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PCR(聚合酶链式反应)仪温度特性的实验研究与分析 被引量:4
1
作者 程远霞 魏燕 +3 位作者 刘宝林 华泽钊 陈颖 鲍彩丽 《仪表技术与传感器》 CSCD 北大核心 2009年第1期31-34,共4页
该文的目的是测量PCR温度的精确性和PCR仪上孔间以及不同循环和不同次测量的温度均一性。PCR程序:95℃(变性),30 s;55℃(退火),40 s;72℃(延伸),50 s;6个循环。孔和管内的温度重复性都很好;变性阶段,孔和管内液体温度与程序温度偏差较大... 该文的目的是测量PCR温度的精确性和PCR仪上孔间以及不同循环和不同次测量的温度均一性。PCR程序:95℃(变性),30 s;55℃(退火),40 s;72℃(延伸),50 s;6个循环。孔和管内的温度重复性都很好;变性阶段,孔和管内液体温度与程序温度偏差较大,孔及管内的温度均一性和重复性均很好;孔内温度不能达到通常所需的温度(90℃以上)的比例为22.2%。退火和延伸阶段孔和管内的温差较小;有2个孔不能达到通常需要的温度。实际温度在各阶段停留的时间分别占设定时间的90%的比例较低。这些缺陷可能导致扩增结果假阳性或假阴性。 展开更多
关键词 聚合链式反应 pcr 临床检验 温度偏差 温度均一性
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常用聚合酶链式反应(PCR)技术概述 被引量:3
2
作者 谢德平 廖宇静 《生物学教学》 北大核心 2009年第2期8-10,共3页
聚合酶链式反应(PCR)技术在过去20多年中,经过不断改良以及与其他研究手段相结合,如今已发展为有数十种之多研究方法的一套技术手段。本文对较常用的几种PCR技术手段的原理、优点、缺点和应用等作了概述。
关键词 聚合链式反应 pcr技术 生物学 扩增
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聚合酶链式反应(PCR)技术在植物病害诊断中的应用 被引量:2
3
作者 邓晓东 刘志昕 郑学勤 《热带农业科学》 1998年第4期48-53,共6页
PCR技术是一项崭新的体外扩增基因的技术 ,已广泛应用于与生命相关的学科的研究。本文从植物病害检测的角度 ,探讨如何应用PCR技术来进行植物病害的检测。
关键词 植物病害 检测 pcr技术 聚合链式反应
全文增补中
聚合酶链式反应(PCR)技术鉴定啤酒腐败菌的最新进展 被引量:9
4
作者 徐岩 张丽苹 顾国贤 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期71-74,共4页
综述了PCR技术在啤酒腐败细菌鉴定方面的应用及最新进展 ;介绍了 3种PCR技术 ,特别讲述了利用这些技术对啤酒中乳酸菌的鉴定 ;并分析了PCR技术的局限性 ,对其应用前景进行了展望。
关键词 聚合 链式反应技术 腐败菌 鉴定 啤酒 pcr技术
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聚合酶链式反应(PCR)的原理和应用 被引量:3
5
作者 林炳辉 吕婷云 《生物技术通报》 CAS CSCD 1990年第5期1-5,共5页
聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)是最近几年在分子生物学领域中一项具有革命性的技术突破.这项新兴的生物技术非常迅速地形成常规的标准程序,为科学家提供了从微量的生物材料中快速得到大量特定遗传物质的实验手段,因而... 聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)是最近几年在分子生物学领域中一项具有革命性的技术突破.这项新兴的生物技术非常迅速地形成常规的标准程序,为科学家提供了从微量的生物材料中快速得到大量特定遗传物质的实验手段,因而PCR技术在基础研究、医学、生物工程学和法医学等许多领域都有着重要的实际应用价值,并对原先建立的分子杂交、序列分析、基因克隆等现代分子生物学技术的发展给以巨大的推动作用。 展开更多
关键词 聚合链式反应 pcr DNA POLYMERASE 生物工程学 基因分析 生物材料 基因克隆 实验手段 拷贝数
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微流控实时荧光聚合酶链式反应成像非均匀性的校正 被引量:5
6
作者 刘勇 钱鸿鹄 +2 位作者 朱灵 赵树弥 张龙 《光学精密工程》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第8期2161-2168,共8页
综合参考标样法和定标校正法的思想,提出了一种用于校正微流控实时荧光聚合酶链式反应(PCR)系统荧光成像非均匀性的"多目标像素区域定标线性校正"算法,以提高其检测结果的准确性。以与PCR荧光标记物SYBR Green光谱特性相似的... 综合参考标样法和定标校正法的思想,提出了一种用于校正微流控实时荧光聚合酶链式反应(PCR)系统荧光成像非均匀性的"多目标像素区域定标线性校正"算法,以提高其检测结果的准确性。以与PCR荧光标记物SYBR Green光谱特性相似的荧光素钠溶液为样本,检测了11种不同浓度的均匀荧光素钠溶液受激发射荧光信号的强度,分析了各个目标像素区域荧光强度和荧光素钠溶液浓度之间的线性响应关系,采用两点定标校正方法计算了CCD各个目标像素区域的校正系数矩阵。实验表明,3种浓度荧光素钠溶液的成像均匀度分别从校正前的71.28%、72.01%、70.73%提高到校正后的77.49%、80.07%、90.64%;微流控四腔芯片中相同浓度的DNA样品在PCR扩增阶段的Ct值相对标准偏差由校正前的4.38%、1.94%、3.31%减小到校正后的2.44%、0.79%、1.31%,显著提高了微流控实时荧光PCR检测结果的准确性。 展开更多
关键词 微流控 聚合链式反应pcr 成像非均匀 非均匀性校正 荧光检测
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聚合酶链式反应技术的研究进展 被引量:4
7
作者 王文君 任军 +2 位作者 陈克飞 丁能水 黄路生 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 2000年第4期599-604,共6页
聚合酶链式反应技术自诞生以来 ,已在生物学及相关学科中得到了广泛应用 ,并得以不断的深入和发展。本文就近年来研究和发展出现的一些特殊PCR技术 ,如 :逆转录PCR、反向PCR、定量PCR、锚定PCR、重组PCR、长PCR、热起动PCR、免疫PCR、复... 聚合酶链式反应技术自诞生以来 ,已在生物学及相关学科中得到了广泛应用 ,并得以不断的深入和发展。本文就近年来研究和发展出现的一些特殊PCR技术 ,如 :逆转录PCR、反向PCR、定量PCR、锚定PCR、重组PCR、长PCR、热起动PCR、免疫PCR、复合PCR、差向显示PCR等作一简述 ,以供参考。 展开更多
关键词 pcr 聚合链式反应技术 研究进展
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硅-玻璃聚合酶链式反应微芯片对β-葡糖苷酸酶基因的扩增 被引量:6
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作者 邹志青 周天 +1 位作者 赵建龙 徐元森 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第1期41-46,共6页
聚合酶链式反应 (PCR)微芯片是基于微机电系统 (MEMS)制作 ,在微芯片上进行PCR反应 ,实现生物样品扩增的一项新技术 .介绍了硅 玻璃PCR微芯片的设计和制作、微反应腔的清洗和表面处理、借助外置温度控制系统进行PCR扩增反应以及扩增产... 聚合酶链式反应 (PCR)微芯片是基于微机电系统 (MEMS)制作 ,在微芯片上进行PCR反应 ,实现生物样品扩增的一项新技术 .介绍了硅 玻璃PCR微芯片的设计和制作、微反应腔的清洗和表面处理、借助外置温度控制系统进行PCR扩增反应以及扩增产物在琼脂糖凝胶电泳下的检测分析 ,实现了对 β 葡糖苷酸酶 (GUS)基因的有效扩增 ,扩增时间由原来的 90min缩短到现在的 37min . 展开更多
关键词 pcr微芯片 MEMS技术 表面处理 硅-玻璃聚合链式反应 生物芯片技术
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动物园猫瘟热净化的新手段——聚合酶链式反应 被引量:3
9
作者 邱薇 夏咸柱 +7 位作者 范泉水 何洪彬 黄耕 余春 乔军 武银莲 范秀军 王春华 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2001年第5期14-15,共2页
关键词 动物园 猫瘟病毒 热净化 聚合链式反应 pcr技术
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聚合酶链式反应检测猪细小病毒方法的研究 被引量:7
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作者 戎伟 杨润德 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期465-467,共3页
本研究依据编码猪细小病毒结构蛋白VP2基因序列,合成了一对寡核苷酸引物,通过减少病毒核酸的提取时间、费用及优化聚合酶链式反应(PCR)的条件,成功地从猪细小病毒(PPV)感染的细胞中扩增出预期的158bp片段,经EcoRⅠ酶切鉴定,证实了该扩... 本研究依据编码猪细小病毒结构蛋白VP2基因序列,合成了一对寡核苷酸引物,通过减少病毒核酸的提取时间、费用及优化聚合酶链式反应(PCR)的条件,成功地从猪细小病毒(PPV)感染的细胞中扩增出预期的158bp片段,经EcoRⅠ酶切鉴定,证实了该扩增片段的特异性。经敏感性试验测定,PCR的最低检出量为0 008病毒血凝(HA)单位。这些结果表明本试验建立的PCR对PPV的检测人有快速、简便、经济、灵敏度高和特异性强的特点。 展开更多
关键词 聚合链式反应 特异性 pcr 病毒核酸 血凝 HA 感染 猪细小病毒 PPV 扩增片段
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应用聚合酶链式反应检测细胞培养物和细胞培养用小牛血清支原体污染 被引量:2
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作者 郭玉广 南文龙 +6 位作者 张春艳 宫晓 李金积 张文学 李明义 范根成 杜元钊 《中国动物检疫》 CAS 北大核心 2005年第7期30-32,共3页
支原体污染是细胞培养中普遍存在的突出问题,直接影响细胞培养的成败以及以细胞培养为基础的科学实验结果的准确性。本试验用聚合酶链式反应(套式PCR)对实验室中生长不良的3种细胞系、11种细胞培养用小牛血清进行了检测。结果显示,3种... 支原体污染是细胞培养中普遍存在的突出问题,直接影响细胞培养的成败以及以细胞培养为基础的科学实验结果的准确性。本试验用聚合酶链式反应(套式PCR)对实验室中生长不良的3种细胞系、11种细胞培养用小牛血清进行了检测。结果显示,3种细胞系的第一次PCR扩增结果为全部为阳性,检出率为100%;11种细胞培养用小牛血清第一次PCR扩增后8种样品为阳性,对第一次PCR扩增为阴性的血清样品进行第二次PCR扩增结果全部为阳性,检出率100%。传统的支原体检测繁琐、费时、周期长而受到限制,本试验使用的套式PCR法为细胞培养工作中检测支原体污染提供了一种敏感、快速、特异的方法。 展开更多
关键词 聚合链式反应 支原体污染 牛血清 细胞培养物 检测 pcr扩增 应用 科学实验 直接影响 生长不良 血清样品 培养工作 pcr 细胞系 检出率 准确性 实验室 阳性 试验
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使用中的聚合酶链式反应仪的温度分布及维护 被引量:5
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作者 娄沂春 《实验室研究与探索》 CAS 2001年第2期109-111,共3页
聚合酶链式反应仪 ( PCR仪 )是分子生物学的基本仪器。它通过设定不同温度变化条件对被扩增的 DNA片段进行变性、退火和聚合处理 ,以达到将 DNA片段的量成倍地扩增的目的。因此温度的分布和准确程度 ,尤其是各个温度的时间控制直接影响 ... 聚合酶链式反应仪 ( PCR仪 )是分子生物学的基本仪器。它通过设定不同温度变化条件对被扩增的 DNA片段进行变性、退火和聚合处理 ,以达到将 DNA片段的量成倍地扩增的目的。因此温度的分布和准确程度 ,尤其是各个温度的时间控制直接影响 DNA片段扩增的效率。通过定期对使用中的 PCR仪进行检测 ,可以了解仪器的工作状况 ,及时发现问题并加以维护、保养。 展开更多
关键词 聚合链式反应 温度分布 pcr 分子生物学 DNA 仪器维护 PE480型仪器
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聚合酶链式反应技术在生物学及医学中的应用
13
作者 王静波 胡长龙 徐宏发 《生物学教学》 北大核心 2001年第6期3-5,共3页
关键词 聚合链式反应技术 生物学 医学 DNA pcr技术 技术原理 组织器官移植 配型选择 传染病诊断
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食品中荧光假单胞菌聚合酶链式反应检测体系的建立和评价 被引量:2
14
作者 杨一林 周敏 +2 位作者 施春雷 杨捷琳 史贤明 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第20期185-190,共6页
建立用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测食品中荧光假单胞菌的方法。分别针对16~23S rRNA基因间隔区序列、gyrB基因以及通过生物信息学方法发掘到的4个种特异性基因设计6对检测引物,通过初步特异性实验,筛选出一对... 建立用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测食品中荧光假单胞菌的方法。分别针对16~23S rRNA基因间隔区序列、gyrB基因以及通过生物信息学方法发掘到的4个种特异性基因设计6对检测引物,通过初步特异性实验,筛选出一对种特异性最佳的引物。最终建立以gyrB基因为检测靶点的PCR扩增体系,并对体系进行系统评价。结果表明:该方法可特异检测荧光假单胞菌的存在,纯DNA检测灵敏度为14.9fg/μL(2~3拷贝/μL),纯培养物检测灵敏度为2.8×102CFU/mL。豆奶样品经15h充分增菌可提高检测灵敏度至0.28CFU/25g。 展开更多
关键词 荧光假单胞菌 gyrB基因 聚合链式反应(pcr) 检测 食品
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普通聚合酶链式反应鉴定牛肉及其制品中的牛源性成分 被引量:3
15
作者 陈晓宇 陆利霞 +2 位作者 熊雄 刘元建 熊晓辉 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期215-222,共8页
依据牛种属的线粒体细胞色素b(cytochrome b,Cytb)基因上的保守序列设计牛源特异性引物对,建立一种特异性强、灵敏性高、耗时短的鉴定食品中牛源性成分的聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)方法。选取牦牛、水牛、黄牛品种... 依据牛种属的线粒体细胞色素b(cytochrome b,Cytb)基因上的保守序列设计牛源特异性引物对,建立一种特异性强、灵敏性高、耗时短的鉴定食品中牛源性成分的聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)方法。选取牦牛、水牛、黄牛品种及羊、猪、鸡、鸭、鹅、兔、马、驴、鱼、大豆、玉米等动植物源成分进行特异性试验。结果显示:所建立的方法高度特异于牛源性检测,其他非牛动植物源成分均无扩增条带。采用常见的牛品种进行灵敏性试验,结果显示所建立的方法可检测到的最低牛DNA量为0. 2 pg;将牛肉分别与猪肉、驴肉、羊肉、大豆组织混合进行PCR测定,结果表明最低检测限为鲜样品含0. 01%质量分数的牛源成分,高压121℃、0. 1MPa,20 min处理样品含0. 01%质量分数的牛源成分。对市售食品中牛源性成分检测结果与现行PCR牛源性成分检测标准方法的检测结果 100%一致。 展开更多
关键词 聚合链式反应(pcr) 细胞色素b(Cytb)基因 牛源性成分 鉴定
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硅对聚合酶链式反应抑制作用的实时定量实验研究 被引量:1
16
作者 雷银花 王玮 +1 位作者 王海滨 李志宏 《传感技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期203-206,共4页
采用实时定量PCR的方法研究了硅表面对乙肝病毒(HBV)DNA扩增过程的抑制作用。实验中采用HF处理的H终止硅和与自然氧化的硅片作为样品,按照1.0mm2/μL和5.2mm2/μL的面体比(硅片总表面积与PCR反应液的体积之比)与PCR反应液预混合(未加DN... 采用实时定量PCR的方法研究了硅表面对乙肝病毒(HBV)DNA扩增过程的抑制作用。实验中采用HF处理的H终止硅和与自然氧化的硅片作为样品,按照1.0mm2/μL和5.2mm2/μL的面体比(硅片总表面积与PCR反应液的体积之比)与PCR反应液预混合(未加DNA样品,同时,TaqDNA聚合酶的浓度分别为0.2U/35μL和1.0U/35μL),充分混合预设的时间后,取出硅片,汲取上清液与DNA样品混合后采用实时定量PCR仪SlanTM进行扩增。扩增结果的荧光曲线表明:自然氧化的硅样品对PCR抑制作用更强,其对Taq聚合酶的抑制效果大于4.4mU/mm2;高面体比条件下,即使在初始扩增阶段,也达不到理想的指数形式;缩短芯片反应时间有利于降低材料对扩增的抑制效应。 展开更多
关键词 硅抑制作用 聚合链式反应 实时定量pcr
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聚合酶链式反应(PCR)技术及其在水产业的应用
17
作者 谢丹丹 《福建水产》 1994年第4期65-67,共3页
聚合酶链式反应(Potgnerase Chain Reaction,PCR)由美国PE公司遗传部的Mullis于1984年发明建立,Mullis因此而获93年度诺贝尔化学奖;1985年,Sairi等人首先于《Science》杂志上完整地描述了该反应,1987年美国专利局授予PCR技术专利。... 聚合酶链式反应(Potgnerase Chain Reaction,PCR)由美国PE公司遗传部的Mullis于1984年发明建立,Mullis因此而获93年度诺贝尔化学奖;1985年,Sairi等人首先于《Science》杂志上完整地描述了该反应,1987年美国专利局授予PCR技术专利。1988年,Muilis等人又从黄石公园温泉中分离出嗜热菌Thermus aouaticus并从中提取Tag DNA聚合酶, 展开更多
关键词 聚合链式反应 pcr) pcr技术 DNA聚合 PE 遗传 分离 水产业 公司 年度
全文增补中
聚合酶链式反应技术及应用简介
18
作者 周彬 蔡立权 《生物学教学》 1999年第2期3-5,共3页
关键词 pcr 聚合链式反应 应用
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聚合酶键式反应生物芯片/微装置的实时定量荧光检测
19
作者 章春笋 徐进良 《分析科学学报》 CAS CSCD 2006年第1期102-107,共6页
以微电子机械系统技术而发展起来的聚合酶链式反应(Polymerase Chain Re-action,PCR)生物芯片/微装置,由于具有所需样品和反应混合物体积少,反应速度快以及集成化程度高等优点而日益引起人们的重视。实时定量PCR是利用能特异标记PCR产... 以微电子机械系统技术而发展起来的聚合酶链式反应(Polymerase Chain Re-action,PCR)生物芯片/微装置,由于具有所需样品和反应混合物体积少,反应速度快以及集成化程度高等优点而日益引起人们的重视。实时定量PCR是利用能特异标记PCR产物的荧光染料来动态显示PCR产物的累积,从而得到PCR扩增曲线的技术。本文介绍了实时定量检测技术及其在PCR生物芯片/微装置中的应用。 展开更多
关键词 聚合链式反应(pcr) 实时定量检测 生物芯片/微装置 荧光检测
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鸽疱疹病毒gB基因SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法的建立与应用
20
作者 李鹏 苏和 +4 位作者 韩慧敏 孟海 王昊 王凤雪 温永俊 《中国家禽》 北大核心 2025年第3期93-99,共7页
为建立检测鸽疱疹病毒(PiHV)的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR(qPCR)方法,研究根据PiHV gB基因的高度保守区域设计特异性引物,构建质粒作为标准品建立PiHV qPCR检测方法,并进行敏感性和特异性试验。结果显示:建立的PiHV qPCR方法最低DNA检出... 为建立检测鸽疱疹病毒(PiHV)的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR(qPCR)方法,研究根据PiHV gB基因的高度保守区域设计特异性引物,构建质粒作为标准品建立PiHV qPCR检测方法,并进行敏感性和特异性试验。结果显示:建立的PiHV qPCR方法最低DNA检出浓度为8.62×10^(2)拷贝/μL,敏感性比普通PCR方法高100倍,可特异性区分鸽疱疹病毒与其他多种常见感染鸽的细菌和病毒,其批内变异系数小于1%,批间变异系数小于2%;应用该方法对呼和浩特市及周边地区赛鸽公棚和鸽养殖场采集的30份疑似病鸽肝脏样品进行检测,可快速准确地检出样品中的PiHV,并且检出率比普通PCR方法高。研究表明,建立的PiHV qPCR检测方法特异性强,敏感性较高,能够应用于赛鸽、肉鸽等的鸽疱疹病毒快速检测。 展开更多
关键词 鸽疱疹病毒 SYBR Green 荧光定量pcr 聚合链式反应 GB基因
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