摘要
目的检测干扰eIF4E基因对宫颈癌细胞中c—myc基因表达和增殖活性的影响，初步探讨eIF4E对宫颈癌细胞的作用机制。方法两种宫颈癌细胞C33A、Hela各分为未转染组（C33A—Mock、Hela—Mock），空载对照组（C33A—NC、Hela—NC）以及eIF4E干扰组（C33A—shelF4E、Hela—shelF4E），用阳离子脂质体Lip2000将上述质粒转染到宫颈癌细胞，收集细胞逆转录合成CDNA后采用qRT—PCR方法检测各组细胞中eIF4E和C—myc基因mRNA相对水平的变化，采用Western blot方法检测各组细胞中上述基因蛋白水平的改变，采用MTT法绘制细胞生长曲线检测各组细胞增殖活性的变化。结果与未转染组细胞相比，C33A—shelF4E细胞的elF4EmRNA和蛋白水平分别下降（71±2．1）％和（694-2．4）％，c—mycmRNA和蛋白水平分别上调（5．6±0．7）倍和下降（60±2．5）％，细胞种板后1—3d增殖无明显改变，第4、5、6、7天增殖抑制率分别为（62±1．7）％、（65±1．2）％、（69±1．4）％、（63±1．2）％；Hela—shelF4E细胞的eIF4EmRNA和蛋白水平分别下降（68±1．9）％和（61±2．1）％，c—mycmRNA和蛋白水平分别上调（3．4±0．2）倍和下降（53±1．5）％。结论eIF4E基因敲减导致宫颈癌细胞c—myc的蛋白表达相应下调，同时显著抑制宫颈癌细胞增殖活性，提示eIF4E通过调控c—myc的蛋白表达进而影响宫颈癌细胞的生物学行为。
出处
《广东医学》
CAS
北大核心
2016年第21期3195-3197,共3页
Guangdong Medical Journal
基金
广东省医学科学研究基金项目(编号:A2015346)
广东省自然科学基金资助项目(编号:2014A030313536)
广东医学院青年基金项目(编号:XQ13006)
作者简介
通信作者
