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季节、胎次、泌乳阶段和地区对奶牛原料乳纤溶酶及其酶原的影响
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作者 钱文涛 李东 +6 位作者 王鹏杰 王晓冰 杨晋辉 王孟辉 魏晓军 陈冲 李洪亮 《食品科学》 北大核心 2025年第17期63-69,共7页
分析季节、胎次、泌乳阶段和地区对奶牛原料乳中纤溶酶(plasmin,PL)及纤溶酶原(plasminogen,PG)的影响规律。采集内蒙古呼和浩特某集约化牧场原料乳样本,考察季节(夏季、冬季)、泌乳周期(初期、早期、晚期)、奶牛胎次(1~4胎)、地区(安... 分析季节、胎次、泌乳阶段和地区对奶牛原料乳中纤溶酶(plasmin,PL)及纤溶酶原(plasminogen,PG)的影响规律。采集内蒙古呼和浩特某集约化牧场原料乳样本,考察季节(夏季、冬季)、泌乳周期(初期、早期、晚期)、奶牛胎次(1~4胎)、地区(安徽马鞍山、宁夏银川、黑龙江哈尔滨及新疆昌吉)对PL活性及PG转化效率的影响。结果显示:季节因素对PL活性无显著影响(P>0.05),但显著调控PG激活水平(P<0.01),夏季PG衍生活性((5.98±0.25)U/L)较冬季((4.45±0.43)U/L)提升34.4%;奶牛胎次对PL、PG系统均无显著影响(P>0.05);泌乳阶段显著影响PG激活进程(P<0.01),晚期样本PG衍生活性((5.67±0.70)U/L)较初期((5.22±0.70)U/L)和早期((5.31±0.67)U/L)分别升高8.6%和6.8%;地域因素显著影响PG转化效率(P<0.05),哈尔滨样本PG衍生活性((5.62±0.88)U/L)显著高于银川样本((5.12±1.19)U/L)(P<0.05);原料乳体细胞数与PL活性(r=0.33)、PG激活水平(r=0.21)呈弱正相关性,提示乳腺炎潜在影响。本研究发现季节变化与泌乳周期通过调控PG激活通路影响乳品稳定性,而高纬度地区可能通过环境-生理互作增强纤PL系统活性,本研究为建立基于酶活调控的原料乳品质评价体系提供了新视角。 展开更多
关键词 原料乳 纤溶酶 纤溶酶 活性 奶牛
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豆豉纤溶酶基因的异源表达及其重组菌在淡豆豉中的应用
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作者 徐菁雯 乌日娜 +8 位作者 王伟明 阎亦然 向雪琴 赵玉莲 武俊瑞 王亚琦 邓丽 童星 史海粟 《食品科学》 北大核心 2025年第4期68-80,共13页
从不同来源及不同发酵阶段的淡豆豉中分离筛选出65株优势菌,通过酶联免疫吸附法测定纤溶酶活性,得到一株高产纤溶酶的贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)20-1,并扩增其纤溶酶基因,在毕赤酵母中异源表达,获得高产纤溶酶的重组菌株Pichi... 从不同来源及不同发酵阶段的淡豆豉中分离筛选出65株优势菌,通过酶联免疫吸附法测定纤溶酶活性,得到一株高产纤溶酶的贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)20-1,并扩增其纤溶酶基因,在毕赤酵母中异源表达,获得高产纤溶酶的重组菌株Pichia pastoris pPIC9K-his-aprEBS2,重组菌中该基因表达水平是出发菌株的5.8倍,培养48 h后纤溶酶活性达到(3 025.59±201.27)U/mL,是出发菌株的8.9倍;经优化,其活性可达(8 698.24±180.73)U/mL。通过急性毒性实验证明,该重组菌无毒。利用该重组菌纯种发酵淡豆豉,淡豆豉中纤溶酶活性达到(17 287.02±103.20)U/g,通过理化指标监测、感官特性分析及电子舌分析,重组菌可以提高淡豆豉的感官及风味。重组菌发酵的淡豆豉成品血栓溶解率可达到(60.55±1.58)%,高于市售淡豆豉。 展开更多
关键词 豆豉纤溶酶 异源表达 毕赤酵母 淡豆豉
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纤溶酶相关蛋白在冠心病患者中的表达
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作者 高艳玲 谢林金 汪洋 《实用医学杂志》 CAS 2008年第12期2066-2068,共3页
目的:了解冠心病患者是否存在组织型纤溶酶原激活物(t-PA)及纤溶酶原激活抑制物Ⅰ(PAI-Ⅰ)功能紊乱,以及这两个指标与血脂、胰岛素抵抗的相关关系。方法:选择2004年1月至2006年1月于我院住院就诊的冠心病患者作为观察对象。按临床类型分... 目的:了解冠心病患者是否存在组织型纤溶酶原激活物(t-PA)及纤溶酶原激活抑制物Ⅰ(PAI-Ⅰ)功能紊乱,以及这两个指标与血脂、胰岛素抵抗的相关关系。方法:选择2004年1月至2006年1月于我院住院就诊的冠心病患者作为观察对象。按临床类型分为SAP组、UAP组、AMI组、OMI组,并设健康对照组。检测t-PA、PAI-Ⅰ、胰岛素敏感性指数(IAI)、胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)等指标。结果:(1)健康对照组t-PA高于各型冠心病组(P<0.05),AMI组t-PA低于其余各型冠心病组(P<0.05);健康对照组PAI-Ⅰ低于各型冠心病组(P<0.05),AMI组PAI-Ⅰ高于其余各型冠心病(P<0.05)。(2)t-PA与IAI呈正相关,与TC、TG、LDL呈负相关;PAI-Ⅰ则与IAI呈负相关,与TC、TG、LDL呈正相关。(3)各病例组t-PA于治疗后有所升高,PAI-Ⅰ于治疗后有所下降(P<0.05)。结论:冠心病患者存在明显的纤溶功能紊乱,且以急性期为重,并且纤溶功能紊乱与胰岛素抵抗、血脂异常等因素有关。 展开更多
关键词 冠状动脉疾病 纤溶酶 组织型纤溶酶原激活物 纤溶酶原激活抑制物
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纤溶酶联合脉络舒通颗粒治疗下肢深静脉血栓的效果
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作者 孙健铭 宋家明 +3 位作者 潘江皓 付广印 雷勇 张晓洁 《辽宁中医杂志》 北大核心 2025年第5期108-111,共4页
目的探究纤溶酶联合脉络舒通颗粒治疗下肢深静脉血栓(lower limb deep vein thrombosis,LEDVT)患者的临床效果及对血清溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid,LPA)、血管性血友病因子(vascular hemophilia factor,vWF)水平的影响。方法该研... 目的探究纤溶酶联合脉络舒通颗粒治疗下肢深静脉血栓(lower limb deep vein thrombosis,LEDVT)患者的临床效果及对血清溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid,LPA)、血管性血友病因子(vascular hemophilia factor,vWF)水平的影响。方法该研究对象选取的是2017年2月—2018年2月的LEDVT患者共计90例,应用完全随机性原则分组,具体方法为随机数字表法。对照组45例患者的治疗用药为纤溶酶,观察组为纤溶酶+脉络疏通颗粒。比较两组患者临床疗效和不良反应,对两组患者治疗前后凝血功能指标[纤维蛋白原(fibrinogen,FIB)、凝血酶原时间(prothrombin time,PT)、D-二聚体(D-Dimer)、活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)]水平以及血清LPA、vWF水平进行检测和对比。结果观察组的有效率显著高于对照组(P<0.05)。治疗前凝血功能指标在两组患者之间对比差异无统计学意义(P>0.05),治疗后FIB和D-Dimer降低,PT和APTT升高(P<0.05),治疗后观察组PT、APTT显著低于对照组而FIB和D-Dimer显著高于对照组(P<0.05)。治疗前两组血清LPA、vWF水平比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗后均显著降低(P<0.05),治疗后观察组血清LPA、vWF水平显著低于对照(P<0.05)。治疗不良反应方面两组患者之间对比差异无统计学意义,安全性相当(P>0.05)。结论纤溶酶联合脉络舒通颗粒对可显著改善LEDVT患者凝血功能指标,具有更好的临床效果,同时可以下调血清中LPA、vWF水平,具有更好的预后,并具有一定的安全性。 展开更多
关键词 下肢深静脉血栓 纤溶酶 脉络舒通颗粒 血磷脂酸 血管性血友病因子
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NF-κB对纤溶酶调控小鼠集合管M-1细胞γ-ENaC表达的影响
5
作者 张文馨 李蕾 +3 位作者 葛皖粤 许在平 王运来 许钒 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第4期723-731,共9页
目的:探讨纤溶酶对小鼠肾皮质集合管上皮细胞(M-1细胞)上皮钠离子通道γ亚基(epithelial sodium channel γ-subunit, γ-ENaC)激活的影响及核因子κB(nuclear factor-κB, NF-κB)的作用。方法:本研究以小鼠M-1细胞为对象,设计三个实... 目的:探讨纤溶酶对小鼠肾皮质集合管上皮细胞(M-1细胞)上皮钠离子通道γ亚基(epithelial sodium channel γ-subunit, γ-ENaC)激活的影响及核因子κB(nuclear factor-κB, NF-κB)的作用。方法:本研究以小鼠M-1细胞为对象,设计三个实验部分:第一部分将细胞分为对照组、纤溶酶组、纤溶酶+BAY 11-7082(NF-κB抑制剂)组以探讨纤溶酶对炎症因子及γ-ENaC的作用;第二部分分为对照组、BAY 11-7082组、BAY 11-7082+纤溶酶组,用BAY 11-7082预先处理M-1细胞,以探讨纤溶酶调控γ-ENaC表达中NF-κB的作用;第三部分分为对照组、纤溶酶组、白细胞介素6(interleukin-6, IL-6)组,用纤溶酶或IL-6处理M-1细胞,以探讨NF-κB下游的IL-6对γ-ENaC的调控作用。药物干预后,ELISA法检测各组细胞培养上清液中IL-6、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)、单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant protein-1, MCP-1)和IL-1β水平,Western blot检测磷酸化核因子κB抑制蛋白α (phosphorylated inhibitor of nuclear factor-κB α,p-IκBα)/IκBα、p-NF-κB p65/NF-κB p65和γ-ENaC蛋白水平,免疫荧光染色检测γ-ENaC膜上分布情况。结果:与对照组相比,10 mg/L纤溶酶作用24 h后细胞上清液IL-6、TNF-α、MCP-1和IL-1β含量上升(n=3,P<0.01),p-IκBα/IκBα、p-NF-κB p65/NF-κB p65和γ-ENaC蛋白表达升高(n=5,P<0.01),膜上γ-ENaC分布增加。与纤溶酶组相比,纤溶酶与BAY 11-7082共培养后各组细胞IL-6、TNF-α、MCP-1和IL-1β含量下降(n=3,P<0.05或P<0.01),p-IκBα/IκBα、p-NF-κB p65/NF-κB p65和γ-ENaC蛋白表达降低(n=5,P<0.05或P<0.01),膜上γ-ENaC分布减少。单纯给予BAY 11-7082组与对照组相比,p-NF-κB p65/NF-κB p65表达降低(n=5,P<0.05或P<0.01),γ-ENaC没有明显变化,再给予纤溶酶刺激后,p-IκBα/IκBα、p-NF-κB p65/NF-κB p65及γ-ENaC表达升高(n=5,P<0.05),膜上分布增加。NF-κB下游中的IL-6干预24 h后细胞γ-ENaC蛋白表达增加(n=5,P<0.05),γ-ENaC膜上分布增加。结论:纤溶酶调控小鼠M-1细胞γ-ENaC表达与NF-κB激活后引起炎症因子异常升高有关。 展开更多
关键词 上皮钠离子通道γ亚基 纤溶酶 核因子ΚB 炎症因子
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葡萄糖甘油二脂对纤溶酶原和纤溶酶原激活剂二级结构的影响 被引量:2
6
作者 郝斐 吴文惠 +1 位作者 瞿佳华 包斌 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2010年第8期2171-2174,共4页
为研究葡萄糖甘油二脂(GDG)对纤溶酶原和纤溶酶原激活剂二级结构的影响。应用圆二色谱法(CD)、聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)研究了GDG对纤溶酶原和纤溶酶原激活剂二级结构的影响。在GDG分别与单链尿激酶型纤溶酶原激活剂和链激酶相... 为研究葡萄糖甘油二脂(GDG)对纤溶酶原和纤溶酶原激活剂二级结构的影响。应用圆二色谱法(CD)、聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)研究了GDG对纤溶酶原和纤溶酶原激活剂二级结构的影响。在GDG分别与单链尿激酶型纤溶酶原激活剂和链激酶相互作用后,使其二级结构发生改变,不同浓度的GDG对一些纤溶因子的α-螺旋、β-折叠、β-转角和无规卷曲产生不同程度的影响。GDG对纤溶酶原和纤溶酶的α-螺旋、β-折叠、β-转角和无规卷曲没有明显影响。利用SDS-PAGE发现了GDG促进纤溶酶原/单链尿激酶型纤溶酶原激活剂相互转化的作用。从而可得出结论,GDG对单链尿激酶型纤溶酶原激活剂和链激酶的活性产生影响,表明GDG通过改变单链尿激酶型纤溶酶原激活剂的内因性活性来促进纤溶作用。 展开更多
关键词 葡萄糖甘油二脂 单链尿激纤溶酶原激活剂 纤溶酶 纤溶酶 链激 圆二色谱 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳
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纤溶酶原:结构、功能与进化 被引量:1
7
作者 刘明英 张士璀 《中国海洋大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期69-74,共6页
纤维蛋白溶解系统是凝血系统的重要组成部分,对于维持血液的流动性和血管的完整性起着至关重要的作用。作为纤溶系统中心组分的纤溶酶原在其激活剂的作用下转变为活性形式的纤溶酶,进而降解纤维蛋白原,并能溶解血栓。纤溶酶也参与金属... 纤维蛋白溶解系统是凝血系统的重要组成部分,对于维持血液的流动性和血管的完整性起着至关重要的作用。作为纤溶系统中心组分的纤溶酶原在其激活剂的作用下转变为活性形式的纤溶酶,进而降解纤维蛋白原,并能溶解血栓。纤溶酶也参与金属蛋白酶类和脂氧合酶类激活作用,还与细胞许多迁移相关的生理和病理过程相关诸如癌症、血管增生、卵子成熟、胚胎发生、伤口愈合以及病原侵入相关。本文简要概述了纤溶酶原和纤溶酶的结构、功能及其进化的研究进展。 展开更多
关键词 纤溶酶 纤溶酶 系统 纤溶酶原激活剂
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分步洗脱亲和层析法快速纯化纤溶酶-α_2抗纤溶酶复合物
8
作者 李建新 周芸 +3 位作者 王红 郑佐娅 李稻 王鸿利 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2004年第3期355-358,共4页
为快速地获取高度纯化的纤溶酶 α2 抗纤溶酶复合物 (plasmin α2 antiplasmincomplex ,PAP) ,对其纯化方法进行了改进。将尿激酶激活的新鲜乏血小板血浆上Lysine Sepharose 4B亲和层析柱后 ,以不同成分的洗脱液分步洗脱。结果表明 ,每... 为快速地获取高度纯化的纤溶酶 α2 抗纤溶酶复合物 (plasmin α2 antiplasmincomplex ,PAP) ,对其纯化方法进行了改进。将尿激酶激活的新鲜乏血小板血浆上Lysine Sepharose 4B亲和层析柱后 ,以不同成分的洗脱液分步洗脱。结果表明 ,每 10 0ml新鲜血浆能获取纯化PAP 3.0mg ,整个纯化过程可在数小时内完成。结论 :本方法简单、快速、经济以及得率高。 展开更多
关键词 纤溶酶-a2 纤溶酶复合物 亲和层析 纯化 分步洗脱
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蚯蚓纤溶酶对犬纤溶酶活性和血小板聚集功能的影响 被引量:3
9
作者 杜珍香 李相端 +2 位作者 钱隽 忻伟钧 袁弥满 《上海医科大学学报》 CSCD 1998年第3期229-231,共3页
目的研究口服蚯蚓纤溶酶(EFE)对纤溶系统和血小板聚集功能的影响。方法正常雄性Beagle犬,体重6.5~9kg,经口给蚯蚓纤溶酶,经前肢静脉取血。以S-2251为发色底物,测定血浆纤溶酶活性;50μmol/LADP... 目的研究口服蚯蚓纤溶酶(EFE)对纤溶系统和血小板聚集功能的影响。方法正常雄性Beagle犬,体重6.5~9kg,经口给蚯蚓纤溶酶,经前肢静脉取血。以S-2251为发色底物,测定血浆纤溶酶活性;50μmol/LADP为诱导剂测定血小板聚集率。结果(1)单剂量EFE40、80mg/kg后血浆纤溶酶活性升高(P<0.05),80mg/kg组高于40mg/kg组(P<0.05)。连续给药10d,40、80mg/kg组均有多个时间点纤溶酶活性升高(P<0.05),但两组间无差异。(2)单剂量EFE40mg/kg,或经口给阿司匹林8mg/kg后3h,血小板聚集均被抑制(P<0.05);而在单剂量EFE80mg/kg或经口给淀粉后3h,血小板聚集功能均无变化。结论EFE经口给药可提高血浆纤溶酶活性,并在一定剂量下可抑制血小板的聚集。 展开更多
关键词 蚯蚓纤溶酶 纤溶酶活性 血小板聚集 中药
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蛹虫草发酵产物新纤溶酶的分离纯化 被引量:19
10
作者 刘晓兰 张雯舒 +2 位作者 郑喜群 沈媛 孙莹 《华南理工大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第5期107-114,共8页
笔者所在项目组的前期研究发现,蛹虫草深层培养可以产生至少两种纤溶酶.基于此,文中对蛹虫草深层培养产生的纤溶酶的分离纯化展开了研究.采用硫酸铵盐析、Sephadex G-25凝胶色谱、Phenyl-Sepharose HP疏水相互作用色谱、CM-Sepharose F... 笔者所在项目组的前期研究发现,蛹虫草深层培养可以产生至少两种纤溶酶.基于此,文中对蛹虫草深层培养产生的纤溶酶的分离纯化展开了研究.采用硫酸铵盐析、Sephadex G-25凝胶色谱、Phenyl-Sepharose HP疏水相互作用色谱、CM-Sepharose FF弱阳离子交换色谱和Superdex 75凝胶色谱对纤溶酶进行分离.最终纯化后的纤溶酶Ⅰ比活力达1467.44U/mg,纯化倍数为36.07,回收率为5.79%.纤溶酶Ⅱ比活力达1681.58U/mg,纯化倍数为41.33,回收率为4.00%.两种纤溶酶经电泳鉴定均达到电泳纯,相对分子质量分别约为28000和32000. 展开更多
关键词 蛹虫草 深层培养 纤溶酶 纯化 色谱分离
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胞外纤溶酶产生菌的筛选及其产酶条件研究 被引量:54
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作者 董明盛 江晓 +1 位作者 刘诚 江汉湖 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期23-26,共4页
从豆豉、酱豆和纳豆样品中分离筛选到一株具强力纤溶活性的细菌 ,编号为NK—5,经鉴定为芽孢杆菌属枯草杆菌群细菌。该菌在固态基质及液体培养基中均产生大量胞外纤溶酶。摇瓶发酵试验表明 ,其最适产酶碳源和氮源分别为蔗糖和蛋白胨。通... 从豆豉、酱豆和纳豆样品中分离筛选到一株具强力纤溶活性的细菌 ,编号为NK—5,经鉴定为芽孢杆菌属枯草杆菌群细菌。该菌在固态基质及液体培养基中均产生大量胞外纤溶酶。摇瓶发酵试验表明 ,其最适产酶碳源和氮源分别为蔗糖和蛋白胨。通过正交试验确定最适产酶培养基为 :豆粕粉 2 0 %、麸皮 0 5%、玉米淀粉 0 5%、KH2 PO4 0 2 %、K2 HPO40 4 %、MgSO4 0 0 5%、CaCl2 0 0 2 % ,pH7 0。在优化条件下 ,发酵液酶活达 6 83 展开更多
关键词 胞外纤溶酶 枯草菌 发酵制品 特性
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蚯蚓纤溶酶新基因PV_(242)的克隆与表达 被引量:19
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作者 徐义辉 梁国栋 +4 位作者 孙兆军 陈飞 付士红 柴玉波 侯云德 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第4期610-614,共5页
从我国特有的双胸蚓属 (Lumbricusbimastus)蚯蚓体内提取到一种有纤维蛋白平板溶解活性的蛋白质 ,采用聚偏二氟乙烯膜 (PVDF)微量测序法测得蛋白质的N端氨基酸序列 ,依此设计简并引物 ,通过RT PCR获得其对应cDNA .该cDNA全长 888bp ,1~... 从我国特有的双胸蚓属 (Lumbricusbimastus)蚯蚓体内提取到一种有纤维蛋白平板溶解活性的蛋白质 ,采用聚偏二氟乙烯膜 (PVDF)微量测序法测得蛋白质的N端氨基酸序列 ,依此设计简并引物 ,通过RT PCR获得其对应cDNA .该cDNA全长 888bp ,1~ 72 6位核苷酸对应读码框架 (ORF) ,编码含 2 4 2个氨基酸的成熟肽 .终止子 (TAG)位于cDNA的 72 7~ 72 9位 ,其余核苷酸序列为 3′端非编码区 .成熟肽命名为蚯蚓纤溶酶PV2 42 .蛋白质预测得知蛋白质等电点为 4 33,含组氨酸 (His4 4 )及丝氨酸 (Ser191)两个活性位点 ;蛋白质由两个结构域组成 ,表面有活性裂隙 ;该蛋白质属丝氨酸蛋白酶超家族胰蛋白酶类 .经国际基因库等多种查询比较未见PV2 42 基因的报道 ,为首次发现的新基因 ,在国际基因库的输入号为GenBankAF10 96 4 8.随后构建了pTrxFUS PV2 42 重组质粒 ,并在大肠杆菌GI72 4中获得融合蛋白TrxA/PV2 42 的可溶性表达 ,采用离子交换层析法纯化表达蛋白 ,融合蛋白有纤维平板溶解活性 . 展开更多
关键词 蚯蚓纤溶酶 新基因 PV242 克隆 表达 双胸蚓属 蛋白质测序
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蚯蚓纤溶酶的抗肿瘤作用 被引量:19
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作者 李洪燕 刘悦 +3 位作者 张福荣 黄文华 李燕 陈晓光 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第8期908-910,共3页
目的 观察蚯蚓纤溶酶 (EFE)对体外人癌细胞株及体内人癌裸鼠移植性肿瘤生长的影响 ,对该药进行临床前抗肿瘤药效学评价。方法 采用MTT法观察蚯蚓纤溶酶对体外人癌细胞的生长抑制作用 ;用人胃癌BGC82 3和人乳腺癌B37裸鼠移植性肿瘤模... 目的 观察蚯蚓纤溶酶 (EFE)对体外人癌细胞株及体内人癌裸鼠移植性肿瘤生长的影响 ,对该药进行临床前抗肿瘤药效学评价。方法 采用MTT法观察蚯蚓纤溶酶对体外人癌细胞的生长抑制作用 ;用人胃癌BGC82 3和人乳腺癌B37裸鼠移植性肿瘤模型对蚯蚓纤溶酶进行体内抗肿瘤药效学观察。结果 蚯蚓纤溶酶在体外对人癌细胞的生长无抑制作用 ;灌胃给予蚯蚓纤溶酶 2 0 0~ 10 0 0mg·kg-1,可明显抑制人胃癌BGC82 3和人乳腺癌B37裸鼠移植性肿瘤的生长。结论 蚯蚓纤溶酶具有抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 蚯蚓纤溶酶 抗肿瘤 裸鼠
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蚯蚓纤溶酶组分的抗原性 被引量:13
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作者 赵晓瑜 静天玉 +2 位作者 姜晓燕 段明星 郑昌学 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期209-212,共4页
以大豆胰蛋白酶抑制剂为配基 ,通过亲和层析制备出的蚯蚓纤溶酶 (EFE)含有 11~ 13个组分 .为了了解这些组分的相互关系 ,用EFE免疫家兔获得了抗血清 .利用该抗血清与已纯化的 10个组分进行免疫双扩散 ,根据形成沉淀线的形状可以将上述... 以大豆胰蛋白酶抑制剂为配基 ,通过亲和层析制备出的蚯蚓纤溶酶 (EFE)含有 11~ 13个组分 .为了了解这些组分的相互关系 ,用EFE免疫家兔获得了抗血清 .利用该抗血清与已纯化的 10个组分进行免疫双扩散 ,根据形成沉淀线的形状可以将上述 10个组分分为 4大组 .各组内组分之间的沉淀线完全融合 (免疫反应同一性 ) ;组间沉淀线交叉 (免疫反应非同一性 )或为支线 (免疫反应部分同一性 ) .这种按免疫学性质分组与根据分子量大小、氨基酸组成和N端氨基酸序列分组基本吻合 .上述结果为EFE的分类提供了依据 . 展开更多
关键词 蚯蚓 纤溶酶组分 抗原性 免疫反应同一性
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蚯蚓纤溶酶在大肠杆菌中的克隆与表达 被引量:12
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作者 赵晓瑜 静天玉 +2 位作者 王彦芳 王会文 李亚东 《河北大学学报(自然科学版)》 CAS 2002年第4期392-395,共4页
根据蚯蚓纤溶酶最佳组分的N -末端氨基酸序列设计简并引物 ,以蚯蚓cDNA为模板 ,获得该组分蛋白质的部分编码序列 (AF4 32 2 2 4 ,GenBank登陆号 ) .BLAST相似性分析表明 ,该序列与U 2 5 6 43和U2 5 6 48的部分序列相似性达 91% ,根据 5... 根据蚯蚓纤溶酶最佳组分的N -末端氨基酸序列设计简并引物 ,以蚯蚓cDNA为模板 ,获得该组分蛋白质的部分编码序列 (AF4 32 2 2 4 ,GenBank登陆号 ) .BLAST相似性分析表明 ,该序列与U 2 5 6 43和U2 5 6 48的部分序列相似性达 91% ,根据 5’和 3’末端保守序列设计引物 ,经PCR获得全长cDNA编码序列 .将该序列插入 pTBY - 11质粒 ,转化大肠杆菌 ,表达蛋白以包含体形式存在 . 展开更多
关键词 蚯蚓纤溶酶 分子克隆 基因表达 大肠杆菌 编码序列 基因克隆 表达载体
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固态发酵大豆生产豆豉纤溶酶的研究 被引量:12
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作者 齐海萍 钱和 +1 位作者 王璋 许时婴 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2003年第12期52-55,共4页
以大豆为底物进行固态发酵生产纤溶酶 ,并对其固态发酵工艺进行了探讨。得出以下结论 :最佳发酵时间 2 8h ,添加麦芽糖 2 %、NaCl 0 .1%、Ca2 +0 .2mg/kg、Mg2 +0 .3mg/kg最高酶活力可达到 12 5 6IU/g。豆豉提取物的最适存放温度为 37... 以大豆为底物进行固态发酵生产纤溶酶 ,并对其固态发酵工艺进行了探讨。得出以下结论 :最佳发酵时间 2 8h ,添加麦芽糖 2 %、NaCl 0 .1%、Ca2 +0 .2mg/kg、Mg2 +0 .3mg/kg最高酶活力可达到 12 5 6IU/g。豆豉提取物的最适存放温度为 37℃以下 ,最适pH为 8,Mn2 +、Ca2 +、Mg2 +对该酶活力有明显的激活作用 ,添加明胶对纤溶酶活力起稳定作用。PCMB、PMSF、胰蛋白酶对此酶活性抑制率几乎达 10 0 %。EDTA、β 巯基乙醇对此酶活性影响不大。 展开更多
关键词 大豆 底物 固态发酵生产 纤溶酶 豆豉 活性
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天然纤溶酶的来源及生产方法研究进展 被引量:1
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作者 彭粹盈 王盼盼 +2 位作者 邓雄伟 谢小梅 翁美芝 《中国酿造》 CAS 北大核心 2024年第2期29-34,共6页
全球每年有1790万人丧命于心血管疾病,占全球死亡人数的31%。而在各种心血管病中,血栓形成是最常见的一种,如何有效防治血栓是一个全球性的重大医学问题。在血栓防治中,纤溶酶潜力巨大。纤溶酶是一种蛋白水解酶,对血栓栓塞性疾病的防治... 全球每年有1790万人丧命于心血管疾病,占全球死亡人数的31%。而在各种心血管病中,血栓形成是最常见的一种,如何有效防治血栓是一个全球性的重大医学问题。在血栓防治中,纤溶酶潜力巨大。纤溶酶是一种蛋白水解酶,对血栓栓塞性疾病的防治非常重要。该文综述了血栓形成及纤溶酶的作用机制,总结了纤溶酶的来源(海洋微生物、发酵食品微生物、植物和动物)和生产方法,并对纤溶酶生产方法作出总结和展望,以期为相关领域研究提供参考。 展开更多
关键词 纤溶酶 蛋白 血栓 栓机理 纤溶酶原激活剂
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高活性豆豉纤溶酶产生菌出发菌株的筛选 被引量:20
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作者 齐海萍 钱和 +1 位作者 王璋 许时婴 《中国调味品》 CAS 北大核心 2004年第2期12-15,共4页
目的:快速筛选高产纤溶酶产生菌出发菌株。方法:在普通培养基中添加血纤维蛋白作为初筛平板,通过液态发酵的方法对纤溶酶产生菌进行复筛。结果:从12个产生地的豆豉中筛选出产纤溶酶活力较高的菌株,酶活达到1230~1256IU/mL。结论:本研... 目的:快速筛选高产纤溶酶产生菌出发菌株。方法:在普通培养基中添加血纤维蛋白作为初筛平板,通过液态发酵的方法对纤溶酶产生菌进行复筛。结果:从12个产生地的豆豉中筛选出产纤溶酶活力较高的菌株,酶活达到1230~1256IU/mL。结论:本研究为开发具有高纤溶活性豆豉保健食品奠定可靠的理论依据。 展开更多
关键词 筛选 纤溶酶 菌株
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高产纤溶酶霉菌固体发酵工艺条件的优化 被引量:10
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作者 闵伟红 李佳 +2 位作者 王影 张锦玉 李玉 《食品科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期207-211,共5页
从我国传统发酵豆制品中筛选出一株具有纤溶酶活性的霉菌菌株,初步鉴定为枯青霉,经诱变后纤溶酶活力为660U/g。本实验以其为出发菌株,对该菌株固体发酵条件进行优化,结果表明菌株产酶最佳条件为:m(麸皮):m(豆粕)=1:3,自然pH值,加水量0.7... 从我国传统发酵豆制品中筛选出一株具有纤溶酶活性的霉菌菌株,初步鉴定为枯青霉,经诱变后纤溶酶活力为660U/g。本实验以其为出发菌株,对该菌株固体发酵条件进行优化,结果表明菌株产酶最佳条件为:m(麸皮):m(豆粕)=1:3,自然pH值,加水量0.75ml/g物料,MnSO4·H2O和(NH4)2SO4加量分别为0.25%和1.4%,接种量17.5%,发酵温度30℃,发酵时间72h,在该条件下固体培养纤溶酶活性平均达到873.76U/g,比优化前提高了213U/g。 展开更多
关键词 纤溶酶 固体发酵 优化
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Bacillus subtilis γ-DES36纤溶酶发酵条件的优化研究 被引量:8
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作者 吕凤霞 陆兆新 +1 位作者 别小妹 梁思宇 《农业工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第12期175-178,共4页
以高活性纤溶酶突变株B acillus subtilisγ-DES36为发酵菌株,研究其纤溶酶液体发酵的最佳工艺条件。通过对不同接种量、碳源、氮源、碳氮比、表面活性剂、金属离子等单因素研究,使用麦芽糖和胰胨时纤溶酶活性达2900 IU/mL左右。为了降... 以高活性纤溶酶突变株B acillus subtilisγ-DES36为发酵菌株,研究其纤溶酶液体发酵的最佳工艺条件。通过对不同接种量、碳源、氮源、碳氮比、表面活性剂、金属离子等单因素研究,使用麦芽糖和胰胨时纤溶酶活性达2900 IU/mL左右。为了降低成本,使用廉价的碳氮源麸皮和豆粕粉。正交试验得到该菌株产纤溶酶的优化液体发酵条件为:麸皮1%,麦芽糖1%,胰胨0.25%,豆粕粉1.5%,吐温40 0.15%,酵母膏0.1%,K2HPO40.25%,KH2PO40.1%,复合无机盐0.2mL/(100 mL),接种量1%,发酵液纤溶酶酶活达到2300 IU/mL。 展开更多
关键词 纤溶酶 高产突变株 发酵条件 优化
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