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氨氯地平通过抑制足细胞的Ca^(2+)内流促进细胞自噬
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作者 赵韦 徐德苹 +3 位作者 廖开楠 蔡春林 臧丹丹 周海胜 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第7期1179-1186,共8页
目的探究降血压药物氨氯地平对足细胞内Ca^(2+)内流及其自噬的影响。方法体外常规培养永生化的人足细胞(HPC),使用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)以及L型Ca^(2+)阻断剂氨氯地平单独或者联合处理HPC细胞,Ca^(2+)成像系统实时检测药物处理后HPC细胞... 目的探究降血压药物氨氯地平对足细胞内Ca^(2+)内流及其自噬的影响。方法体外常规培养永生化的人足细胞(HPC),使用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)以及L型Ca^(2+)阻断剂氨氯地平单独或者联合处理HPC细胞,Ca^(2+)成像系统实时检测药物处理后HPC细胞内Ca^(2+)通量的瞬时变化;Western blot法检测自噬标志蛋白LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值变化、Beclin-1、P62和凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达水平;流式细胞术检测488 nm处Fluo-4AM的阳性细胞数以分析HPC细胞内Ca^(2+)内流水平;Lyso-Tracker Green活细胞染色分析溶酶体荧光强度;流式细胞术检测HPC细胞凋亡率。结果与对照组比较,AngⅡ组Ca^(2+)瞬时通量和Fluo-4AM阳性细胞数显著增加(P<0.001)、自噬标志蛋白LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值(P<0.001)和Beclin-1的蛋白表达(P<0.01)均降低、P62的表达升高(P<0.01)、溶酶体荧光强度减弱(P<0.05)、细胞凋亡率升高(P<0.0001)、凋亡相关蛋白Bcl-2表达降低(P<0.01)、Bax蛋白升高(P<0.001)。与对照组比较,氨氯地平组Fluo-4AM阳性细胞数显著降低(P<0.001)、LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值(P<0.001)和Beclin-1的蛋白表达(P<0.001)均升高、P62蛋白表达降低(P<0.05)、溶酶体荧光强度增强(P<0.01)、细胞凋亡率降低(P<0.01)、Bcl-2蛋白表达升高(P<0.001)、Bax蛋白降低(P<0.001)。与AngⅡ组比较,AngⅡ+氨氯地平组Fluo-4AM阳性细胞数显著降低(P<0.001)、LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值(P<0.01)以及Beclin-1的蛋白表达升高(P<0.05)、P62蛋白降低(P<0.01)、溶酶体荧光强度增加(P<0.05)、细胞凋亡率降低(P<0.001)、Bcl-2蛋白表达升高(P<0.001)、Bax蛋白表达降低(P<0.001)。结论氨氯地平抑制足细胞内Ca^(2+)内流,促进足细胞自噬、抑制凋亡,对于预防高血压肾病发生具有一定的作用。 展开更多
关键词 细胞 氨氯地平 血管紧张素Ⅱ 自噬 CA^(2+) 细胞凋亡
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内皮素-1和细胞内Ca^(2+)含量在继发性脊髓损伤中作用机制的研究
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作者 蔡卫华 叶晓健 +1 位作者 崔志明 贾连顺 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 2004年第10期751-752,755,共3页
目的:通过检测大鼠颈脊髓损伤(SCI)后不同时间段伤段脊髓组织内皮素-1(ET-1)含量和细胞内Ca2+含量的变化,探讨继发性脊髓损伤中ET-1和细胞内Ca2+的作用机制。方法:Sprague-Dawley雄性大鼠80只,应用改良Allen打击法,致伤力为50g·cm... 目的:通过检测大鼠颈脊髓损伤(SCI)后不同时间段伤段脊髓组织内皮素-1(ET-1)含量和细胞内Ca2+含量的变化,探讨继发性脊髓损伤中ET-1和细胞内Ca2+的作用机制。方法:Sprague-Dawley雄性大鼠80只,应用改良Allen打击法,致伤力为50g·cm,造成C6、7段脊髓中度损伤模型后,分别在SCI后2h、4h、8h、24h、72h、1w和2w,应用放射免疫法和原子吸收光谱分析法测定脊髓组织中ET-1和Ca2+的含量。结果:损伤节段脊髓组织ET-1和Ca2+含量均随病程而改变,伤后4h达最高峰,并分别持续至48h和72h,于1-2w仍维持较高水平。结论:SCI后早期伤段脊髓内ET-1和Ca2+含量增高,共同参与了继发性脊髓损伤。 展开更多
关键词 内皮素-1 细胞内Ca^2+含量 继发性脊髓损伤 作用机制 检测 大鼠
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玉米种子萌发过程中Na^+、K^+和Ca^2+含量变化与耐盐性的关系 被引量:28
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作者 商学芳 董树亭 +1 位作者 郑世英 王丽燕 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期333-336,共4页
玉米耐盐品种登海9号和盐敏感品种浚单18在含0、50、100、150和200mmolL-1 NaCl的营养液中萌发生长,采用等离子质谱分别测定其萌动种子种皮、胚、胚乳和幼苗根、根颈、叶中Na+、K+、Ca2+的含量。结果表明,随着培养液中NaCl浓度的增加,... 玉米耐盐品种登海9号和盐敏感品种浚单18在含0、50、100、150和200mmolL-1 NaCl的营养液中萌发生长,采用等离子质谱分别测定其萌动种子种皮、胚、胚乳和幼苗根、根颈、叶中Na+、K+、Ca2+的含量。结果表明,随着培养液中NaCl浓度的增加,玉米体内Na+含量逐渐升高,在幼苗中表现地下部(根和根颈)显著高于地上部(叶);在萌动种子中,胚中Na+积累量显著高于种皮和胚乳。根系积累Na+能力较强,胚拒Na+能力较弱,种皮具有一定的Na+累积能力。随NaCl浓度的增加,K+和Ca2+含量逐渐降低,尤其是Ca2+含量急剧减少,达38.4%~55.9%(登海9号)和65.6%~78.2%(浚单18)。玉米根、根颈、种皮的Na+积累能力、叶的拒Na+能力和幼苗选择吸收Ca2+的能力可能与品种耐盐性有关。 展开更多
关键词 玉米 盐胁迫 Na^+含量 K^+含量 CA^2+含量 种子萌发
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补骨脂素对HL60细胞凋亡及细胞内Ca^(2+)浓度影响的探讨 被引量:16
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作者 蔡宇 陈冰 +1 位作者 张荣华 杨燕霞 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期64-66,共3页
目的:探讨补骨脂素对HL60细胞凋亡的影响,以及细胞内Ca2+浓度与凋亡之间关系。方法:采用MTT比色分析法测定补骨脂素对HL60的细胞毒性影响,流式细胞仪及激光共聚焦显微镜测定HL细胞内Ca2+浓度和凋亡比率。结果:补骨脂素对HL60细胞生长具... 目的:探讨补骨脂素对HL60细胞凋亡的影响,以及细胞内Ca2+浓度与凋亡之间关系。方法:采用MTT比色分析法测定补骨脂素对HL60的细胞毒性影响,流式细胞仪及激光共聚焦显微镜测定HL细胞内Ca2+浓度和凋亡比率。结果:补骨脂素对HL60细胞生长具有抑制作用,补骨脂素促进细胞凋亡比率,细胞凋亡与Ca2+浓度成正相关。结论:补骨脂素影响HL60细胞凋亡,Ca2+介导的细胞凋亡是补骨脂素抑制肿瘤细胞生长的可能机制之一。 展开更多
关键词 补骨脂素 HL60细胞 凋亡 CA^2+
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应用Ca^(2+)荧光探针fluo-3和fluo-4测定H_2O_2诱导的A549细胞凋亡过程中的[Ca^(2+)]_i变化 被引量:7
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作者 张四洋 李春艳 +2 位作者 高建 邱雪杉 崔泽实 《中国肺癌杂志》 CAS 北大核心 2014年第3期197-202,共6页
背景与目的肺癌是世界范围内常见的恶性肿瘤,Ca2+对于肿瘤细胞凋亡有重要的调控作用。实时监测肺癌细胞内Ca2+水平,有助于深入研究Ca2+介导肺癌细胞凋亡的分子机制。本研究旨在观察Ca2+荧光探针fluo-3和fluo-4在H2O2诱导的A549细胞凋亡... 背景与目的肺癌是世界范围内常见的恶性肿瘤,Ca2+对于肿瘤细胞凋亡有重要的调控作用。实时监测肺癌细胞内Ca2+水平,有助于深入研究Ca2+介导肺癌细胞凋亡的分子机制。本研究旨在观察Ca2+荧光探针fluo-3和fluo-4在H2O2诱导的A549细胞凋亡过程中的应用,实时测定胞浆Ca2+浓度([Ca2+]i),探讨[Ca2+]i与细胞凋亡的关系,并比较两种Ca2+探针在荧光强度及[Ca2+]i测定值方面的差异。方法采用Ca2+荧光探针fluo-3和fluo-4负载细胞,1 h后用不同浓度的H2O2刺激细胞,激光扫描共聚焦显微镜实时测定选取细胞的[Ca2+]i变化。采用DAPI染色试剂盒观察H2O2刺激后细胞凋亡情况。结果在相同的探针浓度、负载时间和相同的图像采集参数的条件下,选定细胞内fluo-4平均荧光强度高于fluo-3。50 mM H2O2刺激后,A549细胞胞浆内[Ca2+]i迅速升高,通过公式计算发现采用fluo-3探针负载的选定细胞中[Ca2+]i变化范围是112.2 nM-1,069.6 nM,采用fluo-4探针负载的选定细胞中[Ca2+]i变化范围是7.6nM-505.4 nM。同时发现经H2O2刺激后,凋亡细胞百分比明显增加(P<0.01)。结论 H2O2促进A549细胞内Ca2+释放,诱导细胞凋亡。Ca2+探针fluo-4可能更适合于监测含量较低的细胞中[Ca2+]i变化。 展开更多
关键词 Fluo-3 Fluo-4 CA^2+ H2O2 细胞凋亡
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灵芝多糖对小鼠T细胞胞浆游离Ca^(2+)浓度和胞内pH的影响 被引量:23
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作者 李明春 雷林生 +4 位作者 王庆彪 梁东升 许自明 杨淑琴 孙莉莎 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期167-170,共4页
目的通过考察灵芝多糖(GLP)对免疫细胞信号转导过程的影响,探讨GLP免疫调节作用机制。方法采用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)技术,动态监测GLP均一体组分GLB7对小鼠T细胞胞浆游离Ca2+浓度([Ca2+)和胞... 目的通过考察灵芝多糖(GLP)对免疫细胞信号转导过程的影响,探讨GLP免疫调节作用机制。方法采用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)技术,动态监测GLP均一体组分GLB7对小鼠T细胞胞浆游离Ca2+浓度([Ca2+)和胞内 pH([pH]i)的影响。结果 GLB7(20mg·L-1)引起小鼠 T细胞中[Ca2+];和[pH];明显升高,1min即分别升高至334.70%±16,4%(n=3)、171.6% ± 10.4%(n=3),之后一直分别维持在该平台期,至 10 min仍维持高峰水平。加入ECTA和 verapamil处理后, 10 min GLB7 引起 T细胞[Ca2+];和[pH];分别升高为 202.4%± 13.6%(n=3)。140.2%±7.8%(n=3),与正常对照组比较差异有显著性(P<0.01)。以 EGTA和 verapamil处理后,再分别以 hep-erin和 procaine处理细胞 10 min,之后以 GLB7刺激T细胞,10min[Ca2+]i值分别为151.5%±9.4%(n=3)、143.2%± 8.1 %( n= 3),与 EGTA和 verapamil处理组相比差异有显著性( P< 0.01)。 展开更多
关键词 灵芝多糖 T细胞 游离胞浆Ca^2+浓度 PH值 激光扫描共聚焦显微镜
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18β-甘草次酸诱导人乳腺癌细胞凋亡及其细胞内Ca^(2+)水平的变化 被引量:18
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作者 黄炜 陈新美 +2 位作者 张志凌 罗惠玲 张东方 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2006年第2期102-106,共5页
背景与目的:18-甘草次酸是甘草的重要成分,近年来的研究发现18-甘草次酸具有抑制人淋巴细胞性白血病、肝癌和肺癌的细胞增殖。本研究探讨18-甘草次酸对人乳腺癌MCF-7细胞诱导凋亡的作用。目前研究已证实细胞内游离Ca2+浓度([Ca2+]i)的... 背景与目的:18-甘草次酸是甘草的重要成分,近年来的研究发现18-甘草次酸具有抑制人淋巴细胞性白血病、肝癌和肺癌的细胞增殖。本研究探讨18-甘草次酸对人乳腺癌MCF-7细胞诱导凋亡的作用。目前研究已证实细胞内游离Ca2+浓度([Ca2+]i)的动态变化在诱发细胞凋亡过程的多个环节中起重要作用,因此本研究也探讨由18-甘草次酸诱导的MCF-7细胞凋亡发生与[Ca2+]i变化的关系。方法:用50~250μmol/L浓度梯度的18β-甘草次酸处理MCF-7细胞24h,用MTT比色法测定细胞增殖能力。100μmol/L和150μmol/L 18β-甘草次酸处理细胞24 h,用末端脱氧核苷酸转移酶介导dUTP末端标记法、Annexin V流式细胞仪法和单细胞凝胶电泳法检测凋亡细胞。150μmol/L 18β-甘草次酸处理细胞24 h,用Fura-2荧光负载方法测定[Ca2+]i的变化。分别用100μmol/L BAPTA-AM和0.5 mmol/L EGTA与150μmol/L 18β-甘草次酸联合处理MCF-7细胞24 h,用单细胞凝胶电泳法检测凋亡细胞。结果:从100μmol/L 18β-甘草次酸浓度起对MCF-7细胞的增殖抑制率显著升高(P<0.01和P<0.05),呈剂量依赖性,半增殖抑制浓度(IC 50)为234.33μmol/L。100μmol/L和150μmol/L 18β-甘草次酸使细胞凋亡率显著升高(P<0.01和P<0.05);18β-甘草次酸处理组的[Ca2+]i也明显高于对照组(P<0.05)。18β-甘草次酸与BAPTA-AM联合处理组和18β-甘草次酸与EGTA联合处理组的凋亡率均明显低于单纯的150μmol/L18β-甘草次酸处理组(P<0.05和P<0.01)。结论:18-甘草次酸具有抑制MCF-7细胞增殖和诱导其凋亡的作用,而18-甘草次酸诱导MCF-7细胞凋亡的作用在抑制该细胞增殖方面起主要作用。18-甘草次酸诱导MCF-7细胞凋亡依赖于细胞内Ca2+水平上调,而细胞外Ca2+内流是导致细胞内Ca2+水平上调的原因之一。 展开更多
关键词 人乳腺癌细胞 18Β-甘草次酸 凋亡 增殖 细胞内CA^2+
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低温胁迫下夏威夷椰子幼苗叶肉细胞Ca^(2+)水平及细胞超微结构变化的研究 被引量:20
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作者 丁印龙 廖启炓 +1 位作者 谢潮添 杨盛昌 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期679-682,共4页
用焦锑酸钙沉淀的电镜细胞化学方法 ,研究了低温胁迫下夏威夷椰子 (PritchardiagaudichaudiiH .Wendl.)幼苗叶肉细胞内Ca2 + 水平的变化 .研究结果表明 ,未经低温处理的夏威夷椰子幼苗叶肉细胞 ,焦锑酸钙沉淀颗粒大量出现在液泡中 ,而... 用焦锑酸钙沉淀的电镜细胞化学方法 ,研究了低温胁迫下夏威夷椰子 (PritchardiagaudichaudiiH .Wendl.)幼苗叶肉细胞内Ca2 + 水平的变化 .研究结果表明 ,未经低温处理的夏威夷椰子幼苗叶肉细胞 ,焦锑酸钙沉淀颗粒大量出现在液泡中 ,而细胞基质及细胞间隙中则看不到焦锑酸钙沉淀 .而夏威夷椰子幼苗经过 2℃ ,48h低温处理后 ,细胞基质和细胞膜、液泡膜上焦锑酸钙沉淀增加 ,而液泡中的焦锑酸钙沉淀减少 ,并且超微结构已初步显示出寒害的特征 ,叶绿体外膜部分破损 ,类囊体片层稀疏且排列不规则 .而夏威夷椰子幼苗经过 2℃ ,96h低温处理后 ,Ca2 +大量分布于液泡和细胞基质中 ,细胞间隙中也可见少量斑块状沉淀 ,大部分细胞结构已经严重破损 ,内部结构分辨不清呈现出了遭受严重冷害的症状 .从而揭示了Ca2 + 展开更多
关键词 幼苗叶肉细胞 Ca^2+水平 超微结构 夏威夷椰子 低温胁迫 细胞化学 抗寒性 植物抗逆性 观叶植物
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氟对体外培养大鼠成釉细胞HAT-7细胞活性和对细胞内Ca^(2+)浓度的影响 被引量:8
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作者 马林 张颖 +6 位作者 钟鸣 朱莉 张凯强 顾和峰 刘璐 张思宇 程睿波 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期7-10,共4页
目的:观察氟对体外培养的大鼠成釉细胞HAT-7细胞活性及细胞内Ca2+浓度的影响。方法:取对数生长期的HAT-7细胞,分别加入不同浓度的Na F培养液,培养24、48、72 h后,用CCK-8检测细胞的活性;流式细胞术分析氟对细胞凋亡的影响;激光共聚焦显... 目的:观察氟对体外培养的大鼠成釉细胞HAT-7细胞活性及细胞内Ca2+浓度的影响。方法:取对数生长期的HAT-7细胞,分别加入不同浓度的Na F培养液,培养24、48、72 h后,用CCK-8检测细胞的活性;流式细胞术分析氟对细胞凋亡的影响;激光共聚焦显微镜检测细胞内钙离子的浓度。结果:Na F浓度为0.4、0.8 mmol/L时,促进成釉细胞增殖;当Na F浓度大于1.6 mmol/L时,促进成釉细胞凋亡,Na F浓度为1.6 mmol/L时,细胞早期凋亡数量增加,激光共聚焦显微镜检测证实,1.6mmol/L Na F可以诱导大鼠成釉细胞内Ca2+浓度升高,Na F对HAT-7细胞的上述作用与浓度和作用时间呈正相关。结论:低浓度氟促进HAT-7细胞增殖,高浓度则抑制其增殖。Na F浓度超过1.6 mmol/L时,可诱导成釉细胞凋亡,并诱导成釉细胞内Ca2+浓度增加。 展开更多
关键词 成釉细胞 CCK8 流式细胞 CA^2+ 激光共聚焦
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Ca^(2+)浸泡处理对发芽糙米生理指标和GABA等物质含量的影响 被引量:21
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作者 韩永斌 顾振新 蒋振辉 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第10期58-61,共4页
本文研究了外源Ca2+对糙米在浸泡发芽过程中生长状况、呼吸强度和γ-氨基丁酸(GABA)等几种物质含量的影响。结果表明,Ca2+处理浓度在0.5~2.5mmol/L时可加速糙米生长,处理浓度为10mmol/L时抑制其生长;Ca2+能提高发芽糙米的呼吸强度,有利... 本文研究了外源Ca2+对糙米在浸泡发芽过程中生长状况、呼吸强度和γ-氨基丁酸(GABA)等几种物质含量的影响。结果表明,Ca2+处理浓度在0.5~2.5mmol/L时可加速糙米生长,处理浓度为10mmol/L时抑制其生长;Ca2+能提高发芽糙米的呼吸强度,有利于GABA的积累和抑制Glu,且浓度越高,效果越明显;但对可溶性蛋白质、游离氨基酸、淀粉和还原糖含量的影响不显著。 展开更多
关键词 CA^2+ 发芽糙米 生理指标 γ-氨基丁酸(GABA) 主要物质含量
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淡化养殖水体中Ca^(2+)与Mg^(2+)含量对南美白对虾生长的影响 被引量:29
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作者 朱春华 徐志标 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2002年第6期46-48,共3页
关键词 淡化养殖 水体 CA^2+ MG^2+ 含量 南美白对虾 生长
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Ca^(2+)载体A23187对受精失败人类成熟卵母细胞的补救激活作用 被引量:6
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作者 舒益民 庄广伦 +2 位作者 周灿权 徐艳文 张敏芳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期260-262,共3页
目的 :观察Ca2 + 载体A2 31 87对受精失败人类成熟卵母细胞的补救激活及激活后的胚胎发育情况。方法 :收集常规体外受精 (IVF)及卵浆内单精子注射 (ICSI)后 2 4h仍无受精征象的成熟卵母细胞作为研究对象 ,5μmol/LCa2 + 载体A2 31 87中... 目的 :观察Ca2 + 载体A2 31 87对受精失败人类成熟卵母细胞的补救激活及激活后的胚胎发育情况。方法 :收集常规体外受精 (IVF)及卵浆内单精子注射 (ICSI)后 2 4h仍无受精征象的成熟卵母细胞作为研究对象 ,5μmol/LCa2 + 载体A2 31 87中处理 5min,观察第二极体排出及原核形成情况 ,激活后卵母细胞在体外继续培养 2d。结果 :IVF组及ICSI组卵母细胞激活率分别为 64 9% (2 4 / 37)和 73 2 % (30 / 4 1 )。ICSI组受精失败卵母细胞激活后主要表现为二极体二原核 (2PB +2PN) (80 % ,2 4 / 30 ) ,而IVF组仅有 2 0 %的被激活卵母细胞表现为 2PB +2PN ,两组间差异具极显著 (P <0 0 1 )。 31个 2PN卵母细胞继续培养 ,2 5个发生分裂 ,1 1个发育到 2 - 4细胞 ,8个发育到 4 - 8细胞 ,6个发育到 8-细胞以上阶段。结论 :Ca2 + 载体A2 31 87能够有效地激活ICSI后受精失败卵母细胞恢复受精并继续发育成胚胎。 展开更多
关键词 卵母细胞 激活 受精失败 CA^2+ 载体 A23187
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异丙酚对PC12细胞膜流动性及[Ca^(2+)]_i的影响 被引量:5
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作者 盛国庆 张晋蓉 +2 位作者 戴体俊 蒲小平 李长龄 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期264-266,共3页
目的 研究异丙酚对PC12细胞膜流动性及 [Ca2 + ]i的影响。方法 以PC12细胞作为神经细胞模型 ,加入不同浓度的异丙酚 ,用荧光偏振法测定细胞膜微粘度 η的动态变化 ,用激光扫描共聚焦显微镜检测 [Ca2 + ]i 随时间变化曲线。结果 ①异... 目的 研究异丙酚对PC12细胞膜流动性及 [Ca2 + ]i的影响。方法 以PC12细胞作为神经细胞模型 ,加入不同浓度的异丙酚 ,用荧光偏振法测定细胞膜微粘度 η的动态变化 ,用激光扫描共聚焦显微镜检测 [Ca2 + ]i 随时间变化曲线。结果 ①异丙酚各剂量组的 η值均降低 ,并呈现剂量依赖性 ;② 30、10 0mg·L-1的异丙酚在加药后 2 0~ 30s使[Ca2 + ]i 短暂升高 ,[Ca2 + ]i的峰值分别比加药前增加了119%和 14 0 % ,但在 5 0s内均恢复到加药前水平。 展开更多
关键词 异丙酚 PC12细胞 膜流动性 [CA^2+]I 机理
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外源性Wnt5a激活K562细胞非经典Wnt5a/Ca^2+信号途径研究 被引量:4
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作者 李招权 司维柯 +3 位作者 邹全明 袁媛 潘静 赵宸 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期924-927,共4页
目的观察外源性Wat5a对K562细胞非经典Wnt5a/Ca2+途径的影响,进一步研究外源性Wnt5a诱导K562细胞的分化机制。方法激光共聚焦显微镜观察Ca2+内流的变化,以RT-PCR及免疫组化检测β-catenin的表达变化,以Western blot检测cyclinD1的表达... 目的观察外源性Wat5a对K562细胞非经典Wnt5a/Ca2+途径的影响,进一步研究外源性Wnt5a诱导K562细胞的分化机制。方法激光共聚焦显微镜观察Ca2+内流的变化,以RT-PCR及免疫组化检测β-catenin的表达变化,以Western blot检测cyclinD1的表达变化。结果外源性Wnt5a能明显促进K562细胞Ca2+内流,显著下调cyclinD1表达,且能下调K562细胞β-catenin表达,但β-catenin表达下调无统计学意义。结论外源性Wnt5a能激活K562细胞非经典Wnt5a/Ca2+途径,外源性Wnt5a诱导K562细胞分化机制可能与此相关。 展开更多
关键词 WNT5A K562细胞 CA^2+ β-catenin CYCLIN D1
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低温胁迫下枇杷幼叶细胞内Ca^(2+)水平及细胞超微结构变化的研究 被引量:21
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作者 陈由强 叶冰莹 +1 位作者 高一平 陈文列 《武汉植物学研究》 CSCD 2000年第2期138-142,共5页
用焦锑酸钾沉淀的电镜细胞化学方法 ,研究了低温胁迫下枇杷幼叶细胞内 Ca2 + 水平变化。研究结果表明 ,枇杷幼叶细胞未经低温处理时 ,Ca2 +定位分布的沉淀颗粒大量出现在细胞壁、细胞间隙、质膜和液泡 ;叶绿体、细胞质和细胞核中也有一... 用焦锑酸钾沉淀的电镜细胞化学方法 ,研究了低温胁迫下枇杷幼叶细胞内 Ca2 + 水平变化。研究结果表明 ,枇杷幼叶细胞未经低温处理时 ,Ca2 +定位分布的沉淀颗粒大量出现在细胞壁、细胞间隙、质膜和液泡 ;叶绿体、细胞质和细胞核中也有一些 Ca2 +沉淀颗粒分布。枇杷幼叶经 44h、4℃低温处理后 ,在质膜和液泡膜上 Ca2 + 的沉淀增多 ,细胞质和细胞核中的Ca2 +水平增加。不抗寒品种在低温胁迫条件下可见核孔开口较大 ,有时可观察到核内容物外漏。抗寒品种在低温胁迫条件下核孔未见明显开口 ,叶绿体中类囊体不形成基粒 ,少数片层结合重叠后伸展在整个叶绿体中。而不抗寒品种类囊体则堆积形成明显的颗粒状基粒 ,类囊体片层数量较多。在 2个叶绿体之间还常可见到线粒体紧夹其间 ,但线粒体的内膜模糊不清。不抗寒品种内质网和高尔基体也较多见 ,内膜系统比较发达 ,但低温胁迫条件下膜系统易受破坏 ,膜结构模糊不清。 展开更多
关键词 枇杷 低温胁迫 细胞化学 细胞超微结构 CA^2+
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线粒体Ca^(2+)转运与细胞代谢调节 被引量:8
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作者 梁晚益 杨宗城 黄跃生 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期357-360,共4页
线粒体具有一套完整的Ca2 + 转运系统 ,包括两条摄取途径和三条释放途径。生理条件下 ,它们在细胞胞质与线粒体钙稳态维持以及细胞能量代谢中起重要作用 ,线粒体从胞质摄取的Ca2 + 可激活某些Ca2 + 敏感的呼吸酶和代谢过程。病理条件下 ... 线粒体具有一套完整的Ca2 + 转运系统 ,包括两条摄取途径和三条释放途径。生理条件下 ,它们在细胞胞质与线粒体钙稳态维持以及细胞能量代谢中起重要作用 ,线粒体从胞质摄取的Ca2 + 可激活某些Ca2 + 敏感的呼吸酶和代谢过程。病理条件下 ,线粒体Ca2 + 转运发生紊乱 。 展开更多
关键词 线粒体 Ca^2+转运系统 细胞代谢 调节机制
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绞股蓝总黄酮对缺氧心肌细胞损伤标记物及细胞内游离Ca^2+浓度的影响 被引量:8
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作者 李乐 高小利 丁宝兴 《浙江工业大学学报》 CAS 2008年第1期23-25,共3页
探讨绞股蓝总黄酮(TFG)对缺氧心肌细胞损伤标记物及细胞内游离Ca2+浓度的影响.在离体乳鼠心肌细胞原代培养基础上制备心肌细胞缺氧模型,随机分为正常对照组、缺氧损伤组和绞股监总黄酮干预缺氧损伤组.分别测定各组心肌培养基中乳酸脱氢... 探讨绞股蓝总黄酮(TFG)对缺氧心肌细胞损伤标记物及细胞内游离Ca2+浓度的影响.在离体乳鼠心肌细胞原代培养基础上制备心肌细胞缺氧模型,随机分为正常对照组、缺氧损伤组和绞股监总黄酮干预缺氧损伤组.分别测定各组心肌培养基中乳酸脱氢酶(LDH)、肌钙蛋白I(cTn I)的含量,心肌细胞内游离Ca2+的浓度(荧光探针法).缺氧损伤组心肌培养基中LDH和cTnI的含量及心肌细胞内游离Ca2+浓度较正常对照组明显增加(P<0.05或0.01);经TFG干预后细胞培养基中LDH利cTnI的含量及心肌细胞内游离Ca2+浓度较缺氧损伤组明显降低(P<0.05或0.01).TFG对缺氧心肌细胞具有保护作用,其机理可能与减轻心肌细胞内钙超负荷有关. 展开更多
关键词 TFG 缺氧心肌细胞 CTN I LDH 游离CA^2+
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豚鼠耳蜗Hensen细胞的分离、活性鉴定及其胞内静态游离Ca^(2+)分布 被引量:4
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作者 赵立东 周春喜 +1 位作者 李楠 李兴启 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期13-16,W005,共5页
使用酶消化法及机械分离法对 Hensen细胞进行分离 ,置于倒置显微镜下用碘化丙啶及钙敏荧光染料 Fluo-3进行细胞活性鉴定并在激光扫描共聚焦显微镜下观察静息状态 Hensen细胞内的游离 Ca2 +的时空分布。结果证明 ,每个豚鼠耳蜗可以得到... 使用酶消化法及机械分离法对 Hensen细胞进行分离 ,置于倒置显微镜下用碘化丙啶及钙敏荧光染料 Fluo-3进行细胞活性鉴定并在激光扫描共聚焦显微镜下观察静息状态 Hensen细胞内的游离 Ca2 +的时空分布。结果证明 ,每个豚鼠耳蜗可以得到单离的 Hensen细胞 5~ 12个。细胞活性良好 ,可保持 5~ 6h。当细胞变性、坏死时可见一系列的形态学变化。对此得出几点判断 Hensen细胞活性的标准 :(1)细胞体呈卵圆形或椭圆形 ,大小可不一致 ;(2 )细胞膜完整 ,细胞边界清楚 ,折光现象明显 ;(3 )细胞浆清澈透明 ,无布朗运动 ,无溢出 ;(4 )细胞浆内的脂滴清晰可辨 ,折光现象明显 ;(5 )细胞无水肿 (即无气球样变 )。在静息状态下 ,Hensen细胞内的 Ca2 + 在细胞内分布不均匀 ,脂滴所在部位没有 Ca2 + 的分布。随时间延长 ,细胞内的 [Ca2 + ] i可小幅度振荡 ,但基本处于一种稳定状态。本工作为进一步对 展开更多
关键词 Hensen细胞 细胞活性 形态学 耳蜗 豚鼠 分离 活性鉴定 胞内静态游离Ca^2+ 分布
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三氧化二砷、地塞米松和沙利度胺对骨髓瘤细胞U266凋亡及胞浆内Ca^(2+)浓度的影响 被引量:4
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作者 林如峰 陆化 +7 位作者 刘澎 王永韧 沈文怡 吴雨洁 张建富 费小明 葛峥 李建勇 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第6期1200-1203,共4页
为了探讨三氧化二砷(As2O3)、地塞米松(dexamethasone,Dex)和沙利度胺(thalidomide,Thal)诱导骨髓瘤细胞株U266细胞凋亡时对胞浆内Ca2+浓度([Ca2+]i)的影响,用含15%FBS的RPMI1640培养液培养U266细胞并按5×105/(ml.well)接种于24孔... 为了探讨三氧化二砷(As2O3)、地塞米松(dexamethasone,Dex)和沙利度胺(thalidomide,Thal)诱导骨髓瘤细胞株U266细胞凋亡时对胞浆内Ca2+浓度([Ca2+]i)的影响,用含15%FBS的RPMI1640培养液培养U266细胞并按5×105/(ml.well)接种于24孔板中,分别用不同浓度的As2O3、Dex和Thal干预8小时后收集U266细胞,用荧光显微镜观察细胞凋亡,以AnnexinV-FITC/PI双参数流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡,负载Fluo-3/AM荧光素FCM检测[Ca2+]i。结果显示:①随As2O3、Dex和Thal浓度增加,荧光显微镜下带有荧光信号的凋亡细胞逐渐增多;②As2O3、Dex和Thal作用U266细胞后FCM测得凋亡细胞比例从对照组的0.56%分别升至31.54%、28.35%、21.97%;③As2O3、Dex诱导U266细胞凋亡时[Ca2+]i升高,升高的程度与药物浓度成正比关系;④Thal诱导细胞凋亡时未观察到[Ca2+]i有明显改变。结论:[Ca2+]i的升高是As2O3、Dex诱导U266细胞凋亡的机制之一,Thal诱导U266细胞凋亡与[Ca2+]i的变化无明显关系。 展开更多
关键词 三氧化二砷 地塞米松 沙利度胺 胞浆内[Ca^2+] 细胞凋亡 U266细胞
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AngⅡ对大鼠肝脏星状细胞内[Ca^(2+)]_i及其增殖的影响 被引量:4
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作者 汪余勤 李定国 +3 位作者 周馨 潘勤 徐芹芳 陆汉明 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2002年第4期313-314,321,共3页
目的观察不同浓度血管紧张奏Ⅱ (Ang Ⅱ )对大鼠肝脏星状细胞 (HSC) [Ca2 +] i 及其增殖的影响 ,以探讨HSC和细胞内 [Ca2 +] i 的相关性。 方法HSC分离培养后 ,采有MTT法和Fura -2 AM荧光指示剂负载分别测定HSC增殖情况及细胞内 [Ca2 ... 目的观察不同浓度血管紧张奏Ⅱ (Ang Ⅱ )对大鼠肝脏星状细胞 (HSC) [Ca2 +] i 及其增殖的影响 ,以探讨HSC和细胞内 [Ca2 +] i 的相关性。 方法HSC分离培养后 ,采有MTT法和Fura -2 AM荧光指示剂负载分别测定HSC增殖情况及细胞内 [Ca2 +] i。 结果 10 - 9~ 10 - 5mol LAngⅡ能显著增加HSC内游离 [Ca2 +] i(P <0 .0 1) ,且呈剂量依赖关系 ;10 - 9~ 10 - 6mol LAngⅡ均能促进HSC增殖 ( P <0 .0 5 ) ,但 10 - 5mol LAngⅡ却对HSC增殖无显著影响 (P >0 .0 5 )。 结论在一定剂量范围内Ang Ⅱ能够剂量依赖性地促进HSC增殖和增加HSC内游离 [Ca2 +] i,二者存在一定相关性。 展开更多
关键词 血管紧张素Ⅱ 肝脏星状细胞 [CA^2+]I 细胞增殖
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