP1 基因克隆 表达载体的构建 序列分析
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日本血吸虫谷胱甘肽硫转移酶原核表达载体的构建及序列分析 被引量:1
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作者 方桂杰 乔宪凤 《江西农业学报》 CAS 2010年第11期8-10,14,共4页
为构建带有组氨酸标签(his-tag)的日本血吸虫谷胱甘肽硫转移酶(sjGST)表达载体。以载有sjGST基因的载体PGEX-KG为模板,PCR扩增sjGST基因,并在进行酶切和基因测序后将其克隆到pET28a载体上。运用生物学软件与具有代表性的血吸虫GST基因... 为构建带有组氨酸标签(his-tag)的日本血吸虫谷胱甘肽硫转移酶(sjGST)表达载体。以载有sjGST基因的载体PGEX-KG为模板,PCR扩增sjGST基因,并在进行酶切和基因测序后将其克隆到pET28a载体上。运用生物学软件与具有代表性的血吸虫GST基因进行比对并对可能的表达产物进行分析。结果表明,PCR产物与3种sjGST基因有99%的同源性。重组载体构建成功。 展开更多
关键词 日本血吸虫 谷胱甘肽硫转移酶 原核 表达载体的构建 序列分析 SCHISTOSOMA JAPONICUM Sequence Analysis 基因测序 重组载体构建 组氨酸标签 生物学软件 表达产物 PCR产物 HIS-TAG GST基因 同源性 代表性 pET28a 模板 酶切
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NtSKP1基因的反义载体构建及转基因烟草的产生 被引量:1
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作者 张付云 李伟 +3 位作者 张瑛 孙秋颖 李研 杜昱光 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期141-145,共5页
根据枯斑三生烟SKP1基因(NtSKP1)的序列,设计一对分别含有特定酶切位点的特异引物,以重组质粒pMD18-SKP1为模板,扩增目的基因(约473bp)片段。将反向目的片段插入中间载体pHANNIBAL的内含子右侧,再经NotⅠ酶切回收约3443bp的目的片段,插... 根据枯斑三生烟SKP1基因(NtSKP1)的序列,设计一对分别含有特定酶切位点的特异引物,以重组质粒pMD18-SKP1为模板,扩增目的基因(约473bp)片段。将反向目的片段插入中间载体pHANNIBAL的内含子右侧,再经NotⅠ酶切回收约3443bp的目的片段,插入到双元载体质粒pART27中,成功构建了含NtSKP1基因片段反向序列的植物表达载体pART27-skp1a,其转录产物能减弱目的基因的表达。将pART27-skp1a质粒导人根癌农杆菌LBA4404中并转化烟草叶片细胞,经选择分化培养,获得转基因烟草。 展开更多
关键词 NtSKP1基因 反义表达载体的构建 转基因烟草
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玉米细胞分裂素Zmrr3的克隆及RNAi载体的构建 被引量:1
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作者 齐璐璐 马庆 《农业灾害研究》 2018年第3期3-5,共3页
应用聚合酶链式反应技术从鲁原92自交系玉米基因组中扩增了Zmrr3基因的第5外显子特异性片段,并以测序过的目的片段构建了RNAi的载体p CAMBIA303+RNAi+2F,该载体还有潮霉素、卡那霉素、GUS等筛选基因。可以用于细胞分裂素调控叶序变化的... 应用聚合酶链式反应技术从鲁原92自交系玉米基因组中扩增了Zmrr3基因的第5外显子特异性片段,并以测序过的目的片段构建了RNAi的载体p CAMBIA303+RNAi+2F,该载体还有潮霉素、卡那霉素、GUS等筛选基因。可以用于细胞分裂素调控叶序变化的分子机制研究。 展开更多
关键词 细胞分裂素 小干涉RNA 表达载体的构建 玉米
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番茄ARF2蛋白的生物信息学分析与亚细胞定位 被引量:14
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作者 冯媛媛 侯佩 +1 位作者 李颖楠 刘永胜 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2012年第1期51-58,共8页
克隆番茄(Solanum lycopersicum)ARF2基因,并分析其分子特性和亚细胞定位,为研究其功能提供基础.通过生物信息学方法分析SlARF2基因编码蛋白的理化性质和分子特性.采用RT-PCR技术从番茄果实cDNA中扩增SlARF2基因全长,并构建与黄色荧光蛋... 克隆番茄(Solanum lycopersicum)ARF2基因,并分析其分子特性和亚细胞定位,为研究其功能提供基础.通过生物信息学方法分析SlARF2基因编码蛋白的理化性质和分子特性.采用RT-PCR技术从番茄果实cDNA中扩增SlARF2基因全长,并构建与黄色荧光蛋白(YFP)融合的pBA-ARF2-YFP表达载体,进而再通过农杆菌介导的遗传转化方法,将重组质粒转化到野生型番茄中,将得到的T1代转基因种子萌发,然后取根尖通过荧光显微镜观察了融合蛋白在活细胞内分布的特点.生物信息学分析结果表明,SlARF2是富含Ser、Leu、Gly和Pro以及具有ARF家族典型结构域的可溶性蛋白,其氨基酸序列与葡萄、木薯和拟南芥的同源性分别为70.08%、66.94%和60.87%.经酶切和测序分析证实pBA-ARF2-YFP融合表达载体构建成功,此外,PCR分析表明融合蛋白在转基因植株中得到表达.经荧光显微镜观察,ARF2定位在细胞核中.表明转录因子SlARF2定位在细胞核中,对番茄果实发育和成熟起重要作用. 展开更多
关键词 ARF2 生物信息学分析 表达载体的构建 亚细胞定位
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