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Alg2通过调控Ku70糖基化对肺癌细胞放射敏感性的增强作用
1
作者 张兆阳 姚志成 +1 位作者 王茹茹 赵国平 《安徽大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第2期91-98,共8页
为了探究α-1,3/1,6-甘露糖基转移酶Alg2在增强肺癌细胞放射敏感性中发挥的作用及机制,采用人的非小细胞肺癌细胞(A549),构建Alg2过表达及敲低细胞系,辐照条件下利用DR-GFP质粒报告系统检测Alg2对DNA损伤修复方式,如对同源重组(HR)修复... 为了探究α-1,3/1,6-甘露糖基转移酶Alg2在增强肺癌细胞放射敏感性中发挥的作用及机制,采用人的非小细胞肺癌细胞(A549),构建Alg2过表达及敲低细胞系,辐照条件下利用DR-GFP质粒报告系统检测Alg2对DNA损伤修复方式,如对同源重组(HR)修复和非同源末端连接(NHEJ)修复的影响;再利用Western blot、免疫荧光等方法探究Alg2敲低细胞对辐射的响应,探究Alg2对Ku70糖基化的调控机制.结果表明:辐照引起Alg2敲低的肿瘤细胞死亡显著增加;Alg2敲低显著抑制非同源末端连接(NHEJ)修复途径,并导致Ku70蛋白糖基化减少.总的来说,Alg2通过调控NHEJ修复关键蛋白Ku70的糖基化,抑制Alg2后会抑制Ku70的染色质募集,影响肿瘤细胞的NHEJ修复,最终增加肿瘤细胞的放射敏感性. 展开更多
关键词 Alg2 KU70 糖基化 放射敏感性 NHEJ
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2型转谷氨酰胺酶对人胶质母细胞瘤细胞U251放射敏感性的影响
2
作者 蓝瑞隆 伍兵 王锃 《辐射防护》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期537-545,共9页
为探讨2型转谷氨酰胺酶(transglutaminase 2,TG2)对胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)放射敏感性的影响。通过生信分析TG2表达与胶质瘤病人预后的关系,并分析了其在GBM放射抵抗细胞株U251中的水平;瞬时转染得到TG2过表达细胞(U251-TG2)或... 为探讨2型转谷氨酰胺酶(transglutaminase 2,TG2)对胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)放射敏感性的影响。通过生信分析TG2表达与胶质瘤病人预后的关系,并分析了其在GBM放射抵抗细胞株U251中的水平;瞬时转染得到TG2过表达细胞(U251-TG2)或空载细胞(U251-EV);CCK8法绘制生长曲线;transwell检测细胞迁移能力;不同剂量X射线照射后,检测细胞克隆形成能力、ROS水平;并通过免疫荧光检测γ-H2AX水平;Western blot检测自噬关键分子Beclin-1、LC3及mTOR磷酸化水平。结果显示,TG2高表达胶质瘤患者具有更差的无进展间隔期及总生存期,TG2在放射抵抗型U251中的表达显著高于野生型U251;U251-TG2细胞增殖能力高于U251-EV,且前者迁移能力高于后者;经X射线照射后,U251-TG2细胞克隆形成率高于U251-EV,前者ROS水平及γ-H2AX荧光焦点数均低于后者;自噬关键蛋白Beclin-1及自噬活性指标LC3-Ⅱ/Ⅰ比值在U251-TG2的水平均高于U251-EV,且前者mTOR磷酸化水平低于后者。实验结果证明,X射线照射后,TG2可能通过抑制mTOR磷酸化的方式促进自噬,进而降低GBM细胞U251的放射敏感性。 展开更多
关键词 胶质母细胞瘤 2型转谷氨酰胺酶 放射敏感性
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腺苷脱氨酶ADAR1调控肺腺癌细胞放射敏感性的研究
3
作者 陈才 杨文娣 +5 位作者 陈柯宏 张雅倩 曾洪 彭媛 张晓月 杨镇洲 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期1378-1386,共9页
目的研究下调ADAR1基因表达对肺腺癌细胞放射敏感性的影响。方法慢病毒转染下调肺腺癌细胞A549的ADAR1基因,分别设阴性对照组(shNC)和ADAR1敲降组(shADAR1),同时以单次剂量0 Gy和6 Gy X射线照射为干预条件。采用蛋白免疫印迹和RT-qPCR... 目的研究下调ADAR1基因表达对肺腺癌细胞放射敏感性的影响。方法慢病毒转染下调肺腺癌细胞A549的ADAR1基因,分别设阴性对照组(shNC)和ADAR1敲降组(shADAR1),同时以单次剂量0 Gy和6 Gy X射线照射为干预条件。采用蛋白免疫印迹和RT-qPCR分别检测A549细胞转染后ADAR1的蛋白和mRNA表达水平。CCK-8实验、伤口愈合实验及Transwell迁移实验检测细胞增殖、迁移能力。克隆形成实验检测下调ADAR1对A549细胞放射敏感性的影响。流式细胞术、蛋白免疫印迹实验检测细胞凋亡及相关蛋白Bax和Bcl-2的表达水平。细胞免疫荧光、蛋白免疫印迹实验检测γ-H2AX的表达水平。彗星实验检测细胞DNA损伤程度。4~6周、体质量16~18 g雌性裸鼠12只,用随机数表法分为(n=3):shNC组、shADAR1组、阴性对照联合电离辐射(Ionizing radiation,IR)组(shNC+IR)和ADAR1敲低联合IR组(shADAR1+IR),通过皮下成瘤实验检测不同组细胞在体内生长情况。结果蛋白免疫印迹和RT-qPCR实验显示A549 shADAR1细胞ADAR1的蛋白及mRNA表达量均明显降低(P<0.05)。CCK-8实验、伤口愈合实验及Transwell迁移实验结果显示下调ADAR1抑制A549细胞的增殖、迁移能力,IR后这种抑制趋势更加明显(P<0.01)。细胞克隆形成实验结果显示随着辐射剂量增加,两组的克隆形成率均有下降,但shADAR1组形成的克隆数低于shNC组。流式细胞术及蛋白免疫印迹实验结果显示下调ADAR1增加A549细胞凋亡率、Bax蛋白表达(P<0.01),减少Bcl-2蛋白表达(P<0.05),IR后A549 shADAR1细胞凋亡率、Bax蛋白水平进一步升高(P<0.01),Bcl-2蛋白水平进一步降低(P<0.01)。A549 shADAR1细胞经IR后γ-H2AX foci数目及蛋白表达量明显升高(P<0.05),彗星实验结果显示A549 shADAR1细胞经IR后DNA损伤更加明显(P<0.01)。裸鼠皮下成瘤实验结果显示A549 shADAR1细胞皮下成瘤经IR后其生长受到明显抑制(P<0.01)。结论下调ADAR1可显著抑制IR后A549细胞的增殖、迁移,促进细胞凋亡及DNA损伤,从而增加肺腺癌细胞的放射敏感性。 展开更多
关键词 ADAR1 放射敏感性 肺腺癌 DNA损伤
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谷氨酰胺对结直肠癌HT-29细胞放射敏感性的影响及机制探讨
4
作者 卢亨 倪向敏 +4 位作者 于生财 梁馨予 朱文艺 李忠俊 王建 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1007-1014,共8页
目的观察不同浓度谷氨酰胺(glutamine,Gln)对结直肠癌HT-29细胞放射敏感性的影响,并探讨其可能机制。方法体外培养HT-29细胞,将对数生长期的HT-29细胞按照Gln不同浓度设置对照组(2 mmol/L,培养基基础浓度)、实验组Ⅰ(4 mmol/L)、实验组... 目的观察不同浓度谷氨酰胺(glutamine,Gln)对结直肠癌HT-29细胞放射敏感性的影响,并探讨其可能机制。方法体外培养HT-29细胞,将对数生长期的HT-29细胞按照Gln不同浓度设置对照组(2 mmol/L,培养基基础浓度)、实验组Ⅰ(4 mmol/L)、实验组Ⅱ(6 mmol/L)、实验组Ⅲ(8 mmol/L),预处理2 h后给予Co 60源放射。通过CCK-8法检测未放射与放射后不同浓度Gln对细胞活力的影响;克隆形成实验检测放射后不同浓度Gln对细胞放射敏感性的影响;活性氧(ROS)试剂盒检测放射后24 h细胞ROS水平;流式细胞仪检测放射后48 h细胞凋亡率;蛋白印迹法测定放射后各组细胞Nrf2、HO-1、cleaved-Caspase3蛋白的表达水平。结果未放射的HT-29细胞在Gln干预24 h后实验组Ⅱ、实验组Ⅲ细胞活力明显高于对照组、实验组Ⅰ(P<0.05)。HT-29细胞放射24 h后,各实验组细胞活力明显高于对照组(P<0.05);放射后14 d,各实验组细胞克隆形成数均高于对照组(P<0.05);放射后24 h,各实验组ROS水平均低于对照组(P<0.05);放射后48 h,各实验组细胞凋亡率均低于对照组(P<0.05)。实验组ⅠNrf2表达高于对照组(P<0.05);实验组Ⅱ、ⅢNrf2、HO-1表达均高于对照组和实验组Ⅰ(P<0.05),cleaved-Caspase3表达均低于对照组和实验组Ⅰ(P<0.05);实验组Ⅲcleaved-Caspase3表达低于实验组Ⅱ(P<0.05)。结论谷氨酰胺能显著降低HT-29细胞的放射敏感性,其机制与减轻氧化应激损伤和减少细胞凋亡有关,这可能不利于结直肠癌患者放疗。 展开更多
关键词 谷氨酰胺 HT-29细胞 氧化应激损伤 细胞凋亡 放射敏感性
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肿瘤微环境与肿瘤细胞放射敏感性关系的研究进展 被引量：13
5
作者 张玉宇 王利波 +3 位作者 赵钦 李戈 龚守良 董丽华 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期1038-1044,共7页
肿瘤放射治疗(放疗)是肿瘤治疗的重要手段之一。然而,电离辐射等因素可改变肿瘤微环境,而其微环境对电离辐射产生抵抗性,降低肿瘤细胞的放射敏感性,这已成为肿瘤放疗的瓶颈、复发的根源。为此,本文主要综述肿瘤微环境中肿瘤细胞放射敏... 肿瘤放射治疗(放疗)是肿瘤治疗的重要手段之一。然而,电离辐射等因素可改变肿瘤微环境,而其微环境对电离辐射产生抵抗性,降低肿瘤细胞的放射敏感性,这已成为肿瘤放疗的瓶颈、复发的根源。为此,本文主要综述肿瘤微环境中肿瘤细胞放射敏感性的差异、缺氧微环境诱导肿瘤细胞的辐射抗性、肿瘤细胞DNA损伤修复与放射敏感性、肿瘤基质和干细胞对放射敏感性的影响及肿瘤细胞凋亡和自噬与放射敏感性等方面内容,以加深对肿瘤微环境与肿瘤细胞放射敏感性之间关系的理解,并对辐射抗性的肿瘤细胞及其肿瘤干细胞采取可能的干预措施,达到有效治疗肿瘤的目的。 展开更多
关键词 肿瘤细胞 肿瘤微环境 电离辐射 放射敏感性 辐射抗性
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鼻咽癌血管内皮生长因子及微血管与放射敏感性 被引量：17
6
作者 刘宜敏 梁碧玲 +3 位作者 卢泰祥 崔念基 李海刚 沈溪明 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期161-163,167,共4页
[目的]探讨鼻咽癌组织中血管内皮生长因子(VEGF)表达及微血管(MVD)在预测鼻咽癌放射敏感性中的价值.[方法]对39例病理确诊为鼻咽癌的单纯放疗患者放疗前的鼻咽活检组织,进行Von Willebrand因子、VEGF免疫组化染色;用动态MRI观察肿瘤放... [目的]探讨鼻咽癌组织中血管内皮生长因子(VEGF)表达及微血管(MVD)在预测鼻咽癌放射敏感性中的价值.[方法]对39例病理确诊为鼻咽癌的单纯放疗患者放疗前的鼻咽活检组织,进行Von Willebrand因子、VEGF免疫组化染色;用动态MRI观察肿瘤放疗后的体积变化,在MR机上直接测量肿瘤体积.[结果]VEGF表达与MVD密切相关(r=0.553,P＜0.05).VEGF表达与肿瘤体积缩小百分比相关,有统计学意义(38～40 Gy时r=-0.45,P＜0.05;68～76 Gy时r=-0.42,P＜0.05).MVD与肿瘤体积缩小百分比的相关无统计学意义(38～40Gy时,r=-0.183,P=0.265;68～76 Gy时,r=-0.244,P=0.135).[结论]鼻咽癌组织内VEGF表达与放射敏感性呈负相关;VEGF表达与MVD呈正相关;MVD与放射敏感性的相关无统计学意义. 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 血管内皮生长因子 微血管密度 放射敏感性
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放射敏感性、X线辐射剂量对鼻咽癌细胞miR-7表达的影响 被引量：12
7
作者 陈智贤 孙爱民 +4 位作者 陈勇 刘英 詹军芳 陈龙华 袁亚维 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1810-1812,1816,共4页
目的探讨放射敏感性、X线辐射剂量对鼻咽癌细胞miR-7表达的影响。方法以低放射敏感性鼻咽癌细胞株CNE-1、高放射敏感性鼻咽癌细胞株CNE-2为研究对象,采用析因设计的方法,分别给予CNE-1、CNE-2假照(0Gy)、低剂量照射(2Gy)、高剂量照射(8... 目的探讨放射敏感性、X线辐射剂量对鼻咽癌细胞miR-7表达的影响。方法以低放射敏感性鼻咽癌细胞株CNE-1、高放射敏感性鼻咽癌细胞株CNE-2为研究对象,采用析因设计的方法,分别给予CNE-1、CNE-2假照(0Gy)、低剂量照射(2Gy)、高剂量照射(8Gy)。Trizol法提取总RNA,设计特异性茎环引物逆转录miR-7,随机六引物逆转录18srRNA,所得cDNA进行染料法荧光定量PCR,以0Gy照射的CNE-1细胞为参照样本,ΔΔCt法计算各组细胞miR-7的相对表达值,SPSS13.0行析因设计资料方差分析。结果 CNE-1和CNE-2的miR-7表达量有显著差异(F=135.483,P<0.001),CNE-1的miR-7表达量(χ=4.49±3.62)高于CNE-2(χ=1.29±1.10),不同剂量照射后,鼻咽癌细胞株miR-7表达量也有显著性差异(F=39.565,P<0.001),CNE-1接受2GyX线照射后miR-7表达最高,8Gy照射组次之,0Gy照射组最低。CNE-2接受2GyX线照射后miR-7表达最低,8Gy照射组次之,0Gy照射组最高。结论放射敏感性不同导致细胞受X线辐射后,miR-7表达调整方向不同,即低放射敏感细胞上调,而高放射敏感性细胞下调;X线辐射剂量将影响miR-7的表达调整幅度,即低剂量照射后miR-7调整幅度大,高剂量照射后调整幅度小。抑制miR-7表达可能会提高鼻咽癌细胞的放射敏感性。 展开更多
关键词 放射敏感性 辐射剂量 鼻咽癌 MICRORNA
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下调环指蛋白2的表达促进U87脑胶质瘤细胞凋亡并增强其放射敏感性 被引量：8
8
作者 周春辉 杨帆 +6 位作者 席文锦 魏铭 郑国旭 王微 杨安钢 张剑宁 温伟红 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期471-475,共5页
目的在U87脑胶质瘤细胞中下调环指蛋白2(RNF2)的表达,观察对U87细胞生长及放射敏感性的影响。方法用含有针对RNF2基因小发夹RNA(shRNA)的表达载体转染U87细胞,利用荧光实时定量PCR(qRT-PCR)和Western blot法分别在mRNA及蛋白水平验证RNF... 目的在U87脑胶质瘤细胞中下调环指蛋白2(RNF2)的表达,观察对U87细胞生长及放射敏感性的影响。方法用含有针对RNF2基因小发夹RNA(shRNA)的表达载体转染U87细胞,利用荧光实时定量PCR(qRT-PCR)和Western blot法分别在mRNA及蛋白水平验证RNF2的表达下调,用MTT法检测细胞增殖,用annexin V-FITC/PI标记结合流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期情况;经X射线照射后,用流式细胞术检测对照细胞和RNF2表达下调细胞的凋亡情况。结果 2条针对RNF2的shRNA均可有效抑制U87细胞中RNF2的表达。RNF2表达下调后,U87细胞的增殖受到显著抑制,S期细胞明显减少(shRNA-NC:27.31±1.35;shRNF2-1:16.72±2.90;shRNF2-3:10.35±1.33),G1期细胞显著增加(shRNA-NC:56.13±1.80;shRNF2-1:76.32±3.11;shRNF2-3:80.45±2.83),同时出现细胞凋亡。经X线照射后,RNF2下调的细胞凋亡率明显增加(shRNA-NC:20.88±0.64;shRNF2-1:39.69±0.57;shRNF2-3:47.82±0.45)。结论下调RNF2表达可明显抑制细胞生长,并增强U87细胞对放射的敏感性。 展开更多
关键词 RNF2 胶质瘤 RNA干扰 放射敏感性
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姜黄素对食管癌细胞系放射敏感性的影响及其机理 被引量：11
9
作者 张晓智 韩苏夏 +1 位作者 杨玉琮 李旭 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期377-378,386,共3页
目的　探讨姜黄素对食管癌细胞系Eca10 9的放射增敏作用及其机制。方法　利用细胞克隆技术进行剂量 -存活曲线分析 ,末端脱氧核苷酰转移酶法检测细胞凋亡 ,并对细胞周期进行分析。结果　姜黄素组D0 值为 91.35cGy ,空白对照和空白药物组... 目的　探讨姜黄素对食管癌细胞系Eca10 9的放射增敏作用及其机制。方法　利用细胞克隆技术进行剂量 -存活曲线分析 ,末端脱氧核苷酰转移酶法检测细胞凋亡 ,并对细胞周期进行分析。结果　姜黄素组D0 值为 91.35cGy ,空白对照和空白药物组D0 值分别为 130 .0 7cGy和 138.37cGy ,(P <0 .0 5 )。流式细胞仪分析空白组和姜黄素组凋亡区阳性细胞分别为 1.0 1%和 87.5 8% (P <0 .0 5 ) ;经姜黄素处理后 ,与对照组相比 ,G0 1 期细胞比例降低 ,G2 + M期细胞比例增高。结论　姜黄素可以明显提高Eca 10 9细胞的放射敏感性 ,机制可能与其引起瘤细胞周期阻滞 。 展开更多
关键词 姜黄素 食管癌 放射敏感性 放射治疗 细胞凋亡 抗癌药
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重楼皂苷Ⅰ对鼻咽癌CNE-2细胞体外放射敏感性的影响 被引量：8
10
作者 花永虹 马胜林 +2 位作者 傅真富 牟翰舟 江皓 《中华中医药学刊》 CAS 2011年第6期1387-1390,共4页
目的:探讨重楼皂苷Ⅰ(PPⅠ)对鼻咽癌CNE-2细胞的放射增敏作用及可能机制。方法:MTT法检测PPⅠ对CEN-2细胞增殖抑制作用。克隆形成实验检测PPⅠ对CNE-2的放射增敏效应,单击多靶模型拟合细胞存活曲线并计算放射增敏比。流式细胞仪检测PP... 目的:探讨重楼皂苷Ⅰ(PPⅠ)对鼻咽癌CNE-2细胞的放射增敏作用及可能机制。方法:MTT法检测PPⅠ对CEN-2细胞增殖抑制作用。克隆形成实验检测PPⅠ对CNE-2的放射增敏效应,单击多靶模型拟合细胞存活曲线并计算放射增敏比。流式细胞仪检测PPⅠ对细胞周期分布和细胞凋亡的影响。结果:PPⅠ对CNE-2细胞有增殖抑制作用,呈时间-剂量依赖性,24和48h半数抑制量(50%concentration of inh ib ition,IC50)分别为6.68μg/mL和3.84μg/mL。1.5和3μg/mL PPⅠ的放射增敏比分别为1.10和1.44,DDP阳性对照组放射增敏比为1.22。增敏组凋亡率、G2/M期细胞比例较对照组增多(P<0.05)。结论:PPⅠ对鼻咽癌细胞系CNE-2具有放射增敏作用,其机制可能与促进细胞凋亡及引起G2/M期阻滞有关。 展开更多
关键词 重楼皂苷Ⅰ 鼻咽癌 放射敏感性
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人骨肉瘤细胞HOS锎-252中子放射敏感性的研究 被引量：5
11
作者 卿毅 王东 +2 位作者 李增鹏 何怡 张沁宏 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期117-120,共4页
目的观察锎-252中子治疗骨肉瘤的效果。方法人骨肉瘤细胞HOS用铱-192γ射线和锎-252中子射线分别以不同的剂量照射,MTT法绘出细胞存活曲线,经典的克隆形成分析测算D0、Dq和SF2值,彗星分析法检测照射后细胞的DNA损伤情况。结果MTT法、克... 目的观察锎-252中子治疗骨肉瘤的效果。方法人骨肉瘤细胞HOS用铱-192γ射线和锎-252中子射线分别以不同的剂量照射,MTT法绘出细胞存活曲线,经典的克隆形成分析测算D0、Dq和SF2值,彗星分析法检测照射后细胞的DNA损伤情况。结果MTT法、克隆形成分析和彗星分析法3种方法的实验结果均表明HOS细胞对锎-252中子射线更为敏感。由克隆形成分析得到锎-252中子射线和铱-192γ射线照射HOS细胞的D0值分别是2·80和3·34,Dq值分别是2·66和3·07,SF2值分别是0·596和0·684。锎-252中子射线和铱-192γ射线以200、500、1000cGy3个剂量照射HOS细胞后,碱性彗星尾力矩分别是(6·664±0·648)、(20·322±1·433)、(33·909±1·245)和(4·760±0·528)、(15·203±1·272)、(27·375±1·315)(P<0·05)。结论锎-252中子对HOS细胞的杀伤效果优于铱-192γ射线,说明锎-252中子放射治疗骨肉瘤可能是一种具有发展潜力的放射治疗方法。 展开更多
关键词 骨肿瘤 锎-252中子 放射敏感性 中子
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bcl-2和bax蛋白表达与鼻咽癌放射敏感性相关关系的探讨 被引量：6
12
作者 黄阗 陈茂怀 +3 位作者 吴名耀 吴贤英 黄文杰 欧海强 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2004年第18期35-37,共3页
目的:探讨bcl-2和bax蛋白的表达与鼻咽癌放射敏感性的关系。方法:应用免疫组化法检测51例放疗前鼻咽癌活检组织中bcl-2和bax蛋白的表达。结果:51例鼻咽癌组织中bcl-2和bax蛋白表达阳性者均为47例(92.2%);鼻咽癌组织中bcl-2和bax蛋白的... 目的:探讨bcl-2和bax蛋白的表达与鼻咽癌放射敏感性的关系。方法:应用免疫组化法检测51例放疗前鼻咽癌活检组织中bcl-2和bax蛋白的表达。结果:51例鼻咽癌组织中bcl-2和bax蛋白表达阳性者均为47例(92.2%);鼻咽癌组织中bcl-2和bax蛋白的表达强度呈显著相关(P<0.05);bcl-2蛋白的表达与鼻咽癌放射敏感性呈负相关(P<0.05),而bax蛋白的表达与鼻咽癌放射敏感性无关(P>0.05);bcl-2/bax的比率与鼻咽癌放射敏感性呈负相关(P<0.05)。结论:bcl-2蛋白和bcl-2/bax的比率是反映鼻咽癌放射敏感性和预测鼻咽癌放疗效果的重要指标,而bax蛋白不能单独作为判断鼻咽癌放射敏感性的指标。 展开更多
关键词 鼻咽癌 BCL-2 BAX 放射敏感性
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RNAi抑制Ku80表达后促进宫颈癌SiHa细胞的放射敏感性 被引量：6
13
作者 庄亮 于世英 +2 位作者 黄晓园 熊华 徐慧婷 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2007年第5期385-389,共5页
背景与目的:Ku80为细胞受辐射致DNA双链断裂(DNA double-strand break,DSB)后的主要修复蛋白之一,Ku80的高表达预示着宫颈癌组织对放射线的抵抗,本研究运用RNAi技术抑制Ku80表达,观察宫颈癌Si-Ha细胞对X线敏感性的变化。方法:构建1个靶... 背景与目的:Ku80为细胞受辐射致DNA双链断裂(DNA double-strand break,DSB)后的主要修复蛋白之一,Ku80的高表达预示着宫颈癌组织对放射线的抵抗,本研究运用RNAi技术抑制Ku80表达,观察宫颈癌Si-Ha细胞对X线敏感性的变化。方法:构建1个靶向抑制Ku80的siRNA表达载体和1个阴性对照质粒,稳定转染入SiHa细胞后Western blot和RT-PCR检测Ku80表达变化;6 MV X线照射10 Gy后20 h、28 h和48 h收集细胞,流式细胞术检测细胞凋亡率;克隆形成实验检测细胞D0、SF2和α等值。结果:构建表达质粒转染SiHa细胞经筛选后获得2个稳定转染细胞株,Western blot和RT-PCR分析表明转染pKu80-siRNA的阳性克隆Ku80在mRNA和蛋白质水平均受到明显抑制;X线照射28 h及48 h后,Ku80表达受抑细胞其凋亡率均显著高于转染阴性质粒组和空白对照组(P<0.05);Ku80受抑细胞的D0和SF2值分别为1.330和0.425,低于转染阴性质粒细胞(1.748和0.580)和空白对照细胞(1.835和0.597),α值为0.295,高于转染阴性质粒细胞(0.176)和空白对照细胞(0.188)。结论:运用RNAi技术可以有效抑制Ku80的表达从而促进SiHa细胞对X线的敏感性,Ku80可能是一个较理想的肿瘤分子治疗靶点。 展开更多
关键词 KU80 RNA干扰 宫颈癌 SIHA 放射敏感性 培养的肿瘤细胞
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RNA干扰靶向沉默诱骗受体3基因增加人胰腺癌细胞的放射敏感性 被引量：5
14
作者 肖华平 李庆 +2 位作者 谢辉 罗春阳 方玉江 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期833-837,共5页
目的:探讨RNA干扰沉默诱骗受体3(decoy receptor 3,DcR3)基因对胰腺癌细胞放射敏感性的影响及其相关机制。方法:构建带有DcR3 siRNA序列的稳定表达质粒,通过脂质体转染至胰腺癌AsPC-1细胞株,设对照组、siRNA(-)阴性对照组和DcR3 siRNA组... 目的:探讨RNA干扰沉默诱骗受体3(decoy receptor 3,DcR3)基因对胰腺癌细胞放射敏感性的影响及其相关机制。方法:构建带有DcR3 siRNA序列的稳定表达质粒,通过脂质体转染至胰腺癌AsPC-1细胞株,设对照组、siRNA(-)阴性对照组和DcR3 siRNA组,应用Western blotting检测AsPC-1细胞中DcR3表达的变化,平板克隆形成实验检测转染DcR3 siRNA后AsPC-1细胞放射敏感性的变化,流式细胞术检测细胞凋亡,RT-PCR和Western blotting检测Caspase-8、Caspase-3和PARP-1表达的变化。结果:DcR3 siRNA组细胞中DcR3蛋白表达水平较对照或siRNA(-)组明显降低(均P<0.01);DcR3 siRNA组的克隆形成率明显低于对照或siRNA(-)组,其存活分数(survival fraction,SF)降低、α/β比值升高(均P<0.01);放射后DcR3 siRNA组肿瘤细胞凋亡率明显高于对照或siRNA(-)组(均P<0.01);转染DcR3 siRNA后可以明显上调Caspase-8、Caspase-3的表达和下调PARP-1的表达。结论:RNA干扰沉默DcR3基因通过激活凋亡因子Caspase-8和Caspase-3促进细胞凋亡,从而增加胰腺癌细胞对放射的敏感性。 展开更多
关键词 胰腺癌 AsPC-1细胞 诱骗受体3基因 RNA干扰 放射敏感性
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葫芦素B通过调控HERG1对膀胱癌细胞增殖、迁移侵袭和放射敏感性的影响 被引量：5
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作者 董建设 李豪 +3 位作者 赵俊峰 陈瑞廷 张林超 贾占奎 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期1449-1456,共8页
目的探讨葫芦素B通过调控HERG1对膀胱癌细胞增殖、迁移侵袭和放射敏感性的影响。方法葫芦素B(0.1、1、10μmol/L)处理膀胱癌细胞48 h;将si-NC、si-HERG1、pcDNA、pcDNA-HERG1转染至T24细胞;经pcDNA、pcDNA-HERG1转染后,分别加入10μg/m... 目的探讨葫芦素B通过调控HERG1对膀胱癌细胞增殖、迁移侵袭和放射敏感性的影响。方法葫芦素B(0.1、1、10μmol/L)处理膀胱癌细胞48 h;将si-NC、si-HERG1、pcDNA、pcDNA-HERG1转染至T24细胞;经pcDNA、pcDNA-HERG1转染后,分别加入10μg/mL葫芦素B培养48 h。MMT法检测各组细胞增殖情况;Transwell评估细胞的迁移和侵袭变化;细胞克隆形成实验测定细胞放射敏感性;RT-PCR检测T24细胞HERG1 mRNA表达;Western blot法检测蛋白表达。结果葫芦素B抑制T24细胞增殖、迁移、侵袭,HERG1mRNA及蛋白表达,呈浓度依赖型(P<0.05);增强T24细胞的放射敏感性。抑制HERG1表达可抑制T24细胞的增殖、迁移和侵袭,增强其放射敏感性(P<0.05)。过表达HERG1逆转了葫芦素B抑制T24细胞增殖、迁移和侵袭和放疗增敏的作用。结论葫芦素B能抑制膀胱癌细胞增殖、迁移、侵袭能力,并且增强细胞的放射敏感性,机制可能与调控HERG1基因有关。 展开更多
关键词 葫芦素B HERG1 膀胱癌 放射敏感性 增殖 迁移侵袭
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lncRNA ZFAS1靶向miR-193a-3p调控宫颈癌细胞Siha放射敏感性的分子机制研究 被引量：6
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作者 刘晓娟 王静 +2 位作者 张娟 高月月 王虹 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期195-200,共6页
目的:探讨lncRNA ZFAS1对宫颈癌细胞放射敏感性的影响以及其作用机制。方法:实验设置pcDNA组、pcDNA-ZFAS1组、si-con组、si-ZFAS1组、IR+si-con组、IR+si-ZFAS1组、si-ZFAS1+anti-miR-con组、si-ZFAS1+anti-miR-193a-3p组、IR+si-ZFAS1... 目的:探讨lncRNA ZFAS1对宫颈癌细胞放射敏感性的影响以及其作用机制。方法:实验设置pcDNA组、pcDNA-ZFAS1组、si-con组、si-ZFAS1组、IR+si-con组、IR+si-ZFAS1组、si-ZFAS1+anti-miR-con组、si-ZFAS1+anti-miR-193a-3p组、IR+si-ZFAS1+anti-miR-con组、IR+si-ZFAS1+anti-miR-193a-3p组。qRT-PCR检测miR-193a-3p和ZFAS1表达;Western blot检测蛋白表达;流式细胞术检测细胞凋亡;细胞克隆形成实验检测宫颈癌细胞的放射敏感性;双荧光素酶报告实验检测荧光活性。结果:宫颈癌放射抵抗组织和不同剂量射线照射后的宫颈癌细胞中ZFAS1高表达,miR-193a-3p低表达;沉默lncRNA ZFAS1可促进宫颈癌细胞凋亡并增加细胞放射敏感性,促进Cleaved Caspase-3、γ-H2AX表达,抑制Cyclin D1表达。ZFAS1靶向调节miR-193a-3p表达;抑制miR-193a-3p表达逆转了沉默ZFAS1对宫颈癌细胞的放射增敏和细胞凋亡促进作用。结论:lncRNA ZFAS1可增加宫颈癌细胞的放射敏感性,并促细胞凋亡,其机制可能与调控miR-193a-3p有关,为宫颈癌的放疗提供新靶点和新思路。 展开更多
关键词 lncRNA ZFAS1 miR-193a-3p 宫颈癌 放射敏感性 凋亡
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低温热疗对肺腺癌细胞放射敏感性的影响 被引量：8
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作者 鹿红 陈龙邦 +2 位作者 臧静 管小翔 李兵 《医学研究生学报》 CAS 2005年第2期115-118,共4页
目的:研究低温热疗(≤42℃)对肺腺癌细胞株SPC A 1的放射增敏作用及其对生长周期的影响。　方法: 集落形成率实验观察低温热疗的放射增敏作用;流式细胞仪观察细胞生长周期的变化。　结果:单纯放射时细胞的 Do、Dq值分别为1.693、2.4... 目的:研究低温热疗(≤42℃)对肺腺癌细胞株SPC A 1的放射增敏作用及其对生长周期的影响。　方法: 集落形成率实验观察低温热疗的放射增敏作用;流式细胞仪观察细胞生长周期的变化。　结果:单纯放射时细胞的 Do、Dq值分别为1.693、2.453Gy,放射合并41.5℃加热时Do、Dq值分别为1.390、1.426Gy,热增敏比为1.218。放 射及热放射后细胞周期出现了再分布。未处理组流式细胞仪检测到S期细胞比例为14.81%,照射6Gy后48、72h 分别为18.80%和31.91%;照射后立即41.5℃加热1h,48、72h的S期细胞分别为5.89%和9.08%。　结论:低 温热疗对肺腺癌细胞系有放射增敏作用,低温热疗能去除放射引起的细胞S期阻滞,其机制可能与加热抑制了肿 瘤细胞对放射所致亚致死损伤和潜在致死损伤的修复能力有关。 展开更多
关键词 低温热疗 放射敏感性 肺腺癌细胞株
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沉默PeroxiredoxinⅠ基因对乳腺癌裸鼠移植瘤放射敏感性的影响 被引量：7
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作者 郭启帅 黄曦 李少林 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期1119-1123,共5页
目的探讨PeroxiredoxinⅠ(PrxⅠ)沉默后对乳腺癌裸鼠移植瘤放射敏感性的影响及其作用机制。方法将稳定表达PrxⅠshRNA的pGPU6-PrxⅠ和阴性对照pGPU6-HK细胞接种于裸鼠皮下,建立乳腺癌裸鼠移植瘤模型。实验共分为4组:pGPU6-HK组、pGPU6-... 目的探讨PeroxiredoxinⅠ(PrxⅠ)沉默后对乳腺癌裸鼠移植瘤放射敏感性的影响及其作用机制。方法将稳定表达PrxⅠshRNA的pGPU6-PrxⅠ和阴性对照pGPU6-HK细胞接种于裸鼠皮下,建立乳腺癌裸鼠移植瘤模型。实验共分为4组:pGPU6-HK组、pGPU6-PrxⅠ组、pGPU6-HK+照射(ionizing radiation,IR)组、pGPU6-PrxⅠ+IR组。用6MVX线照射裸鼠瘤组织,测量肿瘤体积,称取肿瘤质量,计算抑瘤率;免疫组化检测肿瘤组织中PrxⅠ和Caspase3蛋白表达;电镜观察肿瘤细胞超微结构,Western blot测定肿瘤组织中γ-H2AX和Rad51蛋白表达。结果成功构建了裸鼠移植瘤模型,pGPU6-PrxⅠ+IR组裸鼠移植瘤生长肿瘤明显迟缓,体积较小,抑瘤率为79.76%,与pGPU6-PrxⅠ(34.92%)和pGPU6-HK+IR(56.94%)比较差异具有显著性(P<0.05);给予pGPU6-PrxⅠ及IR处理后,肿瘤细胞凋亡和坏死增多,PrxⅠ和Rad51蛋白表达减少,而Caspase3和γ-H2AX蛋白表达增加,以pGPU6-PrxⅠ+IR组更为显著,其Rad51蛋白下降了84.8%,γ-H2AX蛋白表达升高5.6倍(P<0.05)。结论沉默PrxⅠ表达可提高乳腺癌移植瘤的放射敏感性,其作用机制与DNA双链断裂增加、DNA损伤后修复能力降低有关。PrxⅠ可能是一个理想的乳腺癌放射增敏分子靶点。 展开更多
关键词 PEROXIREDOXIN Ⅰ 放射敏感性 DNA双链断裂 DNA损伤修复 乳腺癌
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Linc00152靶向miR-376c-3p对宫颈癌细胞活力、凋亡和放射敏感性的影响 被引量：6
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作者 刘晓娟 王静 +2 位作者 张娟 高月月 王虹 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期67-74,共8页
目的:探讨长链非编码RNA Linc00152对宫颈癌细胞活力、凋亡和放射敏感性的影响及作用机制。方法:RT-qPCR检测宫颈癌HeLa细胞和SiHa细胞以及正常宫颈细胞Ect1/E6E7中Linc00152与微小RNA-376c-3p(miR-376c-3p)的表达水平。建立Linc00152... 目的:探讨长链非编码RNA Linc00152对宫颈癌细胞活力、凋亡和放射敏感性的影响及作用机制。方法:RT-qPCR检测宫颈癌HeLa细胞和SiHa细胞以及正常宫颈细胞Ect1/E6E7中Linc00152与微小RNA-376c-3p(miR-376c-3p)的表达水平。建立Linc00152低表达或miR-376c-3p过表达的宫颈癌HeLa细胞系,MTT法、流式细胞术、集落形成实验和Western blot分别检测Linc00152低表达或miR-376c-3p过表达对宫颈癌HeLa细胞的活力、凋亡、放射敏感性及相关蛋白表达的影响。双萤光素酶报告基因实验验证Linc00152与miR-376c-3p的调控关系。结果:与Ect1/E6E7细胞相比,宫颈癌HeLa细胞和SiHa细胞中的Linc00152表达上调,miR-376c-3p表达下调(P<0.05)。Linc00152低表达或miR-376c-3p过表达均可抑制HeLa细胞的活力,并诱导其凋亡,增强其放射敏感性,抑制cyclin D和Bcl-2蛋白表达,促进P21和Bax蛋白表达(P<0.05)。Linc00152在HeLa细胞中负向调控miR-376c-3p的表达,抑制miR-376c-3p表达可逆转Linc00152低表达对HeLa细胞活力、凋亡和放射敏感性的作用。结论:宫颈癌细胞中Linc00152高表达;Linc00152通过靶向调控miR-376c-3p影响HeLa细胞的生长、凋亡和放射敏感性,是宫颈癌潜在的诊治靶点。 展开更多
关键词 宫颈癌 Linc00152 微小RNA-376c-3p 细胞活力 细胞凋亡 放射敏感性
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AG490抑制甲状腺髓样癌TT细胞增殖并提高其放射敏感性 被引量：6
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作者 李娟 甘生敏 +2 位作者 罗超 刘双 彭志平 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期753-757,共5页
目的研究AG490对体外培养甲状腺髓样癌TT细胞增殖、凋亡及放射敏感性的影响。方法采用(0、25、50、100)μmol/L AG490处理甲状腺髓样癌TT细胞,MTT法和流式细胞术进行细胞增殖和凋亡检测,克隆形成实验检测其放射敏感性、Western blot法... 目的研究AG490对体外培养甲状腺髓样癌TT细胞增殖、凋亡及放射敏感性的影响。方法采用(0、25、50、100)μmol/L AG490处理甲状腺髓样癌TT细胞,MTT法和流式细胞术进行细胞增殖和凋亡检测,克隆形成实验检测其放射敏感性、Western blot法检测各组细胞Janus激酶2(JAK2)、磷酸化的信号转导子与转录激活子3(p-STAT3)、Bcl-2、Bax蛋白表达。结果与对照组相比,(25、50、100)μmol/L AG490组的抑制作用增强,呈浓度和时间依赖性;随着AG490药物浓度的增加凋亡率逐渐增加;与对照组相比,50μmol/L组细胞存活率显著降低,放射生物学参数:射线为2Gy时的存活分数(SF2)、平均致死剂量(D0)、准阈剂量(Dq)和外推数(N)降低;D0时放射增敏比(SER D0)、Dq时放射增敏比(SERDq)则增加。Western blot结果显示JAK2、p-STAT3和Bcl-2的蛋白表达量随着药物浓度的升高而逐渐降低,Bax蛋白表达量随着药物浓度的升高而逐渐增加。结论 AG490可抑制甲状腺髓样癌TT细胞增殖、增加细胞凋亡、提高放射敏感性。 展开更多
关键词 AG490 甲状腺髓样癌 放射敏感性
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