多重PCR技术在动物疫病诊断中的应用 被引量：28

1

作者 曹洪志 颜其贵 +3 位作者 郭万柱 樊汶樵 肖雪 李成贤 《中国动物检疫》 CAS 北大核心 2007年第1期45-47,共3页

聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction．PCR）技术已经建立20余年．在这20多年里．它被广泛应用于生命科学各个领域．已经显示出了强大的工具性作用和旺盛的生命力。PCR技术的广泛应用同时也带动了自身的发展．而PCR的发展又产生... 聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction．PCR）技术已经建立20余年．在这20多年里．它被广泛应用于生命科学各个领域．已经显示出了强大的工具性作用和旺盛的生命力。PCR技术的广泛应用同时也带动了自身的发展．而PCR的发展又产生了一些新的应用．多重PCR技术就是其中之一。在疾病的诊断方面．人们一直在梦想寻找一种高度特异、敏感和简便的方法能同时将需要鉴别诊断的疾病一次性地得到确诊．多重PCR技术的出现。无疑使之成为了可能。它不仅使疾病在分子水平上得到了确诊．而且在类症鉴别上具有其他诊断方法无可比拟的优越性。 展开更多

关键词 多重pcr技术 疫病诊断 应用 聚合酶链式反应 动物 生命科学 鉴别诊断

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多重PCR技术在动物病原检测中的应用 被引量：18

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作者 黄溢泓 韦正吉 +5 位作者 李志源 盘美妮 黄小武 李璧梅 蒋柳平 马小蓉 《广西农业科学》 CSCD 2009年第4期423-426,共4页

多重PCR技术是近几年兴起的一项新技术,具有高效快捷、高度特异敏感、实验成本低等优点,能够同时扩增出多个核酸片段,具有普通PCR方法不可比拟的优越性。文章主要论述了多重PCR技术的影响因素、条件优化以及多重PCR技术在动物病毒病原... 多重PCR技术是近几年兴起的一项新技术,具有高效快捷、高度特异敏感、实验成本低等优点,能够同时扩增出多个核酸片段,具有普通PCR方法不可比拟的优越性。文章主要论述了多重PCR技术的影响因素、条件优化以及多重PCR技术在动物病毒病原体、细菌病原体、动物产品及寄生虫和微生物耐药性等方面的检测应用,指出当前应用PCR技术对动物疫病病原诊断中存在的问题,并提出了解决问题的方法。 展开更多

关键词 多重pcr技术 影响因素 动物病原 检测

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多重PCR技术分析日本对虾Marsupenaeus japonicus精巢和卵巢差异表达基因 被引量：2

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作者 王艺磊 贾锡伟 +1 位作者 邹志华 张子平 《科学技术与工程》 2004年第5期374-379,共6页

通过多重PCR方法 ,对采用SSH(抑制消减杂交 )技术制备日本对虾卵巢特异探针并筛选卵巢cDNA全长文库所获得的 8个阳性克隆进行分析 ,研究这些新克隆的基因在精巢和卵巢的差异表达情况。这 8个基因可分为二类 ,一类为卵巢特异表达的基因 。

关键词 多重pcr技术 日本对虾 精巢 卵巢 基因表达 抑制消减杂交 基因克隆

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多重PCR技术在寄生虫病诊断上的应用及其建立方法的浅析

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作者 石云良 黄维义 +2 位作者 张为宇 施维 王树艳 《广西畜牧兽医》 2010年第1期59-60,共2页

关键词 多重pcr技术 临床诊断 寄生虫病 应用 病原体感染 立方 pcr方法 细菌性疾病

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多重PCR技术在实验动物病原检测中的应用 被引量：19

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作者 张飞燕 赵玲 +2 位作者 金洁 王芸 吕龙宝 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2018年第10期111-116,共6页

多重PCR作为一种新型的分子生物学检测技术,具有高效、快捷、特异性和灵敏度高等优点,能够同时扩增出多个核酸片段,克服了普通PCR缺点,实现了对多种病原微生物的同时检测,为临床病原鉴别诊断、基因分型、耐药基因等领域的研究提供了新思... 多重PCR作为一种新型的分子生物学检测技术,具有高效、快捷、特异性和灵敏度高等优点,能够同时扩增出多个核酸片段,克服了普通PCR缺点,实现了对多种病原微生物的同时检测,为临床病原鉴别诊断、基因分型、耐药基因等领域的研究提供了新思路,具有较大的发展前景。笔者对多重PCR的原理及技术特点,多重PCR技术在实验动物病毒、细菌、寄生虫病原体和微生物耐药等方面进行综述,旨在为多重PCR技术应用在实验动物疫病病原体的检测提供参考依据。 展开更多

关键词 多重pcr技术 实验动物 病原检测

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多重PCR技术在食品安全检测中的应用 被引量：6

6

作者 宋岱松 《山东畜牧兽医》 2009年第5期57-58,共2页

食品安全是一个越来越引起人们重视的问题，不仅影响到人们的生活、工作和健康，更是关系到国计民生的大事。在各种食物中毒中，细菌性食物中毒是食物中毒的主要因素。食源性疾病原的检测技术是食源性疾病的预防与控制的关键技术环节。... 食品安全是一个越来越引起人们重视的问题，不仅影响到人们的生活、工作和健康，更是关系到国计民生的大事。在各种食物中毒中，细菌性食物中毒是食物中毒的主要因素。食源性疾病原的检测技术是食源性疾病的预防与控制的关键技术环节。目前我们国家虽然制定相关的食物中毒病原菌检验方法，由于检测方法均采用经典、耗时较长的方法，且存在国内试剂供应不配套等问题， 展开更多

关键词 多重pcr技术 食品安全检测 食源性疾病 食物中毒 应用 检测技术 检验方法 病原菌

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烤烟品种的多重PCR技术标记鉴别

7

作者 贾梦珠 孙九喆 +7 位作者 苏东赢 杨金初 王二彬 许衡 王永超 王君婷 孟丹丹 马林 《轻工学报》 CAS 2017年第3期51-57,共7页

以12份烤烟品种为模板,针对6对SCAR引物进行引物比例和退火温度的条件优化,采用多重PCR技术,建立了12份烤烟品种的多重PCR指纹图谱和鉴别路线.结果表明,同普通PCR相比,多重PCR具有高效、快速、节约时间、成本低的优点,6对SCAR引物稳定... 以12份烤烟品种为模板,针对6对SCAR引物进行引物比例和退火温度的条件优化,采用多重PCR技术,建立了12份烤烟品种的多重PCR指纹图谱和鉴别路线.结果表明,同普通PCR相比,多重PCR具有高效、快速、节约时间、成本低的优点,6对SCAR引物稳定性好、条带特异性强,能准确区分12份烤烟品种. 展开更多

关键词 多重pcr技术 SCAR标记 烤烟品种鉴别 指纹图谱

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动物疫病诊断中多重PCR技术的应用 被引量：5

8

作者 刘海成 《中国畜禽种业》 2015年第8期32-33,共2页

随着PCR技术的不断发展,现在逐渐诞生一种多重PCR技术,这种技术能够一次性的鉴别多重疾病,使得疫病诊断上升到了分子水平,有着非常大的优势,本文从实际的工作经验出发,探索多重PCR技术在动物疫病诊断中的应用。

关键词 动物疫病诊断 多重pcr技术 DNA体外扩增

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动物疫病诊断中多重PCR技术的应用 被引量：1

9

作者 孙博 叶阳 +4 位作者 任德强 张健 张立恒 宋新刚 郭伟 《畜牧兽医科技信息》 2020年第8期69-69,共1页

随着我国生物技术的不断进步,多重PCR技术也开始应用于动物疫病的诊断,该技术可以一次性对多种疾病加以鉴定,促使动物疫病的诊断水平上升到了分子水平,而且具有的优势非常明显。所以,本文深入探讨了多重PCR技术的优点,应用和存在的问题... 随着我国生物技术的不断进步,多重PCR技术也开始应用于动物疫病的诊断,该技术可以一次性对多种疾病加以鉴定,促使动物疫病的诊断水平上升到了分子水平,而且具有的优势非常明显。所以,本文深入探讨了多重PCR技术的优点,应用和存在的问题,供参考。 展开更多

关键词 动物疫病 诊断 多重pcr技术

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多重PCR技术可用于肠炎沙门菌鉴定

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作者 吕玲 《中国家禽》 北大核心 2010年第6期70-70,共1页

全球的食源性疾病发生率日益增多，其中沙门菌类细菌是食物性中毒的来源之一，在某些情况下这些细菌可导致死亡。巴西利亚大学动物卫生项目组的科研人员采用多重PCR技术（mPCR）就家禽屠体（127份）和内脏（73份）中的肠炎沙门菌、伤寒... 全球的食源性疾病发生率日益增多，其中沙门菌类细菌是食物性中毒的来源之一，在某些情况下这些细菌可导致死亡。巴西利亚大学动物卫生项目组的科研人员采用多重PCR技术（mPCR）就家禽屠体（127份）和内脏（73份）中的肠炎沙门菌、伤寒沙门菌和鼠伤寒沙门菌的快速鉴定进行了试验。 展开更多

关键词 鼠伤寒沙门菌 多重pcr技术 快速鉴定 肠炎 疾病发生率 家禽屠体 科研人员 动物卫生

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多重PCR技术在动物疫病诊断中的应用探讨

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作者 陈志龙 《吉林畜牧兽医》 2019年第12期96-97,共2页

一般的PCR 技术只能运用于一对引物当中,且在该技术干预下只能扩增出一个核酸片段,一般PCR 技术只能对单一致病因子进行鉴定。随着现代医疗技术的发展,一般PCR 技术逐渐发展出多重PCR 技术。

关键词 致病因子 现代医疗技术 多重pcr技术 核酸片段 技术干预 动物疫病诊断 应用探讨 pcr

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同时检测猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、猪圆环病毒的多重PCR技术

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《中国猪业》 2013年第5期74-74,共1页

本试验设计了一种多重聚合酶链反应（PCR）技术，可用于同时检测与猪繁殖和呼吸衰竭相关的3种病毒一猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪瘟病毒（CSFV）和猪圆环病毒2型（PCV2）。根据3种病毒的靶序列设计引物，

关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 多重pcr技术 猪圆环病毒2型 同时检测 猪瘟病毒 多重聚合酶链反应 试验设计 呼吸衰竭

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基于多重长PCR靶向捕获测序技术的高同源SNP鉴定 被引量：2

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作者 王决恒 周宇荀 +1 位作者 李凯 肖君华 《东华大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2024年第1期163-170,共8页

为建立一种高同源区段的单核苷酸多态性(SNP)基因分型技术,通过构建本地Blast对SNP所在的200和400 bp区段进行同源性评估,并筛选出高同源区段的SNP。利用第一轮多重长PCR(polymerase chain reaction)捕获329个样本的9个高同源区段SNP所... 为建立一种高同源区段的单核苷酸多态性(SNP)基因分型技术,通过构建本地Blast对SNP所在的200和400 bp区段进行同源性评估,并筛选出高同源区段的SNP。利用第一轮多重长PCR(polymerase chain reaction)捕获329个样本的9个高同源区段SNP所在的长片段,使用纯化后的第一轮PCR产物作为模板进行扩增子建库测序,检测样本共得2 928个SNP位点信息,测序成功率高达98.885 6%。利用Hardy-Weinberg(HWE)法则计算试验研究的9个高同源区段SNP位点的基因频率(p值均大于0.05,符合HWE法则),并与NCBI(national center for biotechnology information)中千人基因组数据库中获取的基因频率相比对,发现二者单碱基基因频率一致(误差限<0.15)。研究表明,利用多重长PCR靶向捕获技术结合二代测序技术为高同源区段的SNP分型提供一个准确、快速、大样本检测方案。 展开更多

关键词 SNP分型 高同源区段 多重长pcr靶向捕获技术 高通量测序

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应用多重竞争性PCR联合毛细管电泳技术进行脊髓性肌萎缩症携带者筛查 被引量：2

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作者 李烨荣 吕娟 +3 位作者 王玉国 谭建新 邵彬彬 张菁菁 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期618-628,共11页

脊髓性肌萎缩症(spinal muscular atrophy,SMA)是一种常染色体隐性遗传、儿童致死性神经系统疾病。SMA致病基因为运动神经元存活基因(survival motor neuron1,SMN1)。虽然检测SMN1基因拷贝数的方法众多,但目前适于大规模人群筛查的技术... 脊髓性肌萎缩症(spinal muscular atrophy,SMA)是一种常染色体隐性遗传、儿童致死性神经系统疾病。SMA致病基因为运动神经元存活基因(survival motor neuron1,SMN1)。虽然检测SMN1基因拷贝数的方法众多,但目前适于大规模人群筛查的技术较少。为寻求一种快速准确的实验技术可以用于人群中SMA携带者的大规模筛查,了解区域人群携带情况及常见变异的分布,本研究应用多重竞争性PCR联合毛细管电泳技术检测12例SMA患者及其父母SMN1基因拷贝数,同时对江苏地区151例健康孕妇人群SMN1基因进行拷贝数检测,并通过多重连接依赖探针扩增(multiplex ligation-dependent probe amplification,MLPA)技术验证检测结果。多重竞争性PCR联合毛细管电泳技术结果与MLPA结果一致,显示12例SMA患者均为SMN1基因零拷贝,其父母的SMN1基因拷贝数均为单拷贝,151例健康人群中检测出SMN1基因单拷贝3例(即SMA携带者),占2.0%;SMN1基因双拷贝134例,占88.7%;SMN1基因大于双拷贝14例,占9.3%。因此,多重竞争性PCR联合毛细管电泳技术作为一种快速、简便和准确的检测技术具有着应用于人群中SMA携带者的大规模筛查的潜力。 展开更多

关键词 脊髓性肌萎缩症 多重竞争性pcr联合毛细管电泳技术 SMN1基因 携带者筛查

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H_5、H_9亚型禽流感病毒和新城疫病毒的多重RT-PCR检测

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作者 谢青梅 王敬师 +4 位作者 李少璃 陈丽 马静云 曹永长 毕英佐 《广东畜牧兽医科技》 2006年第3期35-37,共3页

根据Genbank注册发表的H5、H9亚型禽流感病毒(AIV)的HA基因和新城疫病毒(NDV)的HA基因序列,设计多对引物,每种病毒各筛选出一对特异性好、灵敏度高的引物,其中FP1/FP2扩增H5亚型AIVHA基因片断长为545bp;P3/P4扩增H9亚型AIVHA基因片断长... 根据Genbank注册发表的H5、H9亚型禽流感病毒(AIV)的HA基因和新城疫病毒(NDV)的HA基因序列,设计多对引物,每种病毒各筛选出一对特异性好、灵敏度高的引物,其中FP1/FP2扩增H5亚型AIVHA基因片断长为545bp;P3/P4扩增H9亚型AIVHA基因片断长为321bp;P11/P22扩增NDVHA基因片断长为672bp。用RT-PCR方法,通过特异性试验、灵敏度试验,H5、H9亚型AIV和NDV引物的灵敏度分别达到了1:104、1:108、1:104稀释度,与传染性支气管炎(IB)、传染性法氏囊病(IBD)、传染性喉气管炎(ILTV)、传染性鼻炎(IC)、霉形体(MS)、H1N1猪流感等抗原无交叉反应。实验结果表明,本研究建立了检测H5、H9亚型AIV和NDV的多重RT-PCR方法,混合引物的最佳退火温度为50℃,鉴定检测仅需4小时。 展开更多

关键词 H5、H9亚型禽流感病毒 新城疫病毒 多重RT—pcr技术

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应用多重反转录-聚合酶链反应检测鸡新城疫病毒和传染性支气管炎病毒的研究 被引量：30

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作者 谢芝勋 庞耀珊 +1 位作者 谢志勤 邓显文 《中国预防兽医学报》 CSCD 2000年第2期126-130,共5页

本文建立了一种同时检测NDV和IBV二种病原体的多重PCR技术。根据NDV和IBV的基因文库 ,设计了两对分别与NDV和IBV某段基因序列互补的引物 ,用这两对引物对同一样品中NDV和IBVRNA模板进行多重RT_PCR扩增 ,结果均同时得到了两条特异性的大... 本文建立了一种同时检测NDV和IBV二种病原体的多重PCR技术。根据NDV和IBV的基因文库 ,设计了两对分别与NDV和IBV某段基因序列互补的引物 ,用这两对引物对同一样品中NDV和IBVRNA模板进行多重RT_PCR扩增 ,结果均同时得到了两条特异性的大小与实验设计相符的 31 0bp(NDV)和 1 72 0bp(IBV)多重的RT_PCR扩增带 ,而对其他 6种禽病病原的PCR扩增结果均为阴性 ;敏感性测定结果表明 ,该多重RT_PCR技术能同时检出 1 0pg的NDV和 1 0 0pg的IBVRNA模板。 展开更多

关键词 IBV NDV 多重pcr技术 病原检测

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中国汉族人群N-乙酰基转移酶1基因多态性的检测分析

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作者 徐张巍 梅俏 +2 位作者 许建明 胡乃中 胡咏梅 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2005年第2期153-156,共4页

目的　探讨N 乙酰基转移酶1(NAT1)基因型检测方法及其基因多态性的分布。方法　在140名汉族健康人的外周血中,应用聚合酶链反应(PCR)限制性片段长度多态性分析(RFLP)及多重PCR技术,进行NAT1等位基因分型研究。结果　应用PCR- RFLP+多重... 目的　探讨N 乙酰基转移酶1(NAT1)基因型检测方法及其基因多态性的分布。方法　在140名汉族健康人的外周血中,应用聚合酶链反应(PCR)限制性片段长度多态性分析(RFLP)及多重PCR技术,进行NAT1等位基因分型研究。结果　应用PCR- RFLP+多重PCR方法避免了多种限制性内切酶之间相互干扰,可准确区分NAT1基因型。在140名检测标本中,NAT1* 3,NAT1* 4,NAT1* 10和NAT1* 11的发生频率分别是8 .2%、49. 6%、40%和2 2%。NAT1* 4发生率明显低于欧美人群,但高于东南亚人群;而NAT1* 10的发生率高于欧美人群,NAT1* 3和NAT1* 11的发生率较低,与大多数亚洲人群基本一致。结论　PCR RFLP+多重PCR方法检测NAT1基因型特异性高;NAT1基因型分布与其他国家检测情况有所差异。 展开更多

关键词 N-乙酰基转移酶 基因多态性 中国汉族人群 检测分析 限制性片段长度多态性分析 聚合酶链反应(pcr) 多重pcr技术 NAT1 pcr方法 限制性内切酶 基因型分布 发生率 检测方法 分型研究 等位基因 相互干扰 检测标本 发生频率

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海南不同地区红火蚁社会型鉴定

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作者 杨复香 刘锦龙 +2 位作者 张国庆 周爱明 李磊 《热带农业科学》 2023年第1期51-54,共4页

为明确海南部分地区红火蚁的社会型,通过多重PCR(Multiplex Polymerase Chain Reaction)技术及Gp-9^(b)等位基因扩增2种方法,鉴定分析了采集自海南万宁、琼海、海口、陵水、文昌、屯昌和儋州7个不同地区的红火蚁的社会型。鉴定结果表明... 为明确海南部分地区红火蚁的社会型,通过多重PCR(Multiplex Polymerase Chain Reaction)技术及Gp-9^(b)等位基因扩增2种方法,鉴定分析了采集自海南万宁、琼海、海口、陵水、文昌、屯昌和儋州7个不同地区的红火蚁的社会型。鉴定结果表明,采自7个地区的不同蚁巢社会型均为多蚁后型。本研究对海南地区科学监测红火蚁具有重大意义,同时为增强红火蚁的防治效果提供理论依据。 展开更多

关键词 红火蚁 社会型 多重pcr技术 Gp-9^(b)等位基因

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251份藜麦种质资源遗传多样性及分子身份证构建 被引量：13

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作者 刘彬 赵雨露 +8 位作者 杨鑫雷 张建恒 孙鑫博 刘晓清 温晓敏 耿艳楼 李悦有 穆国俊 吕玮 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期706-721,共16页

藜麦(Chenopodium quinoa Willd.)种质资源的准确鉴别是遗传多样性研究及藜麦种业和产业发展的前提和基础。本研究利用MultipSeq多重PCR扩增子捕获技术获得656个SNP,对251份藜麦种质资源进行遗传多样性分析,并利用perl脚本构建每份种质... 藜麦(Chenopodium quinoa Willd.)种质资源的准确鉴别是遗传多样性研究及藜麦种业和产业发展的前提和基础。本研究利用MultipSeq多重PCR扩增子捕获技术获得656个SNP,对251份藜麦种质资源进行遗传多样性分析,并利用perl脚本构建每份种质资源的DNA指纹图谱,基于指纹图谱信息构建个体分子身份证。群体遗传结构分析表明,251份种质资源被划分为2个类群Ⅰ和Ⅱ,分别对应安第斯高原型藜麦群和智利低海拔型藜麦群;类群Ⅰ、Ⅱ群体遗传多样性指数分别为0.0037和0.0036,群体分化指数为0.14;群体主成分分析结果与群体遗传结构分析结果完全一致,类群间存在部分遗传交叉现象;系统发育分析显示类群Ⅰ包括以玻利维亚、秘鲁为主的152份种质资源,类群Ⅱ包括以智利为主的99份种质资源,其中类群Ⅰ又进一步划分为Ⅰ-1和Ⅰ-2两个亚群,亚群Ⅰ-1、Ⅰ-2的Nei′s遗传距离为0.054。112份河北石家庄种质材料中,40份与玻利维亚种质群亲缘关系较近、24份与秘鲁种质群亲缘关系较近、48份与智利种质群亲缘关系较近。本研究构建的251份藜麦种质材料分子身份证能够达到对种质材料溯源和保护的作用,同时群体遗传多样性分析结果对于我国藜麦种质资源划分和系统整理具有一定的参考意义。 展开更多

关键词 藜麦 种质资源 多重pcr扩增子捕获测序技术 SNP 分子身份证

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禽流感病毒快速诊断获批启动研究

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《北方牧业》 2007年第21期13-13,共1页

通过多重PCR技术，包括禽流感、SARS等呼吸道疾病的病原微生物只需4个小时就能被检测出。11月4日，上海市科委已批准复旦大学附属中山医院启动病原微生物快速诊断项目的研究.

关键词 禽流感病毒 快速诊断 多重pcr技术 病原微生物 呼吸道疾病 上海市科委 SARS 复旦大学

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