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蛋白连接组织生长因子表达腺病毒的构建及其基因功能
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作者 宫宁 章华兵 +1 位作者 方福德 常永生 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期649-653,I0014,共6页
目的构建及鉴定蛋白连接组织生长因子(CTGF)基因过表达腺病毒,初步探究CTGF在糖脂代谢方面的功能。方法克隆CTGF过表达质粒,定向克隆入穿梭载体pAdTrack-CMV,Pme I酶切线性化穿梭质粒转化改造的E.coliBJ5183(含腺病毒载体pAdEasy-1)感... 目的构建及鉴定蛋白连接组织生长因子(CTGF)基因过表达腺病毒,初步探究CTGF在糖脂代谢方面的功能。方法克隆CTGF过表达质粒,定向克隆入穿梭载体pAdTrack-CMV,Pme I酶切线性化穿梭质粒转化改造的E.coliBJ5183(含腺病毒载体pAdEasy-1)感受态细菌产生重组腺病毒载体,用Pac I线性化重组质粒,回收转染293A细胞包装病毒颗粒,经过3轮扩增,感染肝原代细胞,观察感染效率及检测基因表达情况。通过对小鼠不同时间段的饥饿处理,提取肝脏RNA做RT-PCR,实时定量PCR检测CTGF基因在不同营养条件下的变化情况。结果成功包装CTGF的腺病毒,感染效率达90%以上。CTGF在不同营养条件下表达情况不同,并且与糖脂代谢重要基因过氧化物酶体增值激活受体γ共激活因子1α表达情况一致。饥饿24h,CTGF上调(3.38±0.51)倍;饥饿48h,CTGF上调(5.26±1.25)倍(P<0.05)。结论初步认定CTGF可能参与糖脂代谢。 展开更多
关键词 蛋白连接组织生长因子 过表达 腺病毒 饥饿
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高糖、茶多酚对人系膜细胞结缔组织生长因子、纤维连接蛋白mRNA表达的影响 被引量:5
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作者 赵龙 邓红 +3 位作者 汪颖南 苏宁 刘必成 刘东风 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期157-160,175,共5页
目的:研究高糖条件下系膜细胞氧化失衡与结缔组织生长因子(CTGF)、纤维连接蛋白(FN)mRNA表达之间的关系,通过抗氧化剂茶多酚证实氧化应激在糖尿病肾硬化发展中的作用。方法:高糖(35mmol/LD鄄糖)条件下培养系膜细胞,加或不加茶多酚(20μg... 目的:研究高糖条件下系膜细胞氧化失衡与结缔组织生长因子(CTGF)、纤维连接蛋白(FN)mRNA表达之间的关系,通过抗氧化剂茶多酚证实氧化应激在糖尿病肾硬化发展中的作用。方法:高糖(35mmol/LD鄄糖)条件下培养系膜细胞,加或不加茶多酚(20μg/ml),采用分光光度法检测不同时间点(0、12、24、36、48h)的上清液中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性、丙二醛(MDA)含量及RT鄄PCR法细胞CTGF、FNmRNA的表达水平。结果:高糖显著降低上清SOD、CAT活力(P<0.05),升高MDA水平(P<0.05),刺激系膜细胞CTGF、FNmRNA高表达;茶多酚能有效抑制高糖的上述作用(P<0.05)。结论:①高糖条件下活性氧生成增多,抗氧化酶活性下降,氧化失衡,促进组织纤维化的进展。②茶多酚通过调节氧化失衡抑制纤维化的进展。③氧化平衡失调在DN发生、发展中具有重要的作用。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 氧化失衡 结缔组织生长因子 纤维连接蛋白
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不同类型和病程视网膜前膜中结缔组织生长因子和纤维连接蛋白的差异表达 被引量:3
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作者 孙冰 柯根杰 +2 位作者 胡闻 文磊 陈艳 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期757-762,共6页
背景 视网膜前膜的形成和发展过程有多种细胞、细胞因子和细胞外基质等的调控和参与,结缔组织生长因子(CTGF)和纤维连接蛋白(FN)等参与其中,研究视网膜前膜的形态结构和病理学特征对于防治相关的视网膜病变具有重要意义. 目的 分析... 背景 视网膜前膜的形成和发展过程有多种细胞、细胞因子和细胞外基质等的调控和参与,结缔组织生长因子(CTGF)和纤维连接蛋白(FN)等参与其中,研究视网膜前膜的形态结构和病理学特征对于防治相关的视网膜病变具有重要意义. 目的 分析不同类型和病程眼底病变所致视网膜前膜的病理特点,研究CTGF和FN在视网膜前膜中的表达.方法 收集玻璃体切割术或硅油取出术中获得的视网膜前膜标本,其中孔源性视网膜脱离(RRD)组24例24眼,包括病程<90 d者14眼及≥90 d者10眼;伴有玻璃体积血或牵拉性视网膜脱离(RD)的糖尿病视网膜病变(DR)组20例20眼,硅油填充眼组7眼,病程均≥90 d.各眼增生性玻璃体视网膜病变(PVR)分级均为C2级以上.对获取的视网膜标本进行常规组织病理学检查,采用免疫组织化学法检测视网膜前膜标本中CTGF和FN的表达,应用Fisher确切概率法对病程≥90 d不同组间和RRD组不同病程间视网膜前膜标本中CTGF和FN表达阳性率的差异进行比较. 结果 RRD组病程<90 d的标本中以视网膜色素上皮(RPE)细胞和炎性细胞增多为主,而病程≥90 d的标本中以神经胶质细胞和成纤维细胞增多为主.RRD组和伴有玻璃体积血或牵拉性RD的DR组以炎性细胞浸润为主要表现,而硅油填充眼组以纤维增生为主要表现.病程≥90 d的3个组视网膜前膜中,RRD组CTGF阳性表达者7眼,占70.0%,伴有玻璃体积血或牵拉性RD的DR组18眼,占90.0%,硅油填充眼组2眼,占28.6%,3个组间视网膜前膜中CTGF表达阳性率的总体比较差异有统计学意义(P=0.037);RRD组FN阳性表达者9眼,占90.0%,伴有玻璃体积血或牵拉性RD的DR组18眼,占90.0%,硅油填充眼组7眼,占100.0%,3个组间FN表达阳性率的总体比较差异无统计学意义(P=0.379).RRD组中,病程≥90 d者视网膜前膜中CTGF阳性表达者7眼,占70.0%,病程<90 d者13眼,占92.9%,差异有统计学意义(P=0.032);病程≥90 d者视网膜前膜中FN阳性者9眼,占90.0%,病程<90 d者7眼,占50.0%,差异有统计学意义(P=0.019). 结论 CTGF和FN在不同眼底病所致的视网膜前膜中及不同阶段的视网膜前膜中均呈差异性表达.CTGF的表达变化与病程和疾病类型有关,而FN的表达变化仅与病程有关. 展开更多
关键词 视网膜 增生 视网膜前膜 结缔组织生长因子 纤维连接蛋白 免疫组织化学
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碱性成纤维细胞生长因子和纤维连接蛋白在大鼠组织工程复合皮肤愈合中的表达 被引量:4
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作者 王军琳 金岩 +4 位作者 郭征 刘晓亮 刘源 赵宇 胡静 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期41-43,共3页
目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)和纤维连接蛋白 (FN)在组织工程皮肤愈合过程中的作用。方法 以新生SD大鼠皮肤为原材料培养组织工程复合皮肤并将其移植到 15只成年SD大鼠 ,第 7、10、14、2 0、30天取标本 ,通过HE染色、免疫... 目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)和纤维连接蛋白 (FN)在组织工程皮肤愈合过程中的作用。方法 以新生SD大鼠皮肤为原材料培养组织工程复合皮肤并将其移植到 15只成年SD大鼠 ,第 7、10、14、2 0、30天取标本 ,通过HE染色、免疫组织化学方法对移植后不同时间的组织工程复合皮肤进行检测 ,观察创面愈合过程中bFGF、FN的表达变化及其与组织修复的关系。以做自体皮肤移植和正常Wistar大鼠做对照。结果 术后第 10天时bFGF、FN表达明显 ,术后第 10天以前和第 14天以后表达较弱。bFGF、FN在组织工程皮肤愈合过程中的变化与自体皮肤移植愈合过程相似。结论 在组织工程皮肤移植修复大鼠皮肤缺损中bFGF、FN有表达 。 展开更多
关键词 碱性成纤维细胞生长因子 纤维连接蛋白 大鼠 组织工程复合皮肤 愈合
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单核细胞趋化蛋白-1和转化生长因子β_1及结缔组织生长因子在2型糖尿病肾病大鼠肾组织中的表达 被引量:23
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作者 张亚莉 冯婕 +5 位作者 姜莎莎 李燕 孙吉平 王慧芳 于琳华 郭尚武 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第21期2473-2476,共4页
目的观察单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、转化生长因子β1(TGF-β1)及结缔组织生长因子(CTGF)在链脲佐菌素(STZ)诱发的2型糖尿病肾病大鼠肾组织中的表达。方法将35只SD雄性大鼠随机分为对照组14只和糖尿病肾病组21只。糖尿病肾病组给予高... 目的观察单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、转化生长因子β1(TGF-β1)及结缔组织生长因子(CTGF)在链脲佐菌素(STZ)诱发的2型糖尿病肾病大鼠肾组织中的表达。方法将35只SD雄性大鼠随机分为对照组14只和糖尿病肾病组21只。糖尿病肾病组给予高脂饮食,产生胰岛素抵抗后一次性腹腔注射STZ,35 mg/kg;对照组给予常规饲料,腹腔注射等量的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。采用免疫组织化学法检测两组大鼠肾组织3种因子的表达。结果 MCP-1、TGF-β1、CTGF在STZ诱导的2型糖尿病肾病大鼠肾组织中(主要在肾小管)有较强的表达,糖尿病肾病组大鼠3种因子的平均吸光度分别为(0.29±0.04)、(0.20±0.02)、(0.20±0.02),对照组大鼠分别为(0.21±0.02)、(0.17±0.01)、(0.16±0.02),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 MCP-1、TGF-β1、CTGF在STZ诱导的2型糖尿病肾病大鼠肾组织中表达增强,参与了糖尿病肾病早期的发病。 展开更多
关键词 单核细胞趋化蛋白1 转化生长因子β1 结缔组织生长因子 糖尿病肾病 模型 动物
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胰岛素在培养的乳鼠心肌成纤维细胞对纤维连接蛋白、层粘连蛋白和转化生长因子β_1表达的影响 被引量:5
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作者 林岚 洪华山 +2 位作者 陈若函 王一波 江琼 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2003年第1期18-22,共5页
目的 :研究胰岛素对心肌成纤维细胞胞外基质纤维连接蛋白 (fibronectin ,FN)、层粘连蛋白 (lami nin ,LN)及细胞因子转化生长因子 β1(TGFβ1)表达的影响 ,探讨其在心肌肥厚中的作用。方法 :乳鼠心肌成纤维细胞的培养并鉴定 ;用Streptav... 目的 :研究胰岛素对心肌成纤维细胞胞外基质纤维连接蛋白 (fibronectin ,FN)、层粘连蛋白 (lami nin ,LN)及细胞因子转化生长因子 β1(TGFβ1)表达的影响 ,探讨其在心肌肥厚中的作用。方法 :乳鼠心肌成纤维细胞的培养并鉴定 ;用Streptavidin Peroxi dase (SP)染色方法 ,比较胰岛素实验组和对照组乳鼠心肌成纤维细胞FN、LN及TGFβ1的表达。结果 :培养的细胞经形态学观察和波形蛋白 (vimentin)SP染色 ,证实为心肌成纤维细胞 ;10 -8mol·L-1胰岛素实验组细胞膜上FN和细胞浆内TGFβ1的表达明显强于对照组 (P <0 .0 1) ;LN在培养的心肌成纤维细胞上基本不表达。结论 :在体外 ,胰岛素具有促进心肌成纤维细胞胞外基质FN堆积的作用 ,可能参与了心肌肥厚的发生和发展 ,其机制可能与胰岛素促进心肌成纤维细胞TGFβ1的合成与分泌有关。 展开更多
关键词 药效学 胰岛素 成纤维细胞 纤维连接蛋白 层粘连蛋白 转化生长因子β1 心肌肥厚
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不同强度耐力运动对大鼠心房Ⅰ型、Ⅲ胶原蛋白的影响及结缔组织生长因子的调节作用 被引量:7
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作者 王世强 常芸 +1 位作者 马晓雯 饶志坚 《中国运动医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第10期971-976,共6页
目的:探讨不同强度耐力运动对大鼠心房Ⅰ型胶原蛋白(Col-I)和Ⅲ型胶原蛋白(Col-III)的影响,并研究结缔组织生长因子(CTGF)的表达变化,为探究运动性心房纤颤的发生机制提供依据。方法:24只健康雄性SD大鼠随机分为安静组、中强度组和大强... 目的:探讨不同强度耐力运动对大鼠心房Ⅰ型胶原蛋白(Col-I)和Ⅲ型胶原蛋白(Col-III)的影响,并研究结缔组织生长因子(CTGF)的表达变化,为探究运动性心房纤颤的发生机制提供依据。方法:24只健康雄性SD大鼠随机分为安静组、中强度组和大强度组,每组8只。进行16周的运动训练,每周训练5天,每天1小时。16周末处死大鼠摘取心脏后分离出右心房,应用RT-PCR、免疫荧光化学和Western Blot技术测定Col-I、Col-III和CTGF基因与蛋白的表达。结果:与安静组相比,大强度组Col-I m RNA和蛋白的表达显著升高(P<0.05和P<0.01);Col-III m RNA增加但无显著性,蛋白表达显著性升高(P<0.01);Col-I/Col-III蛋白表达的比值显著升高(P<0.01);CTGF m RNA和蛋白的表达均显著升高(P<0.05)。与安静组相比,中强度组Col-I m RNA和蛋白的表达增加,但无统计学差异;Col-III m RNA表达显著性降低(P<0.01),蛋白表达无显著性变化;Col-I/Col-III蛋白表达比值增高,但无显著性;CTGF m RNA表达增高而蛋白表达降低,但均无显著性。结论:长期大强度运动可导致大鼠心房Col-I和Col-III显著增加、Col-I/Col-III比例发生失衡,可能与长期大强度运动诱导大鼠心房CTGF的表达增加有关,构成了运动性心房纤颤发生的重要病理机制之一。 展开更多
关键词 耐力运动 胶原蛋白 结缔组织生长因子 大鼠 心房
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人尿道狭窄瘢痕组织中胶原蛋白含量和转化生长因子β_1的表达及意义 被引量:9
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作者 程伟 孙润芹 +1 位作者 呼冬利 赵世平 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期207-208,共2页
目的探讨人尿道瘢痕组织中胶原蛋白含量和转化生长因子β1(TGF-β1)的表达及其意义。方法应用免疫组织化学SP法和VG染色方法检测了16例尿道狭窄患者及6例正常人尿道组织中的TGF-β1表达和胶原蛋白含量。结果尿道狭窄瘢痕组织中TGF-β1... 目的探讨人尿道瘢痕组织中胶原蛋白含量和转化生长因子β1(TGF-β1)的表达及其意义。方法应用免疫组织化学SP法和VG染色方法检测了16例尿道狭窄患者及6例正常人尿道组织中的TGF-β1表达和胶原蛋白含量。结果尿道狭窄瘢痕组织中TGF-β1蛋白表达较强,阳性表达率100%,且其表达主要集中在瘢痕成纤维细胞、巨噬细胞及血管内皮细胞的胞浆和胞膜;而正常尿道组织中TGF-β1表达较弱,阳性表达率仅为33.3%。两组比较差异有显著性(P<0.05)。VG染色结果显示尿道瘢痕组织中胶原纤维染色密集,成束状排列;而正常尿道组织胶原纤维染色淡,成网状排列。结论TGF-β1和胶原蛋白与尿道瘢痕形成关系密切,抑制TGF-β1过度表达将有助于预防和减轻尿道狭窄的发生。 展开更多
关键词 尿道瘢痕 转化生长因子Β1 胶原蛋白 免疫组织化学
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胃癌中骨桥蛋白、结缔组织生长因子的表达及其意义 被引量:7
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作者 刘鲁英 韩艳春 +1 位作者 赵铭锋 吴淑华 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期130-134,共5页
目的探讨骨桥蛋白(osteopontin,OPN)和结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)及其联合检测在判断胃癌患者预后中的意义。方法应用免疫组化PowerVision法检测108例胃癌组织中OPN及CTGF的表达,分析OPN、CTGF表达与患者... 目的探讨骨桥蛋白(osteopontin,OPN)和结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)及其联合检测在判断胃癌患者预后中的意义。方法应用免疫组化PowerVision法检测108例胃癌组织中OPN及CTGF的表达,分析OPN、CTGF表达与患者临床病理特征、术后生存时间之间的关系。结果 TNM III/IV期患者中OPN阳性率高于Ⅰ/Ⅱ期(P<0.001),OPN阳性的患者更易发生淋巴结转移(P=0.002)和远处转移(P=0.022),并且OPN表达与肿瘤浸润深度正相关(P=0.015)。CTGF高表达常见于发生淋巴结转移的病例(P=0.038)。OPN阳性的患者术后5年生存率低于OPN阴性的患者(P<0.001)。高表达CTGF的患者术后5年生存率低于低表达CTGF的患者(P=0.003)。分析联合检测OPN和CTGF在胃癌组织中的表达发现OPN阳性/CTGF高表达组、OPN阳性/CTGF低表达或者OPN阴性/CTGF高表达组与OPN阴性/CTGF低表达组3组之间患者的术后生存率存在显著差异(4.2%3、4.1%6、0.5%,P<0.001)。Cox回归分析结果表明TNM分期(P<0.001)、分化程度(P=0.01)和OPN/CTGF联合表达水平(P<0.001)是胃癌患者的独立预后因子。结论组织中OPN、CT-GF表达与胃癌的生物学特征密切相关,尤其是联合检测OPN/CTGF两种蛋白是指示胃癌患者预后的独立指标。 展开更多
关键词 胃肿瘤 骨桥蛋白 结缔组织生长因子 淋巴结转移 预后
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高糖对肝星状细胞T_6表达结缔组织生长因子、血小板衍化生长因子BB及层黏蛋白和透明质酸的影响 被引量:4
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作者 苌新明 焦明丽 +1 位作者 任莉 常远红 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期739-741,共3页
目的研究高糖对肝星状细胞T(6HSC-T6)表达结缔组织生长因子(CTGF)、血小板衍化生长因子BB(PDGF-BB)及层黏蛋白(LN)、透明质酸(HA)的影响。方法按不同葡萄糖浓度进行分组,并设葡萄糖对照组和高渗对照组。处理HSC-T648和72h后,用免疫组织... 目的研究高糖对肝星状细胞T(6HSC-T6)表达结缔组织生长因子(CTGF)、血小板衍化生长因子BB(PDGF-BB)及层黏蛋白(LN)、透明质酸(HA)的影响。方法按不同葡萄糖浓度进行分组,并设葡萄糖对照组和高渗对照组。处理HSC-T648和72h后,用免疫组织化学方法及放射免疫分析法测胞浆内CTGF和PDGF-BB的表达及细胞上清液中LN和HA的表达。结果HSC-T6在高糖环境中培养48h后,高浓度组(4500和6000mg/L)胞浆中CTGF和PDGF-BB表达较对照组和高渗对照组明显增加;在高糖环境中培养72h后,高浓度组(4500和6000mg/L)细胞上清液中HA及LN表达较对照组和高渗对照组增加。结论高血糖作为糖尿病的重要表现,可能通过刺激HSC分泌CTGF、PDGF-BB、HA及LN促进肝纤维化。 展开更多
关键词 肝星状细胞 结缔组织生长因子 血小板衍化生长因子 透明质酸 层黏蛋白
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转化生长因子-β对基质金属蛋白酶及其组织抑制因子调控的研究进展 被引量:17
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作者 林海燕 王红梅 祝诚 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第1期7-12,共6页
基质金属蛋白酶 (MMPs)及其组织抑制因子 (TIMPs)参与调控胞外基质 (ECM)的降解与重建 ,二者的协同作用以及表达的动态平衡保证组织的生理 /病理形态结构建成 ,并完成生长、分化、维持、降解的往复周期 .转化生长因子 β (TGF β)通过对... 基质金属蛋白酶 (MMPs)及其组织抑制因子 (TIMPs)参与调控胞外基质 (ECM)的降解与重建 ,二者的协同作用以及表达的动态平衡保证组织的生理 /病理形态结构建成 ,并完成生长、分化、维持、降解的往复周期 .转化生长因子 β (TGF β)通过对MMPs和TIMPs家族成员因细胞类型而异的基因表达调控作用 ,表现出调节ECM重建的生物学效应 .TGF β可通过激活Smad通路、促分裂原活化蛋白激酶 (MAPK)通路 ,以及刺激激活蛋白 1(AP 1)复合体的形成 ,完成对MMPs和TIMPs基因表达的调控功能 . 展开更多
关键词 转化生长因子 基质金属蛋白 组织抑制因子 TIMPS 基因表达 调控作用 研究进展 MAPK信号通路
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高糖对足细胞表达结缔组织生长因子及其受体蛋白的调节 被引量:4
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作者 李永强 肖跃飞 +2 位作者 黄海长 李惊子 袁维中 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期262-265,共4页
目的:研究长期高糖对体外培养的足细胞表达结缔组织生长因子(CTGF)及其受体———低密度脂蛋白受体相关蛋白(LRP)的影响以及可能涉及的信号途径。方法:以体外培养的小鼠肾小球足细胞为研究对象,应用Western印迹分析技术,检测高糖刺激不... 目的:研究长期高糖对体外培养的足细胞表达结缔组织生长因子(CTGF)及其受体———低密度脂蛋白受体相关蛋白(LRP)的影响以及可能涉及的信号途径。方法:以体外培养的小鼠肾小球足细胞为研究对象,应用Western印迹分析技术,检测高糖刺激不同时间对足细胞表达CTGF蛋白的影响。观察高糖对丝裂素激活蛋白激酶(MAPKS)信号途径活化的影响以及MAPKS信号途径在高糖调节足细胞表达CTGF中的作用,同时检测高糖对足细胞CTGF的受体LRP蛋白的影响。结果:体外培养足细胞表达基础水平的CTGF蛋白,高糖刺激2天后足细胞表达CTGF水平开始升高,第4天达高峰,第6天下降,第8天降至对照组水平。正常糖和甘露醇组CTGF蛋白没有明显变化。高糖可以激活足细胞外信号调节激酶(ERK1/2),于刺激30min时ERK1/2即开始活化,6h达高峰,持续至24h,48h接近基础水平。正常糖和甘露醇在各个时间点均不活化ERK1/2。应用ERK1/2活化特异抑制剂PD98059可以消减高糖刺激CTGF表达增加的效应。在各个时间点,长期高糖环境对足细胞CTGF的受体LRP蛋白没有明显作用。结论:短期(2~4d)高糖通过活化ERK1/2信号通路刺激足细胞CTGF的表达,高糖继续培养(6~8d)对足细胞内的CTGF蛋白表达水平没有影响。长期高糖环境对足细胞上CTGF的受体LRP蛋白的表达无影响。 展开更多
关键词 高糖 结缔组织生长因子 LDL受体相关蛋白质类 足细胞
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负载转化生长因子β1的生物蛋白胶促进骨髓间充质干细胞体内构建组织工程软骨 被引量:4
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作者 葛薇 姜文学 +3 位作者 李长虹 尤佳 邱录贵 赵春华 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期692-695,i0011-i0012,共6页
目的探讨负载转化生长因子β1(TGF-β1)的生物蛋白胶(FS)促进骨髓间充质干细胞(BMSCs)体内构建组织工程软骨的可能性。方法体外分离扩增健康人BMSCsK以含有TGF-β1、地塞米松的特定培养基进行软骨起源的诱导。将诱导7d的BMSCs分别与含... 目的探讨负载转化生长因子β1(TGF-β1)的生物蛋白胶(FS)促进骨髓间充质干细胞(BMSCs)体内构建组织工程软骨的可能性。方法体外分离扩增健康人BMSCsK以含有TGF-β1、地塞米松的特定培养基进行软骨起源的诱导。将诱导7d的BMSCs分别与含或不含有TGF-β1的FS复合后接种于裸鼠背部,作为BMSCs+FS-TGF-β1和BMSCs+FS实验组,同时设只注射FS和BMSCs的对照组。12周后从裸鼠体内取出组织工程标本进行大体观察、湿重测定、蛋白聚糖含量测定,并进行组织学及免疫组织化学检测。结果BMSCs以特定培养基诱导后可具备软骨细胞的形态和功能特征。复合物接种后两个实验组均可形成软骨样组织块,BMSCs+FS-TGF-β1组与BMSCs+FS组相比,可形成体积和重量更大的软骨样复合物;阿尔新兰染色显示具有更多的细胞外基质分泌;蛋白聚糖含量明显增高;免疫组织化学检测Ⅱ型胶原表达增强。而两个对照组无软骨样组织块形成。结论负载TGF-!1的FS支架可以促进BMSCs体内构建组织工程软骨。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 转化生长因子Β1 可注射软骨 生物蛋白 组织工程
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厄贝沙坦对高糖刺激的大鼠肾小球系膜细胞结缔组织生长因子及膜型基质金属蛋白酶-1表达的影响 被引量:3
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作者 姚芳 闫喆 +2 位作者 史永红 郝军 段惠军 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期531-535,共5页
目的研究血管紧张素Ⅱ受体1拮抗剂厄贝沙坦对高糖刺激的大鼠肾小球系膜细胞结缔组织生长因子(CTGF)和膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)表达的影响。方法体外培养的大鼠肾小球系膜细胞,分别给予高糖和厄贝沙坦干预,采用RT-PCR及Western blo... 目的研究血管紧张素Ⅱ受体1拮抗剂厄贝沙坦对高糖刺激的大鼠肾小球系膜细胞结缔组织生长因子(CTGF)和膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)表达的影响。方法体外培养的大鼠肾小球系膜细胞,分别给予高糖和厄贝沙坦干预,采用RT-PCR及Western blot法分别检测CTGF和MT1-MMP的mRNA及蛋白的表达,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养上清中Ⅳ型胶原的含量。结果与对照组相比,高糖组各时间点系膜细胞CTGF表达明显上调,Ⅳ型胶原的分泌增加,且二者随时间持续增高;而MT1-MMP的表达则随时间呈明显下降趋势。厄贝沙坦能够抑制高糖引起的上述变化。结论高糖可诱导肾小球系膜细胞CTGF表达增加,抑制MT1-MMP的表达。厄贝沙坦抑制肾小球系膜细胞基质分泌的作用可能部分通过抑制CTGF,增加MT1-MMP的表达而实现。 展开更多
关键词 厄贝沙坦 肾小球系膜细胞 结缔组织生长因子 型基质金属蛋白
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转化生长因子β1和骨形态发生蛋白-9在人骨不连组织中的表达及其临床意义 被引量:3
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作者 刘春风 刘文琦 +4 位作者 刘傥 刘小平 王振 刘进炼 刘超群 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期49-53,共5页
目的:检测肥大性骨不连组织与萎缩性骨不连组织中转化生长因子β1和骨形态发生蛋白-9表达的差异,评价两种骨不连组织在成骨潜能上的区别。方法:收集2010年至2014年中南大学湘雅二医院和上海交通大学医学院苏州九龙医院骨科住院的肥大性... 目的:检测肥大性骨不连组织与萎缩性骨不连组织中转化生长因子β1和骨形态发生蛋白-9表达的差异,评价两种骨不连组织在成骨潜能上的区别。方法:收集2010年至2014年中南大学湘雅二医院和上海交通大学医学院苏州九龙医院骨科住院的肥大性和萎缩性骨不连患者各20例。利用免疫组织化学SP二步法及病理图像分析软件IPP6.0对骨不连断端间组织转化生长因子β1和骨形态发生蛋白-9的表达进行半定量分析。根据骨不连类型、患者年龄和骨不连时间对其进行统计学分析。结果:肥大性骨不连患者中转化生长因子β1和骨形态发生蛋白-9的吸光度值分别为0.3236±0.0390和0.1337±0.0400,萎缩性骨不连患者中转化生长因子β1和骨形态发生蛋白-9的吸光度值分别为0.3191±0.0369和0.1373±0.0423,两者标本中的吸光度值差异均无明显统计学意义(均P>0.05)。转化生长因子β1和骨形态发生蛋白-9在不同年龄、不同骨不连时间中的吸光度值差异也均无明显统计学意义(均P>0.05)。结论:肥大性骨不连组织和萎缩性骨不连组织在成骨潜能上无明显差异。 展开更多
关键词 骨不连 转化生长因子Β1 骨形态发生蛋白-9 免疫组织化学
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病理性瘢痕组织中基质金属蛋白酶-1、金属蛋白酶组织抑制剂-1、血小板源性生长因子、增殖细胞核抗原的表达 被引量:4
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作者 郭丽丽 陈言汤 +1 位作者 牛扶幼 刘林嶓 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2006年第6期1027-1030,共4页
目的探讨病理性瘢痕组织中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)、血小板源性生长因子(PDGF)、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达及意义。方法采用免疫组织化学方法检测58例病理性瘢痕、16例正常皮肤及16例非病理性瘢痕... 目的探讨病理性瘢痕组织中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)、血小板源性生长因子(PDGF)、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达及意义。方法采用免疫组织化学方法检测58例病理性瘢痕、16例正常皮肤及16例非病理性瘢痕组织中MMP-1、TIMP-1、PDGF及PCNA的表达情况。结果病理性瘢痕组织中MMP-1、TIMP-1、PDGF阳性表达率及PCNA指数均高于非病理性瘢痕及正常皮肤组织(P均<0.05)。病理性瘢痕组织中TIMP-1与PDGF、MMP-1、PCNA及PDGF与PCNA表达均呈正相关(P均<0.05)。结论病理性瘢痕的形成与MMP-1、TIMP-1、PDGF及PCNA相互作用失衡有关。 展开更多
关键词 增生性瘢痕 瘢痕疙瘩 基质金属蛋白酶-1 金属蛋白组织抑制剂-1 血小板源性生长因子 增殖 细胞核抗原
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组织蛋白酶B和血管内皮生长因子在高氧诱导的视网膜新生血管中的作用 被引量:4
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作者 王文娟 周国宏 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期873-877,共5页
背景血管内皮生长因子(VEGF)在血管发育和新生血管形成中起着关键作用。研究表明,组织蛋白酶B(Cathepsin B)参与新生血管的生成,但其具体机制尚不明确。目的探讨Cathepsin B和VEGF在高氧诱导小鼠视网膜新生血管中的表达及二者之... 背景血管内皮生长因子(VEGF)在血管发育和新生血管形成中起着关键作用。研究表明,组织蛋白酶B(Cathepsin B)参与新生血管的生成,但其具体机制尚不明确。目的探讨Cathepsin B和VEGF在高氧诱导小鼠视网膜新生血管中的表达及二者之间的关系。方法应用随机数字表法将44只7日龄清洁级C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组、高氧诱导组、空白对照(NC)-绿色荧光蛋白(GFP)-慢病毒(Lv)组和Cathepsin B-RNA干扰(RNAi)-Lv组,每组11只小鼠22只眼。正常对照组小鼠在自然环境中生长;其余3个组7日龄小鼠置于氧体积分数为(75±2)%的密闭氧箱内饲养5 d,之后返回到正常环境中。高氧诱导组的12日龄小鼠不给予任何药物干预;NC-GFP-Lv组和Cathepsin B-RNAi-Lv组的12日龄小鼠分别给予玻璃体腔注射NC-GFP-Lv和Cathepsin B-RNAi-Lv各1 μl。取各组17日龄小鼠,颈椎脱臼法处死后剥取视网膜,分别采用real-time PCR和Western blot法检测小鼠视网膜中Cathepsin B和VEGF mRNA及蛋白的相对表达量。结果荧光显微镜下Cathepsin B-RNAi-Lv组视网膜新生血管分层和分支均较高氧诱导组和NC-GFP-Lv组少。各组Cathepsin B和VEGF mRNA总体比较,差异均有统计学意义(F=444.89,P=0.00;F=519.78,P=0.00),其中高氧诱导组、NC-GFP-Lv组和Cathepsin B-RNAi-Lv组小鼠视网膜中Cathepsin B和VEGF mRNA的相对表达量均明显高于正常对照组,Cathepsin B-RNAi-Lv组小鼠视网膜中Cathepsin B和VEGF mRNA的相对表达量均明显低于高氧诱导组和NC-GFP-Lv组,差异均有统计学意义(均P〈0.05)。各组Cathepsin B和VEGF蛋白总体比较,差异均有统计学意义(F=54.37,P=0.00;F=79.65,P=0.00),其中高氧诱导组、NC-GFP-Lv组和Cathepsin B-RNAi-Lv组小鼠视网膜中Cathepsin B和VEGF蛋白的相对表达水平均明显高于正常对照组,Cathepsin B-RNAi-Lv组小鼠视网膜中Cathepsin B和VEGF蛋白的相对表达水平均明显低于高氧诱导组和NC-GFP-Lv组,差异均有统计学意义(均P〈0.05)。结论高氧诱导的视网膜新生血管中Cathepsin B和VEGF高表达,Cathepsin B-RNAi-Lv可以抑制Cathepsin B和VEGF mRNA和蛋白的表达水平,VEGF表达的改变可能是受Cathepsin B表达的影响。 展开更多
关键词 组织蛋白酶B 血管内皮生长因子 视网膜新生血管
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血管内皮生长因子、基质金属蛋白酶-9及组织金属蛋白酶抑制剂在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义 被引量:7
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作者 韩琦 孔娜 伍钢 《中国医学前沿杂志(电子版)》 2015年第5期109-111,共3页
目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织中血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、组织金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)的表达水平及其与病理特征的相关性。方法收集2012年6月至2014年6月本院NSCLC患者手术切除的病理组织标本76例,采... 目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织中血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、组织金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)的表达水平及其与病理特征的相关性。方法收集2012年6月至2014年6月本院NSCLC患者手术切除的病理组织标本76例,采用免疫组织化学法测定肺癌组织及癌旁正常组织中VEGF、MMP-9、TIMP-1的表达水平。结果 NSCLC组织中VEGF、MMP-9、TIMP-1的阳性表达率显著高于癌旁正常组织(χ2=42.3693、35.3032、34.4533,P<0.01);腺癌中VEGF、MMP-9、TIMP-1的表达水平高于鳞癌,但差异无显著性(χ2=2.0234、1.3189、2.8533,P>0.05);VEGF、MMP-9、TIMP-1的表达与TNM分期及淋巴结转移呈正相关(P<0.05),与组织分化程度无关(P>0.05)。结论 NSCLC中VEGF、MMP-9、TIMP-1表达水平可在一定程度上预测肿瘤侵袭、转移情况,VEGF、MMP-9、TIMP-1表达在不同程度上相互作用促进NSCLC恶化。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 基质金属蛋白酶-9 组织金属蛋白酶抑制剂-1 血管内皮生长因子
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转化生长因子-1和基质金属蛋白酶抑制因子-1在肝硬化组织中的表达及其临床意义 被引量:4
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作者 蒋莹 阿依吐拉 《临床肝胆病杂志》 CAS 2009年第1期39-41,共3页
目的了解转化生长因子-1(TGFβ1)和基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP1)在肝硬化组织中的表达和分布状态。方法采用免疫组化法(S-P)。检测10例对照肝组织,57例肝硬化患者肝组织中TGFβ1、TIMP1的表达。结果57例肝硬化患者肝组织中TGFβ... 目的了解转化生长因子-1(TGFβ1)和基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP1)在肝硬化组织中的表达和分布状态。方法采用免疫组化法(S-P)。检测10例对照肝组织,57例肝硬化患者肝组织中TGFβ1、TIMP1的表达。结果57例肝硬化患者肝组织中TGFβ1、TIMP1蛋白表达的阳性率分别为90.38%、100%,而正常肝组织未见阳性表达,差异有统计学意义(P<0.01)。TGFβ1、TIMP1表达的阳性信号均位于肝细胞胞浆中,细胞核中无表达。结论(1)肝硬化患者肝细胞中存在TGFβ1、TIMP1的表达,其表达强度与肝组织病理改变相关。提示TGFβ1与TIMP1的表达与肝纤维化活动状态密切相关,在肝纤维化的形成和发展中具有重要意义。(2)检测TGFβ1、TIMP1的表达可对肝硬化病变从分子水平进行评估,也可作为早期诊断及临床治疗和判断预后的分子病理学指标。 展开更多
关键词 肝硬化 转化生长因子-1 基质金属蛋白组织抑制因子-1 细胞外基质 免疫组织化学
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重症病毒性肝炎肝组织胶原蛋白和血小板衍生生长因子-1的表达 被引量:1
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作者 张志安 黄元成 石淑仙 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期24-26,106,共4页
目的 了解重症病毒性肝炎患者肝组织I型前胶原mRNA、血小板衍生生长因子-1(PDGF-1)mRNA及Ⅰ、Ⅳ型胶原蛋白的表达情况,探讨重症病毒性肝炎纤维化发生的分子机制。方法 将重症病毒性肝炎肝组织标本20例,非肝病患者肝组织6例,用原位杂交... 目的 了解重症病毒性肝炎患者肝组织I型前胶原mRNA、血小板衍生生长因子-1(PDGF-1)mRNA及Ⅰ、Ⅳ型胶原蛋白的表达情况,探讨重症病毒性肝炎纤维化发生的分子机制。方法 将重症病毒性肝炎肝组织标本20例,非肝病患者肝组织6例,用原位杂交法检测肝组织I型前胶原和PDGF-1 mRNA的表达,用免疫组化法观察肝组织Ⅰ、Ⅳ型胶原蛋白的沉积、分布和含量,用天狼红染色观察肝组织总的胶原含量。结果 与正常肝组织相比,重症病毒性肝炎患者的肝组织Ⅰ型前胶原和PDGF-1 mRNA的表达显著增加,Ⅰ、Ⅳ型胶原蛋白大量沉积。PDGF-1mRNA的表达与Ⅰ型前胶原mRNA的表达呈显著正相关,和总的胶原含量,Ⅰ、Ⅳ型胶原蛋白的表达也呈显著正相关,Ⅰ型前胶原mRNA的表达和Ⅰ型胶原蛋白的表达呈显著正相关。结论 PDGF-1 mRNA与Ⅰ型前胶原mRNA表达的增加是导致肝组织胶原蛋白合成增加,重症病毒性肝炎发展成肝纤维化乃至肝硬化的原因之一。 展开更多
关键词 重症病毒性肝炎 组织 胶原蛋白 血小板衍生生长因子-1 表达
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