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含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶10在压力超负荷诱导的心肌肥厚中的表达及其与心肌纤维化的关系 被引量:1
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作者 王震 王梦龙 +6 位作者 刘剑芳 叶晶 徐瑶 姜慧敏 叶迪 张记收 万军 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2019年第8期810-816,共7页
目的:探讨含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶10(ADAMTS10)在压力超负荷诱导的心肌肥厚中的表达及其与心肌纤维化的关系。方法:将60只8周雄性C57BL/6J小鼠随机分成假手术组(n=20)和实验组(n=40)。应用主动脉弓缩窄术(TAC)... 目的:探讨含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶10(ADAMTS10)在压力超负荷诱导的心肌肥厚中的表达及其与心肌纤维化的关系。方法:将60只8周雄性C57BL/6J小鼠随机分成假手术组(n=20)和实验组(n=40)。应用主动脉弓缩窄术(TAC)建立压力负荷诱导的心肌肥厚模型。两组小鼠分别于第4周和第8周超声检测小鼠心功能,之后处死测量体质量和心脏质量,同时行心肌组织苏木素-伊红、天狼猩红、麦胚凝集素(WGA)和免疫荧光染色。应用免疫印迹(Westernblotting)法检测小鼠心肌组织ADAMTS10蛋白质的表达,应用实时聚合酶联反应(RT-PCR)法检测小鼠心肌组织ADAMTS10、心房钠尿肽(ANP)、β-肌球蛋白重链(β-MHC)、基质金属蛋白酶(MMP)2和MMP9mRNA的表达。结果:实验组与假手术组比较,小鼠第4周心脏质量显著升高(P<0.05),且在实验组第8周进一步升高(P<0.05);小鼠第4周左心室射血分数以及短轴缩短率均明显降低(P<0.05,且在第8周进一步降低,P<0.05);ADAMTS10mRNA和蛋白表达升高(P均<0.05)。免疫荧光结果提示ADAMTS10定位于成纤维细胞;RT-PCR结果提示ADAMTS10mRNA水平与心肌组织ANP水平显著正相关[r=0.6017,P<0.05(实验组4周)和r=0.6607,P<0.05(实验组8周)],与β-MHC水平显著正相关[r=0.6249,P<0.05(实验组4周)和r=0.7194,P<0.05(实验组8周)],与MMP2显著正相关[r=0.6971,P<0.05(实验组4周)和r=0.8689,P<0.05(实验组8周)],与MMP9水平显著正相关[r=0.6931,P<0.05(实验组4周)和r=0.8096,P<0.05(实验组8周)]。结论:在压力超负荷诱导的心肌肥厚模型,ADAMTS10通过调控细胞外基质重构,参与心肌肥厚和纤维化的发生发展。 展开更多
关键词 心肌肥厚 心肌纤维化 含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶10 细胞外基质
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含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶8在恶性肿瘤中的研究进展 被引量:1
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作者 谢伦昀 吕庆杰 《中国医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第7期649-652,共4页
近年来,含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS)基因的表达与恶性肿瘤进展之间的关系成为众多学者的研究热点。ADAMTS8是一种定位于肿瘤微环境的金属蛋白酶,是ADAMTS家族成员之一。ADAMTS8在恶性肿瘤中的作用受到越来... 近年来,含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS)基因的表达与恶性肿瘤进展之间的关系成为众多学者的研究热点。ADAMTS8是一种定位于肿瘤微环境的金属蛋白酶,是ADAMTS家族成员之一。ADAMTS8在恶性肿瘤中的作用受到越来越多的关注,其表达上调可抑制肿瘤的发生发展并与患者预后密切相关,是肿瘤治疗的潜在靶点。然而,ADAMTS8在各种恶性肿瘤中的功能异常复杂,其具体机制尚未完全阐明。本文综述了ADAMTS8在恶性肿瘤中的研究进展,为恶性肿瘤的发病机制、靶向治疗及预后提供了理论依据。 展开更多
关键词 含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶8 恶性肿瘤 治疗靶点 预后
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三方基序蛋白13的生物学特征和功能及与疾病发生的关系
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作者 姜淼 蒋丽娜 +3 位作者 董玥宏 姚咏明 赵自刚 牛春雨 《生物化学与生物物理进展》 北大核心 2025年第3期554-568,共15页
三方基序蛋白(tripartite motif-containing,TRIM)13具备一个独特的跨膜结构域,锚定在内质网,通过调节泛素化途径影响诸多关键信号通路,对于调节内质网功能以及免疫反应、代谢紊乱、炎症疾病和肿瘤抑制具有重要作用。本文综述TRIM13蛋... 三方基序蛋白(tripartite motif-containing,TRIM)13具备一个独特的跨膜结构域,锚定在内质网,通过调节泛素化途径影响诸多关键信号通路,对于调节内质网功能以及免疫反应、代谢紊乱、炎症疾病和肿瘤抑制具有重要作用。本文综述TRIM13蛋白的结构和功能,特别是在内质网自噬、炎症反应和肿瘤抑制中的作用及其在多种疾病中的潜在意义,期望深化对TRIM13蛋白及其在相关疾病发生过程中调控机制的认识,为疾病诊断和治疗提供新的靶点。 展开更多
关键词 三方基序蛋白13 泛素化 内质网自噬 免疫调控
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子宫内膜癌患者血清泛素耦联酶2C、三基序蛋白27表达水平及其与病理参数的相关性 被引量:3
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作者 柴菲 陈振文 +3 位作者 刘宏艳 李肃 龚媛媛 赵莹莹 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第13期1808-1813,共6页
目的探究子宫内膜癌(EC)患者血清泛素耦联酶2C(UBE2C)、三基序蛋白27(TRIM27)表达水平及其与病理参数的相关性。方法选取医院2020年3月至2023年3月96例EC患者为EC组,同期子宫内膜非典型增生(EAH)患者65例为EAH组,体检健康者80例为对照... 目的探究子宫内膜癌(EC)患者血清泛素耦联酶2C(UBE2C)、三基序蛋白27(TRIM27)表达水平及其与病理参数的相关性。方法选取医院2020年3月至2023年3月96例EC患者为EC组,同期子宫内膜非典型增生(EAH)患者65例为EAH组,体检健康者80例为对照组。酶联免疫法分析血清UBE2C、TRIM27水平。ROC曲线分析血清UBE2C、TRIM27水平评估EC发生的预测价值。结果EC患者血清UBE2C、TRIM27水平显著高于体检健康者(P<0.05)。EC患者血清UBE2C、TRIM27水平与肿瘤直径、肿瘤分化程度、淋巴结转移、FIGO分期、肌层浸润深、宫颈受累、雌激素受体表达、孕激素受体表达有关(P<0.05)。血清UBE2C与TRIM27水平呈正相关(r=0.475,P<0.001);血清UBE2C、TRIM27水平与肿瘤直径、淋巴结转移、FIGO分期、肌层浸润深度呈正相关,与肿瘤分化程度、雌激素受体表达、孕激素受体表达呈负相关(P<0.05)。UBE2C、TRIM27联合评估EC发生的AUC显著高于单项检测(ZUBE2C-联合=3.406,P<0.001,ZTRIM27-联合=3.285,P=0.001)。结论EC患者血清UBE2C、TRIM27表达水平上调,与病理参数密切相关,血清UBE2C、TRIM27水平可为早期诊断EC提供参考。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 泛素耦联酶2C 基序蛋白27 病理参数 相关性
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TRIM24蛋白在人肾透明细胞癌组织中的表达及其临床意义
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作者 耿海营 于焱 +2 位作者 代春美 温有锋 李宁 《吉林大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第2期486-492,共7页
目的:探讨三重基序蛋白24(TRIM24)在肾透明细胞癌(ccRCC)组织中的表达,阐明TRIM24蛋白与ccRCC患者临床病理特征和预后的关联。方法:选取术前均未行放化疗的90例ccRCC患者的癌组织和癌旁正常组织。采用组织芯片技术和免疫组织化学法检测c... 目的:探讨三重基序蛋白24(TRIM24)在肾透明细胞癌(ccRCC)组织中的表达,阐明TRIM24蛋白与ccRCC患者临床病理特征和预后的关联。方法:选取术前均未行放化疗的90例ccRCC患者的癌组织和癌旁正常组织。采用组织芯片技术和免疫组织化学法检测ccRCC组织中TRIM24蛋白表达水平,分析ccRCC组织与癌旁正常组织中TRIM24蛋白表达水平的差异。计算TRIM24蛋白表达评分及其平均值,并根据平均值将ccRCC患者分为TRIM24蛋白低表达组和TRIM24蛋白高表达组;分析TRIM24蛋白表达水平与患者不同临床病理特征之间的关联,分析TRIM24蛋白表达水平与患者预后之间的关系。结果:免疫组织化学法,TRIM24蛋白在ccRCC患者癌组织细胞核和细胞质中均有表达,且癌组织中TRIM24蛋白表达水平与癌旁正常组织比较差异均有统计学意义(P<0.05);ccRCC组织细胞核中TRIM24蛋白表达水平与患者年龄、性别和肿瘤大小有关联(P<0.05);KaplanMeier生存分析,TRIM24蛋白在ccRCC组织细胞质中高表达、年龄大和病理分级高的患者总生存期短于TRIM24蛋白低表达、年龄小和病理分级低的患者(P<0.05);多因素Cox回归分析,与TRIM24蛋白低表达和病理分级低的患者比较,ccRCC组织细胞质中TRIM24蛋白高表达和病理分级高的患者预后较差(P<0.05)。结论:ccRCC癌组织的细胞质中TRIM24高表达和病理分级高的患者术后生存率较低,预后较差。 展开更多
关键词 肾透明细胞癌 三重基序蛋白24 免疫组织化学 病理分级 预后
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RNA结合基序蛋白3的生物学功能 被引量:2
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作者 李云龙 李昌盛 +5 位作者 李静辉 孟宇 张雪 贺军 杨焕民 李士泽 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期429-433,共5页
RNA结合基序蛋白3(RNA binding motif protein 3,RBM3)是在哺乳动物细胞中发现的重要冷应激蛋白,伴随冷应激过程其表达量上调。研究发现RBM3与冷诱导RNA结合蛋白(cold inducible RNA binding protein,CIRP)在核酸结构和氨基酸结构上高... RNA结合基序蛋白3(RNA binding motif protein 3,RBM3)是在哺乳动物细胞中发现的重要冷应激蛋白,伴随冷应激过程其表达量上调。研究发现RBM3与冷诱导RNA结合蛋白(cold inducible RNA binding protein,CIRP)在核酸结构和氨基酸结构上高度保守,具有较高的同源性,且发挥作用的方式也有很多相似之处。RBM3不仅具有介导冷诱导下细胞抗凋亡的保护作用,还能参与人和动物的缺氧应激、缺血应激、紫外照射应激、细胞增殖、骨骼肌调节、生殖发育,疾病的治疗等多种生理过程,而且它还能够作为原癌基因以及参与小RNA(microRNA,简称miRNA)生物学过程的调控作用。因此,深入开展RBM3功能性研究和应用性研究具有重要的基础研究价值和临床研究意义。 展开更多
关键词 RNA结合基序蛋白3 生物学功能 应激
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三基序蛋白25过表达对肺癌细胞H1299顺铂敏感性的影响
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作者 屈灿 邱峰 +2 位作者 陈世知 粟林 敬怀志 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期374-377,共4页
目的:初步探讨三基序蛋白25(tripartite motif containing 25,TRIM25)过表达对人肺癌细胞株H1299顺铂敏感性的影响及其分子作用机制。方法:应用基因克隆技术构建TRIM25高表达质粒载体,瞬时转染人肺癌细胞株H1299,荧光显微镜下观察转染效... 目的:初步探讨三基序蛋白25(tripartite motif containing 25,TRIM25)过表达对人肺癌细胞株H1299顺铂敏感性的影响及其分子作用机制。方法:应用基因克隆技术构建TRIM25高表达质粒载体,瞬时转染人肺癌细胞株H1299,荧光显微镜下观察转染效率,Western blot法检测TRIM25蛋白表达水平及其过表达时丙酮酸激酶M2(pyruvate kinase isozyme type M2,PKM2)蛋白水平的变化。用顺铂分别处理转染前后的H1299细胞24 h,MTT法检测细胞耐药性,Annexin V/PI双染法流式细胞仪(flow cytometry,FCM)检测细胞凋亡。结果 :同H1299空白组和转染pGCMV/neo空载体组比较,pGCMV-trim25转染组细胞中TRIM25蛋白的表达水平明显增加(P=0.003,P=0.005);且TRIM25过表达时,细胞中PKM2蛋白的表达水平降低(P=0.001,P=0.003)。用顺铂处理后,pGCMV-trim25转染组细胞的药物敏感性显著下降(P<0.001),转染组细胞凋亡率亦明显降低(P<0.001)。结论:TRIM25在肺癌细胞H1299中高表达时,可能通过下调PKM2而降低对顺铂的敏感性。 展开更多
关键词 高表达载体 基序蛋白25 丙酮酸激酶M2 肺癌细胞H1299 药物敏感性
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肺腺癌组织中RNA结合基序蛋白38和p53基因的表达及其临床意义 被引量:3
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作者 尚自强 童莹 +3 位作者 宋佳 薛亚斌 况志星 王洪江 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期900-903,共4页
目的:分析肺腺癌组织中RNA结合基序蛋白38基因(RNA-binding motif protein 38,RBM38)及抑癌基因p53 m RNA和蛋白的表达情况,探讨其在肺腺癌发生发展中的意义。方法:取2012年10月至2015年6月新疆医科大学附属肿瘤医院收治的50例肺腺癌患... 目的:分析肺腺癌组织中RNA结合基序蛋白38基因(RNA-binding motif protein 38,RBM38)及抑癌基因p53 m RNA和蛋白的表达情况,探讨其在肺腺癌发生发展中的意义。方法:取2012年10月至2015年6月新疆医科大学附属肿瘤医院收治的50例肺腺癌患者的肿瘤组织标本作为实验组,相对应的癌旁组织标本作为对照组。用RT-PCR法检测两组中RBM38及p53m RNA相对表达量,用Western blotting法检测两组中RBM38及p53蛋白的相对表达量。结果:实验组RBM38 m RNA及蛋白相对表达量(0.357±0.170、0.294±0.149)均高于对照组(0.271±0.128、0.206±0.099),实验组p53 m RNA及蛋白(0.457±0.208、0.671±0.200)相对表达量均高于对照组(0.308±0.167、0.332±0.071),差异均有统计学意义(均P<0.01)。RBM38表达与肺腺癌患者TNM分期、浸润深度有关(P<0.05),p53表达与患者TNM分期有关(P<0.05)。实验组RBM38与p53蛋白表达呈负相关(r=-0.626,P<0.01)。结论:肺腺癌组织RBM38、p53 m RNA及蛋白表达均高于癌旁组织,两者均与患者TNM分期等病理参数关系密切。随着RBM38蛋白表达的增加p53蛋白随之减少,RBM38可能通过抑制p53的翻译从而促进肺癌的发生发展,RBM38可能成为肺腺癌分子靶向治疗的靶点。 展开更多
关键词 肺腺癌 RNA结合基序蛋白38基因 P53基因
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Ⅰ型干扰素诱导表达的三基序蛋白22引发线粒体交联促进心肌细胞凋亡 被引量:2
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作者 宋双 孙大康 +5 位作者 崔明丽 王倩倩 赵希军 徐会圃 李洋 程艳丽 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2021年第11期1127-1134,共8页
目的:研究三基序蛋白22(TRIM22)在Ⅰ型干扰素(Interferon,IFN)致人心肌细胞凋亡中的作用及机制。方法:用不同浓度的IFN-α刺激心肌细胞,流式细胞术检测心肌细胞凋亡情况。经实时荧光定量PCR(realtime PCR)检测IFN-α刺激心肌细胞后,不... 目的:研究三基序蛋白22(TRIM22)在Ⅰ型干扰素(Interferon,IFN)致人心肌细胞凋亡中的作用及机制。方法:用不同浓度的IFN-α刺激心肌细胞,流式细胞术检测心肌细胞凋亡情况。经实时荧光定量PCR(realtime PCR)检测IFN-α刺激心肌细胞后,不同时间点TRIM22 mRNA的表达水平,以及TRIM22 mRNA和蛋白表达水平与IFN-α的剂量依赖性关系。在心肌细胞中过表达TRIM22,通过流式细胞术和激光共聚焦检测细胞凋亡情况。通过核酸染料4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)或线粒体深红色荧光探针染色,经激光共聚焦观察TRIM22与线粒体的共定位情况及对线粒体的影响。结果:流式细胞术检测发现IFN-α可诱导心肌细胞凋亡,且呈剂量依赖性(P<0.05)。realtime PCR检测发现,IFN-α刺激心肌细胞6 h后TRIM22 mRNA表达显著上调,12 h达最高,随后逐渐下降(P<0.05)。同时IFN-α刺激心肌细胞TRIM22 mRNA和蛋白表达水平升高,且呈剂量依赖性(P<0.05)。激光共聚焦检测发现TRIM22-增强绿色荧光蛋白(EGFP)以团块状分布在胞浆和胞核中;TRIM22与线粒体存在共定位关系,TRIM22能够引发线粒体交联,导致心肌细胞凋亡小体出现。结论:IFN-α可刺激心肌细胞高表达TRIM22引发线粒体交联,加速细胞凋亡。 展开更多
关键词 Ⅰ型干扰素 基序蛋白22 心肌细胞 心肌炎 细胞凋亡
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RNA结合基序蛋白25作用的研究进展 被引量:1
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作者 赵可心 丁虹 +1 位作者 刘述 张小卫 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期1356-1360,共5页
RNA结合基序蛋白25(RNA-binding motif protein 25,RBM25)是RNA结合蛋白(RNA binding proteins,RBPs)家族的一员。其富含丝氨酸/精氨酸蛋白,在mRNA剪接体的组装和选择性剪接的调控过程中起着重要作用,并参与多种疾病如(心血管疾病和肿瘤... RNA结合基序蛋白25(RNA-binding motif protein 25,RBM25)是RNA结合蛋白(RNA binding proteins,RBPs)家族的一员。其富含丝氨酸/精氨酸蛋白,在mRNA剪接体的组装和选择性剪接的调控过程中起着重要作用,并参与多种疾病如(心血管疾病和肿瘤)的发生、发展。RBM 25可以调控BCL-2、SCN5A、BIN1等基因的可变剪接,进而参与细胞凋亡、离子通道电流改变及细胞因子活性改变等重要病理生理过程,但人们对RBM25了解甚少。该文将从RBM 25的基本结构和功能、调控作用机制和研究进展进行系统综述。为心血管疾病和肿瘤的防治提供相应的理论参考。 展开更多
关键词 RNA结合基序蛋白25 选择性剪接 BCL-2 SCN5A 心血管疾病 肿瘤
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希金斯炭疽菌中NPFxD基序蛋白找寻及其生物信息学分析 被引量:1
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作者 陈光建 覃悦 韩长志 《江苏农业科学》 北大核心 2022年第5期35-40,共6页
希金斯炭疽菌是一种半活体营养型植物炭疽病原真菌,能够侵染多种十字花科植物引起的炭疽病,特别是引起蔬菜炭疽病的重要病原。胞吞在真菌侵染植物过程中发挥着重要作用,该作用一般同具有NPFxD基序的蛋白受体介导有关,然而,目前有关该炭... 希金斯炭疽菌是一种半活体营养型植物炭疽病原真菌,能够侵染多种十字花科植物引起的炭疽病,特别是引起蔬菜炭疽病的重要病原。胞吞在真菌侵染植物过程中发挥着重要作用,该作用一般同具有NPFxD基序的蛋白受体介导有关,然而,目前有关该炭疽菌中胞吞作用相关蛋白尚未明确。基于前人已报道的构巢曲霉中NPFxD蛋白序列,通过关键词搜索以及Blastp比对等方法对希金斯炭疽菌蛋白质数据库进行NPFxD蛋白找寻,明确该菌中存在2个NPFxD蛋白序列,根据蛋白同源性,分别命名为ChMYO1、ChGBP2。同时,对这2个蛋白序列开展了保守结构域及跨膜区结构、蛋白质理化性、信号肽、亚细胞定位以及二级结构等生物信息学分析。结果表明,ChMYO1、ChGBP2蛋白亚细胞定位情况不同,前者定位在质膜,后者定位在核内;两者在亲疏水性、最高氨基酸残基和其位置等均有着一定差异;两者均无明显的信号肽序列;两者均含有无规则卷曲、α螺旋、β卷曲,而缺乏TM螺旋。此外,对多个不同真菌中NPFxD基序同源蛋白序列开展遗传关系分析,明确希金斯炭疽菌中的NPFxD基序蛋白与炭疽菌属中其他病菌中的蛋白具有较高的同源性,本研究为进一步研究炭疽菌属NPFxD基序蛋白的功能提供了理论参考。 展开更多
关键词 胞吞作用 希金斯炭疽菌 NPFxD基序蛋白 生物信息学
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RNA结合基序蛋白20在心肌病中作用的研究进展 被引量:4
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作者 杨珍 刘宇宁 +1 位作者 余薇 郑萍 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1505-1508,共4页
心肌病是异质性的心肌病变,表现为心肌结构和功能的异常,心肌病最终会导致心力衰竭甚至死亡。RNA结合基序蛋白20(RBM 20)在心肌中高度表达,是富含丝氨酸/精氨酸蛋白家族的一种,对RNA剪接体的组装和选择性剪接的调控过程起着重要作用,参... 心肌病是异质性的心肌病变,表现为心肌结构和功能的异常,心肌病最终会导致心力衰竭甚至死亡。RNA结合基序蛋白20(RBM 20)在心肌中高度表达,是富含丝氨酸/精氨酸蛋白家族的一种,对RNA剪接体的组装和选择性剪接的调控过程起着重要作用,参与心肌病的发生、发展。RBM 20调控Titin、RyR 2、LDB 3、CaMKIIδ、CACNA1C等多种基因的选择性剪接,这些基因与心脏舒张功能、肌节组装、离子转运密切相关。该文将对RBM 20在心肌病中的作用和RBM 20调控机制进行综述,为心肌病的防治提供相应的理论参考。 展开更多
关键词 RNA结合基序蛋白20 心肌病 心力衰竭 TITIN RyR2 CA 2+/CaM依赖激酶
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兔抗小鼠含IQ基序及泛素结构域蛋白(IQUB)多克隆抗体的制备和应用 被引量:1
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作者 袁露 徐文华 +5 位作者 葛婷婷 周慧萍 杨玲 杨凡 牛长敏 郑英 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期846-851,共6页
目的 制备兔抗小鼠含IQ基序及泛素结构域蛋白(IQUB)多克隆抗体并检测IQUB在小鼠睾丸中的表达情况。方法将IQUB蛋白编码序列全长插入pET-30a(+)载体,构建pET-30a-IQUB原核表达质粒。将原核表达质粒转化入大肠杆菌BL21中,异丙基-β-D-硫... 目的 制备兔抗小鼠含IQ基序及泛素结构域蛋白(IQUB)多克隆抗体并检测IQUB在小鼠睾丸中的表达情况。方法将IQUB蛋白编码序列全长插入pET-30a(+)载体,构建pET-30a-IQUB原核表达质粒。将原核表达质粒转化入大肠杆菌BL21中,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导蛋白表达。利用组氨酸融合蛋白纯化柱纯化蛋白,使用梯度浓度的尿素复性原核蛋白。蛋白复性后免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。免疫完成后ELISA测定多克隆抗体效价,应用Western blot及免疫荧光染色分析多克隆抗体的有效性与特异性。结果 成功构建了pET-30a-IQUB重组质粒,并通过IPTG诱导成功表达了原核蛋白。ELISA检测多克隆抗体效价达到1∶1 000 000,制备的多克隆抗体能识别成年野生型小鼠睾丸组织中的内源性IQUB蛋白,IQUB在成年小鼠睾丸的各级生精细胞表达,在成熟精子中定位于顶体及鞭毛。结论 成功制备出高特异性的兔抗小鼠IQUB多克隆抗体,可用于Western blot及免疫荧光组织化学染色。 展开更多
关键词 含IQ基序及泛素结构域蛋白(IQUB) 多克隆抗体 精子发生
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三基序蛋白27的生理意义及其在肿瘤发生发展中的作用
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作者 刘秦峰 黄渊 唐景峰 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期422-431,共10页
三基序蛋白27(tripartite motif 27,TRIM27)是一种E3泛素连接酶,在细胞核、胞质溶胶和内体中均有分布,广泛存在于多种细胞中。TRIM27还具有转录抑制活性以及SUMO E3连接酶活性。TRIM27参与调控机体多种正常的生理过程:例如作为转录调控... 三基序蛋白27(tripartite motif 27,TRIM27)是一种E3泛素连接酶,在细胞核、胞质溶胶和内体中均有分布,广泛存在于多种细胞中。TRIM27还具有转录抑制活性以及SUMO E3连接酶活性。TRIM27参与调控机体多种正常的生理过程:例如作为转录调控蛋白质促进减数分裂过程,与生殖过程密切相关;通过增强胱天蛋白酶3(cysteine-containing aspartate-specific protease-3,caspase-3)活性诱导正常细胞凋亡过程的发生;不仅可以抑制由IκB激酶(IkappaB kinase,IKK)家族成员介导的NF-κB的激活,还能通过泛素化降解NF-κB抑制剂Iκbα,进而参与NF-κB信号通路,在先天免疫中发挥重要调控作用;通过激活STAT3信号通路参与多种炎症疾病的发生。最新研究表明,TRIM27还参与了癌症进程关键信号通路,例如PI3K/AKT,Wnt/β-catenin等,从而促进非小细胞肺癌,结直肠癌和肝癌等多种常见癌症细胞的增殖、侵袭和转移能力,抑制它们凋亡过程的发生以及抑制卵巢癌细胞的细胞周期停滞。同时,TRIM27作为癌症干预的潜在靶点,还能与核因子Y(nuclear factor-Y,NF-Y)组成蛋白质复合物,而增强癌细胞对某些抗癌药物的耐药性。总之,TRIM27对于细胞的某些生命过程调控作用以及机制不同,甚至相反,这取决于细胞的类型以及所处的状态。本文将从TRIM27结构、生物学功能以及主要参与的信号通路出发,针对TRIM27发挥的生理意义和在肿瘤发生发展中起到的功能及调控机制等方面进行综述。 展开更多
关键词 基序蛋白27 凋亡 天然免疫 炎症反应 癌症
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三元基序家族蛋白15敲低诱导肝癌细胞周期阻滞 被引量:2
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作者 刘珊珊 刘连新 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期58-64,共7页
三元基序家族蛋白15(tripartite motif-containing protein 15,TRIM15)是TRIM家族成员,该家族是一类具有E3泛素连接酶活性的蛋白质。TRIM15在肿瘤中的功能鲜有报导。本研究意在阐释TRIM15在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的... 三元基序家族蛋白15(tripartite motif-containing protein 15,TRIM15)是TRIM家族成员,该家族是一类具有E3泛素连接酶活性的蛋白质。TRIM15在肿瘤中的功能鲜有报导。本研究意在阐释TRIM15在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的作用。核质分离和免疫荧光实验确定TRIM15定位于细胞核和细胞质中;设计发夹RNA(shRNA)在肝癌细胞系中对TRIM15进行敲低;敲低TRIM 15后,细胞生长曲线测定和克隆形成结果显示,细胞增殖受到显著抑制(P<0.05);流式细胞术检测细胞周期显示,敲低TRIM 15使细胞阻滞在G_(0)/G_(1)期(P<0.05);而Western印迹检测在敲低TRIM 15后,细胞周期蛋白A(cyclin A)、周期蛋白依赖性蛋白激酶2(cyclin-dependent kinase 2,CDK2)、Rb、P-Rb、E2F转录因子1(E2F transcription factor 1,E2F1)表达下调,而CDK抑制因子(cyclin-dependent kinase inhibitor,CKI)p16、p21、p27表达显著上调。这些研究结果均证明,TRIM 15敲低诱导肝癌细胞周期阻滞,这表明,TRIM15可作为可行的治疗肝细胞癌的靶点。 展开更多
关键词 三元基序家族蛋白15 肝细胞癌 细胞增殖 细胞周期
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转录因子SP1调控肝细胞癌中三元基序家族蛋白7基因表达的机制 被引量:1
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作者 樊昌宇 丁涵 +2 位作者 徐乙冉 咸蕊 闫凤娟 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期1314-1321,共8页
三元基序家族蛋白7(tripartite motif-containing protein 7,TRIM7)作为E3泛素连接酶TRIM家族的成员,在免疫调控、代谢等生理过程中发挥重要调控作用。此外,TRIM7的异常表达与肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的发生发展密切相... 三元基序家族蛋白7(tripartite motif-containing protein 7,TRIM7)作为E3泛素连接酶TRIM家族的成员,在免疫调控、代谢等生理过程中发挥重要调控作用。此外,TRIM7的异常表达与肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的发生发展密切相关并呈现出复杂的调控作用,但其在HCC中的表达调控机制尚不清楚。本研究首先利用多种在线数据库分析发现,TRIM7在HCC中高表达,并且TRIM7高表达的肝细胞癌患者预后较差;利用UCSC、JASPAR数据库分析预测TRIM7基因启动子区的转录因子结合位点。结果显示,TRIM7启动子上含有4个特异性蛋白1(specificity protein 1,SP1)转录因子结合位点。本研究利用双荧光素酶报告实验、ChIP-PCR方法检测发现,SP1通过直接结合在TRIM7启动子上的SP1结合位点,从而正调控TRIM7启动子驱动的转录活性。RT-qPCR、Western印迹检测结果进一步显示,过表达SP1在mRNA和蛋白质水平均上调TRIM7基因的表达(P<0.01),且利用SP1抑制剂Mithramycin A处理能够逆转SP1对TRIM7基因表达的调控作用(P<0.01)。总之,本研究初步揭示了TRIM7在肝细胞癌中高表达的调控机制,为深入研究该基因功能以及早期诊断、靶向治疗提供重要的理论依据。 展开更多
关键词 肝细胞癌 转录调控 启动子 三元基序家族蛋白7 特异性蛋白1
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蛋白聚糖和ADAMTS-1在多囊卵巢综合征患者血清中的表达及其临床意义 被引量:2
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作者 金爱红 周霞平 余志英 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期400-404,共5页
目的:探讨蛋白聚糖(Versican)和Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS-1在多囊卵巢综合征(PCOS)患者血清中的表达,阐明二者在PCOS发病中的作用。方法:选取80例PCOS患者(PCOS组)和100名正常体检妇女(对照组)为研究对象,... 目的:探讨蛋白聚糖(Versican)和Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS-1在多囊卵巢综合征(PCOS)患者血清中的表达,阐明二者在PCOS发病中的作用。方法:选取80例PCOS患者(PCOS组)和100名正常体检妇女(对照组)为研究对象,测量2组受试对象身高和体质量,计算体质量指数(BMI);采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测2组受试对象血清中Versican和ADAMTS-1水平,测定2组受试对象血清中卵泡刺激素(FSH)、黄体生成激素(LH)、睾酮(T)、空腹血糖(FBG)和空腹胰岛素等水平;采用胰岛素抵抗指数稳态模式评估法(HOMA-IR)评估胰岛素抵抗。采用Pearson直线相关分析法分析Versican和ADAMTS-1与代谢指标的相关性。结果:PCOS组患者血清中Versican水平低于对照组(P=0.004),PCOS组患者血清中ADAMTS-1水平低于对照组(P<0.01)。Versican和ADAMTS-1预测PCOS的灵敏度、特异度、受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)分别为76.74%vs 63.64%(P=0.018)、52.94%vs 40.73%(P=0.009)和0.675(0.550~0.795)vs 0.714 (0.601~0.827)(P=0.032)。PCOS组患者Versican水平与FBG水平呈负相关关系(r=-0.738,P=0.022),ADAMTS-1水平与FBG水平亦呈负相关关系(r=-0.524,P=0.043)。结论:Versican和ADAMTS-1在PCOS患者外周血中低表达,并与胰岛素抵抗呈负相关关系,在PCOS发生中可能起抑制作用。 展开更多
关键词 蛋白聚糖 Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白 多囊卵巢综合征 胰岛素抵抗 空腹血糖
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RECK和基质金属蛋白酶与恶性肿瘤预后的研究进展 被引量:7
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作者 胡亚威 施鑫 +1 位作者 吴苏稼 周光新 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2013年第3期330-333,共4页
伴有kazal基序富含半胱氨酸的逆转诱导蛋白(reversion-inducing cysteine-rich protein with Kazal motif,RECK)基因是新近发现的基质金属蛋白酶(matrix matalloproteinase,MMP)抑制剂,能在转录后水平抑制多种MMP的表达而抑制肿瘤的侵... 伴有kazal基序富含半胱氨酸的逆转诱导蛋白(reversion-inducing cysteine-rich protein with Kazal motif,RECK)基因是新近发现的基质金属蛋白酶(matrix matalloproteinase,MMP)抑制剂,能在转录后水平抑制多种MMP的表达而抑制肿瘤的侵袭及转移。RECK与乳腺癌、胰腺癌、骨肉瘤等疾病患者的预后存在正相关关系。文中综述RECK和MMP与各系统肿瘤的关系。 展开更多
关键词 回复引导半胱氨酸丰富蛋白含kazal基序 基质金属蛋白 恶性肿瘤 预后
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多配体蛋白聚糖-4和新型金属蛋白酶-1在组织愈合过程中的作用
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作者 秦雁雁 王丹 林崇韬 《国际口腔医学杂志》 CAS 2012年第1期97-100,共4页
多配体蛋白聚糖-4是一种新发现的多肽,广泛存在于多种组织中,调控着多种生物学效应。含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS)-1是一种新型金属蛋白酶,广泛存在于哺乳动物和无脊椎动物体内,在保持凝血系统的稳态、器官... 多配体蛋白聚糖-4是一种新发现的多肽,广泛存在于多种组织中,调控着多种生物学效应。含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS)-1是一种新型金属蛋白酶,广泛存在于哺乳动物和无脊椎动物体内,在保持凝血系统的稳态、器官生成、炎症和生育等方面起着重要的作用。二者均参与组织的创伤愈合过程,且ADAMTS-1特异性地作用于多配体蛋白聚糖-4,使其胞外区脱落。本文就多配体蛋白聚糖、ADAMTS-1、多配体蛋白聚糖-4与ADAMTS-1、多配体蛋白聚糖-4与牙周组织等研究进展作一综述,为探究牙周组织的损伤修复机制提供理论依据。 展开更多
关键词 Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白 多配体蛋白聚糖 损伤愈合 牙周组织
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解聚蛋白样基质金属蛋白酶4表达及其与颈动脉斑块易损性关系的研究 被引量:5
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作者 邓先明 郑猛 +6 位作者 王红芹 秦琨 王坤 洪川 彭超 侯兴华 陈光忠 《中国脑血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期720-725,733,共7页
目的探讨含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样基质金属蛋白酶4(ADAMTS-4)在颈动脉粥样硬化性狭窄患者中的表达及其与斑块易损性的相关性,同时分析血液相关指标与斑块易损性之间的关系。方法回顾性连续纳入2017年8月至2019年12月广东... 目的探讨含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样基质金属蛋白酶4(ADAMTS-4)在颈动脉粥样硬化性狭窄患者中的表达及其与斑块易损性的相关性,同时分析血液相关指标与斑块易损性之间的关系。方法回顾性连续纳入2017年8月至2019年12月广东省人民医院神经外科收治的颈动脉粥样硬化性狭窄并行颈动脉内膜切除术(CEA)患者43例,其中1例分期行双侧CEA,以2例计算,共计44例患者。以颈部血管超声造影结果0~1级为稳定斑块,2~3级为易损斑块;以高分辨率增强MR血管成像(MRA)结果Ⅰ~Ⅲ型、Ⅶ~Ⅷ型为稳定斑块,Ⅳ~Ⅵ型为易损斑块。当颈部血管超声造影与高分辨率增强MRA对斑块易损性评估结果不一致时,以颈部血管超声造影结果为准。根据斑块性质,将44例患者分为稳定组(15例)和易损组(29例)。记录两组患者的一般资料、血液学指标、斑块中ADAMTS-4的表达,一般资料包括年龄、性别、高血压病、糖尿病和狭窄侧别;血液学指标包括血小板计数、中性粒细胞计数、淋巴细胞计数、ADAMTS-4、血小板与淋巴细胞比值(PLR)、中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR),并进行组间比较。分析PLR和ADAMTS-4与斑块易损性的相关性(对正态分布资料采用Pearson相关分析,对非正态分布资料及有序变量采用Spearman秩相关分析)。术前采用酶联免疫吸附测定检测血清中ADAMTS-4的水平;对斑块组织行免疫组织化学染色,检测ADAMTS-4在斑块中的表达,分为阳性细胞数<25%、25%~50%和>50%。结果(1)两组患者年龄、性别、高血压病、糖尿病、颈动脉粥样硬化性狭窄侧别的差异均无统计学意义(均P>0.05)。(2)两组血小板计数、中性粒细胞计数、淋巴细胞计数、NLR的差异均无统计学意义(均P>0.05);稳定组血清ADAMTS-4水平、PLR均低于易损组,组间差异均有统计学意义[分别为(72±26)μg/L比(116±24)μg/L,t=-5.683;110.87(87.25,134.05)比151.33(130.72,169.17),Z=-2.860;均P<0.01]。(3)稳定组阳性细胞数<25%、25%~50%和>50%的占比分别为10/15、3/15、2/15,易损组阳性细胞数<25%、25%~50%和>50%的占比分别为3/29、14/29、12/29,组间差异有统计学意义(Z=-3.330,P=0.001)。(4)相关性分析结果显示,PLR水平、斑块ADAMTS-4与斑块易损性的相关度较低(Spearman相关系数r值分别为0.436、0.508),血清ADAMTS-4水平与斑块易损性呈中度相关(Pearson相关系数r=0.659),均与斑块易损性呈正相关(均P<0.01)。结论PLR及ADAMTS-4表达水平与颈动脉斑块的易损性呈正相关,PLR和斑块ADAMTS-4与易损性相关度均较低,血清ADAMTS-4与斑块易损性为中度相关。 展开更多
关键词 含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样基质金属蛋白酶4 血小板与淋巴细胞比值 颈动脉狭窄 斑块易损性
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