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凋亡抑制因子Survivin与肿瘤诊治的研究进展 被引量:3
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作者 伊新 曲喜英 林木生 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2003年第2期182-185,共4页
Survivin属凋亡抑制蛋白家族新成员 ,具有抑制细胞凋亡和调节细胞分裂的双重功能 ;Survivin是肿瘤特异性凋亡抑制因子 ,高表达于多种肿瘤组织而在正常成人组织中未见表达。研究表明 ,Survivin在肿瘤的发生、发展过程中起关键作用 ,是估... Survivin属凋亡抑制蛋白家族新成员 ,具有抑制细胞凋亡和调节细胞分裂的双重功能 ;Survivin是肿瘤特异性凋亡抑制因子 ,高表达于多种肿瘤组织而在正常成人组织中未见表达。研究表明 ,Survivin在肿瘤的发生、发展过程中起关键作用 ,是估计肿瘤预后和复发的重要指标。Survivin还参与血管形成过程。近来 ,Survivin已成为肿瘤诊断。 展开更多
关键词 抑制因子 survivin 肿瘤 研究进展 细胞 细胞分裂 血管形成 基因治疗
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凋亡抑制因子Survivin表达在大鼠重症急性胰腺炎肾损伤中的作用 被引量:3
2
作者 樊恒 宋甫春 +1 位作者 包俊炜 赵宇 《临床肝胆病杂志》 CAS 2012年第8期603-605,共3页
目的研究大鼠重症急性胰腺炎(SAP)肾组织细胞间凋亡抑制因子Survivin表达与肾损伤的关系。方法 40只SD大鼠,体重(250±20)g,随机分为假手术组和重症急性胰腺炎6h、12 h、24 h组,每组10只。实验组采用胰胆管逆行穿刺注射4.5%牛磺胆酸... 目的研究大鼠重症急性胰腺炎(SAP)肾组织细胞间凋亡抑制因子Survivin表达与肾损伤的关系。方法 40只SD大鼠,体重(250±20)g,随机分为假手术组和重症急性胰腺炎6h、12 h、24 h组,每组10只。实验组采用胰胆管逆行穿刺注射4.5%牛磺胆酸钠(1.0 ml/kg)建立不同炎症程度的SAP模型,比较假手术组与各实验组胰腺组织和肾组织病理学变化,检查各组血清淀粉酶(AMY)、血肌酐(Cr)和血尿素氮(BUN),应用免疫组化方法检测胰腺和肾组织中Survivin的表达,肾脏组织细胞凋亡测定法(TUNEL法)检测肾组织细胞凋亡的变化。结果各实验组AMY、Cr、BUN较假手术组有所升高,Survivin在假手术组胰腺组织和肾组织表达均呈阴性,Survivin在SAP大鼠胰腺组织中的表达主要集中在胰腺导管处,腺泡细胞也有散在表达,Survivin在SAP大鼠肾组织中表达主要集中在肾小管和肾小球。肾小球细胞凋亡指数明显高于对照组[6、12、24 h分别为(3.10±1.00)vs(0.79±0.11),P<0.05;(4.01±1.90)vs(0.87±0.12),P<0.05;(5.00±1.80)vs(0.81±0.19),P<0.01],肾小管细胞凋亡指数明显高于对照组[6、12、24 h分别为(9.50±1.01)vs(1.29±0.47),P<0.01;(11.90±2.30)vs(1.27±0.29),P<0.01;(14.9±2.57)vs(1.21±0.32),P<0.01],且随SAP病程延长,肾组织凋亡细胞水平逐渐升高。结论 Survivin在SAP大鼠胰腺组织中及并发肾损伤的肾组织中呈异常高表达,Survivin表达的高低与肾组织损伤的严重程度有关,可能起到减轻肾损伤、促进其修复的作用。 展开更多
关键词 胰腺炎 急性坏死性 抑制蛋白质类 survivin 肾功能衰竭 急性
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新的凋亡抑制因子Survivin的研究进展
3
作者 闵玲 周克元 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第3期339-341,共3页
Survivin是近年来发现的一种凋亡抑制因子 ,属于凋亡抑制蛋白 (inhibitorofapoptosisproteins,IAP)家族的新成员 ;主要通过抑制caspase 3和caspase 7的活性而阻断细胞凋亡过程 .Survivin选择性地表达于胚胎发育组织和大多数肿瘤组织 ,... Survivin是近年来发现的一种凋亡抑制因子 ,属于凋亡抑制蛋白 (inhibitorofapoptosisproteins,IAP)家族的新成员 ;主要通过抑制caspase 3和caspase 7的活性而阻断细胞凋亡过程 .Survivin选择性地表达于胚胎发育组织和大多数肿瘤组织 ,而正常成人终末分化组织中不表达 .Survivin参与了细胞周期调控 ,与肿瘤的发生、发展和预后密切相关 ,可作为肿瘤治疗的新靶点 . 展开更多
关键词 抑制因子 survivin 研究进展 细胞 抑制蛋白
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凋亡抑制因子Survivin在大肠杆菌TB1中的表达纯化及鉴定 被引量:1
4
作者 刘晔 张青云 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期200-204,共5页
本文旨在克隆凋亡抑制因子Survivin基因,并在大肠杆菌中进行可溶性表达与初步纯化.采用RT-PCR法,扩增人凋亡抑制因子survivincDNA,并克隆入原核表达载体pMAL-p2X中,转化TB1大肠杆菌感受态细胞.经0.3mmol/LIPTG诱导2h后,收集菌体蛋白,进... 本文旨在克隆凋亡抑制因子Survivin基因,并在大肠杆菌中进行可溶性表达与初步纯化.采用RT-PCR法,扩增人凋亡抑制因子survivincDNA,并克隆入原核表达载体pMAL-p2X中,转化TB1大肠杆菌感受态细胞.经0.3mmol/LIPTG诱导2h后,收集菌体蛋白,进行SDS-PAGE、ELISA及Western印迹鉴定.实验获得凋亡抑制因子survivin编码区cDNA,以构建的原核表达载体pMAL-p2X-survivin转化菌株后,可表达凋亡抑制因子survivin和麦芽糖结合蛋白(MBP)的融合蛋白,相对分子质量(Mr)为58000.并成功利用FactorXa将融合蛋白裂解开.ELISA和Western印迹表明,融合蛋白能与抗凋亡抑制因子survivin单克隆抗体特异性结合.获得的凋亡抑制因子survivin全长cDNA可在大肠杆菌TB1中以MBP-survivin融合蛋白的形式表达,成功地将survivin目的蛋白和MBP蛋白分离,为深入研究survivin的结构和功能奠定了基础. 展开更多
关键词 抑制因子 survivin 麦芽糖结合蛋白 pMAL-p2X 可溶性表达 纯化
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Survivin——一个新的肿瘤特异性的抑制凋亡因子 被引量:5
5
作者 关健 陈杰 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期532-534,共3页
Survivin(SVV)是IAP(inhibitorofapoptosis)家族的一个新成员。具有抑制细胞凋亡的作用,并在细胞的有丝分裂和胞质分裂中起重要的作用。研究表明SVV是一个肿瘤特异性的抑制凋亡因子它在成熟的终末分化组织中基本无表达,而在胚胎发育... Survivin(SVV)是IAP(inhibitorofapoptosis)家族的一个新成员。具有抑制细胞凋亡的作用,并在细胞的有丝分裂和胞质分裂中起重要的作用。研究表明SVV是一个肿瘤特异性的抑制凋亡因子它在成熟的终末分化组织中基本无表达,而在胚胎发育过程中和人的肿瘤组织中表达,SVV的过度表达是提示肿瘤预后不良的一个因素,并可能是导致肿瘤细胞耐药性的因素。SVV是肿瘤靶向治疗的一个很好的靶基因蛋白。 展开更多
关键词 survivin 肿瘤 抑制因子 基因治疗
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凋亡抑制蛋白livin在人胃癌中的表达以及和survivin表达的关系 被引量:49
6
作者 王同杉 游思洪 +3 位作者 葛红梅 陈子庆 丁小健 刘平 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期39-43,共5页
目的:探讨胃癌组织中凋亡抑制蛋白livin表达情况及其与各临床病理因素的关系,以及和凋亡抑制蛋白survivin表达的相关性。方法:采用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)检测胃癌组织中livinα、livinβ和survivin的mRNA的表达,并用westernblot... 目的:探讨胃癌组织中凋亡抑制蛋白livin表达情况及其与各临床病理因素的关系,以及和凋亡抑制蛋白survivin表达的相关性。方法:采用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)检测胃癌组织中livinα、livinβ和survivin的mRNA的表达,并用westernblot分析livin和survivin蛋白的表达。结果:40例胃癌组织中livin表达阳性率为47.5%、survivin为60%,而在正常和癌旁组未检出阳性结果;livin的表达与组织分化和淋巴结转移有关,组织分化差,淋巴结转移者livin表达率高(P<0.05);24例survivin阳性样本中有14例livin呈阳性。结论:livin在胃癌组织中表达增高,可作为胃癌的分子标志物,可能成为胃癌治疗的新分子靶点,livin表达和survivin表达在本实验中结果显示没有相关性(P>0.05)。 展开更多
关键词 抑制蛋白 LIVIN survivin 胃癌
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凋亡抑制蛋白Survivin在原发性肝细胞癌中的表达及其意义 被引量:5
7
作者 齐亚灵 方艳秋 +2 位作者 段秀梅 谭岩 陈东 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期135-138,F0003,共5页
目的:通过研究凋亡抑制蛋白Survivin在原发性肝细胞癌(HCC)中的表达情况及其与临床病理特征之间的关系,探讨Survivin在HCC发生、发展中的作用。方法:采用流式细胞术(FCM)及免疫组化(SP)法对30例肝癌组织、20例癌旁组织及10例正常肝组织... 目的:通过研究凋亡抑制蛋白Survivin在原发性肝细胞癌(HCC)中的表达情况及其与临床病理特征之间的关系,探讨Survivin在HCC发生、发展中的作用。方法:采用流式细胞术(FCM)及免疫组化(SP)法对30例肝癌组织、20例癌旁组织及10例正常肝组织中的Survivin蛋白进行定量检测,并结合临床资料进行分析。结果:①Survivin在HCC组织中的表达率显著高于癌旁组织及正常肝组织(P<0.05);②Survivin蛋白在癌旁正常组织中无表达;③Survivin蛋白的表达与肿瘤的大小、部位、包膜、AFP无关联(P>0.05),而与镜下门静脉癌栓形成有关联(P<0.05)。结论:Survivin基因蛋白在HCC组织中过表达是反应HCC生物学行为的有效指标,Survivin基因蛋白表达的特异性有望成为HCC基因诊断与治疗的靶点。 展开更多
关键词 抑制蛋白survivin 肝细胞 免疫组织化学 流式细胞术
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凋亡抑制因子Livin在喉鳞癌中的表达及临床意义 被引量:9
8
作者 肖虹 姬长友 陈继川 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期1226-1228,共3页
目的探讨凋亡抑制因子L ivin在喉鳞癌中的表达及临床意义。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测40例喉癌患者喉鳞癌组织及外周血细胞中L ivin的表达,并以声带息肉患者和正常人外周血作对照。结果在40例喉鳞癌标本中,L ivinα在26... 目的探讨凋亡抑制因子L ivin在喉鳞癌中的表达及临床意义。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测40例喉癌患者喉鳞癌组织及外周血细胞中L ivin的表达,并以声带息肉患者和正常人外周血作对照。结果在40例喉鳞癌标本中,L ivinα在26例(65%)癌组织中表达阳性,在17例(42.5%)外周血细胞中表达阳性;L ivinβ在喉癌组织及外周血细胞和声带患者中均不表达。L ivinα的阳性表达率与喉癌患者的年龄、性别、肿瘤部位、分化程度无相关性(P>0.05),与临床分期、淋巴结转移呈正相关(P<0.05)。结论凋亡抑制因子L ivinα在喉鳞癌组织和血液中高表达且与喉癌淋巴结转移、临床分期密切相关。 展开更多
关键词 抑制因子 LIVIN 喉鳞癌 逆转录聚合酶链反应
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组织因子途径抑制物-2在非小细胞肺癌中的表达及其与细胞凋亡的关系 被引量:7
9
作者 董永强 纪涛 +3 位作者 张晓明 朱水波 徐家行 殷桂林 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2010年第11期1903-1905,共3页
目的:探讨非小细胞肺癌中组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)的表达及其与细胞凋亡的关系,评价其与肺癌恶性程度的关系。方法:收集非小细胞肺癌石蜡标本、临床资料和临床分期,采用免疫组化法检测TFPI-2蛋白在60例非小细胞肺癌和15例正常肺组... 目的:探讨非小细胞肺癌中组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)的表达及其与细胞凋亡的关系,评价其与肺癌恶性程度的关系。方法:收集非小细胞肺癌石蜡标本、临床资料和临床分期,采用免疫组化法检测TFPI-2蛋白在60例非小细胞肺癌和15例正常肺组织中的表达水平,并应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的标记染色法(TUNEL法)检测细胞凋亡,计算凋亡指数(AI)。结果:TFPI-2在非小细胞肺癌中的表达指数为60.0%,低于正常肺组织的89.5%。Ⅰ、Ⅱ期及无转移的非小细胞肺癌组织中TFPI-2表达指数(70.9%)及AI值[(9.58±4.52)%]均高于Ⅲ、Ⅳ期[48.3%、(6.36±1.98)%]及有转移的非小细胞肺癌组织[57.1%、(6.10±2.68)%],差异有统计学意义(P<0.05)。结论:TFPI-2在正常肺组织中的表达水平明显高于非小细胞肺癌组织,TFPI-2可能在诱导非小细胞凋亡中起到重要作用。 展开更多
关键词 非小细胞肺 组织因子途径抑制物-2 细胞
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Ⅲ型β-微管蛋白、微管相关蛋白tau及凋亡抑制蛋白survivin的mRNA水平与胃癌对紫杉醇敏感性的研究 被引量:4
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作者 何雯婷 陆明洁 +3 位作者 喻存俊 施伟 束永前 刘平 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期867-871,共5页
目的:探讨胃癌细胞中Ⅲ型β-微管蛋白(ClassⅢβ-tubulin)、微管相关蛋白tau(MAPT)和凋亡抑制蛋白survivin的表达水平对化疗药物紫杉醇敏感性的预测价值。方法:采用ATP生物荧光法检测54例胃癌原代细胞对紫杉醇的体外药物敏感性,RT-PCR... 目的:探讨胃癌细胞中Ⅲ型β-微管蛋白(ClassⅢβ-tubulin)、微管相关蛋白tau(MAPT)和凋亡抑制蛋白survivin的表达水平对化疗药物紫杉醇敏感性的预测价值。方法:采用ATP生物荧光法检测54例胃癌原代细胞对紫杉醇的体外药物敏感性,RT-PCR法检测胃癌细胞内ClassⅢβ-tubulin、MAPT和survivin的mRNA表达水平,分析胃癌细胞对紫杉醇的体外敏感性与上述生物学指标表达水平的关系。结果:ClassⅢβ-tubulin的mRNA表达水平为1.04±0.22,与分化程度有关(P=0.029);MAPT的mRNA表达水平为0.80±0.17;survivin的mRNA表达水平为1.00±0.19,与分化程度有关(P=0.009)。药敏指数与ClassⅢβ-tubulin表达水平呈负相关(r=-0.372,P=0.006),与MAPT表达水平呈负相关(r=-0.292,P=0.032),与survivin表达水平呈负相关(r=-0.340,P=0.012);ClassⅢβ-tubulin与MAPT mRNA表达水平呈正相关(r=0.284,P=0.037),与survivin mRNA表达水平呈正相关(r=0.559,P=0.000)。结论:胃癌细胞中ClassⅢβ-tubulin、MAPT和survivin的表达水平可能对紫杉类药物的化疗敏感性具有较好的预测价值。 展开更多
关键词 胃癌 紫杉醇 Ⅲ型β-微管蛋白 微管相关蛋白tau 抑制蛋白survivin ATP生物荧光法
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细胞因子信号传导抑制蛋白1对肿瘤坏死因子-α诱导的肾小管细胞凋亡的影响 被引量:3
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作者 杜春阳 史永红 +4 位作者 崔立文 任韫卓 王月华 赵松 段惠军 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1378-1382,共5页
目的观察细胞因子信号传导抑制蛋白1(SOCS-1)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导肾小管上皮细胞(HKC)凋亡的影响。方法体外培养人肾小管上皮细胞(HKC),应用脂质体2000分别转染pCR3.1/SOCS-1表达质粒和pCR3.1空质粒载体,G418筛选阳性克隆。给... 目的观察细胞因子信号传导抑制蛋白1(SOCS-1)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导肾小管上皮细胞(HKC)凋亡的影响。方法体外培养人肾小管上皮细胞(HKC),应用脂质体2000分别转染pCR3.1/SOCS-1表达质粒和pCR3.1空质粒载体,G418筛选阳性克隆。给予TNF-α(20μg.L-1)进行刺激。采用Western blot检测SOCS-1、Bax、Bcl-2、Cleaved caspase-3、Caspase-3、Janus酪氨酸激酶2(JAK2)、信号转导和转录活化因子1(STAT1)、磷酸化JAK2(p-JAK2)和磷酸化STAT1(p-STAT1)的表达;流式细胞术和原位缺口末端标记法(TUNEL)观察HKC细胞凋亡情况。结果与对照组相比,TNF-α组肾小管上皮细胞凋亡明显增加,凋亡相关Cleaved caspase-3蛋白表达明显上调,Bax/Bcl-2蛋白比率升高;SOCS-1过表达能够抑制TNF-α刺激引起的HKC细胞的凋亡,下调JAK2和STAT1的磷酸化水平及Cleavedcaspase-3蛋白的表达,降低Bax/Bcl-2蛋白比率。结论 SOCS-1过表达抑制TNF-α诱导的肾小管上皮细胞凋亡可能是通过抑制JAK/STAT信号通路活化实现的。 展开更多
关键词 细胞因子信号传导抑制蛋白1 肿瘤坏死因子 肾小管上皮细胞 JAK2/STAT1 基因转染
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半滑舌鳎的一种细胞凋亡抑制因子的克隆、鉴定与分析 被引量:1
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作者 孙业盈 张全启 +4 位作者 齐洁 陈妍婕 李春梅 钟其旺 王志刚 《中国海洋大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期927-931,共5页
克隆半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)的1种细胞凋亡抑制因子survivin基因,并对其序列及表达模式进行分析。结果表明,该基因cDNA序列全长704 bp(GenBank登录号为EU499314),包括86 bp5’非翻译区,444 bp开放阅读框以及含poly(A)信号的17... 克隆半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)的1种细胞凋亡抑制因子survivin基因,并对其序列及表达模式进行分析。结果表明,该基因cDNA序列全长704 bp(GenBank登录号为EU499314),包括86 bp5’非翻译区,444 bp开放阅读框以及含poly(A)信号的174 bp的3’非翻译区,编码147个氨基酸。氨基酸序列同源性分析表明,半滑舌鳎survivin氨基酸序列与斑马鱼、非洲爪蟾、鸡、小鼠和人survivin氨基酸序列的同源性分别达到了63.3%,49.0%,43.7%,43.6%和41.5%。RT-PCR分析表明,survivin基因在半滑舌鳎成体雌鱼卵巢中大量表达,在雌鱼的肾脏中微量表达,在其它雌鱼的组织中无表达,在雄性的任何组织中均无表达。该基因在受精卵、多细胞和囊胚3个胚胎发育的早期阶段,大量表达,而随着胚胎发育的进程,survivin基因的表达逐渐减少,在孵化前尾芽期胚胎中只有微量表达,在孵化后5 d的仔鱼中,几乎检测不到survivin基因的表达。表明该基因可能参与卵子形成和胚胎的早期发育。 展开更多
关键词 半滑舌鳎 抑制蛋白 survivin基因 克隆 表达分析
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组织因子途径抑制物2诱导人卵巢癌A2780细胞凋亡及其机制研究 被引量:5
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作者 仲任 宋善俊 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期635-638,共4页
目的探讨组织因子途径抑制物2(tissue factor pathway inhibitor-2,TFPI-2)表达对卵巢癌细胞杀伤和诱导凋亡的机制。方法脂质体介导人类TFPI-2真核表达载体pBos-Cite-neo/TFPI-2转染卵巢癌细胞系A2780,用G418筛选阳性细胞,经逆转录聚合... 目的探讨组织因子途径抑制物2(tissue factor pathway inhibitor-2,TFPI-2)表达对卵巢癌细胞杀伤和诱导凋亡的机制。方法脂质体介导人类TFPI-2真核表达载体pBos-Cite-neo/TFPI-2转染卵巢癌细胞系A2780,用G418筛选阳性细胞,经逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)、Western blot技术检测转染前后卵巢癌细胞中TFPI-2 mRNA以及相应蛋白质表达情况;利用流式细胞仪检测转染前后卵巢癌细胞凋亡率的改变;通过Western blot技术检测转染前后凋亡相关蛋白Caspase-3、Caspase-9的变化情况。结果转染成功的卵巢癌细胞证实有TFPI-2 mRNA和相应蛋白质的表达;转染TFPI-2后细胞凋亡率明显增加[(62.32±3.72)%vs(0.56±0.17)%,P<0.01],且Caspase-3、Caspase-9比转染前高表达。结论 TFPI-2可通过增加Caspase-3、Caspase-9的活性,诱导卵巢癌细胞的凋亡,为进一步开展卵巢癌基因治疗提供实验依据。 展开更多
关键词 组织因子途径抑制物2 卵巢肿瘤 细胞
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地塞米松对人晶状体上皮细胞核转录因子κB及其抑制蛋白α的表达和细胞凋亡的影响 被引量:3
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作者 王钧蔚 王林 +1 位作者 葛红岩 刘平 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期145-150,共6页
背景长期全身或眼局部应用糖皮质激素可诱导皮质类固醇性白内障,但其作用机制尚不明确。目的研究地塞米松作用于人晶状体上皮细胞(LECs)后对LECs中核转录因子κB(NF—κB)/NF—κB抑制蛋白κ(IκBκ)表达的影响及LECs凋亡的发... 背景长期全身或眼局部应用糖皮质激素可诱导皮质类固醇性白内障,但其作用机制尚不明确。目的研究地塞米松作用于人晶状体上皮细胞(LECs)后对LECs中核转录因子κB(NF—κB)/NF—κB抑制蛋白κ(IκBκ)表达的影响及LECs凋亡的发生情况,了解皮质类固醇性白内障的发病机制。方法取人LECs系(HLE283)在含质量分数20%胎牛血清的DMEM中进行培养和传代。将不同浓度的地塞米松(0.01、0.1、1、10、100μmol/L)分别加入DMSO无血清DMEM培养液中作为不同浓度地塞米松组,不含地塞米松的DMSO无血清DMEM培养液培养的LECs作为空白对照组。采用逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)、Western blot、流式细胞术等方法,分别在基因水平、蛋白水平检测LECs中NF—κB/IκB α浓度的改变及LECs凋亡率的变化。结果扩增的基因片段与所设计片段大小一致。地塞米松作用后NF—α核蛋白在LECs中的表达量随着地塞米松浓度的增加而下降,差异有统计学意义(F=36.077,P=0.004);IκBα蛋白的表达随着地塞米松浓度的增加而上升,差异有统计学意义(F=35.741,P=0.002)。在同浓度地塞米松组,NF—κB核蛋白在LECs中的表达量随作用时间的不同差异有统计学意义(F=16.606,P=0.01),与地塞米松作用24h时的表达量比较,36h和48h时的NF—κB核蛋白表达量明显下降,差异有统计学意义(P=0.002;P=0.01)。与地塞米松作用24h时的表达量比较,36h和48hIκBα蛋白在LECs中的表达量明显增加,差异均有统计学意义(P=0.014;P=0.002)。流式细胞仪检测显示LECs的凋亡率随着地塞米松浓度的增加明显上升,与空白对照组相比差异有统计学意义(P〈0.05)。结论地塞米松通过上调IκBα的表达而过度抑制了NF—κB的活性,并导致LECs凋亡,其作用呈浓度依赖性,这可能是皮质类固醇性白内障发生发展的细胞学和分子生物学机制之一。 展开更多
关键词 皮质类固醇性白内障 地塞米松 核转录因子ΚB 核转录因子κB抑制蛋白α 人晶状体上皮细胞
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X连锁凋亡抑制蛋白相关因子-1抑制肝癌裸鼠移植瘤生长的研究 被引量:1
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作者 朱黎明 涂水平 +3 位作者 戴强 姚玮艳 乔敏敏 江石湖 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1419-1423,共5页
目的研究X连锁凋亡抑制蛋白相关因子-1(XAF1)基因对人肝癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法建立人肝癌细胞株SMMC7721裸鼠荷瘤模型,每组5只裸鼠分别在瘤内分3点注射相同感染滴度的重组腺病毒Ad5/F35-XAF1、Ad5/F35-Null对照空病毒及等体... 目的研究X连锁凋亡抑制蛋白相关因子-1(XAF1)基因对人肝癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法建立人肝癌细胞株SMMC7721裸鼠荷瘤模型,每组5只裸鼠分别在瘤内分3点注射相同感染滴度的重组腺病毒Ad5/F35-XAF1、Ad5/F35-Null对照空病毒及等体积的磷酸缓冲液(PBS),隔天注射1次,疗程2周。每3天测量各组裸鼠移植瘤的体积,观察Ad5/F35-XAF1组移植瘤的生长与其他两组的差异。原位末端标记TUNEL法检测移植瘤细胞的凋亡,免疫组织化学法检测移植瘤中XAF1蛋白表达和微血管密度(MVD)。结果与PBS组和Ad5/F35-Null组比较,瘤内注射Ad5/F35-XAF1组裸鼠移植瘤体积、质量和MVD显著减小(P<0.05或P<0.01),而移植瘤细胞的凋亡指数和XAF1蛋白的表达率均明显增高(P<0.01)。结论腺病毒介导XAF1基因可抑制人肝癌裸鼠移植瘤的生长,可能与该基因诱导肝癌细胞凋亡和抑制肿瘤血管形成有关。 展开更多
关键词 X连锁抑制蛋白相关因子-1 肝癌 腺病毒 移植瘤 血管形成
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家蚕凋亡蛋白抑制因子(BmIAP)基因真核表达与功能分析 被引量:2
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作者 易华山 马鲜平 +1 位作者 潘敏慧 鲁成 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期18-23,共6页
【目的】家蚕Bombyx mori凋亡蛋白抑制因子(BmIAP)是在家蚕中发现的一个凋亡蛋白抑制因子(IAP)。本研究旨在验证家蚕BmIAP蛋白在家蚕细胞内的功能特征,以进一步研究BmIAP在家蚕细胞凋亡中的作用。【方法】对构建的瞬时表达载体PIZ/V5-Bm... 【目的】家蚕Bombyx mori凋亡蛋白抑制因子(BmIAP)是在家蚕中发现的一个凋亡蛋白抑制因子(IAP)。本研究旨在验证家蚕BmIAP蛋白在家蚕细胞内的功能特征,以进一步研究BmIAP在家蚕细胞凋亡中的作用。【方法】对构建的瞬时表达载体PIZ/V5-BmIAP-dsRed,应用脂质体转染家蚕Bm N-SWU1细胞;应用实时荧光定量PCR和Western blot分析BmIAP mRNA及蛋白表达水平;通过150 ng/m L放线菌素D诱导家蚕Bm N-SWU1细胞12,18和24 h,应用免疫荧光及实时荧光定量PCR方法,分析BmIAP瞬时表达与细胞凋亡的关系。【结果】构建的瞬时表达载体PIZ/V5-BmIAP-dsRed能在家蚕Bm N-SWU1细胞表达BmIAP蛋白,其BmIAP mRNA表达水平上调近45倍,融合蛋白约为60 k D;BmIAP基因瞬时表达72 h后,BmIAP能显著抑制放线菌素D诱导12 h时的家蚕Bm N-SWU1细胞凋亡。【结论】BmIAP蛋白在家蚕细胞中能抑制家蚕细胞凋亡,是家蚕的一种凋亡蛋白抑制因子。 展开更多
关键词 家蚕 细胞 蛋白抑制因子 真核表达 瞬时表达
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表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂厄洛替尼联合山奈酚诱导卵巢癌细胞凋亡的协同机制 被引量:10
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作者 张宝月 张俊农 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期31-35,共5页
目的:探讨厄洛替尼和山奈酚对表皮生长因子受体酪氨酸激酶(EGFR-TPK)的抑制作用,并阐明二者对卵巢癌细胞生长的协同抑制作用机制。方法:培养人卵巢癌SKOV-3细胞,将细胞分为空白组、山奈酚组和厄洛替尼组,将不同浓度山奈酚与厄洛替尼加入... 目的:探讨厄洛替尼和山奈酚对表皮生长因子受体酪氨酸激酶(EGFR-TPK)的抑制作用,并阐明二者对卵巢癌细胞生长的协同抑制作用机制。方法:培养人卵巢癌SKOV-3细胞,将细胞分为空白组、山奈酚组和厄洛替尼组,将不同浓度山奈酚与厄洛替尼加入到EGFR-TPK和人卵巢癌SKOV-3细胞中,ELISA法检测EGFR-TPK的活性,采用Transwell小室法检测各组SKOV-3细胞侵袭转移能力,采用酶标仪检测各组SKOV-3细胞凋亡蛋白caspase-3活性,MTT法检测各组SKOV-3细胞的生长抑制率及山奈酚联合厄洛替尼对SKOV-3细胞的生长抑制作用。结果:山奈酚和厄洛替尼对EGFR-TPK的半数抑制浓度(IC50)分别为(2.33±0.32)g·L-1和(1.75±0.18)g·L-1,二者比较差异无统计学意义(P>0.05)。与空白组比较,山奈酚和厄洛替尼组穿膜细胞数减少(P<0.05或P<0.01),SKOV-3细胞中凋亡蛋白caspase-3活性明显增加(P<0.05或P<0.01)。随着山奈酚和厄洛替尼浓度增加,SKOV-3细胞生长抑制率不断增加,与空白组比较差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:山奈酚联合厄洛替尼对人卵巢癌SKOV-3细胞具有协同抑制作用,并对SKOV-3细胞转移起到抑制作用。 展开更多
关键词 山奈酚 厄洛替尼 表皮生长因子受体酪氨酸激酶 SKOV-3人卵巢癌细胞株 抑制作用 细胞 caspase-3
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川芎嗪对人肝星状细胞凋亡与基质金属蛋白酶抑制因子-1 mRNA表达的影响 被引量:2
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作者 何航 华海婴 徐宏平 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2008年第10期1447-1448,共2页
目的:观察川芎嗪(TMP)对人肝星状细胞(HSC)凋亡与基质金属蛋白酶抑制因子-1mRNA(TIMP-1 mRNA)表达的影响。方法:采用人肝星状细胞株LX-2作为理想的肝星状细胞研究模型,LX-2细胞经不同剂量TMP(终浓度为50、100、200、400mg/L)作用48h后,... 目的:观察川芎嗪(TMP)对人肝星状细胞(HSC)凋亡与基质金属蛋白酶抑制因子-1mRNA(TIMP-1 mRNA)表达的影响。方法:采用人肝星状细胞株LX-2作为理想的肝星状细胞研究模型,LX-2细胞经不同剂量TMP(终浓度为50、100、200、400mg/L)作用48h后,应用流式细胞仪Annexin/PI双染方法检测TMP对LX-2细胞凋亡的影响;应用RT-PCR检测TMP对LX-2细胞TIMP-1 mRNA表达的影响。结果:TMP可显著促进LX-2细胞凋亡,细胞早期凋亡率随TMP浓度增加而提高,与空白对照组相比凋亡率显著升高(P<0.01或P<0.05);同时TMP可显著降低LX-2细胞TIMP-1mRNA的表达,与空白对照组相比差异显著(P<0.01)。结论:促进HSC凋亡,抑制其TIMP-1 mR-NA的表达是TMP抗肝纤维化的部分机制。 展开更多
关键词 川芎嗪 肝星状细胞 基质金属蛋白酶抑制因子-1
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核糖核酸酶抑制因子对人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡和侵袭的影响 被引量:1
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作者 周继红 唐晓燕 +2 位作者 赵锐 王慧 夏俊 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期260-264,共5页
目的:将核糖核酸酶抑制因子(RI)转染乳腺癌细胞株MDA-MB-231中,探讨RI对细胞凋亡和侵袭的影响。方法:(1)应用脂质体LipofectamineTM2000分别将重组表达载体pLNCX-RI和空载体pLNCX导入MDA-MB-231细胞,G418筛选阳性克隆并扩增传代。RT-PCR... 目的:将核糖核酸酶抑制因子(RI)转染乳腺癌细胞株MDA-MB-231中,探讨RI对细胞凋亡和侵袭的影响。方法:(1)应用脂质体LipofectamineTM2000分别将重组表达载体pLNCX-RI和空载体pLNCX导入MDA-MB-231细胞,G418筛选阳性克隆并扩增传代。RT-PCR和Western blot检测RI表达。(2)流式细胞术、Transwell细胞侵袭实验分别观察RI对乳腺癌细胞凋亡、侵袭的影响。(3)RT-PCR和West-ern blot法检测Survivin mRNA和蛋白的表达,Western blot方法检测Caspase-3蛋白的活化情况,初步探讨RI诱导乳腺癌细胞凋亡的相关机制。(4)RT-PCR和Western blot法检测CD24mRNA和蛋白的表达,初步探讨RI抑制细胞侵袭的机制。结果:(1)成功构建表达外源性RI的亚克隆细胞系MDA-MB-231/pLNCX-RI。(2)与未转染的MDA-MB-231细胞及转染空载体的MDA-MB-231/pLNCX细胞相比,MDA-MB-231/pLNCX-RI细胞凋亡率增加(P<0.01);细胞穿膜数减少(P<0.01);Survivin mRNA和蛋白的表达量下降(P<0.01),且能活化Caspase-3;CD24 mRNA和蛋白的表达量亦下降(P<0.01)。结论:(1)外源性RI基因在乳腺癌MDA-MB-231细胞中的稳定表达可以通过抑制Survivin的表达和激活Caspase-3促进细胞凋亡,并能通过抑制CD24表达降低细胞侵袭力。 展开更多
关键词 核糖核酸酶抑制因子 人乳腺癌细胞 细胞侵袭 细胞
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A20突变体对前列腺癌细胞炎症反应因子及凋亡抑制基因表达的影响 被引量:1
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作者 王艳艳 但刚 +1 位作者 胡宗海 吴丽娟 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期50-54,共5页
目的通过构建A20突变体真核载体,获取A20突变体,研究其对前列腺癌细胞PC-3M细胞炎症反应因子及凋亡抑制基因表达的影响。方法构建A20突变体pEGFP-C1表达载体,提取质粒,限制性内切酶酶切鉴定并测序。质粒DNA转染COS7细胞,用LPS诱导PC-3M... 目的通过构建A20突变体真核载体,获取A20突变体,研究其对前列腺癌细胞PC-3M细胞炎症反应因子及凋亡抑制基因表达的影响。方法构建A20突变体pEGFP-C1表达载体,提取质粒,限制性内切酶酶切鉴定并测序。质粒DNA转染COS7细胞,用LPS诱导PC-3M细胞产生炎症反应,利用Western blot法检测PC-3M细胞A20,IκB-α、pERK1/ERK2、pJNK、Bcl-2;利用ELISA检测NF-κB、TNF-α、IL-6等的水平。结果限制性内切酶酶切鉴定与DNA测序证实合成A20突变体真核载体寡核苷酸链插入正确。Western blot检测结果表明转染后PC-3M细胞A20蛋白表达显著增。A20突变体抑制IκB-α的降解,ERK1/ERK2、JNK磷酸化及凋亡抑制基因Bcl-2的表达。ELISA法检测结果表明,A20突变体能显著抑制NF-κB、TNF-α、IL-6的表达(P<0.05,P<0.01)。结论成功构建人A20突变体真核表达载体,A20突变能抑制炎症反应因子及凋亡抑制基因。 展开更多
关键词 A20突变体 因子ΚB 前列腺癌 炎症反应因子 抑制基因
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