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毛细胞白血病和毛细胞白血病变异型患者免疫球蛋白重链可变区基因分子特征分析 被引量：1
1
作者 王轶 王婷玉 +5 位作者 王君 阎禹廷 吕瑞 熊文婕 邱录贵 易树华 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2022年第20期1073-1078,共6页
目的:本研究归纳毛细胞白血病(hairy cell leukemia,HCL)和毛细胞白血病变异型(hairy cell leukemia-variant,HCL-v)患者免疫球蛋白重链可变区(immunoglobulin heavy chain variable region,IGHV)基因分子特征,并探讨其与临床特征及预... 目的:本研究归纳毛细胞白血病(hairy cell leukemia,HCL)和毛细胞白血病变异型(hairy cell leukemia-variant,HCL-v)患者免疫球蛋白重链可变区(immunoglobulin heavy chain variable region,IGHV)基因分子特征,并探讨其与临床特征及预后的相关性。方法:回顾性分析2004年12月至2020年1月在中国医学科学院血液病医院完善IGHV检测的29例HCL患者和15例HCL-v患者临床和生存资料。结果:44例患者共检测出23种重排片段,VH4和VH4-34分别是两种疾病最常见的V区基因家族和重排片段。HCL和HCL-v患者中IGHV为突变状态的比例分别为72.4%和66.7%,发生VH4-34重排(VH4-34 rearrangement,VH4-34+)的患者IGHV突变率更低(P<0.001)。在HCL中,使用VH1基因家族患者脾大发生率更低(P=0.041);而VH4-34+或IGHV未突变状态(IGHV-unmutated,IGHV-UM)的患者具有更高的乳酸脱氢酶(VH4-34+P=0.049,IGHV-UM P=0.022)和β2微球蛋白(VH4-34+P=0.039,IGHV-UM P=0.036)水平,且VH4-34+患者BRAF V600E突变率更低(20%vs.85%,P=0.012)。单因素预后分析显示,VH4-34+是HCL患者无进展生存(progression-free survival,PFS)(P=0.001)和总生存(P=0.004)的不良预后因素,IGHV-UM则为HCL-v患者PFS(P=0.038)的危险因素。结论:HCL和HCL-v患者对VH4基因家族及VH4-34存在偏向性使用,VH4-34+和IGHV-UM间存在明显共现性。在HCL中,VH4-34+与高肿瘤负荷及更差生存相关,而IGHV-UM是HCL-v患者PFS的危险因素。 展开更多
关键词 毛细胞白血病 毛细胞白血病变异型 免疫球蛋白重链可变区基因 疾病特征 预后
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新生儿免疫球蛋白重链可变区基因重排研究
2
作者 毛晓健 肖昕 +1 位作者 熊爱华 钱新华 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1901-1904,共4页
目的探讨不同胎龄新生儿免疫球蛋白(Ig)重链可变区(VH)基因重排情况。方法排除宫内感染的新生儿,其中胎龄27周4例,28～32周9例、33～36周12例、37～42周13例,提取其外周血RNA、进行逆转录PCR(RT-PCR)扩增其IgVH基因、6%变性聚丙烯酰胺... 目的探讨不同胎龄新生儿免疫球蛋白(Ig)重链可变区(VH)基因重排情况。方法排除宫内感染的新生儿,其中胎龄27周4例,28～32周9例、33～36周12例、37～42周13例,提取其外周血RNA、进行逆转录PCR(RT-PCR)扩增其IgVH基因、6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染显色。结果各个胎龄VH1～VH7各家族均有多个重排条带表达,同一个VH家族重排基因的平均中分子量在各个胎龄组间差异无显著性。结论27～42周新生儿IgVH基因VH1～VH7家族重排均具有多样性;对同一个VH家族来说,28～42周各胎龄组IgVH基因重排无显著性差异。 展开更多
关键词 新生儿 免疫球蛋白 重链可变区 基因重排
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细胞内RT－PCR扩增免疫球蛋白重链可变区基因 被引量：1
3
作者 李昌龙 赵满仓 +2 位作者 王抒 蒋雷 李健斋 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1995年第4期380-382,共3页
通常，逆转录ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）需要高质量的ｍＲＮＡ，操作过程复杂，效率低且易受到ＲＮａｓｅ的破坏，为了简化操作，提高效率，用１０％甲醛盐溶液固定杂交瘤细胞，以Ｎｐ－４０渗透化处理细胞后做ＲＴ－ＰＣＲ，获得了大约３... 通常，逆转录ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）需要高质量的ｍＲＮＡ，操作过程复杂，效率低且易受到ＲＮａｓｅ的破坏，为了简化操作，提高效率，用１０％甲醛盐溶液固定杂交瘤细胞，以Ｎｐ－４０渗透化处理细胞后做ＲＴ－ＰＣＲ，获得了大约３５０ｂｐ的特异性免疫球蛋白重链可变区基因片段，与用同一对引物得到的常规ＲＴ－ＰＣＲ扩增产物一致．这项技术可用于获得特定结构基因片段，连结并扩增嵌合蛋白基因及构建多克隆免疫球蛋白文库等． 展开更多
关键词 细胞 RT-PCR 重链可变区基因 免疫球蛋白
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哺乳动物免疫球蛋白重链恒定区基因研究进展
4
作者 鲍永华 鄢敏 +1 位作者 赵志辉 郭永臣 《动物医学进展》 CSCD 2006年第5期32-34,共3页
免疫球蛋白分子是由2条相同的重链和2条相同的轻链所构成的多肽链结构,其中重链有5种,与之相应的免疫球蛋白分子为5类,整个免疫球蛋白分子可分为恒定区和可变区2部分。由于免疫球蛋白重链恒定区在免疫过程中起多种效应作用,目前已对多... 免疫球蛋白分子是由2条相同的重链和2条相同的轻链所构成的多肽链结构,其中重链有5种,与之相应的免疫球蛋白分子为5类,整个免疫球蛋白分子可分为恒定区和可变区2部分。由于免疫球蛋白重链恒定区在免疫过程中起多种效应作用,目前已对多种动物的免疫球蛋白重链恒区基因进行了研究,如哺乳动物、鱼类、两栖类、爬行类、鸟类等。了解哺乳动物免疫球蛋白的结构、功能起到了重要的作用,也对了解免疫系统的起源和进化提供依据。 展开更多
关键词 哺乳动物 免疫球蛋白 重链恒定区位点 基因组结构
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5种鲟鱼免疫球蛋白重链恒定区序列研究 被引量：17
5
作者 王荻 刘红柏 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期1247-1253,共7页
为了探讨几种鲟鱼免疫球蛋白(IgM)所包含的信息与其亲缘和进化之间的关系,分别对俄罗斯鲟(Acipenser.gueldenstaedtii)、小体鲟(A.ruthenus)、施氏鲟(A.schrenckii)、中华鲟(A.sinensis)和欧鳇(Husohuso)的IgM重链(IgH)恒定区进行了研... 为了探讨几种鲟鱼免疫球蛋白(IgM)所包含的信息与其亲缘和进化之间的关系,分别对俄罗斯鲟(Acipenser.gueldenstaedtii)、小体鲟(A.ruthenus)、施氏鲟(A.schrenckii)、中华鲟(A.sinensis)和欧鳇(Husohuso)的IgM重链(IgH)恒定区进行了研究。采用RT-PCR的方法对IgH核酸序列进行了克隆,通过软件获得了相应的IgH氨基酸序列。在分别对这5种鲟鱼免疫球蛋白重链恒定区4个区(CH1～CH4)进行研究后发现,其CH4区氨基酸序列相似性最高。通过对CH4区序列氨基酸变异期望值(Kaa),物种分化时间(T)及物种间系统进化树(PhylogeneticTree)等参数的分析,将克隆的5种鲟鱼IgH恒定区序列与已发表的西伯利亚鲟同源序列比对(源于NCBI序列)后发现:西伯利亚鲟与俄罗斯鲟、施氏鲟与欧鳇、小体鲟各构成一个分支,并与中华鲟相对。实验结果从体液免疫系统的演化这个角度,反映了被研究的鲟鱼物种间的分类地位、地理分布及进化关系之间的联系。 展开更多
关键词 免疫球蛋白 重链 恒定区 鲟鱼 进化关系
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欧洲鳗鲡免疫球蛋白M重链基因的原核表达与不同组织中表达变化的定量分析 被引量：4
6
作者 冯建军 关瑞章 +1 位作者 林鹏 郭松林 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期719-725,共7页
通过RT-PCR技术从欧鳗(Anguilla anguilla)脾脏总RNA中获得了编码成熟免疫球蛋白(Ig)重链的基因序列(GenBank accession No.GQ249838),该序列长1 686 bp,编码562个氨基酸残基,分子质量为62.2 ku。将该基因片段与pET-his载体连接构建原... 通过RT-PCR技术从欧鳗(Anguilla anguilla)脾脏总RNA中获得了编码成熟免疫球蛋白(Ig)重链的基因序列(GenBank accession No.GQ249838),该序列长1 686 bp,编码562个氨基酸残基,分子质量为62.2 ku。将该基因片段与pET-his载体连接构建原核表达载体,在大肠杆菌BL21中诱导表达,其表达产物经SDS-PAGE和Western-blotting分析表明新增的66 ku蛋白条带与预期值相符,且能够与兔抗欧鳗IgM血清发生强烈的特异性反应,证实了欧鳗免疫球蛋白重链(IgH)基因能够在大肠杆菌中以包涵体形式高效表达;利用荧光定量PCR检测了Ig基因在欧鳗背肌注射山羊IgG前后不同组织的表达水平,结果显示欧鳗在免疫前后其肾脏与脾脏Ig基因的表达量均明显高于其它组织,在鳃、肌肉中的表达量也较高,而在肝脏、心脏中的表达量较低。此外,对同一组织免疫前后的Ig基因表达量比较发现,除肝脏外,其它组织Ig基因表达水平在免疫后均上升,在鳃和肌肉中达到显著水平,而在脾脏中达到极显著水平。 展开更多
关键词 欧洲鳗鲡 免疫球蛋白重链基因 原核表达 荧光定量PCR
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B细胞淋巴瘤患者外周血免疫球蛋白重链基因重排检测 被引量：1
7
作者 张明智 孙振昌 +4 位作者 王桂叶 王海莉 邢舴 吴广银 任梅香 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2007年第2期253-255,共3页
目的:评价B细胞淋巴瘤(B-NHL)患者外周血免疫球蛋白重链(IgH)基因重排检测的应用价值。方法:收集慢性淋巴结炎患者(10例)、健康体检者(16例)和病理活检确诊为B-NHL的患者(28例)外周血,PCR法检测IgH基因重排,观察B-NHL患者治疗前后IgH基... 目的:评价B细胞淋巴瘤(B-NHL)患者外周血免疫球蛋白重链(IgH)基因重排检测的应用价值。方法:收集慢性淋巴结炎患者(10例)、健康体检者(16例)和病理活检确诊为B-NHL的患者(28例)外周血,PCR法检测IgH基因重排,观察B-NHL患者治疗前后IgH基因重排的变化。结果:B-NHL患者IgH基因重排阳性率为67.9%(19/28),高于骨髓涂片细胞形态学检查阳性率32.1%(9/28),差异有统计学意义(P<0.05),健康体检者及慢性淋巴结炎患者均为阴性。15例外周血单克隆IgH基因重排阳性者,治疗后10例完全缓解(CR)。10例CR中,9例IgH基因重排转阴。结论:外周血IgH基因重排在B-NHL辅助诊断和预后评估等方面具有重要的临床价值。 展开更多
关键词 基因重排 B细胞淋巴瘤 免疫球蛋白重链
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禽鸟免疫球蛋白重链基因研究进展 被引量：1
8
作者 位治国 郭玉萍 +3 位作者 王萍 王晓雪 张霞 文凤云 《中国家禽》 北大核心 2014年第17期37-40,共4页
文章从禽鸟免疫球蛋白重链基因的结构、类型、多样性机制出发,总结了目前禽鸟中免疫球蛋白重链基因的研究情况,发现目前禽鸟免疫球蛋白重链基因的研究主要集中在鸡形目、雁形目、雀形目和平胸总目在内的部分代表性物种,禽鸟中:普遍存在... 文章从禽鸟免疫球蛋白重链基因的结构、类型、多样性机制出发,总结了目前禽鸟中免疫球蛋白重链基因的研究情况,发现目前禽鸟免疫球蛋白重链基因的研究主要集中在鸡形目、雁形目、雀形目和平胸总目在内的部分代表性物种,禽鸟中:普遍存在IgM、IgA、IgY3种免疫球蛋白重链基因类型,分别由μ、α、γ基因所编码;基因座为典型的易位子结构Vn-Dn-Jn-Cμ-Cα-Cγ;禽鸟中普遍缺失编码IgD的δ基因;α基因在基因座上反向插入;免疫球蛋白的多样性主要通过基因转换进行。雁形目中额外高表达IgY(△Fc),该转录本缺失γ基因的第三、第四个外显子,可能导致雁形目特殊的免疫机制。IgY(△Fc)的产生机制及功能的全面研究将有助于开辟禽病治疗的新机制。 展开更多
关键词 禽鸟 免疫球蛋白 重链基因 研究进展
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西伯利亚鲟免疫球蛋白M重链区mRNA的组织分布和细菌感染后的表达 被引量：1
9
作者 田照辉 徐绍刚 +1 位作者 胡红霞 朱华 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期217-220,共4页
根据GenBank登录的西伯利亚鲟Acipernser baerii免疫球蛋白M重链区mRNA（IgHM mRNA）设计引物,进行SYBR green实时定量。结果表明：鲟的脑、鳃、性腺、心脏、后肠、肝脏、肌肉、脾脏8种组织中,IgHM mRNA在脾脏中表达最高,在肝脏和心脏... 根据GenBank登录的西伯利亚鲟Acipernser baerii免疫球蛋白M重链区mRNA（IgHM mRNA）设计引物,进行SYBR green实时定量。结果表明：鲟的脑、鳃、性腺、心脏、后肠、肝脏、肌肉、脾脏8种组织中,IgHM mRNA在脾脏中表达最高,在肝脏和心脏中表达较少,在脑、鳃、性腺、后肠、肌肉5种组织中几乎不表达;在水温22.6～24.5℃时,按100 g体质量注射0.1 mL菌液,给体质量为（260.2±37.8）g的西伯利亚鲟注射浓度为2.0×107CFU/mL的维氏气单胞菌Aeromonas veronii,注射后40 h鱼开始死亡,62 h后停止死亡,注射后直至62 h时,处理组脾脏IgHM mRNA表达量一直处于对照组水平,93 h时处理组脾脏IgHM mRNA显著升高（P〈0.05）,为93 h对照组含量的3.7倍,说明机体已经开始特异性免疫应答。 展开更多
关键词 西伯利亚鲟 免疫球蛋白M重链区mRNA 实时定量PCR 细菌感染
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免疫球蛋白重链和T细胞受体γ基因重排在非霍奇金淋巴瘤中检测的临床意义 被引量：1
10
作者 佟红艳 金洁 楼基余 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2001年第1期5-8,共4页
目的 :探讨免疫球蛋白重链 ( Ig H)和 T细胞受体 γ( TCRγ)基因重排在非霍奇金淋巴瘤( NHL )中的检测意义。方法 :用 PCR方法检测 2 5例 NHL和 1例反应性淋巴结炎患者 ,及 2 0例正常人骨髓、周围血和 /或淋巴结单个核细胞 ( MNCs)中克... 目的 :探讨免疫球蛋白重链 ( Ig H)和 T细胞受体 γ( TCRγ)基因重排在非霍奇金淋巴瘤( NHL )中的检测意义。方法 :用 PCR方法检测 2 5例 NHL和 1例反应性淋巴结炎患者 ,及 2 0例正常人骨髓、周围血和 /或淋巴结单个核细胞 ( MNCs)中克隆性 Ig H、TCRγ基因重排。结果 :克隆性Ig H和 /或 TCRγ基因重排在 2 5例 NHL 中检出为 84.0 % ( 2 1 / 2 5 ) ;克隆性 Ig H基因重排在 B-NHL和 T-NHL中检出分别为 86.7% ( 1 3 / 1 5 )和 2 0 .0 % ( 2 / 1 0 ) ,克隆性 TCRγ基因重排分别为5 3 .3 % ( 8/ 1 5 )和 80 .0 % ( 8/ 1 0 )。 1例反应性淋巴结炎和 2 0例正常人均未检测到 Ig H和 TCRγ基因重排。结论 :Ig H、TCRγ基因重排检测有助于 NHL 的诊断和鉴别诊断 ,及发现 NHL 展开更多
关键词 免疫球蛋白类 重链 基因重排 T细胞抗原受体γ链 非霍奇金淋巴瘤
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女性患者下生殖道淋巴组织高度反应性增生(淋巴瘤样病变):一种具有免疫球蛋白重链克隆性基因重排的良性病变 被引量：9
11
作者 樊祥山 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期115-115,共1页
关键词 淋巴瘤样病变 反应性增生 良性病变 下生殖道 女性患者 克隆性基因重排 免疫球蛋白重链 淋巴组织
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荧光定量PCR分析弥漫大B细胞淋巴瘤免疫球蛋白重链基因重排表达 被引量：1
12
作者 易基群 林桐榆 何友兼 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2007年第8期619-623,共5页
背景与目的:大多数B细胞淋巴瘤患者综合治疗后可以达到完全缓解,但是一半以上的患者终究要复发。复发来源于体内残留的耐药淋巴瘤细胞,即微小残留病变。但临床上发现IgH基因重排阳性患者并非都出现复发或远处浸润。因此,推测阳性患者是... 背景与目的:大多数B细胞淋巴瘤患者综合治疗后可以达到完全缓解,但是一半以上的患者终究要复发。复发来源于体内残留的耐药淋巴瘤细胞,即微小残留病变。但临床上发现IgH基因重排阳性患者并非都出现复发或远处浸润。因此,推测阳性患者是否复发,可能与IgH基因重排的表达量有关。本研究探讨荧光染料标记的即时定量PCR方法检测弥漫大B细胞淋巴瘤免疫球蛋白重链基因(IgH)重排的可行性及临床意义。方法:44例DLBCL患者的57份新鲜骨髓标本用于检测IgH基因重排,Namalwa细胞系作阳性对照,U-937细胞系作阴性对照。β-actin作内参照,SYBRGreen荧光染料标记的实时荧光定量PCR方法分别检测IgH基因重排CDRIII。结果:分析融解曲线可以确定IgH基因重排产物的特异性。荧光定量PCR检测IgH基因重排的阳性率63.2%。IgH/β-actin阳性表达量在0.01～4131.69,中位数0.42。Ⅰ/Ⅱ期患者IgH基因重排表达量中位数为0,Ⅲ、Ⅳ期患者IgH基因重排表达量中位数为0.35,经统计学检验,两组患者之间差异有显著性(P=0.018)。LDH值高于正常组,IgH基因重排表达量为0.39,LDH值低于正常组,IgH基因重排表达量为0.01,经非参数检验,两组患者之间差异有显著性(P=0.046)。结论:荧光染料标记的定量PCR方法可用于弥漫大B细胞淋巴瘤的骨髓微小残留病变的检测。检测骨髓IgH基因重排,可以协助分期。 展开更多
关键词 弥漫大B细胞淋巴瘤 免疫球蛋白重链基因 实时荧光定量PCR 嵌套式PCR
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用PCR技术对多发性骨髓瘤免疫球蛋白重链基因重排的研究 被引量：1
13
作者 陈文明 朱嘉芷 +3 位作者 张鹏 孙卫红 李淑兰 李桂英 《首都医学院学报》 1995年第4期274-277,共4页
用ＰＣＲ技术检测了２１例多发性骨髓瘤（ＭＭ）病人外周血或骨髓涂片免疫球蛋白重链基因重排，发现１７例阳性，４例阴性，其中２例为轻链型。外周血免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）基因重排的检出率与骨髓涂片的结果基本一致，表明ＩｇＨ基... 用ＰＣＲ技术检测了２１例多发性骨髓瘤（ＭＭ）病人外周血或骨髓涂片免疫球蛋白重链基因重排，发现１７例阳性，４例阴性，其中２例为轻链型。外周血免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）基因重排的检出率与骨髓涂片的结果基本一致，表明ＩｇＨ基因重排为诊断ＭＭ的最敏感方法之一，可弥补形态学、血清学诊断之不足。 展开更多
关键词 多发性 骨髓瘤 免疫球蛋白重链 基因重排
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T细胞受体γ基因和免疫球蛋白重链基因在急性淋巴细胞白血病细胞的重排及其在分型中的意义
14
作者 张东华 刘文励 +2 位作者 唐锦治 沈关心 曾凡斌 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1995年第3期296-302,共7页
用PCR扩增检测27例急性淋巴细胞白血病(acute lymphocytic leukemia,ALL)和1例T细胞淋巴瘤(T lymphocytic lymphoma,T-LL)的T细胞受体(Tcell receptor,TCR)γ基因和免疫球蛋白重链(immunoglobulin heavy chain,IgH)基因重排。TCRγ基因... 用PCR扩增检测27例急性淋巴细胞白血病(acute lymphocytic leukemia,ALL)和1例T细胞淋巴瘤(T lymphocytic lymphoma,T-LL)的T细胞受体(Tcell receptor,TCR)γ基因和免疫球蛋白重链(immunoglobulin heavy chain,IgH)基因重排。TCRγ基因在9例T-ALL及2例未分型白血病病例中全部重排;在6例B-ALL中有1例重排;在10例C-ALL中有1例重排,而IgH基因在24例ALL病例中重排,其中7例为T-ALL,1例为未分型白血病。TCRγ和IgH基因在1例T-LL中均无重排,在T-ALL、B-ALL和C-ALL中均有交叉重排现象。我们探讨了这些结果在分型中的意义,同时还注意到,在28例中的10例病人存在IgH和TCRγ基因双重重排,如作为特异的双标记检测其微小残留白血病细胞,无疑会提高准确率。 展开更多
关键词 急性淋巴细胞白血病 免疫球蛋白重链 T细胞受体 基因重排 白血病分型
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用电镜原位杂交法定位急性白血病免疫球蛋白重链基因重排
15
作者 邓星明 王德炳 +3 位作者 杨耀明 郑荣 谢大鹤 郝跃华 《北京医科大学学报》 CSCD 1994年第5期327-330,共4页
采用电镜原位杂交法，观察６例急性白血病免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）基因重排，结果发现，５例急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）阳性，表明均为Ｂ－ＡＬＬ；１例急性粒单细胞白血病（ＡＭＬ－Ｍ４）阴性。在阳性细胞核内，代表ＩｇＨ基因重... 采用电镜原位杂交法，观察６例急性白血病免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）基因重排，结果发现，５例急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）阳性，表明均为Ｂ－ＡＬＬ；１例急性粒单细胞白血病（ＡＭＬ－Ｍ４）阴性。在阳性细胞核内，代表ＩｇＨ基因重排的胶体金颗粒成群分布，该技术把核酸探针杂交与超微形态学相结合，在基因水平确定白血病细胞类型，尤其对缺乏特异免疫表型的白血病更有应用价值。 展开更多
关键词 免疫球蛋白 重链 基因重排 急性 白血病
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磺胺二甲氧嘧啶免疫小鼠抗体重链可变区基因的克隆及序列分析
16
作者 曹盛丰 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期24-27,共4页
应用RT-PCR方法从磺胺二甲氧嘧啶免疫小鼠B细胞扩增和克隆抗SDM抗体VH基因。测序结果表明:抗SDM抗体VH基因为339 bp,编码113个氨基酸。用NCBI GenBank分析表明,抗SDM抗体VH基因符合小鼠抗体重链可变区特征,隶属于小鼠抗体重链SM7家族,... 应用RT-PCR方法从磺胺二甲氧嘧啶免疫小鼠B细胞扩增和克隆抗SDM抗体VH基因。测序结果表明:抗SDM抗体VH基因为339 bp,编码113个氨基酸。用NCBI GenBank分析表明,抗SDM抗体VH基因符合小鼠抗体重链可变区特征,隶属于小鼠抗体重链SM7家族,由胚系基因VHSM7.a3.93-DSP2.9-JH1功能性重排形成。抗SDM抗体VH基因的克隆为抗SDM单链抗体的构建与表达奠定了基础。 展开更多
关键词 磺胺二甲氧嘧啶 重链可变区 基因克隆 序列分析
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伴发副肿瘤性天疱疮的Castleman瘤B细胞免疫球蛋白基因重排与超变分析 被引量：4
17
作者 王京 卜定方 朱学骏 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期454-461,共8页
目的 :我科近来研究了副肿瘤性天疱疮 (PNP)患者肿瘤在发病中的作用 ,证明 1例Castleman瘤产生针对表皮连接蛋白的抗体。本文进一步探讨肿瘤和抗体在疾病发生过程中的作用和PNP的发病机制。方法 :对 1例副肿瘤性天疱疮伴发已经证明可分... 目的 :我科近来研究了副肿瘤性天疱疮 (PNP)患者肿瘤在发病中的作用 ,证明 1例Castleman瘤产生针对表皮连接蛋白的抗体。本文进一步探讨肿瘤和抗体在疾病发生过程中的作用和PNP的发病机制。方法 :对 1例副肿瘤性天疱疮伴发已经证明可分泌自身反应性抗体的Castleman瘤患者肿瘤B细胞进行培养 ,免疫组化分析其表面标志 ;扩增患者肿瘤组织的RNA ,将PCR产物克隆、测序。对B细胞克隆的免疫球蛋白可变区基因重排和超变区突变特点进行分析。结果 :培养肿瘤细胞多数为CD2 0、HLA DR、smIgM、smIgG阳性。克隆得到IgVH 与IGHV3 9 0 1胚系基因片段接近 ,IgVL与IGKV4 1 0 1胚系基因片段同源。VH和VL 基因CDRs区的核苷酸改变均明显多于FRs区 ,并且在VH和VL 基因观察到的CDRs区替换突变数目远大于可能发生随机突变的值。结论 :本例伴发Castleman瘤的副肿瘤性天疱疮患者的肿瘤中存在特殊B细胞克隆 ,其已重排的免疫球蛋白可变区基因CDRs超变区发生明显体细胞突变 ,可能是抗原选择的结果。该克隆经过免疫球蛋白类别转换 ,可能直接产生与表皮自身抗原特异性结合的自身反应性IgG。 展开更多
关键词 副肿瘤性天疱疮 B细胞 患者 免疫球蛋白 抗体 克隆 可变区基因 VL基因 PCR产物 随机突变
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抗鳗弧菌独特型单克隆抗体重链可变区基因的克隆及序列测定 被引量：1
18
作者 夏永娟 黄宝成 +2 位作者 温伟红 黄威权 杨安钢 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期176-177,共2页
关键词 鱼鳗弧菌感染 单克隆抗体 重链可变区 基因克隆 基因测序
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抗人CD14新克隆ZCH-7-2F9单抗轻重链可变区基因克隆与序列分析 被引量：1
19
作者 宁铂涛 汤永民 +2 位作者 曹江 沈红强 钱柏芹 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2007年第4期348-354,共7页
目的:获取抗人CD14单克隆抗体(单抗)ZCH-7-2F9(简称2F9)轻链可变区(VL)和重链可变区(VH)基因,为2F9单链抗体(ScFv2F9)的构建奠定基础。方法:复苏2F9和NS-1细胞株,并亚克隆2F9细胞株,从其最佳克隆93A10提取总RNA,RQ1 RNase-Free DNase处... 目的:获取抗人CD14单克隆抗体(单抗)ZCH-7-2F9(简称2F9)轻链可变区(VL)和重链可变区(VH)基因,为2F9单链抗体(ScFv2F9)的构建奠定基础。方法:复苏2F9和NS-1细胞株,并亚克隆2F9细胞株,从其最佳克隆93A10提取总RNA,RQ1 RNase-Free DNase处理污染的DNA,与NS-1细胞进行同步对照,通过RT-PCR,扩增获得2F9单抗VL基因和VH基因,分别克隆入pGEM○R-T Easy载体,然后转化DH5α细菌,酶切鉴定并纯化阳性重组子,测序后进行在线核苷酸序列分析。结果:2F9单抗VL基因全长321 bp,编码107个氨基酸,归属于小鼠Ig的Vκ基因,氨基酸序列分析结果显示,VL含有明确的4个框架区(FR)和3个抗原决定簇互补区(CDR),在第23位和第88位为半胱氨酸,是与抗体二硫键形成有关的两种特征性氨基酸;其VH基因全长360 bp,编码120个氨基酸,归属于小鼠Ig的VH基因,氨基酸序列分析结果显示,VH含有明确的4个框架区和3个抗原决定簇互补区,在第22位和第96位为半胱氨酸,是与抗体二硫键形成有关的两种特征性氨基酸。结论:经核苷酸序列分析证明所克隆的基因分别是2F9单抗的VL和VH基因,为2F9基因工程抗体研究奠定了坚实的基础。 展开更多
关键词 抗体 单克隆 抗原 CD14 序列分析 免疫球蛋白可变区/遗传学 基因
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单克隆抗体3D3重链可变区基因结构分析 被引量：1
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作者 史依仁 郭先健 颜江华 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期264-264,共1页
单克隆抗体（ＭｃＡｂ）在科研及影像诊断等领域应用十分广泛，鼠源性单克隆抗体，由于其抗原性，在人体疾病治疗应用受到限制，利用ＤＮＡ重组技术，构建各种重组抗体基因，表达制备重组抗体，可降低其抗原性，前提是必须获得其可变区... 单克隆抗体（ＭｃＡｂ）在科研及影像诊断等领域应用十分广泛，鼠源性单克隆抗体，由于其抗原性，在人体疾病治疗应用受到限制，利用ＤＮＡ重组技术，构建各种重组抗体基因，表达制备重组抗体，可降低其抗原性，前提是必须获得其可变区基因，我们利用设计合成的一对鼠抗体... 展开更多
关键词 单克隆抗体 3D3 重链可变区 基因结构
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