目的:构建并表达鼠源甲状旁腺激素相关蛋白(parathyroid hormone related protein,PTHrP)1～84片段的载体,并检测其在促进骨形成中的作用。方法:应用RT-PCR方法体外扩增mPTHrP1～84基因,经测序后重组入原核表达载体pGEX-2TK,将构建正确...目的:构建并表达鼠源甲状旁腺激素相关蛋白(parathyroid hormone related protein,PTHrP)1～84片段的载体,并检测其在促进骨形成中的作用。方法:应用RT-PCR方法体外扩增mPTHrP1～84基因,经测序后重组入原核表达载体pGEX-2TK,将构建正确的pGEX-2TK/mPTHrP1～84原核表达载体转化E.coliBL21,IPTG诱导表达。表达产物经蛋白纯化及活性鉴定,通过细胞学实验确定纯化的重组PTHrP片段在促进骨形成中的作用。结果:构建的重组表达载体pGEX-2TK/mPTHrP1～84诱导表达产物以可溶性的形式存在;纯化的mPTHrP1～84可促进小鼠的间充质干细胞向成骨方向增殖和分化。结论:构建、表达的mPTHrP1～84片段可促进骨形成。展开更多
目的:探索并鉴定甲状旁腺激素相关蛋白(parathyroid hormone related protein,PTHrP)与Bmi-1的结合作用,为进一步研究PTHrP相关信号转导通路提供线索。方法:应用RT-PCR方法体外扩增鼠源性PTHrP基因,经测序后重组人原核表达载体pGEX-2TK...目的:探索并鉴定甲状旁腺激素相关蛋白(parathyroid hormone related protein,PTHrP)与Bmi-1的结合作用,为进一步研究PTHrP相关信号转导通路提供线索。方法:应用RT-PCR方法体外扩增鼠源性PTHrP基因,经测序后重组人原核表达载体pGEX-2TK,将构建正确的pGEX-2TK/mPTHrP原核表达载体转化E.coli BL21,IPTG诱导表达。表达产物经活性鉴定,通过体外GST pull-down技术和免疫印迹实验,检测PTHrP与Bmi-1蛋白的相互作用。结果:成功构建和表达了重组载体pGEX-2TK/mPTHrP;通过体外蛋白质结合实验证实了PTHrP与Bmi-1蛋白可以相互作用。结论:PTHrP与Bmi-1蛋白之间存在相互作用,此结果为研究PTHrP介导的下游信号转导通路的机制奠定了基础。展开更多
下颌骨髁突软骨是一种继发性纤维性软骨,其生长发育的调控过程可能更加复杂。近十几年来,国内外才渐有针对髁突软骨生长发育研究的相关报道。甲状旁腺激素相关蛋白(parathyroid hormone related protein,PTHrP)是软骨代谢的关键调控因子...下颌骨髁突软骨是一种继发性纤维性软骨,其生长发育的调控过程可能更加复杂。近十几年来,国内外才渐有针对髁突软骨生长发育研究的相关报道。甲状旁腺激素相关蛋白(parathyroid hormone related protein,PTHrP)是软骨代谢的关键调控因子,广泛参与软骨生长改建、形态发生及软骨内成骨的过程。同四肢软骨类似,PTHrP在下颌骨髁突软骨生长发育过程中亦发挥关键作用。深入了解PTHrP信号及相关因子在髁突软骨发育过程中的调节机制,可进一步明确PTHrP对颞下颌关节生长发育的影响,这对临床诊疗有重要指导意义。本文就PTHrP在下颌骨髁突软骨生长发育过程中的作用机制作一综述。展开更多
文摘目的:构建并表达鼠源甲状旁腺激素相关蛋白(parathyroid hormone related protein,PTHrP)1～84片段的载体,并检测其在促进骨形成中的作用。方法:应用RT-PCR方法体外扩增mPTHrP1～84基因,经测序后重组入原核表达载体pGEX-2TK,将构建正确的pGEX-2TK/mPTHrP1～84原核表达载体转化E.coliBL21,IPTG诱导表达。表达产物经蛋白纯化及活性鉴定,通过细胞学实验确定纯化的重组PTHrP片段在促进骨形成中的作用。结果:构建的重组表达载体pGEX-2TK/mPTHrP1～84诱导表达产物以可溶性的形式存在;纯化的mPTHrP1～84可促进小鼠的间充质干细胞向成骨方向增殖和分化。结论:构建、表达的mPTHrP1～84片段可促进骨形成。
文摘下颌骨髁突软骨是一种继发性纤维性软骨,其生长发育的调控过程可能更加复杂。近十几年来,国内外才渐有针对髁突软骨生长发育研究的相关报道。甲状旁腺激素相关蛋白(parathyroid hormone related protein,PTHrP)是软骨代谢的关键调控因子,广泛参与软骨生长改建、形态发生及软骨内成骨的过程。同四肢软骨类似,PTHrP在下颌骨髁突软骨生长发育过程中亦发挥关键作用。深入了解PTHrP信号及相关因子在髁突软骨发育过程中的调节机制,可进一步明确PTHrP对颞下颌关节生长发育的影响,这对临床诊疗有重要指导意义。本文就PTHrP在下颌骨髁突软骨生长发育过程中的作用机制作一综述。
