单分子荧光原位杂交(single-molecule fluorescence in situ hybridization,smFISH)技术是一种通过用偶联荧光基团的寡核苷酸探针,对固定细胞或组织中单个mRNA分子进行成像的方法。smFISH可对RNA进行定位、定量,以此对目标转录本进行实...单分子荧光原位杂交(single-molecule fluorescence in situ hybridization,smFISH)技术是一种通过用偶联荧光基团的寡核苷酸探针,对固定细胞或组织中单个mRNA分子进行成像的方法。smFISH可对RNA进行定位、定量,以此对目标转录本进行实时研究。sm FISH适用于细胞、组织切片等多种类型生物样本。近年来,多种基于基础smFISH的改进技术被发明,进一步促进了该技术的实际应用。smFISH良好的RNA单分子可视化能力,使得其在发育生物学、神经生物学及肿瘤生物学等基础生物学科中得到了广泛的应用。本文综述了smFISH技术基本原理、smFISH技术的局限性、smFISH衍生技术方法、smFISH在不同生物学科中的应用进展,并对smFISH技术的发展前景做出展望。展开更多
背景与目的:尿路上皮癌是泌尿系统常见的恶性肿瘤,其早期诊断对改善患者预后至关重要。本研究比较了荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)、尿脱落细胞学及二者联合检测在尿路上皮癌及其不同亚型中的诊断效能。方法:...背景与目的:尿路上皮癌是泌尿系统常见的恶性肿瘤,其早期诊断对改善患者预后至关重要。本研究比较了荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)、尿脱落细胞学及二者联合检测在尿路上皮癌及其不同亚型中的诊断效能。方法:本研究纳入了2022年1月—2023年12月行经尿道膀胱肿瘤切除术(transurethral resection of bladder tumor,TURBT)且符合入组标准及排除标准的患者,且获得复旦大学附属肿瘤医院伦理委员会批准(伦理批号:050432-4-2307E)。收集患者本次TURBT后病理学诊断结果及术前1周的FISH和脱落细胞学检测结果,对FISH、脱落细胞学及二者联合检测在尿路上皮癌中的诊断准确率、灵敏度和特异度进行统计学分析。本研究属于观察性研究,严格遵循《加强流行病学中观察性研究报告质量》(Strengthening the Reporting of Observational Studies in Epidemiology,STROBE)指南及《诊断准确性研究报告规范》(Standards for Reporting of Diagnostic Accuracy,STARD)中的各项条目。结果:本研究共纳入283例TURBT术后患者,其中136例为尿路上皮癌,147例为良性病变。136例尿路上皮癌中,根据病理学亚型分组,79(58.09%)例为浸润性尿路上皮癌,57(41.91%)例为非浸润性尿路上皮癌。根据恶性程度分组,112(82.35%)例为高级别尿路上皮癌,24(17.65%)例为低级别尿路上皮癌。以组织病理学诊断结果为金标准,136例尿路上皮癌中FISH、脱落细胞学、联合检测的准确率分别为79.51%、72.08%、77.39%,灵敏度分别为72.06%、58.82%、78.68%,特异度分别为86.39%、84.35%、76.19%。FISH、联合检测的曲线下面积(area under the curve,AUC)差异无统计学意义,但均高于脱落细胞学(0.792 vs 0.716,P=0.006;0.774 vs 0.716,P=0.004);FISH与脱落细胞学相比,净重分类改善(net reclassification improvement,NRI)提升15.28%(P=0.006)。79例浸润性尿路上皮癌中,FISH的准确率高于脱落细胞学(86.28%vs 78.32%,P=0.011);FISH、联合检测的灵敏度均高于脱落细胞学(86.08%vs 67.09%,P=0.004;91.14%vs67.09%,P<0.001),AUC值也高于脱落细胞学(0.808 vs 0.713,P=0.004;0.784 vs 0.713,P=0.007);FISH与脱落细胞学相比,NRI值提升21.03%(P=0.003)。57例非浸润性尿路上皮癌中,3种检测方法的AUC值均较低(AUC<0.700)。112例高级别尿路上皮癌中,FISH的准确率、联合检测的灵敏度均高于脱落细胞学(84.94%vs 76.45%,P=0.005;89.29%vs 66.07%,P<0.001),FISH及联合检测的AUC值也均高于脱落细胞学(0.847vs 0.752,P=0.002;0.827 vs 0.752,P=0.001),FISH比脱落细胞学的NRI值提升19.01%(P=0.003)。24例低级别尿路上皮癌中,3种检测方法的AUC值均较低(AUC<0.600)。结论:尿路上皮癌中,尤其是浸润性和高级别尿路上皮癌,FISH的诊断效能优于脱落细胞学;FISH单独检测的准确率、灵敏度与联合检测相当,且特异性高于联合检测。在非浸润性或低级别尿路上皮癌中,3种检测方法的诊断效能均较低。展开更多
荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)分离探针因设计、判读相对简单而广泛应用于肿瘤的病理诊疗。目前针对FISH分离探针中出现的非典型信号类型及意义尚无系统研究。该文根据国内外相关研究,系统总结了FISH分离探针...荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)分离探针因设计、判读相对简单而广泛应用于肿瘤的病理诊疗。目前针对FISH分离探针中出现的非典型信号类型及意义尚无系统研究。该文根据国内外相关研究,系统总结了FISH分离探针非典型信号的类型、意义、出现的可能原因及机制,为FISH分离探针非典型信号的判读及深入研究提供理论基础。展开更多
文摘背景与目的:尿路上皮癌是泌尿系统常见的恶性肿瘤,其早期诊断对改善患者预后至关重要。本研究比较了荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)、尿脱落细胞学及二者联合检测在尿路上皮癌及其不同亚型中的诊断效能。方法:本研究纳入了2022年1月—2023年12月行经尿道膀胱肿瘤切除术(transurethral resection of bladder tumor,TURBT)且符合入组标准及排除标准的患者,且获得复旦大学附属肿瘤医院伦理委员会批准(伦理批号:050432-4-2307E)。收集患者本次TURBT后病理学诊断结果及术前1周的FISH和脱落细胞学检测结果,对FISH、脱落细胞学及二者联合检测在尿路上皮癌中的诊断准确率、灵敏度和特异度进行统计学分析。本研究属于观察性研究,严格遵循《加强流行病学中观察性研究报告质量》(Strengthening the Reporting of Observational Studies in Epidemiology,STROBE)指南及《诊断准确性研究报告规范》(Standards for Reporting of Diagnostic Accuracy,STARD)中的各项条目。结果:本研究共纳入283例TURBT术后患者,其中136例为尿路上皮癌,147例为良性病变。136例尿路上皮癌中,根据病理学亚型分组,79(58.09%)例为浸润性尿路上皮癌,57(41.91%)例为非浸润性尿路上皮癌。根据恶性程度分组,112(82.35%)例为高级别尿路上皮癌,24(17.65%)例为低级别尿路上皮癌。以组织病理学诊断结果为金标准,136例尿路上皮癌中FISH、脱落细胞学、联合检测的准确率分别为79.51%、72.08%、77.39%,灵敏度分别为72.06%、58.82%、78.68%,特异度分别为86.39%、84.35%、76.19%。FISH、联合检测的曲线下面积(area under the curve,AUC)差异无统计学意义,但均高于脱落细胞学(0.792 vs 0.716,P=0.006;0.774 vs 0.716,P=0.004);FISH与脱落细胞学相比,净重分类改善(net reclassification improvement,NRI)提升15.28%(P=0.006)。79例浸润性尿路上皮癌中,FISH的准确率高于脱落细胞学(86.28%vs 78.32%,P=0.011);FISH、联合检测的灵敏度均高于脱落细胞学(86.08%vs 67.09%,P=0.004;91.14%vs67.09%,P<0.001),AUC值也高于脱落细胞学(0.808 vs 0.713,P=0.004;0.784 vs 0.713,P=0.007);FISH与脱落细胞学相比,NRI值提升21.03%(P=0.003)。57例非浸润性尿路上皮癌中,3种检测方法的AUC值均较低(AUC<0.700)。112例高级别尿路上皮癌中,FISH的准确率、联合检测的灵敏度均高于脱落细胞学(84.94%vs 76.45%,P=0.005;89.29%vs 66.07%,P<0.001),FISH及联合检测的AUC值也均高于脱落细胞学(0.847vs 0.752,P=0.002;0.827 vs 0.752,P=0.001),FISH比脱落细胞学的NRI值提升19.01%(P=0.003)。24例低级别尿路上皮癌中,3种检测方法的AUC值均较低(AUC<0.600)。结论:尿路上皮癌中,尤其是浸润性和高级别尿路上皮癌,FISH的诊断效能优于脱落细胞学;FISH单独检测的准确率、灵敏度与联合检测相当,且特异性高于联合检测。在非浸润性或低级别尿路上皮癌中,3种检测方法的诊断效能均较低。
文摘荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)分离探针因设计、判读相对简单而广泛应用于肿瘤的病理诊疗。目前针对FISH分离探针中出现的非典型信号类型及意义尚无系统研究。该文根据国内外相关研究,系统总结了FISH分离探针非典型信号的类型、意义、出现的可能原因及机制,为FISH分离探针非典型信号的判读及深入研究提供理论基础。
