枯草芽孢杆菌XF-1中脱乙酰几丁质酶在大肠杆菌中的表达及其抑菌活性 被引量：6

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作者 赵静 熊国如 +3 位作者 王志远 毛自朝 吴毅歆 何月秋 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2011年第4期504-509,共6页

根据脱乙酰几丁质酶同源基因序列设计引物,扩增、克隆和测序了枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis菌株XF-1的脱乙酰几丁质酶基因(csn)。该基因编码区为834bp,编码由277个氨基酸组成的约30kD的蛋白质,其基因序列与枯草芽孢杆菌菌株B168的脱... 根据脱乙酰几丁质酶同源基因序列设计引物,扩增、克隆和测序了枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis菌株XF-1的脱乙酰几丁质酶基因(csn)。该基因编码区为834bp,编码由277个氨基酸组成的约30kD的蛋白质,其基因序列与枯草芽孢杆菌菌株B168的脱乙酰几丁质酶基因的相似性达到99%,氨基酸序列相似性为98%,在第19、47、60、256和257位的氨基酸发生了变化,分别由异亮氨酸代替了菌株B168脱乙酰几丁质酶中的甲硫氨酸、缬氨酸代替了谷氨酸、苏氨酸代替了异亮氨酸、天冬氨酸代替了谷氨酸、赖氨酸代替了天冬酰胺。菌株XF-1对稻瘟病菌Magnaporthe oryzae和芸薹根肿菌Plasmodiophora brassicae有抑制作用,而菌株B168没有。菌株XF-1和B168的csn基因在大肠杆菌Escherichia coli中的表达产物均具有脱乙酰几丁质酶活性,但前者的表达产物对稻瘟病菌及芸薹根肿菌具有抑制作用,而后者没有。表明脱乙酰几丁质酶是XF-1抑制根肿病作用机制之一,且上述5个氨基酸替代可能与抑菌机制有关。 展开更多

关键词 枯草芽孢杆菌xf-1 脱乙酰几丁质酶 根肿菌 抑菌作用

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枯草芽孢杆菌XF-1的碳水化合物活性酶类(CAZymes)蛋白预测与遗传关系分析 被引量：8

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作者 韩长志 祝友朋 许僖 《河南师范大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2018年第3期95-100,共6页

枯草芽孢杆菌XF-1对多种植物病原菌具有较好的抑制作用,是农业生产上非常重要的生防菌之一.碳水化合物活性酶类蛋白(CAZymes)作为植物病原真菌、细菌中重要的蛋白,在其生长和发育过程中发挥着重要作用.基于前期获得的枯草芽孢杆菌XF-1中... 枯草芽孢杆菌XF-1对多种植物病原菌具有较好的抑制作用,是农业生产上非常重要的生防菌之一.碳水化合物活性酶类蛋白(CAZymes)作为植物病原真菌、细菌中重要的蛋白,在其生长和发育过程中发挥着重要作用.基于前期获得的枯草芽孢杆菌XF-1中104个分泌蛋白基本序列信息,利用CAT预测程序对该菌中的CAZymes蛋白进行预测分析,明确其含有CAZymes蛋白的数量是58个,上述蛋白可以分为主要类别和复合类别两大类,前者包括26个GHs、21个CBMs以及2个CEs、3个PLs、2个GTs;后者则包括4个复合蛋白类型GH/CBM.该研究有效地实现了枯草芽孢杆菌XF-1中CAZymes的预测,为进一步开展其功能研究打下坚实的理论基础. 展开更多

关键词 枯草芽孢杆菌xf-1 碳水化合物活性酶蛋白 预测程序 遗传关系

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枯草芽孢杆菌对黄曲霉毒素B_(1)引起羊人工瘤胃异常发酵的改善作用

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作者 张照杰 韩一铭 +9 位作者 高宇凤 任晓丽 宋超 李志娟 李洪政 石冬梅 贾雨婷 姬中豪 皇甫和平 王金明 《动物营养学报》 北大核心 2025年第2期1260-1270,共11页

本试验旨在探究添加不同剂量枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)对黄曲霉毒素B_(1)(AFB_(1))致羊人工瘤胃异常发酵的影响。试验以全混合日粮(TMR)为发酵底物,采用单因素试验设计,分为7个组,包括对照组(NC组)、AFB_(1)组和5个试验组,其中N... 本试验旨在探究添加不同剂量枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)对黄曲霉毒素B_(1)(AFB_(1))致羊人工瘤胃异常发酵的影响。试验以全混合日粮(TMR)为发酵底物,采用单因素试验设计,分为7个组,包括对照组(NC组)、AFB_(1)组和5个试验组,其中NC组添加1 mL甲醇,AFB_(1)组添加1 mL 10μg/mL的AFB_(1),试验组分别同时添加1 mL 10μg/mL的AFB_(1)和0.01%、0.03%、0.06%、0.12%、0.24%的枯草芽孢杆菌制剂,每组3个重复。试验当天随机收集3只屠宰羊的新鲜瘤胃液,按照试验设计在39℃条件下培养4、8、12、24和48 h,记录pH和产气量,测定氨态氮(NH_(3)-N)、微生物蛋白(MCP)和挥发性脂肪酸(VFA)含量,并利用荧光定量PCR检测微生物区系。结果表明:1)发酵24 h时,AFB_(1)组产气量与NC组相比显著降低(P<0.05),0.03%组产气量与AFB_(1)组相比极显著升高(P<0.01)。2)发酵24 h时,各组发酵液pH均无显著差异(P>0.05)。AFB_(1)组NH_(3)-N和MCP含量低于NC组,但无显著差异(P>0.05);0.03%组NH_(3)-N和MCP含量与AFB_(1)组相比极显著升高(P<0.01)。3)发酵24 h时,AFB_(1)组发酵液各VFA含量在数值上均低于NC组,其中异丁酸含量与NC组相比显著降低(P<0.05);0.03%组乙酸、丁酸和总挥发性脂肪酸(TVFA)与AFB_(1)组相比极显著提高(P<0.01),丙酸和异丁酸含量与AFB_(1)组相比显著提高(P<0.05)。4)与NC组相比,AFB_(1)组产琥珀酸丝状杆菌(Fibrobacter succinogenes)、嗜淀粉瘤胃杆菌(Ruminobacter amylophilus)和原虫相对丰度极显著降低(P<0.01),溶纤维丁酸弧菌(Butyrivibrio fibrisolvens)和栖瘤胃普雷沃氏菌(Prevotella ruminicola)相对丰度显著降低(P<0.05)。与AFB_(1)组相比,0.03%组白色瘤胃球菌(Ruminococcus albus)、黄色瘤胃球菌(Ruminococcus flavefaciens)、栖瘤胃普雷沃氏菌和产甲烷菌相对丰度显著提高(P<0.05),溶纤维丁酸弧菌、嗜淀粉瘤胃杆菌和原虫相对丰度极显著提高(P<0.01)。综上所述,AFB_(1)会降低体外发酵瘤胃产气量以及NH_(3)-N、MCP和VFA含量,同时抑制瘤胃微生物活性;饲粮中添加0.03%枯草芽孢杆菌可以有效缓解AFB_(1)致羊人工瘤胃发酵的抑制作用,促进瘤胃发酵。 展开更多

关键词 枯草芽孢杆菌 黄曲霉毒素B_(1) 瘤胃 体外发酵 微生物区系

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枯草芽孢杆菌YZ-1突变体库构建与产表面活性素优势菌株筛选

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作者 万莉 何月秋 +5 位作者 谢鑫欣 刘迎龙 何鹏搏 Shahzad MUNIR 吴毅歆 何鹏飞 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第11期2475-2484,共10页

【目的】拟通过构建高效杀虫枯草芽孢杆菌YZ-1的转座突变体库,从中筛选出高产表面活性素的突变体菌株,为后续YZ-1的表面活性素合成调控机制解析和开发利用提供前期材料。【方法】利用携带转座子TnYLB-1和温敏型复制蛋白的穿梭载体pMarA... 【目的】拟通过构建高效杀虫枯草芽孢杆菌YZ-1的转座突变体库,从中筛选出高产表面活性素的突变体菌株,为后续YZ-1的表面活性素合成调控机制解析和开发利用提供前期材料。【方法】利用携带转座子TnYLB-1和温敏型复制蛋白的穿梭载体pMarA转化YZ-1,通过50℃高温诱导转座子转座,并对转座突变体进行抗性培养复筛,构建YZ-1菌株的转座突变体库。组合使用血平板法初筛,溴百里香酚蓝比色法复筛及HPLC定量检测,从突变体库中筛选表面活性素合成显著增强的突变体。【结果】通过自然转化将pMarA质粒导入枯草芽孢杆菌YZ-1中,获得含有3000株转座突变子的YZ-1突变体库,从中筛选出11株表面活性素合成增强的候选菌株。HPLC检测显示与YZ-1野生型相比,表面活性素合成量增强及相近的突变体有5株(M1、M6、M7、M8、M9),显著下降的有6株(M2、M3、M4、M5、M10、M11),其中表面活性素产量最高的为M8突变体(282.4 mg/L),较野生型增加13.7%,最低的为M2菌株(47.53 mg/L),较野生型下降80.9%。【结论】增设抗性复筛培养可提高YZ-1突变体库的正确率。基于血平板培养和溴百里香酚蓝比色的高通量筛选可初步筛选脂肽类产物显著变化的突变体菌株。 展开更多

关键词 枯草芽孢杆菌 表面活性素 TnYLB-1转座子 pMarA质粒 Himar1转座元件

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枯草芽孢杆菌LTA诱导绵羊瘤胃上皮细胞SBD-1表达的影响研究

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作者 李鑫阳 齐盟 +1 位作者 刘加庆 杨银凤 《当代畜禽养殖业》 2024年第5期7-12,共6页

为探究枯草芽孢杆菌的脂磷壁酸(LTA)对绵羊瘤胃上皮细胞(ORECs)中绵羊β-防御素-1(SBD-1)表达的影响,本试验使用不同浓度(0、10、20、30、40和50μg/mL)的枯草芽孢杆菌LTA刺激ORECs 8 h,并通过酶联免疫吸附试验(ELISA)和荧光定量PCR试验... 为探究枯草芽孢杆菌的脂磷壁酸(LTA)对绵羊瘤胃上皮细胞(ORECs)中绵羊β-防御素-1(SBD-1)表达的影响,本试验使用不同浓度(0、10、20、30、40和50μg/mL)的枯草芽孢杆菌LTA刺激ORECs 8 h,并通过酶联免疫吸附试验(ELISA)和荧光定量PCR试验(qPCR)分别检测ORECs SBD-1蛋白和mRNA的表达量,确定最佳刺激浓度;再用最佳刺激浓度的枯草芽孢杆菌LTA分别刺激ORECs不同时间(0、2、4、8、12和24 h),采用qPCR和ELISA方法检测SBD-1的mRNA和蛋白表达量,确定最佳刺激时间。结果表明:不同条件下的枯草芽孢杆菌LTA均可使ORECs中SBD-1的表达量上调,其中在刺激浓度为10μg/mL与刺激时间为8 h的情况下,SBD-1的表达量最高,且与对照组呈极显著差异(P<0.01);并且不同条件下的枯草芽孢杆菌LTA对ORECs的刺激均不产生细胞毒性作用。这说明枯草芽孢杆菌LTA可诱导ORECs中SBD-1表达量增加,且最佳诱导浓度和时间分别为10μg/mL和8 h。本研究为枯草芽孢杆菌LTA诱导调节SBD-1机制的研究提供理论依据。 展开更多

关键词 绵羊瘤胃上皮细胞 枯草芽孢杆菌脂磷壁酸 β-防御素-1 诱导表达 荧光定量PCR

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多粘类芽孢杆菌BRF-1和枯草芽孢杆菌BRF-2对黄瓜和番茄枯萎病的防治效果 被引量：70

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作者 陈雪丽 王光华 +1 位作者 金剑 吕宝林 《中国生态农业学报》 CAS CSCD 2008年第2期446-450,共5页

采用室内培养方法，对生防细菌多粘类芽孢杆菌BRF-1和枯草芽孢杆菌BRF-2不同稀释倍数的代谢产物抑制黄瓜尖孢镰刀菌、番茄枯萎病菌分生孢子萌发和菌丝生长的试验结果表明，当两菌株代谢产物稀释5倍时，对分生孢子萌发的抑制率达到80％... 采用室内培养方法，对生防细菌多粘类芽孢杆菌BRF-1和枯草芽孢杆菌BRF-2不同稀释倍数的代谢产物抑制黄瓜尖孢镰刀菌、番茄枯萎病菌分生孢子萌发和菌丝生长的试验结果表明，当两菌株代谢产物稀释5倍时，对分生孢子萌发的抑制率达到80％以上；两菌株代谢产物在稀释2倍和5倍时，对2种病原真菌菌丝生长的抑制率在40％-80％之间，与对照差异极显著（P〈0．01）。盆栽试验表明，BRF-1和BRF-2生防细菌菌悬液及其无菌代谢物对黄瓜和番茄枯萎病不仅具有较好的防治效果，而且具有明显的促进生长作用。 展开更多

关键词 多粘类芽孢杆菌BRF-1 枯草芽孢杆菌BRF-2 黄瓜枯萎病 番茄枯萎病 生物量 生物防治

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利用转座子TnYLB-1构建枯草芽孢杆菌的突变体文库 被引量：17

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作者 马欣 刘俊 +2 位作者 乔俊卿 伍辉军 高学文 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期77-81,共5页

为了鉴定枯草芽孢杆菌定殖和促进植物生长相关基因,用携带转座子TnYLB-1的穿梭载体pMarA转化枯草芽孢杆菌OKB105菌株。高温诱变条件下,筛选了2 000个转座子插入突变的单克隆,构建了OKB105菌株的突变体文库。对随机挑选的15个突变体采用... 为了鉴定枯草芽孢杆菌定殖和促进植物生长相关基因,用携带转座子TnYLB-1的穿梭载体pMarA转化枯草芽孢杆菌OKB105菌株。高温诱变条件下,筛选了2 000个转座子插入突变的单克隆,构建了OKB105菌株的突变体文库。对随机挑选的15个突变体采用PCR及Southern杂交验证,结果表明:转座子TnYLB-1以单拷贝、随机方式插入到OKB105菌株的染色体上。 展开更多

关键词 枯草芽孢杆菌OKB105 TnYLB-1转座子 pMarA质粒 Himar1转座元件 随机诱变

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枯草芽孢杆菌对绵羊瘤胃上皮细胞β-防御素-1表达的影响 被引量：19

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作者 王佩 范燕茹 +1 位作者 金鑫 杨银凤 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期760-767,共8页

选用益生枯草芽孢杆菌研究其对体外培养的绵羊瘤胃上皮细胞β-防御素表达的调节作用。首先,在体外成功培养绵羊瘤胃上皮细胞,然后用枯草芽孢杆菌对体外培养的绵羊瘤胃上皮细胞进行不同浓度、不同时间的刺激,利用荧光定量PCR技术(Real-ti... 选用益生枯草芽孢杆菌研究其对体外培养的绵羊瘤胃上皮细胞β-防御素表达的调节作用。首先,在体外成功培养绵羊瘤胃上皮细胞,然后用枯草芽孢杆菌对体外培养的绵羊瘤胃上皮细胞进行不同浓度、不同时间的刺激,利用荧光定量PCR技术(Real-time fluorescence quantitative PCR,RT-PCR)从mRNA水平检测刺激后上皮细胞中绵羊β-防御素-1(Sheep beta-defensin-1,SBD-1)基因表达水平的差异。结果表明:当菌液浓度为1010 cfu·mL-1刺激上皮细胞8h后,SBD-1的表达量达到最高;不同的菌液浓度诱导下SBD-1的表达量均有显著增加,109、1010、1011 cfu·mL-1菌液浓度刺激下,SBD-1的表达量与空白相比差异极显著(P<0.01)。结果表明,枯草芽孢杆菌能够诱导绵羊瘤胃上皮细胞内SBD-1基因的表达。 展开更多

关键词 β-防御素-1 瘤胃上皮细胞 枯草芽孢杆菌 荧光定量PCR

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枯草芽孢杆菌Natto3的筛选及其降解黄曲霉毒素B_1的初步研究 被引量：11

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作者 张盼 李培武 +5 位作者 万霞 江木兰 龚阳敏 胡传炯 丁小霞 张银波 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期234-239,245,共7页

从可食用的纳豆中筛选出一株能够高效降解黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,简称AFB1)的细菌,该细菌的发酵上清液经浓缩后制成的粗酶液对AFB1降解率达到91.4%。对该菌进行了分类地位鉴定并初步研究了粗酶液的酶学性质。结果表明,该菌经生理生... 从可食用的纳豆中筛选出一株能够高效降解黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,简称AFB1)的细菌,该细菌的发酵上清液经浓缩后制成的粗酶液对AFB1降解率达到91.4%。对该菌进行了分类地位鉴定并初步研究了粗酶液的酶学性质。结果表明,该菌经生理生化和16S r DNA序列比对鉴定为枯草芽孢杆菌,并命名为Natto3。Natto3的粗酶液降解AFB1的最适培养时间为72h,最适反应温度为37℃,最适p H值是8.5,Zn2+、Mn2+、Mg2+、Cu2+、Li+五种金属离子均会不同程度地抑制降解活性。此外,将该粗酶液添加在被黄曲霉毒素高度污染的花生样品中进行脱毒实验,可使花生中AFB1的浓度从192μg/kg降至43μg/kg。 展开更多

关键词 纳豆 枯草芽孢杆菌 降解 AFB1

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枯草芽孢杆菌R31和TR21菌株防治香蕉枯萎病田间药效试验 被引量：13

10

作者 黎永坚 程萍 +1 位作者 喻国辉 陈燕红 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第23期70-72,共3页

研究了枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)R31菌株和TR21菌株单独及混合使用防治农科1号香蕉(Musa AAA Cavendishsubgroup cv.Nongke No.1)枯萎病的田间效果。收获期结束后统计的结果表明,R31处理区香蕉枯萎病发病率为4.05%,TR21处理区发... 研究了枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)R31菌株和TR21菌株单独及混合使用防治农科1号香蕉(Musa AAA Cavendishsubgroup cv.Nongke No.1)枯萎病的田间效果。收获期结束后统计的结果表明,R31处理区香蕉枯萎病发病率为4.05%,TR21处理区发病率为8.70%,TR21+R31(V:V=1:1)处理区发病率4.59%,对照区发病率21.88%,防效分别为81.86%、61.09%和79.45%;折算每667m2经济损失率比对照分别减少34.46%、25.90%、32.50%。研究结果表明两株枯草芽胞杆菌具有较好的应用前景。 展开更多

关键词 香蕉枯萎病 生物防治 枯草芽孢杆菌 农科1号品系香蕉

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泰山枯草芽孢杆菌的分离鉴定及其对黄曲霉毒素B_1的降解研究 被引量：15

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作者 孙玲玉 李超 +1 位作者 郝海玉 柴同杰 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第8期246-250,共5页

本试验旨在从泰山土壤中筛选出具有降解黄曲霉毒素B1(AFB1)作用的枯草芽孢杆菌,经16SrRNA基因测序鉴定为枯草芽孢杆菌,最终确定1株具有较高降解作用的枯草芽孢杆菌,命名为泰山枯草芽孢杆菌,并利用该菌株对AFB1进行了降解率、活性组分、... 本试验旨在从泰山土壤中筛选出具有降解黄曲霉毒素B1(AFB1)作用的枯草芽孢杆菌,经16SrRNA基因测序鉴定为枯草芽孢杆菌,最终确定1株具有较高降解作用的枯草芽孢杆菌,命名为泰山枯草芽孢杆菌,并利用该菌株对AFB1进行了降解率、活性组分、性质的确定及降解饲料中AFB1效果的研究。结果表明,泰山枯草芽孢杆菌对AFB1的降解率达90.28%,其中,泰山枯草芽孢杆菌发酵后的上清液对AFB1的降解活性最高,确定发酵后的上清液中存在解毒活性组分;对解毒活性物质进行加热和蛋白酶K变性处理后,解毒活性显著降低,表明起解毒作用的活性物质是其分泌的一种胞外酶;应用性试验进一步证明泰山枯草芽孢杆菌能降解霉变饲料中的AFB1,可在饲料或食品行业应用。 展开更多

关键词 枯草芽孢杆菌 分离鉴定 AFB1 发酵上清液 降解酶

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生防内生枯草芽孢杆菌Jaas ed1在西瓜植株内的定殖能力检测 被引量：5

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作者 王卿 林玲 +1 位作者 罗楚平 邓晟 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2015年第5期2079-2085,共7页

分别对枯草芽孢杆菌Jaas ed1进行利福平(Rif)抗性标记和绿色荧光蛋白(GFP)标记,获得Rif抗性标记的菌株Jaas ed1R及GFP标记的菌株Jaas ed1-GFP,并初步研究Jaas ed1在西瓜植株中的定殖能力。定殖结果表明,在灌根接种Jaas ed1R后的35 d内... 分别对枯草芽孢杆菌Jaas ed1进行利福平(Rif)抗性标记和绿色荧光蛋白(GFP)标记,获得Rif抗性标记的菌株Jaas ed1R及GFP标记的菌株Jaas ed1-GFP,并初步研究Jaas ed1在西瓜植株中的定殖能力。定殖结果表明,在灌根接种Jaas ed1R后的35 d内能在西瓜苗根部检测到Jaas ed1R,20 d内能在茎部检测到Jaas ed1R;并且在根部定殖的数量显著大于茎部,接种后3 d根部Jaas ed1R的数量为1.62×104cfu·g-1鲜重,茎部为2.95×102cfu·g-1鲜重。灌根接种Jaas ed1-GFP后的第3天,在荧光显微镜下观察到西瓜苗根部存在大量的Jaas ed1-GFP,在激光共聚焦显微镜观察到西瓜苗茎内的Jaas ed1-GFP分布集中在维管束中。说明内生枯草芽孢杆菌Jaas ed1能够在西瓜植株体内定殖,能够从土壤中进入西瓜根部组织,并且能够侵入到茎部微管束组织中,从而在整个植株体内转移。 展开更多

关键词 枯草芽孢杆菌Jaas ed1 内生细菌 利福平 绿色荧光蛋白 定殖 维管束

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枯草芽孢杆菌发酵制剂对饲喂含AFB1饲料肉鸡血清生化指标和肝功能的影响 被引量：5

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作者 张桂枝 曹艳芳 +4 位作者 靳双星 孙俊伟 李新正 徐耀辉 曹素芳 《中国家禽》 北大核心 2019年第23期31-35,共5页

本试验旨在探讨枯草芽孢杆菌发酵制剂对饲喂含AFB1饲料肉鸡血清生化指标和肝功能的影响。选择1日龄健康AA+肉仔鸡180只,随机分为3组,每组5个重复,每个重复12只鸡。Ⅰ组饲喂基础日粮,Ⅱ组在基础日粮中添加100μg/kg AFB1,Ⅲ组在Ⅱ组基础... 本试验旨在探讨枯草芽孢杆菌发酵制剂对饲喂含AFB1饲料肉鸡血清生化指标和肝功能的影响。选择1日龄健康AA+肉仔鸡180只,随机分为3组,每组5个重复,每个重复12只鸡。Ⅰ组饲喂基础日粮,Ⅱ组在基础日粮中添加100μg/kg AFB1,Ⅲ组在Ⅱ组基础上添加0.1%枯草芽孢杆菌发酵制剂。结果表明:Ⅱ组出栏体重、采食量显著下降、料重比显著升高,Ⅲ组与Ⅰ组无显著差异(P>0.05);Ⅱ组肝脏的相对质量最高、Ⅰ组最低,Ⅲ组显著低于Ⅱ组(P<0.05);肝脏和粪便中AFB1残留量Ⅱ组最高、Ⅰ组最低,Ⅲ组显著低于Ⅱ组(P<0.05);血清中谷丙转氨酶、谷草转氨酶和碱性磷酸酶的活性Ⅱ组最高、Ⅰ组最低,Ⅲ组显著低于Ⅱ组(P<0.05);血清总蛋白、白蛋白和球蛋白含量Ⅱ组显著低于Ⅰ组和Ⅲ组(P<0.05),Ⅰ组和Ⅲ组无显著差异(P>0.05)。结果表明AFB1可引起肉鸡出栏体重降低、采食量降低、料重比增加;增加肝脏的相对质量及肝脏和粪便中AFB1残留量,升高血清中谷丙转氨酶、谷草转氨酶和碱性磷酸酶的活性,降低血清总蛋白、白蛋白和球蛋白含量;枯草芽孢杆菌发酵制剂能够在一定程度上改善AFB1对机体的损害和减少其在肝脏中残留。 展开更多

关键词 AFB1 枯草芽孢杆菌发酵制剂 肉鸡 血清生化指标 肝功能

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Cry1 Ac基因载体构建及其在枯草芽孢杆菌中的杀虫活性表达 被引量：2

14

作者 刘济宁 刘贤进 +1 位作者 余向阳 彭正强 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期342-346,共5页

根据苏云金芽孢杆菌BacillusthuringiensisHD_73基因Cry1Ac和枯草芽孢杆菌Bacillussubtilis木糖诱导型启动子PxylR序列,分别设计2对特异引物Cry1AcFR和PxyFR,扩增获得了完整的启动子PxylR和Cry1Ac基因序列,进一步以上述产物混合物为模板... 根据苏云金芽孢杆菌BacillusthuringiensisHD_73基因Cry1Ac和枯草芽孢杆菌Bacillussubtilis木糖诱导型启动子PxylR序列,分别设计2对特异引物Cry1AcFR和PxyFR,扩增获得了完整的启动子PxylR和Cry1Ac基因序列,进一步以上述产物混合物为模板,以PxyFCry1AcR作引物进行重迭PCR,获得了载体PxylR_Cry1Ac,经SphⅠ和BamHⅠ完全酶切后,将PxylR_Cry1Ac插入大肠杆菌_苏云金芽孢杆菌穿梭载体pHT315,重组表达质粒pCry1Ac315转化枯草芽孢杆菌感受态细胞。工程菌株质粒酶切电泳分析、SDS_PAGE电泳分析和杀虫生物活性测定结果证实了Cry1Ac基因的导入及其在枯草芽孢杆菌JAAS01D中的有效表达。 展开更多

关键词 苏云金芽孢杆菌 枯草芽孢杆菌 重迭PCR CRY1AC基因 杀虫活性

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紫外诱变枯草芽孢杆菌选育葡萄糖-1-磷酸高产菌株 被引量：4

15

作者 许向华 史军花 +1 位作者 赵国罡 郑鸿雁 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2011年第9期21-23,共3页

对出发菌株进行紫外诱变以获得葡萄糖-1-磷酸产量高且遗传稳定性好的枯草芽孢杆菌菌株。以葡萄糖-1-磷酸的发酵产量为考察指标,采用HPLC-MS检测方法,对出发菌株Bacillus sublitis XH-13进行三轮紫外诱变,并对获得的高产菌株连续传代6次... 对出发菌株进行紫外诱变以获得葡萄糖-1-磷酸产量高且遗传稳定性好的枯草芽孢杆菌菌株。以葡萄糖-1-磷酸的发酵产量为考察指标,采用HPLC-MS检测方法,对出发菌株Bacillus sublitis XH-13进行三轮紫外诱变,并对获得的高产菌株连续传代6次。结果表明,枯草芽孢杆菌突变菌株UV3-8的葡萄糖-1-磷酸产量最高,达到6.85 g/L,是出发菌株产量的1.54倍,且遗传稳定性好。菌株Bacillussubtilis XH-13_UV3-8的营养简单、葡萄糖-1-磷酸产量高且遗传稳定性好,具有产业化应用前景。 展开更多

关键词 紫外诱变 葡萄糖-1-磷酸 枯草芽孢杆菌

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降解AFB_(1)的枯草芽孢杆菌S1分离与鉴定 被引量：2

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作者 孙向丽 刘宇翾 +4 位作者 时子瑶 温长印 田亚东 康相涛 王彦彬 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第12期1554-1564,共11页

【目的】筛选出能够高效降解黄曲霉毒素(aflatoxin, AF)的菌株,并对其降解活性及残留毒性进行检测,以期为黄曲霉毒素B1(alflatoxin B_(1),AFB_(1))污染防治提供参考。【方法】采集耗牛、绵羊等草食性动物粪便和养殖场霉变饲料,以AFB_(1... 【目的】筛选出能够高效降解黄曲霉毒素(aflatoxin, AF)的菌株,并对其降解活性及残留毒性进行检测,以期为黄曲霉毒素B1(alflatoxin B_(1),AFB_(1))污染防治提供参考。【方法】采集耗牛、绵羊等草食性动物粪便和养殖场霉变饲料,以AFB_(1)的结构类似物香豆素为唯一碳源筛选降解AFB_(1)效率最高的菌株,并对其进行形态学、生理生化和16S rDNA鉴定。取AFB_(1)与适量筛选菌株的发酵液混合,使AFB_(1)的浓度为1μg/mL,37℃、150 r/min培养,测定培养不同时间AFB_(1)降解率;应用差速离心法分别制取上清液、菌悬液和菌体,将菌体超声裂解后制得胞内液,测定不同组分对AFB_(1)的降解率;对上清液分别进行蛋白酶K、蛋白酶K+SDS和热处理,检测处理后上清液AFB_(1)降解率;分别用不同浓度的饱和硫酸铵沉淀处理上清液,检测AFB_(1)降解率;应用7 ku透析袋对上清液进行浓缩,检测AFB_(1)降解率,从而判断菌株活性成分的性质和分布。将鸡肝细胞分为AFB_(1)组、AFB_(1)-菌株组、菌株组和空白对照组,用实时荧光定量PCR检测各组鸡肝细胞中白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosisi factor alpha, TNF-α)和Bcl-2-associated X蛋白(Bax)基因的相对表达量。【结果】经初筛和复筛,从编号为S1的绵羊粪便样品中分离出1株菌株,其降解AFB_(1)的活性最高,降解率可达60.36%。菌株S1在LB固体培养基上培养12 h,可观察到淡黄色不透明菌落,表面光滑,有隆起,镜检革兰氏染色呈阳性,杆状。16S rDNA基因进行PCR扩增并进一步测序分析,其序列与LC55966.1的同源性为100%。综合16 S rDNA序列分析和生理生化结果鉴定该菌为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。该菌发酵液与AFB_(1)(1μg/mL)反应4、12、24、48和72 h,降解率分别达到10.98%、25.36%、46.24%和52.65%和80.84%。上清液AFB_(1)降解率显著高于菌悬液和胞内液(P<0.05)。热处理后,上清液的AFB_(1)降解活性降低,而经蛋白酶K和SDS处理后降解活性基本丧失。用不同浓度饱和硫酸铵处理的上清液AFB_(1)降解率差异不显著(P>0.05),而经透析浓缩后的上清液AFB_(1)降解率显著高于硫酸铵处理的上清液沉淀蛋白(P<0.05)。在鸡胚胎肝脏原代细胞上,与AFB_(1)组相比,AFB_(1)经枯草芽孢杆菌S1降解后诱导IL-6、TNF-α以及Bax的表达量均显著降低(P<0.05)。【结论】筛选到1株枯草芽孢杆菌S1,其具有较高的降解AFB_(1)的活性,其降解活性主要来自于培养液上清中的蛋白质;AFB_(1)经降解后其毒素显著降低。 展开更多

关键词 黄曲霉毒素B1 枯草芽孢杆菌 毒素降解

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橡胶树枯草芽孢杆菌Czk1抑菌活性物质的理化性质 被引量：5

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作者 樊兰艳 贺春萍 +4 位作者 梁艳琼 郑肖兰 吴伟怀 李锐 郑服丛 《热带生物学报》 2013年第1期36-44,55,共10页

采用杯碟法和生长速率法,对橡胶树枯草芽孢杆菌菌株Czk1发酵液中活性物质进行了初步定位。结果表明:活性物质属于胞外分泌型代谢产物,存在于发酵上清液中。理化性质的研究表明,其抗菌物质表现出耐高温,不耐强酸碱,对紫外线和蛋白酶K不敏... 采用杯碟法和生长速率法,对橡胶树枯草芽孢杆菌菌株Czk1发酵液中活性物质进行了初步定位。结果表明:活性物质属于胞外分泌型代谢产物,存在于发酵上清液中。理化性质的研究表明,其抗菌物质表现出耐高温,不耐强酸碱,对紫外线和蛋白酶K不敏感,以及对5种常见的金属离子溶液、有机溶剂具有不敏感的特性;采用酸沉淀后甲醇抽提的方法可提取该活性物质。Czk1培养条件的单因子实验结果表明,YPD培养基作为该菌株的发酵液培养基,初始pH值为7.0,以7%接种量接种,摇床培养(28℃,180r·min-1)3d,Czk1表现出对病原菌最佳的拮抗活性。 展开更多

关键词 枯草芽孢杆菌 Czk1 活性物质 生物学性质 橡胶树

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应用比色法检测枯草芽孢杆菌变异菌株中1-脱氧野尻霉素含量 被引量：2

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作者 龙玲 杨艳 朱乃硕 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期187-192,共6页

为寻找测定枯草芽孢杆菌黑色变种突变株Bacillus subtilis var.niger-231(B-231)的发酵液中1-脱氧野尻霉素(1-Deoxynojirimycin,DNJ)的新方法并提高其产发酵液中DNJ的含量。在有铜离子的存在下,DNJ与二硫化碳反应,用有机溶剂对产物萃取... 为寻找测定枯草芽孢杆菌黑色变种突变株Bacillus subtilis var.niger-231(B-231)的发酵液中1-脱氧野尻霉素(1-Deoxynojirimycin,DNJ)的新方法并提高其产发酵液中DNJ的含量。在有铜离子的存在下,DNJ与二硫化碳反应,用有机溶剂对产物萃取后在440 nm进行光度测定,得到DNJ含量。再采用紫外诱变方法处理突变株B-231。绘制了检测DNJ标准品的标准曲线,对测定DNJ的新方法做了精密度、灵敏度、准确度以及产物的稳定性的探讨,设计正交试验优化了反应条件,并将此方法运用到细菌发酵液中DNJ含量的测定中,通过遗传诱变手段处理原始细菌B-231,最终筛选到一株高产DNJ的菌株,命名为B.subtilis var.niger-431(B-431),DNJ含量达87.3 mg/L,其产生DNJ的量较原始菌株原突变株提高了4.2倍。首次提出了一种快速测定细菌发酵液中的1-脱氧野尻霉素的新方法,紫外诱变手段使细菌产生DNJ的能力有较大提高。 展开更多

关键词 枯草芽孢杆菌 1-脱氧野尻霉素 Α-糖苷酶抑制剂 紫外诱变

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枯草芽孢杆菌BI1-1产抗白念珠菌物质培养条件的优化

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作者 王德培 魏征 +1 位作者 刘佳 周婷 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期678-682,共5页

目的对发酵产抗白念珠菌物质的培养基及培养条件进行优化,使抗菌物质的产量得到提高。方法以基本培养基为基础,利用单因素实验,确定碳氮源。采用Plackett-Burman设计对培养条件中相关影响因素的效应进行评价并筛选出重要的影响因素。然... 目的对发酵产抗白念珠菌物质的培养基及培养条件进行优化,使抗菌物质的产量得到提高。方法以基本培养基为基础,利用单因素实验,确定碳氮源。采用Plackett-Burman设计对培养条件中相关影响因素的效应进行评价并筛选出重要的影响因素。然后用Box-Behnken设计及响应面分析确定了重要影响因素的最佳条件。结果优化后的碳源为蔗糖4%,氮源为硫酸铵0.5%,发酵条件为pH值7.53,温度30.48℃,培养时间64.4h。结论优化后的抗菌抑菌圈直径达到40.00mm,比优化前的18.25mm提高了119.2%。 展开更多

关键词 枯草芽孢杆菌BI1-1 白念珠菌 单因素 PLACKETT-BURMAN设计 BOX-BEHNKEN设计

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假单胞菌YT3和枯草芽孢杆菌DZ1的发酵罐生长条件优化

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作者 马海林 井大炜 +4 位作者 王爱杰 丁延芹 刘方春 杜振宇 马丙尧 《生物灾害科学》 2013年第3期257-261,共5页

假单胞菌(Pseudomonas sp.)YT3和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)DZ1是从植物根际土壤筛选出的具有应用潜力的植物根际促生细菌。研究发酵罐中接种量、转速、通气量等因素对YT3菌量以及对DZ1芽孢率、菌量的影响。结果表明:不同的接种... 假单胞菌(Pseudomonas sp.)YT3和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)DZ1是从植物根际土壤筛选出的具有应用潜力的植物根际促生细菌。研究发酵罐中接种量、转速、通气量等因素对YT3菌量以及对DZ1芽孢率、菌量的影响。结果表明:不同的接种量、转速和通气量对Pseudomonas sp.YT3的活菌数、Bacillus subtilis DZ1的活菌数及芽孢率均有显著影响。1 0%的接种量、2 m 3/h的通气量对YT3和DZ1菌株的作用效果与15%的接种量、3 m 3/h相当,但显著高于5%的接种量和1 m 3/h。当转速为200 r/min时,YT3具有最高的活菌数,DZ1具有最高的活菌数和芽孢率。综合分析认为,YT3和DZ1发酵罐的最佳条件为接种量10%、转速200 r/min和通气量2 m 3/h。 展开更多

关键词 假单胞菌YT3 枯草芽孢杆菌DZ1 接种量 转速 通气量

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