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肿瘤抑素抗肿瘤相关肽的克隆及生物活性 被引量:6
1
作者 王淑静 刘岩 +3 位作者 林雪松 付雪 徐建永 刘兴汉 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期322-328,共7页
为得到肿瘤抑素中具有直接抗肿瘤活性肽并检测其生物学活性,人工合成肿瘤抑素中185~2 0 3位氨基酸(19肽)所对应的核苷酸序列,将其连接到融合蛋白表达载体pTYB2中,酶切和测序鉴定后,转化到大肠杆菌BL 2 1(DE3)中诱导表达.表达的融合蛋... 为得到肿瘤抑素中具有直接抗肿瘤活性肽并检测其生物学活性,人工合成肿瘤抑素中185~2 0 3位氨基酸(19肽)所对应的核苷酸序列,将其连接到融合蛋白表达载体pTYB2中,酶切和测序鉴定后,转化到大肠杆菌BL 2 1(DE3)中诱导表达.表达的融合蛋白经几丁质亲和层析、二硫苏糖醇(DTT)的柱内还原,直接获得可溶性19肽.利用MTT法,细胞生长曲线,小鼠H2 2腹水型转移型肝癌实体瘤模型抑瘤实验并结合组织病理学切片,研究19肽的生物学活性.获得的19肽对B16小鼠黑色素瘤细胞、人SMMC 772 1肝癌细胞、人脐静脉内皮细胞的生长均具有抑制作用.小鼠H2 2腹水型肝癌抑瘤率达4 8 4 6 % .病理学切片显示,19肽可促使小鼠肿瘤组织坏死,血管数量减少.19肽具有较强的直接抗肿瘤活性,有可能成为肿瘤治疗的一种新的有前景的药物. 展开更多
关键词 肿瘤抑素 蛋白质表达 蛋白质纯化 肿瘤治疗
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五味子甲素改善氧化应激引起的内皮功能障碍
2
作者 侯惠民 张文文 +2 位作者 赵卫萍 赵鑫 朴贤美 《中国药理学通报》 CAS 北大核心 2025年第1期122-130,共9页
目的探究五味子甲素(schizandrin A,SchA)对氧化应激引起内皮功能障碍的拮抗作用及其作用机制。方法选用人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)作为研究对象,采用MTT实验检测SchA对HUVECs活力的影响;通过流... 目的探究五味子甲素(schizandrin A,SchA)对氧化应激引起内皮功能障碍的拮抗作用及其作用机制。方法选用人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)作为研究对象,采用MTT实验检测SchA对HUVECs活力的影响;通过流式细胞技术检测细胞中ROS的含量;试剂盒检测HUVECs中MDA、CAT的含量以及细胞上清液中NO、ET-1的含量;Western blot实验检测细胞中SOD1、p-eNOS/eNOS蛋白以及Nrf2/Keap1/HO-1通路蛋白的表达情况;免疫荧光实验检测细胞Nrf2的入核情况。结果SchA通过激活Nrf2/Keap1/HO-1信号通路逆转LPS或缺氧诱导的HUVECs内ROS和MDA含量的升高及SOD1和CAT含量的下降;SchA逆转LPS诱导的HUVECs中p-eNOS和eNOS蛋白表达的降低及逆转细胞培养液中NO含量的下降和ET-1含量的升高;Nrf2抑制剂ML385逆转SchA对氧化应激及内皮功能障碍的拮抗作用。结论SchA拮抗LPS及缺氧诱导的氧化应激,SchA通过上调Nrf2/Keap1/HO-1信号通路改善氧化应激引起的内皮功能障碍。 展开更多
关键词 SchA 氧化应激 内皮功能障碍 Nrf2/Keap1/HO-1信号通路 HUVECS LPS
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理想的电生理学实验平台:急性分离的成年比格犬迷走神经节神经元 被引量:1
3
作者 钱钊 乔国芬 李柏岩 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2020年第7期490-501,共12页
目的建立急性分离成年犬结状神经节神经元(VGN)电生理学研究平台。方法通过急性分离和培养雌雄成年比格犬VGN,利用全细胞膜片钳技术分别记录动作电位,电压依赖性的外向钾电流(IK)和超极化激活的阳离子电流(Ih)。结果动作电位波形分析结... 目的建立急性分离成年犬结状神经节神经元(VGN)电生理学研究平台。方法通过急性分离和培养雌雄成年比格犬VGN,利用全细胞膜片钳技术分别记录动作电位,电压依赖性的外向钾电流(IK)和超极化激活的阳离子电流(Ih)。结果动作电位波形分析结果显示:①雌性比格犬VGN不仅可以记录到传统分类中的髓鞘化A型和非髓鞘化C型神经元,还可以记录到雌性特异分布的Ah型神经元;②步阶电流除极在诱发相同持续放电频率时,A型所需要的刺激强度最小,Ah型所需要的电流强度与A型近似或轻微增加,而C型需要的刺激强度最大;③河豚毒素显著降低Ah型神经元的除极速率和触及阈值;蝎毒素可显著增加A-型的神经兴奋性;④所有受试神经元均表达IK和Ih,且2种电流密度均呈现A型>Ah型>C型;⑤尽管雌雄VGN分布的传入纤维种类有别,已知的A和C型VGN放电差异性并未在本研究中探讨。结论成年比格犬VGN可被成功急性分离,并用于动作电位、IK和Ih的记录;分类和电生理学特性足以完成药理学试验的需要,持续至少30 min的紧密封接应该满足药理学观察的需要。 展开更多
关键词 结状神经节 电生理学 膜片钳技术 比格犬
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15-HETE对肺动脉平滑肌细胞钙离子浓度的影响 被引量:18
4
作者 张荣 孟丽巍 +3 位作者 张一飞 吕昌莲 郑秋艳 朱大岭 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期66-69,共4页
目的 通过阻断细胞外钙离子 (Ca2+ )内流,观察 15 羟化二十烷四烯酸 ( 15 HETE)对兔肺动脉环收缩张力和肺动脉平滑肌细胞内游离钙浓度 ( [Ca2+ ]i)的影响,探讨缺氧时 15 HETE引起细胞钙动员的机制。方法 采用组织浴槽血管环方法观察L... 目的 通过阻断细胞外钙离子 (Ca2+ )内流,观察 15 羟化二十烷四烯酸 ( 15 HETE)对兔肺动脉环收缩张力和肺动脉平滑肌细胞内游离钙浓度 ( [Ca2+ ]i)的影响,探讨缺氧时 15 HETE引起细胞钙动员的机制。方法 采用组织浴槽血管环方法观察L 型钙通道阻断剂硝苯地平和无钙液对15 HETE诱导的兔肺动脉环收缩力的影响;酶法分离培养兔肺动脉平滑肌细胞,激光扫描共聚焦显微镜测定 15 HETE对细胞内 [Ca2+ ]i的作用。结果 在正常组和缺氧组, 10μmol·L-1硝苯地平和无钙液对 1μmol·L-1 15 HETE引起的肺动脉环收缩均没有影响;培养的 15 HETE组细胞 (正常培养的细胞暴露于 1 μmol·L-1 15 HETE下继续孵育 8min)与正常对照组相比,细胞内 [Ca2+ ]i明显增加 (P<0 05)。结论 15 HETE可引起肺动脉平滑肌细胞 [Ca2+ ]i增加,且此钙来源于细胞内贮钙库的释放。 展开更多
关键词 肺动脉平滑肌细胞 正常 CA^2+ 细胞内 硝苯地平 缺氧 影响 钙动员 L-型钙通道 钙离子浓度
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两个改造后的肿瘤抑素抗肿瘤活性肽活性研究 被引量:11
5
作者 王淑静 刘兴汉 +1 位作者 季宇彬 陈宁 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1152-1161,共10页
为了研究改造后的肿瘤抑素2个抗肿瘤活性肽的作用机制,明确其不同的抗肿瘤活性,采用基因工程技术原理,人工合成肿瘤抑素中185~203位氨基酸所对应的19肽和T7肽(74~98位氨基酸)基础上改造的21肽碱基序列,将其与融合蛋白表达载体pTYB2重... 为了研究改造后的肿瘤抑素2个抗肿瘤活性肽的作用机制,明确其不同的抗肿瘤活性,采用基因工程技术原理,人工合成肿瘤抑素中185~203位氨基酸所对应的19肽和T7肽(74~98位氨基酸)基础上改造的21肽碱基序列,将其与融合蛋白表达载体pTYB2重组后转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达,用几丁质亲和层析柱一步纯化,直接获得19肽和21肽,利用MTT法、细胞生长曲线、TUNEL法、流式细胞仪早期细胞凋亡检测和细胞周期检测,小鼠H22腹水型转移型肝癌实体瘤抑瘤实验并结合组织病理学切片,来研究19肽和21肽单独应用或联合应用对肿瘤细胞和内皮细胞生长和凋亡的影响以及对体内肿瘤的抑制情况.体内外实验表明:获得的19肽抗肿瘤活性以直接作用肿瘤细胞为主,也有抑制新生血管生成的作用.基因重组21肽抗肿瘤作用是通过抑制肿瘤组织新生血管生成实现的.19肽、21肽联合应用对肿瘤细胞、内皮细胞生长抑制和促凋亡作用明显增强,抗肿瘤活性大大提高.联合用药弥补了单独用药不足,产生协同抗肿瘤作用,可能会成为今后肿瘤治疗的一个主要方向. 展开更多
关键词 肿瘤抑素 蛋白质表达 细胞增殖 细胞凋亡 肿瘤治疗
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钙敏感受体在缺氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用 被引量:14
6
作者 李光伟 邢文婧 +4 位作者 郝静辉 白淑芝 李宏霞 林岩 徐长庆 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期2433-2437,共5页
目的:观察钙敏感受体(CaSR)在缺氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用。方法:Ⅱ型胶原酶消化法提取、培养大鼠肺动脉平滑肌细胞。应用Western blotting技术及免疫荧光染色分析CaSR蛋白在肺动脉平滑肌的表达;采用激光共聚焦扫描技... 目的:观察钙敏感受体(CaSR)在缺氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用。方法:Ⅱ型胶原酶消化法提取、培养大鼠肺动脉平滑肌细胞。应用Western blotting技术及免疫荧光染色分析CaSR蛋白在肺动脉平滑肌的表达;采用激光共聚焦扫描技术检测不同处理因素对细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)的影响,应用MTT法分析不同处理因素对细胞存活率的影响。结果:大鼠肺动脉平滑肌细胞有CaSR蛋白表达。缺氧能够增加CaSR和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达、细胞存活率及[Ca2+]i(与对照组比较,P<0.05)。GdCl3(CaSR激动剂)能够增强缺氧的上述作用,NPS2390(CaSR抑制剂)则能够减弱缺氧的作用。结论:缺氧诱导的CaSR表达增加参与了缺氧性肺动脉平滑肌细胞增殖。 展开更多
关键词 受体 钙敏感 肺动脉平滑肌细胞 缺氧 细胞增殖
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多胺在异丙肾上腺素所致大鼠心肌肥厚中的作用及意义 被引量:10
7
作者 林岩 徐长庆 +4 位作者 赵雅君 王丽娜 席玉慧 李鸿珠 李光伟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期417-421,共5页
目的:研究多胺、鸟氨酸脱羧酶(ODC)及精脒/精胺乙酰基转移酶(SSAT)在异丙肾上腺素所致大鼠心肌肥厚中的作用及机制。方法:异丙肾上腺素(ISO)皮下注射复制大鼠心肌肥厚模型,应用反向高效液相色谱(RP-HPLC)、RT-PCR和Western blotting结... 目的:研究多胺、鸟氨酸脱羧酶(ODC)及精脒/精胺乙酰基转移酶(SSAT)在异丙肾上腺素所致大鼠心肌肥厚中的作用及机制。方法:异丙肾上腺素(ISO)皮下注射复制大鼠心肌肥厚模型,应用反向高效液相色谱(RP-HPLC)、RT-PCR和Western blotting结合图像分析系统,分别检测ISO作用不同时点大鼠心肌组织多胺含量、ODC和SSAT mRNA和蛋白的表达。结果:与对照组比较,心脏重量参数在ISO注射后7d时显著增加,ISO注射后1d时腐胺含量增加(P<0.05),5d、7d时显著增加(P<0.01);精脒含量在ISO注射后3d时开始增加,ISO注射后7d时增加显著(P<0.01),精胺含量略有增多(P<0.05),总多胺池显著增加。心肌组织ODC和SSAT的mRNA表达在ISO注射后1d时升高(P<0.05或P<0.01),并持续在较高水平。心肌组织ODC和SSAT的蛋白表达分别在ISO注射后1d和ISO注射后5d时升高,ISO注射后7d时显著升高(P<0.01)。结论:大鼠心肌组织多胺含量增加和ODC、SSAT的表达增强可能参与ISO所致心肌肥厚的病理过程。 展开更多
关键词 多胺 鸟氨酸脱羧酶 精脒/精胺乙酰基转移酶 心肌肥厚 异丙肾上腺素
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重组人内皮抑素的结构改造及抗肿瘤活性变化 被引量:17
8
作者 任明华 王淑静 +4 位作者 林雪松 徐建永 陶站华 赵炜明 刘兴汉 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期45-52,共8页
内皮抑素是一种内源性的血管生成和肿瘤生长抑制剂 .运用定点突变技术对人内皮抑素基因工程菌中的内皮抑素基因进行改造 ,将内皮抑素中的GRIRGAD改为RGDRGD序列 ,提高了内皮抑素的抗肿瘤活性 .裸鼠体内抑瘤试验发现 ,野生与诱变内皮抑... 内皮抑素是一种内源性的血管生成和肿瘤生长抑制剂 .运用定点突变技术对人内皮抑素基因工程菌中的内皮抑素基因进行改造 ,将内皮抑素中的GRIRGAD改为RGDRGD序列 ,提高了内皮抑素的抗肿瘤活性 .裸鼠体内抑瘤试验发现 ,野生与诱变内皮抑素的抑瘤率分别为 4 0 6 6 %和5 1 0 5 % ,诱变内皮抑素抑瘤率比野生内皮抑素提高了近 11个百分点 .病理切片HE染色诱变组肿瘤的血管生成比野生组明显减少 ,坏死灶增多 .免疫组化试验中 ,诱变组在微血管密度MVD(P <0 0 5 )、血管内皮生长因子VEGF(P <0 0 5 )、增殖细胞核抗原PCNA(P >0 0 5 )三个指标上均比野生组减小 .体外细胞实验中 ,MTT结果表明 ,野生组内皮抑素半数抑制浓度IC50 =185 μg ml,诱变组内皮抑素IC50 =2 7μg ml,诱变组抑瘤活性是野生组的 6倍 .细胞迁移抑制实验表明 ,野生组与诱变组内皮抑素均对肿瘤细胞迁移有抑制作用 ,野生组迁移抑制率为 6 8 95 % ;诱变组迁移抑制率为89 94 % .上述结果说明 ,内皮抑素除抑制血管生成外 ,对肿瘤细胞的生长和迁移也有一定的抑制作用 .诱变内皮抑素通过RGDRGD序列与整合素结合而提高了抗肿瘤活性 . 展开更多
关键词 内皮抑素 定点突变 RGD序列 抗肿瘤活性
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异丙肾性心肌梗死大鼠钙敏感受体的表达和凋亡通路的变化 被引量:7
9
作者 郭津 徐长庆 +7 位作者 李鸿珠 裴天仙 王丽娜 张力 张伟华 徐曼 林岩 田野 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期48-53,共6页
目的:观察钙敏感受体(CaSR)在异丙肾性心肌梗死大鼠的表达和凋亡通路的变化。方法:采用连续2 d大剂量异丙肾上腺素(200 mg/kg)皮下注射制备大鼠心肌梗死模型。Wistar大鼠随机分为3组:正常对照组(control);异丙肾上腺素1 d组(ISO/1d);异... 目的:观察钙敏感受体(CaSR)在异丙肾性心肌梗死大鼠的表达和凋亡通路的变化。方法:采用连续2 d大剂量异丙肾上腺素(200 mg/kg)皮下注射制备大鼠心肌梗死模型。Wistar大鼠随机分为3组:正常对照组(control);异丙肾上腺素1 d组(ISO/1d);异丙肾上腺素2 d组(ISO/2d)。采用RT-PCR和Western blotting分别观察CaSR、bax、bcl-2、caspase-3 mRNA和蛋白表达;TUNEL染色观察心肌细胞凋亡情况;光镜和电镜分别观察心肌形态学和超微结构变化;紫外分光法检测乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,电化学免疫发光法检测肌钙蛋白(cTnT)水平。结果:与正常组比较,ISO/1d组:LDH和CK活性、cTnT水平和MDA含量、细胞凋亡指数以及CaSR、Bax和caspase-3的表达均达高峰,同时SOD活性降低,Bcl-2表达减少,心肌细胞超微结构损伤严重;ISO/2d的心肌损伤指标较ISO/1d组有所减轻。结论:CaSR表达增多可能参与了异丙肾性大鼠心肌梗死的发生,其机制与氧化应激和细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 受体 钙敏感 大鼠 心肌梗死 细胞凋亡 异丙肾上腺素
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苦参碱对心房颤动犬心房肌IKM3电流的作用 被引量:12
10
作者 隋晓红 周宇宏 +4 位作者 李竹琴 杨茂 吕延杰 乔国芬 杨宝峰 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期199-202,共4页
目的探讨正常和持续性心房颤动时犬心房肌M3受体介导IKM3电流的变化及苦参碱对IKM3的作用,为筛选抗心律失常药物作用靶点提供理论和实验依据。方法建立快速心房起搏致心房颤动犬模型,通过膜片钳技术比较犬心房肌正常和模型组电流变化及... 目的探讨正常和持续性心房颤动时犬心房肌M3受体介导IKM3电流的变化及苦参碱对IKM3的作用,为筛选抗心律失常药物作用靶点提供理论和实验依据。方法建立快速心房起搏致心房颤动犬模型,通过膜片钳技术比较犬心房肌正常和模型组电流变化及药物作用的不同。结果持续性心房颤动犬心房肌IKM3电流密度明显增高(实验电压+50mV时,232±81pAvs198±80pA,n=4,P<0.05),苦参碱对IKM3电流有抑制作用,且对正常组抑制作用明显高于模型组。结论M3受体及其介导的IKM3电流可能是治疗房颤的新靶点。 展开更多
关键词 心房颤动 M3 受体 IKM3电流 苦参碱
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二氢杨梅素通过增加细胞内钙而收缩离体犬颈动脉环 被引量:6
11
作者 牛慧莉 潘振伟 +4 位作者 朱久新 曹盛吉 单璐琛 吕延杰 杨宝峰 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1437-1440,共4页
目的观察二氢杨梅素(Dihydromyricetin)对离体犬颈动脉环的作用以及相关机制。方法应用等张收缩法记录犬离体颈动脉环张力,应用激光共聚焦显微镜测定急性分离犬颈动脉平滑肌细胞胞质内游离Ca2+浓度([Ca2+]i)。结果在内皮完整和去内皮血... 目的观察二氢杨梅素(Dihydromyricetin)对离体犬颈动脉环的作用以及相关机制。方法应用等张收缩法记录犬离体颈动脉环张力,应用激光共聚焦显微镜测定急性分离犬颈动脉平滑肌细胞胞质内游离Ca2+浓度([Ca2+]i)。结果在内皮完整和去内皮血管上,二氢杨梅素均引起浓度(1~300μmol.L-1)依赖性的血管张力增加;无钙液中,二氢杨梅素引起的张力增加作用明显降低,同有钙液相比,统计学上差异有显著性(P<0.05);电压依赖性钙通道阻断剂维拉帕米不能阻断其收缩作用。激光共聚焦检测细胞内钙的结果表明,二氢杨梅素浓度依赖性(100、300μmol.L-1)增加了静息状态平滑肌细胞胞质内钙浓度。结论二氢杨梅素对血管平滑肌具有剂量依赖性的收缩作用,这一作用为非内皮依赖性,与外钙内流致胞质内钙升高有关。 展开更多
关键词 二氢杨梅素 血管平滑肌 共聚焦 细胞内钙
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15-羟廿碳四烯酸对缺氧性大鼠颈内动脉环的收缩作用及机制 被引量:9
12
作者 朱雨岚 单宏丽 +1 位作者 李倩 朱大岭 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期1327-1331,共5页
目的研究15-羟廿碳四烯酸(15-HETE)对正常及缺氧状态的离体大鼠颈内动脉环的作用,探讨15-HETE在缺血/缺氧性脑损伤的病理生理过程中的作用.方法 16只Wistar大鼠随机分为两组即对照组:其氧浓度(FiO2)为21%和缺氧组:置于FiO2为10%的缺氧箱... 目的研究15-羟廿碳四烯酸(15-HETE)对正常及缺氧状态的离体大鼠颈内动脉环的作用,探讨15-HETE在缺血/缺氧性脑损伤的病理生理过程中的作用.方法 16只Wistar大鼠随机分为两组即对照组:其氧浓度(FiO2)为21%和缺氧组:置于FiO2为10%的缺氧箱中(n=8).9 d后将大鼠处死,游离颈内动脉(ICA)制备血管环,KH液中分别加入不同浓度15-HETE以及2 mmol·L-1 4-AP、10-2 mol·L-1 TEA、10-6 mol·L-1 GLYB后平衡15 min后,再加入15-HETE,观察不同浓度15-HETE、不同K+通道阻断剂对颈内动脉环收缩反应程度的变化.结果 15-HETE以浓度依赖方式(10-8 mol·L-1~10-6mol·L-1)使游离颈内动脉环张力增加,对缺氧组大鼠颈内动脉环张力作用更为明显,与正常对照组相比差异有显著性(15-HETE浓度为10-8 mol·L-1、10-7 mol·L-1时,P<0.05,10-6 mol·L-1时,P<0.01,n=8);2 mmol·L-1 4-AP使颈内动脉环血管张力增高(P<0.05,n=8),但预先应用 2 mmol·L-1 4-AP后浴液中加入10-6 mol·L-1 15-HETE,血管张力无进一步增加的趋势;10-2 mol·L-1 TEA、10-6 mol·L-1 GLYB,对血管环张力差异无显著性(P>0.05,n=8);但进一步应用15-HETE使血管环张力增加,变化幅度接近单纯应用15-HETE组.结论 15-HETE收缩ICA,缺氧情况下尤为明显;Kv通道在15-HETE所致的ICA收缩中起作用. 展开更多
关键词 15-羟廿碳四烯酸 电压依赖钾通道 缺氧 颈内动脉
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缺氧肺动脉高压发病机制研究进展:15-LO/15-HETE的作用 被引量:13
13
作者 郑晓东 朱大岭 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期157-160,共4页
缺氧肺动脉高压(HPH)以急性缺氧肺动脉收缩(HPV)和慢性缺氧导致的肺血管床重构(HPVR)引起的肺动脉压持续升高为特征的临床常见病症。参与HPH的中介因子很多,但没有一种可以完整地阐述其发病机制。本实验室前期工作发现缺氧可使肺血管15... 缺氧肺动脉高压(HPH)以急性缺氧肺动脉收缩(HPV)和慢性缺氧导致的肺血管床重构(HPVR)引起的肺动脉压持续升高为特征的临床常见病症。参与HPH的中介因子很多,但没有一种可以完整地阐述其发病机制。本实验室前期工作发现缺氧可使肺血管15-脂酯氧化酶(15-LO)表达升高,后者催化花生四烯酸,生成15-羟基二十碳四烯酸(15-HETE)。研究发现15-LO/15-HETE参与HPV与HPVR的众多过程,提示15-LO/15-HETE可能是HPH发病过程的一个中介因子。对15-LO/15-HETE研究将更好地阐述HPH的发病机制,寻找更有效的临床治疗靶点。 展开更多
关键词 缺氧肺动脉高压 15-脂酯氧化酶 15-羟基二十碳四 烯酸 缺氧肺动脉收缩 缺氧肺血管重构
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心血管系统钙敏感受体的研究进展 被引量:18
14
作者 徐长庆 张伟华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期409-413,共5页
Calcium sensing receptors (CaSR) is a member of super-family of G-protein coupling receptors. This review first introduced the concept,construction features,distribution,functions,decision methods,moderators,genetic l... Calcium sensing receptors (CaSR) is a member of super-family of G-protein coupling receptors. This review first introduced the concept,construction features,distribution,functions,decision methods,moderators,genetic locus of CaSR and its relationship with some diseases concisely. Then this article described the investigation progress of CaSR in cardiovascular system intensively,including the expression pattern,role and signal pathways of CaSR in rat myocardium in normal,ischemia-reperfusion injury,apoptosis and cardiac hypertrophy; the role and mechanism of CaSR in calcium homostasis regulation of rat myocardium,endoplasmic reticulum (ER) stress and cardiac ischemic preconditioning and postconditioning. The metabolism rule,physiological significance and pathological action of polyamine in cardiac cells; the increase of CaSR expression in cardiac tissue of artherosclerosic rat and its effect on sensitivity to acute myocardial infarction are also discussed. In the end,the research perspective of CaSR in cardiovascular system was anticipated. 展开更多
关键词 钙敏感受体 心血管系统 再灌注损伤 内质网应激 心肌肥大
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钙敏感受体通过PI3K信号通路介导缺氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖 被引量:3
15
作者 李光伟 李波 +3 位作者 康美佳 徐斐翔 邢文婧 徐长庆 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1549-1553,共5页
目的:探讨钙敏感受体(CaSR)在缺氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖中的信号转导途径。方法:Ⅱ型胶原酶消化法提取、培养大鼠PASMCs。通过缺氧培养箱内(93%N2、2%O2、5%CO2)培养24 h的方法复制细胞缺氧模型。应用Western blottin... 目的:探讨钙敏感受体(CaSR)在缺氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖中的信号转导途径。方法:Ⅱ型胶原酶消化法提取、培养大鼠PASMCs。通过缺氧培养箱内(93%N2、2%O2、5%CO2)培养24 h的方法复制细胞缺氧模型。应用Western blotting分析不同处理情况下细胞周期素D1(cyclin D1)及磷酸化的蛋白激酶B(p-Akt)在PASMCs中的表达;采用流式细胞术检测不同处理因素对细胞增殖周期及增殖指数的影响,应用BrdU掺入法分析不同处理因素对细胞DNA合成的影响。结果:缺氧引起PASMCs的cyclin D1及p-Akt表达水平上调,增加BrdU掺入量、S期细胞数量和细胞增殖指数,GdCl3能够放大缺氧的作用,但上述效应可以被LY294002抑制。结论:CaSR通过PI3K/Akt信号通路参与缺氧诱导的大鼠PASMCs增殖。 展开更多
关键词 受体 钙敏感 肺动脉平滑肌细胞 缺氧 信号转导
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高浓度的staurosporine aglycone激活大鼠肺动脉平滑肌细胞中的ERK1/2 被引量:2
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作者 张家宁 褚晓杰 +4 位作者 吕昌莲 吴春铃 包红霞 唐晓波 朱大岭 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期34-38,共5页
目的有报道表明staurosporine作为一种蛋白激酶C(PKC)的抑制剂,可以在多种细胞系内调节细胞外信号调节激酶(ERK1/2)的活性,但是它的衍生物staurosporineagly—COfle(SA)是否具有相同的作用还不清楚,本次实验旨在阐明其对ERK1... 目的有报道表明staurosporine作为一种蛋白激酶C(PKC)的抑制剂,可以在多种细胞系内调节细胞外信号调节激酶(ERK1/2)的活性,但是它的衍生物staurosporineagly—COfle(SA)是否具有相同的作用还不清楚,本次实验旨在阐明其对ERK1/2活性的调节作用。方法培养至4~8代的大鼠肺动脉平滑肌细胞,经过SA处理后提取细胞蛋白,应用Westernblot方法检测磷酸化ERK1/2的含量,观察不同浓度和时间点的SA对ERK1/2活性的影响。结果在纳摩尔浓度水平的SA可以降低大鼠肺动脉平滑肌细胞中ERK1/2的磷酸化水平,但是30μmol·L-1的SA可以激活ERK1/2,这种激活作用可以被丝裂素活化蛋白激酶的激酶(MEK)的抑制剂PD98059或蛋白激酶A(PKA)的激活剂异丙肾上腺素(isoproteren01)所抑制。结论sA对肺动脉平滑肌细胞中的ERK1/2活性有双向调节作用,这种作用是通过PKC和(或)PKA通路产生的。 展开更多
关键词 STAUROSPORINE aglycone(SA) 细胞外信号调节激酶 蛋白激酶C 蛋白激酶A
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外源性精胺对人脐静脉内皮细胞的损伤作用及机制研究 被引量:3
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作者 杨金霞 马越 +4 位作者 穆实 刘德庆 梁春红 徐长庆 张卓然 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1903-1906,共4页
目的:观察外源性精胺(Sp)对传代培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的作用,并初步探讨其可能机制。方法:采用传代培养的方法,观察不同浓度精胺(50μmol/L-5mmol/L)对HUVECs作用2h、4h的影响。观察指标:(1)倒置显微镜下观察HUVECs形态学变化... 目的:观察外源性精胺(Sp)对传代培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的作用,并初步探讨其可能机制。方法:采用传代培养的方法,观察不同浓度精胺(50μmol/L-5mmol/L)对HUVECs作用2h、4h的影响。观察指标:(1)倒置显微镜下观察HUVECs形态学变化;(2)透射电镜观察HUVECs超微结构改变;(3)细胞活力测定;(4)MDA含量测定;(5)SOD活性测定。结果:对HUVECs影响的各项观察指标,50μmol/LSp与正常对照组比较,无显著差异(P>0.05);200μmol/L、1mmol/L、5mmol/LSp对HUVECs有损伤作用,作用4h的细胞损伤较2h重,其特点为细胞活力降低,超微结构损伤,MDA含量升高,SOD活性降低。结论:Sp呈浓度依赖性引起HU-VECs损伤,其作用机制可能与氧自由基大量产生导致的细胞膜脂质过氧化有关。 展开更多
关键词 精胺 人脐静脉内皮细胞 活性氧
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抗人羧酸酯酶-Ⅱ单克隆抗体的制备与鉴定 被引量:3
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作者 武正华 唐晓波 +4 位作者 王志刚 纪宏宇 于磊 刘慧文 朱大岭 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期148-151,共4页
目的制备鼠抗人羧酸酯酶-Ⅱ(humancarboxyles-terases-Ⅱ,hCE-Ⅱ)单克隆抗体(mAb)并对其特性进行鉴定。方法以含hCE-Ⅱ的人肝脏微粒体蛋白混合抗原免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备鼠抗hCE-Ⅱ的mAb,并用Protein-G亲和层析法纯化mAb。... 目的制备鼠抗人羧酸酯酶-Ⅱ(humancarboxyles-terases-Ⅱ,hCE-Ⅱ)单克隆抗体(mAb)并对其特性进行鉴定。方法以含hCE-Ⅱ的人肝脏微粒体蛋白混合抗原免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备鼠抗hCE-Ⅱ的mAb,并用Protein-G亲和层析法纯化mAb。用间接ELISA法测定mAb的效价,以Westernblot鉴定mAb的特异性、免疫组化染色法对mAb相应的抗原进行组织定位。用免疫沉淀和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assistedlaserdesorption/ionizationtime-of-flightmassspectrometry,MALDI-TOF-MS)得到相应的肽质量指纹谱(peptidemassfingerprint,PMF),再通过Mascot在人类蛋白质数据库中分析比对鉴定mAb对应的抗原。结果获得1株可持续、稳定分泌抗hCE-Ⅱ的mAb的杂交瘤细胞系。杂交瘤细胞分泌的mAbIg的亚类(型)为IgG1(κ),腹水mAb的效价达1×10-7。Westernblot分析显示,在Mr为62000处有1条清晰的带。免疫组化染色显示,该mAb可与肝细胞的浆蛋白结合(hCE-Ⅱ存在于肝细胞浆内微粒体),而不与血管平滑肌细胞内的蛋白结合。该mAb免疫沉淀物的Mr为62000,与hCE-Ⅱ的Mr相符。对免疫沉淀的蛋白质进行质谱鉴定证实,该mAb对应的抗原为hCE-Ⅱ。结论制备出的鼠抗hCE-Ⅱ的mAb效价高、特异性良好,为进一步研究hCE-Ⅱ的功能及其在肝癌等癌症的诊断和治疗中的作用提供了工具。 展开更多
关键词 人羧酸酯酶-Ⅱ 单克隆抗体 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱
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精胺对急性脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用 被引量:1
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作者 贾洪丽 赫文 +7 位作者 侯俊青 张宁 孔凡娟 郝静辉 孙健 白淑芝 李宏霞 徐长庆 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期1319-1322,共4页
目的:观察外源性精胺对急性脑缺血-再灌注损伤大鼠的作用,并初步探讨其可能机制。方法:采用线栓法复制大鼠大脑中动脉缺血(2 h)-再灌注(2 h)模型。SD大鼠随机分为5组:假手术组、模型组和低、中、高剂量精胺组。检测指标有神经病学评分... 目的:观察外源性精胺对急性脑缺血-再灌注损伤大鼠的作用,并初步探讨其可能机制。方法:采用线栓法复制大鼠大脑中动脉缺血(2 h)-再灌注(2 h)模型。SD大鼠随机分为5组:假手术组、模型组和低、中、高剂量精胺组。检测指标有神经病学评分、脑梗死面积、皮层脑组织HE染色、电镜超微结构观察、超氧化物歧化酶活性(SOD)及丙二醛(MDA)含量。结果:与模型组相比,不同浓度精胺均能降低大鼠急性脑缺血-再灌注后神经功能学评分、梗死面积、缺血脑组织MDA含量,减轻脑组织形态学和超微结构损伤,增加缺血区SOD活性。结论:外源性精胺对大鼠局灶性急性脑缺血-再灌注损伤有保护作用,其机制可能与清除氧自由基有关。 展开更多
关键词 精胺 脑缺血 超氧化物歧化酶 丙二醛 大鼠
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多胺在L-精氨酸抑制异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌肥厚中的作用 被引量:1
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作者 林岩 徐长庆 +4 位作者 王丽娜 李鸿珠 赵雅君 席玉慧 王国忠 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期2099-2104,共6页
目的:研究多胺在L-精氨酸抑制病理性心肌肥厚中的作用及机制。方法:异丙肾上腺素(ISO)皮下注射复制大鼠心肌肥厚模型,L-精氨酸作为干预因素,检测心脏肥大指数,心肌组织胶原染色,心房利钠肽(ANP)的转录水平,观察L-精氨酸对心肌肥大的影响... 目的:研究多胺在L-精氨酸抑制病理性心肌肥厚中的作用及机制。方法:异丙肾上腺素(ISO)皮下注射复制大鼠心肌肥厚模型,L-精氨酸作为干预因素,检测心脏肥大指数,心肌组织胶原染色,心房利钠肽(ANP)的转录水平,观察L-精氨酸对心肌肥大的影响;不同时段,应用高效液相色谱仪(HPLC)测定心肌组织内多胺含量,应用Western blotting结合图像分析系统,检测各组大鼠心肌组织鸟氨酸脱羧酶(ODC)和精眯/精胺乙酰转移酶(SSAT)的蛋白表达水平;检测血清NO含量和NOS活性。结果:皮下注射ISO7d后,心肌肥大指数增加,心肌纤维增粗、排列紊乱,ANP mRNA表达增加;L-精氨酸干预可抑制ISO诱导的心肌肥大,随着L-精氨酸作用时间延长,心肌组织多胺含量减少,血清NOS活性增强,NO含量增加。同时,ODC蛋白表达下调,SSAT蛋白表达上调。结论:L-精氨酸抑制ISO诱导的心肌肥大,其机制可能与下调L-精氨酸/多胺通路、上调L-精氨酸/NO通路有关。 展开更多
关键词 多胺 心肌肥厚 精氨酸
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