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胰岛素样生长因子1-磷脂酰肌醇3激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白通路对T细胞与角质形成细胞共培养模型中炎性细胞因子的影响
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作者 马瑞洁 谭雅芹 周刚 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2019年第4期397-400,共4页
目的:检测在口腔扁平苔藓中异常活化的胰岛素样生长因子1-磷脂酰肌醇3激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(insulin-like growth factor 1-phosphatidylinositol-3-kinase/the mammalian target of rapamycin,IGF1-PI3K/mTOR)信号通路对T细胞... 目的:检测在口腔扁平苔藓中异常活化的胰岛素样生长因子1-磷脂酰肌醇3激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(insulin-like growth factor 1-phosphatidylinositol-3-kinase/the mammalian target of rapamycin,IGF1-PI3K/mTOR)信号通路对T细胞与角质形成细胞共培养环境中炎性细胞因子的影响。方法:通过外源性IGF1、LY294002、雷帕霉素评估IGF-PI3K/mTOR信号通路在活化T细胞中的作用,构建T细胞与角质形成细胞共培养模型,运用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbnent assay,ELISA)法检测细胞培养上清中白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)分泌情况。结果:与单独培养的T细胞比较,T细胞与角质形成细胞共培养能促进TNF-α的分泌(P<0.05),而对IL-2的分泌无明显影响;而IGF1-PI3K/mTOR通路可减少共培养环境中IL-2和TNF-α水平(P<0.05)。结论:IGF1-PI3K/mTOR信号通路可调控T细胞与角质形成细胞共培养模型中炎性细胞因子的分泌,可能参与了口腔扁平苔藓免疫炎症的发生发展。 展开更多
关键词 口腔扁平苔藓 T细胞 角质形成细胞 胰岛素样生长因子1-磷脂酰肌醇3激酶/哺乳动物霉素蛋白
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淫羊藿素通过调控黏着斑激酶及下游细胞外信号调节激酶/细胞周期蛋白D1和蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素蛋白信号通路抑制肝癌细胞增殖的作用机制研究
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作者 李珍 高寒 +4 位作者 赵永康 王梓萱 王婧筱 王伽伯 宋鑫华 《环球中医药》 CAS 2023年第12期2401-2407,共7页
目的探究淫羊藿素(icaritin,ICA)抑制肝癌细胞增殖的作用机制。方法以Huh7肝癌细胞为研究对象并在体外培养;设置200、100、50、20、10、5、2、1、0.5μmol/L不同浓度的ICA给药干预72小时之后,采用0.5%结晶紫染色分析ICA对Huh7肝癌细胞... 目的探究淫羊藿素(icaritin,ICA)抑制肝癌细胞增殖的作用机制。方法以Huh7肝癌细胞为研究对象并在体外培养;设置200、100、50、20、10、5、2、1、0.5μmol/L不同浓度的ICA给药干预72小时之后,采用0.5%结晶紫染色分析ICA对Huh7肝癌细胞生存的影响;将Huh7肝癌细胞给与ICA高(10μmol/L)、中(5μmol/L)、低(2.5μmol/L)三个浓度,每个浓度设置三个复孔,通过克隆形成实验检测ICA对Huh7肝癌细胞增殖能力的影响;Huh7肝癌细胞给与ICA IC 50值浓度,对照孔及ICA给药孔分别在0、6、12、24小时在倒置显微镜下拍照,通过细胞划痕分析ICA对肝癌细胞迁移能力的影响;并且用流式细胞术对细胞周期进行分析。另外,通过蛋白印迹对增殖相关蛋白,如增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、磷酸化黏着斑激酶(phosphorylated focal adhesion kinase,p-FAK)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、磷酸化细胞外信号调节激酶(phosphorylated extracellular signal-regulated protein kinase,p-ERK)、磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,p-Akt)和磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(phosphorylated mammalian target of rapamycin,p-mTOR)等蛋白的表达水平进行分析。结果ICA可以明显抑制肝癌细胞的增殖及迁移能力,并且使肝癌细胞的细胞周期在G1期发生阻滞(P<0.05)。另外,研究发现ICA可以下调p-FAK及其下游调节蛋白p-ERK、cyclin D1以及p-Akt、p-mTOR、p-S6的表达水平。结论ICA可能通过调控FAK及下游ERK/cyclin D1和Akt/mTOR信号通路从而抑制肝癌细胞的增殖生长。 展开更多
关键词 肝细胞癌 淫羊藿素 黏着斑激酶 细胞外信号调节激酶 细胞周期蛋白D1 蛋白激酶B 哺乳动物霉素蛋白
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雷帕霉素促进哮喘调节性T细胞分化及功能的机制 被引量:1
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作者 金华良 周燕 王利民 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期621-626,共6页
目的:探讨雷帕霉素对哮喘调节性T细胞体外分化的作用及机制。方法:采用卵蛋白致敏、激发制备哮喘模型。采用超高速流式细胞分选仪收集哮喘小鼠和正常小鼠的脾CD4^(+)CD25^(-)T细胞,进一步分为三组,其中模型对照组予转化生长因子β(TGF-... 目的:探讨雷帕霉素对哮喘调节性T细胞体外分化的作用及机制。方法:采用卵蛋白致敏、激发制备哮喘模型。采用超高速流式细胞分选仪收集哮喘小鼠和正常小鼠的脾CD4^(+)CD25^(-)T细胞,进一步分为三组,其中模型对照组予转化生长因子β(TGF-β)、白介素(IL)-2,雷帕霉素组予TGF-β、IL-2的同时用雷帕霉素(终浓度为500 nmol/L)干预。采用流式细胞仪检测调节性T细胞水平和CD4(+)CD25^(-)T细胞增殖情况;采用蛋白质印迹法测定哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合体(mTORC)1/2通路相关蛋白S6、Akt磷酸化水平。结果:与模型对照组比较,雷帕霉素组调节性T细胞比例增加,CD4(+)CD25^(-) T细胞增殖水平降低,mTORC1/2信号通路下游S6、Akt磷酸化水平降低(均P<0.05).结论:雷帕霉素可促进调节性T细胞的分化及功能,其在一定程度上与抑制mTORCl/2信号通路相关。 展开更多
关键词 哮喘 霉素 调节性T细胞 哺乳动物霉素蛋白 分化 增殖 外实验
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雷帕霉素对衰老细胞生物节律关键基因的调控作用观察
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作者 刘佐君 刘宝华 孟凡彪 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第42期25-28,共4页
目的观察雷帕霉素对衰老细胞生物节律关键基因的调控作用。方法通过传代诱导人皮肤成纤维细胞复制性衰老,获得衰老的人皮肤成纤维细胞。加入50%的马血清刺激诱导细胞同步化,将细胞分为观察组和对照组,分别加入100 mmol/L的雷帕霉素和DMS... 目的观察雷帕霉素对衰老细胞生物节律关键基因的调控作用。方法通过传代诱导人皮肤成纤维细胞复制性衰老,获得衰老的人皮肤成纤维细胞。加入50%的马血清刺激诱导细胞同步化,将细胞分为观察组和对照组,分别加入100 mmol/L的雷帕霉素和DMSO培养24 h。采用荧光定量PCR法检测生物节律关键基因芳烃受体核转位蛋白3(BMAL1)、节律周期蛋白2(PER2)、蓝光受体蛋白1(CRY1)、孤儿核受体α(Rev-erbα)、孤核受体α(Rorα)mRNA表达,利用JTK-CYCLE软件分析各基因的节律周期,Western blotting法检测BMAL1、PER2、CRY1蛋白表达。结果观察组PER2、CRY1、Rev-erbα、RorαmRNA表达高于对照组(P均<0.05)。对照组BMAL1、CRY1、Rev-erbα、Rorα基因的节律周期为24 h,PER2基因的节律周期为28 h。观察组BMAL1、CRY1、Rorα基因的节律周期为24 h,Rev-erbα基因的节律周期为27.5 h,PER2的节律周期为24 h。观察组CRY1蛋白表达高于对照组(P<0.05),PER2蛋白表达低于对照组(P<0.05),两组BMAL1 mRNA及蛋白表达比较无统计学差异。结论雷帕霉素可以提高衰老的人皮肤成纤维细胞生物节律关键基因BMAL1、PER2、CRY1、Rev-erbα、RorαmRNA的表达,缩短PER2的节律周期,对紊乱的节律钟功能具有调控作用。 展开更多
关键词 生物节律 霉素 生物节律关键基因 芳烃受核转位蛋白3 节律周期蛋白2 蓝光受蛋白1 孤儿核受α 孤核受α 哺乳动物霉素蛋白
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Rab1A与肿瘤发生发展的研究进展 被引量:7
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作者 程正武 王子康 何宋兵 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2018年第1期73-76,共4页
Rab1A是RAB家族的一员,是一种小三磷酸鸟苷(GTP)酶,是哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合体1(mTORC1)的激活因子,已经被证实参与调节内质网至高尔基体的囊泡运输。随着Rab1A研究的不断深入,很多学者发现Rab1A蛋白还参与信号传导、细胞迁移以及... Rab1A是RAB家族的一员,是一种小三磷酸鸟苷(GTP)酶,是哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合体1(mTORC1)的激活因子,已经被证实参与调节内质网至高尔基体的囊泡运输。随着Rab1A研究的不断深入,很多学者发现Rab1A蛋白还参与信号传导、细胞迁移以及自体吞噬的调节。同时Rab1A异常表达也与一些临床疾病的发生发展有关,如帕金森氏病、原发性心肌病及阿司匹林加重性呼吸道疾病等。而近年来人们逐渐开始关注Rab1A在肿瘤发生发展中的作用,在包括舌癌、乳腺癌、肺癌、肝癌、结直肠癌、胃癌及子宫颈癌等多种恶性肿瘤中Rab1A均有不同程度的高表达,且在肿瘤的发生发展中扮演着重要角色。文章就Rab1A在肿瘤发生发展及信号通路等方面的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 Rab1A 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合体1 信号通路 肿瘤
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p-mTOR、p-4EBP1及p-S6K1在乳腺癌组织中的表达及临床意义 被引量:5
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作者 闫斌 马铎 +1 位作者 于跃利 韩丽红 《动物医学进展》 北大核心 2018年第12期214-217,共4页
研究p-mTOR、p-4EBP1及p-S6K1在乳腺癌组织中的表达及临床意义。选择2015年3月至2017年8月在包头市肿瘤医院进行手术切除的60例乳腺癌组织为观察组,对照组为癌旁组织40例。采用免疫组化方法检测60例乳腺癌组织及40例癌旁组织中p-mTOR、p... 研究p-mTOR、p-4EBP1及p-S6K1在乳腺癌组织中的表达及临床意义。选择2015年3月至2017年8月在包头市肿瘤医院进行手术切除的60例乳腺癌组织为观察组,对照组为癌旁组织40例。采用免疫组化方法检测60例乳腺癌组织及40例癌旁组织中p-mTOR、p-4EBP1及p-S6K1的表达情况。p-mTOR在观察组和对照组阳性率分别为71.7%和42.5%;p-4EBP1在观察组和对照组阳性率分别为26.7%和10.0%;p-S6K1在观察组和对照组阳性率分别为45.0%和12.5%;p-mTOR、p-4EBP1及p-S6K1在乳腺癌组织中的表达水平均高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。试验结果表明,p-mTOR、p-4EBP1及p-S6K1在乳腺癌组织中过度表达可能是乳腺癌发生发展的重要机制之一。 展开更多
关键词 乳腺癌 磷酸化的哺乳动物霉素蛋白 磷酸化起始因子4E结合蛋白1 磷酸化核糖40S小亚基S6蛋白激酶1 免疫组化
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部分靶向药物在头颈部鳞状细胞癌靶向治疗中的应用进展 被引量:3
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作者 张娣 董梅 《山东医药》 CAS 2021年第18期106-111,共6页
表皮生长因子受体(EGFR)、血管内皮生长因子受体(VEGFR)、肝细胞生长因子(HGF)及其受体c-Met、胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)以及磷脂酰肌3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/m TOR)等可作为头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)的... 表皮生长因子受体(EGFR)、血管内皮生长因子受体(VEGFR)、肝细胞生长因子(HGF)及其受体c-Met、胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)以及磷脂酰肌3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/m TOR)等可作为头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)的治疗靶点。EGFR抑制剂分为靶向作用于细胞外配体结合域的单克隆抗体(西妥昔单抗、帕尼单抗及扎鲁木单抗等)和作用于细胞内酪氨酸激酶结构域内ATP结合位点的小分子酪氨酸激酶抑制剂(吉非替尼、厄洛替尼和拉帕替尼等)两大类。VEGF/VEGFR单抗(贝伐珠单抗、雷莫芦单抗)及多靶点小分子TKI(索拉菲尼、舒尼替尼、阿昔替尼、仑伐替尼等)可促进肿瘤血管正常化,抑制肿瘤新生血管生成,单药或联合免疫治疗在HNSCC表现出初步疗效。针对EGFR抑制剂耐药的HNSCC患者,c-Met可能是一种有效治疗靶点,c-Met/HGF抑制剂(Capmatinib、Ficlatuzumab等)可抑制HNSCC增殖、迁移和侵袭,目前研究仍处于早期阶段。PI3K-AKT-mTOR通路相关靶点药物(雷帕霉素、依维莫司、替西莫司等)无论作为单一疗法还是与细胞抑制药物或放疗联合应用于Ⅰ/Ⅱ期研究中,具有一定抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 表皮生长因子受 血管内皮生长因子受 肝细胞生长因子 肝细胞生长因子受c-Met 胰岛素样生长因子1 磷脂酰肌3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物霉素蛋白 向治疗 治疗 头颈部鳞状细胞癌
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