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HPV16 E6-295T/G和E6-350T/G变异位点影响IFNκ、MHC-Ⅰ、STAT1和IRF9蛋白质表达的研究
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作者 李杨杨 辛慧珍 +5 位作者 郭柄轩 王慧娟 宋树言 李洪涛 李冬妹 潘泽民 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2024年第2期223-231,共9页
目的探讨HPV16(Human Papillomavirus Type 16)E6-295T/G和E6-350T/G变异位点对IFNκ、MHC-Ⅰ、STAT1和IRF9蛋白质表达的影响。方法在宫颈癌细胞C33A(HPV阴性)中分别转染真核表达载体295G/350G-GV230、295T/350G-GV230和295T/350T-GV23... 目的探讨HPV16(Human Papillomavirus Type 16)E6-295T/G和E6-350T/G变异位点对IFNκ、MHC-Ⅰ、STAT1和IRF9蛋白质表达的影响。方法在宫颈癌细胞C33A(HPV阴性)中分别转染真核表达载体295G/350G-GV230、295T/350G-GV230和295T/350T-GV230作为实验组,以NC-GV230作为对照组。通过免疫组织化学法、Western blot方法检测HPV16 E6295T/G、350T/G不同变异位点对IFNκ、MHC-Ⅰ、STAT1和IRF9蛋白质表达的影响。通过IBM SPSS Statistics 26软件对实验结果进行统计学分析,P<0.05为差异具有统计学意义,免疫组织化学法定量采用image J软件进行阳性细胞计数。结果Western blot结果显示,免疫分子干扰素κ(Interferon Kappa,IFNκ)的表达,HPV16 E6-295G/350G变异组较HPV16 E6-295T/350T原型组和HPV16 E6-295T/350G组降低(P<0.01,P<0.05)。HPV16 E6-295G/350G变异组的免疫分子主要组织相容性复合体I类(Major Histocompatibility Complex Class I,MHC-I)的表达显著低于HPV16 E6-295T/350T原型组和HPV16 E6-295T/350G组(P<0.05)。HPV16 E6-295G/350G变异组的信号转导子和转录激活子1(Signal Transducer and Activator of Transcription 1,STAT1)表达显著低于HPV16 E6-295T/350T原型组和HPV16 E6-295T/350G组(P<0.05,P<0.01)。变异组HPV16 E6-295G/350G与HPV16 E6-295T/350T原型组和HPV16 E6-295T/350G变异组相比,干扰素调节因子9(Interferon Regulatory Factor 9,IRF9)表达显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论HPV16病毒E6蛋白质可以降低IFNκ、MHC-Ⅰ、STAT1和IRF9的蛋白质表达水平,E6基因T295G/T350G变异降低这些分子的表达作用最强。 展开更多
关键词 宫颈癌 HPV16 E6基因 基因变异 蛋白质表达
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信号肽及其在蛋白质表达中的应用 被引量:65
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作者 韦雪芳 王冬梅 +1 位作者 刘思 周鹏 《生物技术通报》 CAS CSCD 2006年第6期38-42,共5页
分子生物学研究已进入后基因组时代,其中心任务是更多地关注基因组表达的蛋白质的结构和功能。由于基因功能最终通过其表达产物——蛋白质来实现,因此,要了解基因组全部功能活动,最终也必须回到蛋白质上。另外,在菌株、培养和发酵等逐... 分子生物学研究已进入后基因组时代,其中心任务是更多地关注基因组表达的蛋白质的结构和功能。由于基因功能最终通过其表达产物——蛋白质来实现,因此,要了解基因组全部功能活动,最终也必须回到蛋白质上。另外,在菌株、培养和发酵等逐渐成熟的条件下,构建高效的表达载体以提高外源蛋白质的表达量是降低工业化生产成本的关键。随着研究的深入,发现信号肽对蛋白质的定位有着非常重要的作用,使得信号肽的研究不仅具有重要的理论意义,而且也具有潜在的应用价值。就信号肽的结构和功能,信号肽的捕获方法及其在原核表达系统和真核表达系统中表达外源蛋白质的应用做一些介绍。 展开更多
关键词 信号肽 捕获 原核表达系统 真核表达系统 蛋白质表达
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前脑缺血再灌流后大鼠海马NMDA受体亚单位NR2A和NR2B蛋白质表达的变化 被引量:31
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作者 徐铁军 樊红彬 +1 位作者 张凤真 彭裕文 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期110-116,T024,共8页
用免疫组织化学和图像处理方法 ,观察分析了大鼠前脑缺血 15 min后再灌流 2 h~ 7d的海马结构各区域 NMDA受体亚单位 NR2 A和 NR2 B的表达变化规律及其差异 ,藉以探讨二者在缺血性脑损伤中的作用。结果显示 :( 1) NR2 A在 CA1 区和CA3 ... 用免疫组织化学和图像处理方法 ,观察分析了大鼠前脑缺血 15 min后再灌流 2 h~ 7d的海马结构各区域 NMDA受体亚单位 NR2 A和 NR2 B的表达变化规律及其差异 ,藉以探讨二者在缺血性脑损伤中的作用。结果显示 :( 1) NR2 A在 CA1 区和CA3 区的表达于再灌早期表现为小幅度下降 ( P<0 .0 5 ) ,此趋势在 CA3 区可以逆转 ;但在 CA1 区逐渐加剧 ,第 7d时降至 2 1% ,NR2 A在齿状回的表达几无改变 ;( 2 )与 NR2 A不同 ,再灌后 2 h,NR2 B在 CA1 区的表达即较对照组增高 ( P<0 .0 5 ) ,并持续到再灌后 2 4h,之后转而急剧下降 ,至第 7d仅余 11% ;在 CA3 区及齿状回 ,再灌后 6~ 48h,NR2 B的表达也较对照组增高 ( P<0 .0 5 ) ;在再灌后 72 h则恢复至对照组水平。结果提示 ,缺血性脑损伤后 NR2 A和 NR2 B表达变化的不同可能是造成 CA1 区。 展开更多
关键词 前脑缺血 再灌流 大鼠海马 NMDA受体亚单位 NR2A NR2B 蛋白质表达 免疫组织化学
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中药益气解毒颗粒对鼻咽癌裸鼠移植瘤蛋白质表达的影响 被引量:12
4
作者 唐发清 田道法 +5 位作者 邓富良 龚志君 周辉 梁湘辉 李茂玉 肖志强 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期577-582,共6页
目的 :探讨中药复方益气解毒颗粒抑制鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤生长的分子机制。方法 :将鼻咽癌细胞系HNE1接种至BABL/c裸小鼠 ,2 0只 ,每只 0 .5× 10 7个 ,待移植瘤生长至一定大小 (约 1cm× 1cm× 1cm) ,随机分为两组。中药... 目的 :探讨中药复方益气解毒颗粒抑制鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤生长的分子机制。方法 :将鼻咽癌细胞系HNE1接种至BABL/c裸小鼠 ,2 0只 ,每只 0 .5× 10 7个 ,待移植瘤生长至一定大小 (约 1cm× 1cm× 1cm) ,随机分为两组。中药组灌喂益气解毒颗粒药液 ,对照组灌喂生理盐水 ,30d后处死裸鼠 ,解剖获取肿瘤组织 ,测量瘤体体积大小 ,称量瘤体重量。取 10 0mg瘤体组织 ,常规提取总蛋白质 ,用固相 pH梯度双向凝胶电泳分离移植瘤组织的总蛋白质 ,银染显色 ,ImageMaster 2DElite 4 .0 1软件分析差异蛋白质点。随机选取表达差异点共 19个 ,4个点为只在中药组表达 ,4个点仅在对照中表达 ,余下 11个为表达相差 5倍以上的点 ,进行质谱鉴定和生物信息学分析。结果 :益气解毒颗粒药液能明显抑制鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤的生长 ,灌喂中药组瘤体积和重量分别为 (0 .2 0 7± 0 .0 2 3)cm3和 (0 .132± 0 .0 2 1) g ,对照组为 (1.342± 0 .2 98)cm3 和 (1.0 17± 0 .0 15 ) g(P <0 .0 5 ) ;制率为 84 .5 8%。双向电泳图像分析蛋白质表达 ,益气解毒颗粒药物处理组平均蛋白质数为 5 6 7± 4 9,未处理组的平均蛋白质数为 6 79± 5 9;差异蛋白质有 2 4 3个 ,其中有 112个表达增强 ,有 131蛋白质表达下降 ;差异蛋白质的质谱鉴定和生物? 展开更多
关键词 益气 解毒 中药 瘤体 裸鼠移植瘤 药组 蛋白质表达 蛋白质 固相PH梯度 特异表达
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超级稻花后强、弱势粒灌浆相关蛋白质表达的差异 被引量:8
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作者 陈婷婷 谈桂露 +2 位作者 褚光 刘立军 杨建昌 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期1471-1482,共12页
为进一步揭示水稻强、弱势粒灌浆差异的机制,以2个超级稻品种两优培九(两系杂交籼稻)和淮稻9号(粳稻)为材料,通过双向电泳观察花后强、弱势粒灌浆相关蛋白质表达的差异并对差异蛋白进行质谱分析。结果表明,弱势粒花后3~15d的灌浆速率... 为进一步揭示水稻强、弱势粒灌浆差异的机制,以2个超级稻品种两优培九(两系杂交籼稻)和淮稻9号(粳稻)为材料,通过双向电泳观察花后强、弱势粒灌浆相关蛋白质表达的差异并对差异蛋白进行质谱分析。结果表明,弱势粒花后3~15d的灌浆速率和最终粒重均显著小于强势粒。花后3d、8d和15d弱势粒中蛋白质表达的点少于强势粒,花后25d则弱势粒多于强势粒。花后强、弱势粒间差异蛋白质表达量在2倍以上的点有类似变化趋势。选择有显著差异的27个蛋白点进行质谱分析,其中14个点的功能得到鉴定。这些蛋白质分别参与籽粒的淀粉合成、蛋白合成、光合作用、能量代谢、环境适应以及细胞信号转导等。说明强、弱势粒间多种灌浆相关蛋白质表达的差异是其灌浆和粒重差异的重要原因。 展开更多
关键词 超级稻 强、弱势粒 灌浆相关蛋白质表达 蛋白质功能 籽粒灌浆
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高温对水稻叶片蛋白质表达的影响 被引量:6
6
作者 曹云英 段骅 +2 位作者 王志琴 刘立军 杨建昌 《生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第22期6009-6018,共10页
为明确高温对耐热性不同水稻品种叶片蛋白质表达的影响,以耐热性不同的2个籼稻品种双桂1号(不耐热)和黄华占(耐热)为材料,分别于苗期、减数分裂期及抽穗(始穗后0—10d)和灌浆早期(始穗后11—20d)进行高温处理,之后取材并采用双向凝胶电... 为明确高温对耐热性不同水稻品种叶片蛋白质表达的影响,以耐热性不同的2个籼稻品种双桂1号(不耐热)和黄华占(耐热)为材料,分别于苗期、减数分裂期及抽穗(始穗后0—10d)和灌浆早期(始穗后11—20d)进行高温处理,之后取材并采用双向凝胶电泳技术研究高温对不同水稻品种叶片蛋白质表达的影响。结果表明,高温胁迫导致叶片中蛋白质的变化呈4种状况:新蛋白质的产生,一些蛋白质表达量上调,一些蛋白质的表达被抑制,一些蛋白质表达量下调。蛋白质表达变化在两品种以及4个处理时期的表现不同,总体表现为在热敏感品种中表达谱发生变化的蛋白质总数高于耐热品种。质谱分析表明,差异蛋白质主要涉及光合作用和信号转导,该类蛋白质在热敏感品种中表现为不表达或表达量下降,而在耐热品种则表现为有新诱导的蛋白质的产生或表达量上调,表明参与光合作用和信号转导的蛋白质在水稻耐热机制中发挥了重要作用。 展开更多
关键词 高温 水稻 耐热性品种 叶片 蛋白质表达
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高温对豇豆叶片细胞膜脂过氧化和蛋白质表达的影响 被引量:8
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作者 崔萌 魏娟娟 +5 位作者 苏晓星 邓子贤 潘宇 李金华 苏承刚 张兴国 《西南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期21-27,共7页
分析了高温胁迫条件下豇豆[Vigna unguiculata(L.)Walpers]幼苗叶片细胞膜透性和保护酶活性等理化指标的变化及品种间的差异,分析了高温胁迫对豇豆叶片蛋白质表达的影响.结果显示,在高温胁迫下,8个豇豆品种的热害指数差异有统计学意义,... 分析了高温胁迫条件下豇豆[Vigna unguiculata(L.)Walpers]幼苗叶片细胞膜透性和保护酶活性等理化指标的变化及品种间的差异,分析了高温胁迫对豇豆叶片蛋白质表达的影响.结果显示,在高温胁迫下,8个豇豆品种的热害指数差异有统计学意义,直观表现为之豇28-2和白籽豇豆耐热性强,而高产四号、宁豇三号和红豇豆的耐热性差;所有豇豆品种的细胞膜透性和丙二醛(MDA)质量摩尔浓度均有不同程度的增大,但耐热性强的品种增幅较小;超氧化物歧化酶(SOD),过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性呈现出先上升后下降的变化趋势,而耐热性强的品种增幅较大;耐热豇豆品种的可溶性糖浓度及高温胁迫后的增值均低于耐热性较差的品种;双向电泳结果表明,高温胁迫特异性诱导了15种和抑制了6种蛋白质表达,另鉴别到8种上调和10种下调表达蛋白.表明高温胁迫引起一系列生理生化和基因表达的变化.该研究为今后解析豇豆的耐热机理、选育耐热品种和发掘重要抗热基因等奠定了基础. 展开更多
关键词 豇豆 高温胁迫 膜脂过氧化 防御酶 蛋白质表达
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新基因BRD7对鼻咽癌蛋白质表达谱影响的初步研究 被引量:6
8
作者 彭聪 谭琛 +5 位作者 张秋红 王晓艳 周鸣 黄河 王蓉 李小玲 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第5期721-725,共5页
BRD7基因是与鼻咽癌相关的候选抑瘤基因 .为了进一步研究该基因的作用机制 ,将pcDNA3 1(+) /BRD7的表达质粒经脂质体导入HNE1细胞 ,RNA斑点杂交筛选出阳性克隆 ,通过双向电泳分离过表达BRD7的HNE1细胞内蛋白质 ,筛选出差异表达的蛋白质... BRD7基因是与鼻咽癌相关的候选抑瘤基因 .为了进一步研究该基因的作用机制 ,将pcDNA3 1(+) /BRD7的表达质粒经脂质体导入HNE1细胞 ,RNA斑点杂交筛选出阳性克隆 ,通过双向电泳分离过表达BRD7的HNE1细胞内蛋白质 ,筛选出差异表达的蛋白质点 ,并进行质谱分析鉴定 .鉴定出 10种表达上调的蛋白质点 ,包括精氨 (基 )琥珀酸裂解酶 ,TSA (thio specificantioxdant) ,Proteaseomeactivator2 8betasubunit (PA2 8) ,金属蛋白酶抑制因子 2前体等 ,这些蛋白质涉及细胞生长 ,细胞代谢等很多相关事件 . 展开更多
关键词 鼻咽癌 蛋白质表达 BRD7基因 抑瘤基因
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油松毛虫取食和剪叶刺激胁迫下油松的蛋白质表达差异分析 被引量:6
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作者 王银翠 周国娜 +2 位作者 张斌 陈明叶 高宝嘉 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第8期68-75,共8页
【目的】研究自然环境条件下剪叶和油松毛虫不同取食刺激程度双重诱导对油松体内蛋白质表达的影响,揭示油松诱导防御反应的蛋白质基础。【方法】在河北省平泉县的油松-山杏混交林中,选取15年生左右生长势一致的油松,进行树上套笼饲养10... 【目的】研究自然环境条件下剪叶和油松毛虫不同取食刺激程度双重诱导对油松体内蛋白质表达的影响,揭示油松诱导防御反应的蛋白质基础。【方法】在河北省平泉县的油松-山杏混交林中,选取15年生左右生长势一致的油松,进行树上套笼饲养10头、30头油松毛虫和剪叶处理,以未处理油松为对照,采用双向电泳法测定油松体内蛋白质表达差异。【结果】通过蛋白质点表达量的计算,与对照相比,油松毛虫取食及剪叶刺激后,均有特异表达蛋白点、消失蛋白点、上调蛋白点及下调蛋白点,但不同处理间蛋白点的表达差异不同。对差异蛋白点进行质谱鉴定,数据库检索结果表明,油松毛虫取食后特异表达的蛋白点是叶绿体ATP合酶CF0β亚基、抗坏血酸过氧化物酶、噻唑生物合成酶、Lhcb5蛋白、ATP合酶β亚基以及蛋白类谷胱甘肽S-转移酶,下调表达的蛋白点是蛋白酶亚基和假定蛋白CL304Contig1_01;剪叶刺激后特异表达的蛋白点是tau蛋白类谷胱甘肽S-转移酶和Rubisco加氧酶,下调表达的蛋白点是磷酸甘油酸激酶Ⅰ和核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶大亚基。进一步分析表明,取食刺激处理后,胁迫和防御相关蛋白高度表达,并且30头松毛虫取食后,与蛋白合成相关的蛋白质也特异表达;剪叶处理后,胁迫和防御相关蛋白也有特异表达,而且能量代谢相关蛋白下调。说明取食和创伤刺激可明显诱导油松防御有关蛋白的表达、光合作用的增强、蛋白质的合成和能量代谢的降低等防御反应。【结论】取食和剪叶刺激可明显诱导油松防御有关蛋白的高表达、促进光合作用的增强和蛋白质的合成,降低能量代谢等,这些变化应是构成油松防御反应的蛋白质基础。 展开更多
关键词 油松 油松毛虫 诱导防御反应 取食 剪叶 蛋白质表达差异
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促芽肥对水稻再生芽萌发生长过程蛋白质表达的影响 被引量:10
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作者 陈鸿飞 张志兴 林文雄 《中国生态农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1405-1413,共9页
采用比较蛋白质组学的方法和技术,并结合相关生理指标测定,探讨了促芽肥对水稻再生芽萌发生长过程中蛋白质表达及相应生理特性的影响。共获得了20个在不同促芽肥下再生芽萌发生长过程出现差异表达的蛋白质点,涉及再生芽萌发生长过程的... 采用比较蛋白质组学的方法和技术,并结合相关生理指标测定,探讨了促芽肥对水稻再生芽萌发生长过程中蛋白质表达及相应生理特性的影响。共获得了20个在不同促芽肥下再生芽萌发生长过程出现差异表达的蛋白质点,涉及再生芽萌发生长过程的能量代谢、生长调控和抗逆响应等。在其他栽培措施一致的情况下,施用促芽肥能有效地降低再生芽萌发生长过程中能量代谢相关蛋白的下调幅度,提高光合相关蛋白的表达,从而使再生芽具有相对较强的能量合成能力和光合自养能力,更好地满足再生芽分化生长对能量和物质的需求;还能相对降低抑制再生芽萌发生长相关蛋白的表达,提高促进再生芽分化过程细胞分裂和伸长相关蛋白及抗性相关蛋白的表达,促进再生芽的萌发生长,增强再生芽抵御外界生物和非生物胁迫的能力,提高对各种不良环境的适应性,因而其倒2至倒5各节位再生芽的活芽率和芽长极显著高于未施用促芽肥处理,从而显著提高了再生季的单位面积有效穗数、结实率和产量,实现了再生季的高产增产。 展开更多
关键词 水稻 再生芽 促芽肥 蛋白质表达 产量
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应用激光捕获显微切割技术纯化的鼻咽癌蛋白质表达谱的建立 被引量:4
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作者 彭芳 汤参娥 +7 位作者 李茂玉 李萃 程爱兰 李峰 张鹏飞 李美香 肖志强 陈主初 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期481-486,共6页
目的:建立鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)蛋白质表达谱,为NPC蛋白质组学研究奠定基础。方法:应用激光捕获显微切割(laser capture microdissection,LCM)技术从NPC组织纯化NPC细胞,应用二维凝胶电泳(2-DE)分离LCM纯化NPC细胞的蛋... 目的:建立鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)蛋白质表达谱,为NPC蛋白质组学研究奠定基础。方法:应用激光捕获显微切割(laser capture microdissection,LCM)技术从NPC组织纯化NPC细胞,应用二维凝胶电泳(2-DE)分离LCM纯化NPC细胞的蛋白质,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定蛋白质,利用生物信息学资源构建NPC的2-DE蛋白质组数据库。结果:建立了NPC蛋白质2-DE参考图谱,2-DE图谱共显示(1312±30)个蛋白质点,共鉴定了427个蛋白质点,包括241个非冗余蛋白质,并构建了NPC的2-DE蛋白质组数据库,这些数据可从本实验室网站(http://www.xyproteomics.org)上进行查询。结论:首次建立了LCM纯化NPC细胞2-DE蛋白质表达谱,为NPC蛋白质组学研究提供了重要的信息和资料。 展开更多
关键词 鼻咽癌 蛋白质表达 蛋白质组数据库 激光捕获显微切割 二维凝胶电泳 质谱
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早期糖尿病大鼠视网膜蛋白质表达变化的初步研究 被引量:3
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作者 刘尚清 张艳艳 +3 位作者 羊惠君 谢贤镛 胡为民 袁爱花 《眼科研究》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期186-189,共4页
目的观察2个月病程大鼠视网膜组织蛋白质变化情况;建立并优化视网膜蛋白质组分析所需要的双向凝胶电泳(2-DE)技术,提高其分辨率及重复性。方法提取视网膜蛋白质进行2-DE,对影响2-DE结果的各种因素进行调整、优化。用PDQUest7.3.2软件分... 目的观察2个月病程大鼠视网膜组织蛋白质变化情况;建立并优化视网膜蛋白质组分析所需要的双向凝胶电泳(2-DE)技术,提高其分辨率及重复性。方法提取视网膜蛋白质进行2-DE,对影响2-DE结果的各种因素进行调整、优化。用PDQUest7.3.2软件分析凝胶图谱以获得差异表达的蛋白点。结果成功获得了视网膜组织的2-DE图谱。比较后得到36个表达差异有统计学意义(P<0.05)的蛋白质点,包括上调5个,下调23个,消失8个。结论2个月病程糖尿病大鼠视网膜已经有蛋白质表达的差异。已建立的视网膜蛋白质2-DE技术将为进一步开展视网膜疾病的蛋白质组学研究奠定基础。 展开更多
关键词 糖尿病 大鼠 视网膜 蛋白质表达 双向凝胶电泳
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应用nanoLC-MS/MS分析毛白杨次生维管系统的蛋白质表达谱 被引量:3
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作者 蒋淑磊 陈加飞 +1 位作者 赵树堂 卢孟柱 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第5期43-53,共11页
基于1DE的nanoLC-MS/MS方法分析毛白杨次生维管系统的蛋白质组,成功鉴定:14个蛋白质参与细胞分裂,7个转录因子,22个与细胞骨架相关蛋白质,31个与细胞信号转导相关蛋白质,14个与细胞壁相关蛋白质。显示这些蛋白质相应基因参与形成层活动... 基于1DE的nanoLC-MS/MS方法分析毛白杨次生维管系统的蛋白质组,成功鉴定:14个蛋白质参与细胞分裂,7个转录因子,22个与细胞骨架相关蛋白质,31个与细胞信号转导相关蛋白质,14个与细胞壁相关蛋白质。显示这些蛋白质相应基因参与形成层活动的调控,为进一步了解木材形成的分子机制奠定基础。 展开更多
关键词 液相色谱-串联质谱 蛋白质表达 次生维管系统 毛白杨
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大鼠局灶性脑缺血-再灌注后caspase-8和caspase-9 mRNA及蛋白质表达 被引量:3
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作者 张鸿 刘艳艳 +2 位作者 贾春红 马英 宋利春 《中国现代神经疾病杂志》 CAS 2007年第6期543-547,共5页
1994年MacManus等首先报告大鼠全脑缺血后存在神经元凋亡。近10年来,关于脑缺血后细胞凋亡机制的研究取得了巨大进展。已知脑缺血后可有多种基因被诱导表达,这些基因编码的蛋白质产物直接或间接参与了凋亡的调控。天冬氨酸特异性半胱... 1994年MacManus等首先报告大鼠全脑缺血后存在神经元凋亡。近10年来,关于脑缺血后细胞凋亡机制的研究取得了巨大进展。已知脑缺血后可有多种基因被诱导表达,这些基因编码的蛋白质产物直接或间接参与了凋亡的调控。天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶家族(cysteinyl aspartate specific protease,caspase),是细胞凋亡过程中最重要的蛋白酶,细胞凋亡的最后实施是通过caspase的激活而实现的。迄今为止,已知的家族成员共14个,其中caspase-8和caspase-9在细胞凋亡启动过程中具有重要作用。在本实验中,我们观察了大鼠局灶性脑缺血-再灌注后神经元凋亡及caspase-8、caspase-9 mRNA和蛋白质表达的变化,以探讨脑缺血-再灌注后神经元凋亡的信号转导机制。 展开更多
关键词 局灶性脑缺血-再灌注 caspase-9 CASPASE-8 蛋白质表达 MRNA 天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白 大鼠 细胞凋亡机制
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运用双向聚丙烯酰胺凝胶电泳和图像软件分析TPA处理NIH3T3细胞前后的蛋白质表达谱差异 被引量:4
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作者 沈新明 江培洲 +2 位作者 黄华 李欣 姚开泰 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2004年第3期310-313,共4页
目的建立及优化聚丙烯酰胺双向凝胶电泳技术,并应用图像软件分析伏波醇酯(TPA)刺激前后小鼠成纤维细胞NIH3T3系的蛋白质差异表达,为进一步鉴定与TPA生物学作用有关的蛋白质奠定基础。方法分别提取TPA处理前后的NIH3T3细胞总蛋白质,经双... 目的建立及优化聚丙烯酰胺双向凝胶电泳技术,并应用图像软件分析伏波醇酯(TPA)刺激前后小鼠成纤维细胞NIH3T3系的蛋白质差异表达,为进一步鉴定与TPA生物学作用有关的蛋白质奠定基础。方法分别提取TPA处理前后的NIH3T3细胞总蛋白质,经双向电泳,硝酸银染色后用软件分析显示两者蛋白质的差异表达。结果软件分析显示TPA刺激前后的细胞蛋白质有明显的差异表达。结论高质量的双向电泳设备、熟练的电泳操作和图像处理技能是寻找稳定可信的功能蛋白质的必要条件。 展开更多
关键词 双向聚丙烯酰胺 凝胶电泳 图像软件分析 TPA处理 NIH3T3细胞 蛋白质表达
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利用shotgun蛋白组学策略构建变形链球菌蛋白质表达谱 被引量:3
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作者 赵洪岩 张志民 +2 位作者 周延民 张红 李荟 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期822-824,共3页
目的:建立变形链球菌蛋白质表达谱,为变形链球菌蛋白质组学研究奠定基础。方法:提取变形链球菌总蛋白,溶液内酶解,肽段混合物在色谱上分离后shotgun鉴定,并利用生物信息学软件对鉴定出的蛋白质进行分析。结果:建立了变形链球菌蛋白质表... 目的:建立变形链球菌蛋白质表达谱,为变形链球菌蛋白质组学研究奠定基础。方法:提取变形链球菌总蛋白,溶液内酶解,肽段混合物在色谱上分离后shotgun鉴定,并利用生物信息学软件对鉴定出的蛋白质进行分析。结果:建立了变形链球菌蛋白质表达谱,共鉴定出752种蛋白质,其中高可信度298种,并利用Gene Ontology软件对其按分子功能和生物学途径进行归类。结论:变形链球菌蛋白质表达谱的建立,为变形链球菌蛋白质组学研究提供了重要的信息和资料。 展开更多
关键词 变异链球菌 蛋白质表达 shotgun蛋白组学
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盐胁迫下不同盐敏感型番茄在蛋白质表达上的差异 被引量:15
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作者 张恩平 张淑红 +1 位作者 JAN Cordewener TWAN America 《沈阳农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期25-28,共4页
研究了耐盐与不耐盐番茄自交系在盐胁迫与正常栽培条件下根中蛋白质表达上的差异。耐盐番茄根系中蛋白质含量高于不耐盐番茄,正常栽培条件下番茄根系蛋白质含量高于盐处理番茄。蛋白质提取液不但在总蛋白质数量上有所不同,而且在蛋白质... 研究了耐盐与不耐盐番茄自交系在盐胁迫与正常栽培条件下根中蛋白质表达上的差异。耐盐番茄根系中蛋白质含量高于不耐盐番茄,正常栽培条件下番茄根系蛋白质含量高于盐处理番茄。蛋白质提取液不但在总蛋白质数量上有所不同,而且在蛋白质种类上亦有所差异。经过不同的双向凝胶电泳分离后,经过PDQuest软件和Q-TOF质谱分析结果为,在盐胁迫条件下共有8种蛋白质在表达上差异显著。磷酸葡萄糖脱氢酶、乙醇脱氢酶催化和3-异戊基苹果酸脱氢酶在盐处理的耐盐番茄根系中显著增加,异戊烯二磷酸(IDP)异构酶显著减少。 展开更多
关键词 蛋白质表达 盐胁迫 敏感型 蛋白质含量 耐盐番茄 葡萄糖脱氢酶 苹果酸脱氢酶 栽培条件 TOF质谱 Quest 电泳分离 分析结果 差异显著 胁迫条件 盐处理 自交系 根系 蛋白 提取液 酶催化 异构酶 二磷酸 异戊烯
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人结肠上皮蛋白质表达谱的建立 被引量:2
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作者 朱果 郑杰 +6 位作者 陈主初 李明 李茂玉 张鹏飞 汤参娥 袁伟键 肖志强 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期696-701,共6页
目的:建立人正常结肠上皮的蛋白质表达谱。方法:应用双向凝胶电泳(2-DE)技术分离20例人正常结肠上皮的总蛋白质,应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assistedlaserdesorp-tion/ionizationtimeofflightmassspectrometry,MALDI-... 目的:建立人正常结肠上皮的蛋白质表达谱。方法:应用双向凝胶电泳(2-DE)技术分离20例人正常结肠上皮的总蛋白质,应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assistedlaserdesorp-tion/ionizationtimeofflightmassspectrometry,MALDI-TOF-MS)和电喷雾串联质谱(electrosprayionizationtan-demmassspectrometry,ESI-Q-TOF)鉴定其表达的蛋白质,利用生物信息学资源对所鉴定蛋白质的功能和亚细胞定位等进行分析。结果:建立了人类正常结肠上皮蛋白质的2-DE参考图谱,2-DE图谱展示了1020±50个蛋白质点,代表162种非冗余蛋白质的204个蛋白质点被鉴定,其中37种蛋白质存在翻译后修饰,并按功能和亚细胞定位对162种蛋白质进行了初步分类,这些数据可从作者的网站(http://www.xyproteomics.org)上进行查询。结论:首次建立了人正常结肠上皮的蛋白质表达谱,为研究结肠上皮的生理功能和病理过程提供了有意义的资料。 展开更多
关键词 结肠上皮 蛋白质表达 双向凝胶电泳 质谱
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电针对脊髓损伤后蛋白质表达影响的研究 被引量:2
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作者 呙金海 袁章 +3 位作者 杨拯 陈兵 朱文文 张晓 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2009年第24期4242-4243,共2页
脊髓损伤(spinal cord injury.SCI)所造成的外伤性截瘫是最严重的外伤之一。据统计,全世界范围内SCI的发病率大约20—40例/(100万人·年)。大多数损伤源于交通创伤、坠落伤、暴力和运动损伤。SCI患者多是健康青壮年,常给社... 脊髓损伤(spinal cord injury.SCI)所造成的外伤性截瘫是最严重的外伤之一。据统计,全世界范围内SCI的发病率大约20—40例/(100万人·年)。大多数损伤源于交通创伤、坠落伤、暴力和运动损伤。SCI患者多是健康青壮年,常给社会带来沉重负担。SCI所致外伤性截瘫属于中国传统医学中的“体惰”和“痿证”范畴。近几年来采用电针治疗,已取得了不错的疗效。 展开更多
关键词 脊髓损伤 电针治疗 蛋白质表达 外伤性截瘫 中国传统医学 SCI 世界范围 交通创伤
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氟对小鼠脾淋巴细胞ERK通路相关基因及蛋白质表达的影响 被引量:2
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作者 徐刚 王金明 +2 位作者 马淑慧 詹雅琦 马海利 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1888-1894,共7页
为探讨氟化钠对小鼠脾淋巴细胞细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)通路相关基因及蛋白表达的影响,将体内不同氟质量浓度染毒鼠的脾淋巴细胞和体外不同氟浓度作用的脾淋巴细胞经过细菌脂多糖(LPS)刺激培养后,采用Real-time PCR和Western blott... 为探讨氟化钠对小鼠脾淋巴细胞细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)通路相关基因及蛋白表达的影响,将体内不同氟质量浓度染毒鼠的脾淋巴细胞和体外不同氟浓度作用的脾淋巴细胞经过细菌脂多糖(LPS)刺激培养后,采用Real-time PCR和Western blotting检测ras、c-raf、MEK1、ERK1在mRNA水平的转录变化以及ERK1在蛋白质水平的表达差异。结果显示:小鼠脾淋巴细胞ERK通路的激活可被低质量浓度的氟抑制,但随氟质量浓度增加,其抑制趋势逐渐减少而转为促进。表明氟化物可通过影响小鼠脾淋巴细胞ERK通路的激活,从而进一步影响免疫系统的功能。 展开更多
关键词 氟化钠 小鼠脾淋巴细胞 ERK1 基因转录 蛋白质表达
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