cAMP反应序列结合蛋白及其家族与转录调节 被引量：17

1

作者 田今华 王晓民 韩济生 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 1996年第3期227-232,共6页

ｃＡＭＰ反应序列结合蛋白（ｃＡＭＰ－ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅｅｌｅｍｅｎｔｂｉｎｄｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎ，ＣＲＥＢ）经磷酸化激活后，可参与ｃＡＭＰ诱导的多种靶基因的转录调控。新近研究表明，ＣＲＥＢ的转录调节作用可能是通过Ｃ... ｃＡＭＰ反应序列结合蛋白（ｃＡＭＰ－ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅｅｌｅｍｅｎｔｂｉｎｄｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎ，ＣＲＥＢ）经磷酸化激活后，可参与ｃＡＭＰ诱导的多种靶基因的转录调控。新近研究表明，ＣＲＥＢ的转录调节作用可能是通过ＣＲＥＢ结合蛋白（ＣＲＥＢ－ｂｉｎｄｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎ，ＣＢＰ）实现的。在神经系统中，ＣＲＥＢ可能介导神经递质诱导的基因表达，并能通过放大神经营养因子的信号，参与神经细胞增殖、分化、存活等生物效应。 展开更多

关键词 环腺苷酸 反应序列 结合蛋白 转录调节 神经递质

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电针结合经颅磁刺激对局灶性脑缺血大鼠p-CREB表达的影响 被引量：12

2

作者 黄国付 黄晓琳 +2 位作者 郭铁成 陈红 韩肖华 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期289-292,共4页

目的:探讨电针结合重复经颅磁刺激(rTMS)对局灶性脑缺血大鼠磷酸化环腺苷酸反应元件结合蛋白(p-CREB)表达的影响及其治疗缺血性脑损伤的机制。方法:Wistar大鼠75只,采用线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞模型,随机分为正常组、模型组、电针... 目的:探讨电针结合重复经颅磁刺激(rTMS)对局灶性脑缺血大鼠磷酸化环腺苷酸反应元件结合蛋白(p-CREB)表达的影响及其治疗缺血性脑损伤的机制。方法:Wistar大鼠75只,采用线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞模型,随机分为正常组、模型组、电针组、rTMS组和电针结合rTMS组,通过免疫组化检测脑缺血后第7天、第14天与第28天三个不同时相大鼠海马胞核内p-CREB表达的变化,并观测其神经功能评分和学习记忆能力。结果:脑缺血后不同时相缺血侧海马p-CREB阳性表达,模型组在第7天时高于正常组,第28天时低于正常组P<0.05,第14天时与正常组相比P>0.05;电针组、rTMS组和电针结合rTMS组三个时相均高于模型组,第7天、第14天时高于正常组,差异具有显著性意义(P<0.05),第28天时与正常组相比P>0.05,其中,电针结合rTMS组第7天、第14天时高于电针组、rTMS组P<0.05,电针组和rTMS组各时相均无显著性差异(P>0.05)。电针组、rTMS组和电针结合rTMS组各时相神经功能评分和电跳台实验评分均较模型组改善(P<0.01,P<0.05),尤以电针结合rTMS组为明显。结论:电针结合rTMS促进p-CREB的表达可能是其治疗缺血性脑卒中的机制之一。 展开更多

关键词 脑缺血 电针 重复经颅磁刺激 磷酸化环腺苷酸反应元件结合蛋白

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原花青素对AD大鼠学习记忆及CREB蛋白表达的影响 被引量：2

3

作者 周水妹 瞿伟 +1 位作者 姚建标 徐露 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2017年第6期650-653,共4页

目的:观察原花青素(OPC)对阿尔茨海默病(AD)大鼠学习记忆及相关蛋白环腺苷酸应答原件结合蛋白(CREB)的影响。方法:40只老龄大鼠随机分为空白对照组、模型组、OPC高剂量组和OPC低剂量组。除空白对照组外,其余各组采用D-半乳糖合并鹅膏覃... 目的:观察原花青素(OPC)对阿尔茨海默病(AD)大鼠学习记忆及相关蛋白环腺苷酸应答原件结合蛋白(CREB)的影响。方法:40只老龄大鼠随机分为空白对照组、模型组、OPC高剂量组和OPC低剂量组。除空白对照组外,其余各组采用D-半乳糖合并鹅膏覃氨酸损毁大脑基底核神经元的方法复制AD模型。Morris水迷宫实验检测大鼠学习和记忆能力,双抗体夹心法测定各组大鼠海马区乙酰胆碱酯酶(Ach E)和乙酰胆碱转移酶(Ch AT)的活性,Western blot法检测CREB蛋白的表达。结果:AD模型组大鼠逃避潜伏期、搜索距离显著高于空白组,探索时间及探索百分比显著低于空白组,Ach E活性显著高于空白组,Ch AT活性及CREB蛋白的表达显著低于空白组。OPC高剂量组和OPC低剂量组逃避潜伏期、搜索距离显著低于模型组,探索时间及探索百分比显著高于模型组,Ach E活性显著低于模型组,Ch AT活性及CREB蛋白的表达显著高于模型组(P<0.05,P<0.01)。结论:OPC能提高AD大鼠的学习记忆能力,其机制可能与降低Ach E活性和提高Ch AT活性,并增加CREB蛋白的表达有关。 展开更多

关键词 阿尔茨海默病 原花青素 学习记忆 环腺苷酸应答原件结合蛋白

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鞘内注射吗啡和可乐定对切口痛大鼠脊髓背角pCREB表达的影响 被引量：1

4

作者 胡兴国 孔明 曾因明 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期999-1001,共3页

目的观察鞘内注射吗啡和可乐定对切口痛大鼠脊髓背角磷酸化环腺苷酸反应原件结合蛋白(pCREB)表达的影响。方法选择雄性SD大鼠80只,随机均分为五组:切口痛组(A组)、鞘内注射吗啡2.5μg组(B组)、鞘内注射可乐定5μg组(C组)、鞘内注射吗啡... 目的观察鞘内注射吗啡和可乐定对切口痛大鼠脊髓背角磷酸化环腺苷酸反应原件结合蛋白(pCREB)表达的影响。方法选择雄性SD大鼠80只,随机均分为五组:切口痛组(A组)、鞘内注射吗啡2.5μg组(B组)、鞘内注射可乐定5μg组(C组)、鞘内注射吗啡2.5μg+可乐定5μg组(D组)和假手术组(E组)。观察大鼠术后2h机械缩足反射阈值(MWT)、热缩足潜伏期(TWL)和脊髓背角pCREB表达的变化。结果与E组比较,A、B、C、D组MWT降低,TWL缩短,脊髓背角pCREB免疫反应阳性神经元数量和pCREB蛋白表达增加(P<0.01)。与A组比较,D组MWT升高,TWL延长,脊髓背角pCREB免疫反应阳性神经元数量和pCREB蛋白表达减少(P<0.01)。结论鞘内注射吗啡加可乐定可抑制大鼠切口痛,这可能与其引起的脊髓背角pCREB的表达增加有关。 展开更多

关键词 疼痛 吗啡 可乐定 脊髓背角 环腺苷酸反应原件结合蛋白

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合欢花水提物对抑郁模型大鼠学习记忆及海马CREB表达的影响 被引量：12

5

作者 王爱梅 未小明 +3 位作者 陈亚奇 李旻 薛娣 刘洪恩 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期771-776,共6页

目的:观察合欢花水提物对抑郁模型大鼠学习记忆能力及海马CREB表达的影响。方法:SD大鼠40只,随机分为空白组、模型组、氟西汀组和合欢花组,每组10只。采用孤养加慢性轻度不可预见性应激结合方法构建抑郁模型,氟西汀或合欢花水提物灌胃治... 目的:观察合欢花水提物对抑郁模型大鼠学习记忆能力及海马CREB表达的影响。方法:SD大鼠40只,随机分为空白组、模型组、氟西汀组和合欢花组,每组10只。采用孤养加慢性轻度不可预见性应激结合方法构建抑郁模型,氟西汀或合欢花水提物灌胃治疗21 d。空白组给予生理盐水。用药结束后,采用体重测定、旷场试验、糖水实验评估各组大鼠的抑郁情况。Morris水迷宫测试各组大鼠的学习记忆能力。ELISA法检测海马组织中cAMP含量。免疫组化法检测海马CREB的表达情况。结果:与模型组相比,合欢花组和氟西汀组抑郁症状明显改善。水迷宫结果显示:与空白组比较,模型组大鼠的逃避潜伏期(EL)明显延长,平台所在象限的游泳时间百分比和穿越站台次数明显减少(P<0.01);与模型组比较,氟西汀组和合欢花组EL明显缩短,游泳时间百分比和穿越站台次数增加(P<0.05或P<0.01);但氟西汀组和合欢花组以上指标的差异不明显(P>0.05)。海马cAMP含量及CREB平均光密度检测结果显示:与空白组比较,模型组大鼠海马cAMP含量、CREB的平均光密显著降低(P<0.01);与模型组相比,氟西汀组和合欢花组上述指标明显升高(P<0.01);而氟西汀组和合欢花组上述指标无统计学差异(P>0.05)。结论:合欢花水提物可以改善抑郁模型大鼠的抑郁症状提高抑郁大鼠学习记忆能力,其机制可能与提高海马CREB的表达影响cAMP-CREB通路有关。 展开更多

关键词 合欢花水提物 抑郁症 学习记忆 环磷酸腺苷反应原件结合蛋白 大鼠

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DNA甲基化介导miR-203/CREB1信号调控对多发性骨髓瘤细胞增殖及凋亡的影响 被引量：5

6

作者 徐成波 廖斌 +2 位作者 付海英 齐彦 沈建箴 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期790-796,共7页

目的:探讨DNA甲基化介导miR-203/CREB1信号途径的调控对多发性骨髓瘤细胞增殖、侵袭和凋亡等生物学行为的影响。方法:采用重亚硫酸氢盐测序法定量检测多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞株中miR-203的甲基化水平;实时荧光定量PCR检测miR-203的... 目的:探讨DNA甲基化介导miR-203/CREB1信号途径的调控对多发性骨髓瘤细胞增殖、侵袭和凋亡等生物学行为的影响。方法:采用重亚硫酸氢盐测序法定量检测多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞株中miR-203的甲基化水平;实时荧光定量PCR检测miR-203的表达水平;应用5-杂氮-2’-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)干预RPMI 8226细胞建立去甲基化模型;转染miR-203模拟物(mimic)构建miR-203过表达细胞;采用CCK-8法、Transwell、流式细胞术分别检测RPMI 8226细胞增殖、侵袭和凋亡;采用双荧光素酶报告实验验证miR-203与CREB1的靶向作用关系;Western blot检测CREB1的蛋白表达水平。结果:RPMI 8226细胞miR-203启动子区存在高甲基化且低表达,去甲基化可以诱导表达;去甲基化作用可以抑制RPMI 8226细胞增殖及细胞侵袭能力,促进细胞凋亡,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。miR-203过表达组的细胞增殖抑制作用、细胞侵袭能力、凋亡率与去甲基化作用组相当。双荧光素酶报告实验证实,CREB1是miR-203的直接作用靶点;去甲基化作用通过上调miR-203抑制CREB1蛋白的表达水平,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:miR-203甲基化沉默导致CREB1表达上调是维持多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞恶性生物学行为的重要原因。 展开更多

关键词 甲基化 miR-203 环腺苷酸反应元件结合蛋白1 多发性骨髓瘤 凋亡

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电针对缺血性脑卒中再灌注损害大鼠CREB表达的影响 被引量：7

7

作者 杨珊莉 江一静 +1 位作者 陶静 陈立典 《世界中医药》 CAS 2014年第2期221-223,共3页

目的:探寻电针对缺血性脑卒中再灌注损害大鼠cAMP反应原件结合蛋白(cAMP-response Element Binding Protein,CREB)表达的影响。方法:将60只健康成年的SD大鼠驯养3 d随机分成假手术组、模型组以及电针组,每组各20只,使用线栓法大脑中动... 目的:探寻电针对缺血性脑卒中再灌注损害大鼠cAMP反应原件结合蛋白(cAMP-response Element Binding Protein,CREB)表达的影响。方法:将60只健康成年的SD大鼠驯养3 d随机分成假手术组、模型组以及电针组,每组各20只,使用线栓法大脑中动脉闭塞(Middle Cerebral Artery Occlusion,MCAO)对模型组、电针组大鼠进行脑缺血模型制作,缺血2 h后进行再灌注,电针组大鼠接受电针干预,再灌注3 d后将大鼠断头取脑,进行2,3,5-氯化三苯基四氮唑(2,3,5-triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色以及图像软件分析观察脑梗死体积,免疫蛋白印迹法(Western blotting)检测CREB蛋白水平,聚合酶链反应(Reverse Transcription-polymerase Chain Reaction,PCR)检测CREB的基因表达水平。结果:TTC及其图像软件分析表明,电针组的SD大鼠脑梗死面积明显小于模型组(P<0.01);电针组的SD大鼠CREB蛋白水平明显高于模型组(P<0.01);电针组的SD大鼠CREB基因水平明显高于模型组(P<0.01)。结论:电针改善脑缺血再灌注损伤可以通过上调CREB实现。 展开更多

关键词 脑缺血 再灌注损伤 电针 cAMP反应原件结合蛋白

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CREB1、BDNF基因多态性与河南汉族老年男性卒中后抑郁的关联性分析 被引量：11

8

作者 刘柳 刘晓芳 +1 位作者 蒋超 王建平 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2019年第4期575-578,共4页

目的:研究CREB1-rs11904814、BDNF-rs6265多态性与河南汉族老年男性卒中后抑郁(PSD)的关系。方法:以319例首次发生脑卒中的河南汉族老年男性患者为研究对象,根据HAMD17项评分将患者分为PSD组(142例)、卒中对照组(177例);根据PSQI评分又... 目的:研究CREB1-rs11904814、BDNF-rs6265多态性与河南汉族老年男性卒中后抑郁(PSD)的关系。方法:以319例首次发生脑卒中的河南汉族老年男性患者为研究对象,根据HAMD17项评分将患者分为PSD组(142例)、卒中对照组(177例);根据PSQI评分又将PSD患者分为伴睡眠障碍组(103例)和不伴睡眠障碍组(39例)。应用PCR-RFLP技术及基因组测序技术检测患者CREB1-rs11904814和BDNF-rs6265位点多态性。结果:PSD组BDNF-rs6265AA基因型及A等位基因频率大于卒中对照组(P<0.05),A等位基因与PSD有关联(OR=1.882,95%CI=1.344~2.635)。CREB1-rs11904814基因型及等位基因频率在PSD组和卒中对照组之间的分布差异无统计学意义(P>0.05);但CREB1-rs11904814G等位基因频率在PSD伴睡眠障碍组和不伴睡眠障碍组之间的分布存在差异(P<0.05),G等位基因与PSD伴睡眠障碍有关联(OR=2.729,95%CI=1.456~5.115)。结论:BDNF-rs6265A等位基因可能是河南汉族老年男性PSD的危险因素;CREB1-rs11904814可能与河南汉族老年男性PSD发病无关,但可能是PSD合并睡眠障碍的预测因素。 展开更多

关键词 环磷酸腺苷反应原件结合蛋白1 脑源性神经营养因子 卒中后抑郁 睡眠障碍

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丹参酮ⅡA对局灶性脑缺血大鼠急性期脑保护作用的相关研究 被引量：3

9

作者 刘玲玲 刘红 +4 位作者 尹君玲 陈惠英 刘晓蕾 焦清海 武一平 《中国卒中杂志》 2014年第1期20-25,共6页

目的探讨丹参酮ⅡA(TashinoneⅡA,TSA)对局灶性脑缺血急性期大鼠顶叶皮质磷酸化环腺苷酸反应元件结合蛋白(phosphorylated cyclic adenosine monophosphate response element binding protein,p-CREB)和CREB1活性调节转导子(transducers... 目的探讨丹参酮ⅡA(TashinoneⅡA,TSA)对局灶性脑缺血急性期大鼠顶叶皮质磷酸化环腺苷酸反应元件结合蛋白(phosphorylated cyclic adenosine monophosphate response element binding protein,p-CREB)和CREB1活性调节转导子(transducers of regulated CREB1,TORC1)的蛋白表达和脑梗死体积的影响。方法采用成年健康雄性SD大鼠,随机分为假手术组、对照组、小剂量TSA组和大剂量TSA组,每组各12只。用线栓法制作右侧大脑中动脉闭塞模型,采用Longa评分判断动物模型成功与否。小剂量TSA组和大剂量TSA组在造模后立刻腹腔注射TSA溶液,剂量分别为:10 mg/kg及20 mg/kg,假手术组及对照组分别腹腔注射等量的生理盐水。造模成功后24 h将大鼠处死,采用2%2,3,5-三苯基四唑氮红染色计算梗死体积,应用Western blotting法检测各组手术侧顶叶皮质梗死灶神经细胞核TORC1和细胞核p-CREB以及细胞TORC1的蛋白表达。结果与对照组相比,大剂量TSA组大鼠脑组织梗死体积明显降低(P=0.004),细胞核TORC1表达显著增加(P<0.001);与对照组相比,小剂量TSA组大鼠脑组织梗死体积减小,无显著差异(P=0.148),细胞核TORC1蛋白表达升高,也无显著差异(P=0.083),细胞核p-CREB和细胞TORC1的蛋白表达水平无论在大剂量组(P均<0.001),还是小剂量组(P分别为0.002和0.001)均显著升高。结论 TSA可以上调脑梗死大鼠病灶侧顶叶皮质神经细胞TORC1-CREB信号通路的表达。 展开更多

关键词 环腺苷酸反应元件结合蛋白活性调节转导子 环腺苷酸反应元件结合蛋白 丹参酮 IIA 大脑中动脉闭塞

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CaMKⅡδ基因沉默对破骨细胞分化功能及c-fos/c-jun/CREB基因的影响 被引量：3

10

作者 张誉泓 戚孟春 +1 位作者 董伟 孙红 《国际口腔医学杂志》 CAS CSCD 2019年第4期420-425,共6页

目的探索编码钙调蛋白依赖性激酶(CaMK)Ⅱδ的基因沉默对破骨细胞分化功能的影响以及c-fos、c-jun、CREB基因在CaMKⅡδ调控破骨细胞分化中的作用,以揭示破骨细胞分化调控的分子机制。方法构建CaMKⅡδ RNA干扰载体,转染至小鼠RAW264.7... 目的探索编码钙调蛋白依赖性激酶(CaMK)Ⅱδ的基因沉默对破骨细胞分化功能的影响以及c-fos、c-jun、CREB基因在CaMKⅡδ调控破骨细胞分化中的作用,以揭示破骨细胞分化调控的分子机制。方法构建CaMKⅡδ RNA干扰载体,转染至小鼠RAW264.7细胞,确定干扰效率。病毒转染细胞后,用50 ng·mL^-1核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)诱导,5 d后收获,通过耐酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)检测、牛骨吸收陷窝检测沉默CaMKⅡδ基因对破骨细胞分化、骨吸收功能的影响;48 h后收获,利用实时聚合酶链式反应(PCR)、Westernblot等方法检测c-fos、c-jun、CREB的表达情况。结果 CaMKⅡδ RNA干扰在mRNA和蛋白质水平的干扰效率分别为70.6%和72.2%。 CaMKⅡδ RNA干扰可显著降低 c-fos、c-jun和CREB的mRNA水平,下调幅度分别为74%、49%和24%,CaMKⅡδ RNA干扰可显著降低c-Fos、c-Jun和CREB的水平,下调幅度分别为74.3%、61.3%和59.2%。结论 CaMKⅡδ RNA干扰可在mRNA和蛋白质水平显著抑制c-fos、c-jun、CREB的表达,其共同参与CaMKⅡδ对破骨细胞分化的调控。 展开更多

关键词 破骨细胞 钙调蛋白依赖性激酶Ⅱδ C-FOS C-JUN 环腺苷酸反应原件结合蛋白

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盐诱导激酶对TORC-CREB复合体的调节及其与高血压、糖尿病的关系 被引量：2

11

作者 刘瑜 李静 +1 位作者 金大庆 唐向东 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第3期274-279,共6页

环腺苷酸反应元件结合蛋白(cyclic AMP responsiveelement-binding protein,CREB)是受cAMP和Ca2+共同激活的转录因子,其目的基因产物涉及广泛的生理过程,如细胞增殖与存活、糖与脂类代谢、类固醇激素合成、学习与记忆等.新近发现的CREB... 环腺苷酸反应元件结合蛋白(cyclic AMP responsiveelement-binding protein,CREB)是受cAMP和Ca2+共同激活的转录因子,其目的基因产物涉及广泛的生理过程,如细胞增殖与存活、糖与脂类代谢、类固醇激素合成、学习与记忆等.新近发现的CREB活性调节转导子(transducer of regulated CREB activity,TORC)通过核-质穿梭调节CREB的活性而控制目的基因的转录与表达.盐诱导激酶(salt-inducible kinase,SIK)是一组丝氨酸/苏氨酸激酶,包含SIK1、SIK2和SIK3.这些蛋白激酶通过影响TORC的磷酸化水平,改变其在核-质中的分布,间接影响CREB目的基因的转录与表达.在某些器官与组织中,SIK(SIK1)也是CREB目的基因之一,因此SIK与TORC-CREB复合体形成一个完整的负反馈调节环路.TORC-CREB复合体广泛存在于多种器官与组织,如胰岛β-细胞、肝脏、肾上腺皮质和骨骼肌中,与胰岛β-细胞存活、肝脏糖异生、类固醇激素合成、骨骼肌线粒体增生与脂肪酸β氧化密切相关.将重点讨论SIK对TORC-CREB复合体的反馈调节及其与高血压、糖尿病发生的关系. 展开更多

关键词 环腺苷酸反应元件结合蛋白(CREB) CREB活性调节转导子(TORC) 盐诱导激酶(SIK)

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七氟醚麻醉对老年小鼠空间认知能力以及海马组织pCreb和Egr1表达的影响 被引量：2

12

作者 周国霞 朋立超 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1125-1129,共5页

目的探讨七氟醚麻醉对老年小鼠空间认知能力以及海马组织中磷酸化环腺苷酸应答元件结合蛋白(pCreb)和早期生长反应因子1(Egr1)表达的影响。方法将12只18月龄老年小鼠随机分为麻醉组和对照组,每组各6只。麻醉组小鼠吸入3%七氟醚4 h,而对... 目的探讨七氟醚麻醉对老年小鼠空间认知能力以及海马组织中磷酸化环腺苷酸应答元件结合蛋白(pCreb)和早期生长反应因子1(Egr1)表达的影响。方法将12只18月龄老年小鼠随机分为麻醉组和对照组,每组各6只。麻醉组小鼠吸入3%七氟醚4 h,而对照组小鼠吸入100%氧气4 h。水迷宫空间学习记忆能力测量在麻醉后48 h进行,获得训练结束后24 h进行空间探索试验。空间探索试验结束后15 min分离海马组织,通过Western blotting和实时定量PCR方法检测海马组织Egr1、Creb和pCreb的表达。结果麻醉组小鼠第4、5、6日逃逸潜伏期显著长于对照组(P<0.05);在空间探索试验中,对照组平台象限时间、路程百分比显著高于麻醉组(P<0.01)。与对照组比较,麻醉组小鼠海马组织Egr1的表达量显著下降(P<0.05);而两组Creb的表达量无显著差异(P>0.05),但麻醉组磷酸化水平下降(P<0.05)。结论七氟醚麻醉下调海马组织Egr1表达和Creb磷酸化水平,影响老年小鼠空间认知能力。 展开更多

关键词 海马 环腺苷酸应答元件结合蛋白 早期生长反应因子1 空间探索试验 老年小鼠 七氟醚

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携带CBP短发夹RNA基因腺病毒表达载体的构建

13

作者 魏云杰 江洪 +2 位作者 陈静 张静 徐昌武 《海南医学院学报》 CAS 2011年第5期577-581,585,共6页

目的:构建编码4条大鼠CREB结合蛋白(rCBP)短发夹RNA(shRNA)的腺病毒,检测RNA干扰技术(RNAi)下调rCBP mRNA的能力。方法:根据RNAi原理,设计4条针对rCBP的shRNA序列。PCR技术和酶切连接技术构建重组穿梭质粒Pgenesil4-rCBP-EGFP;体外同源... 目的:构建编码4条大鼠CREB结合蛋白(rCBP)短发夹RNA(shRNA)的腺病毒,检测RNA干扰技术(RNAi)下调rCBP mRNA的能力。方法:根据RNAi原理,设计4条针对rCBP的shRNA序列。PCR技术和酶切连接技术构建重组穿梭质粒Pgenesil4-rCBP-EGFP;体外同源重组技术构建可同时编码4条rCBP shRNA的腺病毒(CBP-shRNA/Ad),并进行鉴定和滴度检测。荧光显微镜观察CBP-shRNA/Ad转染大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)效率,RT-PCR技术和实时定量PCR技术检测CBP-shRNA/Ad下调rCBP mRNA的能力。结果:经酶切鉴定和质粒测序证实CBP-shRNA/Ad构建成功。荧光显微镜下观察,感染复数为25的CBP-shRNA/Ad转染VSMCs效率达80%,并且细胞生长良好。相同剂量的CBP-shRNA/Ad转染VSMCs 24 h、48 h、72 h,rCBP mRNA含量持续下降(P<0.05),并且72 h时rCBP mRNA含量低于空白对照组(P<0.05)。结论:CBP-shRNA/Ad可明显下调rCBP mRNA含量,对VSMCs无明显毒副作用,为基因治疗血管增殖性疾病奠定初步实验基础。 展开更多

关键词 RNA干扰 腺病毒 环磷腺苷反应原件结合蛋白结合蛋白 血管平滑肌细胞

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CBP基因沉默抑制血管平滑肌细胞增殖的研究

14

作者 魏云杰 江洪 +2 位作者 陈静 张静 徐昌武 《海南医学院学报》 CAS 2011年第4期433-437,444,共6页

目的:探讨RNA干扰大鼠CREB结合蛋白(rCBP)基因对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的影响。方法:根据CBP cDNA序列构建可同时表达4条针对rCBP mRNA特异的短发夹RNA(shR-NA)、携带绿色荧光蛋白的腺病毒(CBP-shRNA/Ad)。以空腺病毒为转染对... 目的:探讨RNA干扰大鼠CREB结合蛋白(rCBP)基因对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的影响。方法:根据CBP cDNA序列构建可同时表达4条针对rCBP mRNA特异的短发夹RNA(shR-NA)、携带绿色荧光蛋白的腺病毒(CBP-shRNA/Ad)。以空腺病毒为转染对照组、含非特异性shRNA编码序列的腺病毒为阴性对照组、感染复数为12、16、25、50的CBP-shRNA/Ad为干预组,转染0.1 U/mL凝血酶预处理的VSMCs 2 d。RT-PCR法、蛋白印记法分别检测rCBP mRNA和蛋白质的表达变化。流式细胞技术检测细胞周期,评价细胞增殖能力。倒置显微镜观察CBP-shRNA/Ad对细胞的毒副作用。结果:不同剂量的CBP-shRNA/Ad可在mRNA和蛋白质水平,明显抑制凝血酶诱导CBP高表达(P<0.05),具有量效依赖性。CBP-shRNA/Ad通过下调CBP含量,可使G0/G1期细胞比例显著升高(P<0.05),S期细胞比例下降(P<0.05),细胞周期被阻滞。倒置显微镜观察细胞贴壁状况良好。结论:RNA干扰技术可通过选择性下调rCBP的表达,显著抑制VSMCs的增殖,无明显细胞毒性。 展开更多

关键词 血管平滑肌细胞 RNA干扰 环磷腺苷反应原件结合蛋白结合蛋白 基因治疗

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异鼠李素激活PI3K/Akt/GSK-3β/CREB信号通路减轻鱼藤酮诱导的PC12细胞损伤 被引量：16

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作者 谭会洁 宋俊科 +3 位作者 石峰 张雯 杜冠华 郭常川 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期272-276,共5页

目的探讨异鼠李素(isorhamnetin,ISO)是否能够通过激活PI3K/Akt/GSK-3β/CREB通路减轻鱼藤酮对PC12细胞的损伤作用。方法采用MTT法检测细胞活力,LDH检测乳酸脱氢酶释放,Western blot法测定p-Akt、Akt、p-GSK-3β、GSK-3β、p-CREB和CRE... 目的探讨异鼠李素(isorhamnetin,ISO)是否能够通过激活PI3K/Akt/GSK-3β/CREB通路减轻鱼藤酮对PC12细胞的损伤作用。方法采用MTT法检测细胞活力,LDH检测乳酸脱氢酶释放,Western blot法测定p-Akt、Akt、p-GSK-3β、GSK-3β、p-CREB和CREB蛋白表达。结果与对照组相比,鱼藤酮损伤后PC12细胞活力明显降低,CREB的磷酸化程度显著降低。异鼠李素预处理组细胞存活率和磷酸化CREB的表达均高于鱼藤酮损伤模型组。此外,异鼠李素预处理增强了鱼藤酮损伤后PC12细胞中Akt和GSK-3β的磷酸化程度。加入PI3K抑制剂LY294002可以抑制Akt、GSK-3β和CREB的磷酸化水平,从而部分消除异鼠李素对鱼藤酮损伤PC12细胞的神经保护作用。结论异鼠李素可能通过PI3K/Akt/GSK-3β/CREB信号通路发挥PC12细胞保护作用。 展开更多

关键词 异鼠李素 鱼藤酮 蛋白激酶B 糖原合成酶激酶-3 环腺苷酸反应结合蛋白 神经保护

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丁苯酞通过激动cAMP/CREB/BDNF信号通路改善小鼠缺血再灌注后认知障碍的作用机制 被引量：19

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作者 官俏兵 韩晨阳 +2 位作者 储志远 杨毅 张晓玲 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2019年第2期152-157,共6页

目的:研究丁苯酞通过激动cAMP/CREB/BDNF信号通路改善小鼠缺血再灌注后认知障碍的作用机制。方法:采用反复结扎双侧颈总动脉造成缺血再灌注损伤小鼠的认知障碍模型(VCI)。将小鼠分为假手术组、模型组、药物组,药物组分别采用5、10、20 m... 目的:研究丁苯酞通过激动cAMP/CREB/BDNF信号通路改善小鼠缺血再灌注后认知障碍的作用机制。方法:采用反复结扎双侧颈总动脉造成缺血再灌注损伤小鼠的认知障碍模型(VCI)。将小鼠分为假手术组、模型组、药物组,药物组分别采用5、10、20 mg/kg的丁苯酞(NBP)干预。Morris水迷宫实验检测小鼠认知能力,尼氏(Nissl)染色观察小鼠海马神经元的形态,比色法检测海马中超氧化物歧化酶(SOD)的活性、丙二醛(MDA)的水平以及一氧化氮(NO)的水平。Western blot法检测海马组织中环磷酸腺苷(cAMP)、磷酸化环磷酸腺苷反应原件结合蛋白(p-CREB)、脑源性神经营养因子(BDNF)的表达水平。结果:模型组小鼠认知功能下降,与假手术组比较差异具有统计学意义(P<0.05);模型组小鼠海马区组织中SOD活力下调,MDA和NO含量上调,与假手术组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。Nissl染色显示模型组小鼠神经元细胞变性坏死且cAMP、CREB、BDNF蛋白表达受到抑制,与假手术组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。NBP干预后,小鼠认知能力显著提高,与模型组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。海马区SOD活性上调,MDA和NO水平下调,具有剂量依赖性,与模型组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。cAMP、p-CREB、BDNF蛋白表达上调;Nissl染色显示,NBP干预后海马区神经元细胞凋亡减少。结论:NBP改善卒中后认知障碍的机制可能与激活cAMP/CREB/BDNF信号通路有关。 展开更多

关键词 丁苯酞 缺血再灌注 认知障碍 环磷酸腺苷 磷酸化环磷酸腺苷反应原件结合蛋白 脑源性神经营养因子

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CREB和ERK1/2在CaMKⅡδ调控破骨细胞分化中的作用 被引量：2

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作者 王红美 董伟 +4 位作者 戚孟春 冯晓洁 陆大壮 李任 孙红 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期91-95,共5页

目的探索c AMP反应原件结合蛋白(CREB)、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)在钙调蛋白依赖性激酶Ⅱ(Ca MKⅡ)δ调控破骨细胞分化中的作用及分子机制。方法构建Ca MKⅡδR NA干扰载体并转染小鼠R AW264.7细胞,确定其干扰效率。病毒转染细胞... 目的探索c AMP反应原件结合蛋白(CREB)、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)在钙调蛋白依赖性激酶Ⅱ(Ca MKⅡ)δ调控破骨细胞分化中的作用及分子机制。方法构建Ca MKⅡδR NA干扰载体并转染小鼠R AW264.7细胞,确定其干扰效率。病毒转染细胞后,用50ng/ml核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)诱导,于不同时间点检测CREB、ERK1/2蛋白磷酸化水平。应用ERK1/2信号阻断剂PD98059处理细胞,检测ERK1/2信号阻断对活化T细胞核因子c1(NFATc1)基因表达及破骨细胞分化的影响。结果 Ca MKⅡδ干扰载体在m RNA和蛋白水平的干扰效率分别为77.2%和70.2%。Ca MKⅡδ干扰可明显降低CREB、ERK1/2蛋白磷酸化水平,下调幅度分别为21%~55%和55%~64%。此外,ERK1/2信号阻断明显下调了NFATc1蛋白表达,使破骨细胞数目、骨吸收陷窝数目及面积分别下降了39.3%、50.0%和52.3%。结论 Ca MKⅡδRNA干扰可明显抑制CREB和ERK1/2蛋白磷酸化;CREB和ERK1/2参与了Ca MKⅡδ对破骨细胞分化的调控。 展开更多

关键词 破骨细胞 钙调蛋白依赖性激酶Ⅱδ RNA干扰 cAMP反应原件结合蛋白 细胞外信号调节激酶1/2 活化T细胞核因子c1

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七氟醚-N2O麻醉对青年小鼠空间学习和记忆功能及pCREB和Egr1表达的影响

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作者 王蓓 周国霞 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期412-418,共7页

目的研究七氟醚-N2O麻醉后青年小鼠的空间学习和记忆能力以及海马磷酸化环腺苷酸应答元件结合蛋白(phosphorylated cyclic AMP response element-binding protein,pCREB)和早期生长反应因子1(early growth response factor 1,Egr1)的表... 目的研究七氟醚-N2O麻醉后青年小鼠的空间学习和记忆能力以及海马磷酸化环腺苷酸应答元件结合蛋白(phosphorylated cyclic AMP response element-binding protein,pCREB)和早期生长反应因子1(early growth response factor 1,Egr1)的表达,并与老年小鼠进行比较。方法12只3月龄和12只18月龄小鼠随机分为对照组和实验组,每组各6只。48 h后进行为期6天的获得训练。获得训练结束后24 h进行空间探索实验,实验结束后15 min收集两组小鼠的海马组织,通过Western blot和实时定量PCR方法评估pCREB和Egr1的表达水平。结果未见麻醉损害青年小鼠的空间学习和记忆功能以及海马中pCREB和Egr1的表达水平,麻醉组与对照组比较差异均无统计学意义;而老年小鼠Sev+N2O组在麻醉后第4、5、6天逃逸潜伏期显著长于对照组(P<0.05),两组小鼠游泳速度差异无统计学意义;在空间探索实验中,Sev+N2O组目标象限路程百分比和时间百分比显著低于对照组(P<0.01);海马中pCREB和Egr1的表达水平均较对照组显著下降(P<0.05)。结论七氟醚-N2O麻醉对青年小鼠的空间学习记忆能力没有损害,也不影响海马中pCREB和Egr1的表达,但会对老年小鼠造成损害。 展开更多

关键词 七氟醚 一氧化二氮(N2O) 环腺苷酸应答元件结合蛋白(pCREB) 早期生长反应因子1(Egr1) 小鼠 MORRIS水迷宫

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