量子点偶联抗体型夹心免疫传感法检测心肌肌钙蛋白I 被引量：11

1

作者 宋健 范佳 +5 位作者 宋大千 毕丽荣 周广宇 张皓 魏景艳 杨柏 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1940-1944,共5页

将纳米量子点（QD）的放大作用与夹心免疫传感技术相结合，首次应用量子点标记抗体和表面等离子体共振生物传感器（SPR）对心肌肌钙蛋白Ⅰ（cTnⅠ）进行特异性定量检测．利用N-羟基琥珀酰（NHS）和1-乙基-3-（3-二甲氨基丙基）碳二亚胺... 将纳米量子点（QD）的放大作用与夹心免疫传感技术相结合，首次应用量子点标记抗体和表面等离子体共振生物传感器（SPR）对心肌肌钙蛋白Ⅰ（cTnⅠ）进行特异性定量检测．利用N-羟基琥珀酰（NHS）和1-乙基-3-（3-二甲氨基丙基）碳二亚胺盐酸盐（EDC）将量子点偶联到cTnⅠ的单克隆抗体2F11上，再利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）验证偶联是否成功，膜印迹法证明标记后的2F11具有良好的生物学和免疫学活性，最后以蛋白A为基底膜、特异性抗心肌肌钙蛋白Ⅰ多克隆抗体为第-抗体（捕捉抗体）、QD标记的抗心肌肌钙蛋白Ⅰ单克隆抗体2F11为第二抗体（检测抗体），用表面等离子体共振生物传感器构建了对心肌肌钙蛋白Ⅰ具有特异性的夹心免疫传感法，并成功用于检测心肌肌钙蛋白Ⅰ．本法的检测范围为0．4～15μg/L，检出限为0．4μg/L，较未标记夹心法和直接法分别提高了约2倍和10倍． 展开更多

关键词 心肌肌钙蛋白I 特异性抗心肌肌钙蛋白i抗体 夹心免疫传感法 量子点 生物传感器

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人心肌肌钙蛋白T的纯化和单克隆抗体的制备 被引量：8

2

作者 李志梁 傅朝平 +3 位作者 陆青 黎梅兰 钱学贤 王素华 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1996年第5期459-462,共4页

从人左室心肌中成功纯化心肌肌钙蛋白Ｔ（ｃＴｎＴ）．经匀浆，７０℃加热处理，咪唑盐酸透析，ＤＥＡＥ－纤维素层析，１００ｇ心肌获取ｃＴｎＴ５ｍｇ，纯度为９７．６％．同时采用脾内免疫法，免疫Ｂａｌｂ／Ｃ小鼠，经细胞融合，筛... 从人左室心肌中成功纯化心肌肌钙蛋白Ｔ（ｃＴｎＴ）．经匀浆，７０℃加热处理，咪唑盐酸透析，ＤＥＡＥ－纤维素层析，１００ｇ心肌获取ｃＴｎＴ５ｍｇ，纯度为９７．６％．同时采用脾内免疫法，免疫Ｂａｌｂ／Ｃ小鼠，经细胞融合，筛选，克隆化得５株稳定分泌抗人ｃＴｎＴ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞（Ｇ３，Ｇ８，Ｇ１０，Ａ５，Ａ７），４株为ＩｇＭ，１株为ＩｇＧ，染色体数目９２～１１０条．腹水效价为３．２×１０－６～１．６×１０－７． 展开更多

关键词 心肌肌钙蛋白T 单克隆抗体 提纯 制备

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用多克隆抗体构建的夹心免疫传感器检测心肌肌钙蛋白I 被引量：2

3

作者 魏景艳 牟颖 +6 位作者 许海波 胡鑫 宋大千 刘霞 张寒琦 金钦汉 罗贵民 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2003年第12期2161-2164,共4页

用表面等离子体子共振生物传感器构建对心肌肌钙蛋白 I特异性的免疫传感器检测心肌肌钙蛋白 I,并建立两种检测方法 :直接法的最低检测限为 2 .5 μg/L,基于传感膜上的夹心免疫法的灵敏度为 0 .5 μg/L,检测范围为 0 .5～ 2 0 μg/L,批... 用表面等离子体子共振生物传感器构建对心肌肌钙蛋白 I特异性的免疫传感器检测心肌肌钙蛋白 I,并建立两种检测方法 :直接法的最低检测限为 2 .5 μg/L,基于传感膜上的夹心免疫法的灵敏度为 0 .5 μg/L,检测范围为 0 .5～ 2 0 μg/L,批内及批间精密度分别为 3 .5 %～ 4.9% ,6.1 %～ 7.4% ;用夹心法及国外试剂盒对 40名健康献血者和 2 0例急性心肌梗死患者血清心肌肌钙蛋白 I水平进行检测 ,两者符合率为 95 % . 展开更多

关键词 心肌肌钙蛋白I 多克隆抗体 夹心免疫分析 SPR传感器 心肌梗塞

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^(99m)Tc标记抗心肌肌钙蛋白Ⅰ单克隆抗体在实验性急性心肌损伤大鼠体内分布的研究 被引量：2

4

作者 李建华 王德杭 +2 位作者 李殿富 徐兆强 张寄南 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期385-388,F0004,共5页

目的:研究99mTc标记的抗心肌肌钙蛋白Ⅰ单克隆抗体(AcTnIMA)在实验性急性心肌损伤大鼠体内的分布,探讨99mTc-AcTnIMA是否可以作为心脏放射免疫显像剂。方法:实验组:20只急性心肌损伤大鼠注射99mTc-AcTnIMA0.2mci,分别于注射后2、4、6、8... 目的:研究99mTc标记的抗心肌肌钙蛋白Ⅰ单克隆抗体(AcTnIMA)在实验性急性心肌损伤大鼠体内的分布,探讨99mTc-AcTnIMA是否可以作为心脏放射免疫显像剂。方法:实验组:20只急性心肌损伤大鼠注射99mTc-AcTnIMA0.2mci,分别于注射后2、4、6、8h处死(每次5只),取血液、肝、脾、肾、正常肌肉、肺和心脏,以计算每克组织放射性计数占总注入计数的百分比(ID%/g)及心-肺ID%/g比(HLR)。药物对照组:20只急性心肌损伤大鼠注射99mTc标记的非特异性免疫球蛋白(N-IgG)0.2mci,处死方法同实验组。取肺及心脏,计算ID%/g及HLR;空白对照组:20只正常大鼠注射99mTc-AcTnIMA0.2mci,处理方法同药物对照组。结果:急性损伤心肌对99mTc-AcTnIMA为特异性摄取,摄取的高峰时间为4h。结论:99mTc-AcTnIMA有望作为心脏放射免疫显像剂诊断急性心肌损伤。 展开更多

关键词 抗心肌肌钙蛋白I单克隆抗体 急性心肌损伤 放射免疫显像

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人心肌肌钙蛋白T单克隆抗体的研制及鉴定 被引量：2

5

作者 傅朝平 陆青 +3 位作者 李志梁 钱学贤 黎梅兰 王素华 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1996年第1期39-41,共3页

以人心肌肌钙蛋白Ｔ（ｃＴｎＴ）为抗原，采用脾内免疫法，免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取其脾淋巴细胞与小鼠Ｓｐ２／０细胞融合，经间接ＥＬＩＳＡ法筛选，三次克隆化后获得５株能稳定分泌抗ｃＴｎＴ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞Ｇ... 以人心肌肌钙蛋白Ｔ（ｃＴｎＴ）为抗原，采用脾内免疫法，免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取其脾淋巴细胞与小鼠Ｓｐ２／０细胞融合，经间接ＥＬＩＳＡ法筛选，三次克隆化后获得５株能稳定分泌抗ｃＴｎＴ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞Ｇ３、Ｇ８、Ｇ１０、Ａ５和Ａ７。免疫球蛋白亚类鉴定其中１株为ＩｇＧ２ａ，４株为ＩｇＭ。染色体数目９２～１１０条。将Ｇ３、Ｇ８、Ｇ１０、Ａ５的单克隆抗体腹水做１：１００稀释与ＬＤＨ、ＣＫ、ＣＫＭＢ和ＧＯＴ等心肌酶均无交叉反应。５株ＭｃＡｂ的腹水效价为３．２×１０－６～１．６×１０－７。ＭｃＡｂ相加试验表明，Ａ５和Ｇ３可识别不同的抗原表位。 展开更多

关键词 心肌肌钙蛋白T 抗原 单克隆抗体

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人心肌肌钙蛋白T单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立 被引量：2

6

作者 张海珠 冯元春 +4 位作者 宋晓荣 刘世国 任红斌 杨献军 史明珠 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2003年第3期369-371,共3页

目的 :建立抗人心肌肌钙蛋白T(cTnT)单克隆抗体 (McAb)的杂交瘤细胞株。方法 :从人心肌组织中提取纯化人cTnT ,免疫BALB/C小鼠 ,采用杂交瘤技术 ,间接ELISA法选择能稳定分泌抗cTnTMcAb的杂交瘤细胞株。结果 :建立了 2株稳定分泌抗cTnTM... 目的 :建立抗人心肌肌钙蛋白T(cTnT)单克隆抗体 (McAb)的杂交瘤细胞株。方法 :从人心肌组织中提取纯化人cTnT ,免疫BALB/C小鼠 ,采用杂交瘤技术 ,间接ELISA法选择能稳定分泌抗cTnTMcAb的杂交瘤细胞株。结果 :建立了 2株稳定分泌抗cTnTMcAb的杂交瘤细胞株N15C和N16D ,其染色体数目为 90～ 10 6 ,McAbIg亚类均为IgG1,间接ELISA法测定McAb腹水效价分别为 1 80 0 0和 1 32 0 0 0。免疫印迹结果显示 2株McAb均可识别cTnT中Mr 为 370 0 0的单一区带 ,不识别人骨骼肌提取物。间接ELISA法测定N15C和N16DMcAb与cTnT反应的最低浓度分别为 4 7μg/L和 2 3μg/L。相加试验表明 2株McAb能识别不同的抗原表位。 结论 :获得 展开更多

关键词 人心肌 肌钙蛋白T 单克隆抗体 杂交瘤细胞株

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急性心肌梗死患者抗心肌肌钙蛋白I自身抗体与左心室重构关系的分析 被引量：21

7

作者 周桑 王洪如 +4 位作者 薛苗 姚文杰 沈茜 吴豫 秦永文 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2018年第4期322-326,共5页

目的:分析急性心肌梗死(AMI)患者血清抗心肌肌钙蛋白I自身抗体(cTnIAAb)与左心室重构的关系。方法:随机选取131例AMI患者,采用酶联免疫吸附试验检测血清cTnIAAb;在患者入院时和AMI发生随访1年后进行超声心动图检查,以左心室收缩末期容积... 目的:分析急性心肌梗死(AMI)患者血清抗心肌肌钙蛋白I自身抗体(cTnIAAb)与左心室重构的关系。方法:随机选取131例AMI患者,采用酶联免疫吸附试验检测血清cTnIAAb;在患者入院时和AMI发生随访1年后进行超声心动图检查,以左心室收缩末期容积(LVESV)增加15%以上为左心室重构标准;采用二分类Logistic逐步回归分析筛选与左心室重构相关的12个危险因素。结果:131例AMI患者中,23例(17.6%)患者血清cTnIAAb阳性,108例(82.4%)cTnIAAb阴性。剔除失访的41例,90例患者中,21.1%患者血清cTnIAAb阳性,78.9%患者cTnIAAb阴性。血清cTnIAAb阳性患者和cTnIAAb阴性患者的入院时临床数据差异无统计学意义(P>0.05);随访1年后,有38例(42.2%)患者的心脏超声心动图LVESV与入院时相比增加超过15%,其中10例(52.6%)患者cTnIAAb阳性,18例(25.4%)cTnIAAb阴性。经二分类Logistic逐步回归分析,血浆B型利钠肽(BNP)峰值和血清cTnIAAb阳性为左心室重构的危险因素[OR(95%CI)分别为1.001(95%CI:1.000～1.002)和3.552(95%CI:1.148～10.989),P值均为0.028]。结论:部分AMI患者血清中存在cTnIAAb,cTnIAAb阳性与AMI患者的左心室重构风险增加有关,cTnIAAb可能参与了AMI后左心室重构的病理生理过程。 展开更多

关键词 心肌梗死 心肌肌钙蛋白 自身抗体 左心室重构

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人心肌肌钙蛋白I单克隆抗体的制备及鉴定 被引量：2

8

作者 焦宝明 李志梁 +4 位作者 陆青 钱洪津 周宁 王素华 钱学贤 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期376-377,共2页

目的 :制备抗人心肌肌钙蛋白 I(c Tn I)单克隆抗体 (c Tn I Mc Ab)并进行初步鉴定。 方法 :从健康意外死亡者的心肌中提取、纯化人 c Tn I,以其为抗原 ,免疫 BAL B/ c小鼠后 ,取其脾淋巴细胞与小鼠 Sp2 / 0骨髓瘤细胞融合 ,反复筛选及克... 目的 :制备抗人心肌肌钙蛋白 I(c Tn I)单克隆抗体 (c Tn I Mc Ab)并进行初步鉴定。 方法 :从健康意外死亡者的心肌中提取、纯化人 c Tn I,以其为抗原 ,免疫 BAL B/ c小鼠后 ,取其脾淋巴细胞与小鼠 Sp2 / 0骨髓瘤细胞融合 ,反复筛选及克隆 ,得到能稳定分泌 c Tn I Mc Ab的杂交瘤细胞株。初步鉴定 c Tn I Mc Ab。结果 :经间接 EL l SA法筛选 ,3次克隆化后获得 5株能稳定分泌 c Tn I Mc Ab的杂交瘤细胞 (3A7、3A 11、3D2、3F10和 1H9) ,5株单抗免疫球蛋白亚类鉴定均为 Ig G2 a类。染色体数目 92～ 110条。 5株单克隆抗体腹水按 1∶ 10 0稀释 ,与 L DH、CK、CK- MB、AST和人心肌肌钙蛋白 T(c Tn T)行交叉反应为阴性。 5株 c Tn I Mc Ab腹水效价为 3.2× 10 - 6 ～ 1.6× 10 - 7。c Tn I Mc Ab相加试验表明 ,3D2、3F10与 3A7、3A11、1H9能识别不同的抗原表位。 结论 :本实验成功制备了具有较高活性的 c Tn I Mc Ab,具有良好应用开发价值。 展开更多

关键词 心肌 肌钙蛋白 单克隆抗体 CTNI

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一种检测血清心肌肌钙蛋白I的生物传感器 被引量：5

9

作者 魏景艳 宋大千 +9 位作者 卜丽莎 朱冬元 牟颖 刘霞 张寒琦 金钦汉 张桂珍 丁家华 王维忠 罗贵民 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期272-275,共4页

目的 :建立一种新的血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)定量检测法。方法 :用亲和层析法提纯cTnI,免疫BALB C鼠及新西兰兔 ,并用杂交瘤技术及膜渗滤亲和层析法 ,制备了特异性抗cTnI单克隆抗体和多克隆抗体。以葡萄球菌蛋白A作基底膜 ,特异性多克... 目的 :建立一种新的血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)定量检测法。方法 :用亲和层析法提纯cTnI,免疫BALB C鼠及新西兰兔 ,并用杂交瘤技术及膜渗滤亲和层析法 ,制备了特异性抗cTnI单克隆抗体和多克隆抗体。以葡萄球菌蛋白A作基底膜 ,特异性多克隆抗体作捕捉抗体 ,单抗 9F5作第二抗体 ,制成了表面等离子体共振生物传感器。比较了直接法和夹心免疫法检测血清cTnI的性能。结果 :夹心免疫法的最低检测限 (0 8μg L)是直接法的 5倍 (4 μg L) ,检测范围为 (0 8～ 2 0 ) μg L ,批内及批间精密度分别达 3 8%～ 5 1% ,6 3%～ 8 1%。用该夹心法及国外试剂盒分别检测 4 0名健康献血队员和 2 8例急性心肌梗死患者血清cTnI水平 ,两者符合率分别为 97 5 %和 94 6 %。结论 :所建立的夹心免疫法操作简单 ,特异性强 ,灵敏度高 ,符合临床诊断要求。 展开更多

关键词 心肌肌钙蛋白Ⅰ 抗心肌肌钙蛋白i抗体 夹心免疫法 表面等离子体共振生物传感器 急性心肌梗死

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血清人心肌肌钙蛋白I快速测定方法的建立 被引量：10

10

作者 李志梁 焦宝明 +1 位作者 陆青 姜朝新 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第9期495-497,共3页

目的 :建立一种简便、快速、准确检测人心肌肌钙蛋白I(cTnI)的胶体金免疫层析法。方法 :应用cTnI免疫Balb/c小鼠 ,取脾细胞与SP2 /0骨髓瘤细胞进行细胞融合筛选 ,获得分泌高效价抗cTnI抗体细胞株 6株。其中 3F10作为金标抗体 ,3A7作为... 目的 :建立一种简便、快速、准确检测人心肌肌钙蛋白I(cTnI)的胶体金免疫层析法。方法 :应用cTnI免疫Balb/c小鼠 ,取脾细胞与SP2 /0骨髓瘤细胞进行细胞融合筛选 ,获得分泌高效价抗cTnI抗体细胞株 6株。其中 3F10作为金标抗体 ,3A7作为生物素化抗体 ,链霉亲合素结合于硝酸纤维素膜 ,制成免疫层析测试条 ,依据测试条上出现肉眼可见的红色线条判定结果。结果 :检测灵敏度可达 0 4ng/ml。测定 30例急性心肌梗塞 (AMI)患者血清cTnI,并与国外同类产品比较 ,两者符合率为 93 6 %。结论 :该方法快速检测cTnI特异性强 ,灵敏度高 ,简便 。 展开更多

关键词 人心肌肌钙蛋白Ⅰ 单克隆抗体 胶体金免疫层析法

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不同抗原表位的cTnⅠ单克隆抗体对cTnⅠ-TnC复合物亲和性的研究

11

作者 何成山 刘洋 +2 位作者 刘路遥 吴豫 陆志成 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第1期189-194,共6页

目的:了解不同心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)抗原表位的单克隆抗体(MAb)对cTnⅠ-肌钙蛋白C(cTnⅠ-TnC)抗原的亲和性,筛选新型cTnⅠ特异性抗体用于临床检测试剂盒研发。方法:基于微阵列化学发光免疫分析技术平台,采用cTnⅠ-TnC抗原点样硬基质芯... 目的:了解不同心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)抗原表位的单克隆抗体(MAb)对cTnⅠ-肌钙蛋白C(cTnⅠ-TnC)抗原的亲和性,筛选新型cTnⅠ特异性抗体用于临床检测试剂盒研发。方法:基于微阵列化学发光免疫分析技术平台,采用cTnⅠ-TnC抗原点样硬基质芯片,以鼠源性cTnⅠMAb为待检抗体,HRP-羊抗鼠IgG为检测抗体,对抗原点样液、抗原点样浓度、待检抗体浓度进行实验条件优化;采用竞争法检测不同抗原表位的cTnⅠMAb对cTnⅠ-TnC的亲和力,实验组为加入梯度浓度的cTnⅠ-TnC,对照组加入等体积稀释液,检测不同cTnⅠMAb的反应信号,计算亲和常数。结果:最优实验条件:抗原点样液为P105,抗原点样浓度为0.1 mg/ml,待检抗体浓度为80 ng/ml;包含TnC抗体的20c6cc和7B9cc MAb亲和性最好,其中20c6cc MAb达3.18×10^(6) L/mol;cTnⅠMAb中位于肽链C端的a.a.r 130~145、169~178和190~196区域的cTnⅠMAb表现出较好的亲和力,其中MAb 625(a.a.r 169~178)为6.37×10^(5) L/mol,在cTnⅠMAb中亲和性最强。结论:cTnⅠ肽链C端a.a.r 130~145、169~178、190~196和TnC区的MAb与cTnⅠ-TnC抗原的亲和性较好,针对该区域设计新型cTnⅠ补位抗体,可作为解决自身抗体及肽链蛋白水解负性干扰的新思路。 展开更多

关键词 心肌肌钙蛋白Ⅰ 肌钙蛋白C 单克隆抗体 亲和性

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实验性心肌损伤大鼠血清心肌肌钙蛋白Ⅰ的检测 被引量：2

12

作者 卞智萍 杨笛 +1 位作者 冯振卿 张寄南 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期477-479,共3页

目的应用抗人cTnI单克隆抗体检测大鼠血清cTnI。方法SD大鼠皮下注射异丙肾上腺素8mg/kg,对照组大鼠注射等体积的生理盐水,4h后处死,观察心肌组织病理改变;应用2株抗人cTnI单克隆抗体建立双抗体夹心ELISA法检测大鼠血清cTnI。结果大鼠注... 目的应用抗人cTnI单克隆抗体检测大鼠血清cTnI。方法SD大鼠皮下注射异丙肾上腺素8mg/kg,对照组大鼠注射等体积的生理盐水,4h后处死,观察心肌组织病理改变;应用2株抗人cTnI单克隆抗体建立双抗体夹心ELISA法检测大鼠血清cTnI。结果大鼠注射异丙肾上腺素后心肌呈散在局灶性病变,表现为心肌纤维呈波浪样改变,部分心肌纤维断裂,心肌间质内炎细胞浸润、水肿。血清cTnI(OD值)明显高于对照组大鼠(1.28±0.78∶0.30±0.22,P<0.01)。结论本实验建立了大鼠血清cTnI双抗体夹心ELISA方法。血清cTnI能反映大鼠心肌病理变化,可作为诊断大鼠心肌损伤的一个可靠指标。 展开更多

关键词 心肌损伤 心肌肌钙蛋白Ⅰ 单克隆抗体 ELISA

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扩张型心肌病抗心肌肌球蛋白抗体与Th细胞亚群分析 被引量：4

13

作者 王秋芬 廖玉华 +1 位作者 龚非力 毛焕元 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期64-65,共2页

关键词 扩张型心肌病 抗心肌肌球蛋白抗体 TH细胞亚群

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生物素-链霉亲和素技术一步法检测人心肌肌钙蛋白T 被引量：2

14

作者 宋晓荣 张海珠 +2 位作者 刘世国 任红斌 冯元春 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2004年第2期241-243,共3页

目的:用已获得的两株抗人心肌肌钙蛋白T(cTnT)单克隆抗体N15C和N16D建立检测cTnT的生物素-链霉亲和素技术一步法。方法:应用酯化生物素对N15C进行标记,应用辣根过氧化物酶对N16D进行标记。将待检血清或抗原标准品、生物素标记的N15C和... 目的:用已获得的两株抗人心肌肌钙蛋白T(cTnT)单克隆抗体N15C和N16D建立检测cTnT的生物素-链霉亲和素技术一步法。方法:应用酯化生物素对N15C进行标记,应用辣根过氧化物酶对N16D进行标记。将待检血清或抗原标准品、生物素标记的N15C和酶标记N16D加入经链霉亲和素包被的96孔酶标板微孔中,然后加入OPD,硫酸终止反应后,在λ=490 nm处读取A值,根据标准曲线求出各样本值。结果:建立的方法检测cTnT,检测灵敏度为1.0μg/L,可定量检测范围为2.0～32.0 μg/L。11例AMI患者和10例正常人用该法进行血清检测,与Enzymun-Test TnT试剂盒相比,阳性符合率为82％,特异性为100％。经重复检测表明本方法检测低浓度cTnT批内变异系数为4.70％,批间变异系数为9.36％;检测高浓度cTnT批内变异系数为3.20％,批间变异系数为8.25％。结论:该方法特异性高,重复性好,较常规双抗体夹心ELISA法有更高的灵敏度。 展开更多

关键词 人 心肌 肌钙蛋白T 单克隆抗体 生物素—链霉亲和素 ELISA

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糖尿病心肌病患者与抗G-蛋白偶联型受体血管紧张素Ⅱ1型受体和肾上腺素能α_1受体自身抗体的初步研究 被引量：3

15

作者 赵林双 廖玉华 +6 位作者 王敏 曹红艳 周子华 向光大 侯洁 乐岭 夏邦顺 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2004年第2期133-135,共3页

目的 :探讨抗G 蛋白偶联型受体血管紧张素Ⅱ 1型受体 (AT1受体 )和肾上腺素能α1受体 (α1受体 )自身抗体是否与糖尿病心肌病发病有关。方法 :以合成的AT1与α1受体多肽片段为抗原 ,应用酶联免疫吸附测定技术 ,检测 196例住院及门诊体... 目的 :探讨抗G 蛋白偶联型受体血管紧张素Ⅱ 1型受体 (AT1受体 )和肾上腺素能α1受体 (α1受体 )自身抗体是否与糖尿病心肌病发病有关。方法 :以合成的AT1与α1受体多肽片段为抗原 ,应用酶联免疫吸附测定技术 ,检测 196例住院及门诊体检者血清中抗G 蛋白偶联型受体AT1和α1受体自身抗体 ,其中糖尿病心肌病患者 46例 (糖尿病心肌病组 ) ,2型糖尿病 5 2例 (糖尿病组 ) ,高血压无靶器官受损患者 5 8例 (高血压组 )及正常对照组 40例。结果 :糖尿病心肌病组抗AT1受体自体抗体阳性率和抗α1受体自身抗体阳性率 ,明显高于糖尿病组、高血压组以及正常对照组 ,有显著性差异 (P均 <0 .0 5～ 0 0 1)。结论 :免疫学机制可能参与糖尿病心肌病病理生理过程。 展开更多

关键词 糖尿病心肌病 抗G-蛋白偶联型受体 血管紧张素Ⅱ1型受体 自身抗体

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牛心肌肌钙蛋白Ⅰ的纯化及鉴定

16

作者 顾春荣 卞智萍 +2 位作者 徐晋丹 杨笛 张寄南 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期586-588,共3页

目的:提取和纯化牛心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)。方法:心室肌经匀浆、离心、盐析提取、CMSephadexC鄄50柱层析、DEAESephadexA鄄50柱层析,获得牛cTnⅠ。结果:从100g湿重牛心肌中获得15mg牛cTnⅠ,SDS鄄PAGE示牛cTnⅠ相对分子质量约为27ku,纯... 目的:提取和纯化牛心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)。方法:心室肌经匀浆、离心、盐析提取、CMSephadexC鄄50柱层析、DEAESephadexA鄄50柱层析,获得牛cTnⅠ。结果:从100g湿重牛心肌中获得15mg牛cTnⅠ,SDS鄄PAGE示牛cTnⅠ相对分子质量约为27ku,纯度约为90%,Western印迹证实纯化的牛cTnⅠ可被抗人cTnⅠ单克隆抗体识别。结论:实验从牛心肌中成功制备cTnⅠ。 展开更多

关键词 心肌肌钙蛋白Ⅰ 牛 纯化 单克隆抗体

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牛心肌肌钙蛋白Ⅰ的提纯

17

作者 曾日亮 沈茜 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第11期1100-1100,S001,共2页

关键词 牛 心肌肌钙蛋白Ⅰ 提纯 单克隆抗体 心肌损伤

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人心肌肌钙蛋白Ⅰ鲁米诺化学发光酶免疫分析法的建立 被引量：3

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作者 李文丽 余鹃 +1 位作者 向军俭 王宏 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期712-717,共6页

目的:制备两株抗人心肌肌钙蛋白Ⅰ(human cardiac troponinⅠ,cTnⅠ)单克隆抗体,建立鲁米诺化学发光酶免疫分析法。方法:制备腹水型单抗、饱和硫酸铵沉淀法和亲和层析柱Protein G纯化抗体,并通过SDS-PAGE和ELISA对抗体特异性进行鉴定,... 目的:制备两株抗人心肌肌钙蛋白Ⅰ(human cardiac troponinⅠ,cTnⅠ)单克隆抗体,建立鲁米诺化学发光酶免疫分析法。方法:制备腹水型单抗、饱和硫酸铵沉淀法和亲和层析柱Protein G纯化抗体,并通过SDS-PAGE和ELISA对抗体特异性进行鉴定,建立鲁米诺化学发光酶免疫分析法,并对30份临床血清样本进行检测。结果:本实验制备的两株单抗(分别命名为Ab1、Ab3;亚型都是Ig G1)能够识别以cTnⅠ单体、cTnⅠ-C复合物和cTnⅠ-T-C复合物不同形式存在的cTnⅠ。Ab1、Ab3的效价分别为1∶80万和1∶40万,亲和力常数分别为1.62×109L/mol、2.60×108L/mol。利用2株单抗建立的鲁米诺化学发光酶免疫分析法检测范围为:6.25~400 ng/ml。对30份临床样本进行检测,阳性检出率为77.3%,阴性检出率为100%。结论:建立了可以检测以cTnⅠ单体、cTnⅠ-C和cTnⅠ-T-C复合物形式存在的cTnⅠ的鲁米诺化学发光酶免疫分析法,具有更高的实用性。 展开更多

关键词 人心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ) 单克隆抗体 化学发光

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白细胞介素21在小鼠病毒性心肌炎中的表达及其与抗ANT抗体的相关性 被引量：8

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作者 杨帆 王红 +1 位作者 谭保平 吴昊 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期453-455,461,共4页

目的:观察病毒性心肌炎(VMC)小鼠急性期不同时点白细胞介素21(IL-21)的表达及其与抗腺嘌呤核苷酸转位子(adenine nucleotide translocator,ANT)抗体的相关性,探究其在VMC发病中的作用及意义。方法:BALB/c小鼠腹腔注射柯萨奇病毒B3(CVB3... 目的:观察病毒性心肌炎(VMC)小鼠急性期不同时点白细胞介素21(IL-21)的表达及其与抗腺嘌呤核苷酸转位子(adenine nucleotide translocator,ANT)抗体的相关性,探究其在VMC发病中的作用及意义。方法:BALB/c小鼠腹腔注射柯萨奇病毒B3(CVB3)建立VMC模型,腹腔注射等量PBS的BALB/c小鼠作为对照组,在注射的第0、1、2、3、4和6周,应用荧光定量逆转录-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测小鼠心肌组织中IL-21mRNA的表达、酶联免疫双夹心抗体法(ELISA)检测血清IL-21蛋白及抗ANT抗体的表达。结果:与对照组比较,VMC小鼠心肌组织中IL-21mRNA及血清中IL-21自1周开始高表达,2周时达峰值,并维持高表达至6周,各时点表达量均高于相应时点的对照组(P<0.05)。血清中抗ANT抗体在第1周时开始升高,2周时达峰值,维持高水平表达至第6周,除0周时点外,VMC小鼠与对照组小鼠比较差异均有统计学意义(P<0.05),Pearson相关分析显示,IL-21与抗ANT抗体存在相关性(r=0.88,P<0.01)。结论:IL-21在VMC小鼠心肌组织及外周血中高表达,并与血清抗ANT抗体呈正相关,提示IL-21参与VMC的发病过程。 展开更多

关键词 心肌炎 白细胞介素21 抗腺苷嘌呤核苷酸转位子抗体

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抗肽抗体在大鼠心肌M_2胆碱受体的免疫组织化学研究 被引量：3

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作者 朱琳 王毅 +2 位作者 杜书章 赵荣瑞 FUMLX 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期438-440,共3页

目的　探讨在扩张型心肌病患者新发现的心脏M2 胆碱受体自身抗体与用人M2 胆碱受体肽段经免疫制备的抗受体抗体对大鼠左右心房和心室M2 胆碱受体的分布位置及其特性的影响。方法　利用免疫组织化学方法及图象分析技术测定M2 胆碱受体... 目的　探讨在扩张型心肌病患者新发现的心脏M2 胆碱受体自身抗体与用人M2 胆碱受体肽段经免疫制备的抗受体抗体对大鼠左右心房和心室M2 胆碱受体的分布位置及其特性的影响。方法　利用免疫组织化学方法及图象分析技术测定M2 胆碱受体在大鼠心房和心室肌细胞的分布位置及其密度的变化。结果　M2 胆碱受体的免疫反应阳性颗粒主要位于远离胞核的胞浆内 ;心房和心室肌细胞均明显存在有免疫阳性反应产物 ,但其分布密度存在有明显差异 ,心房免疫阳性颗粒明显多于心室。用阿托品后 ,心房心室细胞的免疫阳性反应产物明显降低。结论　大鼠M2 胆碱受体主要位于心房和心室肌细胞表面 ,心房M2 胆碱受体的分布密度明显大于心室 ,M2 胆碱受体抗体和受体结合的位点可部分被M2 展开更多

关键词 扩张型心肌病 M2胆碱受体 免疫组化 抗肽抗体

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