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利用CRISPR/Cas9编辑系统构建ACTA1基因敲除的PEFs细胞系 被引量:3
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作者 张雪萍 刘嘉仪 +1 位作者 王彦芳 吴添文 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期2273-2284,共12页
【目的】利用CRISPR/Cas9技术获得α-肌动蛋白1(actin alpha 1,ACTA1)基因敲除的猪胎儿成纤维细胞(porcine embryo fibroblasts, PEFs),为后续在细胞水平上探究猪ACTA1基因功能及发掘友好基因座位奠定基础。【方法】通过实时荧光定量PC... 【目的】利用CRISPR/Cas9技术获得α-肌动蛋白1(actin alpha 1,ACTA1)基因敲除的猪胎儿成纤维细胞(porcine embryo fibroblasts, PEFs),为后续在细胞水平上探究猪ACTA1基因功能及发掘友好基因座位奠定基础。【方法】通过实时荧光定量PCR检测ACTA1基因在巴马小型猪心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、背部皮下脂肪和背最长肌7种组织中的表达情况;利用CRISPOR在线网站在猪ACTA1基因第7外显子区域设计3条向导RNA(single guide RNA,sgRNA),并将其连接至pX330载体;通过T7E1酶切检测不同sgRNA活性,选择效率较高且符合目标的载体质粒共转染至PEFs中;利用有限稀释法筛选单克隆细胞,并对获得的单克隆细胞进行基因型鉴定和脱靶分析。【结果】实时荧光定量PCR结果表明,ACTA1基因在背最长肌中的表达量极显著高于其他组织(P<0.01)。设计的3条sgRNA的基因编辑效率分别为24.87%(sgRNA1)、39.59%(sgRNA2)、36.93%(sgRNA3),综合切割位置和基因编辑效率,选用sgRNA1和sgRNA2共转染细胞。基因型鉴定结果表明,获得的69株单克隆细胞中有20株单克隆细胞发生了编辑,其中单等位基因片段敲除细胞3株,双等位基因片段敲除细胞1株,片段敲除效率为5.8%(4/69)。脱靶分析结果显示,在预测的脱靶位点未检测到脱靶效应。【结论】本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑系统成功构建了ACTA1基因纯合敲除的PEFs,研究结果为进一步探究ACTA1基因对猪骨骼肌发育调控提供了技术支撑和理论基础,同时为挖掘猪组织特异性表达的友好位点提供新思路。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9 ACTA1基因 猪胎儿成纤维细胞(PEFs)
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Breeding and Simple-rapid Regeneration Protocol for Jisheng 1 with Glandless Trait and High-frequency Somatic Embryo Production Ability 被引量:1
2
作者 LI Wei-ming1,ZHANG Han-shuang1,ZHAO Jun-li1,SUN Jing-yan2(1.Cotton Research Institute of Haafs,Shijiazhuang,Hebei Province 050051,China 2.Hebei Normal University Shijiazhuang,Hebei Province 071001,China) 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2008年第S1期95-,共1页
Most of model cotton varieties used in tissue culture have glands on both the reproductive and vegetative parts of the plant.These glands contain compounds that are toxic to human and non-ruminant animals.The presence... Most of model cotton varieties used in tissue culture have glands on both the reproductive and vegetative parts of the plant.These glands contain compounds that are toxic to human and non-ruminant animals.The presence of these compounds limits their usage as food and feed.To obtain a glandless cotton variety with high-frequency somatic embryo production ability,27 glandless varieties 展开更多
关键词 Breeding and Simple-rapid Regeneration Protocol for Jisheng 1 with Glandless Trait and High-frequency Somatic embryo Production Ability MSB cycle
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籼型巨胚功能稻新品系赣巨1号的选育与应用 被引量:6
3
作者 张标金 张祥喜 罗林广 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期16-20,共5页
“赣巨1号”是“先恢207”与籼型巨胚中间育种材料“80096”(91-308/巨胚2号,F6)杂交选育而成的籼型巨胚水稻新品种(系)。“赣巨1号”富含蛋白质、矿物质等多种营养物质,其胚大小是其亲本“先恢207”的2~3倍,γ-氨基丁酸(γ-am... “赣巨1号”是“先恢207”与籼型巨胚中间育种材料“80096”(91-308/巨胚2号,F6)杂交选育而成的籼型巨胚水稻新品种(系)。“赣巨1号”富含蛋白质、矿物质等多种营养物质,其胚大小是其亲本“先恢207”的2~3倍,γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid, GABA)含量是常规品种“先恢207”的5.39倍,具有很好的作为保健功能食品进一步开发利用价值。该新品种(系)农艺性状好,表现丰产稳产,适合在江西赣抚平原、赣中南丘陵地区作二晚种植。 展开更多
关键词 赣巨1 巨胚稻( ORYZA SATIVA L ) γ-氨基丁酸( GABA)
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胚培无核葡萄新品种——沪培1号的选育 被引量:28
4
作者 蒋爱丽 李世诚 +2 位作者 金佩芳 杨天仪 骆军 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期402-403,共2页
沪培1号是以二倍体无核品种喜乐为母本与四倍体品种巨峰杂交,经胚离体挽救培养育成,其根尖细胞染色体计数57条,属三倍体无核品种。在栽培条件下,果穗平均质量400g,果粒椭圆形,单个果粒质量5.0~6.8g,绿白色。肉质中等硬,风味浓郁,可溶... 沪培1号是以二倍体无核品种喜乐为母本与四倍体品种巨峰杂交,经胚离体挽救培养育成,其根尖细胞染色体计数57条,属三倍体无核品种。在栽培条件下,果穗平均质量400g,果粒椭圆形,单个果粒质量5.0~6.8g,绿白色。肉质中等硬,风味浓郁,可溶性固形物15%~18%,品质上等。上海地区8月初成熟。 展开更多
关键词 葡萄 新品种 沪培1 三倍体 无核 胚培
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1,2,4-三氯苯对斑马鱼生殖和胚胎发育毒性效应 被引量:12
5
作者 杜青平 刘伍香 +1 位作者 袁保红 贾晓珊 《中国环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第4期736-741,共6页
采用斑马鱼胚胎早期发育技术研究了1,2,4-三氯苯(1,2,4-TCB)对成年斑马鱼(Danio retio)和斑马鱼受精卵染毒后胚胎生命早期阶段生长发育的影响.结果发现,大于5mg/L剂量的1,2,4-TCB有明显发育毒性,会导致胚胎致畸,引起胚胎凝集或死亡.1,2,... 采用斑马鱼胚胎早期发育技术研究了1,2,4-三氯苯(1,2,4-TCB)对成年斑马鱼(Danio retio)和斑马鱼受精卵染毒后胚胎生命早期阶段生长发育的影响.结果发现,大于5mg/L剂量的1,2,4-TCB有明显发育毒性,会导致胚胎致畸,引起胚胎凝集或死亡.1,2,4-TCB对成年斑马鱼和斑马鱼受精卵染毒后,胚胎的致死率均与1,2,4-TCB处理之间呈现时间-效应和剂量-效应关系.高浓度的(15 mg/L)1,2,4-TCB对成年斑马鱼的染毒,其平均产卵量和受精率均降低.成年斑马鱼或者受精卵接触1,2,4-TCB后,胚胎发育中典型的非致死效应—心包囊水肿和脊柱畸形的比例均随着1,2,4-TCB的浓度升高而逐渐升高.同浓度1,2,4-TCB处理后,斑马鱼胚胎直接染毒造成的非致死毒性效应更强.结果表明,水体中残留的1,2,4-TCB对于鱼类的生殖和发育具有潜在的危害. 展开更多
关键词 1 2 4-三氯苯 胚胎 急性毒性 斑马鱼
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不同品种鸭胚胎期骨骼肌成肌细胞GHR和IGF-1 mRNA表达差异分析 被引量:4
6
作者 姬改革 陶志云 +5 位作者 朱春红 束婧婷 刘宏祥 徐文娟 胡艳 李慧芳 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2016年第3期406-411,共6页
为探讨生长激素受体(growth hormone receptor,GHR)和胰岛素样生长因子-1(Insulin-like growth factor-1,IGF-1)在不同品种鸭胚胎期骨骼肌成肌细胞中的表达差异。选择生长速度不同的金定鸭和高邮鸭为试验动物,采用实时荧光定量PCR方法... 为探讨生长激素受体(growth hormone receptor,GHR)和胰岛素样生长因子-1(Insulin-like growth factor-1,IGF-1)在不同品种鸭胚胎期骨骼肌成肌细胞中的表达差异。选择生长速度不同的金定鸭和高邮鸭为试验动物,采用实时荧光定量PCR方法检测鸭13,15,17,19,21和23胚龄时胸肌和腿肌成肌细胞GHR,IGF-1mRNA的表达情况,并进行了品种间比较。结果发现:13胚龄时,高邮鸭胸肌和腿肌成肌细胞IGF-1的表达均显著高于金定鸭(P<0.05);17胚龄是两个品种鸭GHR和IGF-1共同的表达高峰期;17胚龄之后,鸭胸肌和腿肌成肌细胞GHR和IGF-1表达均显著降低。在19,21胚龄时,高邮鸭胸肌成肌细胞2个基因的表达均显著高于金定鸭(P<0.05),而腿肌成肌细胞GHR和IGF-1表达在品种间无显著差异(P>0.05)。鸭胚胸肌和腿肌成肌细胞GHR和IGF-1表达呈现极显著的正线性相关(P<0.01)。提示:GHR和IGF-1的表达谱及各自在品种间的变化规律基本一致;鸭胚骨骼肌成肌细胞GHR和IGF-1 mRNA表达有组织特异性,二者之间可能存在正调控的作用机制。 展开更多
关键词 胚胎 成肌细胞 GHR IGF-1
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GM-1对培养的人胚神经干细胞增殖和分化的影响 被引量:5
7
作者 赵新利 杨波 +5 位作者 李红伟 宋来君 许予明 杜英 阮丽荣 张清勇 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2003年第1期18-20,共3页
目的:观察不同剂量神经节苷脂(GM-1)对神经干细胞增殖和分化的影响。方法:从人胚胎脑组织分离出神经干细胞,培养于含bFGF(阳性对照组)和B27(阴性对照组)的DMEM/F12细胞培养液中,实验组培养液中分别加入0.335μg/L,3.35μg/L及33.5μg/L... 目的:观察不同剂量神经节苷脂(GM-1)对神经干细胞增殖和分化的影响。方法:从人胚胎脑组织分离出神经干细胞,培养于含bFGF(阳性对照组)和B27(阴性对照组)的DMEM/F12细胞培养液中,实验组培养液中分别加入0.335μg/L,3.35μg/L及33.5μg/L的GM-1,用MTT比色分析法测定细胞增殖能力。用含体积分数3%血清的DMEM/F12培养液诱导细胞分化,每间隔6 h于倒置显微镜下观察细胞分化情况。结果:5 d、10 d MTT比色显示,GM-1(33.5μg/L)组与阳性对照组比较,P均>0.05,与阴性对照组比较,P均<0.05;GM-1(0.335μg/L)组、GM-1(3.35μg/L)组与阴性对照组比较,P均>0.05。分化实验发现,接种6 h后,体积分数3%血清+DMEM/F12组神经球周边可见明显的细胞突起,呈放射状向周围伸出,而3个实验组和阴性对照组的细胞突起短且细小,随着培养时间的延长,各组的细胞突起均逐渐伸长,3个实验组分化能力低于对照组,与阴性对照组之间无明显差异。结论:GM-1能够维持神经干细胞的原始神经状态,促进神经干细胞的增殖,对神经干细胞无明显的诱导分化作用。 展开更多
关键词 细胞增殖 GM-1 神经干细胞 人胚 细胞分化
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排卵正常妇女子宫内膜种植窗期基质金属蛋白酶-9及其抑制物-1的表达特点及作用 被引量:8
8
作者 桂文武 丘彦 +2 位作者 曾品鸿 刘淑文 舒为群 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2004年第1期1-4,7,共5页
目的 :探讨基质金属蛋白酶 - 9(MMP - 9)和组织金属蛋白酶抑制物 - 1(TIMP - 1)在排卵正常妇女子宫内膜种植窗期的表达特点 ,及其在胚泡植入中的作用。方法 :选择排卵正常妇女的子宫内膜 ,用扫描电镜 (SEM )确定分泌中期子宫内膜种植窗... 目的 :探讨基质金属蛋白酶 - 9(MMP - 9)和组织金属蛋白酶抑制物 - 1(TIMP - 1)在排卵正常妇女子宫内膜种植窗期的表达特点 ,及其在胚泡植入中的作用。方法 :选择排卵正常妇女的子宫内膜 ,用扫描电镜 (SEM )确定分泌中期子宫内膜种植窗开放 ;用免疫组化法检测 15例种植窗期子宫内膜组织中MMP - 9/TIMP - 1蛋白的表达 ,并与 15例增生期、13例分泌早期、14例分泌晚期内膜的表达相比较。结果 :MMP - 9/TIMP - 1在各期子宫内膜中均呈阳性表达 ,腺上皮细胞、腔上皮细胞和基质细胞胞浆内均可见棕黄色颗粒沉着。从增生期到分泌早期至种植窗期染色逐渐增强 ,以种植窗期最明显 (P <0 .0 5 ) ,分泌晚期略低于种植窗期 ,但明显高于分泌早期和增生期 (P <0 .0 5 )。结论 :排卵正常妇女种植窗期子宫内膜高表达MMP - 9/TIMP - 1蛋白 ,可能参与了胚泡的着床 ,调节胚胎的植入过程。 展开更多
关键词 子宫内膜 种植窗 MMP—9 TIMP—1 胚泡植入
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影响Fat-1转基因水牛胚胎发育因素的研究 被引量:2
9
作者 王建 庞春英 +5 位作者 邓廷贤 杨春艳 郑海英 黄芬香 杨炳壮 梁贤威 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第12期121-124,共4页
本试验比较了水牛卵母细胞体外受精后注射外源DNA的时间(5~6、9~10、13~14、17~18、21~22 h)和外源DNA的浓度(10、50、100μg/mL)对Fat-1转基因水牛胚胎的发育影响。结果显示,9~10 h组的胚胎表达率和囊胚表达率最高,其中胚胎表达... 本试验比较了水牛卵母细胞体外受精后注射外源DNA的时间(5~6、9~10、13~14、17~18、21~22 h)和外源DNA的浓度(10、50、100μg/mL)对Fat-1转基因水牛胚胎的发育影响。结果显示,9~10 h组的胚胎表达率和囊胚表达率最高,其中胚胎表达率极显著高于5~6 h组,囊胚表达率极显著高于21~22 h组(P<0.01);在浓度试验中,50μg/mL浓度组的胚胎表达率和囊胚表达率最高,且极显著高于100μg/mL(P<0.01)。 展开更多
关键词 水牛 转基因 Fat-1 胚胎
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粳型巨胚稻西巨胚1号品种特性与栽培技术研究 被引量:1
10
作者 张荣萍 戴红燕 蔡光泽 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第6期3204-3205,共2页
[目的]研究西巨胚1号品种特性及在攀西高原稻区高产栽培技术。[方法]通过对西巨胚1号、合系22-2、昌米011在生育期、农艺性状、分蘖力、穗部性状和品质性状等方面进行对比分析,从播期、播量、栽插密度、水肥管理、病虫害防治等方面总结... [目的]研究西巨胚1号品种特性及在攀西高原稻区高产栽培技术。[方法]通过对西巨胚1号、合系22-2、昌米011在生育期、农艺性状、分蘖力、穗部性状和品质性状等方面进行对比分析,从播期、播量、栽插密度、水肥管理、病虫害防治等方面总结西巨胚1号在攀西高原稻区栽培技术要点。[结果]西巨胚1号在攀西高原稻区种植中表现出胚大、米质较优、抗病、抗倒、适应性强等特点,适宜在攀西高原地区3月下旬播种,用种量为60~75 kg/hm2,基本苗120万~150万株/hm2,早施分蘖肥,重施基肥,补施穗粒肥,科学灌水,注意病、虫、草、鸟害防治。[结论]该研究为进一步改进西巨胚1号栽培技术提供理论和生产实践参考。 展开更多
关键词 粳型巨胚稻 西巨胚1 品种特性 栽培技术 攀西高原稻区
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IGF-1抑制妊娠合并糖尿病诱导的鼠胚胎细胞凋亡 被引量:3
11
作者 罗晓敏 邹海燕 +5 位作者 张喆 潘爱华 尹芳 魏苗 杨静 黄河 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第6期776-780,共5页
为研究妊娠合并糖尿病对孕妇及胎儿产生危害的机制,构建妊娠合并糖尿病的昆明小鼠动物模型,检测不同浓度葡萄糖对体外培养胚泡细胞生长的影响.观察不同浓度胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)对体外高糖环境胚泡... 为研究妊娠合并糖尿病对孕妇及胎儿产生危害的机制,构建妊娠合并糖尿病的昆明小鼠动物模型,检测不同浓度葡萄糖对体外培养胚泡细胞生长的影响.观察不同浓度胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)对体外高糖环境胚泡细胞发育的影响,利用细胞核DNA双染实验观察不同浓度IGF-1作用下胚泡细胞的凋亡.采用实时定量PCR(RT-PCR)分析不同凋亡相关基因在体外培养胚泡中的表达情况.结果显示,随着葡萄糖浓度的增加,胚泡细胞总数减少,高浓度葡萄糖(≥30mmol/L)则能显著性抑制胚泡细胞的生长(P<0.01).RT-PCR检测发现妊娠合并糖尿病小鼠的胚泡igf-1表达下调,且与葡萄糖的浓度成正相关.凋亡相关基因bcl-2和bcl-xl的表达随着体外IGF-1培养浓度的增加而表达上调,而p53基因和凋亡相关基因Bax的表达则下调.细胞凋亡实验显示,随着IGF-1浓度的增加,体外培养胚泡细胞的凋亡逐渐降低,当IGF-1浓度达到100μg/L时,几乎未发现细胞凋亡.因此,高血糖能抑制胚泡细胞的生长发育,导致igf-1的表达下调,而IGF-1能抑制胚泡细胞的凋亡,有利于胚泡细胞的生长发育. 展开更多
关键词 妊娠合并糖尿病 鼠胚胎 体外培养 IGF-1 凋亡
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凝血酶诱导人胚胎肾系膜细胞增殖和PAI-1表达的研究 被引量:11
12
作者 何庆南 易著文 +1 位作者 陈香美 傅博 《湖南医科大学学报》 CSCD 2000年第2期191-193,共3页
目的 :探讨凝血酶对人胚胎肾系膜细胞增殖和纤溶酶原激活物抑制物 1 (PAI 1 )表达的影响。方法 :采用噻唑蓝 (MTT)掺入法、Northern杂交和纤维蛋白平板法分别检测不同浓度凝血酶刺激下人胚胎肾小球系膜细胞增殖、PAI 1mRNA表达和PAI 1... 目的 :探讨凝血酶对人胚胎肾系膜细胞增殖和纤溶酶原激活物抑制物 1 (PAI 1 )表达的影响。方法 :采用噻唑蓝 (MTT)掺入法、Northern杂交和纤维蛋白平板法分别检测不同浓度凝血酶刺激下人胚胎肾小球系膜细胞增殖、PAI 1mRNA表达和PAI 1蛋白质活性的变化 ,并同时用人工水蛭素进行阻断实验。结果 :凝血酶呈浓度依赖性的方式促进人胚胎肾小球系膜细胞增殖、PAI 1mRNA表达和PAI 1蛋白质活性 ,水蛭素能特异地阻断凝血酶的作用。结论 :凝血酶可通过促进系膜细胞增殖、PAI 展开更多
关键词 凝血酶 PAI-1 肾小球 系膜细胞培养 胚胎
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鸭出雏前后腿肌IGF-1基因表达规律研究 被引量:2
13
作者 宋卫涛 宋迟 +3 位作者 李慧芳 单艳菊 胡艳 朱春红 《云南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期54-57,共4页
为探讨家鸭出雏前后腿肌类胰岛素样生长因子(IGF-1)的表达规律,本研究采用荧光定量PCR和原位杂交(ISH)技术,选取高邮鸭和金定鸭13,17,21,25,27日胚龄和7日龄共192个腿肌样本为研究对象。首次发现IGF-1 mRNA在两个品种不同胚龄和日龄腿... 为探讨家鸭出雏前后腿肌类胰岛素样生长因子(IGF-1)的表达规律,本研究采用荧光定量PCR和原位杂交(ISH)技术,选取高邮鸭和金定鸭13,17,21,25,27日胚龄和7日龄共192个腿肌样本为研究对象。首次发现IGF-1 mRNA在两个品种不同胚龄和日龄腿肌中的表达量规律:两个品种鸭腿肌IGF-1 mRNA表达量差异不显著(P>0.05);腿肌13日胚龄表达量极显著高于其他时间点(P<0.01),并随着胚龄的增加逐渐降低。同时,原位杂交结果显示,血管周围及腿肌肌肉肌束间的肌膜中IGF-1 mRNA的表达量明显高于周边腿肌肌肉组织。研究结果表明,IGF-1基因对鸭胚胎期腿肌的生长发育具有重要意义。 展开更多
关键词 腿肌 胚胎期 IGF-1 原位杂交 IGF-1
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黄芪多糖对小鼠1-细胞胚胎体外发育效果的初步研究 被引量:2
14
作者 张建芳 高建明 +5 位作者 陈武 于同泉 穆祥 李杗 邸冉 孟令君 《中国比较医学杂志》 CAS 2007年第6期333-337,共5页
目的探讨黄芪多糖对小鼠1-细胞胚胎体外发育的作用。方法以mCZB添加抗生素为对照组,以添加不同浓度黄芪多糖(Astragulus Polysacharin,Aps)为试验组,观察胚胎体外发育率、孵化胚胎细胞数目及切割取样后桑椹胚发育率和细胞数目。结果体... 目的探讨黄芪多糖对小鼠1-细胞胚胎体外发育的作用。方法以mCZB添加抗生素为对照组,以添加不同浓度黄芪多糖(Astragulus Polysacharin,Aps)为试验组,观察胚胎体外发育率、孵化胚胎细胞数目及切割取样后桑椹胚发育率和细胞数目。结果体外培养96 h,试验组囊胚发育率(86.0%、85.8%、89.5%)均显著高于对照组(75.8%)(P<0.05),各试验组间差异无显著性(P>0.05);体外培养144 h,试验组胚胎孵化率(28.9%、31.0%、25.4%)均高于对照组(22.6%),以Aps2(100μg/mL)组孵化率为最高(31.0%)。孵化胚胎细胞数试验各组(76.00±6.25、81.73±7.01、75.89±4.54)均极显著高于对照组(69.06±5.15)(P<0.01)。切割取样(≤5或>5个)后桑椹胚体外培养72 h,试验组发育率和细胞数分别为(≤5组为50%和44±2.7、50%和53±2.7、44.4%和55±2.7;>5组为23.1%和42±1.6、20.0%和44±1.0、14.3%和41±1.0)均高于对照组(33.3%和41±1.7;0%和0)。结论中药有效成分黄芪多糖能促进小鼠早期胚胎的体外发育及胚胎细胞增殖,并对切割取样后胚胎的体外培养有一定促进作用,且切割样本数≤5对胚胎发育比较有利。 展开更多
关键词 黄芪多糖 小鼠 1-细胞胚胎 培养技术 体外 胚胎分割 细胞计数
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IL-1α促进骨巨细胞瘤中破骨样细胞体外骨吸收研究 被引量:4
15
作者 赵宁侠 于世凤 庞淑珍 《北京医科大学学报》 CSCD 1998年第3期246-248,共3页
目的:比较骨巨细胞瘤中的多核巨细胞与破骨细胞骨吸收的功能特点。方法:体外分离骨巨细胞瘤中的多核巨细胞与骨片共同培养,观察IL1α(50μg/L,100μg/L)对多核巨细胞体外骨吸收的影响。结果:IL1α可使多核... 目的:比较骨巨细胞瘤中的多核巨细胞与破骨细胞骨吸收的功能特点。方法:体外分离骨巨细胞瘤中的多核巨细胞与骨片共同培养,观察IL1α(50μg/L,100μg/L)对多核巨细胞体外骨吸收的影响。结果:IL1α可使多核巨细胞骨吸收陷窝的数目和面积增加;其作用随剂量增加而增强;IL1α对多核巨细胞的促进作用具有长效性。结论:IL1α具有促进多核巨细胞体外骨吸收作用,说明多核巨细胞与破骨细胞在骨吸收功能方面有相似性。 展开更多
关键词 骨肿瘤 骨巨细胞瘤 破骨细胞 骨质吸收 IL-1Α
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肿瘤转移抑制因子基因MRP-1/CD9对小鼠胚胎着床影响的研究 被引量:1
16
作者 赵邦霞 谭冬梅 +2 位作者 彭红英 尉晓蔚 谭毅 《四川动物》 CSCD 北大核心 2007年第3期686-688,共3页
目的研究外源性MRP-1/CD9抗体对小鼠胚胎着床的影响。方法1.将8-细胞小鼠胚胎培养于含不同浓度MRP-1/CD9抗体的培养液中,观察囊胚形成及囊胚脱透明带的情况。2.妊娠D4小鼠子宫角注射MRP-1/CD9抗体,于妊娠D8观察小鼠胚胎植入数量。结果1... 目的研究外源性MRP-1/CD9抗体对小鼠胚胎着床的影响。方法1.将8-细胞小鼠胚胎培养于含不同浓度MRP-1/CD9抗体的培养液中,观察囊胚形成及囊胚脱透明带的情况。2.妊娠D4小鼠子宫角注射MRP-1/CD9抗体,于妊娠D8观察小鼠胚胎植入数量。结果1.体外培养时,MRP-1/CD9抗体显著抑制胚胎的囊胚形成率(1:400,P<0.05)和脱带率(1∶800,P<0.05)。2.宫角注射MRP-1/CD9抗体可以显著提高小鼠胚胎的着床数(8.33±0.15vs4.57±0.21)。结论MRP-1/CD9参入小鼠胚胎的发育及植入。 展开更多
关键词 肿瘤转移抑制因子MRP-1/CD9 子宫内膜 胚胎着床
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大熊猫轮状病毒CH-1株研究进展 被引量:4
17
作者 杨锐 王成东 颜其贵 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期1040-1043,共4页
轮状病毒(Rotavirus,RV)是引起婴幼儿及幼龄动物急性腹泻甚至死亡的重要病原。2009年,首次在幼龄大熊猫粪便中分离到RV,被确定为A组,并将其命名为大熊猫轮状病毒(Giant Panda Rotavirus,GPRV)CH-1株。GPRV CH-1株主要感染断奶后的大熊猫... 轮状病毒(Rotavirus,RV)是引起婴幼儿及幼龄动物急性腹泻甚至死亡的重要病原。2009年,首次在幼龄大熊猫粪便中分离到RV,被确定为A组,并将其命名为大熊猫轮状病毒(Giant Panda Rotavirus,GPRV)CH-1株。GPRV CH-1株主要感染断奶后的大熊猫,引起急性传染性、顽固性腹泻甚至死亡,这对大熊猫的健康造成了严重的危害。本文介绍了GPRV CH-1株的基因结构和病毒蛋白结构及其生物信息学分析学以及该病的诊断方法和防治措施,以期为该病致病机制及疫苗研究提供参考。 展开更多
关键词 大熊猫轮状病毒CH-1 基因结构 病毒蛋白 生物信息学分析 诊断方法
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Junctophilin 1在小鼠胚胎干细胞定向分化心肌细胞及大鼠胚胎心肌发生中的表征 被引量:2
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作者 梁星光 吴博文 +3 位作者 张维晨 周立民 朱丹雁 楼宜嘉 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期359-365,共7页
目的:评价膜连接蛋白Junctophilin 1(JP1)亚型在哺乳动物心肌发生过程中,基因转录和蛋白表达特征,为心肌发育生物学及心脏再生医学相关生命现象本质提供实验依据。方法:小鼠胚胎干(embryonic stem,ES)细胞相继制成单细胞悬液和悬滴,收... 目的:评价膜连接蛋白Junctophilin 1(JP1)亚型在哺乳动物心肌发生过程中,基因转录和蛋白表达特征,为心肌发育生物学及心脏再生医学相关生命现象本质提供实验依据。方法:小鼠胚胎干(embryonic stem,ES)细胞相继制成单细胞悬液和悬滴,收集拟胚体转至培养皿中悬浮分化培养。每隔2 d收集细胞供分子生物学评价,并于心肌分化成熟期(第17天),免疫荧光成像原位检测JP1与心肌小节蛋白α-Actinin和Troponin-T是否呈共表达,流式细胞术定量确认JP1阳染率。另以大鼠胎心为研究对象,大鼠受精后第14天起,每隔2 d取胎心直至分娩新生鼠,供RT-PCR和免疫印迹实验用。结果:ES细胞分化过程中,JP1在基因转录层面全程表达,至第11天达高峰。蛋白层面呈一过性表达,在第9天达高峰,此后迅速下降,至分化培养第15天消失,分化成熟期未见表达。大鼠胎心表达趋势与ES细胞分化过程基本一致,但JP1蛋白表达持续在出生后。在分化终端,流式细胞术显示JP2和肌小节蛋白双染率达16.59%,而未见JP1阳染细胞。结论:JP1基因在小鼠ES细胞定向分化心肌细胞全程均有转录,但JP1仅在分化早期有一过性表达。大鼠胎心JP1表达趋势与ES细胞分化过程基本相一致。 展开更多
关键词 Junctophilin 1 胚胎干细胞 连接蛋白类 心肌/生长和发育 心肌/细胞学 细胞分化 定向分化 大鼠胚胎 心肌发生
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小鼠胚泡着床前后子宫内膜细胞间粘附分子-1 mRNA表达水平的变化 被引量:1
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作者 朱瑾 周剑萍 +1 位作者 刘银坤 吴欣 《上海医科大学学报》 CSCD 1999年第5期365-367,共3页
目的 研究小鼠胚泡着床前后子宫内膜细胞间粘附分子1(ICAM1)在转录水平的表达变化。方法 小鼠雌雄合笼后建立小鼠早孕模型,用逆转录聚合酶链式反应(RTPCR),测定ICAM1mRNA的表达。结果 小鼠正常动情期子宫内膜有一定ICAM1mRNA的表达,... 目的 研究小鼠胚泡着床前后子宫内膜细胞间粘附分子1(ICAM1)在转录水平的表达变化。方法 小鼠雌雄合笼后建立小鼠早孕模型,用逆转录聚合酶链式反应(RTPCR),测定ICAM1mRNA的表达。结果 小鼠正常动情期子宫内膜有一定ICAM1mRNA的表达,着床前后其表达显著升高,并在着床前一天即孕3d达到高峰,着床后逐渐出现下降趋势。结论 ICAM1在胚泡着床前后明显上调,和胚泡着床密切相关。 展开更多
关键词 胚泡着床 小鼠 ICAM-1 MRNA 子宫内膜
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乳酸钠对小鼠1—细胞胚胎体外发育的影响 被引量:1
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作者 李光鹏 张心田 严云勤 《东北农学院学报》 CSCD 1993年第3期292-294,共3页
小鼠 1-细胞胚胎在含10.8,16.2,21.6和32.4 mM 乳酸钠不同 Whitten's 液中培养时,分别有2.6%,172%,8.5%和0%的胚胎发育到扩展囊胚。在4种培养液中均有60%以上的胚胎完成了第1次卵裂,发育到2-细胞期,但以后的发育则有明显差异。培养... 小鼠 1-细胞胚胎在含10.8,16.2,21.6和32.4 mM 乳酸钠不同 Whitten's 液中培养时,分别有2.6%,172%,8.5%和0%的胚胎发育到扩展囊胚。在4种培养液中均有60%以上的胚胎完成了第1次卵裂,发育到2-细胞期,但以后的发育则有明显差异。培养液中较高浓度乳酸钠的存在,可能是造成小鼠胚胎体外培养的“2-细胞早期阻断”的原因之一。 展开更多
关键词 乳酸钠 1-细胞胚胎 小鼠 体外发育
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