γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶、转化生长因子β1在吸烟大鼠肺组织中的表达 被引量：7

1

作者 许建英 孙丽娜 庞敏 《山西医科大学学报》 CAS 2009年第2期103-107,192,共6页

目的观察不同吸烟时间大鼠支气管上皮细胞、肺泡巨噬细胞和肺组织中γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)和转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA及其蛋白的表达水平以及二者的相关性,探讨TGF-β1在吸烟所致慢性阻塞性肺疾病(COPD)氧化/抗氧化失... 目的观察不同吸烟时间大鼠支气管上皮细胞、肺泡巨噬细胞和肺组织中γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)和转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA及其蛋白的表达水平以及二者的相关性,探讨TGF-β1在吸烟所致慢性阻塞性肺疾病(COPD)氧化/抗氧化失衡中的作用。方法自制大鼠实验性被动吸烟装置,建立吸烟引起COPD的动物模型,将40只大鼠随机分为不吸烟组、吸烟1月组、吸烟2月组、吸烟3月组,每组各10只。分别采用免疫组织化学法、免疫细胞化学法和原位杂交半定量技术检测支气管上皮细胞及肺泡巨噬细胞中γ-GCSh(重链亚单位)和TGF-β1mRNA及其蛋白的表达水平。逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测肺组织匀浆中γ-GCSh和TGF-β1mRNA的表达水平。结果吸烟3月组大鼠出现了肺气肿的病理改变。①吸烟1月、2月和3月组大鼠支气管上皮细胞γ-GCSh和TGF-β1mRNA及蛋白表达水平、肺泡巨噬细胞γ-GCSh和TGF-β1蛋白表达水平明显高于不吸烟组(均P<0.01)。②吸烟1月、2月和3月组大鼠肺组织匀浆中γ-GC-Sh和TGF-β1mRNA表达水平明显高于不吸烟组(均P<0.05)。③吸烟1月组和吸烟3月组大鼠支气管上皮细胞γ-GCShmRNA及其蛋白的表达水平与TGF-β1表达水平呈直线正相关,肺泡巨噬细胞γ-GCSh蛋白表达水平与TGF-β1表达呈直线正相关;吸烟3月组肺组织匀浆中γ-GCShmRNA表达水平与TGF-β1表达呈直线正相关。结论随着吸烟时间的延长,支气管肺组织中γ-GCS和TGF-β1的mRNA及其蛋白表达水平逐渐增高,并且二者呈正相关;提示TGF-β1在吸烟所致COPD氧化/抗氧化失衡中可能发挥一定的作用。 展开更多

关键词 吸烟 慢性阻塞性肺疾病 γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶 转化生长因子Β1

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酵母γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶基因的克隆与原核高效表达

2

作者 李莉 陈庆富 王华芳 《酿酒科技》 北大核心 2008年第12期30-34,共5页

谷胱甘肽是生物体内重要的抗氧化物质,γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶是合成谷胱甘肽的关键酶。从酿酒酵母基因组中克隆了γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶基因,测序验证后在大肠杆菌工程菌中表达了约81kDa蛋白。

关键词 微生物 谷胱甘肽 γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶 克隆 表达

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降血压因子——γ-谷氨酰甲胺的研究进展

3

作者 李伟桥 江波 +1 位作者 缪铭 沐万孟 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期398-400,共3页

γ-谷氨酰甲胺是一种特殊氨基酸,在生物体内发挥重要作用,特别是其具有明显的降低血压功能。本文简要介绍了γ-谷氨酰甲胺在植物、微生物和动物体内的生理功能,并对其化学合成和生物合成的方法进行详细阐述。评述了合成方法的优缺点,提... γ-谷氨酰甲胺是一种特殊氨基酸,在生物体内发挥重要作用,特别是其具有明显的降低血压功能。本文简要介绍了γ-谷氨酰甲胺在植物、微生物和动物体内的生理功能,并对其化学合成和生物合成的方法进行详细阐述。评述了合成方法的优缺点,提出可能的合成途径,对γ-谷氨酰甲胺开发应用前景进行了展望。 展开更多

关键词 γ-谷氨酰甲胺 功能 合成 降血压

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补肾活血剂对TGF-β_2干预缺氧状态下视网膜Müller细胞谷氨酸代谢的影响 被引量：2

4

作者 马殿伟 谢学军 +1 位作者 张梅 万李 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2013年第9期804-807,共4页

目的应用血清药理学方法探讨补肾活血中药对体外培养的视网膜Müller细胞在缺氧及转化生长因子-β2(transforming growth factorβ2,TGF-β2)干预下谷氨酸(glutamate,Glu)代谢的影响。方法取新生7 d SD大鼠5只,颈椎脱位处死后进行... 目的应用血清药理学方法探讨补肾活血中药对体外培养的视网膜Müller细胞在缺氧及转化生长因子-β2(transforming growth factorβ2,TGF-β2)干预下谷氨酸(glutamate,Glu)代谢的影响。方法取新生7 d SD大鼠5只,颈椎脱位处死后进行视网膜Müller细胞培养。根据[3H]标记的D,L-Glu摄入量判断体外培养第2代视网膜Müller细胞的Glu的摄入功能;以酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定体外培养细胞外液中谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GS)活性。结果与正常对照组比较,12 h、24 h、48 h时缺氧组、TGF-β2+缺氧组的Glu摄入量增加(均为P<0.05),而24 h、48h时GS活性明显下降(均为P<0.05);与缺氧组比较,TGF-β2+缺氧组12 h、48 h时Glu摄入量减少,48 h时GS活性下降(P<0.05)。24 h、48 h时TGF-β2干预组较正常对照组Glu摄入量增加(均为P<0.05),12 h时GS活性增加(P<0.05)。与TGF-β2+缺氧组比较,中药血清+TGF-β2+缺氧组12 h、24 h时Glu摄入量减少(均为P<0.05),但GS的活性增加(均为P<0.05)。结论缺氧使视网膜Müller细胞的Glu摄入功能明显增强,GS活性明显降低,而TGF-β2加重缺氧条件下Müller细胞GS活性的降低;在缺氧和TGF-β2同时存在条件下,补肾活血中药血清下调视网膜Müller细胞的Glu摄入能力,增加GS的活性。 展开更多

关键词 补肾活血 转化生长因子-Β2 缺氧 视网膜MÜLLER细胞 谷氨酸 谷氨酰胺合成酶

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利用重组大肠杆菌发酵生产L-茶氨酸 被引量：5

5

作者 张通 龙科艺 +4 位作者 曹华杰 吴思佳 元跃 陈宁 范晓光 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第22期6-11,共6页

L-茶氨酸是茶叶中一种独特的非蛋白质氨基酸。γ-谷氨基甲酰胺合成酶可以催化L-谷氨酸、乙胺和ATP合成L-茶氨酸,但反应成本较高。为了提高L-茶氨酸的生产效率,该研究开发了直接发酵生产L-茶氨酸的新方法。首先,在大肠杆菌基因组上双拷贝... L-茶氨酸是茶叶中一种独特的非蛋白质氨基酸。γ-谷氨基甲酰胺合成酶可以催化L-谷氨酸、乙胺和ATP合成L-茶氨酸,但反应成本较高。为了提高L-茶氨酸的生产效率,该研究开发了直接发酵生产L-茶氨酸的新方法。首先,在大肠杆菌基因组上双拷贝Methylovorus mays来源的γ-谷氨酰甲胺合成酶基因gmas,获得了一株遗传稳定的用于L-茶氨酸生产的重组菌株。其次,在5 L罐中采用流加乙胺的方式发酵20 h,L-茶氨酸产量达到30.45 g/L,糖酸转化率达到20.17%。最后,根据L-茶氨酸的物化性质拟定出合适的分离提取路线,从发酵液中获得了98.51%纯度的L-茶氨酸成品,总提取收率可达到70.34%。该方法操作简单,原料成本较低,具有较好的工业应用前景。 展开更多

关键词 L-茶氨酸 γ-谷氨酰甲胺合成酶 发酵 分离提取

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巴西橡胶树中谷胱甘肽及其合成代谢途径关键酶活性的研究 被引量：3

6

作者 邓治 王翔 李德军 《热带农业科学》 2012年第12期50-54,58,共6页

硫醇广泛存在于巴西橡胶树胶乳中,其主要成分为还原型谷胱甘肽(GSH),在橡胶树产排胶和死皮中发挥重要作用。γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γGCS)是催化GSH生物合成的限速酶,谷胱甘肽还原酶(GR)在NADPH作用下催化氧化型谷胱甘肽(GSSG)还原为... 硫醇广泛存在于巴西橡胶树胶乳中,其主要成分为还原型谷胱甘肽(GSH),在橡胶树产排胶和死皮中发挥重要作用。γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γGCS)是催化GSH生物合成的限速酶,谷胱甘肽还原酶(GR)在NADPH作用下催化氧化型谷胱甘肽(GSSG)还原为还原型GSH。GSH的抗氧化能力很大程度上取决于其在胞内的浓度及GSH/GSSG的比率。本研究发现健康橡胶树胶乳中的硫醇含量、γGCS和GR活性高于死皮树。H2O2能增加PR107、RY7-33-97和RRIM600 3个品系橡胶树幼苗叶片中GSH/GSSG比例、γGCS和GR活性,其中RRIM600上调最为明显,PR107变化最小。研究结果为进一步揭示硫醇在产排胶和死皮中的作用提供了实验证据,同时也为阐明橡胶树活性氧与死皮的关系奠定了基础。 展开更多

关键词 巴西橡胶树 谷胱甘肽 γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶 谷胱甘肽还原酶 死皮

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γ-GCS及TGF-β1在MRL/1pr雌性小鼠肾组织表达研究 被引量：2

7

作者 张北平 刘树锋 +1 位作者 王海 谭校 《北方药学》 2016年第7期133-133,共1页

目的:对狼疮小鼠肾组织γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)表达水平进行研究,发现γ-GCS的表达量改变在转化生长因子β1(TGF-β1)促纤维化中的作用。方法:以C57BL/6小鼠为对照,荧光定量PCR法检测MRL/1pr雌性小鼠肾组织γ-GCS和TGF-β1的m ... 目的:对狼疮小鼠肾组织γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)表达水平进行研究,发现γ-GCS的表达量改变在转化生长因子β1(TGF-β1)促纤维化中的作用。方法:以C57BL/6小鼠为对照,荧光定量PCR法检测MRL/1pr雌性小鼠肾组织γ-GCS和TGF-β1的m RNA表达。结果:狼疮小鼠组肾组织中γ-GCS的m RNA及蛋白表达减少,TGF-β1的m RNA表达水平升高,与C57BL/6小鼠组比较有显著差异(P<0.05)。结论:γ-GCS表达降低导致谷胱甘肽(GSH)合成减少,抗氧化能力减弱,促使肾间质纤维化。 展开更多

关键词 狼疮性肾炎 转化生长因子 γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶

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E-box元件对大鼠γ-GCS催化亚单位基因调控作用的组织特异性研究 被引量：4

8

作者 陈辉 李冰 冉丕鑫 《广州医学院学报》 2007年第1期1-5,共5页

目的:探讨大鼠γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)催化亚单位(GCLC)基因启动子(-745～-705)区段E-box元件对其转录调控是否存在组织细胞差异性。方法:分别将GCLC5’端上游序列驱动的荧光素酶报道基因载体GCLC-Luc、E-box缺失的delE-box-GC... 目的:探讨大鼠γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)催化亚单位(GCLC)基因启动子(-745～-705)区段E-box元件对其转录调控是否存在组织细胞差异性。方法:分别将GCLC5’端上游序列驱动的荧光素酶报道基因载体GCLC-Luc、E-box缺失的delE-box-GCLC-Luc及pGL3-enhancer空载体瞬时转染大鼠不同组织来源的细胞,测得荧光素酶活性;并经蛋白定量及pSV-β-半乳糖苷酶的活性测定,获得校正荧光素酶活性值,通过比较校正荧光素酶活性值差异间接判断E-box元件对GCLC转录活性的影响。结果:在大鼠心肌细胞H9C2(2-1),转染delE-box-GCLC-Luc组荧光素酶活性值较转染GCLC-Luc组明显升高(P<0.001),说明E-box能使其GCLC转录活性下调;在大鼠肾小球细胞HBZY-1,转染delE-box-GCLC-Luc组荧光素酶活性值较GCLC-Luc组明显降低(P<0.02),提示E-box具有上调该细胞GCLC转录活性的作用;而在大鼠神经胶质瘤细胞C6和小肠隐窝上皮细胞IEC-6,组间差异无统计学意义(P>0.05),提示E-box对其GCLC转录活性无影响。结论:E-box元件能组织特异性的调控大鼠GCLC基因的转录,该元件可能是决定GCLC基因存在组织差异性表达的重要顺式作用元件。 展开更多

关键词 γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶 氧化应激 E-box元件 组织特异性转录 大鼠

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深淹胁迫对三峡库区狗牙根谷胱甘肽代谢途径的影响 被引量：2

9

作者 周大祥 刘仁华 +3 位作者 秦洪文 汪开拓 李彦杰 杨俊年 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期161-163,共3页

以三峡库区自然消落带野生狗牙根为研究对象,进行自然条件下不同水位深度(0、5、10、15、20、25、30 m)的深淹胁迫以及胁迫后恢复试验,对谷胱甘肽合成、循环代谢关键酶及物质含量进行分析。结果表明,深淹胁迫后,狗牙根可以通过增强谷胱... 以三峡库区自然消落带野生狗牙根为研究对象,进行自然条件下不同水位深度(0、5、10、15、20、25、30 m)的深淹胁迫以及胁迫后恢复试验,对谷胱甘肽合成、循环代谢关键酶及物质含量进行分析。结果表明,深淹胁迫后,狗牙根可以通过增强谷胱甘肽合成及循环代谢关键酶:谷胱甘肽还原酶和γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶的活性,维持植物体内谷胱甘肽水平及氧化还原状态,从而抵御深淹造成的氧化伤害。深淹恢复生长30 d后,狗牙根谷胱甘肽、总谷胱甘肽含量、谷胱甘肽还原酶、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶活性恢复至未淹对照水平。从植物对深淹胁迫的生理响应上,表明狗牙根作为禾本科植物在遗传上具有一定的耐淹能力,可以作为三峡水库消落带植被恢复的物种。 展开更多

关键词 狗牙根 深淹胁迫 谷胱甘肽 谷胱甘肽还原酶 γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶

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锰胁迫对甜菜幼苗光合色素含量及碳氮代谢相关酶活性的影响 被引量：4

10

作者 吴旭红 张超 《中国糖料》 2011年第4期42-45,48,共5页

研究了盆栽条件下土壤中锰(Mn)污染对甜菜叶片叶绿体色素含量和幼苗期碳、氮代谢相关酶活性的影响。结果表明,随着Mn含量的增加,叶绿素a+b、a/b及类胡萝卜素值逐渐减小;叶片1,5-二磷酸核酮糖羧化酶(Rubisco)含量下降,蛋白水解酶活性升高... 研究了盆栽条件下土壤中锰(Mn)污染对甜菜叶片叶绿体色素含量和幼苗期碳、氮代谢相关酶活性的影响。结果表明,随着Mn含量的增加,叶绿素a+b、a/b及类胡萝卜素值逐渐减小;叶片1,5-二磷酸核酮糖羧化酶(Rubisco)含量下降,蛋白水解酶活性升高;硝酸还原酶(NR)和谷氨酰胺合成酶(GS)活性呈先升后降的变化趋势,其中以0.8mmol/L处理12d的影响最大。品种间比较,甜单301的类胡萝卜素和Rubisco含量降幅均大于KWS9419,而NR和GS活性在两品种上都显示出低剂量刺激高剂量抑制的特点,且时间累加效应明显。甜单301对Mn污染的敏感性高于KWS9419,而KWS9419对高Mn毒害的耐受性优于甜单301。 展开更多

关键词 甜菜幼苗 锰胁迫 光合色素 1 5-二磷酸核酮糖羧化酶 蛋白水解酶 谷氨酰胺合成酶

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多年生黑麦草LpGCS基因克隆及其在烟草中的初步功能验证

11

作者 魏树强 孙振元 +1 位作者 代小梅 钱永强 《草业学报》 CSCD 北大核心 2016年第4期121-132,共12页

本研究以多年生黑麦草‘高帽2号’叶片为试材,根据同源基因的CDS序列设计简并引物,采用RT-PCR和RACE技术,克隆了多年生黑麦草γ-谷氨酰基半胱氨酸合成酶基因LpGCS。该基因全长为1674bp(GenBank登录号:KJ551844),具有完整的开放阅读框(OR... 本研究以多年生黑麦草‘高帽2号’叶片为试材,根据同源基因的CDS序列设计简并引物,采用RT-PCR和RACE技术,克隆了多年生黑麦草γ-谷氨酰基半胱氨酸合成酶基因LpGCS。该基因全长为1674bp(GenBank登录号:KJ551844),具有完整的开放阅读框(ORF),共1125bp;对其氨基酸序列特性、结构以及与其他8种同源基因氨基酸序列间的同源性进行了研究,预测该蛋白分子量为42.86kDa,属于不稳定类蛋白质,其蛋白质二级结构以α-螺旋为主;蛋白质氨基酸序列与其他8种同源基因氨基酸序列间同源性都比较高;此外,成功构建了该基因的正、反义植物表达载体pCAMBIA-Ubi-LpGCS+和pCAMBIA-Ubi-LpGCS-,并通过农杆菌介导法获得转正、反义基因烟草。对转基因植株和野生型烟草进行镉离子胁迫试验,生理生化指标测试结果表明镉离子胁迫处理10d后,转LpGCS+植株中MDA含量低于野生型,光合色素含量与POD、SOD、CAT活性均高于野生型;而转LpGCS-植株中MDA含量高于野生型,光合色素含量与POD、SOD、CAT活性均低于野生型。综上所述,LpGCS基因在烟草中的过量表达可以提高植株的耐镉胁迫能力,为进一步利用该基因转化多年生黑麦草培育抗重金属植株奠定基础。 展开更多

关键词 多年生黑麦草 γ-谷氨酰基半胱氨酸合成酶 基因克隆 功能验证

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基于酶活性调节的酿酒酵母谷胱甘肽发酵调控研究 被引量：7

12

作者 方聪明 刘联杰 +3 位作者 周安盛 杜馨 林建国 蔡俊 《中国酿造》 CAS 2014年第6期79-83,共5页

研究了酿酒酵母分批补料发酵合成谷胱甘肽（GSH）过程中pH与温度对GSH产量的影响。通过先研究工程菌所表达的酿酒酵母中γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶在不同pH及温度下的酶学特性,再以此为基础在分批补料发酵过程进行pH值和温度控制的优化。... 研究了酿酒酵母分批补料发酵合成谷胱甘肽（GSH）过程中pH与温度对GSH产量的影响。通过先研究工程菌所表达的酿酒酵母中γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶在不同pH及温度下的酶学特性,再以此为基础在分批补料发酵过程进行pH值和温度控制的优化。结果表明：与初始发酵条件相比,pH控制在5.5~7.5的变化范围内菌体生物量达到（44.80±1.20）g/L,胞内GSH含量为（19.74±0.51）mg/g,GSH产量为（884.35±27.30）mg/L,分别提高了10.07%、3.35%、13.76%。当温度控制在35℃时,菌体生物量达到（46.30±1.55）g/L,胞内GSH含量为（19.84±0.44）mg/g,GSH产量为（918.59±29.22）mg/L,分别提高了3.87%、13.70%、18.17%。研究表明在发酵过程中,通过对pH控制和温度的优化来提高GSH产量是有效的。 展开更多

关键词 酿酒酵母 谷胱甘肽 发酵调控 γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶 酶活性

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茶氨酸大肠杆菌的代谢工程研究初探

13

作者 张程杰 《四川农业科技》 2022年第7期59-61,共3页

L-茶氨酸(L-The)是茶叶的一种关键风味物质,同时是一种重要的食品添加剂。微生物发酵法生产L-The具有原料价格低廉,效率高,专一性强等特点,具有很强的工业生产前景。但是目前L-The合成关键酶γ-谷氨酰甲胺合成酶(GMAS)催化效率较低,还... L-茶氨酸(L-The)是茶叶的一种关键风味物质,同时是一种重要的食品添加剂。微生物发酵法生产L-The具有原料价格低廉,效率高,专一性强等特点,具有很强的工业生产前景。但是目前L-The合成关键酶γ-谷氨酰甲胺合成酶(GMAS)催化效率较低,还有较大提升空间,导致L-The产量难以大幅度提高。研究基于同源模建建立了Methyloversatilis universalis的GMAS的三维结构,通过分析L-The合成关键节点酶GMAS对底物谷氨酸的分子识别,进行分子对接,开展GMAS的晶体结构半理性设计,构建关键位点的饱和突变体库,以提高GMAS对关键底物谷氨酸的识别能力和催化效率,为构建高产L-The的工程菌株奠定基础。最后筛选的突变体E174A和E174G在L-The产量上相较野生型,提高了19%和24%。摇瓶发酵24 h, L-The产量达到1.71 g/L和1.78 g/L。具有较大的工业化生产前景。 展开更多

关键词 L-茶氨酸 分子对接 半理性设计 γ-谷氨酰甲胺合成酶

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酿酒酵母GSH Ⅰ基因的克隆、表达与结构分析 被引量：1

14

作者 宋冬梅 朱益波 +2 位作者 周丽丽 郑丽雪 齐斌 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2013年第13期157-160,共4页

γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(GSHI)是合成谷胱甘肽的关键酶。通过构建GSHI活性较高的重组菌来提高合成GSH的能力。利用PCR技术扩增获得了酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)2-10515的gshI基因,构建原核表达载体pET-28a-gshI,转化到Escheri... γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(GSHI)是合成谷胱甘肽的关键酶。通过构建GSHI活性较高的重组菌来提高合成GSH的能力。利用PCR技术扩增获得了酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)2-10515的gshI基因,构建原核表达载体pET-28a-gshI,转化到Escherichia coli BL21(DE3)中,重组菌经诱导表达后,测得GSHI的酶活力为46.09U/mg湿菌,活性较高。进一步利用生物信息学方法分析和预测GSHI基因的序列和蛋白结构,为在基因水平上提高该酶的表达量和活性提供了理论依据。 展开更多

关键词 谷胱甘肽 γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶 序列分析 表达

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腺苷A_(2A)受体(A_(2A)R)拮抗剂ZM241385对视网膜脱离动物模型视网膜光感受器细胞的保护作用 被引量：1

15

作者 高莎 沈玺 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2022年第7期510-513,519,共5页

目的探讨腺苷A_(2A)受体(A_(2A)R)拮抗剂ZM241385对视网膜脱离(RD)动物模型视网膜光感受器细胞的保护作用。方法选取健康雄性SPF级C57BL/6J小鼠48只作为研究对象。将实验小鼠随机分为对照+二甲基亚砜(DMSO)组、对照+ZM241385组、RD+DMS... 目的探讨腺苷A_(2A)受体(A_(2A)R)拮抗剂ZM241385对视网膜脱离(RD)动物模型视网膜光感受器细胞的保护作用。方法选取健康雄性SPF级C57BL/6J小鼠48只作为研究对象。将实验小鼠随机分为对照+二甲基亚砜(DMSO)组、对照+ZM241385组、RD+DMSO组、RD+ZM241385组,每组12只。RD模型建立后,实验小鼠立即腹腔注射ZM241385(3 mg·kg^(-1),剂量不超过0.2 mL)或同体积DMSO,连续给药3 d。采用免疫荧光染色检测视网膜中Müller细胞谷氨酰胺合成酶(GS)的表达,Western blot检测单核细胞趋化蛋白(MCP)-1、肿瘤坏死因子(TNF)-α、Cleaved caspase 3和B细胞淋巴瘤抗体(Bcl)-2的表达。结果免疫荧光染色结果显示:RD+DMSO组小鼠视网膜Müller细胞GS荧光强度较对照+DMSO组显著降低,而RD+ZM241385组小鼠视网膜Müller细胞GS荧光强度较RD+DMSO组显著升高。RD+DMSO组小鼠视网膜MCP-1、TNF-α蛋白表达水平较对照+DMSO组均显著升高,差异均有统计学意义(均为P<0.001),而RD+ZM241385组小鼠视网膜MCP-1、TNF-α蛋白表达水平较RD+DMSO组均显著降低,差异均有统计学意义(均为P<0.001)。与对照+DMSO组相比,RD+DMSO组小鼠视网膜Cleaved caspase 3蛋白表达水平显著升高,Bcl-2蛋白表达水平显著下降,差异均有统计学意义(均为P<0.001)。而与RD+DMSO组相比,RD+ZM241385组小鼠视网膜Cleaved caspase 3蛋白表达水平显著下降,Bcl-2蛋白表达水平显著升高,差异均有统计学意义(均为P<0.001)。结论A_(2A)R拮抗剂ZM241385通过促进RD小鼠视网膜Müller细胞GS表达,抑制炎症细胞因子MCP-1、TNF-α的表达,缓解光感受器细胞凋亡。 展开更多

关键词 视网膜脱离 腺苷A_(2A)受体 谷氨酰胺合成酶 单核细胞趋化蛋白-1 肿瘤坏死因子-α 光感受器细胞

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