目的探究血浆β淀粉样蛋白(Aβ)与认知功能障碍的关系。方法选取西安市鄠邑区某2个自然村40岁及以上常住村民作为研究对象,通过问卷调查、体格检查和实验室检查评估一般状况和认知功能障碍危险因素;采用简易精神状态量表检查(Mini-Menta...目的探究血浆β淀粉样蛋白(Aβ)与认知功能障碍的关系。方法选取西安市鄠邑区某2个自然村40岁及以上常住村民作为研究对象,通过问卷调查、体格检查和实验室检查评估一般状况和认知功能障碍危险因素;采用简易精神状态量表检查(Mini-Mental State Examination,MMSE)及成套神经心理量表评估认知功能,并将人群分为认知功能正常组、可疑认知功能障碍组、认知功能障碍组。酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定空腹血浆中Aβ_(1-42)、Aβ_(1-40)水平。单因素和多因素分析血浆Aβ与认知功能障碍的关系。结果1314名研究对象中,认知功能正常1180例(89.8%),可疑认知功能障碍85例(6.47%),认知功能障碍49例(3.73%)。单因素分析显示,可疑认知功能障碍组血浆Aβ_(1-42)/Aβ_(1-40)比值高于认知功能正常组(P<0.05)及认知功能障碍组(P<0.05),可疑认知功能障碍组血浆Aβ_(1-42)水平高于认知功能正常组(P<0.05)。3组间血浆Aβ_(1-40)水平差异无统计学意义。多因素Logistic回归分析校正混杂因素后(包括年龄、性别、教育程度、认知功能障碍危险因素、生活习惯),分析结果与单因素分析一致。结论可疑认知障碍患者血浆Aβ_(1-42)水平和Aβ_(1-42)/Aβ_(1-40)比值显著升高,提示血浆Aβ_(1-42)升高可能在认知障碍早期更为明显,有望作为认知功能下降的早期生物标记物。展开更多
目的探究CDP-二酰基甘油合酶1(CDS1)对小鼠海马神经细胞自噬和淀粉样蛋白沉积的影响及机制。方法使用刚果红和免疫组织化学染色观察淀粉样前体蛋白(APP)/早老蛋白1(PS1)双转基因小鼠海马组织淀粉样物质的沉积情况;慢病毒介导HT22细胞内...目的探究CDP-二酰基甘油合酶1(CDS1)对小鼠海马神经细胞自噬和淀粉样蛋白沉积的影响及机制。方法使用刚果红和免疫组织化学染色观察淀粉样前体蛋白(APP)/早老蛋白1(PS1)双转基因小鼠海马组织淀粉样物质的沉积情况;慢病毒介导HT22细胞内APP过表达,刚果红染色观察细胞内淀粉样物质沉积情况;蛋白质印迹法检测APP/PS1双转基因小鼠海马组织和APP过表达HT22细胞的微管相关蛋白1轻链3(LC3)-Ⅱ、P62蛋白表达情况;通过APP/PS1双转基因小鼠海马蛋白质组学结果,筛选出差异表达蛋白CDS1;蛋白质印迹法检测APP/PS1双转基因小鼠海马组织和APP过表达HT22细胞中的CDS1蛋白表达情况;慢病毒介导HT22细胞APP过表达后,再过表达CDS1,采用蛋白质印迹法检测LC3-Ⅱ、P62蛋白表达情况。结果APP/PS1双转基因小鼠海马组织及APP过表达HT22细胞中均有β-淀粉样蛋白的沉积。在APP/PS1双转基因小鼠海马组织和APP过表达HT22细胞中LC3-Ⅱ、P62蛋白均升高。从APP/PS1双转基因小鼠蛋白质组学结果中的京都基因与基因组百科全书通路分析筛选到其中一条差异代谢通路——甘油磷脂代谢通路,从该通路中获取到差异表达蛋白CDS1。与野生型C57BL/6小鼠相比,APP/PS1双转基因小鼠海马组织中CDS1蛋白表达量下降(0.46±0.07 vs 1.00±0.25,P<0.01);与感染空载病毒载体的HT22细胞相比,慢病毒过表达APP的HT22细胞中CDS1蛋白表达量下降(0.68±0.18 vs 1.00±0.13,P<0.01)。在APP过表达的HT22细胞过表达CDS1后,神经细胞的自噬流明显恢复(LC3-Ⅱ:1.00±0.15 vs 0.21±0.05,P<0.01;P62:1.00±0.16 vs 0.67±0.10,P<0.01),并且Aβ沉积明显减少。结论CDS1表达下调诱导自噬体与溶酶体融合障碍,促进阿尔茨海默病小鼠海马淀粉样物质沉积。展开更多
文摘目的探究血浆β淀粉样蛋白(Aβ)与认知功能障碍的关系。方法选取西安市鄠邑区某2个自然村40岁及以上常住村民作为研究对象,通过问卷调查、体格检查和实验室检查评估一般状况和认知功能障碍危险因素;采用简易精神状态量表检查(Mini-Mental State Examination,MMSE)及成套神经心理量表评估认知功能,并将人群分为认知功能正常组、可疑认知功能障碍组、认知功能障碍组。酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定空腹血浆中Aβ_(1-42)、Aβ_(1-40)水平。单因素和多因素分析血浆Aβ与认知功能障碍的关系。结果1314名研究对象中,认知功能正常1180例(89.8%),可疑认知功能障碍85例(6.47%),认知功能障碍49例(3.73%)。单因素分析显示,可疑认知功能障碍组血浆Aβ_(1-42)/Aβ_(1-40)比值高于认知功能正常组(P<0.05)及认知功能障碍组(P<0.05),可疑认知功能障碍组血浆Aβ_(1-42)水平高于认知功能正常组(P<0.05)。3组间血浆Aβ_(1-40)水平差异无统计学意义。多因素Logistic回归分析校正混杂因素后(包括年龄、性别、教育程度、认知功能障碍危险因素、生活习惯),分析结果与单因素分析一致。结论可疑认知障碍患者血浆Aβ_(1-42)水平和Aβ_(1-42)/Aβ_(1-40)比值显著升高,提示血浆Aβ_(1-42)升高可能在认知障碍早期更为明显,有望作为认知功能下降的早期生物标记物。
文摘目的探究CDP-二酰基甘油合酶1(CDS1)对小鼠海马神经细胞自噬和淀粉样蛋白沉积的影响及机制。方法使用刚果红和免疫组织化学染色观察淀粉样前体蛋白(APP)/早老蛋白1(PS1)双转基因小鼠海马组织淀粉样物质的沉积情况;慢病毒介导HT22细胞内APP过表达,刚果红染色观察细胞内淀粉样物质沉积情况;蛋白质印迹法检测APP/PS1双转基因小鼠海马组织和APP过表达HT22细胞的微管相关蛋白1轻链3(LC3)-Ⅱ、P62蛋白表达情况;通过APP/PS1双转基因小鼠海马蛋白质组学结果,筛选出差异表达蛋白CDS1;蛋白质印迹法检测APP/PS1双转基因小鼠海马组织和APP过表达HT22细胞中的CDS1蛋白表达情况;慢病毒介导HT22细胞APP过表达后,再过表达CDS1,采用蛋白质印迹法检测LC3-Ⅱ、P62蛋白表达情况。结果APP/PS1双转基因小鼠海马组织及APP过表达HT22细胞中均有β-淀粉样蛋白的沉积。在APP/PS1双转基因小鼠海马组织和APP过表达HT22细胞中LC3-Ⅱ、P62蛋白均升高。从APP/PS1双转基因小鼠蛋白质组学结果中的京都基因与基因组百科全书通路分析筛选到其中一条差异代谢通路——甘油磷脂代谢通路,从该通路中获取到差异表达蛋白CDS1。与野生型C57BL/6小鼠相比,APP/PS1双转基因小鼠海马组织中CDS1蛋白表达量下降(0.46±0.07 vs 1.00±0.25,P<0.01);与感染空载病毒载体的HT22细胞相比,慢病毒过表达APP的HT22细胞中CDS1蛋白表达量下降(0.68±0.18 vs 1.00±0.13,P<0.01)。在APP过表达的HT22细胞过表达CDS1后,神经细胞的自噬流明显恢复(LC3-Ⅱ:1.00±0.15 vs 0.21±0.05,P<0.01;P62:1.00±0.16 vs 0.67±0.10,P<0.01),并且Aβ沉积明显减少。结论CDS1表达下调诱导自噬体与溶酶体融合障碍,促进阿尔茨海默病小鼠海马淀粉样物质沉积。
