目的探讨核基质结合区结合蛋白,富含A-T序列特异性结合蛋白1(special A-T rich sequencebinding protein 1,SATB1)对乳腺癌干细胞表型CD44+/CD24-的影响及机制。方法用SATB1相关小干扰RNA(SATB1related small interfering RNA,SATB1-siR...目的探讨核基质结合区结合蛋白,富含A-T序列特异性结合蛋白1(special A-T rich sequencebinding protein 1,SATB1)对乳腺癌干细胞表型CD44+/CD24-的影响及机制。方法用SATB1相关小干扰RNA(SATB1related small interfering RNA,SATB1-siRNA)双链寡核糖核酸干扰MDA-MB-231细胞;pEGFP-N1-SATB1-GFP真核表达质粒瞬时转染MCF7细胞后,流式细胞术检测SATB1对乳腺癌干细胞表型CD44+/CD24-表达的影响。结果 MCF7细胞转染SATB1后,表达CD44+/CD24-的细胞比例明显升高;MDA-MB-231细胞在SATB1-siRNA干扰后,表达CD44+/CD24-的细胞比例明显降低(P<0.05)。结论 SATB1可能在形成并维持乳腺癌肿瘤干细胞特性中起重要作用。展开更多
目的:探讨肿瘤微环境在乳腺癌干细胞(breast cancer stem cells,BCSCs)培养鉴定及分化过程中的影响及意义。方法:采用无血清培养液PCM-2及成纤维细胞上清液对乳腺癌细胞及MCF-7细胞进行原代培养。观察乳腺癌细胞微球体形成状况,MTT比色...目的:探讨肿瘤微环境在乳腺癌干细胞(breast cancer stem cells,BCSCs)培养鉴定及分化过程中的影响及意义。方法:采用无血清培养液PCM-2及成纤维细胞上清液对乳腺癌细胞及MCF-7细胞进行原代培养。观察乳腺癌细胞微球体形成状况,MTT比色法检测乳腺癌细胞的增殖能力,免疫细胞化学方法检测乳腺癌干细胞标记物及上皮间质标记物的表达,并通过RT-PCR进行验证。结果:无血清培养液PCM-2培养的原代细胞微球体的直径大于成纤维细胞上清液的培养(t=4.996,P=0.002),且原代细胞中ALDH1(aldehyde dehydrogenase 1)的表达率高于后者。成纤维细胞上清液培养的细胞生长速度较无血清培养液PCM-2快,差异具有统计学意义(P=0.004)。RT-PCR检测发现无血清培养液PCM-2培养的原代细胞中ALDH1表达上调,E-cadherin、Vimentin表达下调。结论:在乳腺癌原代细胞和MCF-7细胞中可以采用无血清悬浮培养方法富集BCSCs样微球体,成纤维细胞上清液能够促进BCSCs样微球体的增殖与分化。提示乳腺肿瘤微环境在乳腺癌细胞的生长增殖过程中发挥了至关重要的作用。展开更多
