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地塞米松对人晶状体上皮细胞核转录因子κB及其抑制蛋白α的表达和细胞凋亡的影响 被引量:3
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作者 王钧蔚 王林 +1 位作者 葛红岩 刘平 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期145-150,共6页
背景长期全身或眼局部应用糖皮质激素可诱导皮质类固醇性白内障,但其作用机制尚不明确。目的研究地塞米松作用于人晶状体上皮细胞(LECs)后对LECs中核转录因子κB(NF—κB)/NF—κB抑制蛋白κ(IκBκ)表达的影响及LECs凋亡的发... 背景长期全身或眼局部应用糖皮质激素可诱导皮质类固醇性白内障,但其作用机制尚不明确。目的研究地塞米松作用于人晶状体上皮细胞(LECs)后对LECs中核转录因子κB(NF—κB)/NF—κB抑制蛋白κ(IκBκ)表达的影响及LECs凋亡的发生情况,了解皮质类固醇性白内障的发病机制。方法取人LECs系(HLE283)在含质量分数20%胎牛血清的DMEM中进行培养和传代。将不同浓度的地塞米松(0.01、0.1、1、10、100μmol/L)分别加入DMSO无血清DMEM培养液中作为不同浓度地塞米松组,不含地塞米松的DMSO无血清DMEM培养液培养的LECs作为空白对照组。采用逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)、Western blot、流式细胞术等方法,分别在基因水平、蛋白水平检测LECs中NF—κB/IκB α浓度的改变及LECs凋亡率的变化。结果扩增的基因片段与所设计片段大小一致。地塞米松作用后NF—α核蛋白在LECs中的表达量随着地塞米松浓度的增加而下降,差异有统计学意义(F=36.077,P=0.004);IκBα蛋白的表达随着地塞米松浓度的增加而上升,差异有统计学意义(F=35.741,P=0.002)。在同浓度地塞米松组,NF—κB核蛋白在LECs中的表达量随作用时间的不同差异有统计学意义(F=16.606,P=0.01),与地塞米松作用24h时的表达量比较,36h和48h时的NF—κB核蛋白表达量明显下降,差异有统计学意义(P=0.002;P=0.01)。与地塞米松作用24h时的表达量比较,36h和48hIκBα蛋白在LECs中的表达量明显增加,差异均有统计学意义(P=0.014;P=0.002)。流式细胞仪检测显示LECs的凋亡率随着地塞米松浓度的增加明显上升,与空白对照组相比差异有统计学意义(P〈0.05)。结论地塞米松通过上调IκBα的表达而过度抑制了NF—κB的活性,并导致LECs凋亡,其作用呈浓度依赖性,这可能是皮质类固醇性白内障发生发展的细胞学和分子生物学机制之一。 展开更多
关键词 皮质类固醇性白内障 地塞米松 核转录因子κb 核转录因子κb抑制蛋白α 凋亡 人晶状体上皮细胞
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电针预处理对脑缺血再灌注损伤大鼠神经功能和缺血半暗区Tolls样受体4、核转录因子κB蛋白的影响 被引量:20
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作者 叶涛 朱路文 +4 位作者 唐强 李宏玉 梁碧莹 张继瑶 郑婷婷 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2017年第7期745-749,共5页
目的探讨电针预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤后神经功能的影响及其机制。方法雄性Sprague-Dawley大鼠36只随机分为假手术组(n=12)、模型组(n=12)和电针预处理组(n=12)。后两组线栓法制备大鼠脑缺血2 h再灌注模型。电针预处理组在缺血前... 目的探讨电针预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤后神经功能的影响及其机制。方法雄性Sprague-Dawley大鼠36只随机分为假手术组(n=12)、模型组(n=12)和电针预处理组(n=12)。后两组线栓法制备大鼠脑缺血2 h再灌注模型。电针预处理组在缺血前给予电针百会干预2周。再灌注24 h后,采用改良神经功能缺损评分进行评定,HE染色观察缺血侧脑组织脑损伤程度,Western blotting检测脑缺血半暗区Tolls样受体4(TLR4)、核转录因子κB(NF-κB)蛋白表达。结果与模型组比较,电针预处理组神经功能缺损评分降低(P<0.05),脑组织损伤程度减轻,缺血半暗区TLR4、NF-κB蛋白表达下调(P<0.05)。结论电针预处理通过下调缺血半暗区TLR4、NF-κB蛋白表达,诱导脑保护作用,降低炎性损伤程度,改善脑缺血再灌注损伤后大鼠的神经功能。 展开更多
关键词 脑缺血再灌注损伤 电针 预处理 神经功能 Tolls样受体4 核转录因子κb 大鼠
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青藤碱对核转录因子κB及其抑制因子IκB的影响 被引量:22
3
作者 金晓琨 李卫东 +1 位作者 滕慧玲 林志彬 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期788-791,共4页
目的 探讨青藤碱对BALB/c近交纯系小鼠腹腔巨噬细胞核转录因子κB及其抑制因子IκB表达的影响 ,提供其抗炎治疗类风湿性关节炎作用机制的实验依据。方法 应用荧光标记和激光共聚焦扫描显微镜技术检测药物对LPS(Lipopolysaccharides)... 目的 探讨青藤碱对BALB/c近交纯系小鼠腹腔巨噬细胞核转录因子κB及其抑制因子IκB表达的影响 ,提供其抗炎治疗类风湿性关节炎作用机制的实验依据。方法 应用荧光标记和激光共聚焦扫描显微镜技术检测药物对LPS(Lipopolysaccharides)刺激状态下腹腔巨噬细胞NF κBp6 5 (nucleartranscriptionfactors)核移位的影响 ;采用Westernblot方法检测药物对LPS刺激作用下的腹腔巨噬细胞IκB α降解的影响。结果 高、中剂量给药组与模型对照 (control)组间NF κBp6 5核移位和IκB α降解的差异有显著性 (P <0 0 1)。结论 青藤碱的抗炎抗风湿的作用可能与其抑制NFκBp6 5核移位和IκB α降解有关。 展开更多
关键词 青藤碱 类风湿性关节炎 腹腔巨噬细胞 核转录因子κb Iκb
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溃疡性结肠炎小鼠模型肠粘膜中细胞因子的表达和核转录因子κB的激活 被引量:17
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作者 王群英 陈村龙 +3 位作者 王继德 马强 赖卓胜 张亚历 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第11期1202-1205,共4页
目的:建立小鼠溃疡性结肠炎动物模型并检测其肠粘膜中致炎细胞因子TNF-α、IL-1β的表达和NF-κB的激活。方法用5%葡聚糖硫酸钠(DSS)口饲法制备小鼠UC模型;采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,对UC小鼠肠粘膜中TNF-α、IL-1β的表达... 目的:建立小鼠溃疡性结肠炎动物模型并检测其肠粘膜中致炎细胞因子TNF-α、IL-1β的表达和NF-κB的激活。方法用5%葡聚糖硫酸钠(DSS)口饲法制备小鼠UC模型;采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,对UC小鼠肠粘膜中TNF-α、IL-1β的表达水平进行半定量测定;应用免疫电泳迁移率改变分析(EMSA)法检测急性期和慢性期UC小鼠肠粘膜细胞NF-κB的激活。结果模型组肠粘膜中TNF-α、IL-1β的表达较正常对照组显著增加(P=0.009),NF-κB 的核内结合活性也显著增强。结论UC 的发生、发展过程伴随致炎细胞因子表达的升高,可以加剧炎症,致上皮细胞凋亡。该过程可能受NF-κB激活的调控。 展开更多
关键词 溃疡性结肠炎 小鼠 动物模型 肠粘膜 细胞因子 核转录因子κb TNF-Α IL-1Β
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胃癌组织核转录因子κB p65蛋白表达与肿瘤多药耐药性的关系 被引量:7
5
作者 李勇 耿建磊 +4 位作者 檀碧波 范立侨 赵群 刘羽 刘庆伟 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期238-241,共4页
目的分析胃癌组织中核转录因子κB(NF-κB)p65蛋白表达与肿瘤多药耐药性(MDR)的关系,并探讨其意义。方法选取2013年1—12月在河北医科大学第四医院外三科手术切除并经病理证实的68例胃癌患者的肿瘤组织及癌旁组织。采用免疫组化(SP)法... 目的分析胃癌组织中核转录因子κB(NF-κB)p65蛋白表达与肿瘤多药耐药性(MDR)的关系,并探讨其意义。方法选取2013年1—12月在河北医科大学第四医院外三科手术切除并经病理证实的68例胃癌患者的肿瘤组织及癌旁组织。采用免疫组化(SP)法检测胃癌组织及癌旁组织NF-κB p65、P-gp、Bcl-2、Bax蛋白表达;采用体外药物敏感实验(MTT法)检测胃癌组织细胞对氟尿嘧啶(5-FU)、长春新碱(VCR)、紫杉醇(PTX)、奥沙利铂(L-OHP)、表阿霉素(e ADM)的体外化疗药物敏感性。结果胃癌组织NF-κB p65、P-gp、Bcl-2蛋白强表达率均高于癌旁组织,Bax蛋白强表达率低于癌旁组织,差异均有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关分析结果显示,胃癌组织NF-κB p65与P-gp蛋白表达呈正相关(rs=0.321,P=0.008),NF-κB p65与Bax蛋白表达呈负相关(rs=-0.333,P=0.006),NF-κB p65与Bcl-2蛋白表达无直线相关关系(rs=0.231,P=0.058)。在胃癌组织中,5-FU、PTX对NF-κB p65强表达者肿瘤细胞抑制率低于弱表达者,差异有统计学意义(P<0.05);5-FU、PTX、L-OHP对P-gp强表达者肿瘤细胞抑制率低于弱表达者,差异有统计学意义(P<0.05);5-FU、PTX、e ADM对Bcl-2强表达者肿瘤细胞抑制率低于弱表达者,差异有统计学意义(P<0.05);5-FU、L-OHP、e ADM对Bax强表达者肿瘤细胞抑制率高于弱表达者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论胃癌组织中NF-κB p65表达增高,其可能通过调控P-gp、Bax蛋白表达而参与胃癌MDR。 展开更多
关键词 胃肿瘤 多药耐药相关蛋白质类 核转录因子κb
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Epstein-Barr病毒潜伏蛋白1通过核转录因子κB诱导鼻咽上皮细胞表达端粒酶活性 被引量:3
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作者 杨静 邓锡云 +4 位作者 唐敏 吴尚辉 顾焕华 易薇 曹亚 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第4期556-561,共6页
利用已建立的原代人胚鼻咽上皮细胞和Tet on LMP1系统等良好的实验模型 ,采用荧光酶报道基因分析法和端粒酶TRAP ELISA技术 ,分别检测EB病毒潜伏蛋白 1(LMP1)诱导的核转录因子κB (NFκB)活性和端粒酶活性 ,从LMP1介导NFκB信号传导途... 利用已建立的原代人胚鼻咽上皮细胞和Tet on LMP1系统等良好的实验模型 ,采用荧光酶报道基因分析法和端粒酶TRAP ELISA技术 ,分别检测EB病毒潜伏蛋白 1(LMP1)诱导的核转录因子κB (NFκB)活性和端粒酶活性 ,从LMP1介导NFκB信号传导途径角度 ,探讨LMP1诱导端粒酶表达的分子机制 .结果表明 ,LMP1可诱导鼻咽上皮细胞表达端粒酶活性 ,将LMP1羧基端胞浆区突变后 ,可同时下调NFκB活性和端粒酶活性 .在Doxycycline诱导LMP1表达状态下 ,NFκB反式激活活性增强 ,同时端粒酶活性升高 ;进一步应用硫代磷酸化修饰的反义NFκBp6 5寡脱氧核苷酸和IκBα的显性负性突变体分别阻断NFκB活性 ,可降低由LMP1诱导的端粒酶活性 .因此 ,NFκB作为LMP1信号传导途径上的枢纽 ,可能介导了LMP1对端粒酶的表达调控 . 展开更多
关键词 Epstein-barr病毒 潜伏蛋白1 核转录因子κb 诱导 鼻咽上皮细胞 表达 端粒酶活性
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核转录因子κB和糖皮质激素受体在慢性阻塞性肺疾病患者稳定期的相互作用 被引量:10
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作者 柳涛 彭敏 蔡柏蔷 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期147-150,共4页
目的探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期外周血和气道黏膜核转录因子κB(NF-κB)和糖皮质激素受体(GCR)的表达。方法应用Werstern blot方法检测COPD稳定期患者和相匹配的肺功能正常对照组各8例外周血淋巴细胞和支气管黏膜核蛋白核转录因... 目的探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期外周血和气道黏膜核转录因子κB(NF-κB)和糖皮质激素受体(GCR)的表达。方法应用Werstern blot方法检测COPD稳定期患者和相匹配的肺功能正常对照组各8例外周血淋巴细胞和支气管黏膜核蛋白核转录因子NF-κB和GCR的表达。结果 COPD患者稳定期外周血淋巴细胞和支气管黏膜核蛋白GCR表达均显著低于对照组(P<0.05,P<0.01),两组支气管黏膜表达显著高于外周血淋巴细胞(P<0.05,P<0.01);COPD患者稳定期外周血淋巴细胞和支气管黏膜核蛋白NF-κB表达均显著高于对照组(P<0.05),两组支气管黏膜表达高于外周血淋巴细胞(P<0.05,P<0.01)。结论 COPD患者稳定期与对照组NF-κB和GCR表达差异性提示COPD患者即使在稳定期仍存在慢性炎症,尤其是气道局部炎症更为明显。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病 糖皮质激素受体 核转录因子κb
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核转录因子κB在TNF-α诱导人气道上皮细胞hBD-2表达中的作用 被引量:2
8
作者 廖伟 钱桂生 +2 位作者 雷撼 黄桂君 张方 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期491-493,共3页
目的观察肿瘤坏死因子-α(TNFα-)诱导人气道上皮细胞人β防御素-2(hBD-2)的表达及核转录因子κB(NFκ-B)在hBD-2表达中的作用。方法用TNFα-和或NFκ-B抑制剂PDTC处理体外培养人气道原代上皮细胞,RT-PCR法检测hBD-2 mRNA的表达,W ester... 目的观察肿瘤坏死因子-α(TNFα-)诱导人气道上皮细胞人β防御素-2(hBD-2)的表达及核转录因子κB(NFκ-B)在hBD-2表达中的作用。方法用TNFα-和或NFκ-B抑制剂PDTC处理体外培养人气道原代上皮细胞,RT-PCR法检测hBD-2 mRNA的表达,W estern b lot检测细胞质IκBα-蛋白活性变化,凝胶迁移试验(EMSA)检测不同时相NFκ-B活性的变化。结果TNFα-刺激0.5 h后可见人气道上皮细胞hBD-2 mRNA表达,并呈时间依赖性;PDTC可抑制hBD-2mRNA表达;NFκ-B在TNFα-刺激1 h后明显活化,抗体超迁移率实验结果显示p65-p50异型二聚体NFκ-B参与了NFκ-B的活化。结论一定剂量的TNFα-可诱导人气道上皮细胞hBD-2 mRNA表达,NFκ-B在TNFα-诱导气道上皮细胞hBD-2mRNA起重要的调控作用。 展开更多
关键词 人气道上皮细胞 人Β防御素-2 肿瘤坏死因子 核转录因子κb
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核转录因子κB在炎症相关癌症中的作用 被引量:4
9
作者 余太平 李勇 王涛 《国际口腔医学杂志》 CAS 2007年第6期418-420,共3页
核转录因子κB(NF-κB)是一种重要的转录因子蛋白,广泛存在于机体各种组织细胞中,对多种表达诸如:细胞因子、化学因子、生长因子、细胞黏附分子、抗凋亡蛋白基因的上调起关键作用,并且在多种疾病尤其是癌症的发病机制中发挥重要的作用... 核转录因子κB(NF-κB)是一种重要的转录因子蛋白,广泛存在于机体各种组织细胞中,对多种表达诸如:细胞因子、化学因子、生长因子、细胞黏附分子、抗凋亡蛋白基因的上调起关键作用,并且在多种疾病尤其是癌症的发病机制中发挥重要的作用。本文就NF-κB在炎症促进癌症发生发展中的作用以及在癌症治疗中的可行性作一综述。 展开更多
关键词 核转录因子κb 炎症 癌症 白细胞介素 肿瘤坏死因子Α
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白血病耐药细胞中多药耐药基因MDR1与核转录因子κB的关系 被引量:2
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作者 杨冬艳 张宏宇 +2 位作者 孔晓霞 孙连坤 史纪文 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期650-655,共6页
目的:研究核转录因子κB与多药耐药基因MDR1在白血病化疗耐药中的作用,阐明核转录因子κB(NF-κB)与白血病多药耐药的关系及相关分子机制。方法:白血病细胞K562和阿霉素(ADM)诱导的耐药细胞K562/ADM分别应用ADM(0、0.25、0.50、1.00和2... 目的:研究核转录因子κB与多药耐药基因MDR1在白血病化疗耐药中的作用,阐明核转录因子κB(NF-κB)与白血病多药耐药的关系及相关分子机制。方法:白血病细胞K562和阿霉素(ADM)诱导的耐药细胞K562/ADM分别应用ADM(0、0.25、0.50、1.00和2.00μg.L-1)或丝裂霉素(MIT)(0、2、4、8和16 mg.L-1)作用48 h,通过MTT法检测细胞生存率,计算细胞耐药指数;RT-PCR方法检测MDR1和IκBmRNA表达;Western blotting方法检测P-gp和P65的蛋白表达。结果:ADM和MIT分别作用后,与空白对照组比较,白血病细胞K562细胞生存率下降(P<0.01),呈剂量依赖性;ADM和MIT对耐药细胞K562/ADM生存率作用不明显;在mRNA水平上,与K562细胞比较,K562/ADM细胞的MDR1 mRNA高表达(P<0.01)。与空白对照组比较,ADM 0.50和1.00μg.L-1或MIT 4和8 mg.L-1分别作用K562细胞和K562/ADM细胞,IκBαmRNA表达均下降(P<0.01),并呈剂量依赖性;在蛋白水平上,与K562细胞比较,K562/ADM细胞的P-gp蛋白高表达(P<0.01)。与空白对照组比较,ADM 0.50和1.00μg.L-1或MIT 4和8 mg.L-1分别作用K562/ADM细胞,P-gp蛋白表达量升高(P<0.01),同时P65蛋白表达量升高,且呈药物剂量依赖性(P<0.01)。结论:MDR1基因及P-gp蛋白的高表达很可能是白血病细胞K562多药耐药性形成的关键机制,而NF-κB的激活可能参与了多药耐药的调控。 展开更多
关键词 多药耐药基因 核转录因子κb P65
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核转录因子κBp65在子宫颈鳞癌中的表达及意义 被引量:2
11
作者 程大丽 陈冬 +1 位作者 陈浩阳 张淑兰 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期140-142,共3页
目的: 探讨核转录因子κB(NF- κB)p65蛋白在人宫颈鳞癌组织中的表达及意义。方法: 32例人宫颈鳞状细胞癌为实验组,慢性宫颈炎及正常宫颈组织各30例为对照组。应用免疫组织化学方法检测NF- κBp65蛋白在组织中的表达水平。结果:免疫组... 目的: 探讨核转录因子κB(NF- κB)p65蛋白在人宫颈鳞癌组织中的表达及意义。方法: 32例人宫颈鳞状细胞癌为实验组,慢性宫颈炎及正常宫颈组织各30例为对照组。应用免疫组织化学方法检测NF- κBp65蛋白在组织中的表达水平。结果:免疫组织化学方法显示32例宫颈癌组织中NF- κBp65蛋白阳性表达率为68. 7.%,慢性宫颈炎组织中NF -κBp65蛋白阳性表达率为6. 66%,而30例正常组织中无表达,实验组与对照组之间差异显著(P<0.05)。结论:NF- κB活化与宫颈癌的发生有关,NF -κBp65可能成为人宫颈癌治疗的新靶点。 展开更多
关键词 核转录因子κb 宫颈癌 免疫组织化学 肿瘤发生
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角膜碱烧伤中白介素-1与核转录因子κB表达的相关性研究 被引量:7
12
作者 张明昌 王勇 《眼科研究》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期33-36,共4页
目的观察白细胞介素-1α(IL-1α)与核转录因子κB(NF-κB)在角膜碱烧伤中的表达变化及相关性,探讨其对角膜碱烧伤损伤修复的影响。方法制作大鼠碱烧伤模型,裂隙灯显微镜与病理组织学观察角膜炎症反应,应用western-blot测定角膜中NF-κB... 目的观察白细胞介素-1α(IL-1α)与核转录因子κB(NF-κB)在角膜碱烧伤中的表达变化及相关性,探讨其对角膜碱烧伤损伤修复的影响。方法制作大鼠碱烧伤模型,裂隙灯显微镜与病理组织学观察角膜炎症反应,应用western-blot测定角膜中NF-κB的表达;应用酶链免疫吸附实验(ELISA)测定IL-1α的表达。结果碱烧伤角膜炎症反应随时间延长而加重,第7d开始溃疡形成,21d左右趋于稳定。活化的NF-κB表达量与IL-1α质量浓度在碱烧伤后早期显著增加,伤后3d达到高峰,7d后回落,14d降至正常水平。相关性分析显示,角膜碱烧伤后IL-1质量浓度与NF-κB表达量为正相关,相关系数为0·808(P<0·01)。结论角膜碱烧伤后早期,NF-κB显著活化,提高IL-1α的表达,在角膜碱烧伤损伤机制中起着重要作用。 展开更多
关键词 白细胞介素-1 核转录因子κb 角膜碱烧伤
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表皮生长因子通过核转录因子κB促进胆管癌细胞侵袭的实验研究 被引量:1
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作者 孔凡民 李昱骥 +3 位作者 王立新 李航宇 张浩 郭仁宣 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期249-250,共2页
目的探讨表皮生长因子(EGF)诱导胆管癌细胞侵袭的相关机制。方法检测胆管癌细胞株HuCCT1在EGF不同浓度下的细胞侵袭力及细胞增殖情况;采用凝胶电泳迁移率试验检测核转录因子κΒ(NF-κΒ)在不同EGF浓度下的活性;并用NF-κΒ的抑制剂(PD... 目的探讨表皮生长因子(EGF)诱导胆管癌细胞侵袭的相关机制。方法检测胆管癌细胞株HuCCT1在EGF不同浓度下的细胞侵袭力及细胞增殖情况;采用凝胶电泳迁移率试验检测核转录因子κΒ(NF-κΒ)在不同EGF浓度下的活性;并用NF-κΒ的抑制剂(PDTC)和布洛芬预先处理HuCCT1胆管癌细胞后,检测其对HuCCT1胆管癌细胞侵袭力的影响。结果随着EGF浓度的增加,胆管癌细胞株HuCCT1侵袭细胞数也随之增加,具有明显的浓度依赖性。而EGF浓度的变化对HuCCT1细胞的增殖无明显影响。随着EGF浓度的增加,NF-κΒ的活化明显增强;PDTC和布洛芬明显抑制EGF诱导的HuCCT1细胞侵袭力。结论EGF能够增强胆管癌细胞的侵袭力,其增强的侵袭力可能是通过NF-κΒ信号传导路径,激活基质金属蛋白酶9等蛋白水解酶而实现的。 展开更多
关键词 表皮生长因子 核转录因子κb 胆管癌 侵袭
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核转录因子κB在缺血缺氧性脑损伤中的作用 被引量:1
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作者 于秋红 薛连璧 张红霞 《中国卒中杂志》 2006年第12期900-903,共4页
在细胞未受刺激时核转录因子κB(NF-κB)保持静息状态,当细胞受到外界信号刺激后NF-κB被激活,参与一系列病理和生理过程的调控。本文主要探讨NF-κB在缺血缺氧性脑损伤中扮演的角色。大量实验结果表明脑缺血缺氧损伤发生后NF-κB被激... 在细胞未受刺激时核转录因子κB(NF-κB)保持静息状态,当细胞受到外界信号刺激后NF-κB被激活,参与一系列病理和生理过程的调控。本文主要探讨NF-κB在缺血缺氧性脑损伤中扮演的角色。大量实验结果表明脑缺血缺氧损伤发生后NF-κB被激活并引起细胞死亡,亦有人提出NF-κB活性下降可能加重脑缺血缺氧,诱导神经元死亡,NF-κB活化则为神经保护作用。NF-κB活化到底起损伤还是保护作用仍有争议。 展开更多
关键词 核转录因子κb 活化 缺血缺氧性脑损伤
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核转录因子κB RNA适体重组腺病毒载体的构建
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作者 游兴姬 杨生生 +3 位作者 蔡在龙 张志珍 焦炳华 毛积芳 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期650-653,共4页
目的 :构建核转录因子 κB(NF- κB) RNA适体 (aptamer)重组腺病毒载体 p Adeasy- aptamer,制备重组腺病毒 Ad- ap-tam er并测定其活性。方法 :采用亚磷酸二酯法合成 aptamer c DNA的 6个寡核苷酸片段并拼接完整 ,克隆至 p GEM- 7Z载体... 目的 :构建核转录因子 κB(NF- κB) RNA适体 (aptamer)重组腺病毒载体 p Adeasy- aptamer,制备重组腺病毒 Ad- ap-tam er并测定其活性。方法 :采用亚磷酸二酯法合成 aptamer c DNA的 6个寡核苷酸片段并拼接完整 ,克隆至 p GEM- 7Z载体中 ,经酶切鉴定和测序后把 aptam er c DNA定向插入穿梭质粒 p Shuttle- CMV的多克隆位点上 ,再将重组质粒 p Shuttle- CMV-aptamer与腺病毒载体 p Adeasy在大肠杆菌 BJ5 183中同源重组产生重组腺病毒载体 p Adeasy- aptam er。用脂质体转染p Adeasy- aptam er至 HEK2 93细胞 ,产生有感染能力的重组腺病毒 Ad- aptam er,RT- PCR检测重组腺病毒在感染细胞中的表达 ,并测定其对体外抑制炎症细胞系释放炎症介质 IL- 1β和 IL- 6的影响。 结果 :感染重组腺病毒的细胞具有 aptamer c DNA的表达 ,重组腺病毒能抑制感染细胞炎症介质的释放 ,具有预期的生物学活性。结论 :产生具有生物学活性的重组腺病毒 Ad-aptamer,为下一步基因治疗因 NF- 展开更多
关键词 核转录因子κb RNA适体 重组腺病毒载体 构建 基因治疗
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T淋巴细胞中核转录因子κB在膀胱肿瘤细胞抑制T淋巴细胞功能中的作用
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作者 罗军 靳风烁 +2 位作者 李黔生 江军 高林 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第11期790-793,共4页
目的 :了解T淋巴细胞中核转录因子κB在膀胱肿瘤细胞抑制T淋巴细胞功能中的作用。方法 :1 采用免疫组化法检测与膀胱肿瘤细胞EJ、T2 4、正常移行上皮细胞共培养时T淋巴细胞NF κB。 2 用NF κB激动剂、抑制剂调节T淋巴细胞NF κB活性 ... 目的 :了解T淋巴细胞中核转录因子κB在膀胱肿瘤细胞抑制T淋巴细胞功能中的作用。方法 :1 采用免疫组化法检测与膀胱肿瘤细胞EJ、T2 4、正常移行上皮细胞共培养时T淋巴细胞NF κB。 2 用NF κB激动剂、抑制剂调节T淋巴细胞NF κB活性 ,应用免疫组化法、MTT法 ,了解膀胱肿瘤细胞EJ、T2 4作用下NF κB活性与T淋巴细胞功能的相关性。结果 :1 EJ+T淋巴细胞组、T2 4 +T淋巴细胞组 ,T淋巴细胞胞核染色阳性细胞的百分比与人正常膀胱移行上皮细胞组、空白对照组相比显著降低 (P <0 0 1) ;2 膀胱肿瘤细胞EJ、T2 4作用下T淋巴细胞NF κB胞核染色阳性细胞的百分比与增殖反应 (A值 )呈显著正相关 (Pearson相关系数 =0 74 4 ,P <0 0 0 1,n =6 0 )。结论 :膀胱肿瘤细胞EJ、T2 4可能通过下调NF 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 T淋巴细胞 核转录因子κb
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核转录因子κB抑制子α、β和ε共同稳定下调的HepG2细胞系的建立
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作者 付静 陈瑶 +2 位作者 任一彬 钱尤雯 王红阳 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期998-1003,共6页
目的:利用RNA干扰的方法,构建针对人核转录因子κB抑制子(IκB)α、β和ε的共同干扰载体,转染人肝细胞癌HepG2细胞,建立稳定、共同下调IκBα、IκBβ和IκBε的HepG2细胞系,为后续研究奠定基础。方法:构建3个针对人IκBα基因的干扰载... 目的:利用RNA干扰的方法,构建针对人核转录因子κB抑制子(IκB)α、β和ε的共同干扰载体,转染人肝细胞癌HepG2细胞,建立稳定、共同下调IκBα、IκBβ和IκBε的HepG2细胞系,为后续研究奠定基础。方法:构建3个针对人IκBα基因的干扰载体pcDNATM6.2-miR-IκBα(1,2,3),转染HepG2细胞,在mRNA和蛋白水平检测3个干扰载体对IκBα表达的抑制作用,筛选出抑制效果最好的干扰载体。以同样的方法构建并筛选出分别针对人IκBβ和IκBε基因的最佳干扰载体,通过酶切连接反应将分别针对IκBα、IκBβ和IκBε基因的3个最佳干扰片段串联连入pcDNATM6.2-miR干扰载体中,构建可同时干扰IκBα、IκBβ和IκBε的共同干扰载体pcDNATM6.2-miR-IκBα-IκBβ-IκBε。将共同干扰载体转染HepG2细胞,通过G418筛选,建立IκBα、IκBβ和IκBε的表达共同稳定下调的HepG2细胞系,并以蛋白质印迹法检测IκBα、IκBβ和IκBε的蛋白表达。结果:成功构建共同干扰载体pcDNATM6.2-miR-IκBα-IκBβ-IκBε;Western印迹结果显示,与正常及对照载体pcDNATM6.2-miR-Neg转染的HepG2细胞相比,在稳定转染pcDNATM6.2-miR-IκBα-IκBβ-IκBε的HepG2细胞系中,IκBα、IκBβ和IκBε的表达均稳定下调。结论:成功建立了IκBα、IκBβ和IκBε共同稳定下调的人肝细胞癌HepG2细胞系,为后续研究奠定了基础。 展开更多
关键词 核转录因子κb抑制子 RNA干扰 HEPG2细胞 干扰载体
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斑蝥素阻断核转录因子κB信号通路抑制血管平滑肌细胞增殖和迁移 被引量:9
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作者 邱立强 夏豪 +4 位作者 江洪 李雯静 吴刚 罗强 徐昌武 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2019年第5期503-510,共8页
目的:探讨斑蝥素对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖和迁移的影响,以及从核转录因子κB(NF-κB)信号通路角度探讨其机制。方法:组织块贴壁法获取SD大鼠原代VSMCs,以1 mg/L的脂多糖诱导VSMCs增殖和迁移。实验分4组:对照组、1 mg/L脂多糖刺... 目的:探讨斑蝥素对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖和迁移的影响,以及从核转录因子κB(NF-κB)信号通路角度探讨其机制。方法:组织块贴壁法获取SD大鼠原代VSMCs,以1 mg/L的脂多糖诱导VSMCs增殖和迁移。实验分4组:对照组、1 mg/L脂多糖刺激组、脂多糖刺激后加用5μmol/L斑蝥素组和脂多糖刺激后加用10μmol/L斑蝥素组。观察不同浓度斑蝥素对VSMCs增殖和迁移的影响及从NF-κB信号通路角度探讨其机制。结果:细胞毒性及增殖检测实验显示,斑蝥素浓度在10μmol/L内细胞活性不受影响,脂多糖使用浓度为1 mg/L时VSMCs增殖能力显著提高,但随着脂多糖浓度的进一步提高其增殖能力增速减慢。流式细胞仪检测结果显示,脂多糖可促进VSMCs由S期向G2期转化,而斑蝥素可明显抑制脂多糖的上述作用(P<0.05)。Transwell结果显示,脂多糖可显著诱导细胞迁移(P<0.01),而斑蝥素可呈浓度依赖性抑制脂多糖诱导的细胞迁移(P<0.01)。蛋白免疫印迹法检测显示,脂多糖显著增加磷酸化NF-κB p65水平,同时明显抑制NF-κB抑制蛋白(IκB-α)的表达,而斑蝥素呈浓度依赖性抑制脂多糖的上述作用(P<0.05)。实时荧光定量聚合酶链式反应法和酶联免疫吸附测定结果均显示,脂多糖显著增加促炎因子肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6和单核细胞趋化蛋白-1的表达(P<0.05),而斑蝥素可呈浓度依赖性抑制其表达(P<0.05)。结论:斑蝥素对脂多糖诱导的VSMCs的增殖和迁移具有显著抑制作用,其机制与抑制NF-κB通路并减轻炎症反应有关。 展开更多
关键词 斑蝥素 核转录因子κb信号通路 增殖 迁移
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核转录因子κB在胃癌组织中的表达及临床意义 被引量:3
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作者 陈伟 许建明 汤海涛 《安徽医科大学学报》 CAS 2003年第6期447-449,共3页
目的 通过研究早期、中期、晚期胃癌和不典型增生及慢性胃炎中NF κBp6 5表达 ,探讨胃癌发生、浸润和转移过程中NF κBp6 5表达和临床意义。 方法 收集马鞍山市马钢医院和六安市人民医院 1997~ 2 0 0 2年经术后病理证实的早期、中期... 目的 通过研究早期、中期、晚期胃癌和不典型增生及慢性胃炎中NF κBp6 5表达 ,探讨胃癌发生、浸润和转移过程中NF κBp6 5表达和临床意义。 方法 收集马鞍山市马钢医院和六安市人民医院 1997~ 2 0 0 2年经术后病理证实的早期、中期和晚期胃癌 6 2例作为研究对象 ,同时将 35例不典型增生及慢性胃炎作为对照组 ,进行免疫组织化学染色。检测其中NF κBp6 5表达 ,结合随访资料 ,分析其临床意义。结果 胃癌组中NF κBp6 5的阳性表达率为 6 2 9% ,而对照组的阳性表达率仅为 17 1% ,胃癌组与对照组NF κBp6 5阳性表达率差异有显著性 (P <0 0 1)。胃癌组中 ,早期、中期和晚期胃癌之间NF κBp6 5表达阳性率差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论 胃癌中NF κBp6 5阳性表达与肿瘤的浸润程度 ,淋巴结转移和患者的预后密切相关 ,与肿瘤的发生。 展开更多
关键词 核转录因子κb 胃癌 免疫组织化学 检测 预后 淋巴结转移
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儿童急性淋巴细胞白血病核转录因子κB的表达及其意义 被引量:3
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作者 薛天阳 许伟 +3 位作者 安琪 武怡 徐春萍 张晓艳 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第4期767-771,共5页
为了探讨儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)NF-κB P65蛋白的表达及意义,应用SP免疫组织化学法检测32例ALL患儿和40例非血液病的对照儿童NF-κBP65蛋白的表达。结果表明:32例ALL患儿的NF-κB P65蛋白的阳性表达率为87.50%(28/32),表达定位于... 为了探讨儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)NF-κB P65蛋白的表达及意义,应用SP免疫组织化学法检测32例ALL患儿和40例非血液病的对照儿童NF-κBP65蛋白的表达。结果表明:32例ALL患儿的NF-κB P65蛋白的阳性表达率为87.50%(28/32),表达定位于ALL细胞的胞核及胞浆中,阳性表达率明显高于对照组12.50%(5/40),两者比较有显著性差异(χ2=40.28,p<0.01)。在28例ALL患儿组阳性表达者中,弱阳性表达(+)占10.71%(3/28),阳性表达(++)占42.86%(12/28),强阳性表达(+++)占46.43%(13/28)。正常对照组均为弱阳性表达(5/5),两者表达程度经Ridit分析差异有显著意义(p<0.01)。ALL病程间(初发或复发)、免疫表型间(T系ALL与B系ALL)、各细胞形态学间的表达程度差异均无显著意义(p>0.05,四格表精确概率法)。结论:NF-κB P65蛋白表达于儿童ALL细胞中,抑制NF-κB信号传导途径可能在儿童ALL治疗中有重大价值,这为临床寻求以NF-κB为靶点的治疗手段提供了科学依据。 展开更多
关键词 转录因子-κb 转录因子-κb P65蛋白 急性淋巴细胞白血病
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