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甜菜丛根病的双抗体夹心酶联免疫吸附测定 被引量：1
1
作者 王皙玮 吴玉梅 马龙彪 《中国糖料》 2009年第3期30-31,共2页
对甜菜丛根病毒采用双抗体夹心酶联免疫吸附测定(Double antibody sandwich assay,DAS-ELISA)法进行了检测,并对测定方法及检测结果进行了分析讨论。
关键词 甜菜丛根病 甜菜坏死黄脉病毒(BNYVV) 双抗体夹心酶联免疫吸附(DAS-ELISA)
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抗体夹心酶联免疫吸附法测定鸡白细胞介素-2 被引量：1
2
作者 翁凌 张凌晶 +1 位作者 张其标 曹敏杰 《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第B05期142-145,共4页
利用抗鸡白细胞介素-2(ChIL-2)单克隆抗体作包被抗体、生物素标记的抗ChIL-2多克隆抗体作检测抗体建立了一个抗体夹心酶联免疫吸附测定系统.此系统对鸡白细胞介素-2的检测灵敏度为50 pg/mL.两种抗体与鸡干扰素-α和人白细胞介素-2等细... 利用抗鸡白细胞介素-2(ChIL-2)单克隆抗体作包被抗体、生物素标记的抗ChIL-2多克隆抗体作检测抗体建立了一个抗体夹心酶联免疫吸附测定系统.此系统对鸡白细胞介素-2的检测灵敏度为50 pg/mL.两种抗体与鸡干扰素-α和人白细胞介素-2等细胞因子不产生任何非特异性反应.以不同种类的促有丝分裂剂或鸡病毒刺激鸡淋巴细胞,培养液中分泌产生的天然鸡白细胞介素-2的量用此系统检出.在促有丝分裂剂中,植物血凝素(PHA)导致ChIL-2的产生量最高;在病毒方面,传染性法氏囊病毒最能促使ChIL-2的分泌.本研究建立的抗体夹心酶联免疫吸附测定系统为我们以定量方式测定鸡白细胞介素-2提供了一个灵敏度高、特异性好的工具. 展开更多
关键词 抗体 鸡白细胞介素-2 抗体夹心酶联免疫吸附测定 WESTERN印迹
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双抗体夹心酶联免疫吸附法检测杏仁过敏原苦杏仁球蛋白 被引量：9
3
作者 张洁琼 高淑霞 +2 位作者 生威 张燕 王硕 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第16期173-177,共5页
提取中国甜杏仁过敏原蛋白苦杏仁球蛋白,分别制备兔和鼠多克隆抗体,建立双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法。结果表明:对甜杏仁中苦杏仁球蛋白的检测限为(6.36±1.02)μg/L;对中国苦杏仁及美国大杏仁中苦杏仁球蛋白的检测限分别为(12... 提取中国甜杏仁过敏原蛋白苦杏仁球蛋白,分别制备兔和鼠多克隆抗体,建立双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法。结果表明:对甜杏仁中苦杏仁球蛋白的检测限为(6.36±1.02)μg/L;对中国苦杏仁及美国大杏仁中苦杏仁球蛋白的检测限分别为(12.11±1.70)μg/L和(18.95±1.52)μg/L,且与常见的14种植物性蛋白没有交叉反应,表明该方法具有良好的特异性。将该方法用于法式小面包、饼干和脱脂牛乳中杏仁过敏原的检测,苦杏仁球蛋白的添加回收率为78.94%～125.15%,且相对标准偏差均低于5.81%。 展开更多
关键词 杏仁 苦杏仁球蛋白 双抗体夹心酶联免疫吸附分析法
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双抗夹心酶联免疫吸附法检测沙门氏菌 被引量：36
4
作者 伍燕华 牛瑞江 +4 位作者 赖卫华 山珊 刘道峰 倪小琴 冯荣华 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期62-65,共4页
沙门氏菌是自然界中普遍存在的一种食源性致病菌,在中国的食物中毒中沙门氏菌引起的病例占第一位。本研究以福尔马林灭活的鼠伤寒沙门氏菌免疫雌性日本大耳兔,制备抗沙门氏菌多克隆抗体。以抗沙门氏菌多克隆抗体作为捕获抗体,以抗沙门... 沙门氏菌是自然界中普遍存在的一种食源性致病菌,在中国的食物中毒中沙门氏菌引起的病例占第一位。本研究以福尔马林灭活的鼠伤寒沙门氏菌免疫雌性日本大耳兔,制备抗沙门氏菌多克隆抗体。以抗沙门氏菌多克隆抗体作为捕获抗体,以抗沙门氏菌单克隆抗体C1359作为检测抗体,建立快速检测沙门氏菌双抗夹心ELISA方法。结果表明:该方法可以检测A、B、C、D、E等五种典型的沙门氏菌,对沙门氏菌纯培养液的最低检测量为1×104CFU/mL,与其他杂菌不存在交叉反应,具有较好的灵敏性和特异性。 展开更多
关键词 沙门氏菌 多克隆抗体 双抗夹心酶联免疫吸附法
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酶联免疫吸附试验检测人血清抗双链DNA抗体在系统性红斑狼疮诊断中的性能评估 被引量：20
5
作者 史晓敏 冯珍如 +2 位作者 隋宝环 阎振林 董宁 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期167-170,共4页
目的对人血清抗双链DNA(dsDNA)抗体的酶联免疫吸附检测试剂盒Anti-dsDNA-NcX ELISA行实验室检测性能评估及在系统性红斑狼疮(SLE)诊断中的应用评价。方法对Anti-dsDNA-NcX ELISA试剂盒进行实验性能评价;并用间接免疫荧光法(IIF)和酶联... 目的对人血清抗双链DNA(dsDNA)抗体的酶联免疫吸附检测试剂盒Anti-dsDNA-NcX ELISA行实验室检测性能评估及在系统性红斑狼疮(SLE)诊断中的应用评价。方法对Anti-dsDNA-NcX ELISA试剂盒进行实验性能评价;并用间接免疫荧光法(IIF)和酶联免疫吸附法(ELISA)两种方法共三种试剂盒,同时检测健康体检正常者30例、非系统性红斑狼疮自身免疫病患者27例及SLE患者92例血清抗dsDNA抗体。以SLE的临床诊断为金标准,评价Anti-dsDNA-NcX ELISA试剂盒用于SLE的诊断性能。结果 Anti-dsDNA-NcX ELISA试剂盒达到了各项实验室检测性能指标,试剂盒的最低检测限为2.7 U/m l,线性相关系数为0.998,批内精密度变异系数(CV)<6%,批间精密度CV<10%,溶血、脂血、黄疸对检测结果没有干扰,与类风湿性关节炎、干燥综合征等非SLE自身免疫病患者血清间不存在交叉反应。健康体检正常者血清抗dsDNA抗体水平P97.5为67.0 U/m。l92例狼疮性肾炎患者,两种ELISA试剂的阳性率(60.9%)均高于IIF(20.6%),差异有统计学意义(P<0.05),其中Anti-dsDNA-NcXELISA试剂盒诊断狼疮性肾炎的正确率要高于AESKULISA dsDNA-Check ELISA试剂盒(曲线下面积分别为0.90和0.68),差异有统计学意义(P<0.001)。当抗dsDNA抗体取108 U/m l为诊断界值时,Anti-dsDNA-NcX ELISA试剂盒诊断狼疮性肾炎的特异性为98.2%,阳性预测值为96.6%。结论 Anti-dsDNA-NcX ELISA试剂盒各项检测性能良好,诊断狼疮性肾炎在不降低敏感性的基础上提高了特异性和阳性预测值,是目前IIF的有益补充,其试剂可以用于SLE的临床诊断。 展开更多
关键词 酶联免疫吸附测定 红斑狼疮 系统性 抗体 抗核
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三唑磷酶联免疫吸附测定法中包被抗体稳定剂的研究 被引量：1
6
作者 桂文君 梁赤周 +2 位作者 王姝婷 王春梅 朱国念 《农药学学报》 CAS CSCD 2007年第2期165-171,共7页
选择了甘油、山梨醇、聚乙二醇（PEG）、卵清蛋白（OVA）、多肽、糖、氨基酸等试剂,通过经验法和正交法相结合的手段配制了一系列稳定剂,对吸附在酶标板上的三唑磷多克隆抗体进行处理（37℃,1h）后,再在37℃下连续贮存7d,利用直接竞争EL... 选择了甘油、山梨醇、聚乙二醇（PEG）、卵清蛋白（OVA）、多肽、糖、氨基酸等试剂,通过经验法和正交法相结合的手段配制了一系列稳定剂,对吸附在酶标板上的三唑磷多克隆抗体进行处理（37℃,1h）后,再在37℃下连续贮存7d,利用直接竞争ELISA法对不同稳定剂处理的包被抗体免疫活性、亲合性及检测灵敏度进行检测,并与未经稳定剂处理的对照进行比较,筛选得到效果较好的稳定剂1（质量分数：甘油2.5%,氨基酸1.5%,蛋白胨3.0%,离子螯合剂0.1%,防腐剂0.01%）。用稳定剂1处理包被抗体后,4-6℃下保存半年及37℃下保存14d的试验结果表明,抗体的活性相对保持率分别为97.8%和94.2%;其免疫活性、亲合性（I50分别为68.43和54.38ng/mL）及灵敏度（I10分别为3.72和3.22ng/mL）与常规方法包被的抗体（包被好后不贮存,直接检测,I50为60.73ng/mL,I10为3.11ng/mL）无明显差异;冻融试验表明,经稳定剂1处理的三唑磷抗体在反复冻-融次数不超过8次时其活性也是稳定的。说明筛选出的稳定剂可以显著提高三唑磷多克隆包被抗体的稳定性,可用于三唑磷ELISA试剂盒的生产。 展开更多
关键词 酶联免疫吸附测定法 稳定剂 三唑磷 多克隆抗体
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灵芝酸A多克隆抗体制备及酶联免疫吸附测定法的建立 被引量：4
7
作者 袁耀武 田益玲 +2 位作者 李升云 杨心怡 马晓飞 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第16期332-337,共6页
以牛血清白蛋白为载体,采用活化酯法合成灵芝酸A的偶联抗原作为免疫原,按照免疫程序接种试验兔,获得针对偶联抗原的多克隆抗体。对多克隆抗体的效价及靶向进行分析后,构建灵芝酸A的间接竞争酶联免疫吸附测定法。结果显示:多克隆抗体中... 以牛血清白蛋白为载体,采用活化酯法合成灵芝酸A的偶联抗原作为免疫原,按照免疫程序接种试验兔,获得针对偶联抗原的多克隆抗体。对多克隆抗体的效价及靶向进行分析后,构建灵芝酸A的间接竞争酶联免疫吸附测定法。结果显示:多克隆抗体中存在靶向偶联抗原3个区域的独特型抗体,总效价为1∶78 125,其中抗灵芝酸A特异性抗体效价为1∶3 125。间接竞争酶联免疫吸附测定法的灵芝酸A检出限为0.3μg/L,半数抑制浓度为4.0μg/L,线性范围在0.6~27.3μg/L之间。样品测定批间变异系数低于10%,样品加标回收率在82.9%~118.6%之间,对22份灵芝粉剂产品的测定结果显示不同品牌产品中灵芝酸A含量的差异极显著,该法测定结果与高效液相色谱法的测定结果相比,相关系数为0.972。结果表明,间接竞争酶联免疫吸附法测定灵芝酸A可行,该方法能够为灵芝保健品市场中相关产品的质量监控提供一种辅助方案。 展开更多
关键词 灵芝酸A 多克隆抗体 间接竞争酶联免疫吸附测定法
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单克隆抗体酶联免疫吸附抑制试验测定C1m(f)因子及成都地区汉族频率调查 被引量：1
8
作者 张林 李英碧 +2 位作者 侯一平 苟清 吴梅筠 《法医学杂志》 CAS CSCD 1992年第4期145-147,共3页
作者用抗G1m(f)单克隆抗体,建立检测人类免疫球蛋白同种异型G1m(f)因子的酶联免疫吸附抑制试验.同时调查了成都地区汉族群体G1m(f)因子的频率.在478份样本血清中,G1m(f)因子阳性占83.26%,计算G1m(f)的基因频率为0.5909,方差为0.0004.
关键词 酶联免疫吸附 单克隆抗体 成都地区 抑制试验 频率调查 因子 免疫球蛋白同种异型 测定 汉族群体 基因频率
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电鳐乙酰胆碱酯酶标记第二抗体酶联免疫吸附测定法 被引量：1
9
作者 李前 李凤珍 +1 位作者 孙曼霁 刘伟 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第7期469-471,共3页
目的:以电鳐乙酰胆碱酯酶标记二抗,建立该酶的酶联免疫吸附方法。方法:采用改良高碘酸钠氧化法。结果:标记过程中对AChE的酶活性影响较大的因素有pH值,温度以及NaIO4浓度。AChE酶标记的羊抗小鼠IgG的效价至少高于HRP,酶标记的羊抗小鼠Ig... 目的:以电鳐乙酰胆碱酯酶标记二抗,建立该酶的酶联免疫吸附方法。方法:采用改良高碘酸钠氧化法。结果:标记过程中对AChE的酶活性影响较大的因素有pH值,温度以及NaIO4浓度。AChE酶标记的羊抗小鼠IgG的效价至少高于HRP,酶标记的羊抗小鼠IgG一个数量级。结论:制备的乙酰胆碱酯酶标记第二抗体在酶联免疫吸附测定法中高效地取代辣根过氧化物酶及碱性磷酸酶标记第二抗体。 展开更多
关键词 酶联免疫吸附测定法 电鳐乙酰胆碱酯酶 高碘酸钠氧化法 乙酰胆碱酯酶标记二抗 酶标抗体结合物
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单克隆抗体JPG3双抗体夹心酶联免疫吸附试验用于血吸虫病疗效考核的探讨 被引量：2
10
作者 尹东 陈红根 +4 位作者 许雪萍 衣方誉 姜唯声 曾小军 王腊梅 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第8期726-726,678,共2页
关键词 单克隆抗体 JPG3双抗体夹心酶联免疫吸附试验 血吸虫病 疗效观察
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小麦胚乳贮藏蛋白多克隆抗体间接酶联免疫吸附测定法(ELISA)的建立 被引量：4
11
作者 王兆华 宋希云 +2 位作者 张恩盈 张元景 吕俊华 《莱阳农学院学报》 2006年第3期161-164,169,共5页
通过对比试验研究了蛋白提取液、提取时间、还原剂DTT、封闭液、包被物与抗体浓度等对小麦胚乳贮藏蛋白多克隆抗体的影响,建立了适宜于小麦胚乳醇溶蛋白(G liad in)和低分子量谷蛋白亚基(Low molecu lar we ight glute-n in subun it,LM... 通过对比试验研究了蛋白提取液、提取时间、还原剂DTT、封闭液、包被物与抗体浓度等对小麦胚乳贮藏蛋白多克隆抗体的影响,建立了适宜于小麦胚乳醇溶蛋白(G liad in)和低分子量谷蛋白亚基(Low molecu lar we ight glute-n in subun it,LMW-GS)多克隆抗体的间接酶联免疫吸附测定法(ELISA)。 展开更多
关键词 小麦 贮藏蛋白 多克隆抗体 酶联免疫吸附测定法
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酶联免疫吸附法测定血清抗精子抗体
12
作者 张江兰 谢琪璇 张春雪 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 1998年第S1期78-79,共2页
关键词 免疫吸附法 血清抗精子抗体 生殖免疫 放射免疫 检测技术 免疫吸附技术 测定结果 酶联 暨南大学 聚乙二醇
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单克隆抗体酶联免疫吸附抑制试验测定精斑G2m(n)因子
13
作者 侯一平 苟清 吴梅筠 《法医学杂志》 CAS CSCD 1991年第3期6-9,共4页
人类免疫球蛋白同种异型(human immuhoglobulin allotypes)包括Gm、Km及Am等系统。在法医学实践中可用于个人识别和亲子鉴定。关于人精液中同种异型因子的检测报道极少，我们应用抗G2m(n)因子的检测国内外均未见报道，我们应用抗G2m(n)... 人类免疫球蛋白同种异型(human immuhoglobulin allotypes)包括Gm、Km及Am等系统。在法医学实践中可用于个人识别和亲子鉴定。关于人精液中同种异型因子的检测报道极少，我们应用抗G2m(n)因子的检测国内外均未见报道，我们应用抗G2m(n)单克隆抗体建立了测定精液及精斑G2m(n)因子的酶联免疫吸附抑制试验。现报道如下。 展开更多
关键词 单克隆抗体 酶联免疫吸附抑制试验 测定 精斑 G2m(n)因子 法医物证检验学
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环鸟苷酸兔单克隆抗体的制备和竞争酶联免疫吸附测定方法的建立 被引量：1
14
作者 谭兴梅 胡海峰 陈枢青 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期423-428,共6页
目的：研制环鸟苷酸（cGMP）兔单克隆抗体，并建立测定cGMP浓度的竞争ELISA方法。方法：用人工合成的环鸟苷酸一钥孔血蓝蛋白（cGMP-KLH）免疫新西兰大白兔，采用Epitomics公司的兔单克隆抗体技术制备针对cGMP的兔单克隆抗体；应用cGMP... 目的：研制环鸟苷酸（cGMP）兔单克隆抗体，并建立测定cGMP浓度的竞争ELISA方法。方法：用人工合成的环鸟苷酸一钥孔血蓝蛋白（cGMP-KLH）免疫新西兰大白兔，采用Epitomics公司的兔单克隆抗体技术制备针对cGMP的兔单克隆抗体；应用cGMP兔单克隆抗体建立竞争ELISA方法，并对该方法的特异性、精密度和回收率进行测定。结果：所制备的cGMP兔单克隆抗体的效价为3．1．g／mL，50％抑制浓度（IC50）为12．57ng／mL。与环磷酸肌苷的交叉反应率为33．1％，与其他结构类似的化合物无交叉反应。所建立的cGMP竞争ELISA方法的检测范围为0～120ng／mL，最低检测限为1．95ng／mL，回收率为89％～103％，批次内和批次间的精密度分别小于11．68％和13．85％。结论：成功制备高效价、高特异性的cGMP兔单克隆抗体，并建立了测定cGMP浓度的竞争ELISA方法。 展开更多
关键词 环GMP 抗体 单克隆 酶联免疫吸附测定 兔
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猪圆环病毒3型衣壳蛋白抗体间接酶联免疫吸附测定方法的建立与应用 被引量：4
15
作者 谢晓妍 石玉佩 +3 位作者 李潇南 段燕方 张永红 周双海 《北京农学院学报》 2022年第1期66-69,共4页
【目的】建立一种检测猪圆环病毒3型抗体的血清学方法。【方法】以猪圆环病毒3型衣壳蛋白为包被抗原,通过筛选和优化反应条件建立一种检测猪圆环病毒3型衣壳蛋白抗体的间接酶联免疫吸附测定方法,并进行特异性试验与重复性试验以及初步... 【目的】建立一种检测猪圆环病毒3型抗体的血清学方法。【方法】以猪圆环病毒3型衣壳蛋白为包被抗原,通过筛选和优化反应条件建立一种检测猪圆环病毒3型衣壳蛋白抗体的间接酶联免疫吸附测定方法,并进行特异性试验与重复性试验以及初步临床应用。【结果】确定检测猪圆环病毒3型衣壳蛋白抗体的间接酶联免疫吸附测定方法的各项最佳反应条件;仅有猪圆环病毒3型阳性血清的检测结果为阳性,显示出良好的特异性;批内变异系数和批间变异系数都小于5%,显示出良好的可重复性。在来源于北京地区与河北地区的318份猪的血清中检出猪圆环病毒3型衣壳蛋白抗体阳性率为32.70%,表明这两个地区存在较多的猪圆环病毒3型感染。【结论】建立了一种具有良好特异性和可重复性的检测猪圆环病毒3型衣壳蛋白抗体的间接酶联免疫吸附测定方法,可用于猪圆环病毒3型抗体的检测。 展开更多
关键词 猪圆环病毒3型 衣壳蛋白 间接酶联免疫吸附测定方法 抗体检测
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酵母表面展示-酶联免疫吸附测定法的建立 被引量：2
16
作者 叶茂 韩双艳 +2 位作者 林影 唐语谦 王小宁 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第10期1113-1117,共5页
以表面展示人源蛋白酶体α亚基6蛋白的重组酵母细胞,结合酶联吸附免疫原理检测技术,以表面展示有人源蛋白酶体α亚基6(proteasome subunit alpha6,PSα6)的重组酵母细胞及其对应的单克隆抗体3D7D12D为研究对象,建立酵母酶联免疫吸附(yea... 以表面展示人源蛋白酶体α亚基6蛋白的重组酵母细胞,结合酶联吸附免疫原理检测技术,以表面展示有人源蛋白酶体α亚基6(proteasome subunit alpha6,PSα6)的重组酵母细胞及其对应的单克隆抗体3D7D12D为研究对象,建立酵母酶联免疫吸附(yeast-ELISA)检测技术,应用于检测小鼠单克隆抗体及单抗效价.应用该方法最佳酵母浓度为0.50A600;测得单抗效价为1∶5×105,与常规ELISA效价接近;交叉试验和阻断试验表明该方法特异性强;同时该方法可用于检测抗血清.结果表明,yeast-ELISA可直接应用于检测单抗,测得效价与常规抗原包被间接ELISA具有良好一致性,特异性好,无交叉反应性. 展开更多
关键词 酵母表面展示 抗体检测 酶联免疫吸附测定法
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酶联免疫吸附测定技术新进展 被引量：5
17
作者 刘国霞 曾宪垠 《河南畜牧兽医》 2001年第7期13-14,共2页
关键词 酶联免疫吸附测定 灵敏度 猪疾病 猪瘟抗体 特异性
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赭曲霉毒素A单克隆抗体的制备及直接竞争酶联免疫吸附法的建立
18
作者 石爽 卢锋 +1 位作者 杨美华 庄辉 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1440-1442,共3页
目的建立快速且灵敏的赭曲霉毒素A(OTA)直接竞争酶联免疫吸附检测(cdELISA)方法。方法采用OTA与卵清蛋白(OVA)偶联作为抗原免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行细胞融合、克隆筛选,获得鼠抗OTA的杂交瘤细胞株;以ELIS... 目的建立快速且灵敏的赭曲霉毒素A(OTA)直接竞争酶联免疫吸附检测(cdELISA)方法。方法采用OTA与卵清蛋白(OVA)偶联作为抗原免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行细胞融合、克隆筛选,获得鼠抗OTA的杂交瘤细胞株;以ELISA方法测定抗体效价并鉴定抗体的IgG及亚类;用辣根过氧化物酶(HRP)标记OTA,建立cdELISA方法。结果获得了3株稳定分泌高效价抗OTA单克隆抗体的杂交瘤细胞株(S-17-8、S-212-7和S-225-11),3株重链均为IgG1亚型,轻链为κ亚型;建立了cdELISA检测方法,检测下限为0.5ng/ml。结论以抗OTA单克隆抗体和OTA-HRP为基础,建立了灵敏且省时的检测OTA的cdELISA方法,为进一步OTA快速筛查提供了条件。 展开更多
关键词 赭曲霉毒素A 抗体 单克隆 酶联免疫吸附测定
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重组多肽酶联免疫吸附法检测抗LKM-1抗体的初步应用
19
作者 王文凯 李永哲 段秀杰 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1021-1024,1027,共5页
目的:制备人自身抗原细胞色素P4502D6(CYP2D6)257-351位氨基酸片段融合蛋白作为自身抗原,探讨ELISA检测抗LKM-1抗体的敏感性和特异性。方法:以肝脏的cDNA混合文库为模板作PCR,将PCR产物与真核表达载体pEGH共同转化酿酒酵母Y258,碱裂解... 目的:制备人自身抗原细胞色素P4502D6(CYP2D6)257-351位氨基酸片段融合蛋白作为自身抗原,探讨ELISA检测抗LKM-1抗体的敏感性和特异性。方法:以肝脏的cDNA混合文库为模板作PCR,将PCR产物与真核表达载体pEGH共同转化酿酒酵母Y258,碱裂解法进行质粒制备,PCR扩增鉴定。表达载体构建成功后,在半乳糖的诱导下表达产生重组融合蛋白,经GST亲和层析法进行纯化后,免疫印迹法鉴定抗原性,ELISA检测抗LKM-1抗体阳性血清及部分其他结缔组织病患者血清中的抗LKM-1抗体。结果:重组融合蛋白在宿主菌中获得表达,免疫印迹法鉴定表明其能与标准抗LKM-1抗体阳性血清反应,而与正常血清、其他抗血清无反应。在26份抗LKM-1抗体阳性血清中,6份抗HCV抗体阳性血清用重组多肽ELISA检测有5份呈阳性,其余20份血清用重组多肽ELISA检测均呈阳性;20份其他结缔组织病患者血清用重组多肽ELISA检测均为阴性。结论:重组的257-351位氨基酸片段是CYP2D6抗原的主要抗原表位区域,以重组多肽为基质ELISA检测抗LKM-1抗体的敏感性较高,为进一步研究抗体水平与临床病情变化的相关性奠定了基础。 展开更多
关键词 重组 表位 抗LKM-1抗体 酶联免疫吸附测定
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酶联免疫吸附试验检测姜片虫感染者血清抗体
20
作者 陈思礼 陈强 +10 位作者 袁媛 周雨丝 李玲 张喜红 刘辉 陈建设 陈思义 吴凤娇 廖林贵 石教伦 余祥光 《湖北农业科学》 北大核心 2004年第4期123-125,共3页
超声粉碎制备姜片吸虫成虫冷浸抗原,以1:3500工作浓度包被酶标板;采用Kato—Katz氏定透法普查姜片吸虫病,对虫卵阳性者用ELISA法测定血清抗体,同时测定健康居民的血清和其他吸虫病患者血清,以评价ELISA法检测姜片虫病血清抗体的敏感性... 超声粉碎制备姜片吸虫成虫冷浸抗原,以1:3500工作浓度包被酶标板;采用Kato—Katz氏定透法普查姜片吸虫病,对虫卵阳性者用ELISA法测定血清抗体,同时测定健康居民的血清和其他吸虫病患者血清,以评价ELISA法检测姜片虫病血清抗体的敏感性、特异性和交叉反应性。按常规ELISA方法操作,目视与酶标仪判断结果。普查2 189人中姜片吸虫卵阳性者168例;168例中165例ELISA阳性,ELISA与Kato—Katz氏定透法的阳性符合率98.21％;健康居民血清147份,阳性6份,阳性率4.08％;与血吸虫病交叉阳性为9.38％,肺吸虫病交叉阳性为5.36％。应用此法检测姜片虫感染者血清抗体具有敏感性高、特异性强和交叉反应率低等特点,可代替粪检法广泛用于姜片吸虫感染的检测。 展开更多
关键词 姜片吸虫 成虫抗原 酶联免疫吸附试验 血清抗体测定
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