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18β-甘草次酸诱导人乳腺癌细胞凋亡及其细胞内Ca^(2+)水平的变化 被引量:18
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作者 黄炜 陈新美 +2 位作者 张志凌 罗惠玲 张东方 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2006年第2期102-106,共5页
背景与目的:18-甘草次酸是甘草的重要成分,近年来的研究发现18-甘草次酸具有抑制人淋巴细胞性白血病、肝癌和肺癌的细胞增殖。本研究探讨18-甘草次酸对人乳腺癌MCF-7细胞诱导凋亡的作用。目前研究已证实细胞内游离Ca2+浓度([Ca2+]i)的... 背景与目的:18-甘草次酸是甘草的重要成分,近年来的研究发现18-甘草次酸具有抑制人淋巴细胞性白血病、肝癌和肺癌的细胞增殖。本研究探讨18-甘草次酸对人乳腺癌MCF-7细胞诱导凋亡的作用。目前研究已证实细胞内游离Ca2+浓度([Ca2+]i)的动态变化在诱发细胞凋亡过程的多个环节中起重要作用,因此本研究也探讨由18-甘草次酸诱导的MCF-7细胞凋亡发生与[Ca2+]i变化的关系。方法:用50~250μmol/L浓度梯度的18β-甘草次酸处理MCF-7细胞24h,用MTT比色法测定细胞增殖能力。100μmol/L和150μmol/L 18β-甘草次酸处理细胞24 h,用末端脱氧核苷酸转移酶介导dUTP末端标记法、Annexin V流式细胞仪法和单细胞凝胶电泳法检测凋亡细胞。150μmol/L 18β-甘草次酸处理细胞24 h,用Fura-2荧光负载方法测定[Ca2+]i的变化。分别用100μmol/L BAPTA-AM和0.5 mmol/L EGTA与150μmol/L 18β-甘草次酸联合处理MCF-7细胞24 h,用单细胞凝胶电泳法检测凋亡细胞。结果:从100μmol/L 18β-甘草次酸浓度起对MCF-7细胞的增殖抑制率显著升高(P<0.01和P<0.05),呈剂量依赖性,半增殖抑制浓度(IC 50)为234.33μmol/L。100μmol/L和150μmol/L 18β-甘草次酸使细胞凋亡率显著升高(P<0.01和P<0.05);18β-甘草次酸处理组的[Ca2+]i也明显高于对照组(P<0.05)。18β-甘草次酸与BAPTA-AM联合处理组和18β-甘草次酸与EGTA联合处理组的凋亡率均明显低于单纯的150μmol/L18β-甘草次酸处理组(P<0.05和P<0.01)。结论:18-甘草次酸具有抑制MCF-7细胞增殖和诱导其凋亡的作用,而18-甘草次酸诱导MCF-7细胞凋亡的作用在抑制该细胞增殖方面起主要作用。18-甘草次酸诱导MCF-7细胞凋亡依赖于细胞内Ca2+水平上调,而细胞外Ca2+内流是导致细胞内Ca2+水平上调的原因之一。 展开更多
关键词 人乳腺癌细胞 18Β-甘草次酸 凋亡 增殖 细胞内ca^2+
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广枣总黄酮对大鼠心室肌细胞IC_a、I_(to)和细胞[Ca^(2+)]_i的影响 被引量:22
2
作者 杨玉梅 覃建民 +5 位作者 徐继辉 周尔凤 冯国庆 白音夫 宋一亭 李增曦 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期784-788,共5页
目的 观察广枣总黄酮对大鼠心室肌细胞L 型钙通道电流 (ICa)和瞬时外向钾通道电流 (Ito)以及对心肌细胞内游离钙浓度 ([Ca2 + ]i)的影响 ,探讨其抗心律失常作用机制。方法 全细胞膜片钳记录大鼠心室肌细胞ICa、Ito,激光共聚焦显微镜... 目的 观察广枣总黄酮对大鼠心室肌细胞L 型钙通道电流 (ICa)和瞬时外向钾通道电流 (Ito)以及对心肌细胞内游离钙浓度 ([Ca2 + ]i)的影响 ,探讨其抗心律失常作用机制。方法 全细胞膜片钳记录大鼠心室肌细胞ICa、Ito,激光共聚焦显微镜观察细胞 [Ca2 + ]i 的变化。结果 在钳制电压- 4 0mV ,实验电压 - 4 0~ +5 0mV时 ,广枣总黄酮 10 0mg·L-1对心室肌细胞ICa无显著影响 ;在钳制电压 - 6 0mV ,实验电压 - 4 0~ +5 0mV时显著抑制瞬时外向钾通道Ito(P <0 0 5 ) ;而激光共聚焦显微镜结果显示广枣总黄酮在 5 0、10 0、2 0 0mg·L-1却降低缺氧复氧心肌细胞收缩期和静息期[Ca2 + ]i 的浓度。结论 广枣总黄酮对心肌细胞ICa无显著影响 ,可显著抑制瞬时外向钾通道Ito,并可明显降低心肌细胞收缩期和静息期细胞 [Ca2 + ]i 浓度。这可能是其抗心律失常和保护缺血心肌的主要作用机制。 展开更多
关键词 广枣总黄酮 L-型钙通道电流 瞬时外向钾通道电流 细胞内游离钙浓度
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单细胞内Ca^(2+)时空变化的激光共聚焦显微测定 被引量:5
3
作者 杨小毅 颜坤 黄有国 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1996年第5期442-445,共4页
应用激光扫描共聚焦显微系统(LSCM)和Fluo-3/AM荧光探剂标记技术,测定了单个活细胞胞内游离Ca2+的动态变化与立体分布影像.结果显示,在37℃,Fluo-3/AM终浓度为6μmol/L的条件下,C57BL/... 应用激光扫描共聚焦显微系统(LSCM)和Fluo-3/AM荧光探剂标记技术,测定了单个活细胞胞内游离Ca2+的动态变化与立体分布影像.结果显示,在37℃,Fluo-3/AM终浓度为6μmol/L的条件下,C57BL/6J小鼠巨噬细胞负载1h左右即可获得良好的标记效果.相反,若探剂浓度太高或负载时间太长,胞内荧光强度太强,影响在共聚焦显微镜镜下分辨细胞内结构.因此用LSCM研究细胞内游离Ca2+变化时,荧光探剂的负载应以获得最适荧光信号而不是以最大荧光强度为标准.上述方法在其他如平滑肌细胞、卵母细胞中的测定亦获得满意的结果,这对进一步研究各种生理和病理条件下细胞内Ca2+信号的动态变化、与跨膜Ca2+梯差的关系及对活细胞功能活动的调节提供了一种可行的、直观的研究手段。 展开更多
关键词 细胞 钙离子 激光 共聚焦显微系统
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绞股蓝总黄酮对缺氧心肌细胞损伤标记物及细胞内游离Ca^2+浓度的影响 被引量:8
4
作者 李乐 高小利 丁宝兴 《浙江工业大学学报》 CAS 2008年第1期23-25,共3页
探讨绞股蓝总黄酮(TFG)对缺氧心肌细胞损伤标记物及细胞内游离Ca2+浓度的影响.在离体乳鼠心肌细胞原代培养基础上制备心肌细胞缺氧模型,随机分为正常对照组、缺氧损伤组和绞股监总黄酮干预缺氧损伤组.分别测定各组心肌培养基中乳酸脱氢... 探讨绞股蓝总黄酮(TFG)对缺氧心肌细胞损伤标记物及细胞内游离Ca2+浓度的影响.在离体乳鼠心肌细胞原代培养基础上制备心肌细胞缺氧模型,随机分为正常对照组、缺氧损伤组和绞股监总黄酮干预缺氧损伤组.分别测定各组心肌培养基中乳酸脱氢酶(LDH)、肌钙蛋白I(cTn I)的含量,心肌细胞内游离Ca2+的浓度(荧光探针法).缺氧损伤组心肌培养基中LDH和cTnI的含量及心肌细胞内游离Ca2+浓度较正常对照组明显增加(P<0.05或0.01);经TFG干预后细胞培养基中LDH利cTnI的含量及心肌细胞内游离Ca2+浓度较缺氧损伤组明显降低(P<0.05或0.01).TFG对缺氧心肌细胞具有保护作用,其机理可能与减轻心肌细胞内钙超负荷有关. 展开更多
关键词 TFG 缺氧心肌细胞 CTN I LDH 游离ca^2+
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高钾离子引起PC12细胞内游离Ca^(2+)浓度升高的机制 被引量:6
5
作者 娄淑杰 王晨光 +1 位作者 黄秀英 陈宜张 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期343-346,共4页
目的:分析高钾离子(K+)引起PC12细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)升高的可能机制。方法:利用MiraCalImageSystem检测[Ca2+]i,Ca2+荧光探针为Fura-2/AM。结果:(1)KCl浓... 目的:分析高钾离子(K+)引起PC12细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)升高的可能机制。方法:利用MiraCalImageSystem检测[Ca2+]i,Ca2+荧光探针为Fura-2/AM。结果:(1)KCl浓度为30~100mmol/L时,可剂量依赖性地诱导PC12细胞[Ca2+]i升高;(2)在细胞外无Ca2+时,高K+对PC12细胞[Ca2+]i无影响;(3)L-型电压门控钙通道阻滞剂维拉帕米、地尔硫和硝苯地平的浓度分别为5×10-5,1×10-4和5×10-3mol/L时,可完全阻断高K+诱导的PC12细胞[Ca2+]i升高,但N-型电压门控钙通道阻滞剂ω-conotoxinGVIA在浓度为1×10-6mol/L时,对高K+诱导的PC12细胞[Ca2+]i升高没有影响;(4)5×10-5mol/L维拉帕米对细胞外由无Ca2+到有Ca2+过程引起的[Ca2+]i升高无抑制作用。结论:高K+引起PC12细胞[Ca2+]i升高以细胞质膜上L-型电压门控Ca2+通道开放为基础。 展开更多
关键词 PC12细胞 高钾离子 钙离子 浓度
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神经肽Y经Ca^2+/CaM依赖的钙调神经磷酸酶途径诱导心肌细胞肥大 被引量:2
6
作者 李晓云 陈敏生 +4 位作者 黄少华 董颀 李荧辉 张舒 刘振秀 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期2139-2141,共3页
目的观察神经肽Y(NPY)诱导心肌细胞肥大效应,及Ca2+/CaM依赖的钙调神经磷酸酶(CaN)途径在其中起的作用。方法用NPY(10、100nmol)刺激心肌细胞,用环胞素A(CsA)特异性抑制CaN活性。测定心肌细胞蛋白合成速率(3H-Leu掺入量)、CaN-蛋白表达... 目的观察神经肽Y(NPY)诱导心肌细胞肥大效应,及Ca2+/CaM依赖的钙调神经磷酸酶(CaN)途径在其中起的作用。方法用NPY(10、100nmol)刺激心肌细胞,用环胞素A(CsA)特异性抑制CaN活性。测定心肌细胞蛋白合成速率(3H-Leu掺入量)、CaN-蛋白表达、c-junmRNA表达、CaN酶活性、细胞内游离钙含量。结果(1)在100nmolNPY作用下,心肌细胞3H-Leu掺入量及c-junmRNA表达量均较对照组显著增高(P<0.05,P<0.001)。NPY+CsA组和对照组相比无显著差别。(2)在100nmolNPY作用下,NPY组心肌细胞内CaN酶比活力、CaN-α表达、胞浆及核内钙含量较对照组显著增高(P<0.05,P<0.05,P<0.001,P<0.001)。结论NPY可刺激心肌细胞肥大,CaN信号途径在其中起重要作用。 展开更多
关键词 神经肽Y 钙调神经磷酸酶 胞内钙 心肌细胞肥大
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甘草水溶物诱导MGC-803细胞凋亡中胞内Ca^(2+)、pH与线粒体△ψ_m的变化 被引量:4
7
作者 马靖 李玉梅 +1 位作者 庞大本 徐安龙 《中国生物化学与分子生物学报》 CSCD 2000年第4期556-558,共3页
Changes of intracellular Ca 2+ ,pH value and mitochondria membrane potential(△Ψ m) in the apoptosis of MGC 803 cells induced by water soluble constituents of Glycyrrhiza uralensis Fisch(WSCG) were investigated.MGC 8... Changes of intracellular Ca 2+ ,pH value and mitochondria membrane potential(△Ψ m) in the apoptosis of MGC 803 cells induced by water soluble constituents of Glycyrrhiza uralensis Fisch(WSCG) were investigated.MGC 803 cells were incubated with 0.5,0.75,1.0 and 1.5 g/L WSCG for 1,4,7,11,15,19 and 23 hours respectively.The percentage of apoptosis and intracellular Ca 2+ content increased in a dose and time dependent manner,except that the intracellular Ca 2+ content of 1.5 g/L WSCG treated cells started to decrease after 11 hours.The cells were alkalized after various treatments,except that 1.5 g/L WSCG treated cells turned to acidify after 11 hours.It was found that the mitochondria △Ψ m of all treated cells decreased drastically at the first hour,then kept decreasing slowly until the 23rd hour.The results indicated that intracellular Ca 2+ ,pH and mitochondria △Ψ m all played pivotal roles in the apoptosis of MGC 803 cells induced by WSCG. 展开更多
关键词 甘草 细胞凋亡 胞内ca^2+ 胞内PH 线粒体△Ψm
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川楝素对K^+、Ca^(2+)通道活动及细胞内Ca^(2+)浓度的调控 被引量:3
8
作者 施玉樑 王文萍 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第2期132-137,共6页
川楝素是我国学者从驱蛔中药中分离、鉴定的一个三萜化合物,已证明具选择地影响神经递质释放,有效地对抗肉毒中毒,促进细胞分化、凋亡,抑制肿瘤增殖,抑制昆虫发育和取食,影响K+、Ca2+通道活动等多种生物效应.综述了证明川楝素抑制多种K... 川楝素是我国学者从驱蛔中药中分离、鉴定的一个三萜化合物,已证明具选择地影响神经递质释放,有效地对抗肉毒中毒,促进细胞分化、凋亡,抑制肿瘤增殖,抑制昆虫发育和取食,影响K+、Ca2+通道活动等多种生物效应.综述了证明川楝素抑制多种K+通道,选择地易化L型Ca2+通道和进而升高胞内Ca+浓度的研究资料,并对川楝素产生这些生物效应的机制进行了讨论. 展开更多
关键词 川楝素 K^+通道 L型ca^2+通道 细胞内ca^2+浓度
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水蛭对Ang-Ⅱ刺激鼠肝星状细胞活化Ca^(2+)效应的抑制作用 被引量:9
9
作者 李校天 杨书良 +2 位作者 王军民 段海凤 王天轶 《中国全科医学》 CAS CSCD 2006年第6期472-474,共3页
目的研究水蛭药物血清是否具有抑制肝星状细胞(HSCs)胞浆游离钙([Ca^(2+)]i)增高的作用。方法将32只健康SD大鼠按随机数字表随机分为4组肝纤维化模型水蛭组(8只)皮下注射用精制橄榄油配制的40%CCl4溶液9周,然后灌服水蛭6d;肝纤维化模型... 目的研究水蛭药物血清是否具有抑制肝星状细胞(HSCs)胞浆游离钙([Ca^(2+)]i)增高的作用。方法将32只健康SD大鼠按随机数字表随机分为4组肝纤维化模型水蛭组(8只)皮下注射用精制橄榄油配制的40%CCl4溶液9周,然后灌服水蛭6d;肝纤维化模型对照组(8只)皮下注射用精制橄榄油配制的40%CCl4溶液9周,然后灌服0.9%氯化钠溶液6d;正常大鼠水蛭组(8只)仅皮下注射等量的精制橄榄油9周,然后灌服水蛭6d;正常对照组(8只)仅皮下注射等量的精制橄榄油9周,然后灌服0.9%氯化钠溶液6d。结束后,经下腔静脉取血并分离血清。采用盲法用上述10%血清培养HSCs24h并负载好Fluo-3/AM后使用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)检测HSCs[Ca2+]i。结果(1)经正常大鼠水蛭组及肝纤维化模型水蛭组大鼠血清预处理的HSCs,其[Ca^(2+)]i荧光强度相对值均明显低于肝纤维化模型对照组(P<0.05);且两者与正常对照组间差别也均有显著性意义(P<0.05)。(2)经正常大鼠水蛭组及肝纤维化模型水蛭组大鼠血清预处理HSCs后加入Ang-Ⅱ(1.1×10-7mol/L),HSCs[Ca^(2+)]i荧光强度变化百分数显著低于肝纤维化模型对照组(P<0.01)。结论水蛭能抑制肝星状细胞活化[Ca^(2+)]i的升高,此可能是其发挥抗肝纤维化作用的重要途径之一。 展开更多
关键词 肝硬化 肝星状细胞 水蛭 激光扫描共聚焦显微镜 胞浆游离钙 血管肾张素Ⅱ
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aFGF对肺腺癌AGZY-83A细胞株TPK、PKC活性及Ca^(2+)浓度的影响 被引量:4
10
作者 孙黎光 邢伟 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第6期562-565,共4页
目的:观察aFGF与细胞膜上特异受体结合后引起的细胞内信号转导途径,探讨aFGF导致细胞增殖的机理。方法:以不同浓度的aFGF处理AGZY-83A细胞,利用[γ-32P]ATP掺入外源性底物的方法测定受体的酪氨酸蛋白... 目的:观察aFGF与细胞膜上特异受体结合后引起的细胞内信号转导途径,探讨aFGF导致细胞增殖的机理。方法:以不同浓度的aFGF处理AGZY-83A细胞,利用[γ-32P]ATP掺入外源性底物的方法测定受体的酪氨酸蛋白激酶活性(TPK)及蛋白激酶C(PKC)活性;用Fura-2/AM为荧光指示剂测定[Ca2+]i。结果:随着aFGF浓度增加,TPK及PKC活性随之升高。当aFGF浓度为1.12μg/ml时aFGF处理组的TPK是对照组的4倍;膜PKC活性也是对照组的4倍,胞浆PKC活性是对照组的1.75倍。[Ca2+]i是对照组的3倍。结论:该细胞株中aFGF受体具有TPK活性。TPK激活后进一步促进蛋白质和酶磷酸化,而使PKC活性及[Ca2+]i升高,即PKC和Ca2+是TPK的下游信号分子,进一步促进c-fos、jun基因表达增加。 展开更多
关键词 肺肿瘤 腺癌 酪氨酸蛋白激酶 蛋白激酶C
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1,6-二磷酸果糖对心肌细胞胞质游离Ca^(2+)和pH的影响 被引量:2
11
作者 王宏 江文德 《上海医科大学学报》 CSCD 1996年第6期423-426,共4页
考察外源性的1,6-二磷酸果糖(FDP)对心肌细胞内游离Ca2+浓度和pH值的影响。用荧光探针(Fura-2,BCECF)技术同时测定成年大鼠心肌细胞内游离Ca2+浓度和pH值,并观察其在缺氧/复氧条件下的变化。结果... 考察外源性的1,6-二磷酸果糖(FDP)对心肌细胞内游离Ca2+浓度和pH值的影响。用荧光探针(Fura-2,BCECF)技术同时测定成年大鼠心肌细胞内游离Ca2+浓度和pH值,并观察其在缺氧/复氧条件下的变化。结果:在缺氧/复氧过程中,胞质游离Ca2+浓度缓慢升高,从基础值130±29.5nmol/L1升至742±154nmol/L,胞质pH值则从7.12±0.08降至6.71±0.13。在含有5mmol/LFDP的细胞悬液中,则胞质游离Ca2+上升幅度明显低于对照组(P<0.05),在复氧结束时的最高值为538±193nmol/L,但胞质pH值的变化与对照组比较无显著差别。结论:FDP可以减轻由缺氧/复氧所造成的心肌细胞内游离Ca2+浓度增高的程度,而对胞质pH值的变化无明显影响。 展开更多
关键词 二磷酸果糖 心肌细胞 游离ca^2+ 细胞质 pH值
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aFGF对人脐静脉内皮细胞TPK、PKC活性及Ca^(2+)浓度的影响 被引量:4
12
作者 孙黎光 邢伟 刘素媛 《中国生物化学与分子生物学报》 CSCD 2000年第2期267-270,共4页
为了观察酸性成纤维细胞生长因子 ( acidic fibroblast growth factor,a FGF)与人脐静脉内皮细胞 ( human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)膜上特异受体结合后引起的细胞内信号转导途径 ,探讨 a FGF导致细胞增殖的机理 ,经 Scat... 为了观察酸性成纤维细胞生长因子 ( acidic fibroblast growth factor,a FGF)与人脐静脉内皮细胞 ( human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)膜上特异受体结合后引起的细胞内信号转导途径 ,探讨 a FGF导致细胞增殖的机理 ,经 Scatchard曲线分析人脐静脉内皮细胞膜受体性质 .以不同浓度的 a FGF处理人脐静脉内皮细胞 ,利用 [γ- 3 2 P]ATP参入外源性底物的方法测定受体的酪氨酸蛋白激酶 ( tyrosine protein kinase,TPK)及蛋白激酶 C( protein kinase C,PKC)的活性 ;用 Fura-2 /AM为荧光指示剂测定 [Ca2 + ]i.结果显示 :Scatchard曲线证明 a FGF与 HUVEC膜受体特异结合呈一条曲线 ,即受体为一种结合位点 ,Kd 为 3.6× 1 0 -10~ 9.6× 1 0 -10 mol/L,每个细胞受体数为2 70 90 .随着 a FGF浓度增加 ,TPK及 PKC活性随之升高 .当 a FGF浓度为 1 .1 2 mg/L时 ,a FGF处理组的 TPK活性是对照组的 3倍 ;膜 PKC活性是对照组 3.4倍 ,胞浆 PKC活性是对照组的 1 .87倍 .胞浆 [Ca2 + ]是对照组的 3倍 .结果指出 :该细胞中 a FGF受体具有 TPK活性 .TPK激活后进一步促进蛋白质和酶磷酸化级联反应 ,而使 PKC活性及 [Ca2 + ]i 升高 ,即 PKC和 Ca2 + 为 TPK的下游信号分子 ,进一步促进基因表达增加 ,导致细胞增殖 . 展开更多
关键词 AFGF HUVFC TPK PKC 细胞增殖 细胞内信号转导
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aFGF和Genistein对AGZY-83A细胞内PKC活性及[Ca^(2+)]i的影响
13
作者 马际 孙黎光 +2 位作者 刘素媛 邢伟 侯伟健 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期241-243,共3页
目的 :探讨 a FGF及 TPK抑制剂 Genistein对 AGZY- 83A细胞内 PKC活性及游离 Ca2 +浓度的影响。方法 :用不同浓度的 a FGF和 Genistein诱导 AGZY- 83A细胞 ,(γ- P32 ) - ATP标记的 Histone 为底物 ,液体闪烁测定PKC活性 ;Fura- 2 / AM... 目的 :探讨 a FGF及 TPK抑制剂 Genistein对 AGZY- 83A细胞内 PKC活性及游离 Ca2 +浓度的影响。方法 :用不同浓度的 a FGF和 Genistein诱导 AGZY- 83A细胞 ,(γ- P32 ) - ATP标记的 Histone 为底物 ,液体闪烁测定PKC活性 ;Fura- 2 / AM负载荧光光度法测定细胞内游离 Ca2 +浓度。结果 :a FGF诱导后 ,细胞内 PKC活性及 Ca2 +浓度升高 ,且与 a FGF呈剂量依赖效应。Genistein抑制细胞内 PKC活性及 Ca2 +浓度 ,也呈剂量依赖效应。Genistein对 a FGF诱导的 PKC活性抑制更显著。结论 :进一步证明 PKC和 Ca2 +确是 TPK的下游信号分子。 展开更多
关键词 酪氨酸蛋白激酶抑制剂 钙离子 细胞外信号传导
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镉对人体外周血淋巴细胞内游离Ca^(2+)及钙调素影响的研究 被引量:2
14
作者 李文立 赵振新 陈成章 《第一军医大学学报》 CSCD 1998年第4期271-23,共1页
采用体外实验方法,观察CdCl2对培养24h的人外周血淋巴细胞内游离Ga2+浓度及CaM活性的影响。结果表明:细胞内游离Ca2+浓度与镉浓度(≤100μmol/L)及染毒时间(≤60min)存在明显的剂量及时相相关,在≤50μmol/LCdCl2作用下,CaM... 采用体外实验方法,观察CdCl2对培养24h的人外周血淋巴细胞内游离Ga2+浓度及CaM活性的影响。结果表明:细胞内游离Ca2+浓度与镉浓度(≤100μmol/L)及染毒时间(≤60min)存在明显的剂量及时相相关,在≤50μmol/LCdCl2作用下,CaM活性随染毒剂量增加而升高,50μmol/LCdCl2使CaM活性增至0μmol/L组的190.22%(P<0.05),但100μmol/LCaCl2则对CaM无激活作用。在一定镉浓度(0~50μmol/LCdCl2)及染毒时间(0~40min)内,细胞内游离Ca2+浓度与CaM活性呈*一致性变化,提示镉的免疫毒作用机制与Ca2+、CaM系统有关。 展开更多
关键词 钙调素 镉中毒 淋巴细胞 钙离子 浓度
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活性氧簇介导血管紧张素Ⅱ对延髓神经元胞内游离Ca^(2+)水平的调节作用
15
作者 刘小妮 曹冬青 +4 位作者 张娜娜 陶然 丁滢泂 金惠铭 卢宁 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期2133-2138,共6页
目的:探讨活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)介导血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ)对延髓神经元胞内游离Ca^(2+)的调节作用及其机制。方法:原代培养延髓神经元;免疫荧光双标法鉴定培养神经元的特征;给予Ang Ⅱ处理后,用二氢乙... 目的:探讨活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)介导血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ)对延髓神经元胞内游离Ca^(2+)的调节作用及其机制。方法:原代培养延髓神经元;免疫荧光双标法鉴定培养神经元的特征;给予Ang Ⅱ处理后,用二氢乙啶荧光探针法测定神经元ROS水平;同时或单独给予Ang Ⅱ和NADPH氧化酶抑制剂apocynin或自由基清除剂TEMPOL后,Fura-2/AM钙瞬变法记录神经元胞内游离Ca^(2+)的水平;CCK-8法检测神经元活性。结果:原代培养的延髓神经元多数为谷氨酸阳性的神经元;Ang Ⅱ(5μmol/L)可在10 min内显著升高神经元ROS水平(P<0.01);给予Ang Ⅱ处理后延髓神经元胞内Ca^(2+)水平显著升高(P<0.01);给予apocynin/TEMPOL预处理后,Ang Ⅱ引起的延髓神经元胞内Ca^(2+)的升高则被抑制(P<0.05)。实验浓度的Ang Ⅱ对神经元无毒性作用。结论:ROS介导Ang Ⅱ诱导的延髓神经元胞内Ca^(2+)的升高作用,可能是Ang Ⅱ在中枢诱导氧化应激作用的潜在细胞内信号机制。 展开更多
关键词 延髓神经元 活性氧簇 细胞内ca^2+ 血管紧张素Ⅱ
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血管紧张素Ⅱ增加新生鼠脑细胞胞浆Ca^(2+)浓度
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作者 路新云 马青平 韩济生 《生物化学杂志》 CSCD 1993年第3期278-281,共4页
本文应用荧光钙测定技术观察了血管紧张素Ⅱ(AⅡ)对新生Wistar鼠脑细胞胞浆Ca^(2+)浓度([Ca^(2+)]_i)的影响。结果表明:血管紧张素Ⅱ在1nmol/L—1μmol/L浓度下可诱导新生鼠脑细胞[Ca^(2+)]_i增加,具量效关系。在无外Ca^(2+)存在对,其... 本文应用荧光钙测定技术观察了血管紧张素Ⅱ(AⅡ)对新生Wistar鼠脑细胞胞浆Ca^(2+)浓度([Ca^(2+)]_i)的影响。结果表明:血管紧张素Ⅱ在1nmol/L—1μmol/L浓度下可诱导新生鼠脑细胞[Ca^(2+)]_i增加,具量效关系。在无外Ca^(2+)存在对,其增加幅度有所减少。上述效应可被血管紧张素Ⅱ拮抗剂Saralasin所阻断,并呈剂量依赖关系。上述结果提示,血管紧张素Ⅱ可激活血管紧张素AⅡ受体,增加脑细胞[Ca^(2+)]_i,该效应通过细胞内Ca^(2+)释放和细胞外Ca^(2+)内流两条适径实现,前者的作用是主要的。 展开更多
关键词 血管紧张素Ⅱ 脑细胞 胞浆 钙离子
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蝙蝠葛苏林碱对PC12细胞内游离钙浓度的影响 被引量:5
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作者 何玲 刘国卿 +3 位作者 王金晞 黄文龙 华维一 彭司勋 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第5期416-419,共4页
目的进一步探讨蝙蝠葛苏林碱(Dau)的抗脑缺血/缺氧损伤与其钙拮抗作用间的关系。方法:培养的PC12细胞用Fura-2/AM负载,用AR-CM-MIC阳离子测定系统观测Dau对单细胞内游离钙([Ca(2+)]_i)升高的影响。结果:Dau(0.1~100μmol... 目的进一步探讨蝙蝠葛苏林碱(Dau)的抗脑缺血/缺氧损伤与其钙拮抗作用间的关系。方法:培养的PC12细胞用Fura-2/AM负载,用AR-CM-MIC阳离子测定系统观测Dau对单细胞内游离钙([Ca(2+)]_i)升高的影响。结果:Dau(0.1~100μmol·L(-1))可浓度依赖性抑制高钾和caffeine引起的[Ca(2+)]_i增加,对肌浆网钙泵抑制剂cy-clopiszonicacid引起的[Ca(2+)]_i升高也有抑制作用。结论:Dau不仅抑制电压依赖性钙通道开放引起的细胞外钙内流和caffeine引起的内钙释放.而且对钙泵也可能有影响,这可能是其抗脑缺血/缺氧损伤的重要机制。 展开更多
关键词 蝙蝠葛苏林碱 PC12细胞 游离钙
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白细胞介素-2改变心肌细胞钙瞬态的频率依赖性 被引量:1
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作者 曹春梅 夏强 +3 位作者 沈岳良 叶治国 陆源 陈君柱 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第10期1320-1324,共5页
目的 :观察白细胞介素 - 2 (IL - 2 )对大鼠心肌细胞内钙处理能力的影响。方法 :采用细胞内双波长钙荧光系统检测稳定状态及不同电刺激频率下单个心肌细胞钙瞬态的变化。结果 :在稳定状态 (0 2Hz)下 ,2× 10 5U/LIL - 2抑制心肌细... 目的 :观察白细胞介素 - 2 (IL - 2 )对大鼠心肌细胞内钙处理能力的影响。方法 :采用细胞内双波长钙荧光系统检测稳定状态及不同电刺激频率下单个心肌细胞钙瞬态的变化。结果 :在稳定状态 (0 2Hz)下 ,2× 10 5U/LIL - 2抑制心肌细胞钙瞬态的幅度和峰值 ,使舒张末钙水平升高 ,钙瞬态下降相时间常数延长。细胞外钙浓度为 1 2 5mmol/L时 ,心肌细胞舒张末钙水平、钙瞬态的幅度均随刺激频率 (0 2 - 1 0Hz)的增高而增高。IL - 2抑制了这种正性的频率依赖关系 ,当将外钙浓度增加至 2 5mmol/L时并不能改变其抑制作用。咖啡因诱导的内贮钙释放也呈现正性的频率依赖关系 ,2× 10 5U/LIL - 2抑制其频率依赖关系。在细胞外钙浓度为 1 2 5mmol/L时 ,两组间的钙瞬态机械恢复特性无差异 ,当外钙为 2 5mmol/L时 ,IL - 2组的恢复率减慢。结论 :IL - 2通过抑制肌浆网内贮钙的释放而抑制了细胞内钙瞬态的正性频率依赖关系。 展开更多
关键词 白细胞介素-2 心肌细胞内钙 大鼠 频率依赖性
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盐酸埃他卡林对H_2O_2所致PC12细胞损伤的保护 被引量:2
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作者 柴怡 丁建花 +1 位作者 李皓 胡刚 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2005年第4期377-381,共5页
目的:研究KATP 通道开放剂盐酸埃他卡林(iptakalimhydrochloride ,Ipt)对H2 O2 所致PC12细胞损伤的保护作用及其作用机制。方法:采用培养的PC12细胞,MTT法测定细胞存活率,HPLC法测定细胞培养液中谷氨酸(Glu)的含量,荧光法测定胞内钙离子... 目的:研究KATP 通道开放剂盐酸埃他卡林(iptakalimhydrochloride ,Ipt)对H2 O2 所致PC12细胞损伤的保护作用及其作用机制。方法:采用培养的PC12细胞,MTT法测定细胞存活率,HPLC法测定细胞培养液中谷氨酸(Glu)的含量,荧光法测定胞内钙离子([Ca2 +]i)浓度。结果:Ipt可浓度依赖性的拮抗H2 O2 介导的细胞毒性,提高细胞生存率,降低胞外Glu的释放以及胞内Ca2 +浓度。该保护作用可被2 0 0 μmol·L- 15 - HD(线粒体KATP通道阻断剂)部分拮抗。结论:Ipt可拮抗H2 O2 介导的细胞损伤作用,该保护作用可能与线粒体ATP敏感性钾通道相关。 展开更多
关键词 盐酸埃他卡林 ATP敏感性钾通道 PC12细胞 氧化应激 谷氨酸 游离钙
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用Fura-2双波长荧光法测定低剂量电离辐射对小鼠脾细胞游离钙的影响 被引量:3
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作者 傅海青 吕喆 鞠桂芝 《白求恩医科大学学报》 CSCD 1999年第6期679-681,共3页
目的:探讨低剂量电离辐射免疫增强效应的机理。方法:采用Fura-2/AM 双波长荧光测定法研究了低剂量电离辐射全身照射后小鼠脾T淋巴细胞内游离钙离子浓度(〔Ca2+ 〕i)对次佳浓度Con A(5 m g/L)反应性的变... 目的:探讨低剂量电离辐射免疫增强效应的机理。方法:采用Fura-2/AM 双波长荧光测定法研究了低剂量电离辐射全身照射后小鼠脾T淋巴细胞内游离钙离子浓度(〔Ca2+ 〕i)对次佳浓度Con A(5 m g/L)反应性的变化。结果:静息状态下的小鼠脾淋巴细胞内游离钙离子浓度为95.0±14.0 nm ol/L,ConA 可使小鼠脾T淋巴细胞内游离钙离子浓度增加69.4±7.6 nm ol/L,上升至峰值时间为79.2 s。75、100 和200 m Gy 全身照射后24 h,Con A 诱导的小鼠脾T淋巴细胞内游离钙离子动员明显高于假照射组(P< 0.01)。结论:低剂量电离辐射的免疫兴奋效应与其增强淋巴细胞内〔Ca2+ 展开更多
关键词 低剂量电离辐射 脾细胞 FURA-2/AM 钙离子
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