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特异性小干扰RNA沉默Annexin Ⅱ基因表达对人乳腺癌细胞MDA-MB-231侵袭迁移力的影响 被引量:5
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作者 郭变琴 文阳安 陈婷梅 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期984-987,共4页
目的:探讨RNA干扰技术沉默Annexin Ⅱ基因表达对人乳腺癌细胞MDA-MB-231侵袭迁移力的影响。方法:体外化学合成Annexin Ⅱ基因序列特异性双链小干扰RNA(Annexin Ⅱ-siRNA),转染高转移人乳腺癌细胞株MDA-MB-231,用荧光显微镜观察转染效率... 目的:探讨RNA干扰技术沉默Annexin Ⅱ基因表达对人乳腺癌细胞MDA-MB-231侵袭迁移力的影响。方法:体外化学合成Annexin Ⅱ基因序列特异性双链小干扰RNA(Annexin Ⅱ-siRNA),转染高转移人乳腺癌细胞株MDA-MB-231,用荧光显微镜观察转染效率,逆转录-聚合酶链反应和蛋白印迹检测Annexin Ⅱ mRNA和蛋白表达水平;通过生长曲线和体外侵袭迁移实验,观察乳腺癌细胞恶性生物学行为的改变。结果:Annexin Ⅱ-siRNA能有效抑制Annexin Ⅱ mRNA和蛋白表达(P<0.05);经siRNA处理的细胞,细胞生长速度明显降低(P<0.05),侵袭迁移力显著下降(P<0.05)。结论:沉默Annexin Ⅱ基因表达可抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的侵袭迁移力。 展开更多
关键词 RNA干扰 乳腺癌 annexin 侵袭转移
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反义annexinⅡ对人肺腺癌细胞系SPC-A-1裸鼠移植瘤生长的抑制作用 被引量:5
2
作者 贾晋伟 钱桂生 黄桂君 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期306-308,共3页
目的 分析annexinⅡ基因反义表达载体对裸鼠移植瘤生长的影响。方法 在裸鼠皮下分别接种SPC A 1(亲代组 )和SPC A 1 annexinⅡ(反义组 )细胞 ,测定成瘤时间、肿瘤体积及重量 ,显微镜下观察肿瘤细胞及其对周围组织的影响。结果 成瘤... 目的 分析annexinⅡ基因反义表达载体对裸鼠移植瘤生长的影响。方法 在裸鼠皮下分别接种SPC A 1(亲代组 )和SPC A 1 annexinⅡ(反义组 )细胞 ,测定成瘤时间、肿瘤体积及重量 ,显微镜下观察肿瘤细胞及其对周围组织的影响。结果 成瘤时间反义组明显晚于亲代组。反义组接种后形成的肿瘤体积、重量均显著低于亲代组 ,且无一例出现局部侵犯 ,而亲代组则有 2例侵犯周围组织。结论 annexinⅡ基因在促进肿瘤细胞生长及对周围组织的侵袭方面具有重要作用。 展开更多
关键词 annexin 肺癌 裸鼠
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肾透明细胞癌中AnnexinⅡ的表达及其临床意义 被引量:7
3
作者 杨谨 程婷婷 +2 位作者 王丽娜 陈威 李旭 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期59-62,共4页
目的:探讨AnnexinⅡ在人肾透明细胞癌和癌旁组织样本中的表达情况及其临床意义。方法:采用Western blot方法检测29例新鲜肾透明细胞癌及相应癌旁组织中AnnexinⅡ蛋白的表达;采用免疫组织化学方法检测120例肾透明细胞癌及相应癌旁组织中A... 目的:探讨AnnexinⅡ在人肾透明细胞癌和癌旁组织样本中的表达情况及其临床意义。方法:采用Western blot方法检测29例新鲜肾透明细胞癌及相应癌旁组织中AnnexinⅡ蛋白的表达;采用免疫组织化学方法检测120例肾透明细胞癌及相应癌旁组织中AnnexinⅡ的表达情况,并将结果与患者的临床病理参数及预后进行相关性分析。结果:AnnexinⅡ在肾透明细胞癌及相应癌旁组织中均有表达,前者的表达水平较后者显著升高(P<0.01);免疫组织化学显示肾透明细胞癌组织中,AnnexinⅡ的阳性表达率高达67.5%,与癌旁组织存在明显差异(P<0.01);AnnexinⅡ在肾透明细胞癌组织中以胞膜表达为主,其表达状况与肾透明细胞癌患者的临床分期(P<0.05),组织学分级(P<0.05),肾被膜受侵(P<0.01)和远地转移(P<0.01)紧密相关;并且AnnexinⅡ的表达状况与肾透明细胞癌患者的5年生存率显著相关。结论:AnnexinⅡ在肾透明细胞癌组织中过表达,其与肾癌的发展密切相关,在肾癌的侵袭及转移过程中可能发挥重要作用。 展开更多
关键词 annexin 转移潜能 透明细胞癌 肾癌
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siRNA沉默AnnexinⅡ基因对人乳腺癌细胞MDA-MB-435S的影响 被引量:1
4
作者 郭变琴 陈婷梅 文阳安 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期223-226,共4页
目的探讨RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术沉默AnnexinⅡ基因表达对人乳腺癌细胞MDA-MB-435S生物学特性的影响。方法体外化学合成AnnexinⅡ序列特异性双链小干扰RNA(siRNA),脂质体介导转染人乳腺癌细胞株MDA-MB-435S,采用荧光显微镜... 目的探讨RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术沉默AnnexinⅡ基因表达对人乳腺癌细胞MDA-MB-435S生物学特性的影响。方法体外化学合成AnnexinⅡ序列特异性双链小干扰RNA(siRNA),脂质体介导转染人乳腺癌细胞株MDA-MB-435S,采用荧光显微镜观察转染效率。收集siRNA干扰的细胞,RT-PCR、蛋白印迹和免疫细胞化学法分别检测AnnexinⅡmRNA和蛋白的抑制水平,并采用MTT法、流式细胞术测定细胞增殖能力和细胞周期的变化,Millicell小室测定细胞侵袭、迁移能力的变化。结果AnnexinⅡ-siRNA能有效抑制AnnexinⅡmRNA和蛋白的表达(P<0.05);经siRNA干扰后的细胞,细胞增殖能力显著减低(P<0.05);G0/G1期细胞明显增加,S期细胞明显减少(P<0.05);细胞侵袭、迁移能力明显降低(P<0.05)。结论采用siRNA干扰AnnexinⅡmRNA和蛋白表达后,能有效逆转乳腺癌细胞的某些恶性生物学特点,表明AnnexinⅡ与乳腺癌的发生、发展及转移有一定的关系。 展开更多
关键词 RNA干扰 乳腺癌 annexin基因 细胞增殖 细胞周期 侵袭转移
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AnnexinⅡ在已分化人表皮角质形成细胞中表达的研究 被引量:2
5
作者 李习玲 连小华 +1 位作者 杨力 杨恬 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第17期1793-1795,共3页
目的探讨annexinⅡ在已分化人表皮角质形成细胞(keratinocyte,KC)中的表达。方法采用免疫组织化学(immunoh istochem istry,IHC)技术检测早、中、晚期人胚胎表皮KC及成人表皮KC中annexinⅡ蛋白的表达。结果①annexinⅡ在人胚胎期表皮KC... 目的探讨annexinⅡ在已分化人表皮角质形成细胞(keratinocyte,KC)中的表达。方法采用免疫组织化学(immunoh istochem istry,IHC)技术检测早、中、晚期人胚胎表皮KC及成人表皮KC中annexinⅡ蛋白的表达。结果①annexinⅡ在人胚胎期表皮KC中的表达随胚胎的发育逐渐增强,在成人期表皮KC中的表达明显高于胚胎期。②annexinⅡ呈胞膜方式表达,主要分布于基底上层的分化KC中。结论annexinⅡ可能参与表皮KC分化的调控。 展开更多
关键词 annexin 组织型纤溶酶原激活剂 角质形成细胞 分化 人胚胎 成人
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乳腺浸润性导管癌组织中CD147、MMP-9和AnnexinⅡ蛋白的表达 被引量:5
6
作者 党秋红 曾宪旭 +6 位作者 班振英 何伟 李道明 张威 郝志伟 张欢欢 王玉萍 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2012年第2期159-162,共4页
目的:检测乳腺浸润性导管癌组织中CD147、MMP-9及AnnexinⅡ蛋白的表达。方法:应用免疫组织化学SP法检测60例乳腺浸润性导管癌组织及60例乳腺纤维腺瘤组织中CD147、MMP-9和AnnexinⅡ蛋白的表达,并分析3者与乳腺浸润性导管癌临床病理特征... 目的:检测乳腺浸润性导管癌组织中CD147、MMP-9及AnnexinⅡ蛋白的表达。方法:应用免疫组织化学SP法检测60例乳腺浸润性导管癌组织及60例乳腺纤维腺瘤组织中CD147、MMP-9和AnnexinⅡ蛋白的表达,并分析3者与乳腺浸润性导管癌临床病理特征的关系。结果:乳腺浸润性导管癌组织中CD147、MMP-9和AnnexinⅡ蛋白的阳性表达率分别是91.7%、86.7%及90.0%,明显高于各自在乳腺纤维腺瘤组织中的表达率(6.7%、6.7%及3.3%,P<0.001);伴有淋巴结转移的浸润性导管癌组织中CD147、MMP-9和AnnexinⅡ蛋白的表达率明显高于无淋巴结转移组(P<0.05);组织学分级越高,以上3种蛋白的表达率越高(P<0.05)。结论:CD147、MMP-9和AnnexinⅡ蛋白的异常高表达可能促进了乳腺浸润性导管癌的发展。 展开更多
关键词 乳癌 CD147 MMP-9 annexin
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AnnexinⅡ基因反义表达载体对肺癌细胞生长的影响 被引量:5
7
作者 贾晋伟 钱桂生 黄桂君 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第18期1627-1630,共4页
目的 研究annexinⅡ基因反义表达载体 (annexinⅡ pLXSN)对人肺腺癌细胞株SPC A 1生长的影响。方法 ①提取SPC A 1细胞总RNA ,应用RT PCR法扩增目的片断 ,通过双酶切定向克隆的方法构建annexinⅡ基因反义表达载体。②应用脂质体将ann... 目的 研究annexinⅡ基因反义表达载体 (annexinⅡ pLXSN)对人肺腺癌细胞株SPC A 1生长的影响。方法 ①提取SPC A 1细胞总RNA ,应用RT PCR法扩增目的片断 ,通过双酶切定向克隆的方法构建annexinⅡ基因反义表达载体。②应用脂质体将annexinⅡ pLXSN导入SPC A 1细胞 (SPC A 1 annexinⅡ )。半定量RT PCR法分析转染细胞中annexinⅡmRNA的表达。③观察反义RNA对SPC A 1细胞生物学行为的影响。结果 ①反义表达载体成功导入SPC A 1细胞 ;半定量RT PCR证实SPC A 1 annexinⅡ细胞中annexinⅡmRNA表达量较亲代细胞下降约 2 /3。②对转染前后的细胞观察表明 ,SPC A 1 annexinⅡ细胞生长减慢 ,克隆形成率降低 ,3 H TdR掺入率下降 ,细胞增殖被阻滞于G0 ~G1 期。结论 annexinⅡ具有促进肺癌细胞增殖的作用 。 展开更多
关键词 annexin 基因转染 细胞增殖 DNA合成
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Annexin Ⅱ在肺鳞癌、腺癌中的表达及意义 被引量:4
8
作者 许月新 刘东明 +2 位作者 段鸿梅 官忠艳 韩昱晨 《中国肺癌杂志》 CAS 2009年第5期375-380,共6页
背景与目的AnnexinⅡ是一类钙依赖性磷脂结合蛋白,在许多的细胞功能中发挥作用,已有研究显示annexinⅡ参与肿瘤的发生发展。本研究通过检测膜联蛋白Ⅱ(annexinⅡ)在肺癌组织中的表达情况,分析annexinⅡ与各临床病理因素间的关系。方法... 背景与目的AnnexinⅡ是一类钙依赖性磷脂结合蛋白,在许多的细胞功能中发挥作用,已有研究显示annexinⅡ参与肿瘤的发生发展。本研究通过检测膜联蛋白Ⅱ(annexinⅡ)在肺癌组织中的表达情况,分析annexinⅡ与各临床病理因素间的关系。方法应用免疫组组织化学(SP法)检测110例肺鳞癌和肺腺癌组织中annexinⅡ的表达;应用WesternBlot方法检测40例肺鳞癌和肺腺癌组织及相应癌旁正常肺组织中annexinⅡ蛋白的表达。结果在110例肺癌组织中,有67例为annexinⅡ高表达(60.9%),鳞癌为胞膜表达,腺癌为胞膜表达或胞膜与胞浆均有表达,但以胞膜表达为主。AnnexinⅡ的表达情况与肺癌患者的淋巴结转移(P=0.008)及TNM分期(P=0.002)相关。AnnexinⅡ蛋白在肺鳞癌、腺癌和癌旁组织中均有表达,在癌组织中的表达明显高于癌旁正常肺组织(P<0.001)。结论AnnexinⅡ蛋白的表达与肺鳞癌及腺癌的发展密切相关。 展开更多
关键词 膜联蛋白 肺肿瘤 免疫组织化学 蛋白印记杂交
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韧带样型纤维瘤病中AnnexinⅡ、TGF-β_1和TGF-βRI的表达 被引量:3
9
作者 苗亚静 宋魏 +1 位作者 李家印 仇晓菲 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期186-189,共4页
目的探讨AnnexinⅡ、TGF-β1和TGF-βRI在韧带样型纤维瘤病(desmoid-type fibromatosis,DTF)组织中的表达及意义。方法采用免疫组化PV-9000两步法检测34例DTF和周围正常组织中AnnexinⅡ、TGF-β1和TGF-βRI的表达及分布。结果(1)Annexi... 目的探讨AnnexinⅡ、TGF-β1和TGF-βRI在韧带样型纤维瘤病(desmoid-type fibromatosis,DTF)组织中的表达及意义。方法采用免疫组化PV-9000两步法检测34例DTF和周围正常组织中AnnexinⅡ、TGF-β1和TGF-βRI的表达及分布。结果(1)AnnexinⅡ在DTF中的阳性率为85.3%(29/34),明显高于周围正常组织(P<0.05),阳性表达在浸润区尤为突出。An-nexinⅡ在DTF中的平均阳性细胞率明显高于周围组织(P<0.05);在浸润区平均阳性细胞率明显高于非浸润区(P<0.05)。(2)DTF肿瘤组织中TGF-β1和TGF-βRI的阳性率分别为79.4%(27/34)和82.4%(28/34),明显高于周围正常组织(P<0.05);TGF-β1与TGF-βRI表达呈正相关(P<0.05)。结论 (1)AnnexinⅡ可能参与DTF的发病及浸润性生长。DTF中An-nexinⅡ呈弥漫强阳性,为进一步尝试应用血管抑素靶向治疗DTF提供实验依据。(2)DTF肿瘤中可能存在TGF-β1自分泌环。 展开更多
关键词 韧带样型纤维瘤病 膜联蛋白 转化生长因子Β1 免疫组织化学
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AnnexinⅡ基因克隆及真核表达载体的构建
10
作者 刘亚伟 戴兵 +1 位作者 蔡厚安 梅长林 《生物学杂志》 CAS CSCD 2006年第3期12-14,共3页
目的克隆人AnnexinⅡ全长cDNA序列,并构建其真核表达载体。方法根据Genbank中AnnexinⅡ基因的碱基序列,利用RT-PCR的方法从人肾脏组织中扩增编码AnnexinⅡ基因,将目的片段与pBS-T载体连接,利用亚克隆的方法将AnnexinⅡ的cDNA片段克隆到p... 目的克隆人AnnexinⅡ全长cDNA序列,并构建其真核表达载体。方法根据Genbank中AnnexinⅡ基因的碱基序列,利用RT-PCR的方法从人肾脏组织中扩增编码AnnexinⅡ基因,将目的片段与pBS-T载体连接,利用亚克隆的方法将AnnexinⅡ的cDNA片段克隆到pcDNA3.1载体中,并进行序列测定。结果DNA测序证实该片段序列与Genbank完全一致。结论成功克隆人Annexin II全长cDNA序列,并构建出pcDNA3.1—Annexin II真核表达载体,为进一步研究其在肾脏疾病中的作用和机制奠定基础。 展开更多
关键词 克隆 annexin 真核表达载体
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人间隙连接蛋白31相互作用蛋白AnnexinⅡ的筛选与证实
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作者 刘宇 贺力强 +11 位作者 谭志平 唐程远 迟静薇 蔡芳 潘乾 龙志高 梁德生 邬玲仟 戴和平 夏昆 张灼华 夏家辉 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第6期501-507,共7页
间隙连接蛋白31(connexin31,Cx31)是间隙连接蛋白(connexin)家族的一员,目前对于Cx31的功能及其调节方式知之甚少.采用固相多肽合成的方法合成Cx31羧基端一个多肽片段(250 ̄266),经HPLC纯化后偶联到匙孔血蓝蛋白,免疫新西兰雄兔后采血... 间隙连接蛋白31(connexin31,Cx31)是间隙连接蛋白(connexin)家族的一员,目前对于Cx31的功能及其调节方式知之甚少.采用固相多肽合成的方法合成Cx31羧基端一个多肽片段(250 ̄266),经HPLC纯化后偶联到匙孔血蓝蛋白,免疫新西兰雄兔后采血检测、并纯化、经蛋白质印迹、细胞免疫荧光染色、免疫沉淀证实得到的抗体为特异性抗Cx31的抗体.运用制备的抗Cx31多克隆抗体免疫沉淀,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离,蛋白质条带回收,蛋白质胶块酶解,Q-TOF质谱分析,数据库扫描筛选可能相互作用蛋白,运用抗体pull-down实验,筛选到可能相互作用蛋白annexinⅡ,经过免疫共沉淀、细胞免疫共定位等实验证实annexinⅡ与Cx31相互作用. 展开更多
关键词 间隙连接蛋白31 抗体蛋白质相互作用 annexin 免疫共沉淀 免疫共定位
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Ezrin和AnnexinⅡ在胆囊癌中的表达及意义
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作者 陈义钢 夏加增 瞿甦 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第19期3147-3150,共4页
目的:探讨细胞骨架蛋白Ezrin和AnnexinⅡ在胆囊癌发展转移过程中的意义。方法:应用免疫组织化学(Max-Vision)技术对含有59例胆囊癌组织及6例正常胆囊组织的组织微陈列芯片进行Ezrin和AnnexinⅡ表达的检测;应用Western blot方法检测20例... 目的:探讨细胞骨架蛋白Ezrin和AnnexinⅡ在胆囊癌发展转移过程中的意义。方法:应用免疫组织化学(Max-Vision)技术对含有59例胆囊癌组织及6例正常胆囊组织的组织微陈列芯片进行Ezrin和AnnexinⅡ表达的检测;应用Western blot方法检测20例新鲜胆囊癌标本和6例正常胆囊标本中Ezrin和AnnexinⅡ的表达。并收集临床病理数据,与检测结果作统计分析。结果 :免疫组织化学检测结果表明:胆囊癌组织中Ezrin和AnnexinⅡ的阳性表达率分别为47.5%和50.8%,Ezrin和AnnexinⅡ在胆囊癌组织中的表达明显高于在正常胆囊组织中的表达,Ezrin的阳性表达与肝脏侵犯、淋巴结转移和Nevin分期有关;AnnexinⅡ的阳性表达与肝脏侵犯、分化程度和Nevin分期有关;胆囊癌中的Ezrin与AnnexinⅡ的表达有统计学相关性(r=0.423,P<0.05)。Western blot结果提示:Ezrin和AnnexinⅡ在胆囊癌组织中呈高表达,在正常胆囊组织中低表达,Ezrin和AnnexinⅡ的高表达与肝脏侵犯相关。结论:Ezrin和AnnexinⅡ可能是反映胆囊癌侵袭和转移潜力的重要生物学标记。检测Ezrin和AnnexinⅡ的表达对评估胆囊癌的恶性生物学行为有一定的临床意义。 展开更多
关键词 胆囊肿瘤 细胞骨架蛋白 annexin
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恶性血液病患者骨髓AnnexinⅡ基因的表达 被引量:2
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作者 张丽意 江淼 +3 位作者 李霞 沈飞 Jia Ruan 阮长耿 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第3期529-532,共4页
本研究探讨恶性血液病患者骨髓细胞annexinⅡ基因的表达水平及其在恶性血液病发生发展中的作用。用实时定量PCR方法检测了81例初治急性白血病患者、6例多发性骨髓瘤患者(MM)及20例缺铁性贫血患者(对照)骨髓annexinⅡmRNA的表达水平。结... 本研究探讨恶性血液病患者骨髓细胞annexinⅡ基因的表达水平及其在恶性血液病发生发展中的作用。用实时定量PCR方法检测了81例初治急性白血病患者、6例多发性骨髓瘤患者(MM)及20例缺铁性贫血患者(对照)骨髓annexinⅡmRNA的表达水平。结果显示:annexinⅡ在初治AML-M3患者骨髓中的表达显著高于其它类型恶性血液病患者和对照者,此外在初治AML-M5、AML-M4、MM患者骨髓中也有较高表达,而在初治AML-M1以及AML-M2患者中表达量与对照者相比无统计学差异。结论:annexinⅡ除在AML-M3中高表达外,在临床观察具有高度侵袭浸润能力的类型M5、M4、MM中也有较高表达,推测annexinⅡ可能通过增强恶性血液病细胞降解细胞外基质等机制参与恶性血液病侵袭、浸润过程。 展开更多
关键词 annexin 恶性血液病 实时定量PCR
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Genetic Differentiation Analyses Based on mtDNA COⅡ Gene Sequences Among Different Geographic Populations of Aphis glycines(Hemiptera: Aphididae) in Northeast China 被引量:1
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作者 Li Ran Han Lan-lan +4 位作者 Ye Le-fu Zhang Hong-yu Sun Wen-peng Tong Xin Zhao Kui-jun 《Journal of Northeast Agricultural University(English Edition)》 CAS 2015年第3期23-31,共9页
Aphis glycines (Hemiptera: Aphididae) is considered as a cosmopolitan pest of cultivated soybean, major difficulties in its control measures may be due to its higher genetic diversity; however, the knowledge about ... Aphis glycines (Hemiptera: Aphididae) is considered as a cosmopolitan pest of cultivated soybean, major difficulties in its control measures may be due to its higher genetic diversity; however, the knowledge about population genetic diversity of this species is limited. This study aimed to represent the genetic differentiation among different geographic populations of soybean aphid in Northeast China. In order to investigate and assess the genetic diversity, genetic differentiation, molecular variance, population structure, ecological importance and evolutionary history of A. glycines, we sequenced a fragment of one protein-coding gene, the cytochrome c oxidase I/of mitochondrial DNA gene. The results showed that four haplotypes were defined among CO 11 gene of 180 sequences of soybean aphid in Northeast China including H1 shared by all the populations. Lower haplotype diversity (Hd=0.3590± 0.0420) and nucleotide diversity (Pi=0.0012±0.0002) were observed and high gene flow was detected in every two populations, while most of the variation (80.81%) arose from variability within A. glycines from individuals. Low genetic differentiation and high gene flow (Nm=2.106) indicated a high migration rate between the populations, which might reveal that gene flow in different geographic populations did not affect by geographical distance. The phylogenetic tree and the haplotype network ofA. glycines were obtained based on sequences of CO Ⅱ gene, there were no significant genealogical branches or clusters recognized in NJ tree, and no clear distribution, delineation of haplotypes were demonstrated in the haplotype network according to geographical location. This study rejected the vicariance hypothesis: geographic isolation could be a barrier and it restricted A. glycines gene flow among 10 populations. 展开更多
关键词 Aphis glycines mtDNA CO geographic population gene flow genetic differentiation
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胃窦癌组织中LAG-3 FGL1 MHC-Ⅱ的表达与预后的关系 被引量:2
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作者 戚颖 黄子祺 +2 位作者 别鸿宇 颜次慧 任秀宝 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期64-69,共6页
目的:探索新型免疫检查点淋巴细胞激活基因3(lymphocyte-activation gene 3,LAG-3)、纤维蛋白原样蛋白1(fibrinogenlike protein 1,FGL1)、主要组织相容性复合体Ⅱ类分子(major histocompatibility complex classⅡ,MHC-Ⅱ)在胃窦癌(gas... 目的:探索新型免疫检查点淋巴细胞激活基因3(lymphocyte-activation gene 3,LAG-3)、纤维蛋白原样蛋白1(fibrinogenlike protein 1,FGL1)、主要组织相容性复合体Ⅱ类分子(major histocompatibility complex classⅡ,MHC-Ⅱ)在胃窦癌(gastric antral cancer,GAC)中的表达情况与预后的相关性。方法:收集2012年1月至2014年12月于天津医科大学肿瘤医院诊断为GAC的67例患者病理标本,分别进行石蜡切片制作,采用免疫组织化学法检测LAG-3、FGL1、MHC-Ⅱ三个指标的表达情况,并用统计学方法分析组间差异。采用Kaplan-Meier法评估LAG-3、FGL1、MHC-Ⅱ的表达水平与GAC患者预后之间的关系并绘制生存曲线。结果:GAC患者中,肿瘤大小<4 cm的患者和无淋巴结转移的患者LAG-3免疫细胞阳性率更高(P<0.05);女性患者MHC-Ⅱ免疫细胞阳性率更高(P<0.05)。免疫细胞中LAG-3、MHC-Ⅱ高表达的患者总生存期(overall survival,OS)较好(P<0.05);肿瘤细胞中MHC-Ⅱ高表达的患者OS、无病生存期(disease-free survival,DFS)较差(P<0.05);而FGL1在免疫细胞和肿瘤细胞中的表达与OS、DFS无显著相关性(P>0.05)。结论:GAC患者LAG-3、MHC-Ⅱ在不同区域的表达量存在差异,GAC患者LAG-3及其配体在免疫细胞的表达对预后产生积极影响,提示免疫细胞中LAG-3/MHC-Ⅱ可以作为GAC患者预后标志物,为临床个体化免疫治疗提供新的依据。 展开更多
关键词 胃窦癌 淋巴细胞激活基因3 纤维蛋白原样蛋白1 主要组织相容性复合体类分子 生存 预后
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膜联蛋白Ⅱ在肺癌组织、肺泡灌洗液和胸腔积液中的表达水平及在肺癌诊断中的价值研究 被引量:15
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作者 岳红梅 顾峰 +2 位作者 倪志宏 李佳 高莉萍 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1307-1310,共4页
目的探讨膜联蛋白Ⅱ(AnnexinⅡ)在支气管肺癌组织、肺泡灌洗液(BALF)和胸腔积液中的表达水平及在肺癌诊断中的价值。方法收集2010年10月—2011年10月兰州大学第一医院呼吸内科收治的肺癌伴胸腔积液患者60例(试验组)以及结核性渗出性胸... 目的探讨膜联蛋白Ⅱ(AnnexinⅡ)在支气管肺癌组织、肺泡灌洗液(BALF)和胸腔积液中的表达水平及在肺癌诊断中的价值。方法收集2010年10月—2011年10月兰州大学第一医院呼吸内科收治的肺癌伴胸腔积液患者60例(试验组)以及结核性渗出性胸腔积液患者60例(对照组)。对肺癌组织蜡块标本保留完整的48例患者的肺癌组织进行免疫组化染色,并收集该院病理科提供的18例正常肺组织蜡块标本,检测AnnexinⅡ在肺癌组织及正常肺组织中的阳性表达情况;应用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测试验组及对照组患者的BALF、胸腔积液中AnnexinⅡ的表达水平。结果肺癌组织中AnnexinⅡ的阳性表达率(62.5%,30/48)高于正常肺组织(16.6%,3/18),差异有统计学意义(P<0.05)。AnnexinⅡ在肺癌组织中的表达与患者的性别、吸烟与否、癌细胞分化程度及病理分型无关(P>0.05);与病理分期以及淋巴结转移有关(P<0.05)。试验组患者BALF、胸腔积液中AnnexinⅡ的表达水平高于对照组(P<0.05)。两组BALF中AnnexinⅡ的表达水平分别高于各自组内胸腔积液中AnnexinⅡ的表达水平(P<0.05)。结论 AnnexinⅡ在肺癌组织中的阳性表达率及在肺癌患者BALF、胸腔积液中的表达水平均较高,故AnnexinⅡ可作为肺癌诊断的良好标记物。 展开更多
关键词 肿瘤标记物 膜联蛋白 支气管肺泡灌洗液 胸腔积液 非小细胞肺
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大肠杆菌L-天门冬酰胺酶Ⅱ基因的高效表达 被引量:19
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作者 刘景晶 李晶 +1 位作者 吴梧桐 胡梅清 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第11期696-700,共5页
用一对与大肠杆菌天门冬酰胺酶Ⅱ基因(AnsB)两侧序列互补的寡核苷酸E1,E2作引物,以大肠杆菌野生株CPU210009的染色体DNA为模板,通过PCR扩增得到约1.2kb的DNA片段,将此片段插入pKK233-2的... 用一对与大肠杆菌天门冬酰胺酶Ⅱ基因(AnsB)两侧序列互补的寡核苷酸E1,E2作引物,以大肠杆菌野生株CPU210009的染色体DNA为模板,通过PCR扩增得到约1.2kb的DNA片段,将此片段插入pKK233-2的tac启动子下游,转化不同的大肠杆菌宿主菌株,结果表明以CPU210009为宿主菌时,转化子的酶表达量最高,重组L-天门冬酰胺酶占菌体总蛋白48.3%,发酵液酶活力达400IU/ml;比活为48IU/mg蛋白,SDS-PAGE显示纯化后的重组L-天门冬酰胺酶分子量与天然酶相同,均为140KD。 展开更多
关键词 药物 大肠杆菌 天门冬酰胺酶 基因表达
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猪白细胞Ⅱ类抗原基因多态性研究进展 被引量:18
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作者 周波 王林云 +1 位作者 谈永松 张似青 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期611-614,共4页
本文对SLAⅡ类基因的染色体图谱定位、分子结构、基因分型及其多态性的研究进展作了介绍。重点介绍了SLAⅡ类基因的RFLP基因分型及其多态性研究。猪的主要组织相容性复合物Ⅱ类抗原基因座位存在不同程度的等位基因多态性。RFLP技术是一... 本文对SLAⅡ类基因的染色体图谱定位、分子结构、基因分型及其多态性的研究进展作了介绍。重点介绍了SLAⅡ类基因的RFLP基因分型及其多态性研究。猪的主要组织相容性复合物Ⅱ类抗原基因座位存在不同程度的等位基因多态性。RFLP技术是一种简便而快捷的SLAⅡ类等位基因分型方法。SLAⅡ类基因的多态性和抗原肽结合位点密切相关,这些位点能结合处理过的抗原,然后递呈给T细胞。另外,在编码β1链的SLA DRB1基因和SLA DQB基因中有4个富含GC序列区。 展开更多
关键词 白细胞类抗原基因 多态性 RFLP
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带npt-Ⅱ基因转基因水稻快速检测技术的建立 被引量:14
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作者 王紫萱 易自力 +4 位作者 王志成 蒋建雄 覃静萍 张昊 谭炎宁 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期499-507,共9页
以转溶菌酶基因水稻纯系材料中花9号(ZH9(R))及其受体品种中花9号(ZH9(CK))为材料,以ZH9(R)中携带的npt-Ⅱ基因作为辅助筛选标记,利用抗生素对其进行处理,建立了一套快速检测带npt-Ⅱ基因转基因水稻的技术体系。使用不同浓度的卡那霉素(... 以转溶菌酶基因水稻纯系材料中花9号(ZH9(R))及其受体品种中花9号(ZH9(CK))为材料,以ZH9(R)中携带的npt-Ⅱ基因作为辅助筛选标记,利用抗生素对其进行处理,建立了一套快速检测带npt-Ⅱ基因转基因水稻的技术体系。使用不同浓度的卡那霉素(Kanamycin,Kan)和G418溶液将ZH9(R)和ZH9(CK)成株离体叶片于室内室温下置于培养皿中浸泡处理,通过观察叶片变化,确定G418为检测带npt-Ⅱ基因转基因水稻的最佳抗生素,将G418(溶液)80mg/L浓度(处理4天)作为检测该类转基因水稻成株离体叶片的临界浓度。进一步用G418对ZH9(R)和ZH9(CK)种子、幼胚和幼苗进行了不同处理。确定:(1)G418(溶液)300mg/L浓度(处理7天)作为检测该类转基因水稻种子的临界浓度;(2)G418(1/2MS+0.5mg/L6-BA+1.5%蔗糖培养基)200mg/L浓度(处理10天)作为检测该类转基因水稻幼胚的临界浓度;(3)G418(1/2MS+0.5mg/L6-BA+1.5%蔗糖培养基)150mg/L浓度(处理12天)作为检测该类转基因水稻幼苗的临界浓度,并且通过PCR方法证实了上述结论。将这些结论应用于ZH9(R)转育后代叶片、种子、幼胚和幼苗群体的检测,检测效果都非常明显。这为带npt-Ⅱ基因转基因水稻建立了一套简便、直观且准确的检测方法。 展开更多
关键词 转基因水稻 npt-基因 G418 快速检测
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pcDNA3.1-Annexin A1真核表达载体对结直肠癌细胞迁移、侵袭的影响 被引量:4
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作者 杨晓群 葛慧娟 +4 位作者 汪佳祺 余宏宇 何金 刘惠敏 蔡在龙 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期264-268,共5页
目的探讨Annexin A1对结直肠癌细胞迁移、侵袭能力的影响。方法构建重组质粒pcDNA3.1-AnnexinA1,转染至结直肠癌细胞株SW480中,G418筛选稳定表达株,实时荧光定量PCR、蛋白质印迹检测转染前后Annexin A1mR-NA及蛋白表达;以空载体转染组... 目的探讨Annexin A1对结直肠癌细胞迁移、侵袭能力的影响。方法构建重组质粒pcDNA3.1-AnnexinA1,转染至结直肠癌细胞株SW480中,G418筛选稳定表达株,实时荧光定量PCR、蛋白质印迹检测转染前后Annexin A1mR-NA及蛋白表达;以空载体转染组及未转染SW480细胞作为对照,通过划痕修复实验和Transwell细胞侵袭实验对转染前后细胞的迁移和侵袭能力进行比较观察和分析。结果成功构建重组质粒pcDNA3.1-Annexin A1载体;实时荧光定量PCR和蛋白质印迹检测结果均显示,重组体pcDNA3.1-Annexin A1稳定转染细胞株中Annexin A1mRNA及蛋白表达均明显高于空载体转染及未转染组细胞(P<0.01),而后两者间比较差异无统计学意义(P>0.05);重组体pcDNA3.1-Annexin A1转染组SW480细胞的迁移率(0.415±0.002)明显高于空载体转染组(0.267±0.003)及未转染组细胞(0.271±0.002),差异具有统计学意义(P<0.05),而后两者间差异无统计学意义(P>0.05);与空载体转染组(162.80±12.07)及未转染组(164.25±9.50)相比,重组体pcDNA3.1-Annexin A1转染组穿膜细胞数(221.75±12.07)增多,差异具有统计学意义(P<0.05).结论人Annexin A1基因表达上调能提高结直肠癌细胞迁移和侵袭能力。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 annexin A基因 真核表达载体 划痕修复 Transwell侵袭实验 结直肠癌 转染细胞 侵袭能力 细胞迁移 实时荧光定量
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