生长抑素受体亚型在人鼻咽癌细胞株CNE_2中表达 被引量：3

1

作者 李勇 孙晓南 +1 位作者 姒健敏 张骏 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2006年第8期647-650,共4页

背景与目的:生长抑素受体(somatostatin receptor SSTR)在许多肿瘤组织均有表达,为生长抑素类似物如奥曲肽用于这些肿瘤的治疗提供了生物学基础,但对生长抑素受体在鼻咽癌中表达情况的研究甚少。本研究旨在了解生长抑素受体基因在鼻咽... 背景与目的:生长抑素受体(somatostatin receptor SSTR)在许多肿瘤组织均有表达,为生长抑素类似物如奥曲肽用于这些肿瘤的治疗提供了生物学基础,但对生长抑素受体在鼻咽癌中表达情况的研究甚少。本研究旨在了解生长抑素受体基因在鼻咽癌细胞中的表达情况,为生长抑素类似物用于鼻咽癌治疗的进一步研究提供试验基础。方法:采用RT-PCR法和SP免疫组化法联合检测体外培养的人鼻咽癌细胞株CNE2的SSTRs表达,并对PCR mRNA产物测序以鉴定结果。结果:RT-PCR提示人鼻咽癌细胞株CNE2分别表达生长抑素受体亚型SSTR1、SSTR2、SSTR4;免疫组化结果:人鼻咽癌细胞株CNE2表达SSTR1、SSTR2A为强阳性(>60%),表达SSTR4为弱阳性、SSTR2介于两者之间、SSTR3和SSTR5则无表达。结论:我们的研究证实人鼻咽癌细胞株CNE2有多种生长抑素受体亚型基因表达,且以表达SSTR1、SSTR2较多。 展开更多

关键词 人鼻咽癌细胞株cne2 生长抑素受体 培养的肿瘤细胞

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茶多酚对人鼻咽癌细胞株CNE_2细胞DNA损伤和细胞周期的影响 被引量：12

2

作者 谢冰芬 郝东磊 +3 位作者 刘宗潮 朱孝峰 冯公侃 潘启超 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期424-427,共4页

目的　观察茶多酚（ｔｅａ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ， ＴＰ） 对人鼻咽癌细胞株ＣＮＥ２ 细胞ＤＮＡ 的损伤作用和细胞周期的影响。方法　用琼脂糖凝胶电泳方法测定ＴＰ对细胞ＤＮＡ的断裂作用；用流式细胞术（ＦＣＭ） 观察ＴＰ对ＣＮ... 目的　观察茶多酚（ｔｅａ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ， ＴＰ） 对人鼻咽癌细胞株ＣＮＥ２ 细胞ＤＮＡ 的损伤作用和细胞周期的影响。方法　用琼脂糖凝胶电泳方法测定ＴＰ对细胞ＤＮＡ的断裂作用；用流式细胞术（ＦＣＭ） 观察ＴＰ对ＣＮＥ２ 细胞周期的变化及其诱导凋亡。结果　ＴＰ可引起ＣＮＥ２ 细胞ＤＮＡ 断裂、其断裂程度随剂量的增加和作用时间的延长而增强。ＴＰ不同浓度和不同作用时间可干扰ＣＮＥ２ 细胞在周期中的进程，使Ｇ１ 期细胞明显增多，Ｓ期细胞减少，细胞分裂增殖指数（ＰＩ）亦随之降低。同时，ＴＰ可诱导ＣＮＥ２ 细胞凋亡，其凋亡率随ＴＰ浓度的增加和作用时间的延长在逐渐增加。结论　ＴＰ１９９８１２０４ 收稿，１９９９０７３１ 修回＊ 国家自然科学基金资助课题，Ｎｏ ３９３７０８００作者简介：谢冰芬，女，副研究员，硕士生导师，研究方向为肿瘤药理可引起人鼻咽癌细胞株ＣＮＥ２ 细胞的ＤＮＡ 断裂，使细胞停滞于Ｇ１ 期，阻止Ｇ１ 期细胞进入Ｓ期；同时亦可诱导细胞凋亡。 展开更多

关键词 茶多酚 鼻咽癌 细胞株 cne2 细胞 DNA损伤

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CNE1、CNE2鼻咽癌细胞株中ATM/PI3K区基因突变的检测 被引量：4

3

作者 王宏梅 伍新尧 +2 位作者 夏云飞 黄艳梅 刘秀芳 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期276-278,共3页

为了探讨具有不同放射敏感性的CNE1、CNE2鼻咽癌细胞株中ATM/PI3K区基因突变的情况,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术和PCR产物直接测序方法(荧光标记的ddNTPs循环测序),对CNE1、CNE2中ATM的PI3K关键区域进行突变检测。结果表明,所... 为了探讨具有不同放射敏感性的CNE1、CNE2鼻咽癌细胞株中ATM/PI3K区基因突变的情况,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术和PCR产物直接测序方法(荧光标记的ddNTPs循环测序),对CNE1、CNE2中ATM的PI3K关键区域进行突变检测。结果表明,所测CNE1、CNE2中的ATM/PI3K区序列中没有发生突变,认为鼻咽癌细胞株CNE1、CNE2间内在的放射敏感性的差异可能与ATM/PI3K区基因突变不相关。 展开更多

关键词 cne1 cne2 鼻咽癌 细胞株 ATM/P13K区 基因突变 RT-PCR 放射敏感性

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土贝母皂苷诱导人鼻咽癌细胞株CNE-2Z细胞凋亡的研究 被引量：13

4

作者 翁昔阳 于立坚 马润娣 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期181-181,共1页

目的　研究土贝母皂苷 (下称皂苷 )对人鼻咽癌细胞株CNE 2Z细胞凋亡的影响。方法　MTT法检测皂苷对CNE 2Z细胞生长的影响 ;形态学方法 (荧光显微镜和透射电镜 )、流式细胞仪和DNA琼脂糖凝胶电泳观察和分析在皂苷作用下CNE 2Z细胞形态、... 目的　研究土贝母皂苷 (下称皂苷 )对人鼻咽癌细胞株CNE 2Z细胞凋亡的影响。方法　MTT法检测皂苷对CNE 2Z细胞生长的影响 ;形态学方法 (荧光显微镜和透射电镜 )、流式细胞仪和DNA琼脂糖凝胶电泳观察和分析在皂苷作用下CNE 2Z细胞形态、DNA含量的变化和DNA断裂的情况 ;蛋白免疫印迹法检测凋亡相关基因bcl 2、bax和cas pase 3表达的变化。 结果　皂苷抑制CNE 2Z细胞的生长 ,其效果与皂苷的浓度和作用时间相关 ;诱导CNE 2Z细胞发生典型程序性死亡 ;凋亡抑制基因bcl 2表达逐渐减少 ;而凋亡诱导基因bax和caspase 3在 1、3、5h表达增高。 结论　诱导细胞凋亡是皂苷发挥抗瘤效果的一种重要机制 ;皂苷诱导的CNE 2Z细胞凋亡与bcl 2、bax和caspase 展开更多

关键词 土贝母皂苷 细胞凋亡 凋亡相关基因 鼻咽癌细胞株 cne-2Z

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塞来昔布对鼻咽癌细胞株CNE-2Z作用的研究 被引量：7

5

作者 向银洲 魏莲枝 李洁 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2007年第11期1154-1157,1161,共5页

目的:探讨塞来昔布对鼻咽癌细胞株CNE-2Z的生长抑制作用及可能机制。方法:以人鼻咽癌细胞株CNE-2Z为研究对象,体外药物敏感试验(MTT)观察不同浓度和作用时间的塞来昔布对细胞的生长抑制作用;免疫细胞化学染色检测细胞增殖核抗原(PCNA)... 目的:探讨塞来昔布对鼻咽癌细胞株CNE-2Z的生长抑制作用及可能机制。方法:以人鼻咽癌细胞株CNE-2Z为研究对象,体外药物敏感试验(MTT)观察不同浓度和作用时间的塞来昔布对细胞的生长抑制作用;免疫细胞化学染色检测细胞增殖核抗原(PCNA)和环氧化酶-2(COX-2)的表达;流式细胞术(FCM)检测药物作用后细胞周期分布。结果:MTT试验显示塞来昔布对人鼻咽癌细胞株CNE-2Z增殖有抑制作用,其抑制效应具有时间及浓度依赖的特点;流式细胞术表明塞来昔布可引起CNE-2Z细胞G0/G1期阻滞;免疫组织化学检测显示塞来昔布下调PCNA、COX-2蛋白表达。结论:CNE-2Z细胞中存在COX-2表达,塞来昔布可抑制鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖,可能成为鼻咽癌化疗的有效药物。 展开更多

关键词 塞来昔布 鼻咽癌细胞株cne-2Z 生长抑制

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肝素增强佛波酯对人鼻咽癌CNE2细胞的作用 :上调c-jun ,p53 ,p21的表达(英文) 被引量：7

6

作者 李红良 陈丹丹 +5 位作者 张海伟 钟玲 李小红 罗英儒 任先达 司徒锐 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期250-255,共6页

目的 :观察肝素联合佛波酯对人鼻咽癌细胞的增殖与凋亡的影响及其可能的分子机制。方法 :用细胞记数法、流式细胞术观察肝素联合佛波酯对人鼻咽癌细胞的增殖及细胞周期的影响 ;而用TUNEL、琼脂糖凝胶电泳、Westernblot等方法观察肝素与... 目的 :观察肝素联合佛波酯对人鼻咽癌细胞的增殖与凋亡的影响及其可能的分子机制。方法 :用细胞记数法、流式细胞术观察肝素联合佛波酯对人鼻咽癌细胞的增殖及细胞周期的影响 ;而用TUNEL、琼脂糖凝胶电泳、Westernblot等方法观察肝素与佛波酯联合应用对人鼻咽癌细胞凋亡的作用。结果 :肝素与佛波酯联合应用后对鼻咽癌细胞的生长抑制及其凋亡具有显著增强的作用 ,同佛波酯单独应用于诱导细胞凋亡相比 ,低剂量的肝素与佛波酯联合应用后发现 :TUNEL阳性细胞明显增多 ;G1 期细胞阻止 ,S期细胞明显减少 ,凋亡率增加 ;DNA“梯形”变化更加明显 ;c-jun ,p53 ,p2 1基因表达明显升高 ,而c-fos在整个用药过程中没有改变。结论 :肝素增强佛波酯对人鼻咽癌细胞的抗增殖及促凋亡 ,这可能与c-jun ,p53 ,p2 展开更多

关键词 肝素 细胞周期 细胞凋亡 佛波醇酯类 cne2细胞 鼻咽癌 c-jumn P53 P21

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二烯丙基二硫诱导人鼻咽癌CNE2细胞凋亡及其可能的分子机制 被引量：6

7

作者 唐海林 宋颖 +3 位作者 唐荣军 周秀田 曾希 苏琦 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2007年第8期598-602,共5页

背景与目的:二烯丙基二硫(DADS)是大蒜中的一种脂溶性单体化合物,对多种肿瘤细胞有促凋亡作用。本实验旨在探讨DADS抑制人鼻咽癌CNE2细胞增殖与诱导凋亡的生物学效应及可能的分子机制。方法:分别采用MTT、光学显微镜、流式细胞仪、DNA... 背景与目的:二烯丙基二硫(DADS)是大蒜中的一种脂溶性单体化合物,对多种肿瘤细胞有促凋亡作用。本实验旨在探讨DADS抑制人鼻咽癌CNE2细胞增殖与诱导凋亡的生物学效应及可能的分子机制。方法:分别采用MTT、光学显微镜、流式细胞仪、DNA琼脂糖凝胶电泳与Western blot检测DADS抑制CNE2细胞增殖与诱导凋亡作用及Bcl-2、Bax和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase3)蛋白的表达。结果:MTT结果显示,50、100、200及400μmol/LDADS作用CNE2细胞48h,抑制率分别为3.66%、14.25%、29.66%及61.28%,呈浓度依赖性(P<0.05)。形态学观察发现,DADS处理24h后,部分CNE2细胞变圆,体积明显缩小,胞质强嗜酸性,核固缩、深染,核染色质积聚至核膜周边,呈现凋亡细胞形态学改变。流式细胞术分析显示,50、100、200和400μmol/LDADS作用24h,凋亡率分别为(10.8±1.3)%、(14.8±1.1)%、(21.7±2.0)%及(29.8±2.6)%,呈浓度依赖性诱导CNE2细胞凋亡(n=3,P<0.05)。200及400μmol/LDADS分别作用CNE2细胞24h后,DNA凝胶电泳出现典型梯形条带。Western blot检测显示,50、100、200和400μmol/LDADS处理CNE2细胞24h后,Bcl-2蛋白与β-Actin的灰度值比分别是1.92±0.21、1.21±0.18、0.89±0.14及0.41±0.09,与对照组(2.24±0.26)比较,差异有显著性(P<0.05);Bax蛋白与β-Actin的灰度值比分别是0.78±0.14、1.12±0.19、1.54±0.22及2.08±0.27,与对照组(0.33±0.08)比较,差异有显著性(P<0.05);随浓度的增加,Bcl-2蛋白下调,Bax蛋白表达上调。200、400μmol/LDADS处理CNE2细胞24h后,与对照组相比,Caspase3酶原蛋白条带变细并且可见到蛋白裂解产物,表明DADS可以促进Caspase3的活化。结论:DADS具有抑制人鼻咽癌CNE2细胞增殖和诱导凋亡的作用,其机制可能与Bcl-2蛋白下调,Bax蛋白表达上调导致Bcl-2/Bax比值下降,促进Caspase3的活化有关。 展开更多

关键词 二烯丙基二硫 鼻咽癌 cne2细胞 凋亡

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粉防己碱对人鼻咽癌细胞株CNE增殖抑制和凋亡作用的研究 被引量：17

8

作者 邓雨霞 孙新臣 《医学研究生学报》 CAS 2007年第4期360-365,共6页

目的:探讨粉防己碱(Tet)对人鼻咽癌细胞株CNE增殖抑制和凋亡的影响。方法:将人鼻咽癌细胞株CNE分为不同浓度Tet处理组,并设立对照组。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察Tet对人鼻咽癌细胞株CNE体外生长的抑制作用;采用透射电镜、琼脂糖凝... 目的:探讨粉防己碱(Tet)对人鼻咽癌细胞株CNE增殖抑制和凋亡的影响。方法:将人鼻咽癌细胞株CNE分为不同浓度Tet处理组,并设立对照组。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察Tet对人鼻咽癌细胞株CNE体外生长的抑制作用;采用透射电镜、琼脂糖凝胶电泳技术、流式细胞术Annenxin V/PI EGFP观察Tet对人鼻咽癌细胞株CNE凋亡的影响;采用逆转录-多聚酶链反应技术(RT-PCR)观察Tet对人鼻咽癌细胞株CNE凋亡相关基因mRNA表达的影响。结果:Tet呈浓度依赖性抑制癌细胞体外生长(P<0.05)。Tet处理细胞72 h后,电镜下可见细胞缩小,核裂解,凋亡小体形成;随着Tet浓度的提高,各Tet处理组DNA凝胶电泳梯形条带和细胞凋亡率渐趋明显。与对照组相比较,Bcl-2 mRNA的表达渐减弱,Bax基因mRNA表达渐增强(P<0.05)。结论:Tet可抑制癌细胞生长,促进癌细胞凋亡,其抗癌作用机制可能与下调Bcl-2基因表达和上调Bax基因表达有密切联系。 展开更多

关键词 粉防己碱 人鼻咽癌细胞株cne 细胞凋亡 基因调控

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肝素对叉孢素介导的人鼻咽癌CNE2细胞的增殖与凋亡的影响(英文) 被引量：4

9

作者 李红良 陈丹丹 +4 位作者 罗英儒 张海伟 任先达 刘建军 司徒锐 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期343-343,共1页

目的 :观察肝素对叉孢素介导的人鼻咽癌细胞的增殖与凋亡的影响 ,以及探讨其可能的分子机制。方法 :应用了MTT法、荧光染色、TUNEL、流式细胞术、琼脂糖凝胶电泳、RT -PCR及Westernblot等方法。结果 :肝素与叉孢素联合应用后对鼻咽癌细... 目的 :观察肝素对叉孢素介导的人鼻咽癌细胞的增殖与凋亡的影响 ,以及探讨其可能的分子机制。方法 :应用了MTT法、荧光染色、TUNEL、流式细胞术、琼脂糖凝胶电泳、RT -PCR及Westernblot等方法。结果 :肝素与叉孢素联合应用后对鼻咽癌细胞的增殖及凋亡具有显著的影响。低剂量的肝素与叉孢素联合应用 :细胞生长抑制率显著高于叉孢素单独应用 ;细胞核浓缩 ,核碎裂等形态学变化更加明显 ;TUNEL阳性细胞明显增多 ;凋亡率增加 ;DNA“梯形”变化也清晰可见 ;c-myc ,bax基因的表达明显高于叉孢素单独应用 ,而bcl- 2在整个用药过程中没有改变。结论 :肝素与叉孢素对人鼻咽癌细胞在抗增殖及促凋亡方面有协同作用 ,这可能与c -myc ,bax的表达上调有关 . 展开更多

关键词 肝素 细胞凋亡 叉孢素 蛋白激酶C 鼻咽癌 cne2细胞 细胞增殖

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表皮生长因子受体调控的人鼻咽癌细胞系CNE2分泌蛋白质的筛选 被引量：5

10

作者 梁可 陈主初 +7 位作者 易红 李建玲 张鹏飞 李茂玉 李萃 冯雪萍 彭芳 肖志强 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第1期100-106,共7页

为筛选表皮生长因子受体(epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR)调控的鼻咽癌(nasopharyngealcarcinoma,NPC)细胞的分泌蛋白质,揭示EGFR在NPC发病中的作用机制,采用无血清培养法培养NPC细胞系CNE2,并用转化生长因子(transforminggrowthfa... 为筛选表皮生长因子受体(epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR)调控的鼻咽癌(nasopharyngealcarcinoma,NPC)细胞的分泌蛋白质,揭示EGFR在NPC发病中的作用机制,采用无血清培养法培养NPC细胞系CNE2,并用转化生长因子(transforminggrowthfactor-α,TGF-α)刺激CNE2细胞24h作为实验组,对照组CNE2细胞不用TGF-α刺激.超滤法脱盐并浓缩两组细胞的培养上清制备分泌蛋白,采用双向凝胶电泳技术(two-dimensionalelectrophoresis,2-DE)分离两组细胞的分泌蛋白,PDquest图像分析软件识别差异表达的蛋白质点,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assistedlaserdesorption/ionizationtimeofflightmassspectrometry,MALDI-TOF-MS)鉴定差异表达蛋白.建立了实验组和对照组CNE2细胞分泌蛋白的2-DE图谱,图像分析识别了22个差异蛋白质点,质谱鉴定了8个非冗余蛋白质,其功能涉及肿瘤细胞侵袭转移、细胞凋亡和增殖,为进一步揭示EGFR在NPC发病中的作用及其机制奠定了基础. 展开更多

关键词 鼻咽癌 cne2细胞 表皮生长因子受体(EGFR) 分泌蛋白质组 二维凝胶电泳 质谱

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二烯丙基二硫下调cyclin D1和CDK4的表达诱导人鼻咽癌CNE2细胞G_1期阻滞 被引量：3

11

作者 胡波 邱青朝 +2 位作者 贺修培 赵其辉 贺修胜 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1203-1207,共5页

目的研究二烯丙基二硫(DADS)对人鼻咽癌CNE2细胞的影响及其分子机制。方法采用MTT法检测DADS对CNE2细胞增殖抑制作用;流式细胞术分析DADS对CNE2细胞周期分布的影响;运用RT-PCR和Western blot方法分析DADS作用CNE2细胞后,cyclin D1和CDK... 目的研究二烯丙基二硫(DADS)对人鼻咽癌CNE2细胞的影响及其分子机制。方法采用MTT法检测DADS对CNE2细胞增殖抑制作用;流式细胞术分析DADS对CNE2细胞周期分布的影响;运用RT-PCR和Western blot方法分析DADS作用CNE2细胞后,cyclin D1和CDK4的表达变化。结果 MTT结果显示,不同浓度DADS(90、140、240、400μmol·L-1)处理CNE2细胞48h后,生长抑制率分别为4.0%、13.8%、25.8%、51.2%;流式细胞术分析显示,DADS阻滞CNE2细胞于G1期,并呈浓度依赖性;RT-PCR和Western blot结果表明,细胞周期调控基因cyclinD1、CDK4表达下调。结论 DADS对CNE2细胞的增殖抑制作用与其阻滞细胞G1期有关,并且可能是通过抑制cyclin D1、CDK4的表达使CNE2细胞阻滞于G1期。 展开更多

关键词 二烯丙基二硫 鼻咽癌 cne2细胞 细胞周期 CYCLIN D1 CDK4

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运用蛋白质组学技术研究EB病毒诱导鼻咽癌细胞CNE2表达变化的蛋白质 被引量：4

12

作者 江培洲 甘明 +4 位作者 黄华 沈新明 应万涛 钱小红 姚开泰 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期29-33,共5页

【目的】寻找并鉴定CNE2细胞在EB病毒感染后表达发生变化的功能蛋白质,为阐明该病毒诱导鼻咽上皮细胞发生生物学变化的作用机制提供线索。【方法】分别从EB病毒感染后的CNE2细胞和未经感染的CNE2细胞中抽提总蛋白质,通过双向电泳分离。... 【目的】寻找并鉴定CNE2细胞在EB病毒感染后表达发生变化的功能蛋白质,为阐明该病毒诱导鼻咽上皮细胞发生生物学变化的作用机制提供线索。【方法】分别从EB病毒感染后的CNE2细胞和未经感染的CNE2细胞中抽提总蛋白质,通过双向电泳分离。运用软件比较分析上述两组的蛋白质表达图谱,寻找表达有差异的蛋白质点。从凝胶上切下差异蛋白质点,通过基质辅助激光解吸/离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定。【结果】图像分析显示,EB病毒感染后的CNE2细胞和未经感染的CNE2细胞之间存在一些明显差异的蛋白质点。通过MALDI-TOF-MS成功地鉴定了其中4个蛋白质点,EB病毒感染CNE2细胞后蛋白质GRP78和硫氧还蛋白过氧化物酶1表达上调,蛋白质肌动蛋白胞浆组分2和蛋白酶体ι链表达下调。【结论】EB病毒感染鼻咽上皮细胞后引起生物学变化的分子机制可能包括:①诱导细胞大量合成蛋白质以促进增生,同时上调蛋白质GRP78的表达而抗凋亡;②提高细胞内氧化状态而诱导蛋白质硫氧还蛋白过氧化物酶1的表达,并可能通过该蛋白质调控NF-κB和AP-1来影响细胞生长。 展开更多

关键词 表达 EB病毒感染 cne2细胞 蛋白质组学技术 鼻咽癌细胞 鼻咽上皮细胞 诱导 MALDI-TOF-MS 硫氧还蛋白 基质辅助激光解吸

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分子靶向药物诱导耐药鼻咽癌CNE2/DDP细胞NKG2DLs的表达 被引量：3

13

作者 黄宇贤 王杨 +5 位作者 李玉华 宋朝阳 陈锦章 贺艳杰 周雪云 郭坤元 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期250-255,共6页

目的:探讨不同分子靶向药物对高表达与低表达ATP结合转运蛋白G超家族成员2(ATP-binding cassette super-family Gmember 2,ABCG2)的人耐药鼻咽癌CNE2/DDP细胞(分别简写为ABCG2highCNE2/DDP和ABCG2lowCNE2/DDP)表面NKG2D配体(natural kil... 目的:探讨不同分子靶向药物对高表达与低表达ATP结合转运蛋白G超家族成员2(ATP-binding cassette super-family Gmember 2,ABCG2)的人耐药鼻咽癌CNE2/DDP细胞(分别简写为ABCG2highCNE2/DDP和ABCG2lowCNE2/DDP)表面NKG2D配体(natural killer group 2 member Dligands,NKG2DLs)表达的诱导作用及其对NK细胞杀伤敏感性的影响。方法:免疫磁珠法分选ABCG2highCNE2/DDP、ABCG2lowCNE2/DDP细胞及NK细胞。流式细胞术检测分选细胞的纯度和不同分子靶向药物(硼替佐米、索拉非尼、舒尼替尼)处理前后ABCG2highCNE2/DDP和ABCG2lowCNE2/DDP细胞NKG2DLs的表达率。LDH释放法检测不同药物处理前后ABCG2highCNE2/DDP和ABCG2lowCNE2/DDP细胞对NK细胞杀伤的敏感性。结果:ABCG2highCNE2/DDP和ABCG2lowCNE2/DDP细胞表面ABCG2的表达率分别为(91.40±2.32)%和(1.70±0.24)%。分选后NK细胞中CD3-CD16+CD56+细胞的比例达90%以上。药物处理前,ABCG2highCNE2/DDP和ABCG2lowCNE2/DDP细胞MICA、MICB、ULBP1、ULBP2和ULBP3呈弱表达;经不同分子靶向药物处理后,5种NKG2DLs的表达率均明显上升(P<0.01),以舒尼替尼处理后NKG2DLs的表达率升高最明显。随着NKG2DLs表达的上调,ABCG2highCNE2/DDP和ABCG2lowCNE2/DDP细胞对NK细胞杀伤的敏感性也随之升高。结论:不同分子靶向药物可诱导耐药鼻咽癌CNE2/DDP细胞NKG2DLs的表达,以舒尼替尼的诱导作用最强,且肿瘤细胞NKG2DLs的表达与其对NK细胞杀伤敏感性之间存在线性关系。 展开更多

关键词 分子靶向药物 三磷酸腺苷(ATP)结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2) 鼻咽癌细胞株 NKG2D配体 自然杀伤细胞

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ARA55过表达激活内源性线粒体凋亡通路诱导CNE2鼻咽癌细胞凋亡 被引量：1

14

作者 崔兆磊 辛小琴 陈燕 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第20期2487-2491,共5页

目的:研究外源性ARA55表达上调对人CNE2鼻咽癌细胞生物学特性的影响,初步探讨相关作用机制。方法:实验设过表达组、空载体组及空白对照组。采用ZLip2000将前期构建的pCMV-ARA55-EGFP重组及空白载体分别转染至人CNE2细胞系,经荧光显微镜... 目的:研究外源性ARA55表达上调对人CNE2鼻咽癌细胞生物学特性的影响,初步探讨相关作用机制。方法:实验设过表达组、空载体组及空白对照组。采用ZLip2000将前期构建的pCMV-ARA55-EGFP重组及空白载体分别转染至人CNE2细胞系,经荧光显微镜及Western blot进一步观察和鉴定过表达组中ARA55-EGFP融合蛋白的表达;通过设置细胞增殖、侵袭迁移及凋亡等系列实验,探讨ARA55在鼻咽癌中发挥的生物学功能;Western blot检测线粒体凋亡途径中系列蛋白的表达变化。结果:转染重组过表达质粒的CNE2细胞系中可检测到ARA55-EGFP融合蛋白的表达;体外细胞功能实验结果显示,ARA55蛋白过表达后,CNE2细胞的增殖受到抑制,体外迁移和侵袭的细胞数显著减少(P<0.05)。同时,凋亡相关实验结果显示,ARA55过表达组的细胞凋亡率(早期+中晚期)较空载体组显著升高(P<0.05);Western blot进一步证实ARA55过表达组中Bcl-2蛋白的表达下调,细胞色素C(Cytochrome C)表达明显增加,下游Caspase-9和Caspase-3的剪接体表达增加。结论:过表达外源性ARA55可诱导内源性线粒体凋亡通路的激活,从而抑制CNE2鼻咽癌细胞增殖,诱导凋亡。 展开更多

关键词 ARA55 鼻咽癌 cne2细胞 凋亡 机制

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尼美舒利诱导人鼻咽癌CNE2细胞凋亡作用

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作者 金晶 袁玉林 +1 位作者 周绪红 曾繁典 《医药导报》 CAS 北大核心 2012年第8期985-990,共6页

目的观察尼美舒利(NIM)诱导人鼻咽癌CNE2细胞凋亡作用。方法 0,0.05,0.1,0.2,0.4,0.8 mmol·L-1NIM作用于体外培养的CNE2细胞株,光学显微镜观察细胞形态和数量变化,透射电子显微镜观察细胞形态和结构变化,噻唑蓝(MTT)法检测细胞悬... 目的观察尼美舒利(NIM)诱导人鼻咽癌CNE2细胞凋亡作用。方法 0,0.05,0.1,0.2,0.4,0.8 mmol·L-1NIM作用于体外培养的CNE2细胞株,光学显微镜观察细胞形态和数量变化,透射电子显微镜观察细胞形态和结构变化,噻唑蓝(MTT)法检测细胞悬液吸光度值,流式细胞术(FCM)检测细胞周期分布和凋亡率,蛋白免疫印迹反应(Western Blot)检测细胞环氧化酶2(COX-2)蛋白表达情况。结果不同浓度NIM作用3 d后,CNE2细胞皱缩,数量减少,与药物浓度呈正相关;透射电镜下,细胞形态结构随NIM浓度增加而出现不同程度破坏和死亡征象;相同作用时间下,NIM浓度越高,吸光度值越低;FCM结果显示,NIM各剂量组均在G0/G1峰前出现一个亚二倍体峰(凋亡峰),随着NIM浓度增高,G0/G1期细胞所占比例逐渐下降,G2/M期细胞比例升高,凋亡率逐渐增高;Western Blot结果显示,随着NIM浓度增加,COX-2蛋白表达量逐渐减少。上述结果均与NIM浓度相关,经统计学处理,与对照组和相邻前一浓度组比较,均差异有统计学意义(P<0.05)。结论 NIM能诱导人鼻咽癌CNE2细胞凋亡,且呈剂量依赖性,该作用与抑制COX-2有关。 展开更多

关键词 尼美舒利 鼻咽癌 cne2细胞株 环氧化酶-2

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鬼臼乙叉苷对人鼻咽癌细胞CNE_2的细胞毒作用和对DNA的断裂作用

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作者 刘宗潮 谢冰芬 +3 位作者 王理开 苏秀容 梁永钜 潘启超 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 1993年第4期266-271,共6页

作者用噻唑蓝还原(MTT)法测定了鬼臼乙叉苷(鬼臼乙叉甙,VP-16)对人体鼻咽癌细胞CNE2的毒性作用,在药物浓度为2.5,5.0,10.0,20.0,40.0,80.0和160.0 ug/ml的条件下,连续4次实验,VP-16对CNE2细胞的生长抑制率分别为3.3±3.7％,15.2... 作者用噻唑蓝还原(MTT)法测定了鬼臼乙叉苷(鬼臼乙叉甙,VP-16)对人体鼻咽癌细胞CNE2的毒性作用,在药物浓度为2.5,5.0,10.0,20.0,40.0,80.0和160.0 ug/ml的条件下,连续4次实验,VP-16对CNE2细胞的生长抑制率分别为3.3±3.7％,15.2±3％,36.l±l0％,54±17％,68.4％士13％,76.7士9％和84.2±8％,其半数抑制浓度(IC_(50))为17.0 ug/ml。CNE2细胞分别在含有20.0,100.0和200.0ug/ml VP-16的培养液中孵育24h,细胞的DNA发生了断裂。DNA断裂量随药物浓度的增加而增加。将CNE2细胞放入含200.0ug/ml VP-16的培养液中孵育6h,12h和24 h,发现各时间点的DNA均发生了断裂。断裂程度随时间的增长而增加,未经药物处理的对照细胞的DNA未见断裂现象。经用50.0,100.0,200.0和400.Oug/VP-16处理的CNE_2细胞的拓扑异构酶Ⅱ能诱导超螺旋pBR322质粒DNA断裂成线状DNA,断裂程度与药物的浓度相平行。 展开更多

关键词 VP-16 cne2细胞 鼻咽癌细胞 鬼臼 细胞毒作用 质粒DNA 药物浓度 培养液 DNA断裂 发现

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miR-17-5p通过下调BRMS1L表达调控鼻咽癌CNE2细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡 被引量：6

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作者 王继红 马素丽 +2 位作者 夏西超 张晓燕 陈炳强 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1249-1255,共7页

目的:探讨miR-17-5p通过调控乳腺癌转移抑制基因1相似基因(breast cancer metastasis suppressor 1 like,BRMS1-like或BRMS1L)表达调控鼻咽癌细胞增殖和侵袭的分子机制。方法:收集2014年1月至2017年12月间平煤神马医疗集团总医院收治的4... 目的:探讨miR-17-5p通过调控乳腺癌转移抑制基因1相似基因(breast cancer metastasis suppressor 1 like,BRMS1-like或BRMS1L)表达调控鼻咽癌细胞增殖和侵袭的分子机制。方法:收集2014年1月至2017年12月间平煤神马医疗集团总医院收治的40例鼻咽癌患者切除的鼻咽癌组织及其相应的癌旁组织标本,以及鼻咽癌细胞系CNE 2、HONE 1、C666-1和鼻咽部永生化上皮细胞株NP69,采用qPCR检测miR-17-5p在癌组织和癌细胞系中的表达水平。通过StarBase数据库预测BRMS1L与miR-17-5p的靶向关系,采用双荧光素酶报告基因实验进行验证。WB检测转染miR-17-5p模拟物和抑制物对CNE2细胞中BRMS1L表达的影响;CCK-8、Transwell和流式细胞术检测miR-17-5p/BRMS1L分子轴对CNE2细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡的影响。结果:miR-17-5p在鼻咽癌组织和鼻咽癌细胞系中呈高表达(P<0.05或P<0.01),下调miR-17-5p显著抑制CNE2细胞增殖、侵袭、迁移但促进细胞凋亡(P<0.05或P<0.01)。miR-17-5p靶向作用于BRMS1L并下调其表达水平。过表达BRMS1L可显著抑制CNE2细胞增殖、侵袭、迁移而促进细胞凋亡(均P<0.01);而同时过表达miR-17-5p和BRMS1L可逆转上述作用(均P<0.01)。结论:miR-17-5p通过靶向下调BRMS1L的表达,进而促进CNE2细胞增殖、侵袭和迁移而抑制细胞凋亡。 展开更多

关键词 鼻咽癌 miR-17-5p cne2细胞 乳腺癌转移抑制基因1相似基因 增殖 侵袭 凋亡

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锌指蛋白-2对鼻咽癌CNE2细胞放射敏感性及顺铂敏感性的影响 被引量：3

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作者 黄东恒 马彦凝 +2 位作者 冯惠怡 朱凤盈 于新发 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第24期3741-3745,共5页

目的研究锌指蛋白-2(Zinc finger protein 2,Zic2)对鼻咽癌CNE2细胞放射敏感性及顺铂敏感性的影响。方法将Zic2 siRNA转染至CNE2细胞中,CCK-8实验检测细胞转染后增殖变化,采用克隆形成实验、CCK-8等实验分析Zic2对细胞放射敏感性及顺铂... 目的研究锌指蛋白-2(Zinc finger protein 2,Zic2)对鼻咽癌CNE2细胞放射敏感性及顺铂敏感性的影响。方法将Zic2 siRNA转染至CNE2细胞中,CCK-8实验检测细胞转染后增殖变化,采用克隆形成实验、CCK-8等实验分析Zic2对细胞放射敏感性及顺铂敏感性的作用。使用大剂量X射线反复照射CNE2,挑选存活亚克隆细胞继续培养至稳定生长,命名为CNE2-R,应用CCK-8实验及克隆形成实验分析亲本CNE2与CNE2-R细胞系的放射敏感性,Western blot分析CNE2-R及亲本CNE2的Zic2表达水平。结果抑制Zic2的表达后CNE2的增殖速度下降(P<0.01);抑制Zic2表达可降低CNE2细胞的克隆形成能力及存活率,放射增敏比(SER)为1.483。抑制Zic2表达可提高顺铂作用细胞抑制率(P<0.05)。放射存活亚克隆CNE2-R具有放射抵抗性,Western blot实验证明CNE2-R的Zic2的表达高于亲本CNE2细胞。结论抑制Zic2表达可提高鼻咽癌CNE2细胞的放射敏感性及顺铂敏感性,Zic2在鼻咽癌放射抵抗性细胞中高表达,Zic2可能是鼻咽癌治疗中的一个潜在靶标。 展开更多

关键词 锌指蛋白-2 小脑锌指结构 鼻咽癌 cne2 放射敏感性 顺铂

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苹果多糖抑制人鼻咽癌CNE2细胞增殖并诱导其凋亡 被引量：2

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作者 余巧 郭晓静 +1 位作者 何馨 何跃 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期631-636,共6页

目的探讨苹果多糖(AP)对人鼻咽癌CNE2细胞增殖、凋亡的影响及机制。方法采用水提-醇沉-酸降解的方法获得AP。培养CNE2细胞,采用(0.0、 0.25、 0.5、 1.0)mg/mL AP处理。CCK-8法观察AP对CNE2细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞凋亡,免疫... 目的探讨苹果多糖(AP)对人鼻咽癌CNE2细胞增殖、凋亡的影响及机制。方法采用水提-醇沉-酸降解的方法获得AP。培养CNE2细胞,采用(0.0、 0.25、 0.5、 1.0)mg/mL AP处理。CCK-8法观察AP对CNE2细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞凋亡,免疫组织化学染色法检测CNE2细胞KI-67抗原(ki67)的表达,Western blot法检测CNE2细胞凋亡相关蛋白裂解型胱天蛋白酶3(c-caspase-3)、 c-caspase-8、 c-caspase-9、 BAX和Bcl2的蛋白水平。结果提取得到的AP相对分子质量(M_r)为5000~15 000;AP可显著抑制CEN2细胞的增殖、诱导其凋亡;AP处理后,CEN2细胞的c-caspase-3、 c-caspase-9和BAX蛋白水平增加、 Bcl2蛋白水平降低,具有一定的剂量依赖性。结论 AP可明显抑制人鼻咽癌CNE2细胞的增殖、诱导其凋亡,可能通过线粒体和死亡受体途径发挥作用。 展开更多

关键词 苹果多糖(AP) 鼻咽癌(NPC) cne2细胞 细胞凋亡

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鼻咽癌CNE2细胞X射线照射诱导的多药耐药

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作者 陈永盛 涂青松 《医药导报》 CAS 2009年第10期1274-1276,共3页

目的探讨鼻咽癌CNE2细胞X射线照射前后细胞P糖蛋白(P-gp)表达的差异及鼻咽癌CNE2细胞不同时期X射线照射时抑制率的差异,为临床鼻咽癌综合治疗的放化疗顺序的安排提供理论依据。方法用免疫细胞学检测CNE2细胞株X射线照射前后P-gp阳性表... 目的探讨鼻咽癌CNE2细胞X射线照射前后细胞P糖蛋白(P-gp)表达的差异及鼻咽癌CNE2细胞不同时期X射线照射时抑制率的差异,为临床鼻咽癌综合治疗的放化疗顺序的安排提供理论依据。方法用免疫细胞学检测CNE2细胞株X射线照射前后P-gp阳性表达的差异。用四甲耦氮唑盐(MTT)法检测CNE2细胞株X射线照射前、后化疗药处理及同时X射线照射化疗药处理抑制率的差异。结果鼻咽癌CNE2细胞X射线照射前P-gp阳性表达率为6.7%、X射线照射后阳性表达率为72.7%(P<0.05)。鼻咽癌CNE2细胞株X射线照射后化疗药处理抑制率较X射线照射前化疗药处理及X射线照射化疗药同时处理,在顺铂、紫杉醇、氟尿嘧啶均下降(P<0.05)。鼻咽癌CNE2细胞X射线照射化疗药同时处理抑制率与X射线照射前化疗药处理比较,在顺铂、氟尿嘧啶,紫杉醇均差异无显著性(P>0.05)。结论鼻咽癌CNE2细胞X射线照射后可以诱导P-gp表达升高,降低对化疗药物的敏感性。鼻咽癌综合治疗时先化疗再放疗或同时放化疗可能效果更好。 展开更多

关键词 多药耐药 鼻咽癌 P糖蛋白 cne2细胞 X射线照射

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