用组织微阵列技术分析鼻咽癌变多阶段组织细胞周期蛋白D_1过表达 被引量：14

1

作者 宋鑫 赵晓荣 +3 位作者 王一 周建华 关新元 曹亚 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第3期385-389,共5页

为了探讨细胞周期蛋白D1(CyclinD1)在鼻咽癌变多阶段病变组织中的蛋白质表达与鼻咽癌变的关系 ,应用组织微阵列 (tissuemicroarray)技术 ,采用免疫组化方法检测CyclinD1在鼻咽癌旁粘膜上皮单纯性增生 /化生 (simplehyperplasia/metaplas... 为了探讨细胞周期蛋白D1(CyclinD1)在鼻咽癌变多阶段病变组织中的蛋白质表达与鼻咽癌变的关系 ,应用组织微阵列 (tissuemicroarray)技术 ,采用免疫组化方法检测CyclinD1在鼻咽癌旁粘膜上皮单纯性增生 /化生 (simplehyperplasia/metaplasia ,SH/SM )、异型增生 /化生 (atypicalhyperplasia/metaplasia,AH/AM )和鼻咽癌 (nasopharyngealcarcinoma,NPC)的蛋白质表达 ,阳性表达率分别为 30 0 % (3/ 10 )、 90 0 % (18/ 2 0 )和6 2 9% (39/ 6 2 ) ,其中在异型增生 /化生中呈“一过性增高” .表明CyclinD1高表达可能为鼻咽癌发生过程中的早期事件 ;异型增生 /化生可能是鼻咽癌变的重要“关卡” . 展开更多

关键词 组织微阵列技术 分析 鼻咽癌变 多阶段组织细胞周期蛋白D1 过表达

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组织微阵列技术研究肿瘤转移相关基因在鼻咽癌中的表达与临床意义 被引量：11

2

作者 范松青 张文玲 +2 位作者 徐丽娜 周艳宏 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第5期616-623,共8页

利用高通量组织微阵列结合免疫组化检测MT1-MMP、MT2-MMP、Ezrin、nm23-H1、E-cad和TIMP-2在鼻咽癌组织中的蛋白质表达,探讨肿瘤转移相关基因异常表达在鼻咽癌侵袭转移中的作用,筛选鼻咽癌转移相关分子标志物.结果发现,鼻咽癌组织存在MT... 利用高通量组织微阵列结合免疫组化检测MT1-MMP、MT2-MMP、Ezrin、nm23-H1、E-cad和TIMP-2在鼻咽癌组织中的蛋白质表达,探讨肿瘤转移相关基因异常表达在鼻咽癌侵袭转移中的作用,筛选鼻咽癌转移相关分子标志物.结果发现,鼻咽癌组织存在MT1-MMP、Ezrin蛋白高表达(P<0.01)和nm23-H1、TIMP-2蛋白低表达(P<0.05).临床Ⅱ期、Ⅲ期和Ⅳ期鼻咽癌和淋巴结转移鼻咽癌中MT1-MMP、MT2-MMP和Ezrin蛋白阳性表达显著高于临床Ⅰ期鼻咽癌和无转移癌(P<0.05,P<0.01),但临床Ⅱ期、Ⅲ期和Ⅳ期鼻咽癌和淋巴结转移鼻咽癌中nm23-H1蛋白的阳性表达显著低于临床Ⅰ期鼻咽癌和无转移癌(P<0.05).鼻咽癌组织中MT1-MMP与MT2-MMP(r=0.308,P<0.001),nm23-H1与E-cad(r=0.167,P<0.05)及TIMP-2(r=0.279,P=0.001),E-cad与TIMP-2(r=0.279,P=0.001)的蛋白质表达呈显著正相关.MT1-MMP与E-cad(r=-0.188,P<0.05)及TIMP-2(r=-0.233,P<0.05),Ezrin与E-cad(r=-0.204,P<0.05)的蛋白质表达呈显著性负相关.聚类分析显示,鼻咽癌MT1-MMP、MT2-MMP和Ezrin蛋白共同阳性表达显著高于慢性炎性鼻咽上皮(P<0.05),但nm23-H1、E-cad和TIMP-2蛋白在鼻咽癌组织中的共同阴性显著高于癌旁上皮和慢性炎性鼻咽上皮(P<0.05,P<0.01).多因素分析和有效性评估发现,MT1-MMP蛋白能较好地独立预测鼻咽癌淋巴结转移和临床进展.上述研究结果提示,多个肿瘤转移基因的蛋白质高表达,转移抑制基因的低表达和这些基因的蛋白质表达失平衡在鼻咽癌淋巴结转移和临床进展过程中起重要作用.MT1-MMP蛋白可作为预测鼻咽癌淋巴结转移的较好分子标志. 展开更多

关键词 肿瘤转移相关基因 鼻咽癌 组织微阵列 免疫组化

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一种组织微阵列供体取样与受体蜡块制作的新器具和新方法 被引量：9

3

作者 范松青 张文玲 +8 位作者 熊炜 马键 周洁 周鸣 肖炳燚 欧阳珏 张秋红 谭琛 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第5期474-479,共6页

发明一种组织微阵列供体取样与受体蜡块制作的新器具和新方法.利用这种新器具和新方法成功地制作了分别含448和390个供体组织点阵的组织微阵列受体蜡块和切片.这种新方法制作的组织微阵列切片经H&E染色,显微镜下观察证实,所有切片... 发明一种组织微阵列供体取样与受体蜡块制作的新器具和新方法.利用这种新器具和新方法成功地制作了分别含448和390个供体组织点阵的组织微阵列受体蜡块和切片.这种新方法制作的组织微阵列切片经H&E染色,显微镜下观察证实,所有切片均无供体点阵组织脱落,切片厚度适中,组织结构无挤压变形,细胞形态均匀一致.免疫组化检测P53和P16蛋白在组织微阵列切片与其相应的常规组织切片中的表达结果完全一致.这种组织微阵列供体取样与受体蜡块制作新器具和新方法成本低廉,操作简便,具有在实验室推广应用的价值. 展开更多

关键词 组织微阵列 组织阵列仪 免疫组化

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高通量组织微阵列研究Wnt5a和LMP1在鼻咽癌癌变中的作用 被引量：3

4

作者 徐丽娜 郑军 +2 位作者 李姣 石磊 范松青 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期865-870,共6页

目的:研究Wnt5a和EB病毒潜伏膜蛋白1(Epstein-Barr virus latent membrane protein 1,LMP1)在鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)癌变过程中作用的分子机制,评估其是否可作为NPC相关的分子标志物。方法:利用前期制备的NPC组织微阵列... 目的:研究Wnt5a和EB病毒潜伏膜蛋白1(Epstein-Barr virus latent membrane protein 1,LMP1)在鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)癌变过程中作用的分子机制,评估其是否可作为NPC相关的分子标志物。方法:利用前期制备的NPC组织微阵列芯片,免疫组织化学检测Wnt5a和LMP1在NPC癌变过程不同组织中的蛋白表达,分析Wnt5a异常激活和LMP1蛋白过表达在NPC发生发展中的作用及其与NPC临床病理特征的关系,评估其是否可作为鉴别鼻咽良恶性病变的分子标志物。结果:Wnt5a和LMP1蛋白在NPC中的阳性表达率显著高于异型增生鼻咽上皮、增生鼻咽上皮和正常鼻咽上皮(P<0.05,P<0.01,P<0.01);异型增生鼻咽上皮中的Wnt5a和LMP1蛋白阳性表达率也显著高于增生鼻咽上皮和正常鼻咽上皮(P<0.05,P<0.01)。Wnt5a蛋白和LMP1蛋白在临床Ⅲ和Ⅳ期NPC组织中的阳性表达率显著高于临床Ⅰ和Ⅱ期(P<0.01,P<0.05),有淋巴结转移的NPC组织中Wnt5a蛋白阳性表达率也显著高于无淋巴结转移NPC组织(P<0.01),非角化性NPC组织LMP1蛋白阳性表达显著高于未分化癌和角化性癌(P<0.05,P<0.05);NPC组织中Wnt5a与LMP1蛋白的阳性表达存在显著正相关性(r=0.354,P<0.001)。LMP1和Wnt5a蛋白联合表达检测有助于鼻咽良恶性病变的鉴别。结论:NPC组织中Wnt5a和LMP1的表达存在显著正相关,两者可能共同或相继促进鼻咽上皮细胞的恶性转化和NPC的发生发展;联合应用LMP1和Wnt5a可作为NPC鉴别诊断的较好分子标志物。 展开更多

关键词 鼻咽癌 WNT5A EB病毒 LMP1 组织微阵列 免疫组织化学

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应用组织微阵列技术研究肺癌组织中IGF-Ⅱ的表达 被引量：3

5

作者 朱丛中 王新允 +6 位作者 刘婷 李艳 孙锐 孙翠云 王爱香 赵敏 吴兴业 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2005年第2期126-129,共4页

目的:构建高通量组织微阵列(tissuemicroarray)/组织芯片(tissuechip),检测其上IGFⅡ的表达情况,以明确IGFⅡ表达与肺癌的相关性。方法:用组织阵列仪制备按不同组织学类型排布的组织芯片,然后用免疫组织化学SP法检测一张组织芯片上54例... 目的:构建高通量组织微阵列(tissuemicroarray)/组织芯片(tissuechip),检测其上IGFⅡ的表达情况,以明确IGFⅡ表达与肺癌的相关性。方法:用组织阵列仪制备按不同组织学类型排布的组织芯片,然后用免疫组织化学SP法检测一张组织芯片上54例肺癌肿瘤组织和10例正常肺组织样本中的IGFⅡ表达情况,并分析其表达与各临床病理学参数之间的相关性。结果:IGFⅡ蛋白在实验组中的阳性表达率为42.6%(23/54),对照组为阴性,两者之间具有显著性差异(P<0.05);IGFⅡ表达阳性率与大体类型、组织学分级、临床分期有关(P<0.05),而与性别、年龄、组织学分型及淋巴结转移无关(P>0.05)。结论:IGFⅡ的表达与肺癌的恶性行为有关,检测此指标对预测肺癌的预后和指导治疗有一定的参考价值。组织芯片是一较高的技术平台,可以应用此技术进行大规模组织样本的检测。 展开更多

关键词 肺肿瘤 肺癌 组织微阵列 组织芯片 IGF-Ⅱ 免疫组织化学

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胃癌组织常规切片和组织微阵列p53蛋白表达的比较 被引量：2

6

作者 刘强 朱建善 +2 位作者 许燕萍 向正华 吕军 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 2003年第6期676-677,共2页

关键词 胃癌组织 常规切片 组织微阵列 P53 蛋白表达

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组织微阵列方法分析晚期非小细胞肺癌患者HER2蛋白表达及其临床意义 被引量：1

7

作者 李宁 汪波 +5 位作者 张星 潘振奎 徐菲 王志强 张阳 张力 《中国肺癌杂志》 CAS 2006年第1期50-54,共5页

背景与目的组织芯片技术可以高通量地分析标本蛋白。本研究的目的是分析非小细胞肺癌患者HER2蛋白的表达情况及其与化疗疗效和生存的关系。方法将80例非小细胞肺癌患者的病理蜡块制成组织芯片,切片后使用免疫组织化学的方法分析HER2蛋... 背景与目的组织芯片技术可以高通量地分析标本蛋白。本研究的目的是分析非小细胞肺癌患者HER2蛋白的表达情况及其与化疗疗效和生存的关系。方法将80例非小细胞肺癌患者的病理蜡块制成组织芯片,切片后使用免疫组织化学的方法分析HER2蛋白的表达。结果80例患者中最终有74例可以进行免疫组化分析。全组HER2蛋白阳性率为31.1%(23/74)。其中,HER2蛋白阳性表达组化疗有效率为39.1%,阴性组为51.0%(P=0.345)。HER2蛋白阴性和阳性表达患者的生存时间差异没有统计学意义(P=0.437)。结论使用组织微阵列方法联合免疫组织化学方法分析非小细胞肺癌患者HER2蛋白表达是可行的。HER2蛋白阳性表达组和阴性组之间生存时间差异没有统计学意义。HER2蛋白在非小细胞肺癌中的作用还有待进一步研究。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 HER2 组织微阵列

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自制组织微阵列在自动免疫组化染色中应用 被引量：2

8

作者 孙廷谊 孔令非 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期585-586,共2页

自动免疫组化染色机能够自动完成免疫组化染色的所有步骤,具有节省试剂、染色速度快、工作效率高等优点,能有效地保证染色的准确性、可重复性以及整体染色的一致性.使用自动免疫组化染色机要求每次染色流程必须包含阳性对照和阴性对照,... 自动免疫组化染色机能够自动完成免疫组化染色的所有步骤,具有节省试剂、染色速度快、工作效率高等优点,能有效地保证染色的准确性、可重复性以及整体染色的一致性.使用自动免疫组化染色机要求每次染色流程必须包含阳性对照和阴性对照,其目的是为了确定试剂和仪器功能的可靠性.但一般的阳、阴性对照片因组织较大,给待染色组织裱在载玻片的下端提供了较小的区域,不利于使用小剂量模式滴加试剂（如LabVision Autostainer采用的微量滴加技术,最小试剂量低至80 μl）,也不利于检测滴加的试剂对组织的覆盖效果. 展开更多

关键词 组织微阵列 免疫组织化学 染色

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使用组织微阵列对浸润性膀胱癌癌基因的研究 被引量：2

9

作者 郑敏 Moch Holger 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期6-9,共4页

目的:比较基因杂交(CGH)研究发现染色体5p扩增与膀胱癌的发展有关;TRIO基因位于扩增区,其编码的蛋白在细胞周期调节中起主导作用。本研究在于了解TRIO的扩增和表达是否与膀胱癌的发展有关。方法:荧光原位杂交(FISH)、RNA原位杂交、North... 目的:比较基因杂交(CGH)研究发现染色体5p扩增与膀胱癌的发展有关;TRIO基因位于扩增区,其编码的蛋白在细胞周期调节中起主导作用。本研究在于了解TRIO的扩增和表达是否与膀胱癌的发展有关。方法:荧光原位杂交(FISH)、RNA原位杂交、NorthernBlot分析。结果:微小组织微阵列(TMA)FISH显示:12/14例膀胱癌组织显示TRIO扩增;含有1636例膀胱癌的组织微阵列FISH研究发现TRIO扩增与肿瘤浸润表现型、低分化密切相关。TRIO扩增仅见于1.5%早期膀胱肿瘤(pTaG1/G2)(7/456例),而在膀胱癌(pT1～4)高达12.8%(62/485例)。RNA原位杂交和NorthernBlot法证实TRIO在膀胱癌组织高表达。结论:TRIO扩增和高表达常发生在浸润性生长膀胱癌(pT1～4),可能在膀胱癌的发展过程中发挥重要作用。 展开更多

关键词 膀胱肿瘤 FISH RNA原位杂交 NORTHERN BLOT法 组织微阵列

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介绍一种大容量组织微阵列的制作方法

10

作者 蒋会勇 赵彤 张雪峰 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期818-819,共2页

传统的制作绀织微阵列方法是将待检的组织排列于同一受体蜡块内，因蜡块大小有限，所能排列组织芯的数目有限；正常在l张组织芯片上做200～400个点，如果增加点数，

关键词 组织微阵列 病理学诊断 高通量

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cDNA微阵列和组织微阵列对卵巢上皮性肿瘤基因的表达

11

作者 郑敏 Moch H 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期399-403,共5页

【目的】结合cDNA微阵列和RNA与冰冻组织微阵列原位杂交的方法以寻找新的特异性卵巢癌候选癌基因,为卵巢癌的早期诊断和治疗提供理论依据。【方法】利用cDNA微阵列筛选在所有3种上皮性卵巢肿瘤中(卵巢浆液性交界性肿瘤、卵巢浆液性腺癌... 【目的】结合cDNA微阵列和RNA与冰冻组织微阵列原位杂交的方法以寻找新的特异性卵巢癌候选癌基因,为卵巢癌的早期诊断和治疗提供理论依据。【方法】利用cDNA微阵列筛选在所有3种上皮性卵巢肿瘤中(卵巢浆液性交界性肿瘤、卵巢浆液性腺癌和卵巢子宫内膜样腺癌)显示有意义表达的基因,由RNA与冰冻组织微阵列原位杂交证实其结果。【结果】28个基因在>70%卵巢肿瘤中显示出高表达,18个基因在>70%卵巢肿瘤中低表达;干扰素诱导的转膜蛋白1(IITP1)被进一步用于RNA与冰冻组织微阵列原位杂交研究,其结果与cDNA微阵列研究结果相符合。【结论】将cDNA微阵列和RNA与冰冻组织微阵列原位杂交相结合是寻找卵巢癌候选癌基因的可行方法,研究中显示有意义表达的基因有可能作为新的上皮性卵巢癌候选癌基因。 展开更多

关键词 组织微阵列 CDNA微阵列 原位杂交 表达 卵巢癌 癌基因 RNA 膜蛋白 性腺 冰冻

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NGX6基因在多种常见癌组织中的原位表达及其临床意义的研究 被引量：9

12

作者 范松青 张文玲 +2 位作者 周鸣 彭淑平 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1014-1020,共7页

研究新的候选抑瘤基因NGX6在多种常见癌组织中的mRNA原位表达谱,分析NGX6 mRNA阳性率与肿瘤临床病理特征的关系并评估其作为肿瘤转移、预后预测分子标志物的有效性.利用已制作的多肿瘤组织和鼻咽癌组织微阵列,原位杂交检测NGX6 mRNA在... 研究新的候选抑瘤基因NGX6在多种常见癌组织中的mRNA原位表达谱,分析NGX6 mRNA阳性率与肿瘤临床病理特征的关系并评估其作为肿瘤转移、预后预测分子标志物的有效性.利用已制作的多肿瘤组织和鼻咽癌组织微阵列,原位杂交检测NGX6 mRNA在多种常见癌组织中的阳性率.结果显示,NGX6 mRNA在鼻咽癌、肺癌、胃癌和结、直肠癌中的阳性率低于其对应的正常组织(P<0.05,P<0.01).淋巴结转移性鼻咽癌、肺癌、结、直肠癌和喉癌组织中的NGX6 mRNA阳性率显著降低(P<0.05,P<0.01).NGX6 mRNA阳性率与鼻咽癌、肺癌和结、直肠癌临床分期有关,临床Ⅱ期、Ⅲ期或Ⅳ期癌组织NGX6 mRNA阳性率明显低于其相应的临床Ⅰ期癌(P<0.05,P<0.01).研究表明,鼻咽癌、肺癌、胃癌和结、直肠癌中存在低水平的NGX6 mRNA,NGX6 mRNA可作为鼻咽癌、肺癌和结、直肠癌侵袭、转移和临床进展预测的分子标志. 展开更多

关键词 组织微阵列 原位杂交 NGX6基因

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胃癌组织中HER-2基因扩增和蛋白的表达 被引量：4

13

作者 于雪梅 李新军 +3 位作者 吴戈 付明霞 张建 赵松林 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1133-1134,共2页

目的探讨荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)和免疫组化(immunohistochemistry,IHC)检测胃癌组织微阵列中HER-2基因扩增和蛋白表达的一致性。方法将80例胃癌组织制成组织芯片,采用FISH和IHC法分别检测HER-2基因扩... 目的探讨荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)和免疫组化(immunohistochemistry,IHC)检测胃癌组织微阵列中HER-2基因扩增和蛋白表达的一致性。方法将80例胃癌组织制成组织芯片,采用FISH和IHC法分别检测HER-2基因扩增和蛋白的表达,并对两种检测方法的一致性进行分析。结果在80例胃癌组织芯片中,HER-2基因扩增的阳性率为7.5%,蛋白过表达(IHC)阳性率约为6.3%。FISH和IHC结果行一致性分析,Kappa值=0.92(P<0.001),IHC检测可以很好地反映FISH结果。结论 FISH和IHC法检测胃癌组织微阵列中HER-2基因扩增和蛋白表达具有高度一致性。 展开更多

关键词 胃肿瘤 HER-2 荧光原位杂交 组织微阵列 免疫组 织化学

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基于遗传算法的生物组织图像最佳挖取点寻优 被引量：14

14

作者 王朝晖 李莉 +1 位作者 李引生 蒋庄德 《光学精密工程》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第2期231-236,共6页

生物组织微阵列芯片的制备过程中,需要从包埋有生物组织的蜡块中挖取一块直径为0.5～1.5 mm的组织蜡柱.为了实现自动化作业,研究了基于数字图像处理的组织蜡柱最佳挖取点计算机寻优策略.确定了问题的数学描述为在选定组织图像区域中寻... 生物组织微阵列芯片的制备过程中,需要从包埋有生物组织的蜡块中挖取一块直径为0.5～1.5 mm的组织蜡柱.为了实现自动化作业,研究了基于数字图像处理的组织蜡柱最佳挖取点计算机寻优策略.确定了问题的数学描述为在选定组织图像区域中寻找最大内切圆的圆心,提出了基于遗传算法的寻优算法.重点探讨了坐标点编码,参数选取和遗传操作方法等.研究了个体适应度快速计算方法,初始种群选择等算法改进方案.经过实际编程反复数次实验,结果表明迭代60次算法完全收敛,证明其搜索速度和稳定性都比较好,完全满足自动化作业的在线计算要求. 展开更多

关键词 组织微阵列 数字图像 遗传算法

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组织芯片的Feulgen反应和免疫组化染色 被引量：3

15

作者 徐志秀 李新功 董艳光 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 2003年第2期214-215,共2页

关键词 组织芯片 免疫组化染色 组织微阵列 组织切片 原位杂交 反应 缩微 小组 信息含量 排列

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组织芯片分析CD44v6和PCNA在口腔鳞癌及癌前病变中的表达及意义 被引量：1

16

作者 谢立群 沈丽佳 +1 位作者 蒋会勇 刘求真 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期767-772,778,共7页

目的:研究CD44v6和PCNA的表达与口腔鳞癌的发生、发展的关系。方法:应用组织芯片技术,通过免疫组织化学SP法分别检测一张组织芯片上117例组织样本中CD44v6、PCNA蛋白表达情况。结果:CD44v6在正常口腔黏膜组织和癌前病变呈阳性表达;癌组... 目的:研究CD44v6和PCNA的表达与口腔鳞癌的发生、发展的关系。方法:应用组织芯片技术,通过免疫组织化学SP法分别检测一张组织芯片上117例组织样本中CD44v6、PCNA蛋白表达情况。结果:CD44v6在正常口腔黏膜组织和癌前病变呈阳性表达;癌组织中CD44v6的表达明显,但其表达程度随肿瘤恶性程度的增高而降低,PCNA的表达程度随着增生细胞和癌分级增加而升高。结论:在正常口腔黏膜上皮、增生上皮以及鳞癌中这两种蛋白的表达之间呈负相关。应用组织芯片大规模高效检测临床组织样本是可行的,具有快速、方便、经济、准确的特点。 展开更多

关键词 口腔鳞癌 癌前病变 CD44 PCNA 免疫组织化学 组织微阵列/组织芯片

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手工制作组织芯片在HPV原位杂交中的应用与体会 被引量：2

17

作者 黄卡特 杨开颜 张虎祥 《实用医学杂志》 CAS 2007年第6期932-932,共1页

组织芯片亦称组织微阵列是近年发展起来的以形态学为基础的分子生物学新技术。其具有高通量、可比性强等优点．在实验研究过程中得到一定范围的应用。由于组织阵列仪价格昂贵，限制了组织芯片在临床广泛应用。在实践常规病理工作中。我... 组织芯片亦称组织微阵列是近年发展起来的以形态学为基础的分子生物学新技术。其具有高通量、可比性强等优点．在实验研究过程中得到一定范围的应用。由于组织阵列仪价格昂贵，限制了组织芯片在临床广泛应用。在实践常规病理工作中。我们在无芯片制作仪情况下．利用组织芯片技术原理反复多次摸索．得到了一种简易可行的手工制作方法．并用于本科室开展最多的HPV原位杂交实验上取得了满意的效果，现介绍体会如下。 展开更多

关键词 组织芯片技术 HPV原位杂交 手工制作 实验研究 分子生物学 组织微阵列 病理工作 形态学

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胰腺癌石蜡包埋组织中微RNA原位杂交检测技术的优化

18

作者 倪晨明 倪灿荣 +3 位作者 金钢 焦莉娟 李连峰 郑建明 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1375-1380,共6页

目的对采用原位杂交检测10%中性甲醛溶液固定的石蜡包埋(FFPE)胰腺癌组织切片中微RNA(miR)的方法进行技术优化,以提高miR的阳性检出率。方法将20例胰腺癌组织标本构建成组织芯片,使用锁核酸(LNA)标记的探针和显色原位杂交技术检测miR-21... 目的对采用原位杂交检测10%中性甲醛溶液固定的石蜡包埋(FFPE)胰腺癌组织切片中微RNA(miR)的方法进行技术优化,以提高miR的阳性检出率。方法将20例胰腺癌组织标本构建成组织芯片,使用锁核酸(LNA)标记的探针和显色原位杂交技术检测miR-21和miR-34a的表达。杂交温度分别设为48℃、53℃、56℃,杂交后采用3种不同的洗涤条件(温度、时间和3种不同洗涤缓冲液)进行杂交条件优化。将126例胰腺癌组织标本制成组织芯片,采用优化的显色原位杂交技术检测miR-21和miR-34a的表达。结果 miR-21探针最佳杂交条件为杂交温度53℃下杂交6 h,使用洗涤缓冲液Ⅲ在65℃下洗涤6 min,再用PBS洗涤1 min;miR-34a探针最佳杂交条件为杂交温度53℃下杂交6 h,使用洗涤缓冲液Ⅲ分别在4℃和65℃下洗涤6 min,再用PBS洗涤1 min。在126例胰腺癌组织中,84例(66.7%)miR-21表达阳性,77例(61.1%)miR-34a表达阳性。结论在FFPE胰腺癌组织切片中,miR-21和miR-34a的最佳杂交温度均为53℃,选择合适的杂交后洗涤温度和洗涤缓冲液有利于提高miR的阳性检出率。 展开更多

关键词 原位杂交 微RNA 组织微阵列 胰腺肿瘤 杂交温度

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细胞周期相关蛋白cyclin D1、p53和p21^(WAF1/Cip1)在食管鳞癌中的表达改变及其病理学意义 被引量：10

19

作者 林德晨 史志周 +5 位作者 薛丽燕 陈微 徐昕 韩亚玲 吕宁 王明荣 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期455-460,共6页

食管鳞状细胞癌(Esophageal squam ous cell carcinom a,ESCC)是我国常见的恶性肿瘤之一,虽然临床诊治手段正逐步改进,但中晚期患者5年生存率仍然很低。目前认为细胞周期调控异常与肿瘤发生发展关系密切,然而相关周期调节蛋白在食管癌... 食管鳞状细胞癌(Esophageal squam ous cell carcinom a,ESCC)是我国常见的恶性肿瘤之一,虽然临床诊治手段正逐步改进,但中晚期患者5年生存率仍然很低。目前认为细胞周期调控异常与肿瘤发生发展关系密切,然而相关周期调节蛋白在食管癌患者中的表达改变、临床意义及其应用价值还没有明确结论。文章应用组织微阵列联合免疫组织化学技术(TMA-IHC),对148例食管鳞癌组织标本中细胞G1/S期调控蛋白cyclinD1、p53和p21WAF1/Cip1的表达进行检测,分析其与临床病理参数之间的相关性。结果显示,cyclinD1与p53蛋白在食管癌细胞中表达升高,p53表达阳性率与区域淋巴结转移显著相关(P=0.001)。p21WAF1/Cip1蛋白在肿瘤组织中表达降低,且p21WAF1/Cip1表达阴性患者的术后生存时间显著短于表达阳性的患者(P=0.001)。多因素生存分析显示p21WAF1/Cip1是一个独立的预后因素(相对危险度为0.418,P<0.001)。微阵列比较基因组杂交(array-CGH)检测进一步表明45.4%的食管癌患者存在cyclinD1基因扩增。以上结果提示食管鳞癌中存在细胞周期G1/S期调控异常,p21WAF1/Cip1蛋白可能是一个有应用价值的预后因子。 展开更多

关键词 食管鳞状细胞癌 细胞周期 免疫组化 组织微阵列 预后判断

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子宫颈腺癌中HPV16/18感染对p16^(Ink4a)、Rb蛋白表达的影响 被引量：5

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作者 王喜梅 刘逢吉 +3 位作者 湛丽 孙雷 郑仁恕 张众 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期320-324,共5页

目的研究16、18型人乳头瘤病毒(HPV16/18)DNA与细胞周期相关蛋白p16Ink4a、Rb在子宫颈腺癌中的表达情况及HPV16/18感染对p16Ink4a、Rb蛋白表达的影响。方法采用组织微阵列技术结合原位杂交和免疫组化EliVision二步法标记检测HPV16/18DNA... 目的研究16、18型人乳头瘤病毒(HPV16/18)DNA与细胞周期相关蛋白p16Ink4a、Rb在子宫颈腺癌中的表达情况及HPV16/18感染对p16Ink4a、Rb蛋白表达的影响。方法采用组织微阵列技术结合原位杂交和免疫组化EliVision二步法标记检测HPV16/18DNA和p16Ink4a、Rb蛋白在86例子宫颈腺癌、15例子宫颈腺上皮异型增生及24例慢性子宫颈炎组织中的表达。结果子宫颈腺癌组和子宫颈腺上皮异型增生组HPV16/18DNA阳性表达率分别为65·1%和46·7%,均明显高于慢性子宫颈炎组8·3%(P<0·01);p16Ink4a蛋白在子宫颈腺癌组的阳性表达率为74·4%,显著高于慢性子宫颈炎组33·4%(P<0·01)。Rb蛋白在子宫颈腺癌组的阳性表达率为33·7%,低于慢性子宫颈炎组45·8%,但差异无显著性(P>0·05)。HPV16/18感染与子宫颈腺癌的病理分级和组织学类型无关,但与p16Ink4a蛋白表达呈正相关(P<0·05)。p16Ink4a与Rb蛋白表达与子宫颈腺癌的病理分级有关,G2、G3组p16Ink4a阳性表达率明显高于G1组(P<0·05),G3组Rb阳性表达率明显低于G1组(P<0·05)。p16Ink4a表达与子宫颈腺癌组织学类型有明显相关性,子宫内膜样腺癌p16Ink4a阳性表达率明显高于透明细胞腺癌(P<0·05)。结论子宫颈腺癌的发生与HPV16/18感染有关,HPV16/18感染可能影响p16Ink4a、Rb蛋白表达,使子宫颈腺上皮发生癌变并促进恶性发展。 展开更多

关键词 宫颈肿瘤 腺癌 P16^INK4A Rb 乳头状瘤病毒 人 原位杂交 免疫组织化学 组织微阵列

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